Name: maximum isometric tetanic force measurement of the tibialis anterior muscle in the rat
Uploaded: 2021-06-26T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Maximum Isometric Tetanic Force Measurement of the Tibialis Anterior Muscle in the Rat at JoVE.com

Die in dieser Veröffentlichung berichtete Forschung wurde vom National Institute of Neurological Disorders and Stroke der National Institutes of Health unter der Vergabenummer RO1 NS 102360 unterstützt. Der Inhalt liegt allein in der Verantwortung der Autoren und stellt nicht unbedingt die offiziellen Ansichten der National Institutes of Health dar.

Alle Tierversuche wurden mit Genehmigung des Institutional Animal Care and Use Committee (IACUC A334818) durchgeführt.
1. Kalibrierung des Kraftaufnehmers
<ol><li>Stellen Sie sicher, dass der Computer ordnungsgemäß an das multifunktionale E/A-Datenerfassungsgerät USB-6009 angeschlossen ist, das wiederum an den Kraftaufnehmer angeschlossen werden sollte. HINWEIS: Andere Rattenstämme und -spezies benötigen möglicherweise einen anderen Wägezellen-Kraftaufnehmer, da höhere Kräfte zu...

Dieses Protokoll beschreibt eine zuvor validierte Methode zur Erfassung genauer maximaler ITF-Messungen des TA-Muskels im Rattenmodell32. Die Wiederherstellung der Maximalen Kraft nach experimentellen Nervenrekonstruktionsbehandlungen ist im klinischen Umfeld von primärem Interesse, da sie beweist, dass sich der Nerv nicht nur regenerierte, sondern auch Arbeitsverbindungen mit dem Zielmuskel einstellte. Die ITF kann in einem kleinen Nervenlückenmodell wie dem Ischiasnervmodell3...

Der Verlust der motorischen Funktion nach einer traumatischen peripheren Nervenverletzung hat einen signifikanten Einfluss auf die Lebensqualität und den sozioökonomischen Status der Patienten1,2,3. Die Prognose dieser Patientenpopulation bleibt aufgrund minimaler Verbesserungen der Operationstechniken im Laufe der Jahre schlecht4. Die direkte, spannungsfreie Epineuralreparatur bildet die chirurgische Rekonstruktion nach Goldstandard. In Fällen mit ausgedehnten Nervenlücken hat sich jedoch die Interposition eines autologen Nerventransplantats als überlegen erwiesen5,6. Die damit verbundene Morbidität an der Spenderstelle und die begrenzte Verfügbarkeit von autologen Nerventransplantaten haben die Notwendigkeit alternativer Techniken erforderlich erklärt7,8.
Experimentelle Tiermodelle wurden verwendet, um den Mechanismus der peripheren Nervenregeneration aufzuklären und die Ergebnisse einer Vielzahl von rekonstruktiven und pharmakologischen Behandlungsmöglichkeiten zu bewerten8,9. Das Ischiasnervenmodell der Ratte ist das am häufigsten verwendete Tiermodell10. Ihre geringe Größe macht sie einfach zu handhaben und zu beherbergen. Aufgrund ihres superlativen neuroregenerativen Potenzials kann die verminderte Zeit zwischen Intervention und Bewertung der Ergebnisse zu relativ niedrigeren Kosten führen11,12. Weitere Vorteile seiner Verwendung sind morphologische Ähnlichkeiten mit menschlichen Nervenfasern und die hohe Anzahl vergleichender/historischer Studien13. Letzteres sollte zwar vorsichtig angegangen werden, da eine Vielzahl unterschiedlicher Ergebnismessungen zwischen den Studien den Vergleich der Ergebnisse erschwert14,15,16,17,18.
Die Ergebnismessungen zur Beurteilung der Nervenregeneration reichen von der Elektrophysiologie bis zur Histomorphometrie, aber diese Methoden implizieren eine Korrelation, messen aber nicht unbedingt direkt die Rückkehr der motorischen Funktion14,15. Regenerierende Nervenfasern stellen möglicherweise keine geeigneten Verbindungen her, was zu einer Überschätzung der Anzahl der funktionellen Verbindungen führen kann14,15,19,20. Die beste und klinisch relevanteste Messung zum Nachweis der korrekten Reinnervation von Endorganen bleibt die Beurteilung der Muskelfunktion21,22,23. Die Erstellung von Werkzeugen zur Bewertung der motorischen Funktion für Tiermodelle ist jedoch eine Herausforderung. Medinaceli et al. beschrieben erstmals die Walking-Track-Analyse, die seitdem die am häufigsten verwendete Methode zur Bewertung der funktionellen Erholung in experimentellenperipherenNervenstudienist 21,24,25,26,27,28. Die Walking-Track-Analyse quantifiziert den Ischiasfunktionsindex (SFI) basierend auf Messungen von Pfotenabdrücken von gehenden Ratten21,29. Wesentliche Einschränkungen der Laufweganalyse, wie Zehenkontrakturen, Autoverstümmelung, Verschmieren des Drucks und schlechte Korrelation mit anderen Messungen der Reinnervation, haben die Verwendung anderer Parameter zur Quantifizierung der funktionellen Erholungerforderlich 30,31.
In früheren Studien an Lewis-Ratten32 und neuseeländischen Kaninchen33haben wir die isometrische Tetanic Force (ITF)-Messung für den Tibialis anterior (TA) Muskel validiert und ihre Wirksamkeit bei der Bewertung der Muskelregeneration nach verschiedenen Arten der Nervenreparatur34,35,36,37,38,39nachgewiesen . Der TA-Muskel ist wegen seiner relativ großen Größe, Innervation durch den peronealen Ast des Ischiasnervs und gut aufgeklärten biochemischen Eigenschaften gut geeignet40,41,42,43. Wenn die Muskellänge (Vorspannkraft) und die elektrischen Parameter optimiert werden, bietet die ITF eine Side-to-Side-Variabilität von 4,4% bzw. 7,5% bei Ratten32 bzw. Kaninchen33.
Dieser Artikel enthält ein detailliertes Protokoll der ITF-Messung im Ischiasnervmodell der Ratte, einschließlich einer gründlichen Beschreibung der notwendigen präoperativen Planung, des chirurgischen Ansatzes und der Dissektion des gemeinsamen Peronealnervs und der distalen TA-Muskelsehne. Anhand vorgegebener Werte für die Reizintensität und -dauer wird die optimale Muskellänge und Reizpulsfrequenz definiert. Mit diesen vier Parametern kann die ITF anschließend konsistent und genau gemessen werden.

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	<tbody>
		<tr>
			<td>0.9% Sodium Chloride</td>
			<td>Baxter Healthcare Corporation, Deerfield, IL, USA</td>
			<td>G130203</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1 mm Kirshner wires</td>
			<td>Pfizer Howmedica, Rutherford, NJ</td>
			<td>N/A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Adson Tissue Forceps</td>
			<td>ASSI, Westbury, NY, USA</td>
			<td>MTK-6801226</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bipolar electrode cables</td>
			<td>Grass Instrument, Quincy, MA</td>
			<td>N/A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bipolar stimulator device</td>
			<td>Grass SD9, Grass Instrument, Quincy, MA</td>
			<td>N/A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cotton-tip Applicators</td>
			<td>Cardinal Health, Waukegan, IL, USA</td>
			<td>C15055-006</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Curved Mosquito forceps</td>
			<td>ASSI, Westbury, NY, USA</td>
			<td>MTK-1201112</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Force Transducer MDB-2.5</td>
			<td>Transducer Techniques, Temecula, CA</td>
			<td>N/A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gauze Sponges 4x4</td>
			<td>Covidien, Mansfield, MA, USA</td>
			<td>2733</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ground cable</td>
			<td>Grass Instrument, Quincy, MA</td>
			<td>N/A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane chamber</td>
			<td>N/A</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Custom-made</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ketamine</td>
			<td>Ketalar, Par Pharmaceutical, Chestnut, NJ</td>
			<td>42023-115-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LabView Software</td>
			<td>National Instruments, Austin, TX</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Loop</td>
			<td>N/A</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Custom-made</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microsurgical curved forceps</td>
			<td>ASSI, Westbury, NY, USA</td>
			<td>JFA-5B</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microsurgical scissors</td>
			<td>ASSI, Westbury, NY, USA</td>
			<td>SAS-15R-8-18</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microsurgical straight forceps</td>
			<td>ASSI, Westbury, NY, USA</td>
			<td>JF-3</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Retractor</td>
			<td>ASSI, Westbury, NY, USA</td>
			<td>AG-124426</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scalpel Blade No. 15</td>
			<td>Bard-Parker, Aspen Surgical, Caledonia, MI, USA</td>
			<td>371115</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Slim Body Skin Stapler</td>
			<td>Covidien, Mansfield, MA, USA</td>
			<td>8886803512</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Subminiature electrode</td>
			<td>Harvard Apparatus, Holliston, MA</td>
			<td>N/A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical Nerve Stimulator</td>
			<td>Checkpoint Surgical LCC, Cleveland, OH, USA</td>
			<td>9094</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Terrell Isoflurane</td>
			<td>Piramal Critical Care Inc., Bethlehem, PA, USA</td>
			<td>H961J19A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Testing platform</td>
			<td>N/A</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Custom-made</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tetontomy Scissors</td>
			<td>ASSI, Westbury, NY, USA</td>
			<td>ASIM-187</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Traceable Big-Digit Timer/Stopwatch</td>
			<td>Fisher Scientific, Waltham, MA, USA</td>
			<td>S407992</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>USB-6009 multifunctional I/O data acquisition (DAQ) device</td>
			<td>National Instruments, Austin, TX</td>
			<td>779026-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vacuum Base Holder</td>
			<td>Noga Engineering &#38; Technology Ltd., Shlomi, Isreal</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Attached clamp is custom-made</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Weight (10 g)</td>
			<td>Denver Instruments, Denver, CO, USA</td>
			<td>820010.4</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Weight (20 g)</td>
			<td>Denver Instruments, Denver, CO, USA</td>
			<td>820020.4</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Weight (50 g)</td>
			<td>Denver Instruments, Denver, CO, USA</td>
			<td>820050.4</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Xylazine</td>
			<td>Xylamed, Bimeda MTC Animal Health, Cambridge, Canada</td>
			<td>1XYL002</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

maximum isometric tetanic force measurement of the tibialis anterior muscle in the rat

Traumatische Nervenverletzungen führen zu einem erheblichen Funktionsverlust und segmentale Nervendefekte erfordern oft die Verwendung von autologen Interpositionsnerventransplantaten. Aufgrund ihrer begrenzten Verfügbarkeit und der damit verbundenen komorischen Morbidität auf der Spenderseite konzentrieren sich viele Studien im Bereich der Nervenregeneration auf alternative Techniken, um eine segmentale Nervenlücke zu überbrücken. Um die Ergebnisse chirurgischer oder pharmakologischer experimenteller Behandlungsmöglichkeiten zu untersuchen, wird das Ischiasnervenmodell der Ratte häufig als Bioassay verwendet. Es gibt eine Vielzahl von Ergebnismessungen, die in Rattenmodellen verwendet werden, um das Ausmaß der Nervenregeneration zu bestimmen. Die maximale Ausstoßkraft des Zielmuskels bleibt das relevanteste Ergebnis für die klinische Translation experimenteller Therapien. Die isometrische Kraftmessung der tetanischen Muskelkontraktion wurde zuvor als reproduzierbare und gültige Technik zur Bewertung der motorischen Erholung nach Nervenverletzungen oder -reparaturen in Ratten- und Kaninchenmodellen beschrieben. In diesem Video geben wir eine Schritt-für-Schritt-Anleitung zu diesem unschätzbaren Verfahren zur Beurteilung der funktionellen Erholung des Tibialis-Vordermuskels in einem Ischiasnervendefektmodell der Ratte unter Verwendung optimierter Parameter. Wir werden die notwendigen präoperativen Vorbereitungen zusätzlich zum chirurgischen Ansatz und der Dissektion des gemeinsamen Peronealnervs und der Tibialis anteriorEnmuskelsehne beschreiben. Die isometrische tetanische Kraftmesstechnik wird detailliert beschrieben. Die Bestimmung der optimalen Muskellänge und Reizpulsfrequenz wird erläutert und die Messung der maximalen tetanischen Muskelkontraktion demonstriert.

Fünf Parameter werden verwendet, um die ITF-Messung zu messen. Dazu gehören Muskelspannung (Vorspannkraft), Reizintensität (Spannung), Reizimpulsfrequenz, Reizdauer von 0,4 ms und eine Verzögerung von 2 ms. Vor der Messung der ITF muss die optimale Muskelspannung durch zwei einzelne zuckende Muskelkontraktionen mit einer Intensität von 2 V während des Parametertests ermittelt werden. Diese Reize verursachen eine Dorsiflexion der Pfote und erzeugen ein Ausgangssignal auf der Grafik im VI (Abbild...

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Maximum Isometric Tetanic Force Measurement of the Tibialis Anterior Muscle in the Rat

Die Bewertung der motorischen Erholung bleibt das Benchmark-Ergebnismaß in experimentellen peripheren Nervenstudien. Die isometrische tetanische Kraftmessung des Tibialis-Vordermuskels bei der Ratte ist ein unschätzbares Werkzeug, um funktionelle Ergebnisse nach der Rekonstruktion von Ischiasnervendefekten zu beurteilen. Die Methoden und Nuancen werden in diesem Artikel ausführlich beschrieben.

Maximale isometrische tetanische Kraftmessung des Tibialis-Vordermuskels bei ratten

Traumatic nerve injuries result in substantial functional loss and segmental nerve defects often necessitate the use of autologous interposition nerve ...

Das übergeordnete Ziel dieses Videos ist es, eine Schritt-für-Schritt-Anleitung zur Messung der isometrischen tetanischen Kraft des Tibialis anterior Muskels bei der Ratte zu geben, eine reproduzierbare und validierte Methode zur Beurteilung der funktionellen Erholung nach Ischiasnervenverletzung oder -rekonstruktion. Das Ischiasnervendefektmodell der Ratte wird häufig verwendet, um experimentelle Behandlungsmöglichkeiten für periphere Nervenverletzungen zu bewerten. Um die Goldstandardbehandlung für segmentale Nervendefekte bei Ratten zu replizieren, wird in der Regel ein 10-Millimeter-Segment des Ischiasnervs als Interpositionsautograft umgekehrt herausgeschnitten.Bei experimentellen Behandlungen kann die Nervenlücke mit anderen Techniken, wie z.B. einem Nervenallotransplantat oder einer Leitung, rekonstruiert werden. Für die klinische Translation dieser experimentellen Techniken ist es wichtig, das Ausmaß der motorischen Funktionserholung im Zielmuskel zu messen. In diesem Video werden wir beschreiben, wie man das für den Tibialis anterior Muskel durch Stimulation des gemeinsamen Peronealnervs tun kann.Starten Sie den Vorgang, indem Sie den Kraftaufnehmer kalibrieren. Positionieren Sie die Testplattform, die zwei Holzblöcke enthält, auf dem Verfahrenstisch. Stellen Sie sicher, dass der Computer an ein Datenerfassungsgerät angeschlossen ist, das wiederum an den Kraftaufnehmer angeschlossen werden sollte.Befestigen Sie den Kraftaufnehmer mit seiner Vakuumbasis vertikal an der Prüfplattform. Befestigen Sie die Schlaufe an der Klemme für die Kalibriergewichte. Öffnen Sie die Software, führen Sie das virtuelle Instrument zur isometrischen tetanischen Kraftmessung aus und wählen Sie eine neue Kalibrierung.Die Kalibrierung beginnt mit Null Gewicht auf der Schleife. Nacheinander, mit 10, 20, 30 und 50 Gramm Gewicht und sammeln Sie die Daten zwischen jeder Gewichtsmessung. Wählen Sie den Prozess aus, sobald alle fünf Gewichtsmessungen gesammelt wurden.Im Falle einer erfolgreichen Kalibrierung sollte der Graph eine positive lineare Kurve darstellen und die Werte akzeptieren, um fortzufahren. Entfernen Sie die Schlaufe und die Gewichte von der Klemme und positionieren Sie den Kraftaufnehmer horizontal auf der Prüfplattform. Wählen Sie Null aus, um den Kalibrierungsvorgang abzuschließen.Nachdem Sie die Anästhesie mit einer Isoflurankammer induziert haben, rasieren Sie eine Hinterbeine und legen Sie die Ratte auf ein 37-Grad-Heizkissen. Die Ratte wurde mit einer intraperitonealen Injektion eines Ketamin- und Xylazincocktails tief betäubt und fünf bis sechs Milliliter Kochsalzlösung subkutan verabreicht, um während des gesamten Eingriffs einen ausreichenden Hydratationsstatus aufrechtzuerhalten. Legen Sie die Ratte auf die Seite und erzeugen Sie einen 2 bis 3 Zentimeter breiten posterolateralen Oberschenkelschnitt parallel zum Femur.Um den peronealen Nervenast des Ischiasnervs freizulegen, trennen Sie den Musculus biceps femoris vom Musculus gluteus maximus und vastus lateralis, indem Sie die Faszienebene zwischen diesen Muskeln sezieren. Platzieren Sie den Retraktor zwischen den getrennten Muskeln, um einen besseren Zugang zum Ischiasnerv zu haben. Identifizieren Sie die Trifurkation des Ischiasnervs in den Nervus peronealis, den Nervus tibialis und den Nervus suralis.Verwenden Sie eine gekrümmte Zette, um den peronealen Nervenast aus dem umgebenden Gewebe zu sezieren. Bei Unsicherheit den Nerv vorsichtig einklemmen und beobachten, ob die motorische Reaktion eine Dorsiflexion der Hinterpfote ist. Um den vorderen Muskel Tibialis freizulegen, legen Sie die Ratte auf den Rücken und schneiden Sie den anterolateralen Aspekt der unteren Extremität, beginnend am Kniegelenk und absteigend zur mittelmäßigen Seite der Pfote.Isolieren Sie die distale Tibialis anterior Muskelsehne vom umgebenden Gewebe. Verwenden Sie eine Mückenzette, um die Sehne bis zum Einsetzen stumpf zu sezieren und die Sehne an der Einführstelle zu schneiden. Der erste Schritt im Prozess der isometrischen tetanischen Kraftmessung ist die Optimierung der Muskellänge, auch Parametertest genannt.Übertragen Sie die Ratte zusammen mit dem Heizkissen auf die Testplattform, verwenden Sie zwei 1 Millimeter k-Drähte, um die Hinterbeine am Holzblock zu befestigen. Bohren Sie den ersten k-Draht durch den distalen Femur und den zweiten durch den Knöchel. Befestigen Sie den Halter für die Subminiaturelektrode an der Testplattform und positionieren Sie die Klemme um die Position des Peronealnervs.Führen Sie das Erdungskabel in die umgebenden Muskeln ein und setzen Sie den Retraktor für den Zugang zum Nervus peronealis zurück. Befestigen Sie die bipolaren Elektrodenkabel an der Subminiaturelektrode und haken Sie die Elektrode mit der gekrümmten Pinzette um den Peronealnerv. Verwenden Sie die Klemme am Halter, um die Position der Subminiaturelektrode zu fixieren.Klemmen Sie die distale Tibialis anterior Muskelsehne an die Klemme, die am Kraftaufnehmer befestigt ist. Für eine genaue Messung ist es wichtig, dass der Kraftaufnehmer parallel zum Verlauf des Tibialis-Vordermuskels positioniert ist. Stellen Sie sicher, dass das Rattenreferenzkabel distal auf der Subminiaturelektrode und das schwarze aktive Elektrodenkabel proximal platziert ist.Schließen Sie sowohl diese Kabel als auch das Erdungskabel an ein bipolares Stimulatorgerät an. Zur Optimierung der Muskellänge stellen Sie die Einstellungen des bipolaren Stimulators auf eine Verzögerung von zwei Millisekunden Dauer von 0,4 Millisekunden und eine Reizintensität von 2 Volt ein. Sobald alles gut verbunden ist, stellen Sie die Software auf Parametertest und drücken Sie die Triggersammlung.Erhöhen Sie die Muskellänge, auch Bekannt als Vorspannung, indem Sie den am Kraftaufnehmer befestigten Hebelarm bewegen. Die Vorspannung ist das große Kit oben auf der Grafik auf dem Bildschirm. Beginnen Sie mit einer 10-Gramm-Vorspannung und geben Sie zwei einzelne Zuckungen, indem Sie die Stimulus-Taste am bipolaren Simulator nach unten drücken.Die Ausgabe wird auf dem Diagramm als zwei Spitzenausgangskräfte sichtbar sein und die Ratte sollte eine Dorsiflexion der Pfote zeigen. Drücken Sie erneut die Triggersammlung, um diese beiden Spitzen zu messen. Normalerweise erkennt das Programm die Spitzen automatisch.Drücken Sie in diesem Fall auf Akzeptieren, um fortzufahren. Wenn die Software die Peaks jedoch nicht erkennt, klicken Sie auf die Decline und wählen Sie die Peaks manuell aus. Die beiden Ausgangskräfte werden auf eine mittlere Spitzenausgangskraft gemittelt, die auf der rechten Seite des Diagramms dargestellt wird.Die aktive Muskelkraft kann dann berechnet werden, indem die Vorspannung von dieser mittleren Spitzenausgangskraft abgezogen wird. Verwenden Sie Inkremente von 10 Gramm Vorspannung, bis die Vorspannung, die zur maximalen aktiven Muskelkraft führt, identifiziert ist. Jede Vorlastmessung sollte auf die gleiche Weise durchgeführt werden, indem die Stimulustaste am bipolaren Simulator zweimal nach unten gedrückt wird.Um diesen Prozess zu erleichtern, notiert man die aktive Muskelkraft für jede Vorbelastung und hört auf, die Vorbelastung zu erhöhen, sobald die aktive Muskelkraft abfällt. In diesem Beispiel wird die maximale aktive Muskelkraft bei einer Vorspannung von 20 Gramm umgeschaltet. Die Vorspannung, die die höchste aktive Muskelkraft, also die optimale Muskellänge, ergibt, wird zur Messung der isometrischen Tetankraft verwendet.Lösen Sie die Verspannungen am Muskel und befeuchten Sie den Muskel mit erhitzter Kochsalzlösung. Warten Sie fünf Minuten, bevor Sie mit der Messung der isometrischen tetanischen Kraft beginnen. Passen Sie während des Wartens die Reizintensität auf 10 Volt an, führen Sie die Dauer auf 0,4 Millisekunden und die Verzögerung auf zwei Millisekunden.Die isometrische tetanische Kraft wird mit steigenden Frequenzen ab 30 Hertz gemessen. Wechseln Sie in der Software vom Parametertest zum Frequenztest und bewegen Sie den Kraftaufnehmer auf die vorgegebene optimale Muskellänge. Induzieren Sie nun die tetanische Stimulation, indem Sie die Reiztaste am bipolaren Simulator maximal fünf Sekunden lang nach oben drücken oder bis ein Kraftgipfel deutlich beobachtet wird.Die optimale tetanische Kurve nimmt stark zu und hat dann eine langsam abnehmende Plateauphase, gefolgt von einer starken Abnahme. Dokumentieren Sie die Kraftspitze für jede Reizfrequenz. Lassen Sie den Muskel fünf Minuten lang bei Null Vorspannung ruhen und befeuchten Sie den Muskel mit erhitzter Kochsalzlösung zwischen jeder Messung.Verwenden Sie Inkremente von 30 Hertz und eine Auflösung von 10 Hertz, bis das maximale Kraftplateau eingehalten wird. Dies wird die isometrische tetanische Kraft sein. Verwenden Sie Klammern oder Nähte, um die Haut zu schließen und wiederholen Sie den gesamten Vorgang bis zur kontralateralen Hinterbeine.Euthanasiern Sie das Tier nach Abschluss der Messung auf der kontralateralen Seite. Nachdem Sie sich dieses Video angeschaut haben, sollten Sie ein gutes Verständnis dafür haben, wie Sie die isometrische tetanische Muskelkraft bei Ratten, die sich einer Ischiasnervenrekonstruktion unterzogen haben, reproduzierbar messen können.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Visualization of Proprioceptors in Drosophila Larvae and Pupae

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Forschung

Neurowissenschaften

An In Vitro Adult Mouse Muscle-nerve Preparation for Studying the Firing Properties of Muscle Afferents

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Ein<em&gt; In-vitro-</em&gt; Adult Maus Muskel-Nerven Vorbereitung für das Studium der Brenneigenschaften des Muskel-Afferenzen

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