Name: direct drug delivery to kidney via the renal artery
Uploaded: 2021-04-17T15:00:00
Duration: 11 min 18 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Direct Drug Delivery to Kidney via the Renal Artery at JoVE.com

特別な設計カテーテルを製造する上でコラボレーションのための技術とインステックラボを微調整するのを助けてくれたRRSSCのルネ・レミーに感謝します。AstraZeneca R&D の同僚の皆さんも、ヒントやコツやゼロックスでの音声でビデオを完成させるための生産的な議論に感謝します。

実験的な手順は、ヨーテボリ、スウェーデンの地域実験動物倫理委員会によって承認されました。
1. 術前ケア
<ol><li>感染を避けるために無菌技術を使用してください。<ol>
<li>麻酔(例えば、イオブルラン)の下で、可能な限り無菌的な方法で働いて、手術領域を剃り、脱毛クリームで毛皮を取り除く。クリームを約1分間放置します(皮膚にやけどを避けるため最大2分間)。水で丁寧に洗います。この第一ステップは、手術の直前に動物の余分な冷却を避けるために、手術の1〜2日前に行うことが好ましい。</li>
		<li>目の上に眼用潤滑油を塗布して乾燥を防ぎます。</li>
		<li>感染を避けるために、手術領域を消毒用の皮膚クレンザーで洗浄し、手術直前に消毒剤(クロルヘキシジン)で領域を拭いてください。</li>
	</ol>
</li>
	<li>鎮痛<ol>
<li>動物が末期手順でない場合は鎮痛薬で動物を投与する前に:ブプレノルフィン(例えば、テムゲシック)0.05-0.1 mg/kg s.c。</li>
	</ol>
</li>
	<li>抗 凝固 剤<ol>
<li>血栓を避けるために抗凝固剤を使用してください: 手術の直前に尾静脈を介してヘパリンの10 IU (最大 5 mL/kg).</li>
	</ol>
</li>
</ol>2. 外科的処置
<ol><li>器具をオートクレーブし、滅菌カテーテルを使用します。石鹸とヒビスクラブで急いで洗い流し、フェイスマスク、ヘアネット、無菌の外科用ガウンと手袋を着用してください。第二の人が動物とすべての「汚い」タスクを処理してもらいます。</li>
	<li>麻酔の場合は、イオブルランを使用してください。5%のイオブルランを使ってマウスを麻酔ボックスに入れることで麻酔を誘発する。誘導後、反射神経と呼吸を確認して麻酔の深さを確認します。<ol>
<li>手術中にマウスにフェイスマスクを置き、2%イオブルランの維持用量を与える。</li>
	</ol></li>
	<li>手術台に置く前に、ヒビスクラブとクロルヘキシジンで動物を洗ってください。</li>
	<li>麻酔後、熱くなった外科用パッドの上にマウスを置き、低タック粘着テープを使用して上下の手足をパッドに固定します。肺の圧迫を防ぐために、上肢が正常な位置に維持されていることを確認してください。可能であれば、非電気熱源を使用してください。 注:手術中の調整を容易にするため、吸入麻酔(イオブルランなど)を使用しています。</li>
	<li>マウスをラップでドレープし(例えば、プレスンシール)、手術顕微鏡で作業を行います。</li>
	<li>常に手術領域に生理を加えることによって乾燥から組織を保護します。これはまたティッシュの伸縮性を保つのを助け、外科を行っている間損傷の危険を最小にする。生理液は動物の冷却を避けるために約37°Cでなければなりません。</li>
	<li>鉗子とはさみで正中切開で腹腔を開いた後、湿った折り畳み、圧縮して他のすべての臓器を押しのけて手術領域を良く見ることができます。</li>
	<li>手術領域(5 mm鈍いフック)の良い概要を持っているレトラクターを使用してください。</li>
	<li>大大小と左腎臓を局所化する。</li>
	<li>2つのマイクロサージャリー鉗子を使用して、腎臓から大歯(2.10.1を参照)と尾行(2.10.2を参照)の両方を腎臓から静かにきれいにし、その下に合字を置きます(6-0シルク)。構造物をつままないように注意してください。組織を優しく伸ばして引っ張り、可能な限り腎動脈に近づけることによって、あなたの方法を働かしてください。血管の周りには、容易に発見できないいくつかの神経があります。損傷した神経は麻痺または他の問題を引き起こす可能性があるので、この覚えておいてください。<ol>
<li>腎臓(上記)を、この合字を使用して大麦を持ち上げて、注射を行いながら血流を一時的に閉塞する。この位置では、腎動脈の真上、大動脈が反対方向に分岐する(腸に対して、 図1を参照)。この方法で注入を押すことを避けるために、この枝の下に合字を置きます。注入手順を開始するまで、緊張せずに合字を残します。</li>
		<li>Caudally (下) 腎臓, 他の潜在的な枝を避けるために大動脈が腎臓/腎動脈に分岐する場所の近くに切開を置きます.腎臓から尾大動脈は腹部静脈に非常に近い。静脈を損傷しないように非常に注意してください。</li>
	</ol></li>
	<li>注射<ol>
<li>すべての合字が整っている場合。最初に下の合字を伸ばし、上合字を伸ばして血流を閉塞させ、注入された液体を腎臓に向ける。</li>
		<li>鍼針(Ø 0.25 mm)を使用して、カテーテルの先端(32GA)を大間に穿刺して導き、射出中に移動したり漏れたりしないように合字に1つの結び目を付けて固定します。(図1)。はさみの代わりに鍼治療針を使用すると、血管内の最小限の入り口穴を作ります。</li>
		<li>50 μLの液体を注入します。腎臓は青白くなり、注射が腎臓を浸透させ、運命の場所に終わったことを示す。</li>
		<li>この時点で、2 つの異なるシナリオが考えられます。<ol>
<li>入り口穴を閉じる前に、上合字の緊張を慎重に緩めることによって腎臓に循環を返します。このようにして虚血は改善されるが、注入された液体は潜在的に腎静脈を介して急速にクリアされ、したがって十分な留まる時間を許さないことに注意してください。</li>
			<li>または血流を返さずに手術を進める。</li>
		</ol>
</li>
		<li>上合字を再び締めた後、カテーテルを引き出し、大間を縫合し、完全な循環を返す。<ol>
<li>カテーテルを保持している合字を取り外します。</li>
			<li>カテーテルを撤回します。</li>
			<li>入口穴を単一のステッチ(エチロン11-0、丸み針)で縫合する。</li>
			<li>まず、下の合字を緩め、次に非常にゆっくりと上の合字を緩めます。漏れがある場合は、もう一度合字を締め、数秒待ってからもう一度やり直してください。虚血損傷を避けるために、虚血時間の合計を最大5〜10分に保ちます。</li>
			<li>領域を押して固体をテストし、脈動を探し、腎臓が再循環が確立されていることを再確認するために「正常な着色」に戻ることを確認します。</li>
			<li>糸を切り、大間の下の合字を取り除きます。</li>
			<li>圧縮を取り除き、腸を所定の位置に押し戻します。腹腔に生理食糸を加え、腹膜(Vicryl 6-0)を縫合してから、皮膚を金属クリップで閉じる前に、いくつかの流体を返します。</li>
			<li>動物を目覚めさせる前に、皮下のレヒドレックスの0.7-1 mLを与えられる。 注:全体の手順は、十分な訓練を受けた緊急のために約30〜45分かかります。</li>
		</ol>
</li>
	</ol></li>
</ol>3. 術後ケア
<ol><li>ケージの一部の下に加熱パッド(約38°C)を配置し、手術後2〜3日間、動物が暖かい環境で目を覚ますことができます。</li>
	<li>麻酔を提供し続ける (ブプレノルフィン, 例えば, テムゲシック 0.05-0.1 mg/kg s.c.) 2-3 回/日手術後 3 日間.</li>
	<li>動物が脱水症状を示す場合は、時に10 mL/kgのレハイドレックス.cを与える。</li>
</ol>

<ol>
	<li>Porvasnik, S. L., Mah, C., Polyak, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Targeting+Murine+Small+Bowel+and+Colon+Through+Selective+Superior+Mesenteric+Artery+Injection.">Targeting Murine Small Bowel and Colon Through Selective Superior Mesenteric Artery Injection.</a> Microsurgery. 30 (6), 487-493 (2010).</li><li>Rocca, C. J., Ur, S. N., Harrison, F., Cherqui, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=rAAV9+combined+with+renal+vein+injection+is+optimal+for+kidney-targeted+gene+delivery:+conclusion+of+a+comparative+study.">rAAV9 combined with renal vein injection is optimal for kidney-targeted gene delivery: conclusion of a comparative study.</a> Gene Therapy. 21 (6), 618-628 (2014).</li><li>Cai, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Maximum+efficacy+of+mesenchymal+stem+cells+in+rat+model+of+renal+ischemia-reperfusion+injury:+renal+artery+administration+with+optimal+numbers.">Maximum efficacy of mesenchymal stem cells in rat model of renal ischemia-reperfusion injury: renal artery administration with optimal numbers.</a> PLoS One. 9 (3), 92347 (2014).</li><li>Leda, A. R., Dygert, L., Bertrand, L., Toborek, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+Microsurgery+Infusion+Technique+for+Targeted+Substance+Delivery+into+the+CNS+via+the+Internal+Carotid+Artery.">Mouse Microsurgery Infusion Technique for Targeted Substance Delivery into the CNS via the Internal Carotid Artery.</a> Journal of Visualized Experiments. (119), e54804 (2017).</li><li>Monteiro Carvalho Mori da Cunha, M. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Surgical+Technique+for+Homogenous+Renal+Distribution+of+Substances+in+Rats.">A Surgical Technique for Homogenous Renal Distribution of Substances in Rats.</a> European Surgical Research. 51, 58-65 (2013).</li><li>De Jong, W. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Particle+size-dependent+organ+distribution+of+gold+nanoparticles+after+intravenous+administration.">Particle size-dependent organ distribution of gold nanoparticles after intravenous administration.</a> Biomaterials. 29 (12), 1912-1919 (2008).</li><li>Ullah, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Novel+Approach+to+Deliver+Therapeutic+Extracellular+Vesicles+Directly+into+the+Mouse+Kidney+via+Its+Arterial+Blood+Supply.">A Novel Approach to Deliver Therapeutic Extracellular Vesicles Directly into the Mouse Kidney via Its Arterial Blood Supply.</a> Cells. 9 (4), 937 (2020).</li></ol>

著者は開示するものは何もない。

この方法は、腎損傷を引き起こすことなく、腎臓に製剤を提供することに成功しています.これは、製剤(例えば、小分子、茎/前駆細胞、またはマイクロベシクル)の任意の種類の送達に使用することができます。この方法は、健康な動物または腎疾患モデルに適用することができる。
図2と図3では、神学を示しています。図2は、輸液後180分のヒストロジーを示し、図3は注入後7日目の歴史を示す。その理由は、腎動脈の実験がわずか180分であったためです。この新しい方法で慢性的な損傷がないことを確認するために、我々は意図的にそれらを評価するために7日間待ちました。n 個の数値は小さいですが、これは単なる例です。
この新しく開発した大オルタ投与法は、比較的低いスループットを有する侵襲的な方法であり、単一投下戦略にのみ適している。この方法では、繰り返しのドージングはできません。
合字配置のわずかな調整により、この方法は、両方の腎臓を5,7に注入するために使用される可能性があります。大動脈分岐による波及のリスクの増加に伴い、閉塞した合字を腎臓にできるだけ近づけることに決め、左腎臓への注射のみを導いた。また、他のモデルや、ウニネフレトミーのような技術、あるいはおそらく同時腎虚血再灌流傷害(IRI)に加えて使用することができる。私たちの意見では、IRI3手術後わずか24時間で注射を行うことはあまりにも厳しく、動物の回復に大きな影響を与えます。
新しいマウス株を使用する場合は、その菌株の一部の動物に対してパイロット実験を行い、その方法を何らかの方法で調整する必要がないことを確認する必要があります。例えば、大大体からの血管分岐をある株において、少し異なる位置に置くことができる。合字の位置は、製剤が適切な位置で終わることを確実にするためにいくらか変わるかもしれません。
脱水 腹腔を開くことは脱水症状の大きなリスクをもたらす。従って手術の間および後の両方の液体(37°Cの周り)を加える必要がある後、回復の基礎を維持するためには、術後に。通常、手術後に1mL/マウス.c与えます。
虚血 長時間の手術時間または完全な再循環に達しなかった場合は虚血をもたらす。実際の虚血時間を記録し、腎臓(および後ろ足)への循環が回復することを確認することが重要です。常にトレーニングを行い、スキルをリフレッシュすることが重要です。より速く手順を実行すると、腎臓が虚血にさらされる時間が短縮されます。虚血時間(大大通りの結紮)を5分(最大10分)程度に保つことは、腎臓に害を与えないことが示されている。
波及 注入された製剤が腎静脈を通して循環に再入するとき、他の器官への波及の危険性を考慮して、注入された容積は最小限に抑えるべきである。最大体積50 μLを推奨します。
副作用 (血栓症と麻痺) 当初、モデルを設定する際に、後ろ足の麻痺に関する不整合の問題が発生しました。抗凝固剤の関連用量(尾静脈のヘパリンの10 IU)の投与後、この有害作用は有意に減少した。また、現場の専門家に相談した後、私たちはまた、外傷性手術、つまり組織につままず、できるだけ少ない領域に触れることに、さらに注意を払い始めました。これらの行動は、麻痺の頻度を約50%から事実上なしに減少させた。
当初、方法開発中に、腎動脈に抗凝固組織を適用して切開穴を閉じた。大大間の圧力が非常に高いので、大間への注射を行うとき、これは不可能でした.抗凝固剤はまた、血管内腔に入ると血栓症のリスクを高める。
アドベンチシアは非常に血栓性であるため、縫合時に大大門の内腔にエクスポーズを起こす必要はありません。また、巻きエッジを反転したり、大腿に縫合することによって大間を狭くすることを避けます。
私たちは今、腎臓に直接製剤を提供するための確立された方法を持っています。

製薬業界における前臨床研究分野では、モデルとメソッドの開発が日常業務の一部です。血流を介して他の組織に大きな波及/閉じ込めを行うことなく、特定の器官、あるいは臓器の別々のコンパートメントに薬物を導く能力に対する関心が高まっている。これは、異なる疾患領域1、2、3、4のモデルにおける薬物標的の効率的な評価のための増加および特異的暴露を可能にする。
物質を送達する一般的な方法は、この原稿に記載されている方法よりも侵襲性が低いため、全身経路(例えば、尾静脈を介して)によるものである。しかし、全身投与は、意図した標的器官よりも他の組織における化合物の代謝または蓄積の増加のリスクを増大させ、肺、肝臓および脾臓2、3、5などの濾過器官を通過する場合である。運命の組織に到達しないことは別として、これは潜在的に有害および/または望ましくない影響を引き起こす可能性があります, 注射剤の性質に応じて.非常に小さな分子だけが濾過器官の毛細血管を通過し、より大きな分子6で作業する場合は特に標的送達が重要である。
注入された製剤の波及および/または蓄積を最小にするために、他の組織において、本明細書記載の方法は、それが腎動脈に分岐するすぐ下の腹部大動脈に挿入されたカテーテルを通して腎動脈血流に製剤を導き、腎臓が最初に器官に達した。このガイド付き投与のもう一つの利点は、より低い用量/体積が、全身投与 3を介して達成されたのと同じレベルの暴露に達するために使用することができるということです。
他の投与経路は、例えば、腎動脈に直接カテーテルを介して注射を探索されている。私たちの手の中で, これは腎臓に循環を復元するために失敗のリスクが高い提示することが判明しました。.腎動脈の直径が非常に小さい(直径約0.35~0.55mm)と切開が比較的大きくなり、入り口穴を閉じると閉塞や塞栓のリスクが生じます。私たちの経験によると、この方法を使用すると、腎臓への虚血関連の損傷がしばしば起こったので、腎臓を標的とする大きな大オルタの切開を通じて物質を注入することによって、腎臓を標的にすることに成功したこの新しい方法を開発しました。
同様の技術がラットで開発されているが、腎動脈に直接注射を働く狭窄/血栓症の課題とリスクを明らかにする 5.これは、マウスの血管がさらに小さいので、我々の発見を支える。
この原稿とビデオでは、眼底大動脈に挿入されたカテーテルを介してマウスの腎動脈に注射を向ける方法と、手順における一般的な困難を克服する方法についてのガイダンスを詳細に説明し、可能な限り安全な方法で作業し、再現性を高める。

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Blunt hook 5mm 8/pack</td>
			<td>Cooper surgical</td>
			<td>3316-8G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ETHILON Nylon Suture 11/0</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>W2881</td>
			<td>For vessel</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microsurgery forceps curved</td>
			<td>Karo Pharma</td>
			<td>FRC-15 RM-8</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microsurgery forceps straight</td>
			<td>Karo Pharma</td>
			<td>FRS-15 RM-8</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mouse renal artery cannula, 3mm 32ga stainless steel, 10cm 2Fr PU, fits 25ga</td>
			<td>Instech</td>
			<td>C07SS-MRA1813</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vicryl, 6-0, BV-1 needle</td>
			<td>Angthos</td>
			<td>W9575</td>
			<td>For abdominal cavity</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

direct drug delivery to kidney via the renal artery

腎研究分野における薬物標的の効率的な評価のために、増加し、特定の腎被ばくを可能にする特異的注射の必要性がある。特定の臓器に薬物が蓄積すると、注射剤の性質によっては、有害で望ましくない影響を引き起こす可能性があります。他の組織における波及および/または蓄積を最小限に抑えるために、本明細書記載の方法は、腎動脈に分岐する静脈内大動脈にカテーテルを挿入することによって製剤を腎動脈血流に導き、腎臓が最初に臓器に達し、腎臓全体に製剤を分配する。
本稿は、その方法の詳細な説明、課題と困難を提供します。これは、無菌条件下で精度を必要とするマイクロ手術のこのタイプで熟練するように実験者を導きます。速度は虚血を最小限に抑えるために重要であり、手順を練習することは悪影響を及ぼすことなく正常に注射する可能性を高めます。注射と再灌流の間の時間だけでなく、注入されたボリュームを調節することによって、他の器官への波及のリスクが軽減されます。 
この手法は、単一の投下戦略に適していることに注意してください。

映画は最高のビデオ品質を持つものを提示するために、異なる手術からのビデオのミックスです。いくつかのシーケンスは、マウスが目を覚ますはずの練習セッションから取られています。したがって、マウスは必ずしも適切にドレープされません。動物が目を覚ますとき、私たちは常に無菌的な方法で働きます。
組織学的分析は、腎動脈に直接注射を行うことは、結果として不可逆性虚血を伴う血流の不十分な再循環のために腎臓損傷を引き起こすことを明らかにした(図2)。腹部大動脈を通る注射は、一方、虚血性損傷を引き起こさなかった(図3)。
大石を介した灌流が腎臓を最初に到達した器官となるのを可視化するために、エバンスブルー色素を用いた(図4)。他の器官は、腎静脈を通過するまで青くならない。
我々はまた、この方法を用いて、間葉系幹細胞を用いて浸透した腎臓に注入された製剤の生着を増加させることができることを示した(図5)。
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/61932/61932fig01.jpg"> 図1:縫合糸とカテーテルの配置。 <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/61932/61932fig01large.jpg" target="_blank"></a>
上の写真:左腎臓の最初の合字を配置する場所を記述します。中央の画像:カテーテルの配置直前の手術領域の概要(プロトコルで2.11)。下の写真:注射直前の手術領域の概要(プロトコルでは2.10)
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/61932/61932fig02.jpg"> 図2:腎動脈への直接注射 腎動脈にNaClを直接注入した研究の設計、およびIHC結果は、 <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/61932/61932fig02large.jpg" target="_blank">この図のより大きなバージョンを見るにはここをクリックしてください。</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/61932/61932fig03.jpg"> 図3:大起節投与後7日目のIHC結果。 IHCは、腹部大動脈を介して腎動脈へのNaClの注入を伴う研究から結果、 注射の7日後 <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/61932/61932fig03large.jpg" target="_blank">この図のより大きなバージョンを表示するには、ここをクリックしてください。</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/61932/61932fig04.jpg"> 図4:エバンスブルー染料の注入 エバンスブルー染料の大オルタを介した注射の連続図を示す上図。エバンスブルー染料の大動脈を介して注射後の腎臓の断面を示す下の写真。 <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/61932/61932fig04large.jpg" target="_blank">この図の大きなバージョンを表示するには、ここをクリックしてください。</a>
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/61932/61932fig05.jpg"> 図5:腹動脈注入は、右腎臓と比較して、左腎臓における間葉系幹細胞の生着を有意に増加させた。 ヒト骨髄由来間葉系幹細胞は、懸濁液中にCM-Dil(赤色蛍光)で標識した。100万個の標識されたMSCが3匹のマウスで腹動脈を介して注入された。MSD注入の3時間後、マウスを終了させた。左右の腎臓は収穫され、凍結切断のためにOCTに埋め込まれた。 <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/61932/61932fig05large.jpg" target="_blank">この図の大きなバージョンを表示するには、ここをクリックしてください。</a>

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Direct Drug Delivery to Kidney via the Renal Artery

本原稿は、マウスの腎腹部大動脈に置かれたカテーテルを介して単一の腎臓への標的送達方法を記述する。

腎動脈を介した腎臓への直接薬物送達

There is a need for directed injections to enable increased and specific renal exposure for efficient evaluation of drug targets in the renal research ...

腎臓への直接薬物送達, 腎動脈を介して.腎研究分野では、薬物標的の効率的な評価のために、増加し、特定の、腎暴露を可能にするために、指示された注射の必要性がある。私の名前はエリカダールキストであり、このビデオで私の目的は、腎動脈に直接注射を行う方法で、私の経験を共有することです。私は今あなたに提示します, 注射を行う方法, 大石を介して腎臓に直接.まず、私はいつもマウス、そしてもちろん手術前の両方を与えることを言うことができます。腹腔を開いた後、私は湿った折り畳まれた圧縮を入れて、他のすべての臓器を脇に押し出し、手術領域を良く見ることができます。組織を乾燥から守るために、手術の傷口に生理を加えることによって、常に組織を湿らせた状態に保つようにしてください。これはまた、組織を弾性に保ち、手術を行っている間に損傷のリスクを最小限に抑えるのに役立ちます。手術領域の良い概要を持っているリトラクタを使用してください。この2枚の写真は同じです。右の絵では、私は構造を描こうとしました。ピンクの部分は大大地です。まず、左腎臓から頭蓋の合字を入れます。これで、後で大麦を一時的に持ち上げ、注射をしながら血流を閉塞させます。ご覧のとおり、大大タータから枝があり、写真のリフトに行きます。このように注射を押さないようにするために、私は合字をその下に置く必要があります。これは、作業する非常に狭い領域を残します。2つの鉗子を使うと、周囲のティッシュから大器官をきれいにし始める。組織を優しく伸ばしてプールすることで、構造をつまんで、あなたの方法で働かないようにしてください。血管の周りには、発見が容易ではない神経がたくさんあります。神経を傷つけることは麻痺やその他の問題を引き起こす可能性があるため、手術後に覚えておいてください。前述のように、私は乾燥から組織を保護するために、常に生理学を追加しようとしました。私は今、大オルタの下に最初の合字を配置します。合字が整ったら、次のステップに進みながらそこに残します。そしてもちろん、組織にしっとりし続けます。私は今、カメラを移動し、あなたが見ているのは、構造が腎臓からコーデルです。流体を加えた後、私は以前と同じように大オルタをきれいにするために私の方法を解剖し始めます。大動脈はこの位置にあり、腹部静脈に非常に近い。そして、あなたは静脈を壊さないように非常に注意する必要があります。腎臓の近くで働くようにしてください, 腎動脈にできるだけ短い距離を持っています.エリア内のスペースを増やすには、縫合糸が所定の位置にあるときに、縫合糸を少し上下にゆっくりと動かすことができます。今回は大通りの周りに別の合字を入れて、ゆるい結び目を作ります。これは私が注入する前に、カテーテルの周りの大大間を固定し、閉じるために使用します。すべての合字が配置されている場合は、実際の注入の時間です。下の合字と上合字を伸ばして、血流を閉塞させ、注射された液体を腎臓だけに向ける。鍼針の助けを借りて、カテーテルの丸みを帯びた先端を大間に導き、合字に1つの結び目で固定します。この方法では、それが移動したり、注射中に漏れる.私は今、50マイクロリットルの液体を注入し、腎臓がどのように青白くなるかをはっきりと見ることができます。注射後、腎臓に循環を返すか、まもなく上合字の緊張を緩めるかのどちらかを選択できます。私はこの設定で行うのと同じように。または、血流を返すことなく、手術を続けることができます。血流を返せば、虚血を少し改善します。同時に、注入したものは何でも、腎静脈を通して早くすすい出されます。そして、ここで私が合字を緩めたとき、血液が腎臓に戻ってくるのを見ます。上合字を再び引き締めた後、カテーテルを引き出し、大間を縫合し、再び循環に満ちたものを返す時が過ぎる。まず、縫合糸を取り除き、カテーテルを保持します。そして、私はカテーテルを撤回します。入り口の穴を縫合する。穴を縫合した後、まず下の合字を緩め、次に上の合字を非常にゆっくりと緩めます。漏れがある場合は、合字をもう一度締め、数秒待ってからもう一度やり直してください。縫合糸が所定の位置にある場合、通常は停止します。信仰を持ち、私は常に血流が正常に戻っていることを確保するために、領域を押すことによって、強度をテストし、脈動を探してみてください。すべてが良い場合は、スレッドをカットし、合字を取り除くことができます。圧縮を取り除き、腸をゆっくりと所定の位置に押し戻してみてください。いくつかの流体を返し、金属クリップで皮膚を閉じる前に、一緒に腹腔をステッチします。この研究では、左腎動脈にMSCを注入したとラベル付けしました。これは、右腎臓と比較して左腎臓における細胞の生着が有意に増加することを明らかに示す。要するに、腎損傷を受けずに腎臓に直接製剤を送達する確立された方法があると結論付けることができます。この方法は、あらゆる種類の製剤に対して使用でき、かつ、全身投与と比較して、より少ない量または用量量を必要とするという利点を有し、同じレベルの腎暴露に達する。

Research

JoVE Journal

Medicine

Heterotopic Mucosal Engrafting Procedure for Direct Drug Delivery to the Brain in Mice

マウスの脳に直接薬剤送達のための異粘膜移植手順

Delivery of therapeutics into the brain is impeded by the presence of the blood-brain barrier (BBB) which restricts the passage of polar and high ...

Murine Model of Femoral Artery Wire Injury with Implantation of a Perivascular Drug Delivery Patch

血管周囲ドラッグデリバリーパッチの移植に大腿動脈ワイヤ傷害のマウスモデル

Percutaneous interventions including balloon angioplasty and stenting have been used to restore blood flow in vessels with occlusive vascular disease. ...

Murine Kidney Transplant Technique

マウスの腎臓移植​​技術

The first mouse kidney transplant technique was published in 19731 by the Russell laboratory. Although it took some years for other labs to become ...

Intraluminal Drug Delivery to the Mouse Arteriovenous Fistula Endothelium

マウスの動静脈瘻内皮への管腔内薬物送達

Delivery of therapeutic agents to enhance arteriovenous fistula (AVF) maturation can be administered either via intraluminal or external routes. The ...

Intravascular Delivery of Biologics to the Rat Kidney

ラット腎臓への生物製剤の血管内デリバリー

The renal microvascular compartment plays an important role in the progression of kidney disease and hypertension, leading to the development of End Stage ...

Direct Re-implantation of Left Coronary Artery into the Aorta in Adults with Anomalous Origin of Left Coronary Artery from the Pulmonary Artery (ALCAPA)

Direct Re-implantation of Left Coronary Artery into the Aorta in Adults with Anomalous Origin of Left Coronary Artery from the Pulmonary Artery ALCAPA

肺動脈から左冠状動脈の異常原点と成人における大動脈内に左冠状動脈の直接再注入（ALCAPA）

Anomalous origin of the left coronary artery from the pulmonary artery (ALCAPA) is a rare congenital anomaly which is one of leading causes of myocardial ...

Optimized LC-MS/MS Method for the High-throughput Analysis of Clinical Samples of Ivacaftor, Its Major Metabolites, and Lumacaftor in Biological Fluids of Cystic Fibrosis Patients

Ivacaftor、主要な代謝産物および嚢胞性線維症患者の体液中の Lumacaftor の臨床サンプルの高スループット分析のための最適化された LC-MS/MS 法

Defects in the cystic fibrosis trans-membrane conductance regulator (CFTR) are the cause of cystic fibrosis (CF), a disease with life-threatening ...

Assessment of Kidney Function in Mouse Models of Glomerular Disease

糸球体疾患のマウス ・ モデルにおける腎機能の評価

The use of murine models to mimic human kidney disease is becoming increasingly common. Our research is focused on the assessment of glomerular function ...

An Efficient Sieving Method to Isolate Intact Glomeruli from Adult Rat Kidney

ラット腎臓からそのまま糸球体を分離する効率的なふるい分け法

Preservation of glomerular structure and function is pivotal in the prevention of glomerulonephritis, a category of kidney disease characterized by ...

A Rat Carotid Artery Pressure-Controlled Segmental Balloon Injury with Periadventitial Therapeutic Application

過期治療アプリケーションを用いてラット頸動脈圧制御区分バルーン損傷

Cardiovascular disease remains the leading cause of death and disability worldwide, in part due to atherosclerosis. Atherosclerotic plaque narrows the ...