Name: a contemporary warming/restraining device for efficient tail vein injections in a murine fungal sepsis model
Uploaded: 2020-11-06T15:00:00
Duration: 6 min 2 s
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इस काम को एलएसयूएचएससी फाउंडेशन (पीएलएफ) द्वारा समर्थित किया गया था, और राष्ट्रीय स्वास्थ्य संस्थानों के राष्ट्रीय सामान्य चिकित्सा विज्ञान संस्थान से U54 GM104940 द्वारा भाग में, जो लुइसियाना नैदानिक और ट्रांसलेशनल साइंस सेंटर को धन देता है।

लेखकों के पास खुलासा करने के लिए कुछ नहीं है ।

कृंतक से जुड़े पशु मॉडल का उपयोग जैव चिकित्सा अनुसंधान का एक प्रधान रहा है। कई inbred और outbred उपभेदों, साथ ही आनुवंशिक रूप से संशोधित लाइनों, उपलब्ध है और नियमित रूप से दुनिया भर में प्रयोगशालाओं में इस्तेमाल कर रहे हैं । पूंछ नस इंजेक्शन कृंतक मॉडल में आवश्यक तरीकों में से एक है जिसमें प्रयोगात्मक एजेंटों के नसों (i.v.) प्रशासन की आवश्यकता होती है। आम तौर पर, जीवी इंजेक्शन के प्रशासन के अन्य मार्गों जैसे स्थानीय ऊतकों और पाचन तंत्र को दरकिनार करके उच्च अवशोषण दर और सांद्रता या गैर-शारीरिकपीएच1, 2,3,4के समाधानों के लिए उच्च सहिष्णुता जैसे प्रमुख फायदे होते हैं। अन्य व्यवहार्य इव मार्गों (उदाहरण के लिए, सैफेनस नसें, रेट्रो-ऑर्बिटल वेनस साइनस), पूंछ की नसें कृंतक2,3,5,6में सबसे सुरक्षित और सबसे आसानी से सुलभ रक्त वाहिका मानी जाती हैं। इसलिए, संक्रामक रोग मॉडल 7 , 8 ,9,जैविक सामग्री का प्रत्यारोपण10,11,प्रीक्लिनिकल चिकित्सा विज्ञान 12,13और विषविज्ञान विश्लेषण14,15सहित कृंतक मॉडलों की एक सरणी में पूंछ नस इंजेक्शन को व्यापक रूप सेनियोजितकिया गया है।
स्थिरता और डोजिंग की सटीकता सफल पूंछ नस इंजेक्शन में एक महत्वपूर्ण आवश्यकता है। हैरानी की बात यह है कि साहित्य में पूंछ के नस के इंजेक्शन का मात्रात्मक और गुणात्मक मूल्यांकन अक्सर गलत इंजेक्शन16,17को फंसाता है । एक अध्ययन में बताया गया है कि प्रशिक्षित इंजेक्टरों द्वारा किए गए तीस इंजेक्शनों में से बारह ने18पूंछ के भीतर इंजेक्शन की 10% से अधिक मात्रा में छोड़ दिया । इसके अलावा, प्रक्रिया के दौरान पूंछ नस इंजेक्शन प्राप्त करने वाले जानवर की सुरक्षा और आराम एक प्राथमिक चिंता का विषय होना चाहिए। अनुचित संयम चोटों और तनाव से संबंधित विकृतियों (जैसे, वजन घटाने, बिगड़ा प्रतिरक्षा प्रतिक्रियाओं) की एक श्रृंखला है कि नमूना गुणवत्ता19,20में पर्याप्त चर शुरू कर सकता है के लिए नेतृत्व कर सकते हैं । इन त्रुटियों से डेटा में परिवर्तनशीलता और खराब प्रजनन क्षमता हो सकती है, इस प्रकार अध्ययन परिणामों को नकारात्मक रूप से प्रभावित किया जा सकता है।
पोत के छोटे व्यास के कारण पूंछ नस इंजेक्शन का प्रदर्शन करते समय जानवर में संवहनी फैलाव का प्रेरण अक्सर आवश्यक होता है, चूहों में 300 माइक्रोन होने का अनुमानहै 21। वासोडिलेशन वेनस ल्यूमेन के भीतर इष्टतम सुई-नस संरेखण प्राप्त करने में पूंछ की नसों और एड्स की दृश्यता को बढ़ाता है। प्रयोगशालाओं द्वारा विभिन्न प्रकार के तरीकों की सूचना दी गई है जैसे कि पूंछ को गर्म पानी में डुबोना22,गर्म कपड़े, दीपक, या हेयर ड्रायर23, 24का उपयोग करके पूंछ पर गर्मी लगाना, या जानवर को गर्म वातावरण में रखना, एक हीटिंग पैड, इनक्यूबेटर, या बॉक्स का उपयोग करके इन गर्मी स्रोतों में से एक के साथ संयुक्त25। उपकरणों को या तो विशिष्ट उद्देश्यों के लिए स्वयं बनाया जा सकता है या वाणिज्यिक आपूर्तिकर्ताओं से उपलब्ध हो सकता है। हालांकि, कई थर्मोरेगुलेटरी क्षमताओं की कमी है और यदि कोई हो, तो डिवाइस का तापमान खराब रखा जाता है और अक्सर कमरे के तापमान में भिन्नता के अधीन होता है। इसी प्रकार, पूंछ की नस के इंजेक्शन के लिए निरोधक उपकरण का उपयोग आवश्यक है क्योंकि संज्ञाहरण के उपयोग की सिफारिश नहीं की जाती है26,27. प्रयोगशाला-विशिष्ट या वाणिज्यिक निरोधक उपकरणों के कई प्रकार विकसित किए गए हैं। आमतौर पर, जानवर को डिस्पोजेबल 50 मिलीलीटर शंकु नली4,स्लॉटेड प्लेक्सीग्लास दीवारों, एक सुरंग, या शंकु28में रखा जाता है, जिनमें से सभी जानवर के आंदोलनों को प्रतिबंधित करते हुए पूंछ के पर्याप्त जोखिम की अनुमति देते हैं। हालांकि, अधिकांश निरोधक सामग्रियों की कठोरता के कारण आकार सीमाएं होती हैं। इसके अलावा, व्यावहारिक और परिष्कृत डिजाइनों के बावजूद आधुनिक उच्च जटिलता उपकरण, जानवरों के बड़े समूहों से जुड़े इंजेक्शन के लिए व्यवहार्य प्रतीत नहीं होतेहैं 22।
रक्तधारा संक्रमण और संबद्ध सेप्सिस के माउस मॉडल इस तकनीक के उपयोग की आवश्यकता स्थितियों का एक प्रमुख उदाहरण हैं। गंभीर नैदानिक सेप्सिस के सभी माइक्रोबियल एटियोलॉजी में, फंगल सेप्सिस अक्सर एंटीफंगल थेरेपी29के बावजूद >40% की मृत्यु दर के साथ एक घातक स्थिति होती है। वास्तव में, कैंडिडा एल्बिकान द्वारा संक्रमण को अस्पताल द्वारा अधिग्रहीत रक्तप्रवाह संक्रमण (कैंडिडेमिया)30, 31का चौथा प्रमुख कारण बताया गया है। इंट्रा-पेट कैंडिडियासिस में, गैस्ट्रोइंटेस्टाइनल ट्रैक्ट में सूक्ष्मजीव रक्त के माध्यम से प्रसारित हो सकते हैं और पॉलीमाइक्रोबियल सेप्सिस का कारण बन सकते हैं और इससे भी अधिक मृत्यु दर32,33,34। चूंकि अधिकांश नोसोकोमियल कैंडिमिया के मामले दूषित केंद्रीय रेखा कैथेटर या इंडवेलिंग मेडिकल डिवाइस35,36से निकलते हैं , यानी पूंछ के नस के इंजेक्शन से सी एल्बिकान के साथ टीका लगाने से मानव सेप्सिस विकास को बारीकी से प्रतिबिंबित किया जा सकता है और हेमेटोजेनस द्वारा प्रसारित कैंडिडियासिस 37,38के माउस मॉडल में एक मुख्य विधि रही है। इस मॉडल में, दिनों में होने वाली मृत्यु दरको सी एल्बिकान यानी40,41को समायोजित करके बढ़ाया या छोटा किया जा सकता है।
हाल ही में, हमारी प्रयोगशाला ने एक सुविधाजनक प्रणाली में एक समायोज्य निरोधक इकाई के साथ जोड़ा गया थर्मोरेथुलेटेड वार्मिंग इकाई से लैस एक अभिनव उपकरण का उपयोग करके एक इष्टतम सुव्यवस्थित पूंछ नस इंजेक्शन के लिए एक अभिनव प्रोटोकॉल विकसित किया है। यह प्रोटोकॉल शोधकर्ताओं को सटीक और समय पर तरीके से पूंछ नस इंजेक्शन करने की अनुमति देता है, जबकि जानवरों को न्यूनतम संकट के साथ प्रक्रिया के लिए सुरक्षित रूप से वातानुकूलित और संयमित किया जा सकता है। उन्नत वार्मिंग और निरोधक उपकरण के उपयोग के साथ यहां प्रदर्शित तकनीकें, कृंतक मॉडलों को नियोजित करने वाले विभिन्न अनुसंधान क्षेत्रों में एक उपयोगी उपकरण के रूप में काम कर सकती हैं।

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Candida albicans strain DAY185</td>
			<td>Carnegie Melon University</td>
			<td>N/A</td>
			<td>provided by the laboratory of Aaron Mitchell</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Candida albicans strain efg1&#916;/&#916; cph1&#916;/&#916;</td>
			<td>University of Tennessee Health Sciences Center</td>
			<td>N/A</td>
			<td>provided by the laboratory of Glen Palmer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Candida dubliniensis strain W&#252;284</td>
			<td>Trinity College, Dublin, Ireland</td>
			<td>N/A</td>
			<td>provided by the laboratory of Gary Moran</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mice</td>
			<td>Charles River Laboratories</td>
			<td>551NCICr:SW</td>
			<td>Female Swiss Webster; 6-8 weeks old</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mice</td>
			<td>Charles River Laboratories</td>
			<td>556NCIC57BL/6</td>
			<td>Female C57BL/6; 6-8 weeks old</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needles, 27G, &#189;-in</td>
			<td>Becton Dickinson</td>
			<td>305109</td>
			<td>can be substituted from other vendors</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphate buffered saline (PBS)</td>
			<td>GE</td>
			<td>SH30028.02</td>
			<td>can be substituted from other vendors</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rodent warming and restraining device (Mouse a Minute)</td>
			<td>LSU Health</td>
			<td>custom order</td>
			<td>Mouse a Minute is available for custom ordering from LSU Health</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sabouraud dextrose agar (SDA)</td>
			<td>Becton Dickinson</td>
			<td>211584</td>
			<td>can be substituted from other vendors</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringes, 1 mL</td>
			<td>Becton Dickinson</td>
			<td>309659</td>
			<td>can be substituted from other vendors</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypan blue solution</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>T8154</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Yeast peptone dextrose (YPD) broth</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>BP2469</td>
			<td>can be substituted from other vendors</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a contemporary warming/restraining device for efficient tail vein injections in a murine fungal sepsis model

कृंतक मॉडल में, पूंछ नस इंजेक्शन प्रयोगात्मक एजेंटों के नसों में प्रशासन के लिए महत्वपूर्ण तरीके हैं। पूंछ नस इंजेक्शन आम तौर पर पशु के वार्मिंग शामिल करने के लिए vasodilation को बढ़ावा देने, जो रक्त वाहिकाओं की पहचान और पोत lumen में सुई की स्थिति दोनों में एड्स जबकि सुरक्षित रूप से जानवर निरोधक । हालांकि पूंछ नस इंजेक्शन कई प्रोटोकॉल में आम प्रक्रियाएं हैं और यदि सही ढंग से प्रदर्शन किया जाता है तो अत्यधिक तकनीकी नहीं माना जाता है, सटीक और लगातार इंजेक्शन प्रजनन योग्य परिणाम प्राप्त करने और परिवर्तनशीलता को कम करने के लिए महत्वपूर्ण हैं। पूंछ नस इंजेक्शन से पहले वासोडिलेशन को प्रेरित करने के लिए पारंपरिक तरीके आम तौर पर गर्मी के स्रोत जैसे गर्मी दीपक, इलेक्ट्रिकल/रिचार्जेबल हीट पैड, या 37 डिग्री सेल्सियस पर पूर्व-गर्म पानी के उपयोग पर निर्भर करते हैं। एक मानक प्रयोगशाला की स्थापना में आसानी से सुलभ होने के बावजूद, इन उपकरणों जाहिर है गरीब/सीमित थर्मो नियामक क्षमता से पीड़ित हैं । इसी तरह, हालांकि निरोधक उपकरणों के विभिन्न रूपों व्यावसायिक रूप से उपलब्ध हैं, वे ध्यान से इस्तेमाल किया जाना चाहिए जानवरों के लिए आघात से बचने के लिए । वर्तमान विधियों की ये सीमाएं प्रयोगों में अनावश्यक चर बनाती हैं या परिणामस्वरूप प्रयोगों और/या प्रयोगशालाओं के बीच अलग-अलग परिणाम होते हैं ।
इस लेख में, हम एक अभिनव डिवाइस का उपयोग करके एक बेहतर प्रोटोकॉल प्रदर्शित करते हैं जो कुशल सुव्यवस्थित पूंछ नस इंजेक्शन के लिए एक प्रणाली में समायोज्य निरोधक इकाई के साथ एक स्वतंत्र, थर्मलली विनियमित, वार्मिंग डिवाइस को जोड़ती है। उदाहरण हम उपयोग फंगल रक्तप्रवाह संक्रमण का एक नसों में मॉडल है कि सेप्सिस में परिणाम है । वार्मिंग उपकरण एक गर्मी चिंतनशील ऐक्रेलिक बॉक्स एक समायोज्य स्वचालित थर्मोस्टेट के साथ स्थापित करने के लिए एक पूर्व निर्धारित सीमा पर आंतरिक तापमान बनाए रखने के होते हैं । इसी तरह, शंकु निरोधक तंत्र की चौड़ाई और ऊंचाई को विभिन्न कृंतक आकारों को सुरक्षित रूप से समायोजित करने के लिए समायोजित किया जा सकता है। डिवाइस की उन्नत और बहुमुखी विशेषताओं के साथ, यहां दिखाई गई तकनीक कृंतक मॉडलों को शामिल करते हुए अनुसंधान क्षेत्रों की एक श्रृंखला में एक उपयोगी उपकरण बन सकती है जो पूंछ नस इंजेक्शन को नियोजित करती है।

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A Contemporary Warming/Restraining Device for Efficient Tail Vein Injections in a Murine Fungal Sepsis Model

यहां, हम एक विशिष्ट डिजाइन वार्मिंग/निरोधक डिवाइस का उपयोग कर कृंतक पूंछ नस इंजेक्शन के लिए एक प्रभावी और कुशल विधि पेश करते हैं । वासोडिलेशन और निरोधक प्रक्रियाओं की शुरुआत को व्यवस्थित करके, यह प्रोटोकॉल कम से कम संकट वाले जानवरों के बड़े समूहों के सटीक और समय पर नसों के इंजेक्शन की अनुमति देता है।

एक समकालीन वार्मिंग/एक Murine कवक सेप्सिस मॉडल में कुशल पूंछ नस इंजेक्शन के लिए निरोधक उपकरण

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