Name: recurrent escherichia coli urinary tract infection triggered by gardnerella vaginalis bladder exposure in mice
Uploaded: 2020-12-04T15:00:00
Duration: 8 min 53 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Recurrent Escherichia coli Urinary Tract Infection Triggered by Gardnerella vaginalis Bladder Exposure in Mice at JoVE.com

Авторы благодарят Линн Фостер за техническую помощь в экспериментах с инфекцией, Джеймса Фитцпатрика из Центра клеточной визуализации Вашингтонского университета (WUCCI) за доступ к SEM, Скотта Халтгрена для штамма UTI89kanR UPEC и Дэвида Ханстада за критическое чтение рукописи.
Эта работа была поддержана Национальным научным фондом (Graduate Research Fellowship to VPO#DGE - 1143954), Центром исследований инфекционных заболеваний женщин при Медицинской школе Вашингтонского университета (Pilot Research Award to NMG), Американской кардиологической ассоциацией: #12POST12050583 (NMG) и #14POST20020011 (NMG), а также Национальными институтами здравоохранения, NIAID: R01 AI114635 (ALL) и NIDDK: R21 DK092586 (ALL), P50 DK064540-11 (SJH, проект II PI:ALL) и K01 DK110225-01A1 (NMG). Некоторые из исследований на животных были проведены в учреждении, поддерживаемом грантом NCRR C06 RR015502. Центр клеточной визуализации Вашингтонского университета (WUCCI; где проводился SEM) и MSJ были поддержаны Медицинской школой Вашингтонского университета, Детским институтом открытий Вашингтонского университета и Детской больницей Сент-Луиса (CDI-CORE-2015-505), Фондом еврейской больницы Барнса (3770) и Национальным институтом неврологических расстройств и инсульта (NS086741). Спонсоры не играли никакой роли в разработке исследования, сборе и анализе данных, принятии решения о публикации или подготовке рукописи.

Авторы заявляют, что у них нет конфликта интересов, связанного с этим исследованием.

Инфекции мочевыводящих путей (ИМП) налагают значительное бремя на здравоохранение во всем мире, влияя на качество жизни миллионов людей каждый год, особенно женщин1. Уропатогенная кишечная палочка (УПЭК) является наиболее частой причиной ИМП1. Многие пациенты (примерно 20-30%), у которых развивается ИМП, будут испытывать рецидивирующий ИМП (rUTI) в течение 6 месяцев, несмотря на опосредованный антибиотиками клиренс первоначальной инфекции2. К сожалению, целых 5% женщин в пременопаузе страдают от 3 или более rUTI каждый год 3,4. Последовательные эпизоды rUTI могут быть вызваны персистенцией одного и того же штамма УПЭК из индексного случая 5,6,7,8. Данные с человеческих образцов и моделей мышей свидетельствуют о том, что rUTI одного и того же штамма может быть вызван УПЭК, находящимся в покоящихся резервуарах в мочевом пузыре. У человека УПЭК были обнаружены в эпителиальных клетках и биопсии мочевого пузыря пациентов с ИМП 9,10,11,12,13. Исследования на мышах C57BL/6 показали, что некоторые штаммы УПЭК могут создавать покоящиеся внутриклеточные резервуары в мочевом пузыре, обнаруженные флуоресцентной микроскопией и гомогенизацией и культивированием ткани мочевого пузыря, которые сохраняются в течение нескольких месяцев после разрешения бактериурии 14,15,16. Лечение мочевого пузыря агентами, которые индуцируют отшелушивание эпителия мочевого пузыря (уротелия), например, протамин сульфат17 или хитозан18, вызывают появление УПЭК из резервуаров, чтобы вызвать rUTI. Эти данные свидетельствуют о том, что у женщин, имеющих резервуары УПЭК мочевого пузыря от предшествующей инфекции, воздействие мочевого пузыря, которое приводит к мочеполовому отшелушиванию, может вызвать rUTI.
Появляется все больше доказательств того, что микробиота влагалища способствует инфекции мочевыводящихпутей 19,20. Gardnerella vaginalis является частым членом микробиоты влагалища и мочи 21,22,23,24,25,26,27,28,29. Во влагалище наличие высоких уровней G. vaginalis связано с микробным дисбактериозом, известным как бактериальный вагиноз (BV), который поражает ~ 30% женщин 30,31,32. Женщины с БВ подвергаются более высокому риску развития ИМП по сравнению с женщинами с вагинальным сообществом, в котором преобладают Lactobacillus 33,34,35,36,37. На мышиных моделях G. vaginalis вызывает эпителиальное отшелушивание как во влагалище38, так и в мочевом пузыре39. У мышей C57BL/6, имеющих резервуары мочевого пузыря UPEC, два последовательных воздействия G. vaginalis на мочевой пузырь, но не на PBS, приводят к повторному появлению UPEC из резервуаров, чтобы вызвать UPEC rUTI. О появлении титров УПЭК свидетельствует появление титров УПЭК в моче у мышей, у которых ранее разрешилась бактериурия УПЭК, и последующее снижение гомогенатных титров мочевого пузыря УПЭК при жертвоприношении по сравнению с контрольными животными, подвергшимися воздействию ПБС39. Интересно, что нет длительной колонизации G. vaginalis в мочевом пузыре. В подавляющем большинстве случаев двух коротких воздействий, каждое с менее чем 12 (ч) жизнеспособного G. vaginalis в моче, достаточно, чтобы вызвать уротелиальное отшелушивание и способствовать rUTI.
Этот протокол описывает мышиную модель rUTI, вызванную UPEC, находящуюся во внутриклеточных резервуарах мочевого пузыря, используя прививку мочевого пузыря G. vaginalis для запуска рецидива. Прогресс, достигнутый этой моделью, заключается в том, что G. vaginalis является клинически значимым биологическим триггером rUTI по сравнению с ранее используемыми химическими агентами. Кроме того, относительно кратковременная выживаемость G. vaginalis в мочевыводящих путях мыши позволяет исследовать влияние преходящих микробных воздействий на уротелий, которое может произойти после сексуальной активности. В дополнение к описанию модели rUTI, этот протокол также описывает методы цитологии мочи и фиксации мочевого пузыря in situ и визуализации уротелия с помощью сканирующей электронной микроскопии (SEM).
Этот протокол G. vaginalis-индуцированного рецидивирующего UPEC UTI использует штамм UPEC UTI89 с кассетой с резистентностью к канамицину (UTI89kanR)40. Не все тестируемые штаммы УПЭК смогли сформировать внутриклеточные бактериальные сообщества на стадии острой инфекции у мышей41 и пока неизвестно, обладают ли все штаммы УПЭК способностью образовывать латентные внутриклеточные резервуары. Формирование коллектора должно быть подтверждено до использования других штаммов УПЭК в модели. Этот протокол использует спонтанный стрептомицин-резистентный изолят G. vaginalis , JCP8151BSmR38. Индукция rUTI С помощью JCP8151BSmR требует двух последовательных прививок G. vaginalis , проводимых либо через 12 ч, либо через 7 дней (d) с интерваломв 39. Независимо от того, вызывают ли другие штаммы G. vaginalis отшелушивание и / или UPEC rUTI, еще предстоит определить с помощью этой модели. Важно использовать штаммы UPEC и G. vaginalis с известной устойчивостью к антибиотикам (такие как канамицин или спектиномицин для UPEC и стрептомицин для G. vaginalis), поскольку антибиотики могут быть добавлены к агаровым пластинам для предотвращения роста эндогенной микробиоты мыши, которая в противном случае могла бы помешать перечислению колониеобразующих единиц (КОЕ) для мониторинга инфекции. Это особенно важно для культивирования образцов мочи, потому что моча мыши часто содержит другие бактерии, которые могут разрастаться на культуральных пластинах без антибиотиков. Происхождение этих эндогенных бактерий в моче мышей неизвестно, но, вероятно, отражает периуретральные и урогенитальные бактерии, обнаруженные во время сбора мочи.
G. vaginalis является факультативной анаэробной бактерией и, следовательно, этот протокол описывает выращивание G. vaginalis JCP8151BSmR в анаэробной камере. Если анаэробная камера недоступна, могут быть использованы другие методы поддержания анаэробных условий роста (например, мешочек GasPak в герметичном контейнере). В качестве альтернативы, некоторые штаммы G. vaginalis (включая JCP8151BSmR) будут расти в стандартном инкубаторе тканевых культур (5% CO2). Точно так же, как использование штаммов G. vaginalis , отличных от JCP8151BSmR , требует тестирования для обеспечения того, чтобы бактерии вели себя аналогично в этой модели, изменение условий роста требует эмпирического определения идеальных длительностей для культуры (на пластинах и в жидкости) и эквивалентов оптической плотности (OD) 600 для достижения желаемых жизнеспособных концентраций инокулята. Более того, неизвестно, влияют ли условия роста на патобиологию G. vaginalis.
Наконец, при рассмотрении вопроса о том, следует ли использовать эту модель, исследователи должны знать, что для нее может потребоваться большее количество животных в группе, чем для типичных моделей мышей с ИМП. Отчасти это связано с тем, что индукция rUTI требует, чтобы мыши разрешили бактериурию UPEC, вызванную первоначальной инфекцией мочевого пузыря. Таким образом, любая мышь, которая не может очистить бактериурию (фенотип, обычно указывающий на продолжающуюся почечную инфекцию), не включается в фазу rUTI протокола. На количество мышей, необходимых для питания этих исследований, также влияет скорость «спонтанного» появления УПЭК в моче (в среднем 12-14%). Наконец, различные штаммы мышей имеют разную склонность к развитию хронической бактериурии по сравнению с внутриклеточным образованием резервуаров42,43. При использовании в этой модели штаммов мышей, отличных от C57BL/6, необходимо подтвердить, что у животных развиваются покоящиеся внутриклеточные резервуары УПЭК.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>30G x 1/2 needles</td>
			<td>BD</td>
			<td>305106</td>
			<td>for catheters</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>5 1/2&#34; straight forcep hemostat</td>
			<td>McKesson</td>
			<td>487377</td>
			<td>in situ bladder fixation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ACE 600 Sputter coater</td>
			<td>Leica</td>
			<td></td>
			<td>SEM sample processing</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>aluminum SEM stub</td>
			<td>Ted Pella</td>
			<td>16111</td>
			<td>SEM sample processing</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Calcium chloride</td>
			<td>EMS</td>
			<td>12340</td>
			<td>in situ bladder fixation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>conductive carbon adhesive tab&#160;</td>
			<td>Ted Pella</td>
			<td>16084-1</td>
			<td>SEM sample processing</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Conductive silver paint</td>
			<td>Ted Pella</td>
			<td>16034</td>
			<td>SEM sample processing</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CPD 300 Critical Point Drier</td>
			<td>Leica</td>
			<td></td>
			<td>SEM sample processing</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cytofunnel metal clip</td>
			<td>Simport</td>
			<td>M964B</td>
			<td>cytospun urinalysis</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol</td>
			<td>EMS</td>
			<td>15050</td>
			<td>SEM sample processing</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glucose&#160;</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>G7528</td>
			<td>for NYCIII G. vaginalis growth media</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>glutaraldehyde</td>
			<td>EMS</td>
			<td>16320</td>
			<td>in situ bladder fixation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hema 3 staining kit</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>23123869</td>
			<td>cytospun urinalysis</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HEPES</td>
			<td>Cellgro&#160;</td>
			<td>25-060-Cl</td>
			<td>for NYCIII G. vaginalis growth media</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>iridium</td>
			<td>Ted Pella</td>
			<td>91120</td>
			<td>SEM sample processing</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>isofluorane</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>mouse anaesthesia</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>kanamycin</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>11815024</td>
			<td>add to UPEC LB selective plates (50 ug/mL)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Luria-Bertani agar</td>
			<td>BD</td>
			<td>DF0445174</td>
			<td>UPEC growth plates</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Luria-Bertani broth</td>
			<td>BD</td>
			<td>DF0446173</td>
			<td>UPEC growth media</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Merlin FE-SEM</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td></td>
			<td>scanning electron microscope</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Milli-Q Water Purifier</td>
			<td>Millipore</td>
			<td>IQ-7000</td>
			<td>SEM sample processing</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaCl&#160;</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>S3014</td>
			<td>for NYCIII G. vaginalis growth media</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Olympus Vanox AHBT3 microscope</td>
			<td>Olympus</td>
			<td></td>
			<td>cytospun urinalysis</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>osmium tetroxide</td>
			<td>EMS</td>
			<td>19170</td>
			<td>SEM sample processing</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>paraformaldehyde</td>
			<td>EMS</td>
			<td>15710</td>
			<td>in situ bladder fixation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>polyethylene tubing</td>
			<td>Intramedic</td>
			<td>427401</td>
			<td>for catheters</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Proteose Peptone #3&#160;</td>
			<td>Fisher&#160;</td>
			<td>DF-122-17-4</td>
			<td>for NYCIII G. vaginalis growth media</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PTFE coated double edge razor blade</td>
			<td>EMS</td>
			<td>72000</td>
			<td>cutting bladders for SEM</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Shandon Cytocentrifuge</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>A78300002</td>
			<td>cytospun urinalysis</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Shandon cytofunnel filter</td>
			<td>Simport</td>
			<td>M965FWDV</td>
			<td>cytospun urinalysis</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Shandon Double cytofunnel</td>
			<td>Simport</td>
			<td>M964-1D</td>
			<td>cytospun urinalysis</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Shandon double cytoslides (coated)</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>5991055</td>
			<td>cytospun urinalysis</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>sodium cacodylate trihydrate</td>
			<td>EMS</td>
			<td>12310</td>
			<td>in situ bladder fixation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>spectrophotometer</td>
			<td>BioChrom</td>
			<td>80-3000-45</td>
			<td>measuring bacterial OD600</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>streptomycin</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>11860038</td>
			<td>add to G. vaginalis NYCIII selective plates (1 mg/mL)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>tuberculin slip tip syringe</td>
			<td>BD</td>
			<td>309659</td>
			<td>for catheters</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Yeast Extract&#160;</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>DF0127-17-9</td>
			<td>for NYCIII G. vaginalis growth media</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

recurrent escherichia coli urinary tract infection triggered by gardnerella vaginalis bladder exposure in mice

Рецидивирующие инфекции мочевыводящих путей (rUTI), вызванные уропатогенной кишечной палочкой (UPEC ), являются распространенными и дорогостоящими. Предыдущие статьи, описывающие модели ИМП у самцов и самок мышей, иллюстрируют процедуры бактериальной инокуляции и перечисления в моче и тканях. Во время первоначальной инфекции мочевого пузыря у мышей C57BL/6 УПЭК устанавливает латентные резервуары внутри эпителиальных клеток мочевого пузыря, которые сохраняются после клиренса бактериурии УПЭК. Эта модель основана на этих исследованиях для изучения rUTI, вызванного появлением UPEC из латентных резервуаров мочевого пузыря. Урогенитальная бактерия Gardnerella vaginalis используется в качестве триггера rUTI в этой модели, потому что она часто присутствует в урогенитальных путях женщин, особенно в контексте дисбактериоза влагалища, который был связан с ИМП. Кроме того, также описан метод фиксации мочевого пузыря in situ с последующим сканирующей электронной микроскопией (SEM) анализа ткани мочевого пузыря с потенциальным применением к другим исследованиям с участием мочевого пузыря.

После инокуляции титры УПЭК обнаруживаются в моче (рисунок 2В). Неспособность разложить образцы мочи на селективных средах, содержащих канамицин, вероятно, приведет к чрезмерному росту эндогенной микробиоты мыши, загрязняющей мочу. Уровень бактериурии УПЭК, вероятно, будет высоким на 1-й день и может увеличиться в течение первой недели, прежде чем снизиться в более поздние моменты времени (рисунок 2C). Примерно у 65-80% мышей не будет обнаруживаемого УПЭК в моче на 28 dpi (рисунок 2C, зеленый круг). Эти мыши могут быть использованы на последующих этапах модели. Мыши, которые остаются бактериурными (рисунок 2C, красный эллипс), должны быть исключены из эксперимента.
Два последовательных воздействия G. vaginalis в 12 ч (рисунок 3A) или на расстоянии 1 нед друг от друга (рисунок 3B) приводят к появлению UPEC из внутриклеточных резервуаров, вызывающих рецидивирующую бактериурию. Как уровень бактериурии UPEC (тест Манна-Уитни), так и доля мышей, демонстрирующих UPEC rUTI (точный тест Фишера), значительно выше у мышей, подвергшихся воздействию G. vaginalis , по сравнению с контрольной группой PBS. Цитологический анализ мочи обнаруживает ПМН в моче мышей, подвергшихся воздействию G. vaginalis, у которых наблюдалось появление УПЭК (рисунок 3C). В модели с двумя экспозициями, данными на расстоянии 1 недели друг от друга, титры UPEC в ткани мочевого пузыря ниже у мышей, подвергшихся воздействию G. vaginalis, по сравнению с PBS (рисунок 3D), предположительно из-за появления UPEC из резервуаров и последующего клиренса.
Визуализация in situ-фиксированной ткани мочевого пузыря с помощью SEM показывает большие поверхностные зонтичные уротелиальные клетки, выстилающие поверхность мочевого пузыря у контрольных мышей, подвергшихся воздействию только PBS (рисунок 4A). Уротелиальное отшелушивание проявляется потерей поверхностных зонтичных клеток, выявляющих меньшие базовые переходные эпителиальные клетки у мышей, подвергшихся воздействию G. vaginalis (рисунок 4B). В начале после инокуляции УПЭК при создании внутриклеточных резервуаров УПЭК видны на уротелии и нити наружу из отшелушивающихся клеток (рисунок 4С).

<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/61967/61967fig02.jpg"> Рисунок 2. Мониторинг титров УПЭК в моче во время фазы 1 (образование резервуара). (A) Схема обшивки колониеобразующих единиц (КОЕ). (B) Репрезентативное изображение титров УПЭК в моче на LB+канамицине. Черные круги указывают на пятна образца мочи, которые должны быть подсчитаны для расчета КОЕ/мл. (C) Временное течение бактериурии УПЭК у мышей C57BL/6. Каждая линия представляет собой индивидуальную мышь, отслеживающую титры мочи УПЭК с течением времени. Пунктирная линия указывает на предел обнаружения (1000 КОЕ/мл). Красный эллипс указывает на четырех мышей (из 20), которые не смогли разрешить бактериурию UPEC и, следовательно, не будут использоваться для модели RUTI, индуцированной G. vaginalis. И наоборот, зеленый круг указывает на мышей, которые разрешили бактериурию УПЭК и перешли к последующим фазам. D) таблица данных, используемых для построения графика в панели C. Желтый, обнаруживаемый КОЕ; зеленый, без КОЕ. (E) Рандомизация мышей в группы воздействия на основе точки времени, когда КОЕ УПЭК больше не обнаруживались в моче («День разрешен»). Номера мыши в левом столбце панели D совпадают с номерами мыши, приведенными на панели E. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/61967/61967fig02large.jpg" target="_blank">Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этого рисунка.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/61967/61967fig03.jpg"> Рисунок 3. G. vaginalis вызывает УПЭК рУТИ. Титры УПЭК в моче после двух последовательных воздействий на мочевыводящие пути PBS (круги) или G. vaginalis (Gvag; квадраты) на расстоянии 12 ч (A) или 1 нед (B) друг от друга. Каждый символ представляет собой отдельную мышь. Построен график самый высокий УПК КОЕ/мл, обнаруженный у каждой мыши между 1-3 d после второго воздействия. Мыши без обнаруживаемой бактериурии строятся на пределе обнаружения (пунктирная линия). (C) Цитологический анализ мочи, показывающий УПЭК (наконечники стрел) и полиморфноядерные (ПМН) клетки (стрелки). Шкала бар = 20 мкм. (D) Титры УПЭК в тканях мочевого пузыря, собранные через 3 d после двух последовательных воздействий на мочевыводящие пути с интервалом 1 нед. Каждый символ представляет собой отдельную мышь, а нули наносятся на пределе обнаружения (пунктирная линия). В A, B и D квадраты находятся в первом и третьем квартиле с обозначенной медианой и усами от min до max. Тесты Манна-Уитни U * P < 0,05; ** P < 0,01; P < 0,0001. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/61967/61967fig03large.jpg" target="_blank">Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этого рисунка.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/61967/61967fig04.jpg"> Рисунок 4. SEM анализ мочевых пузырей, зафиксированных in situ. Мочевой пузырь был собран у мышей через 3 ч после двух воздействий (с интервалом 12 ч) на PBS (A) или G. vaginalis (C). Пунктирные линии иллюстрируют одну эпителиальную клетку мочевыводящих путей, которая меньше в мочевом пузыре, подвергающемся воздействию G. vaginalis, потому что большие поверхностные клетки отшелушились, раскрывая основной переходный эпителий. (B) Мочевой пузырь собирали через 6 ч после первоначальной инокуляции УПЭК, во время фазы 1 модели, показывая мочеполовое отшелушивание и внеклеточную УПЭК. (D) Пример нерастворимых жировых капель, присутствующих на поверхности мочевого пузыря. Шкала шкалы составляет 20 мкм на основных изображениях и 2 мкм на вставке. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/61967/61967fig04large.jpg" target="_blank">Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этого рисунка.</a>

Watch this Scientific Journal Video about Recurrent Escherichia coli Urinary Tract Infection Triggered by Gardnerella vaginalis Bladder Exposure in Mice at JoVE.com

Recurrent Escherichia coli Urinary Tract Infection Triggered by Gardnerella vaginalis Bladder Exposure in Mice

Показана мышиная модель уропатогенной трансуретральной инокуляции E. coli (UPEC) для установления скрытых внутриклеточных резервуаров мочевого пузыря и последующего воздействия G. vaginalis на мочевой пузырь с целью индуцирования рецидивирующей ИМП УПЭК. Также продемонстрировано перечисление бактерий, цитология мочи и фиксация и обработка мочевого пузыря in situ для сканирующей электронной микроскопии.

Рецидивирующая инфекция мочевыводящих путей Escherichia coli , вызванная воздействием Gardnerella vaginalis на мочевой пузырь у мышей

Recurrent urinary tract infections (rUTI) caused by uropathogenic Escherichia coli (UPEC) are common and costly. Previous articles describing models of ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Recurrent Escherichia coli Urinary Tract Infection Triggered by Gardnerella vaginalis Bladder Exposure in Mice

Transurethral Induction of Mouse Urinary Tract Infection

Трансуретральная Индукция Мышь инфекции мочевыводящих путей

Uropathogenic bacterial strains of interest are grown on agar. Generally, uropathogenic E. coli (UPEC) and other strains can be grown overnight on ...

Following Cell-fate in E. coli After Infection by Phage Lambda

Following Cell-fate in E. coli After Infection by Phage Lambda

После Cell-судьба<em&gt; E. палочки</em&gt; После заражения фагом лямбда

The system comprising bacteriophage (phage) lambda and the bacterium E. coli has long served as a paradigm for cell-fate determination1,2. Following the ...

Recurrent Herpetic Stromal Keratitis in Mice, a Model for Studying Human HSK

Рецидивирующей герпетической Стромальные Кератит у мышей, модель для изучения человека HSK

Herpetic eye disease, termed herpetic stromal keratitis (HSK), is a potentially blinding infection of the cornea that results in over 300,000 clinical ...

Non-Invasive Model of Neuropathogenic Escherichia coli Infection in the Neonatal Rat

Non-Invasive Model of Neuropathogenic Escherichia coli Infection in the Neonatal Rat

Неинвазивного Модель Neuropathogenic<em&gt; Кишечная палочка</em&gt; Инфекция в новорожденной крысы

Investigation of the interactions between animal host and bacterial pathogen is only meaningful if the infection model employed replicates the principal ...

One-step Negative Chromatographic Purification of Helicobacter pylori Neutrophil-activating Protein Overexpressed in Escherichia coli in Batch Mode

One-step Negative Chromatographic Purification of Helicobacter pylori Neutrophil-activating Protein Overexpressed in Escherichia coli in Batch Mode

Один шаг Отрицательный хроматографической очистки<em&gt; Хеликобактерной</em&gt; Активирующий нейтрофилы белок избыточно экспрессируется в<em&gt; Кишечная палочка</em&gt; В пакетном режиме

Helicobacter pylori neutrophil-activating protein (HP-NAP) is a major virulence factor of Helicobacter pylori (H. pylori). It plays a critical role in H. ...

Urinary Tract Infection in a Small Animal Model: Transurethral Catheterization of Male and Female Mice

Инфекции мочевыводящих путей в небольшой животной модели: трансуретральная катетеризация мужские и женские мышей

Urinary tract infections (UTI) are extremely common worldwide, incurring significant morbidity and healthcare-associated expenses. Small animal models, ...

Detection of Enterohemorrhagic Escherichia Coli Colonization in Murine Host by Non-invasive In Vivo Bioluminescence System

Detection of Enterohemorrhagic Escherichia Coli Colonization in Murine Host by Non-invasive In Vivo Bioluminescence System

Обнаружение энтерогеморрагические Escherichia Coli колонизации в мышиных принимающей системой неинвазивные в Vivo биолюминесценции

Enterohemorrhagic E. coli (EHEC) O157:H7, which is a foodborne pathogen that causesdiarrhea, hemorrhagic colitis (HS), and hemolytic uremic syndrome ...

Overexpression and Purification of Human Cis-prenyltransferase in Escherichia coli

Overexpression and Purification of Human Cis-prenyltransferase in Escherichia coli

Сверхэкспрессия и очищение человека<em&gt; Cis</em&gt; -пренилтрансфераза в<em&gt; Escherichia coli</em

Prenyltransferases (PT) are a group of enzymes that catalyze chain elongation of allylic diphosphate using isopentenyl diphosphate (IPP) via multiple ...

A Facile Protocol to Generate Site-Specifically Acetylated Proteins in Escherichia Coli

A Facile Protocol to Generate Site-Specifically Acetylated Proteins in Escherichia Coli

Легковесные протокол для создания Site-Specifically ацетилированный белков в Escherichia Coli

Post-translational modifications that occur at specific positions of proteins have been shown to play important roles in a variety of cellular processes. ...

Isolation of Single Intracellular Bacterial Communities Generated from a Murine Model of Urinary Tract Infection for Downstream Single-cell Analysis

Изоляция одной внутриклеточных бактериальных сообществ, генерируется из мышиных модели инфекции мочевыводящих путей анализа течению одноклеточного

In this article, we outline a procedure used to isolate individual intracellular bacterial communities from a mouse that has been experimentally infected ...