Name: blood circuit reconstruction in an abdominal mouse heart transplantation model
Uploaded: 2021-06-03T13:00:00
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声優としての彼女の助け、ビデオ編集の助けを借りて建華ペン博士、そしてアニカ・クッカン博士のコメントとサポートに感謝します。この研究は、ドイツ研究財団(DFG)が国際的な協力(HO2581/4-1からAH)、中国国立科学財団(NSFC;FJ #81760291)によって支援されました。

すべての動物実験は、科学的目的のために使用される動物の保護に関する欧州議会の指令2010/63/EUのガイドラインに従って行われました(倫理委員会承認、#G1071/09)。
注: 予備準備、麻酔、術後のケアおよびモニタリング作業は、従来の外科方法1、2、4で行われるのと同じです。BALB/cマウスは心臓ドナー?...

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	<li>Corry, R., Winn, H., Russell, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Primarily+vascularized+allografts+of+heart+in+mice.">Primarily vascularized allografts of heart in mice.</a> Transplantation. 16, 343-350 (1973).</li><li>Habertheuer, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Donor+tissue-specific+exosome+profiling+enables+noninvasive+monitoring+of+acute+rejection+in+mouse+allogeneic+heart+transplantation.">Donor tissue-specific exosome profiling enables noninvasive monitoring of acute rejection in mouse allogeneic heart transplantation.</a> Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 155 (6), 2479-2489 (2018).</li><li>Plenter, R. J., Zamora, M. R., Grazia, T. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Four+decades+of+vascularized+heterotopic+cardiac+transplantation+in+the+mouse.">Four decades of vascularized heterotopic cardiac transplantation in the mouse.</a> Journal of Investigative Surgery. 26, 223-228 (2013).</li><li>Wu, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Novel+technique+for+blood+circuit+reconstruction+in+mouse+heart+transplantation+model.">Novel technique for blood circuit reconstruction in mouse heart transplantation model.</a> Microsurgery. 26, 594-598 (2006).</li><li>Alamran, F. G., Shahkolahi, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Total+arterial+anastomosis+heterotopic+heart+transplantation+model.">Total arterial anastomosis heterotopic heart transplantation model.</a> Transplantation Proceedings. 45, 625-629 (2013).</li><li>Melanie, L., et al., Moffatt-Bruce, S. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Potential+of+Heterotopic+Cardiac+Transplantation+in+Mice+as+a+Model+for+Elucidating+Mechanisms+of+Graft+Rejection.">Potential of Heterotopic Cardiac Transplantation in Mice as a Model for Elucidating Mechanisms of Graft Rejection.</a> Cardiac Transplantation. , (2012).</li><li>Westhofen, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+heterotopic+heart+transplantation+in+mice+as+a+small+animal+model+to+study+mechanical+unloading+-+Establishment+of+the+procedure,+perioperative+management+and+postoperative+scoring.">The heterotopic heart transplantation in mice as a small animal model to study mechanical unloading - Establishment of the procedure, perioperative management and postoperative scoring.</a> PLoS One. 14 (4), 0214513 (2019).</li><li>Wang, C., Wang, Z., Allen, R., Bishop, G. A., Sharland, A. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Modified+Method+for+Heterotopic+Mouse+Heart+Transplantion.">A Modified Method for Heterotopic Mouse Heart Transplantion.</a> Journal of Visualized Experiments. (88), e51423 (2014).</li><li>Mokbel, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Histidine-Tryptophan-Ketoglutarate+Solution+for+Donor+Heart+Preservation+Is+Safe+for+Transplantation.">Histidine-Tryptophan-Ketoglutarate Solution for Donor Heart Preservation Is Safe for Transplantation.</a> Annals of Thoracic Surgery. 109 (3), 763-770 (2020).</li><li>Song, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modified+Suture+Technique+in+a+Mouse+Heart+Transplant+Model.">Modified Suture Technique in a Mouse Heart Transplant Model.</a> Asian Journal of Surgery. 34 (2), 86-91 (2011).</li><li>Martins, P. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessment+of+graft+function+in+rodent+models+of+heart+transplantation.">Assessment of graft function in rodent models of heart transplantation.</a> Microsurgery. 28 (7), 565-570 (2008).</li><li>Wu, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=cold+storage+using+a+new+histidine-tryptophan-ketoglutarate-based+preservation+solution+in+isogeneic+cardiac+mouse+grafts.">cold storage using a new histidine-tryptophan-ketoglutarate-based preservation solution in isogeneic cardiac mouse grafts.</a> European Heart Journal. 32 (4), 509-516 (2011).</li><li>T&#252;rk, T. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reduction+of+chronic+graft+injury+with+a+new+HTK-based+preservation+solution+in+a+murine+heart+transplantation+model.">Reduction of chronic graft injury with a new HTK-based preservation solution in a murine heart transplantation model.</a> Cryobiology. 64 (3), 273-278 (2012).</li></ol>

マウスにおける異所性腹部心臓移植の外科技術は非常に困難であり、これはこのモデルの広範な使用に対する制限を意味する。
従来の技術の欠点の1つは、ドナーの肺動脈(PA)の制限長である。通常は約2mmの長さですが、私たちのモデルで使用されるドナー心臓のIIVCの長さは一般的に約1cmです(図2)。つまり、改変モデルにおいて、IIVC吻合は、手術場?...

マウスにおける異所性腹部心臓移植の外科技術は、移植免疫学1、2、3の研究のための標準的なモデルを表す。しかし、実行することは非常に困難であり、これはこのモデル4、5の広範な使用に対する制限を意味します。
従来のマウス心臓移植(THTx)では、ドナー大動脈およびレシピエント腹部大動脈は、肺動脈がレシピエントの下の静脈6、7、8に吻眼されている間に吻眼される。
この改変マウス心臓移植技術において、ドナー大動脈はレシピエント腹部大動脈に吻合され、ドナーIIVCは、レシピエントの下のカバに吻合される(図2および図3)。

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>30G-needles</td>
			<td>Braun</td>
			<td>456300</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>acepromazine</td>
			<td>CP Pharma</td>
			<td>Tranquisol P</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BALB/c AnNCrl mice</td>
			<td>Charles River. Germany</td>
			<td>no catalog number</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bepanthen eye ointment</td>
			<td>Haus-Apotheke</td>
			<td>PZN 01578675</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bonn Micro Forceps</td>
			<td>FST</td>
			<td>11083-07</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Box for insulation and oxygen supply device</td>
			<td>RUSKINN</td>
			<td>INVIV</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>C57BL/6J&#160; mice</td>
			<td>Charles River. Germany</td>
			<td>no catalog number</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Carprofen</td>
			<td>Zoetis</td>
			<td>Rimadyl 50 mg/ml</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CATHETER-FEP 26G</td>
			<td>TERUMO</td>
			<td>Surflo-W</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Clip Applicator Forceps Style</td>
			<td>FST</td>
			<td>18057-14</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Curved forceps</td>
			<td>WPI</td>
			<td>14114-G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>custodiol/HTK</td>
			<td>Dr. Franz K&#246;hler Chemie</td>
			<td>no catalog numer</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cutasept skin disinfection</td>
			<td>VWR</td>
			<td>BODL980365</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>electrosurgical pen</td>
			<td>Bovie</td>
			<td>CHANGE-A-TIP</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>gauze pads, cotton swabs</td>
			<td>Lohmann-Rauscher</td>
			<td>13353</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heating mat</td>
			<td>THERMO MAT PRO 30W</td>
			<td>HTP-30</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hemostatic sponge</td>
			<td>CuraSpon</td>
			<td>J1276A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>heparine-solution</td>
			<td>Haus-Apotheke</td>
			<td>PZN 03029820</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ice box</td>
			<td>PETZ</td>
			<td>No Catalog Number available</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Inhalation anesthesia device</td>
			<td>GROPPLER</td>
			<td>BKGM 0616</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>insulation and oxygen supply device</td>
			<td>RUSKINN</td>
			<td>INVIV</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>isoflurane</td>
			<td>CP Pharma</td>
			<td>Isofluran CP 1 ml/ml</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ketamine</td>
			<td>Zoetis</td>
			<td>no catalog numer</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>metamizole</td>
			<td>WDT</td>
			<td>no catalog numer</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro scissors</td>
			<td>FST</td>
			<td>15000-00,15000-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro Serrefine ( Clamp ) Angled / 16 mm</td>
			<td>FST</td>
			<td>18055-06</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscope</td>
			<td>Leica</td>
			<td>LEICAMZ6</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscope light</td>
			<td>SCHOTT</td>
			<td>KL2500LED</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Saline solution (NaCl 0.9%)</td>
			<td>Haus-Apotheke</td>
			<td>PZN 06178437</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scissors</td>
			<td>Peha Instruments</td>
			<td>991083/4</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>small Petri dish</td>
			<td>Sarstedt</td>
			<td>833900</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Straight forceps</td>
			<td>WPI</td>
			<td>14113-G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>surgical tape</td>
			<td>BSN</td>
			<td>4120</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Suture Tying Forceps - 10 cm</td>
			<td>FST</td>
			<td>18025-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sutures(10-0)</td>
			<td>Medtronic</td>
			<td>N2540</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sutures(4-0)</td>
			<td>ETHILON</td>
			<td>V4940H</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sutures(7-0)</td>
			<td>ETHILON</td>
			<td>1647H</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe (0.3 mL)</td>
			<td>BD</td>
			<td>324826</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe (1 mL)</td>
			<td>BD</td>
			<td>320801</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>xylazine</td>
			<td>Bayer</td>
			<td>Rompun</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

blood circuit reconstruction in an abdominal mouse heart transplantation model

マウスにおける異所性腹部心臓移植の外科技術は、移植免疫学の研究のための標準的なモデルである。ここでは、異所性腹部心臓移植モデルにおける修飾血液回路再構成のための確立された技術が提示される。この方法では、レシピエントの下の大静脈に対する吻鼻的なドナー心臓の肺動脈の代わりに胸部内の下静脈(IIVC)を使用する。これは、マウスの腹部心臓移植の成功率を促進し、改善しています.

ここでは、これまで研究室で開発され、過去16年間に有用であることが証明されているマウスにおける異所性腹部心臓移植の改変技術が提示される。以前は、静脈からカバ(V-V群)に対する静脈カバの40例の全体的な40例において、従来の肺動脈からカバ(P-V群)の吻合手順4(表1)に比べて、V-V群では20.8±1.3分を要することが報告されていた。 これはP-V群(27.5±1.3分、p<0....

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Blood Circuit Reconstruction in an Abdominal Mouse Heart Transplantation Model

異重症性腹部マウス心臓移植モデルにおける血液回路再建の新しい技術が実証されている。

腹部マウス心臓移植モデルにおける血液回路再建

The surgical technique of heterotopic abdominal heart transplantation in mice is a standard model for research in transplantation immunology. Here, the ...

マウスでの心臓移植は、ここで異性免疫反応を研究するための貴重なモデルであり、マウスにおける異所性腹部心臓移植の新しい外科技術を紹介する。従来のマウス心臓移植では、ドナー大動脈およびレシピエント腹部大動脈は吻受される。肺動脈は、レシピエントの下の静脈に吻眼される。この新しいマウスの心臓移植で。ドナー大動脈はレシピエント腹大動脈に吻眼され、ドナーは胸部内の下静脈がレシピエントの下の静脈に吻当される。実験のデモンストレーションを始めます。イオブルラン吸入および麻酔のためにマウスを箱に入れた後、マウスの重量を量る。マウスの体重に応じて、マウスを麻酔剤にケタミンキシラジンアセプロマシンの腹腔内注射を与える。麻酔が行われた時に操作テーブルの上にマウスを固定し、消毒する。首から下腹部に皮膚を切ります。腹壁の筋肉を切り、内臓を左にそっと取り除きます。次に、下の大静脈を露出する。0.4ミリリットルのヘパリン溶液を下の大静脈にゆっくりと注入し、針を引き出す前に1分間待ちます。針を引き出し、下の大動脈と腹部大動脈の両方をハサミで切り取り、排泄を促進する。U字型の切り抜きを行って胸腔を開きます。心臓、肺、およびすべての胸部血管を完全に露出する。胸部大胸を露出する。内腔の半分を切る。乾性チューブを胸部大胸部の開口部に挿入します。肺静脈を切って灌漑と排水を容易にします。少なくとも2ミリメートルの4度HTK溶液を注入してください。肺静脈流出が完全に明らかになるまで心臓は完全に鼓動を止める。灌漑チューブを引き出し、胸骨を取り外します。胸腺を取り除く。大動脈弓の周りの脂肪を軽く取り除きます。10ゼロ縫合糸で動脈性肺の幹を露出させ、液化する。胸部内の下の静脈に取り付けられた事実と結合組織を分離して、7つの縫合糸を持つ上の静脈を露出させ、結紮の後ろに切断する。大動脈弓の下の心臓の基部の周りに7つのゼロ縫合を作ります。下の大静脈と両方の耳介は、肺動脈の枝と静脈肺血管をリゲートする。大動脈弓を可能な限り遠位にトランセクトしますが、側枝の開口部のない1つの明確なルーメンがあることを確認してください。横隔膜付近の合字および胸部下静脈の下の肺血管。さて、胸から心臓を取り除きます。4度の冷たいHDK溶液に植えられたドナーの心臓を置き、一時的に保存する。60分より長く冷たい虚血時間を延長しないようにしてください。今、私たちは受容体の動作を実証し始めます。初期手術ステップは、麻酔および滅菌を含むドナーマウスに対して以前に示されたものと類似している。腹部の皮膚は横方向に切り取る。腸管解剖後、生理液を用いて腹部の器官を濡れたガーゼで覆う。下の大静脈と腹部大動脈を露出し、周囲の脂肪組織からそれらを解放します。必要に応じて、腎血管の下の側枝血管をリゲートまたは電気焼灼する。脳の上部に右から最初のマイクロ止血鉗子を挿入し、腎血管の下に大間を挿入します。右から脳と大間の2番目のマイクロ止血鉗子を挿入します。2つの止血鉗子の間の吻合のための大大Taおよび静脈の両方のスペースのための1センチメートル以上がある。大大腿部に切開し、上部クランプよりも下のクランプに少し近い。また、小さな穴を作り、マイクロハサミでそれを開くために30G針を使用することができます。心臓を腹腔に入れる。ビジョンの大オルタと反対側の大静脈と小さな濡れたガーゼパッドでそれをカバーしています。ドナー大オルタを受け取る大大ターに適応させ、縫い付け、尾的に始める。結び目を作り、この切開の上部に縫合糸を進めます, 約4〜5ステッチ.次に、心臓を右にひっくり返し、もう一度覆い、尾端に達するまで左側の縫合糸を続けて結び付けます。マイクロハサミを使用して、ドナーの胸部内部の下のカバ内腔と同じ大きさのレシピエントの腹部下静脈の丸い穴を切断する。切開は、計画された大動脈吻合に頭蓋を配置する必要があります。静脈切開を大動脈切開よりも大きくする。ドナーの胸部内部劣大静脈をフラッシュする。ドナー胸部内部の下の大静脈をレシピをレシピを受け取った大静脈に縫い付ける。結び目を結び、切開の上部に達するまで縫合を実行します。5針を使用し、左側の縫合糸を続けます。最後に、尾角に結び目を結び、慎重に締めます。引っ張りすぎないように注意してください。静脈と大動脈吻振りの周りに止血性スポンジの小さな部分を置きます。最初に下部を取り出し、次に上部のマイクロ止血クランプを取り出し、暖かい0.9%の塩化ナトリウムで腹腔をすすきます。止血スポンジを取り除く。移植された心臓の鼓動を観察する。すべてが正しければ、心臓は再び収縮し始めます。腸を腹腔に戻し、4つのゼロ縫合で閉じます。移植されたマウスが回復するための温かい、酸素が豊富な環境を提供します。これまでの研究では、静脈から大静脈までの全40例と、伝統的な肺動脈からカバ吻合法までの40例の比較について報告した。また、静脈からカバ群への血管吻合の動作時間は、従来の肺動脈からカバ群に比べて有意に短かった。マウスにおける異所性腹部心臓移植の外科技術は、移植免疫学の研究のための標準的なモデルを表す。ここで提示される血液回路再建のためのこの新しい技術は、マウスにおける腹部の心臓移植を促進するものである。そして、これは、移植された心臓の温かい虚血と拍動時間を減少させ、このモデルの成功率を向上させると呼ばれる。

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