Name: blood circuit reconstruction in an abdominal mouse heart transplantation model
Uploaded: 2021-06-03T13:00:00
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윤수 박사가 성우, 닥터 젠화 펑(Jianhua Peng) 박사의 도움에 감사를 표하고, 애니카 쿠칸 박사의 의견과 지원에 감사드립니다. 이 작품은 독일 연구 재단 (DFG)이 국제 협력을 촉진하기 위해 부분적으로 지원되었다 (HO2581/4-1 AH에), 중국의 국립 과학 재단 (NSFC; FJ에 #81760291).

모든 동물 실험은 과학적 목적으로 사용되는 동물의 보호에 대한 유럽 의회의 지침 2010/63/EU의 지침에 따라 수행되었습니다 (윤리위원회 승인, #G1071/09).
참고: 예비 제제, 마취, 수술 후 치료 및 모니터링 작업은 전통적인 수술 방법1,2,4에서수행되는 것과 동일합니다. BALB/c 마우스는 심장 기증자와 C57BL/6J를 ?...

<ol>
	<li>Corry, R., Winn, H., Russell, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Primarily+vascularized+allografts+of+heart+in+mice.">Primarily vascularized allografts of heart in mice.</a> Transplantation. 16, 343-350 (1973).</li><li>Habertheuer, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Donor+tissue-specific+exosome+profiling+enables+noninvasive+monitoring+of+acute+rejection+in+mouse+allogeneic+heart+transplantation.">Donor tissue-specific exosome profiling enables noninvasive monitoring of acute rejection in mouse allogeneic heart transplantation.</a> Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 155 (6), 2479-2489 (2018).</li><li>Plenter, R. J., Zamora, M. R., Grazia, T. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Four+decades+of+vascularized+heterotopic+cardiac+transplantation+in+the+mouse.">Four decades of vascularized heterotopic cardiac transplantation in the mouse.</a> Journal of Investigative Surgery. 26, 223-228 (2013).</li><li>Wu, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Novel+technique+for+blood+circuit+reconstruction+in+mouse+heart+transplantation+model.">Novel technique for blood circuit reconstruction in mouse heart transplantation model.</a> Microsurgery. 26, 594-598 (2006).</li><li>Alamran, F. G., Shahkolahi, M. 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N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessment+of+graft+function+in+rodent+models+of+heart+transplantation.">Assessment of graft function in rodent models of heart transplantation.</a> Microsurgery. 28 (7), 565-570 (2008).</li><li>Wu, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=cold+storage+using+a+new+histidine-tryptophan-ketoglutarate-based+preservation+solution+in+isogeneic+cardiac+mouse+grafts.">cold storage using a new histidine-tryptophan-ketoglutarate-based preservation solution in isogeneic cardiac mouse grafts.</a> European Heart Journal. 32 (4), 509-516 (2011).</li><li>T&#252;rk, T. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reduction+of+chronic+graft+injury+with+a+new+HTK-based+preservation+solution+in+a+murine+heart+transplantation+model.">Reduction of chronic graft injury with a new HTK-based preservation solution in a murine heart transplantation model.</a> Cryobiology. 64 (3), 273-278 (2012).</li></ol>

마우스에 있는 이종성 복부 심혼 이식의 외과 기술은 아주 도전적이고 이것은 이 모형의 광범위한 사용에 제한을 연루합니다.
종래기술의 단점 중 하나는 기증자의 폐동맥(PA)의 제한 길이이다. 그것은 일반적으로 약 2 mm 길이의 길이, 반면 우리의 모델에 사용 되는 기증자 심장의 IIVC의 길이는 일반적으로 약 1 cm(도 2). 즉, 변형된 모델에서 IIVC 해부학은 ?...

마우스에서 이성토피복부 심혼 이식의 외과기술은 이식면성1,2,3에대한 연구를 위한 표준 모델을 나타낸다. 그러나, 그것은 수행하는 것은 매우 도전적이며,이 모델4의광범위한 사용에 대한 제한을 연루4,5.
전통적인 마우스 심장 이식 (THTx)에서, 기증자 대동맥및 수령인 복부 대동맥은 폐 동맥이 수신자 열등한 베나 카바6,7,8에마취되는 동안 마취된다.
이러한 수정된 마우스 심장 이식 기법에서, 기증자 대자는 수혜자 복부 대어타에 대해 마취하고 기증자 IIVC는 수신자 열등한 정맥카바(3,4,6)(도 2 및 도 3)에대해 마취된다.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>30G-needles</td>
			<td>Braun</td>
			<td>456300</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>acepromazine</td>
			<td>CP Pharma</td>
			<td>Tranquisol P</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BALB/c AnNCrl mice</td>
			<td>Charles River. Germany</td>
			<td>no catalog number</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bepanthen eye ointment</td>
			<td>Haus-Apotheke</td>
			<td>PZN 01578675</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bonn Micro Forceps</td>
			<td>FST</td>
			<td>11083-07</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Box for insulation and oxygen supply device</td>
			<td>RUSKINN</td>
			<td>INVIV</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>C57BL/6J&#160; mice</td>
			<td>Charles River. Germany</td>
			<td>no catalog number</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Carprofen</td>
			<td>Zoetis</td>
			<td>Rimadyl 50 mg/ml</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CATHETER-FEP 26G</td>
			<td>TERUMO</td>
			<td>Surflo-W</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Clip Applicator Forceps Style</td>
			<td>FST</td>
			<td>18057-14</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Curved forceps</td>
			<td>WPI</td>
			<td>14114-G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>custodiol/HTK</td>
			<td>Dr. Franz K&#246;hler Chemie</td>
			<td>no catalog numer</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cutasept skin disinfection</td>
			<td>VWR</td>
			<td>BODL980365</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>electrosurgical pen</td>
			<td>Bovie</td>
			<td>CHANGE-A-TIP</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>gauze pads, cotton swabs</td>
			<td>Lohmann-Rauscher</td>
			<td>13353</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heating mat</td>
			<td>THERMO MAT PRO 30W</td>
			<td>HTP-30</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hemostatic sponge</td>
			<td>CuraSpon</td>
			<td>J1276A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>heparine-solution</td>
			<td>Haus-Apotheke</td>
			<td>PZN 03029820</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ice box</td>
			<td>PETZ</td>
			<td>No Catalog Number available</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Inhalation anesthesia device</td>
			<td>GROPPLER</td>
			<td>BKGM 0616</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>insulation and oxygen supply device</td>
			<td>RUSKINN</td>
			<td>INVIV</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>isoflurane</td>
			<td>CP Pharma</td>
			<td>Isofluran CP 1 ml/ml</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ketamine</td>
			<td>Zoetis</td>
			<td>no catalog numer</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>metamizole</td>
			<td>WDT</td>
			<td>no catalog numer</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro scissors</td>
			<td>FST</td>
			<td>15000-00,15000-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro Serrefine ( Clamp ) Angled / 16 mm</td>
			<td>FST</td>
			<td>18055-06</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscope</td>
			<td>Leica</td>
			<td>LEICAMZ6</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscope light</td>
			<td>SCHOTT</td>
			<td>KL2500LED</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Saline solution (NaCl 0.9%)</td>
			<td>Haus-Apotheke</td>
			<td>PZN 06178437</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scissors</td>
			<td>Peha Instruments</td>
			<td>991083/4</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>small Petri dish</td>
			<td>Sarstedt</td>
			<td>833900</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Straight forceps</td>
			<td>WPI</td>
			<td>14113-G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>surgical tape</td>
			<td>BSN</td>
			<td>4120</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Suture Tying Forceps - 10 cm</td>
			<td>FST</td>
			<td>18025-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sutures(10-0)</td>
			<td>Medtronic</td>
			<td>N2540</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sutures(4-0)</td>
			<td>ETHILON</td>
			<td>V4940H</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sutures(7-0)</td>
			<td>ETHILON</td>
			<td>1647H</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe (0.3 mL)</td>
			<td>BD</td>
			<td>324826</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe (1 mL)</td>
			<td>BD</td>
			<td>320801</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>xylazine</td>
			<td>Bayer</td>
			<td>Rompun</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

blood circuit reconstruction in an abdominal mouse heart transplantation model

마우스에서 이성애 복부 심장 이식의 외과 기술은 이식 면역학에 있는 연구를 위한 표준 모형입니다. 여기서, 이종성 복부 심장 이식 모델에서 수정된 혈액 회로 재건을 위한 확립된 기술이 제시된다. 이 방법은 기증자 심장의 폐 동맥 대신 열등한 정맥 카바(IIVC)를 사용하여 수혜자의 열등한 정맥 카바에 대한 해부학을 사용한다. 그것은 촉진 하 고 쥐에 복 심 혼 이식에 대 한 성공률을 개선.

여기서, 이전에 우리의 실험실에서 개발되고 지난 16 년 동안 유용하다는 것을 입증한 마우스에 있는 이성애 복부 심혼 이식의 수정된 기술이 제시됩니다. 이전에는 베나카바(V-V 군)에 대한 전체 40건의 경우, 기존 폐동맥40례와 비교하여 정맥카바(P-V 군) 마취시4(표1)혈관 아나스토모시스가 V-V그룹에서 20.8±1.3분이 걸린 것으로 보고되었다. P-V 그룹(27.5±1.3분, p<0.01)보다 현저히 짧...

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Blood Circuit Reconstruction in an Abdominal Mouse Heart Transplantation Model

이성애 복부 마우스 심장 이식 모델에서 혈액 회로 재건을 위한 새로운 기술이 입증된다.

복부 마우스 심혼 이식 모형에 있는 혈액 회로 재건

The surgical technique of heterotopic abdominal heart transplantation in mice is a standard model for research in transplantation immunology. Here, the ...

마우스의 심장 이식은 동종 면역 반응을 연구하기 위한 귀중한 모델이며, 마우스에서 이성애복부 심장 이식의 새로운 수술 기법을 소개합니다. 전통적인 마우스 심장 이식에서 기증자 대자와 받는 사람 복부 대명은 마취된다. 폐 동맥은 수신자 열등한 베나 카바에 마취됩니다.이 새로운 마우스 심장 이식. 기증자 대자는 받는 사람 복부 대어에 마취되고 기증자 내 열등한 베나 카바는 수신자 열등한 베나 카바에게 마취된다. 이제 실험 데모를 시작합니다.이소플루란 흡입 및 마취를 위해 상자에 마우스를 넣은 후 마우스의 무게를 측정합니다. 마우스의 무게에 따르면, 케타민 자일라진 아세프로마신의 관면 주사를 통해 마우스를 마취한다. 마취가 영향을 미쳤을 때 수술 테이블에 마우스를 수정하고 소독합니다.목에서 하복부로 피부를 자른다. 복벽의 근육을 자르고 비스세라를 왼쪽으로 부드럽게 제거했습니다. 다음으로, 열등한 베나 카바를 노출합니다.헤파린 용액의 0.4 밀리리터를 천천히 하부 베나 카바에 넣고 바늘을 꺼내기 전에 1 분 동안 기다립니다. 바늘을 꺼내 열등한 베나 카바와 복부 대어타를 가위로 잘라 내어 난사에 박차를 가합니다. U자 형 컷을 수행하여 가슴 구멍을 엽니 다.심장, 폐 및 모든 흉부 혈관을 완전히 노출시합니다. 흉부 대마를 노출합니다. 루멘의 절반을 잘라.관개 튜브를 흉부 대오르타 개구부에 삽입합니다. 폐 정맥을 잘라 관개 및 배수를 용이하게합니다. 4도 HTK 용액의 적어도 2밀리미터를 주입하십시오.폐 정맥 유출이 완전히 명확해질 때까지 심장은 완전히 박동을 멈춥니다. 관개 튜브를 꺼내 흉골을 분리합니다. 흉선제거.대동맥 아치 주위의 지방을 가볍게 제거합니다. 10 제로 봉합사와 아르테리아 폐모의 트렁크를 노출하고 리디게이트합니다. 내트라토라시크 열등한 베나 카바 노출에 부착된 사실과 결합 조직을 분리하고 7개의 제로 봉합사로 우수한 베나 카바를 리게이트하고 결찰 뒤에 잘라냅니다.대동맥 아치 아래 심장 의 기지 주위에 일곱 제로 봉합사를 합니다. 열등한 베나 카바와 두 오리클, 다음 폐 동맥 가지와 정맥 폐 혈관을 리게이트. 대동맥 아치를 가능한 한 말단으로 변환하지만 측면 가지의 개구부없이 하나의 명확한 루멘이 있는지 확인하십시오.격막 근처의 합자 및 내열성 베나 카바 아래의 폐 혈관. 이제 가슴에서 심장을 제거합니다. 이식된 기증자의 마음을 4도 콜드 HDK 솔루션에 넣고 일시적으로 보존하십시오.감기 허혈 시간을 60 분 이상 연장하지 않도록하십시오. 이제 수용체 작동을 입증하기 시작합니다. 초기 수술 단계는 마취 및 살균을 포함하여 기증자 마우스에 대해 이전에 표시된 것과 유사합니다.복부 피부는 횡방향 방식으로 절단됩니다. 장 내 해부 후, 식염수 용액을 사용하여 젖은 거즈로 복부 장기를 덮습니다. 열등한 베나 카바와 복부 대어타를 노출하고 주변 지방 조직에서 해방하십시오.필요한 경우 신장 혈관 아래 측면 분기 혈관을 리게이트 또는 전기 카운스터화하십시오. 신장 혈관 아래 뇌의 상부와 대어타오른쪽에서 첫 번째 미세 혈전 성 집게를 삽입합니다. 뇌와 대금반의 하부에 오른쪽에서 두 번째 미세 혈전 성 집게를 삽입합니다.두 개의 혈전 성 집게 사이 편도모를 위한 대자와 정맥 공간 둘 다를 위한 1센티미터 이상이 있습니다. 대오르타에 절개를, 상부 클램프보다 낮은 클램프에 조금 더 가깝습니다. 또한 30G 바늘을 사용하여 작은 구멍을 만들고 마이크로 가위로 열 수 있습니다.심장을 복강에 넣습니다. 비전의 대자와 다른 쪽에 있는 베나 카바로 작은 젖은 거즈 패드로 덮습니다. 기증자 대어를 받는 대어에 적응하고 스티치하여 캐들로 시작합니다.매듭을 만들고이 절개 의 상단에 실행 봉합사를 진행, 약 4 ~ 5 바늘. 다음으로, 심장을 오른쪽으로 뒤집어 다시 덮고, 카우달 끝에 도달하고 매듭을 지을 때까지 왼쪽에 봉합사를 계속합니다. 마이크로 가위를 사용하여 기증자의 열등한 정맥 루멘과 동일한 크기여야받는 받는 사람의 복부 열등한 베나 카바에 둥근 구멍을 잘라냅니다.절개는 계획된 대동맥 마취에 두개골이 있어야 한다. 대동맥 절개보다 정맥 절개를 크게 만듭니다. 플러시 기증자의 열등한 정맥 카바.기증자 내 열등한 베나 카바를 수령인 베나 카바(vena cava)에게 바느질합니다. 매듭을 묶고 절개 상단에 도달할 때까지 실행 봉합사를 수행합니다. 다섯 바늘을 사용하고 왼쪽에 봉합사를 계속합니다.마지막으로, 꼬리 모서리에 매듭을 묶고 조심스럽게 조입니다. 너무 꽉 당기지 않도록주의하십시오. 정맥과 대동맥 해부학 주위에 혈전 성 스폰지의 작은 부분을 놓습니다.먼저 하반신을 제거한 다음 상부 마이크로 혈전성 클램프를 제거하고 따뜻한 0.9%의 염화나트륨으로 복강을 헹구는 다. 헤모틱 스폰지를 가져 가라. 이식된 심장박동을 관찰한다.모든 것이 정확하다면 심장이 다시 수축하기 시작합니다. 내장을 복강에 다시 넣고 4 개의 제로 봉합사로 닫습니다. 이식된 마우스가 회복할 수 있도록 따뜻하고 산소가 풍부한 환경을 제공합니다.우리의 이전 연구 작업에서, 우리는 베나 카바의 전반적인 비교에 보고 40 베나 카바 대 40 베나 카바 해부학 절차에 전통적인 폐 동맥의 경우. 베나카바군에서 정맥카로 혈관 아나스토모시스의 작동 시간은 베나카바군에 대한 종래의 폐동맥에 비해 현저히 짧아졌다. 마우스에서 이성애 복부 심장 이식의 외과 기술은 이식 면역학에 있는 연구를 위한 표준 모형을 나타냅니다.여기에 제시 된 혈액 회로 재건을위한이 새로운 기술은 마우스에서 복부 심장 이식을 용이하게한다. 그리고 이것은 감소 된 따뜻한 허혈과 접목 된 심장의 반복 시간과 수반되는 것으로 불리며,이 모델의 성공률을 향상시립니다.

Research

JoVE Journal

Medicine

A Mouse Model of in Utero Transplantation

A Mouse Model of in Utero Transplantation

의 마우스 모델 Utero에 이식

The transplantation of stem cells and viruses in utero has tremendous potential for treating congenital disorders in the human fetus.  For example, in ...

연구

의학

Orthotopic Liver Transplantation in Rats

쥐에게 Orthotopic 간 이식

Clinical progress in the field of liver transplantation has been largely supported by animal models1,2. Since the publication of the first orthotopic rat ...

Using Quantitative Real-time PCR to Determine Donor Cell Engraftment in a Competitive Murine Bone Marrow Transplantation Model

경쟁 손쥐 골수 이식 모델에서 기증자 세포 Engraftment를 확인하려면 수량 실시간 PCR을 사용하여

Murine bone marrow transplantation models provide an important tool in measuring hematopoietic stem cell (HSC) functions and determining genes/molecules ...

Transplantation of Pulmonary Valve Using a Mouse Model of Heterotopic Heart Transplantation

이소성 심장 이식 마우스 모델을 사용하여 폐동맥 판막 이식

Tissue engineered heart valves, especially decellularized valves, are starting to gain momentum in clinical use of reconstructive surgery with mixed ...

Rat Heterotopic Abdominal Heart/Single-lung Transplantation in a Volume-loaded Configuration

쥐 이소성 복부 심장 / 볼륨로드 구성에서 단일 폐 이식

Herein, we describe a novel technique for heterotopic abdominal heart-lung transplantation (HAHLT) in rats. The configuration of the transplant graft ...

Heterotopic Cervical Heart Transplantation in Mice

마우스의 이소성 자궁 심장 이식

The heterotopic cervical heart transplantation in mice is a valuable tool in transplant and cardiovascular research. The cuff technique greatly simplifies ...

Apical Resection Mouse Model to Study Early Mammalian Heart Regeneration

치근단 절제술 마우스 모델은 초기 포유류의 심장 재생을 연구하는

Cardiovascular disease plagues the whole world due to intensive lifestyle changes. Heart regeneration holds great promise for repairing and restoring ...

Using the Sleeve Technique in a Mouse Model of Aortic Transplantation - An Instructional Video

대동맥 이식-교육용 비디오의 마우스 모델에서 소매 기법을 사용 하 여

Orthotopic aortic transplantation using the sleeve technique reduces injury to the aorta with failure rate of only 10-20%. The time to anastomose the ...

A Chronic Cardiac Ischemia Model in Swine Using an Ameroid Constrictor

Ameroid 압축을 사용 하 여 돼지에서 만성 심장 허 혈 모델

Cardiovascular disease remains the number one cause of mortality in the United States. There are numerous approaches to treating these diseases, but ...

Balloon-based Injury to Induce Myointimal Hyperplasia in the Mouse Abdominal Aorta

풍선-기반 부상 마우스 복 부 대동맥에서 Myointimal 증식을 유도 하

The use of animal models is essential for a better understanding of MH, one major cause for arterial stenosis.In this article, we demonstrate a murine ...