Name: using immunofluorescence to detect pm2.5-induced dna damage in zebrafish embryo hearts
Uploaded: 2021-02-15T13:00:00
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Questo lavoro è stato sostenuto dalla National Nature Sciences Foundation of China (numero di sovvenzione: 81870239, 81741005, 81972999) e the Priority Academic Program Development of Jiangsu Higher Education Institutions.

Il pesce zebra selvatico (AB) utilizzato in questo studio è stato ottenuto dal National Zebrafish Resource Center di Wuhan, in Cina. Tutte le procedure per gli animali qui descritte sono state riviste e approvate dall'Animal Care Institution del Comitato Etico della Soochow University.
1. Campionamento PM2.5 ed estrazione di composti organici
NOTA: PM2.5 è stato raccolto in un'area urbana a Suzhou, Cina, 1-7 agosto 2015, come descritto in prece...

<ol>
	<li>Zhang, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Maternal+Exposure+to+Air+Pollution+and+Risk+of+Congenital+Heart+Defects.">Maternal Exposure to Air Pollution and Risk of Congenital Heart Defects.</a> European Journal of Pediatrics. 175, 1520 (2016).</li><li>Huang, C. C., Chen, B. Y., Pan, S. C., Ho, Y. L., Guo, Y. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prenatal+exposure+to+PM2.5+and+Congenital+Heart+Diseases+in+Taiwan.">Prenatal exposure to PM2.5 and Congenital Heart Diseases in Taiwan.</a> The Science of the Total Environment. 655, 880-886 (2019).</li><li>Mesquita, S. 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S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oxidative+damage+induced+in+A549+cells+by+physically+and+chemically+characterized+air+particulate+matter+(PM2.5)+collected+in+Abidjan,+Cote+d'Ivoire.">Oxidative damage induced in A549 cells by physically and chemically characterized air particulate matter (PM2.5) collected in Abidjan, Cote d'Ivoire.</a> Journal of Applied Toxicology. 30, 310-320 (2010).</li><li>Gualtieri, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gene+expression+profiling+of+A549+cells+exposed+to+Milan+PM2.5.">Gene expression profiling of A549 cells exposed to Milan PM2.5.</a> Toxicology Letters. 209, 136-145 (2012).</li><li>Li, S. Y., Sigmon, V. K., Babcock, S. 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Part B, Biochemistry &amp; Molecular Biology. 136, 731-742 (2003).</li><li>Moazzen, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=N-Acetylcysteine+prevents+congenital+heart+defects+induced+by+pregestational+diabetes.">N-Acetylcysteine prevents congenital heart defects induced by pregestational diabetes.</a> Cardiovascular Diabetology. 13, 46 (2014).</li><li>Sun, S. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=N-acetylcysteine,+reactive+oxygen+species+and+beyond.">N-acetylcysteine, reactive oxygen species and beyond.</a> Cancer Biology &amp; Therapy. 9, 109-110 (2010).</li><li>Tu, S., Chi, N. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Zebrafish+models+in+cardiac+development+and+congenital+heart+birth+defects.">Zebrafish models in cardiac development and congenital heart birth defects.</a> Differentiation. 84, 4-16 (2012).</li><li>Asnani, A., Peterson, R. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+zebrafish+as+a+tool+to+identify+novel+therapies+for+human+cardiovascular+disease.">The zebrafish as a tool to identify novel therapies for human cardiovascular disease.</a> Disease Models &amp; Mechanisms. 7, 763-767 (2014).</li><li>Li, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Toxic+effects+of+polychlorinated+biphenyls+on+cardiac+development+in+zebrafish.">Toxic effects of polychlorinated biphenyls on cardiac development in zebrafish.</a> Molecular Biology Reports. 41, 7973-7983 (2014).</li><li>Massarsky, A., Prasad, G. L., Di Giulio, R. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Total+particulate+matter+from+cigarette+smoke+disrupts+vascular+development+in+zebrafish+brain+(Danio+rerio).">Total particulate matter from cigarette smoke disrupts vascular development in zebrafish brain (Danio rerio).</a> Toxicology and Applied Pharmacology. 339, 85-96 (2018).</li><li>Ren, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=AHR-mediated+ROS+production+contributes+to+the+cardiac+developmental+toxicity+of+PM2.5+in+zebrafish+embryos.">AHR-mediated ROS production contributes to the cardiac developmental toxicity of PM2.5 in zebrafish embryos.</a> The Science of the Total Environment. 719, 135097 (2020).</li><li>van Berlo, J. H., Molkentin, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+emerging+consensus+on+cardiac+regeneration.">An emerging consensus on cardiac regeneration.</a> Nature Medicine. 20, 1386-1393 (2014).</li><li>Yue, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protective+effects+of+folic+acid+on+PM2.5-induced+cardiac+developmental+toxicity+in+zebrafish+embryos+by+targeting+AhR+and+Wnt/beta-catenin+signal+pathways.">Protective effects of folic acid on PM2.5-induced cardiac developmental toxicity in zebrafish embryos by targeting AhR and Wnt/beta-catenin signal pathways.</a> Environmental Toxicology. 32, 2316-2322 (2017).</li><li>Zhao, X., Ren, X., Zhu, R., Luo, Z., Ren, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Zinc+oxide+nanoparticles+induce+oxidative+DNA+damage+and+ROS-triggered+mitochondria-mediated+apoptosis+in+zebrafish+embryos.">Zinc oxide nanoparticles induce oxidative DNA damage and ROS-triggered mitochondria-mediated apoptosis in zebrafish embryos.</a> Aquatic Toxicology. 180, 56-70 (2016).</li><li>Zhao, X., Wang, S., Wu, Y., You, H., Lv, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acute+ZnO+nanoparticles+exposure+induces+developmental+toxicity,+oxidative+stress+and+DNA+damage+in+embryo-larval+zebrafish.">Acute ZnO nanoparticles exposure induces developmental toxicity, oxidative stress and DNA damage in embryo-larval zebrafish.</a> Aquatic Toxicology. 136-137, 49-59 (2013).</li><li>Zhu, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=DNA+damage+and+effects+on+glutathione-S-transferase+activity+induced+by+atrazine+exposure+in+zebrafish+(Danio+rerio).">DNA damage and effects on glutathione-S-transferase activity induced by atrazine exposure in zebrafish (Danio rerio).</a> Environmental Toxicology. 26, 480-488 (2011).</li></ol>

Sebbene il pesce zebra sia un eccellente modello di vertebrato per studiare la tossicità dello sviluppo cardiaco delle sostanze chimiche ambientali, a causa delle piccole dimensioni del cuore dell'embrione, è difficile ottenere abbastanza proteine per l'analisi western blot. Pertanto, presentiamo un metodo di immunofluorescenza sensibile per quantificare i livelli di espressione proteica dei biomarcatori di danno al DNA nei cuori degli embrioni di zebrafish esposti a PM2.5.
Durant...

L'inquinamento atmosferico è ora un grave problema ambientale che il mondo deve affrontare. Il particolato fine ambientale (PM2,5), che è uno degli indicatori più importanti della qualità dell'aria, può trasportare un gran numero di sostanze nocive ed entrare nel sistema circolatorio del sangue, causando gravi danni alla salute umana1. Studi epidemiologici hanno dimostrato che l'esposizione al PM2,5 può portare ad un aumento del rischio di difetti cardiaci congeniti (CHD)2,3. Le prove degli esperimenti sugli animali hanno anche dimostrato che il PM2,5 può causare uno sviluppo cardiaco anormale negli embrioni di zebrafish e nella prole dei topi, ma i meccanismi molecolari della tossicità dello sviluppo cardiaco del PM2,5 sono ancora in gran parte sconosciuti4,5,6.
Il danno al DNA può causare l'arresto del ciclo cellulare e indurre l'apoptosi, che può distruggere ampiamente il potenziale delle cellule progenitrici e, di conseguenza, compromettere lo sviluppo del cuore7). È stato ben documentato che gli inquinanti ambientali, tra cui il PM2,5,hanno il potenziale di attaccare il DNA attraverso meccanismi di stress ossidativo8,9. Sia lo sviluppo cardiaco umano che quello del pesce zebra sono sensibili allo stress ossidativo10,11,12. 8-OHdG è un marcatore di danno ossidativo del DNA e il segnale γH2AX è un marcatore di rotture del doppio filamento di DNA. N-acetil-L-cisteina (NAC), un precursore sintetico della cisteina intracellulare e del glutatione, è ampiamente usato come composto antiossidante. In questo studio, utilizziamo NAC per indagare il ruolo dello stress ossidativo in PM2.5- danno al DNA indotto13.
Zebrafish come vertebrato modello è stato ampiamente utilizzato per studiare lo sviluppo cardiaco e le malattie cardiovascolari umane perché i meccanismi di sviluppo cardiaco sono altamente conservati tra i vertebrati14,15. I vantaggi dell'utilizzo del pesce zebra come modello includono le loro piccole dimensioni, la forte capacità riproduttiva e il basso costo di alimentazione. Di particolare interesse per questi studi, gli embrioni di zebrafish non dipendono dal sistema circolatorio durante lo sviluppo precoce e possono sopravvivere a gravi malformazioni cardiache14. Inoltre, la loro trasparenza consente di osservare direttamente l'intero corpo al microscopio. Pertanto, gli embrioni di zebrafish offrono un'eccezionale opportunità per valutare i meccanismi molecolari coinvolti nell'induzione della tossicità dello sviluppo cardiaco a seguito dell'esposizione a varie sostanze chimiche ambientali5,16,17. Abbiamo precedentemente riferito che lo stress ossidativo indotto da PM2,5porta a danni al DNA e apoptosi, con conseguenti malformazioni cardiache nel pesce zebra18. In questo studio, forniamo un protocollo dettagliato per indagare il danno al DNA indotto da PM2,5nel cuore degli embrioni di zebrafish.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>8-OHdG Antibody</td>
			<td>Santa Cruz Biotechnology, USA</td>
			<td>sc-66036</td>
			<td>Primary antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Analytical balance</td>
			<td>Sartorius,China</td>
			<td>BSA124S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BSA</td>
			<td>Solarbio,Beijing,China</td>
			<td>SW3015</td>
			<td>For blocking</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DAPI</td>
			<td>Abcam, USA</td>
			<td>ab104139</td>
			<td>For nuclear counterstain.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMSO</td>
			<td>Solarbio,Beijing,China</td>
			<td>D8371</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluorescence microscope</td>
			<td>Olympus, Japan</td>
			<td>IX73</td>
			<td>For imaging fluorescence signals/</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Goat Anti-Rabbit IgG Cy3</td>
			<td>Carlsbad,USA</td>
			<td>CW0159</td>
			<td>Secondary antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Goat Anti-Rabbit IgG FITC</td>
			<td>Carlsbad,USA</td>
			<td>RS0003</td>
			<td>Secondary antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>N-Acetyl-L-cysteine(NAC)</td>
			<td>Adamas-Beta, Shanghai, China</td>
			<td>616-91-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Orbital shaker</td>
			<td>QILINBEIER,China</td>
			<td>TS-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Paraformaldehyde</td>
			<td>Sigma,China</td>
			<td>P6148</td>
			<td>Make 4% paraformaldehyde for fixation.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphate Buffered Saline</td>
			<td>HyClone,USA</td>
			<td>SH30256.01</td>
			<td>Prepare 0.1% Tween in PBS for washing.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PM2.5 sampler</td>
			<td>TianHong,Wuhan, China</td>
			<td>TH-150C</td>
			<td>For 24-hr uninterrupted PM2.5 sampling.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Re-circulating aquaculture system</td>
			<td>HaiSheng,Shanghai,China</td>
			<td></td>
			<td>The zebrafish was maintained in it.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Soxhlet extractor</td>
			<td>ZhengQiao,Shanghai, China</td>
			<td>BSXT-02</td>
			<td>For organic components extraction.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereomicroscope</td>
			<td>Nikon,Canada</td>
			<td>SMZ645</td>
			<td>For heart dissection from zebrafish embryos.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tricaine methanesulfonate (MS222)</td>
			<td>Sigma,China</td>
			<td>E10521</td>
			<td>To anesthetize zebrafish embryos</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tween 20</td>
			<td>Sigma,China</td>
			<td>P1379</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>&#947;H2AX Antibody</td>
			<td>Abcam, USA</td>
			<td>ab26350</td>
			<td>Primary antibody</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

using immunofluorescence to detect pm2.5-induced dna damage in zebrafish embryo hearts

L'esposizione al particolato fine ambientale (PM2,5)può portare a tossicità per lo sviluppo cardiaco, ma i meccanismi molecolari sottostanti non sono ancora chiari. L'8-idrossi-2'deossigenasi (8-OHdG) è un marker del danno ossidativo al DNA e γH2AX è un marcatore sensibile per le rotture del doppio filamento del DNA. In questo studio, abbiamo mirato a rilevare i cambiamenti 8-OHdG eγH2AXindotti da PM 2,5 nel cuore degli embrioni di zebrafish utilizzando un test di immunofluorescenza. Gli embrioni di zebrafish sono stati trattati con sostanze organiche estraibili (EOM) da PM2,5 a 5 μg/mL in presenza o assenza di N-acetil-L-cisteina antiossidante (NAC, 0,25 μM) a 2 ore dopo la fecondazione (hpf). DMSO è stato utilizzato come controllo del veicolo. A 72 hpf, i cuori sono stati sezionati dagli embrioni usando un ago a siringa e fissati e permeabilizzati. Dopo essere stati bloccati, i campioni sono stati sondati con anticorpi primari contro 8-OHdG e γH2AX. I campioni sono stati poi lavati e incubati con anticorpi secondari. Le immagini risultanti sono state osservate al microscopio a fluorescenza e quantificate utilizzando ImageJ. I risultati mostrano che EOM da PM2.5 ha migliorato significativamente i segnali 8-OHdG e γH2AX nel cuore degli embrioni di zebrafish. Tuttavia, NAC, agendo come spazzino di specie reattive dell'ossigeno (ROS), ha parzialmente contrastato il danno al DNA indotto dall'EOM. Qui, presentiamo un protocollo di immunofluorescenza per studiare il ruolo del danno al DNA nei difetti cardiaci indotti da PM2,5che possono essere applicati al rilevamento di cambiamenti di espressione proteica indotti da sostanze chimiche ambientali nei cuori degli embrioni di zebrafish.

Questo test di immunofluorescenza è un metodo sensibile e specifico per misurare i cambiamenti di espressione proteica nei cuori degli embrioni di zebrafish esposti a sostanze chimiche ambientali.
In questa analisi rappresentativa, gli embrioni esposti a PM2,5 in assenza o presenza del NAC antiossidante sono stati valutati per la presenza di malformazioni cardiache (Figura 1). Come osser...

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Using Immunofluorescence to Detect PM2.5-induced DNA Damage in Zebrafish Embryo Hearts

Questo protocollo utilizza un test di immunofluorescenza per rilevare danni al DNA indotti da PM2,5nei cuori sezionati degli embrioni di zebrafish.

Utilizzo dell'immunofluorescenza per rilevare il danno al DNA indotto da PM2,5nei cuori embrionali di zebrafish

Ambient fine particulate matter (PM2.5) exposure can lead to cardiac developmental toxicity but the underlying molecular mechanisms are still unclear. ...

Questo metodo può essere utilizzato per rilevare con precisione e facilità l'espressione delle proteine bersaglio nel cuore del pesce zebra. Il cambiamento nella proteina bersaglio viene rilevato direttamente misurando l'immunofluorescenza. Eseguire la raccolta e il trattamento degli embrioni di zebrafish, come descritto nel manoscritto di testo.A 72 ore dalla fecondazione, trasferire gli embrioni su vetrini di vetro e osservarli al microscopio stereo. Registrare malformazioni cardiache, come edema pericardico, loop alterato e dimensioni ridotte. Calcola i tassi di malformazione e analizza le differenze tra i gruppi utilizzando ANOVA a senso unico, seguito dal test di confronto multiplo della Turchia.Dopo aver anestetizzato gli embrioni con 0,6 milligrammi per millilitro MS222, registrare i battiti cardiaci per 30 secondi e quantificare la frequenza cardiaca utilizzando il software Image J. Seziona attentamente i cuori degli embrioni di pesce zebra con un ago a siringa usa e getta sotto uno stereomicroscopio. Utilizzare una penna barriera idrofoba per disegnare un cerchio su un vetrino pulito.Aggiungere 50 microlitri di paraformaldeide al 4% a 1,25 microlitri di PBS per creare una soluzione fissativa, quindi posizionare tre cuori sezionati in un cerchio di barriera idrofobica e incubare per 20 minuti a temperatura ambiente. Decantare la soluzione al microscopio e asciugare i campioni a temperatura ambiente per almeno cinque minuti. Lavare le diapositive tre volte in PBST per cinque minuti per lavaggio.Aggiungere 50 microlitri di BSA a 1.000 microlitri di PBST per ottenere una soluzione di BSA al 5% e incubare i vetrini in una camera umida per un'ora per bloccare il legame anticorpale non specifico. Decantare la soluzione e lavare i campioni tre volte con PBS per cinque minuti per lavaggio. Diluire due microlitri di anticorpo monoclonale di topo contro 8-idrossideossiguanosina e due microlitri di anticorpo policlonale di coniglio contro gamma-H2AX in 296 microlitri di PBST per ottenere una soluzione di cocktail anticorpale primario funzionante.Incubare i campioni di cuore con 50 microlitri della soluzione di cocktail anticorpale primario in una camera umidificata per almeno un'ora a temperatura ambiente o durante la notte a quattro gradi Celsius. Decantare la soluzione e lavare i campioni tre volte con PBST per cinque minuti per lavaggio. Diluire un microlitro di anticorpo secondario anti-topo di capra marcato FITC e un microlitro di anticorpo secondario anti-coniglio di capra psy-3 in 500 microlitri di PBST per ottenere una soluzione di cocktail di anticorpi secondari funzionante.Incubare i campioni con gli anticorpi secondari per un'ora a temperatura ambiente al buio. Decantare la soluzione e lavare i campioni tre volte con PBS per cinque minuti per lavaggio. Aggiungere 20 microlitri di DAPI ai campioni per la colorazione nucleare e incubarli per 30 minuti a temperatura ambiente.Applicare un coperchio sul vetrino e sigillarlo con lo smalto per evitare l'asciugatura e il movimento. Immagina i campioni al microscopio a fluorescenza e quantifica il segnale fluorescente dell'area cardiaca utilizzando il software ImageJ. Calcolare le variazioni relative utilizzando la media dei campioni di controllo DMSO e determinare la significatività statistica dei dati.Gli embrioni esposti a PM 2,5 in assenza o presenza dell'antiossidante, N-acetil-L-cisteina, o NAC, sono stati valutati per la presenza di malformazioni cardiache. L'EOM da PM 2,5 è costato un aumento significativo della teratogenesi cardiaca, come edema pericardico, loop alterato e dimensioni ridotte, rispetto ai cuori trattati con controllo DMSO. Anche la frequenza cardiaca è diminuita significativamente negli embrioni esposti alle EOM.Aggiunta di difetti cardiaci indotti da EOM attenuati da NAC. Un test di immunofluorescenza è stato utilizzato per valutare l'entità del danno al DNA nei tessuti trattati con EOM. I livelli di espressione di 8-idrossideossiguanosina e gamma-H2AX sono stati significativamente aumentati nei cuori degli embrioni di zebrafish trattati con EOM, indicando un aumento del danno ossidativo al DNA e delle rotture del doppio filamento del DNA, rispettivamente.Il danno al DNA indotto dall'EOM è stato parzialmente contrastato dall'integrazione di NAC. Quando si tenta questo protocollo, fare attenzione quando si lavano i campioni con PBS, perché il cuore di zebrafish potrebbe staccarsi dal vetrino.

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Using Immunofluorescence to Detect PM2.5-induced DNA Damage in Zebrafish Embryo Hearts

Analysis of Cardiomyocyte Development using Immunofluorescence in Embryonic Mouse Heart

Analisi di Cardiomyocyte Sviluppo usando immunofluorescenza in cuore embrionali di topo

During heart development, the generation of myocardial-specific structural and functional units including sarcomeres, contractile myofibrils, intercalated ...

Ricerca

Biologia dello sviluppo

Microbead Implantation in the Zebrafish Embryo

Microperla impianto nel zebrafish

The zebrafish has emerged as a valuable genetic model system for the study of developmental biology and disease. Zebrafish share a high degree of genomic ...

Optimization of the Wound Scratch Assay to Detect Changes in Murine Mesenchymal Stromal Cell Migration After Damage by Soluble Cigarette Smoke Extract

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Imaging strutture subcellulari nell&#39;embrione Living Zebrafish

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Osservando divisione mitotica e Dynamics in un embrione vivo Zebrafish

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Analisi dei vasi coronarici in sgomberati cuori embrionali

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Uso di Immunolabeling per analizzare i microtubuli stabili, dinamici e nascenti nell'embrione di pesce zebra

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AFM and Microrheology in the Zebrafish Embryo Yolk Cell

AFM e Microrheology nella cella tuorlo embrione di pesce zebra

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Following Endocardial Tissue Movements via Cell Photoconversion in the Zebrafish Embryo

Seguendo i movimenti del tessuto Endocardial tramite cella fotoconversione nell'embrione di pesce zebra

During embryogenesis, cells undergo dynamic changes in cell behavior, and deciphering the cellular logic behind these changes is a fundamental goal in the ...

Minimally Invasive Embryo Transfer and Embryo Vitrification at the Optimal Embryo Stage in Rabbit Model

Trasferimento embrionale minimamente invasivo e vetrificazione embrionale nella fase embrionale ottimale nel modello Rabbit

Assisted reproductive techniques (ARTs), such as in vitro embryo culture or embryo cryopreservation, affect natural development patterns with perinatal ...