Name: a reproducible intensive care unit-oriented endotoxin model in rats
Uploaded: 2021-02-20T15:00:00
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Die Autoren danken Beatrice Beck-Schimmer (MD) und Erik Schadde (MD) für ihre kritische Auseinandersetzung und ihren wertvollen Beitrag zu diesem Manuskript.

Alle in diesem Protokoll vorgestellten Experimente wurden von den Veterinärbehörden des Kantons Zürich, Schweiz, genehmigt (Zulassungsnummern 134/2014 und ZH088/19). Darüber hinaus entsprachen alle Schritte in diesem Experiment den Richtlinien für Tierversuche der Schweizerischen Akademie der Mittleren Wissenschaften (SAMW) und den Richtlinien der Federation of European Laboratory Animal Science Associations (FELASA).
1. Anästhesieinduktion und Tierüberwachung
<ol><li>Halten Sie männ...

<ol>
	<li>Hotchkiss, R. S., Karl, I. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+pathophysiology+and+treatment+of+sepsis.">The pathophysiology and treatment of sepsis.</a> New England Journal of Medicine. 348 (2), 138-150 (2003).</li><li>Singer, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Third+International+Consensus+Definitions+for+Sepsis+and+Septic+Shock+(Sepsis-3).">The Third International Consensus Definitions for Sepsis and Septic Shock (Sepsis-3).</a> Journal of the American Medical Association. 315 (8), 801-810 (2016).</li><li>Vincent, J. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessment+of+the+worldwide+burden+of+critical+illness:+the+intensive+care+over+nations+(ICON)+audit.">Assessment of the worldwide burden of critical illness: the intensive care over nations (ICON) audit.</a> Lancet Respiratory Medicine. 2 (5), 380-386 (2014).</li><li>Fleischmann, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessment+of+Global+Incidence+and+Mortality+of+Hospital-treated+Sepsis.+Current+Estimates+and+Limitations.">Assessment of Global Incidence and Mortality of Hospital-treated Sepsis. Current Estimates and Limitations.</a> American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine. 193 (3), 259-272 (2016).</li><li>Kumar, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Duration+of+hypotension+before+initiation+of+effective+antimicrobial+therapy+is+the+critical+determinant+of+survival+in+human+septic+shock.">Duration of hypotension before initiation of effective antimicrobial therapy is the critical determinant of survival in human septic shock.</a> Critical Care Medicine. 34 (6), 1589-1596 (2006).</li><li>Gotts, J. E., Matthay, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sepsis:+pathophysiology+and+clinical+management.">Sepsis: pathophysiology and clinical management.</a> British Medical Journal. 353, (2016).</li><li>Akira, S., Takeda, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Toll-like+receptor+signalling.">Toll-like receptor signalling.</a> Nature Reviews Immunology. 4 (7), 499-511 (2004).</li><li>Urner, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Insight+into+the+beneficial+immunomodulatory+mechanism+of+the+sevoflurane+metabolite+hexafluoro-2-propanol+in+a+rat+model+of+endotoxaemia.">Insight into the beneficial immunomodulatory mechanism of the sevoflurane metabolite hexafluoro-2-propanol in a rat model of endotoxaemia.</a> Clinical and Experimental Immunology. 181 (3), 468-479 (2015).</li><li>Beck-Schimmer, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Which+Anesthesia+Regimen+Is+Best+to+Reduce+Morbidity+and+Mortality+in+Lung+Surgery?:+A+Multicenter+Randomized+Controlled+Trial.">Which Anesthesia Regimen Is Best to Reduce Morbidity and Mortality in Lung Surgery?: A Multicenter Randomized Controlled Trial.</a> Anesthesiology. 125 (2), 313-321 (2016).</li><li>Deitch, E. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+sepsis+and+shock:+a+review+and+lessons+learned.">Animal models of sepsis and shock: a review and lessons learned.</a> Shock. 9 (1), 1-11 (1998).</li><li>Buras, J. A., Holzmann, B., Sitkovsky, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+sepsis:+setting+the+stage.">Animal models of sepsis: setting the stage.</a> Nature Reviews Drug Discovery. 4 (10), 854-865 (2005).</li><li>Perretti, M., Duncan, G. S., Flower, R. J., Peers, S. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Serum+corticosterone,+interleukin-1+and+tumour+necrosis+factor+in+rat+experimental+endotoxaemia:+comparison+between+Lewis+and+Wistar+strains.">Serum corticosterone, interleukin-1 and tumour necrosis factor in rat experimental endotoxaemia: comparison between Lewis and Wistar strains.</a> British Journal of Pharmacology. 110 (2), 868-874 (1993).</li><li>Marechal, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelial+glycocalyx+damage+during+endotoxemia+coincides+with+microcirculatory+dysfunction+and+vascular+oxidative+stress.">Endothelial glycocalyx damage during endotoxemia coincides with microcirculatory dysfunction and vascular oxidative stress.</a> Shock. 29 (5), 572-576 (2008).</li><li>Thiemermann, C., Ruetten, H., Wu, C. C., Vane, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+multiple+organ+dysfunction+syndrome+caused+by+endotoxin+in+the+rat:+attenuation+of+liver+dysfunction+by+inhibitors+of+nitric+oxide+synthase.">The multiple organ dysfunction syndrome caused by endotoxin in the rat: attenuation of liver dysfunction by inhibitors of nitric oxide synthase.</a> British Journal of Pharmacology. 116 (7), 2845-2851 (1995).</li><li>Osuchowski, M. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Minimum+quality+threshold+in+pre-clinical+sepsis+studies+(MQTiPSS):+an+international+expert+consensus+initiative+for+improvement+of+animal+modeling+in+sepsis.">Minimum quality threshold in pre-clinical sepsis studies (MQTiPSS): an international expert consensus initiative for improvement of animal modeling in sepsis.</a> Intensive Care Medicine Experimental. 6 (1), 26 (2018).</li><li>Fink, M. P., Heard, S. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Laboratory+models+of+sepsis+and+septic+shock.">Laboratory models of sepsis and septic shock.</a> Journal of Surgical Research. 49 (2), 186-196 (1990).</li><li>Buras, J. A., Holzmann, B., Sitkovsky, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+sepsis:+Setting+the+stage.">Animal models of sepsis: Setting the stage.</a> Nature Reviews Drug Discovery. 4 (10), 854-865 (2005).</li><li>Balls, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+principles+of+humane+experimental+technique:+timeless+insights+and+unheeded+warnings.">The principles of humane experimental technique: timeless insights and unheeded warnings.</a> Altex-Alternatives to Animal Experimentation. 27 (2), 144-148 (2010).</li></ol>

Das hier beschriebene Protokoll ermöglicht ein hochgradig reproduzierbares, aber dennoch einfach zu erlernendes Sepsis-Modell, das entsprechend der Forschungsfrage angepasst werden kann. Wesentliche In-vivo-Daten, die sich auf die Organfunktion wie Herzfrequenz, Blutdruck und periphere arterielle Sauerstoffsättigung beziehen, können kontinuierlich gesammelt werden, und die Blutentnahme kann während des gesamten Experiments wiederholt durchgeführt werden. Darüber hinaus können Modifikationen in Bezug auf Flüssigke...

Sepsis und ihre schwerere Form, der septische Schock, sind Syndrome auf der Grundlage einer Infektion, die zu einer überschießenden Entzündungsreaktion mit der Freisetzung von Zytokinen führen, was zu physiologischen und biochemischen Veränderungen mit einer unterdrückten Immunabwehr und tödlichen Ergebnissen führt 1,2. Diese unausgewogene Entzündungsreaktion führt zu Organfunktionsstörungen und Organversagen in verschiedenen lebenswichtigen Organen wie Lunge, Niere und Leber. Mit 37%3 ist Sepsis einer der häufigsten Gründe für die Aufnahme eines Patienten auf eine Intensivstation (ICU). Die Mortalität der Sepsis liegt derzeit bei etwa 20-30%4. Eine frühzeitige und wirksame Behandlung mit Antibiotika ist von größter Bedeutung5. Die Wiederbelebung von Flüssigkeit und Vasopressor muss frühzeitig installiert werden, ansonsten ist die Behandlung rein unterstützend6.
Sepsis ist definiert als eine nachgewiesene oder vermutete Infektion mit Bakterien, Pilzen, Viren oder Parasiten, die von Organfunktionsstörungen begleitet wird. Die septischen Schockkriterien sind erfüllt, wenn ein weiterer kardiovaskulärer Kollaps nicht allein auf die Flüssigkeitsbehandlung anspricht und ein Laktatspiegel von mehr als 2 Millimol / Liter vorliegt2. Sepsis-bedingtes Organversagen kann in jedem Organ auftreten, ist aber im Herz-Kreislauf-System, im Gehirn, in der Niere, in der Leber und in der Lunge sehr häufig. Die meisten Patienten, die an Sepsis leiden, benötigen eine endotracheale Intubation, um die Atemwege des Patienten zu sichern, vor Aspiration zu schützen und eine positive exspiratorische Endbeatmung mit einem hohen Anteil an inspiriertem Sauerstoff anzuwenden, um Hypoxie zu verhindern oder zu überwinden. Um einen Trachealtubus und eine mechanische Beatmung zu vertragen, benötigen die Patienten in der Regel eine Sedierung.
Endotoxine, wie Lipopolysaccharide (LPS) als Bestandteil der Membran gramnegativer Bakterien induzieren über den Toll-like-Rezeptor (TLR) 47 eine starke Entzündungsreaktion. Die Aktivierung eines definierten Signalweges sorgt für eine stabile Entzündungsreaktion. Zytokine wie das durch Zytokin induzierte neutrophile Chemoattraktanzprotein 1 (CINC-1), das Monozyten-Chemoattractant-Protein 1 (MCP-1) und Interleukin 6 (IL-6) sind in diesem Modell8 als prognostische Faktoren für Schweregrad und Ergebnis bekannt. Die intravenöse LPS-Anwendung wurde erfolgreich zur Untersuchung verschiedener Aspekte der Sepsis bei Ratteneingesetzt 8,9.
Die Behandlung von Sepsis ist nach wie vor eine Herausforderung, insbesondere aufgrund des Mangels an prädiktiven Tiermodellen. Ob Endotoxämie mit Aktivierung einer systemischen Entzündung ein adäquates Modell für die Entwicklung pharmakologischer Therapien ist, ist fraglich. Mit dem bekannten LPS-induzierten TLR4-Signalweg können jedoch wichtige Erkenntnisse gewonnen werden.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>2-0 silk sutures</td>
			<td>Ethicon, Sommerville, NJ</td>
			<td>K833</td>
			<td>Standard surgical</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>26 intravenous catheter</td>
			<td>Becton Dickinson, Franklin Lakes, NJ</td>
			<td>391349</td>
			<td>Standard anesthesia equipment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>6-0 LOOK black braided silk</td>
			<td>Surgical Specalities Corporation, Wyomissing, PA</td>
			<td>SP114</td>
			<td>Standard surgical</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alaris Syringe Pump</td>
			<td>Bencton Dickinson</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Betadine</td>
			<td>Mundipharma, Basel, Switzerland</td>
			<td>7.68034E+12</td>
			<td>GTIN-number</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Curved fine tips microforceps</td>
			<td>World precision instruments (WPI), Sarasota, FL</td>
			<td>504513</td>
			<td>Facilitates vascular preparation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fine tips microforceps</td>
			<td>World precision instruments (WPI), Sarasota, FL</td>
			<td>501976</td>
			<td>Tips need to be polished regularly</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Infinity Delta XL Anesthesia monitoring</td>
			<td>Draeger, L&#252;beck, Germany</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane, 250 mL bottles</td>
			<td>Attane, Piramal, Mumbai, India</td>
			<td>LDNI 22098</td>
			<td>Standard vet. equipment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ketamine (Ketalar)</td>
			<td>Pfitzer, New York, NY</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lipopolysaccharide (LPS) from Escherichia coli, serotype 055:B5</td>
			<td>Sigma, Buchs, Switzerland</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Q-tips small</td>
			<td>Carl Roth GmbH, Karlsruhe, Germany</td>
			<td>EH11.1</td>
			<td>Standard surgical</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ringerfundin</td>
			<td>Bbraun, Melsungen, Germany</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tec-3 Isofluorane Vaporizer</td>
			<td>Ohmeda, GE-Healthcare, Chicago, IL</td>
			<td>not available anymore</td>
			<td>Standard vet. equipment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Xylazine (Xylazin Streuli)</td>
			<td>Streuli AG, Uznach, Switzerland</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a reproducible intensive care unit-oriented endotoxin model in rats

Sepsis und septischer Schock sind nach wie vor die häufigste Todesursache auf Intensivstationen. Trotz signifikanter Verbesserungen im Sepsis-Management liegt die Mortalität immer noch zwischen 20 und 30%. Neuartige Behandlungsansätze, um Sepsis-bedingtes Multiorganversagen und -tod zu reduzieren, werden dringend benötigt. Robuste Tiermodelle ermöglichen einen oder mehrere Behandlungsansätze sowie die Prüfung ihrer Wirkung auf physiologische und molekulare Parameter. In diesem Artikel wird ein einfaches Tiermodell vorgestellt.
Erstens wird die Vollnarkose bei Tieren entweder unter Verwendung von flüchtiger oder durch intraperitoneale Anästhesie induziert. Nach dem Einsetzen eines intravenösen Katheters (Schwanzvene), der Tracheostomie und dem Einsetzen eines intraarteriellen Katheters (Schwanzarterie) wird mit der mechanischen Beatmung begonnen. Ausgangswerte des mittleren arteriellen Blutdrucks, der arteriellen Blutsauerstoffsättigung und der Herzfrequenz werden aufgezeichnet.
Die Injektion von Lipopolysacchariden (1 Milligramm/Kilogramm Körpergewicht), gelöst in phosphatgepufferter Kochsalzlösung, induziert eine starke und reproduzierbare Entzündungsreaktion über den toll-like Rezeptor 4. Flüssigkeitskorrekturen sowie die Anwendung von Noradrenalin werden auf der Grundlage etablierter Protokolle durchgeführt.
Das in diesem Artikel vorgestellte Tiermodell ist leicht erlernbar und stark auf die klinische Sepsisbehandlung auf einer Intensivstation mit Sedierung, mechanischer Beatmung, kontinuierlicher Blutdrucküberwachung und wiederholter Blutentnahme ausgerichtet. Außerdem ist das Modell zuverlässig und ermöglicht reproduzierbare Daten mit einer begrenzten Anzahl von Tieren gemäß den 3R-Prinzipien (Reduce, Replace, Refine) von Tierversuchen. Während Tierversuche in der Sepsisforschung nicht leicht ersetzt werden können, ermöglichen wiederholte Messungen eine Verringerung der Tiere und die Anästhesie von septischen Tieren verringert das Leiden.

Das vorgestellte System ermöglicht Endotoxämie bei hämodynamisch stabilen Tieren, wie bereits berichtet9. Während der mittlere arterielle Druck bei Tieren mit und ohne LPS-Stimulation stabil bleibt, entwickeln LPS-behandelte Tiere Merkmale einer Sepsis wie einen negativen Basenüberschuss und eine starke Entzündungsreaktion, gemessen an Plasmazytokinen (6 Stunden nach der Anwendung) wie CINC-1 (867 ng/ml), MCP-1 (5027 ng/ml) und IL-6 (867 ng/ml)8, <strong class="xfig"...

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A Reproducible Intensive Care Unit-Oriented Endotoxin Model in Rats

Hier stellen wir ein reproduzierbares intensivstationsorientiertes Endotoxinmodell an Ratten vor.

Ein reproduzierbares intensivstationsorientiertes Endotoxinmodell bei Ratten

Sepsis and septic shock remain the leading cause of death in intensive care units. Despite significant improvements in sepsis management, mortality still ...

Dieses Protokoll ist ein robustes und reproduzierbares Modell der Endotoxämie, bei dem physiologische und molekulare Parameter wiederholt bewertet werden können. Dieser Ansatz kann helfen, Fragen in der Sepsisforschung zu beantworten. Während unser Modell Tierversuche nicht ersetzt, verfeinert es Sepsis-Modelle durch kontinuierliche Sedierung und reduziert die Anzahl der Tiere durch wiederholte Probenahme.Anfänger können mit dem Einsetzen von arteriellen und venösen Kathetern zu kämpfen haben, aber es ist nur ein begrenztes Training erforderlich, um diese Techniken zu beherrschen. Die Visualisierung des gesamten Versuchsaufbaus erleichtert es den Forschern, ihre Modelle einzurichten oder anzupassen, um eine Situation auf der Intensivstation genauer nachzuahmen. Beginnen Sie damit, das betäubte Tier auf eine Heizmatte zu übertragen.Halten Sie die Körpertemperatur zwischen 36,5 und 37 Grad Celsius. Stellen Sie sicher, dass das Tier spontan atmet, indem Sie Sauerstoff mit einem Nasenkegel versorgen. Bestätigen Sie den Grad der Anästhesie durch das Fehlen des Zehenquetschreflexes vor der Installation von Tracheostomie und arteriellen und venösen Kathetern.Verwenden Sie eine Salbe, um die Augen zu schützen. Bereiten Sie sterile chirurgische Instrumente und Katheter zusammen mit einer Druck- und Sauerstoffsättigungsüberwachung für eine ausreichende Sauerstoffversorgung vor. Tragen Sie ein Tourniquet auf den proximalen Schwanz der Ratte auf, um den venösen Zugang zu erleichtern, und desinfizieren Sie den Schwanz dreimal mit Alkohol.Führen Sie einen intravenösen 26-Gauge-Katheter in eine der beiden seitlichen Heckvenen ein und vermeiden Sie eine Luftinjektion. Lösen Sie den Tourniquet nach dem Einsetzen des intravenösen Katheters und fixieren Sie den intravenösen Katheter mit Klebeband. Schließen Sie Spritzenpumpen mit Drei-Wege-Absperrhähnen an den intravenösen Zugang für kontinuierliche Flüssigkeits- und Arzneimittelanwendungen an.Beginnen Sie die Tracheostomie, indem Sie den vorderen Halsbereich des Tieres rasieren und dann die rasierte Haut dreimal mit Povidon-Jodlösung desinfizieren. Führen Sie einen zwei Zentimeter langen Schnitt mit einer Skalpellklinge Nummer 10 durch. Ziehen Sie die Haut mit 2-0 Seidennähten zurück.Dann bereiten Sie den Kehlkopf und die Luftröhre stumpf vor, um mit einer chirurgischen Schere geöffnet zu werden. Führen Sie eine sterile Trachealkanüle in die Luftröhre ein und achten Sie darauf, nicht zu tief einzudringen, um eine einseitige Belüftung zu vermeiden. Befestigen Sie die Kanüle mit einer 2-O-Seidennaht an Ort und Stelle und schließen Sie die Kanüle dann an ein Beatmungsgerät an, um druck- oder volumengesteuerte Belüftung zu erhalten.Definieren Sie Flüssigkeitsersatzprotokolle, Vasokonstriktor-Anwendungsprotokolle und Abtreibungskriterien, bevor Sie das Experiment einrichten. Desinfizieren Sie den Rattenschwanz dreimal mit Povidon-Jodlösung und schneiden Sie dann den Hautkreis an der Bauchseite mit einem Skalpell um einen Zentimeter Längsrichtung ab, wobei Sie darauf achten, nicht zu tief zu schneiden, um eine Verletzung der Schwanzarterie zu vermeiden. Verwenden Sie ein Operationsmikroskop, um die Arterie vorsichtig freizulegen.Schneiden Sie die Faszie, die die Arterie umgibt, mit einer chirurgischen Mikroschere ab. Ligen Sie dann den distalen Teil der Arterie, indem Sie proximale 6-0-Seidennaht durchführen, aber ziehen Sie die Seide nicht fest. Führen Sie einen 26-Gauge-Katheter in die Arterie zwischen der distalen und proximalen Seidennaht ein und ziehen Sie dann die proximale Seidennaht fest, um den Katheter an Ort und Stelle zu befestigen.Schließen Sie den Katheter an einen Druckmessumformer an, um eine kontinuierliche arterielle Druckmessung zu ermöglichen. Platzieren Sie zusätzlich einen Drei-Wege-Absperrhahn zwischen dem Katheter, der mit dem Druckmessumformer verbunden ist, und dem 26-Gauge-Katheter für die arterielle Blutentnahme. Nachdem das Tier einen stabilen Zustand erreicht hat, induziert eine Sepsis durch Injektion von LPS und sammelt Blutproben.Ersetzen Sie den Flüssigkeitsverlust aus den Blutproben durch Ringers Lösung in einem Verhältnis von eins zu vier und vermeiden Sie jederzeit Luftinjektionen, um Luftembolien zu verhindern. Der mittlere arterielle Druck bleibt bei Tieren mit und ohne LPS-Stimulation stabil. LPS-behandelte Tiere entwickeln Merkmale der Sepsis, wie z.B. einen negativen Basenüberschuss.LPS-behandelte Tiere entwickelten auch eine starke Entzündungsreaktion, die durch Plasmazytokine wie Chemoattractant Protein-1, Monozyten-Chemoattractant-Protein-1 und Interleukin-6 gemessen wurde. Wenn Sie dieses Protokoll versuchen, denken Sie daran, Flüssigkeits- und Vasopressor-Regime vorzudefinieren sowie Terminierungskriterien zu definieren, um solide und reproduzierbare Forschungsdaten zu erhalten. Dieses Protokoll kann an andere Sepsis-Modelle angepasst werden.So wird eine Forschungsfrage mit dem am besten geeigneten Ansatz und in Übereinstimmung mit den Prinzipien des Reduzierens, Verfeinerns, Ersetzens des Tierschutzes beantwortet.

Research

JoVE Journal

Medicine

Spectral Karyotyping to Study Chromosome Abnormalities in Humans and Mice with Polycystic Kidney Disease

Spektrale Karyotypisierung zu Chromosomenanomalien in Menschen und Mäusen mit Kidney Disease Study

Conventional method to identify and classify individual chromosomes depends on the unique banding pattern of each chromosome in a specific species being ...

Forschung

Medizin

A Murine Closed-chest Model of Myocardial Ischemia and Reperfusion

Ein Maus-Closed-Brust-Modell von Myokardischämie und Reperfusion

Surgical trauma by thoracotomy in open-chest models of coronary ligation induces an immune response which modifies different mechanisms involved in ...

Lavage-induced Surfactant Depletion in Pigs As a Model of the Acute Respiratory Distress Syndrome (ARDS)

Lavage-induced Surfactant Depletion in Pigs As a Model of the Acute Respiratory Distress Syndrome ARDS

Lavage-induzierte Surfactant Depletion in Schweine als Modell des Acute Respiratory Distress Syndrome (ARDS)

Various animal models of lung injury exist to study the complex pathomechanisms of human acute respiratory distress syndrome (ARDS) and evaluate future ...

A Model of Cardiac Remodeling Through Constriction of the Abdominal Aorta in Rats

Ein Modell der kardialen Remodeling Durch Zusammenziehen der Bauchaorta bei Ratten

Heart failure is one of the leading causes of death worldwide. It is a complex clinical syndromethat includes fatigue, dyspnea, exercise intolerance, and ...

A Model to Simulate Clinically Relevant Hypoxia in Humans

Ein Modell Simulieren von klinisch relevanter Hypoxie beim Menschen

In case of apnea, arterial partial pressure of oxygen (pO2) decreases, while partial pressure of carbon dioxide (pCO2) increases. To avoid damage to ...

Use of a Central Venous Line for Fluids, Drugs and Nutrient Administration in a Mouse Model of Critical Illness

Die Verwendung eines zentralen Venenkatheter für Flüssigkeiten, Drugs und Nährstoffverwaltung in einem Maus-Modell der Critical Illness

This protocol describes a centrally catheterized mouse model of prolonged critical illness. We combine the cecal ligation and puncture method to induce ...

Observational Study Protocol for Repeated Clinical Examination and Critical Care Ultrasonography Within the Simple Intensive Care Studies

Beobachtungsstudie Protokoll für wiederholte klinische Untersuchung und kritische Care Sonographie innerhalb der einfachen Intensivpflege-Studien

Longitudinal evaluations of critically ill patients by combinations of clinical examination, biochemical analysis and critical care ultrasonography (CCUS) ...

A Protocol to Set Up Needle-Free Connector with Positive Displacement on Central Venous Catheter in Intensive Care Unit

Ein Protokoll zum Einrichten eines nadelfreien Steckverbinders mit positiver Verschiebung auf dem zentralen Venenkatheter auf der Intensivstation

Needle-free connectors were initially designed and promoted to avoid blood exposure for healthcare workers. Some recent data suggest that the latest ...

Inducing Acute Lung Injury in Mice by Direct Intratracheal Lipopolysaccharide Instillation

Induzieren akute Lungenschädigung bei Mäusen durch direkte intratracheale Lipopolysaccharid-Instillation

Airway administration of lipopolysaccharide (LPS) is a common way to study pulmonary inflammation and acute lung injury (ALI) in small animal models. ...

Halogenated Agent Delivery in Porcine Model of Acute Respiratory Distress Syndrome via an Intensive Care Unit Type Device

Halogenierte Wirkstoffabgabe im Schweinemodell des akuten Atemnotsyndroms über ein Gerät vom Typ Intensivstation

Acute respiratory distress syndrome (ARDS) is a common cause of hypoxemic respiratory failure and death in critically ill patients, and there is an urgent ...