Name: a reproducible intensive care unit-oriented endotoxin model in rats
Uploaded: 2021-02-20T15:00:00
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लेखकों को उनकी महत्वपूर्ण परीक्षा और इस पांडुलिपि के लिए उनके मूल्यवान योगदान के लिए Beatrice Beck-Schimmer (एमडी) और एरिक Schadde (एमडी) धन्यवाद करना चाहते हैं.

इस प्रोटोकॉल में प्रस्तुत सभी प्रयोगों को कैंटन ज्यूरिख, स्विट्जरलैंड के पशु चिकित्सा अधिकारियों द्वारा अनुमोदित किया गया था (अनुमोदन संख्या 134/2014 और ZH088/19)। इसके अलावा, इस प्रयोग में किए गए सभी चरण स्विस ?...

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	<li>Hotchkiss, R. S., Karl, I. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+pathophysiology+and+treatment+of+sepsis.">The pathophysiology and treatment of sepsis.</a> New England Journal of Medicine. 348 (2), 138-150 (2003).</li><li>Singer, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Third+International+Consensus+Definitions+for+Sepsis+and+Septic+Shock+(Sepsis-3).">The Third International Consensus Definitions for Sepsis and Septic Shock (Sepsis-3).</a> Journal of the American Medical Association. 315 (8), 801-810 (2016).</li><li>Vincent, J. 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F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Minimum+quality+threshold+in+pre-clinical+sepsis+studies+(MQTiPSS):+an+international+expert+consensus+initiative+for+improvement+of+animal+modeling+in+sepsis.">Minimum quality threshold in pre-clinical sepsis studies (MQTiPSS): an international expert consensus initiative for improvement of animal modeling in sepsis.</a> Intensive Care Medicine Experimental. 6 (1), 26 (2018).</li><li>Fink, M. P., Heard, S. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Laboratory+models+of+sepsis+and+septic+shock.">Laboratory models of sepsis and septic shock.</a> Journal of Surgical Research. 49 (2), 186-196 (1990).</li><li>Buras, J. A., Holzmann, B., Sitkovsky, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+sepsis:+Setting+the+stage.">Animal models of sepsis: Setting the stage.</a> Nature Reviews Drug Discovery. 4 (10), 854-865 (2005).</li><li>Balls, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+principles+of+humane+experimental+technique:+timeless+insights+and+unheeded+warnings.">The principles of humane experimental technique: timeless insights and unheeded warnings.</a> Altex-Alternatives to Animal Experimentation. 27 (2), 144-148 (2010).</li></ol>

यहां वर्णित प्रोटोकॉल एक अत्यधिक पुनरुत्पादक, अभी तक सेप्सिस मॉडल सीखने के लिए सरल है, जिसे शोध प्रश्न के अनुसार अनुकूलित किया जा सकता है। हृदय गति, रक्तचाप और परिधीय धमनी ऑक्सीजन संतृप्ति जैसे अंग सम?...

सेप्सिस और इसके अधिक गंभीर रूप, सेप्टिक शॉक, एक संक्रमण की जमीन पर सिंड्रोम हैं, जिसके परिणामस्वरूप साइटोकिन्स की रिहाई के साथ एक ओवरशूटिंग भड़काऊ प्रतिक्रिया होती है, जिससे एक दबी हुई प्रतिरक्षा रक्षा और घातक परिणाम 1,2 के साथ शारीरिक और जैव रासायनिक परिवर्तनहोते हैं। इस असंतुलित भड़काऊ प्रतिक्रिया के परिणामस्वरूप फेफड़े, गुर्दे और यकृत जैसे विभिन्न महत्वपूर्ण अंगों में अंग शिथिलता और अंग विफलता होती है। 37% 3 के साथ, सेप्सिस एक रोगी को गहन देखभाल इकाई (आईसीयू) में भर्ती होने के लिए सबसे आम कारणों में से एक है। सेप्सिस की मृत्यु दर वर्तमान में लगभग 20-30% 4 है। प्रारंभिक और प्रभावी एंटीबायोटिक उपचार का अत्यधिक महत्व है। द्रव और vasopressor पुनर्जीवन को जल्दी स्थापित करने की आवश्यकता होती है, इसके अलावा, उपचार विशुद्ध रूप से सहायकहै 6।
सेप्सिस को बैक्टीरिया, कवक, वायरस या परजीवी के साथ एक सिद्ध या संदिग्ध संक्रमण के रूप में परिभाषित किया गया है, जो अंग की शिथिलता के साथ होता है। सेप्टिक शॉक मानदंड ों को पूरा किया जाता है जब अकेले तरल पदार्थ के उपचार के लिए एक और कार्डियोवैस्कुलर पतन irresponsive होता है, और 2 मिलीमोल / लीटर से अधिक का लैक्टेटस्तर मौजूद होता है। सेप्सिस से संबंधित अंग विफलता किसी भी अंग में हो सकती है, लेकिन हृदय प्रणाली, मस्तिष्क, गुर्दे, यकृत और फेफड़ों में बहुत आम है। सेप्सिस से पीड़ित अधिकांश रोगियों को रोगी के वायुमार्ग को सुरक्षित करने के लिए एंडोट्रेचियल इंटुबैषेण की आवश्यकता होती है, आकांक्षा से बचाने के लिए, और हाइपोक्सिया को रोकने या दूर करने के लिए प्रेरित ऑक्सीजन के उच्च अंश के साथ सकारात्मक अंत समाप्ति वेंटिलेशन लागू करने के लिए। एक श्वासनली ट्यूब और यांत्रिक वेंटिलेशन को सहन करने के लिए, रोगियों को आमतौर पर बेहोश करने की क्रिया की आवश्यकता होती है।
एंडोटॉक्सिन, जैसे कि ग्राम नकारात्मक बैक्टीरिया की झिल्ली के एक घटक के रूप में लिपोपॉलीसेकेराइड्स (एलपीएस) टोल-जैसे रिसेप्टर (टीएलआर) 4 7 के माध्यम से एक मजबूत भड़काऊ प्रतिक्रिया को प्रेरित करतेहैं। एक परिभाषित मार्ग का सक्रियण एक स्थिर भड़काऊ प्रतिक्रिया सुनिश्चित करता है। साइटोकाइन प्रेरित न्यूट्रोफिल chemoattractant प्रोटीन 1 (CINC-1), मोनोसाइट chemoattractant प्रोटीन 1 (MCP-1), और इंटरल्यूकिन 6 (IL-6) जैसे साइटोकिन्स को इस मॉडल में गंभीरता और परिणाम के लिए पूर्वानुमानकारककारकों के रूप में जाना जाता है। अंतःशिरा एलपीएस आवेदन सफलतापूर्वक चूहों में सेप्सिस के विभिन्न पहलुओं का अध्ययन करने के लिए इस्तेमाल किया गयाहै 8,9.
सेप्सिस का उपचार अभी भी एक चुनौती है, विशेष रूप से भविष्यवाणी करने वाले पशु मॉडल की कमी के कारण। यदि प्रणालीगत सूजन के सक्रियण के साथ एंडोटोक्सिमिया औषधीय उपचारों के विकास के लिए एक पर्याप्त मॉडल है, तो बहस का विषय है। हालांकि, प्रसिद्ध एलपीएस-प्रेरित टीएलआर 4 मार्ग के साथ महत्वपूर्ण ज्ञान प्राप्त किया जा सकता है।

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>2-0 silk sutures</td>
			<td>Ethicon, Sommerville, NJ</td>
			<td>K833</td>
			<td>Standard surgical</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>26 intravenous catheter</td>
			<td>Becton Dickinson, Franklin Lakes, NJ</td>
			<td>391349</td>
			<td>Standard anesthesia equipment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>6-0 LOOK black braided silk</td>
			<td>Surgical Specalities Corporation, Wyomissing, PA</td>
			<td>SP114</td>
			<td>Standard surgical</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alaris Syringe Pump</td>
			<td>Bencton Dickinson</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Betadine</td>
			<td>Mundipharma, Basel, Switzerland</td>
			<td>7.68034E+12</td>
			<td>GTIN-number</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Curved fine tips microforceps</td>
			<td>World precision instruments (WPI), Sarasota, FL</td>
			<td>504513</td>
			<td>Facilitates vascular preparation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fine tips microforceps</td>
			<td>World precision instruments (WPI), Sarasota, FL</td>
			<td>501976</td>
			<td>Tips need to be polished regularly</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Infinity Delta XL Anesthesia monitoring</td>
			<td>Draeger, L&#252;beck, Germany</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane, 250 mL bottles</td>
			<td>Attane, Piramal, Mumbai, India</td>
			<td>LDNI 22098</td>
			<td>Standard vet. equipment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ketamine (Ketalar)</td>
			<td>Pfitzer, New York, NY</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lipopolysaccharide (LPS) from Escherichia coli, serotype 055:B5</td>
			<td>Sigma, Buchs, Switzerland</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Q-tips small</td>
			<td>Carl Roth GmbH, Karlsruhe, Germany</td>
			<td>EH11.1</td>
			<td>Standard surgical</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ringerfundin</td>
			<td>Bbraun, Melsungen, Germany</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tec-3 Isofluorane Vaporizer</td>
			<td>Ohmeda, GE-Healthcare, Chicago, IL</td>
			<td>not available anymore</td>
			<td>Standard vet. equipment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Xylazine (Xylazin Streuli)</td>
			<td>Streuli AG, Uznach, Switzerland</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a reproducible intensive care unit-oriented endotoxin model in rats

सेप्सिस और सेप्टिक शॉक गहन देखभाल इकाइयों में मौत का प्रमुख कारण बने हुए हैं। सेप्सिस प्रबंधन में महत्वपूर्ण सुधार के बावजूद, मृत्यु दर अभी भी 20 और 30% के बीच है। सेप्सिस से संबंधित मल्टीऑर्गन विफलता और मृत्यु को कम करने के लिए उपन्यास उपचार दृष्टिकोण की तत्काल आवश्यकता है। मजबूत पशु मॉडल एक या कई उपचार दृष्टिकोणों के साथ-साथ शारीरिक और आणविक मापदंडों पर उनके प्रभाव का परीक्षण करने की अनुमति देते हैं। इस लेख में, एक साधारण पशु मॉडल प्रस्तुत किया गया है।
सबसे पहले, सामान्य संज्ञाहरण जानवरों में या तो वाष्पशील के उपयोग के साथ या इंट्रापेरिटोनियल संज्ञाहरण द्वारा प्रेरित होता है। एक अंतःशिरा कैथेटर (पूंछ नस), ट्रेकियोस्टोमी, और एक इंट्राआर्टेरियल कैथेटर (पूंछ धमनी) के सम्मिलन के प्लेसमेंट के बाद, यांत्रिक वेंटिलेशन शुरू किया जाता है। माध्य धमनी रक्तचाप, धमनी रक्त ऑक्सीजन संतृप्ति, और हृदय गति के आधारभूत मूल्यों को दर्ज किया जाता है।
लिपोपॉलीसेकेराइड्स (1 मिलीग्राम / किलोग्राम शरीर का वजन) का इंजेक्शन फॉस्फेट-बफ़र्ड खारा में भंग हो जाता है, टोल-जैसे रिसेप्टर 4 के माध्यम से एक मजबूत और पुन: प्रस्तुत करने योग्य भड़काऊ प्रतिक्रिया को प्रेरित करता है। तरल पदार्थ सुधार के साथ-साथ नॉरपेनेफ्रिन के आवेदन को अच्छी तरह से स्थापित प्रोटोकॉल के आधार पर किया जाता है।
इस लेख में प्रस्तुत पशु मॉडल सीखना आसान है और बेहोश करने की क्रिया, यांत्रिक वेंटिलेशन, निरंतर रक्तचाप की निगरानी और दोहराए जाने वाले रक्त के नमूने के साथ एक गहन देखभाल इकाई में नैदानिक सेप्सिस उपचार की ओर दृढ़ता से उन्मुख है। इसके अलावा, मॉडल विश्वसनीय है, जो पशु अनुसंधान के 3R (कम, प्रतिस्थापित, परिष्कृत) सिद्धांतों के अनुसार सीमित संख्या में जानवरों के साथ पुन: प्रस्तुत करने योग्य डेटा की अनुमति देता है। जबकि सेप्सिस अनुसंधान में पशु प्रयोगों को आसानी से प्रतिस्थापित नहीं किया जा सकता है, दोहराए जाने वाले माप जानवरों की कमी के लिए अनुमति देते हैं और सेप्टिक जानवरों को एनेस्थेटिक रखने से पीड़ा कम हो जाती है।

प्रस्तुत प्रणाली हेमोडायनामिक रूप से स्थिर जानवरों के साथ एंडोटॉक्सिमिया के लिए अनुमति देती है जैसा कि पहलेबताया गया था 9। जबकि औसत धमनी दबाव जानवरों में स्थिर रहता है, और एलपीएस उत्तेजना के ?...

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A Reproducible Intensive Care Unit-Oriented Endotoxin Model in Rats

यहां, हम चूहों में एक पुनरुत्पादक गहन देखभाल इकाई-उन्मुख एंडोटॉक्सिन मॉडल प्रस्तुत करते हैं।

चूहों में एक पुनरुत्पादक गहन देखभाल इकाई-उन्मुख एंडोटॉक्सिन मॉडल

Sepsis and septic shock remain the leading cause of death in intensive care units. Despite significant improvements in sepsis management, mortality still ...

यह प्रोटोकॉल एंडोटोक्सिमिया का मजबूत और पुनरुत्पादन योग्य मॉडल है जिसमें शारीरिक और आणविक मापदंडों का बार-बार मूल्यांकन किया जा सकता है। यह दृष्टिकोण सेप्सिस अनुसंधान में सवालों के जवाब देने में मदद कर सकता है। जबकि हमारा मॉडल पशु प्रयोगों को प्रतिस्थापित नहीं करता है, यह निरंतर बेहोश करने की क्रिया के माध्यम से सेप्सिस मॉडल को परिष्कृत करता है और दोहराए गए नमूने के माध्यम से जानवरों की संख्या को कम करता है।शुरुआती लोग धमनी और शिरापरक कैथेटर के सम्मिलन के साथ संघर्ष कर सकते हैं, लेकिन इन तकनीकों में महारत हासिल करने के लिए केवल सीमित प्रशिक्षण की आवश्यकता होती है। पूरे प्रयोगात्मक सेटअप का विज़ुअलाइज़ेशन शोधकर्ताओं को आईसीयू पर स्थिति की अधिक बारीकी से नकल करने के लिए अपने मॉडल को स्थापित करने या अनुकूलित करने की सुविधा प्रदान करता है। एक हीटिंग चटाई के लिए anesthetized जानवर को स्थानांतरित करके शुरू करो।शरीर का तापमान 36.5 और 37 डिग्री सेल्सियस के बीच रखना। सुनिश्चित करें कि जानवर नाक शंकु के साथ ऑक्सीजन प्रदान करके अनायास सांस ले रहा है। ट्रेकियोस्टोमी और धमनी और शिरापरक कैथेटर की स्थापना से पहले पैर की अंगुली चुटकी पलटा की अनुपस्थिति से संज्ञाहरण के स्तर की पुष्टि करें।आंखों की रक्षा के लिए मरहम का उपयोग करें। पर्याप्त ऑक्सीकरण के लिए दबाव और ऑक्सीजन संतृप्ति की निगरानी के साथ बाँझ सर्जिकल उपकरणों और कैथेटर तैयार करें। शिरापरक पहुंच की सुविधा के लिए चूहे की समीपस्थ पूंछ पर एक टॉर्निकेट लागू करें और पूंछ को शराब के साथ तीन बार कीटाणुरहित करें।हवा के इंजेक्शन से बचने वाली दो पार्श्व पूंछ नसों में से एक में एक 26-गेज अंतःशिरा कैथेटर पेश करें। अंतःशिरा कैथेटर रखने के बाद tourniquet खोलें और चिपकने वाला टेप के साथ जगह में अंतःशिरा कैथेटर को ठीक करें। निरंतर तरल पदार्थ और दवा आवेदन के लिए अंतःशिरा पहुंच के लिए तीन तरह से stopcocks के साथ सिरिंज पंपों कनेक्ट करें।जानवर के पूर्वकाल गर्दन क्षेत्र को शेव करके ट्रेकियोस्टोमी शुरू करें, और फिर शेव की गई त्वचा को पोविडोन आयोडीन समाधान के साथ तीन बार कीटाणुरहित करें। एक scalpel ब्लेड नंबर 10 का उपयोग कर एक दो सेंटीमीटर अनुदैर्ध्य चीरा प्रदर्शन. 2-0 रेशम टांके के साथ त्वचा को वापस लें।फिर स्पष्ट रूप से स्वरयंत्र और श्वासनली को सर्जिकल कैंची के साथ खोलने के लिए तैयार किया। श्वासनली में एक बाँझ श्वासनली प्रवेशनी डालें, एकतरफा वेंटिलेशन से बचने के लिए बहुत गहराई से प्रवेश न करने के लिए सावधान रहें। एक 2-ओ रेशम टांके का उपयोग करके जगह में कैनुला को ठीक करें और फिर दबाव या मात्रा-नियंत्रित वेंटिलेशन के लिए एक वेंटिलेटर से कैनुला को कनेक्ट करें।प्रयोग स्थापित करने से पहले द्रव प्रतिस्थापन प्रोटोकॉल, vasoconstrictor अनुप्रयोग प्रोटोकॉल, और गर्भपात मानदंड परिभाषित करें। पोविडोन आयोडीन समाधान के साथ चूहे की पूंछ को तीन बार कीटाणुरहित करें और फिर एक स्केलपेल का उपयोग करके त्वचा सर्कल को वेंट्रल साइड पर एक सेंटीमीटर अनुदैर्ध्य रूप से काटें, पूंछ धमनी की चोट से बचने के लिए बहुत गहराई से कटौती न करने का ध्यान रखें। धमनी को ध्यान से उजागर करने के लिए सर्जिकल माइक्रोस्कोप का उपयोग करें।सर्जिकल माइक्रो कैंची के साथ धमनी के आसपास प्रावरणी काटें। फिर समीपस्थ 6-0 रेशम टांके का प्रदर्शन करके धमनी के दूरस्थ भाग को लिगेट करें, लेकिन रेशम को कसें नहीं। डिस्टल और समीपस्थ रेशम टांके के बीच धमनी में एक 26-गेज कैथेटर पेश करें, और फिर कैथेटर को ठीक करने के लिए समीपस्थ रेशम सीवन को कस लें।निरंतर धमनी दबाव माप प्रदान करने के लिए कैथेटर को दबाव ट्रांसड्यूसर से कनेक्ट करें। इसके अतिरिक्त, दबाव ट्रांसड्यूसर से जुड़े कैथेटर और धमनी रक्त के नमूने के लिए 26-गेज कैथेटर के बीच एक तीन-तरफ़ा स्टॉपकॉक रखें। जानवर के एक स्थिर अवस्था में पहुंचने के बाद, एलपीएस इंजेक्ट करके और रक्त के नमूने एकत्र करके प्रेरित सेप्सिस।एक से चार के अनुपात में रिंगर के समाधान द्वारा रक्त के नमूनों से तरल पदार्थ की हानि को प्रतिस्थापित करें, हवा के अन्त: शल्यता को रोकने के लिए हर समय हवा के इंजेक्शन से बचें। औसत धमनी दबाव एलपीएस उत्तेजना के साथ और बिना जानवरों में स्थिर रहता है। एलपीएस-उपचारित जानवरों में सेप्सिस की विशेषताएं विकसित होती हैं, जैसे कि नकारात्मक आधार अतिरिक्त।एलपीएस-उपचारित जानवरों ने भी एक मजबूत भड़काऊ प्रतिक्रिया विकसित की, जिसे प्लाज्मा साइटोकिन्स द्वारा मापा गया था, जैसे कि कीमोअट्रैक्टेंट प्रोटीन -1, मोनोसाइट कीमोएट्रैक्टेंट प्रोटीन -1, और इंटरल्यूकिन -6। इस प्रोटोकॉल का प्रयास करते समय, तरल पदार्थ और वैसोप्रेसर रेजिमेंट्स को पूर्वनिर्धारित करने के साथ-साथ ठोस और पुन: प्रस्तुत करने योग्य अनुसंधान डेटा प्राप्त करने के लिए समाप्ति मानदंड को परिभाषित करना याद रखें। इस प्रोटोकॉल को अन्य सेप्सिस मॉडल के लिए अनुकूलित किया जा सकता है।इसलिए एक शोध प्रश्न का उत्तर सबसे उपयुक्त दृष्टिकोण के साथ और पशु कल्याण को कम करने, परिष्कृत करने, बदलने के सिद्धांतों के अनुसार दिया जाता है।

Research

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Medicine

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प्रत्यक्ष इंट्राट्रेकल लिपोपॉलीसैकराइड आसवन द्वारा चूहे में तीव्र फेफड़ों की चोट को प्रेरित करना

Airway administration of lipopolysaccharide (LPS) is a common way to study pulmonary inflammation and acute lung injury (ALI) in small animal models. ...

Halogenated Agent Delivery in Porcine Model of Acute Respiratory Distress Syndrome via an Intensive Care Unit Type Device

एक गहन देखभाल इकाई प्रकार डिवाइस के माध्यम से तीव्र श्वसन संकट सिंड्रोम के पोर्सीन मॉडल में हैलोजेनेटेड एजेंट डिलिवरी

Acute respiratory distress syndrome (ARDS) is a common cause of hypoxemic respiratory failure and death in critically ill patients, and there is an urgent ...