Name: a reproducible intensive care unit-oriented endotoxin model in rats
Uploaded: 2021-02-20T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Reproducible Intensive Care Unit-Oriented Endotoxin Model in Rats at JoVE.com

Yazarlar, Beatrice Beck-Schimmer (MD) ve Erik Schadde'ye (MD) eleştirel incelemeleri ve bu makale için değerli katkıları için teşekkür eder.

Bu protokolde sunulan tüm deneyler İsviçre'nin Zürih Kantonu Veterinerlik Otoriteleri tarafından onaylanmıştır (onay numaraları 134/2014 ve ZH088/19). Ayrıca, bu deneyde gerçekleştirilen tüm adımlar, İsviçre Tıp Bilimleri Akademisi (SAMS) tarafından Hayvanlarla Deneyler Kılavuzu ve Avrupa Laboratuvar Hayvanları Bilim Dernekleri Federasyonu (FELASA) Kılavuzlarına uygundur.
1. Anestezi indüksiyonu ve hayvan izleme
<ol><li>250-300 gram (g) ağırlığındaki erkek Wistar ...

<ol>
	<li>Hotchkiss, R. S., Karl, I. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+pathophysiology+and+treatment+of+sepsis.">The pathophysiology and treatment of sepsis.</a> New England Journal of Medicine. 348 (2), 138-150 (2003).</li><li>Singer, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Third+International+Consensus+Definitions+for+Sepsis+and+Septic+Shock+(Sepsis-3).">The Third International Consensus Definitions for Sepsis and Septic Shock (Sepsis-3).</a> Journal of the American Medical Association. 315 (8), 801-810 (2016).</li><li>Vincent, J. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessment+of+the+worldwide+burden+of+critical+illness:+the+intensive+care+over+nations+(ICON)+audit.">Assessment of the worldwide burden of critical illness: the intensive care over nations (ICON) audit.</a> Lancet Respiratory Medicine. 2 (5), 380-386 (2014).</li><li>Fleischmann, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessment+of+Global+Incidence+and+Mortality+of+Hospital-treated+Sepsis.+Current+Estimates+and+Limitations.">Assessment of Global Incidence and Mortality of Hospital-treated Sepsis. Current Estimates and Limitations.</a> American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine. 193 (3), 259-272 (2016).</li><li>Kumar, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Duration+of+hypotension+before+initiation+of+effective+antimicrobial+therapy+is+the+critical+determinant+of+survival+in+human+septic+shock.">Duration of hypotension before initiation of effective antimicrobial therapy is the critical determinant of survival in human septic shock.</a> Critical Care Medicine. 34 (6), 1589-1596 (2006).</li><li>Gotts, J. E., Matthay, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sepsis:+pathophysiology+and+clinical+management.">Sepsis: pathophysiology and clinical management.</a> British Medical Journal. 353, (2016).</li><li>Akira, S., Takeda, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Toll-like+receptor+signalling.">Toll-like receptor signalling.</a> Nature Reviews Immunology. 4 (7), 499-511 (2004).</li><li>Urner, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Insight+into+the+beneficial+immunomodulatory+mechanism+of+the+sevoflurane+metabolite+hexafluoro-2-propanol+in+a+rat+model+of+endotoxaemia.">Insight into the beneficial immunomodulatory mechanism of the sevoflurane metabolite hexafluoro-2-propanol in a rat model of endotoxaemia.</a> Clinical and Experimental Immunology. 181 (3), 468-479 (2015).</li><li>Beck-Schimmer, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Which+Anesthesia+Regimen+Is+Best+to+Reduce+Morbidity+and+Mortality+in+Lung+Surgery?:+A+Multicenter+Randomized+Controlled+Trial.">Which Anesthesia Regimen Is Best to Reduce Morbidity and Mortality in Lung Surgery?: A Multicenter Randomized Controlled Trial.</a> Anesthesiology. 125 (2), 313-321 (2016).</li><li>Deitch, E. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+sepsis+and+shock:+a+review+and+lessons+learned.">Animal models of sepsis and shock: a review and lessons learned.</a> Shock. 9 (1), 1-11 (1998).</li><li>Buras, J. A., Holzmann, B., Sitkovsky, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+sepsis:+setting+the+stage.">Animal models of sepsis: setting the stage.</a> Nature Reviews Drug Discovery. 4 (10), 854-865 (2005).</li><li>Perretti, M., Duncan, G. S., Flower, R. J., Peers, S. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Serum+corticosterone,+interleukin-1+and+tumour+necrosis+factor+in+rat+experimental+endotoxaemia:+comparison+between+Lewis+and+Wistar+strains.">Serum corticosterone, interleukin-1 and tumour necrosis factor in rat experimental endotoxaemia: comparison between Lewis and Wistar strains.</a> British Journal of Pharmacology. 110 (2), 868-874 (1993).</li><li>Marechal, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelial+glycocalyx+damage+during+endotoxemia+coincides+with+microcirculatory+dysfunction+and+vascular+oxidative+stress.">Endothelial glycocalyx damage during endotoxemia coincides with microcirculatory dysfunction and vascular oxidative stress.</a> Shock. 29 (5), 572-576 (2008).</li><li>Thiemermann, C., Ruetten, H., Wu, C. C., Vane, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+multiple+organ+dysfunction+syndrome+caused+by+endotoxin+in+the+rat:+attenuation+of+liver+dysfunction+by+inhibitors+of+nitric+oxide+synthase.">The multiple organ dysfunction syndrome caused by endotoxin in the rat: attenuation of liver dysfunction by inhibitors of nitric oxide synthase.</a> British Journal of Pharmacology. 116 (7), 2845-2851 (1995).</li><li>Osuchowski, M. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Minimum+quality+threshold+in+pre-clinical+sepsis+studies+(MQTiPSS):+an+international+expert+consensus+initiative+for+improvement+of+animal+modeling+in+sepsis.">Minimum quality threshold in pre-clinical sepsis studies (MQTiPSS): an international expert consensus initiative for improvement of animal modeling in sepsis.</a> Intensive Care Medicine Experimental. 6 (1), 26 (2018).</li><li>Fink, M. P., Heard, S. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Laboratory+models+of+sepsis+and+septic+shock.">Laboratory models of sepsis and septic shock.</a> Journal of Surgical Research. 49 (2), 186-196 (1990).</li><li>Buras, J. A., Holzmann, B., Sitkovsky, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+sepsis:+Setting+the+stage.">Animal models of sepsis: Setting the stage.</a> Nature Reviews Drug Discovery. 4 (10), 854-865 (2005).</li><li>Balls, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+principles+of+humane+experimental+technique:+timeless+insights+and+unheeded+warnings.">The principles of humane experimental technique: timeless insights and unheeded warnings.</a> Altex-Alternatives to Animal Experimentation. 27 (2), 144-148 (2010).</li></ol>

Burada açıklanan protokol, araştırma sorusuna göre uyarlanabilen, yüksek oranda tekrarlanabilir, ancak öğrenmesi basit bir sepsis modeline izin verir. Kalp atış hızı, kan basıncı ve periferik arteriyel oksijen satürasyonu gibi organ fonksiyonlarına atıfta bulunan temel in vivo veriler sürekli olarak toplanabilir ve deney boyunca kan örneklemesi tekrar tekrar yapılabilir. Ek olarak, sıvı replasman protokolleri ve vazopressör desteği ile ilgili değişiklikler yapılabilir. Hayvanların hemodinamik ...

Sepsis ve daha şiddetli formu olan septik şok, bir enfeksiyonun zeminindeki sendromlardır, sitokinlerin salınımı ile aşırı inflamatuar reaksiyonla sonuçlanır, baskılanmış bir bağışıklık savunması ve ölümcül sonuçlarla fizyolojik ve biyokimyasal değişikliklere yol açar 1,2. Bu dengesiz inflamatuar reaksiyon, akciğer, böbrek ve karaciğer gibi çeşitli hayati organlarda organ disfonksiyonu ve organ yetmezliği ile sonuçlanır. Sepsis, %373 ile bir hastanın yoğun bakım ünitesine (YBÜ) kabul edilmesinin en yaygın nedenlerinden biridir. Sepsisin mortalitesi günümüzde %20-30 civarında değişmektedir4. Erken ve etkili antibiyotik tedavisi son derece önemlidir5. Sıvı ve vazopressör resüsitasyonunun erken kurulması gerekir, bunun dışında tedavi tamamen destekleyicidir6.
Sepsis, organ disfonksiyonunun eşlik ettiği bakteri, mantar, virüs veya parazitlerle kanıtlanmış veya şüphelenilen bir enfeksiyon olarak tanımlanır. Septik şok kriterleri, tek başına sıvı tedavisine yanıt vermeyen başka bir kardiyovasküler kollaps olduğunda ve 2 milimol / litreden fazla laktat seviyesi mevcut olduğunda karşılanır2. Sepsise bağlı organ yetmezliği herhangi bir organda ortaya çıkabilir, ancak kardiyovasküler sistemde, beyinde, böbrekte, karaciğerde ve akciğerde çok yaygındır. Sepsis hastalarının çoğu, hastanın hava yolunu güvence altına almak, aspirasyondan korumak ve hipoksiyi önlemek veya üstesinden gelmek için yüksek oranda ilham verici oksijen ile pozitif son ekspiratuar ventilasyon uygulamak için endotrakeal entübasyona ihtiyaç duyar. Bir trakea tüpünü ve mekanik ventilasyonu tolere etmek için, hastalar genellikle sedasyona ihtiyaç duyarlar.
Gram negatif bakterilerin zarının bir bileşeni olarak lipopolisakkaritler (LPS) gibi endotoksinler, toll benzeri reseptör (TLR) 47 yoluyla güçlü bir enflamatuar reaksiyona neden olur. Tanımlanmış bir yolun aktivasyonu stabil bir inflamatuar reaksiyon sağlar. Sitokine bağlı nötrofil kemoattractant protein 1 (CINC-1), monosit kemoattractant protein 1 (MCP-1) ve interlökin 6 (IL-6) gibi sitokinler, bu model8'de şiddet ve sonuç için prognostik faktörler olarak bilinir. İntravenöz LPS uygulaması, sıçanlarda sepsisin çeşitli yönlerini incelemek için başarıyla kullanılmıştır 8,9.
Sepsisin tedavisi, özellikle öngörücü hayvan modellerinin eksikliği nedeniyle hala bir zorluktur. Sistemik inflamasyonun aktivasyonu ile endotokseminin farmakolojik tedavilerin geliştirilmesi için yeterli bir model olup olmadığı tartışmalıdır. Bununla birlikte, iyi bilinen LPS kaynaklı TLR 4 yolu ile önemli bilgiler edinilebilir.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>2-0 silk sutures</td>
			<td>Ethicon, Sommerville, NJ</td>
			<td>K833</td>
			<td>Standard surgical</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>26 intravenous catheter</td>
			<td>Becton Dickinson, Franklin Lakes, NJ</td>
			<td>391349</td>
			<td>Standard anesthesia equipment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>6-0 LOOK black braided silk</td>
			<td>Surgical Specalities Corporation, Wyomissing, PA</td>
			<td>SP114</td>
			<td>Standard surgical</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alaris Syringe Pump</td>
			<td>Bencton Dickinson</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Betadine</td>
			<td>Mundipharma, Basel, Switzerland</td>
			<td>7.68034E+12</td>
			<td>GTIN-number</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Curved fine tips microforceps</td>
			<td>World precision instruments (WPI), Sarasota, FL</td>
			<td>504513</td>
			<td>Facilitates vascular preparation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fine tips microforceps</td>
			<td>World precision instruments (WPI), Sarasota, FL</td>
			<td>501976</td>
			<td>Tips need to be polished regularly</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Infinity Delta XL Anesthesia monitoring</td>
			<td>Draeger, L&#252;beck, Germany</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane, 250 mL bottles</td>
			<td>Attane, Piramal, Mumbai, India</td>
			<td>LDNI 22098</td>
			<td>Standard vet. equipment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ketamine (Ketalar)</td>
			<td>Pfitzer, New York, NY</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lipopolysaccharide (LPS) from Escherichia coli, serotype 055:B5</td>
			<td>Sigma, Buchs, Switzerland</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Q-tips small</td>
			<td>Carl Roth GmbH, Karlsruhe, Germany</td>
			<td>EH11.1</td>
			<td>Standard surgical</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ringerfundin</td>
			<td>Bbraun, Melsungen, Germany</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tec-3 Isofluorane Vaporizer</td>
			<td>Ohmeda, GE-Healthcare, Chicago, IL</td>
			<td>not available anymore</td>
			<td>Standard vet. equipment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Xylazine (Xylazin Streuli)</td>
			<td>Streuli AG, Uznach, Switzerland</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a reproducible intensive care unit-oriented endotoxin model in rats

Sepsis ve septik şok, yoğun bakım ünitelerinde önde gelen ölüm nedeni olmaya devam etmektedir. Sepsis yönetiminde önemli iyileşmelere rağmen, mortalite hala %20-30 arasında değişmektedir. Sepsise bağlı çoklu organ yetmezliğini ve ölümünü azaltmak için yeni tedavi yaklaşımlarına acilen ihtiyaç vardır. Sağlam hayvan modelleri, bir veya daha fazla tedavi yaklaşımının yanı sıra fizyolojik ve moleküler parametreler üzerindeki etkilerini test etmeye izin verir. Bu yazıda basit bir hayvan modeli sunulmuştur.
İlk olarak, hayvanlarda uçucu madde kullanımı ile veya intraperitoneal anestezi ile genel anestezi indüklenir. İntravenöz kateter (kuyruk veni), trakeostomi yerleştirildikten ve intraarteriyel kateter (kuyruk arteri) yerleştirildikten sonra mekanik ventilasyona başlanır. Ortalama arteriyel kan basıncı, arteriyel kan oksijen doygunluğu ve kalp atış hızının temel değerleri kaydedilir.
Fosfat tamponlu salin içinde çözünmüş lipopolisakkaritlerin (1 miligram / kilogram vücut ağırlığı) enjeksiyonu, toll benzeri reseptör 4 aracılığıyla güçlü ve tekrarlanabilir bir enflamatuar yanıtı indükler. Sıvı düzeltmeleri ve norepinefrin uygulaması iyi kurulmuş protokollere dayanarak gerçekleştirilir.
Bu makalede sunulan hayvan modelinin öğrenilmesi kolaydır ve sedasyon, mekanik ventilasyon, sürekli kan basıncı monitörizasyonu ve tekrarlayan kan örneklemesi ile yoğun bakım ünitesinde klinik sepsis tedavisine yöneliktir. Ayrıca, model güvenilirdir ve hayvan araştırmalarının 3R (azaltma, değiştirme, rafine etme) ilkelerine uygun olarak sınırlı sayıda hayvanla tekrarlanabilir verilere izin verir. Sepsis araştırmalarındaki hayvan deneyleri kolayca değiştirilemezken, tekrarlayan ölçümler hayvanların azaltılmasına izin verir ve septik hayvanların anestezi altında tutulması acıyı azaltır.

Sunulan sistem, daha önce bildirildiği gibi hemodinamik olarak stabil hayvanlarla endotoksemiye izin verir9. LPS stimülasyonu olan ve LPS stimülasyonu olmayan hayvanlarda ortalama arteriyel basınç sabit kalırken, LPS ile tedavi edilen hayvan, negatif baz fazlalığı ve CINC-1 (867 ng / mL), MCP-1 (5027 ng / mL) ve IL-6 (867 ng / mL)8 gibi plazma sitokinleri (uygulamadan 6 saat sonra) ile ölçülen güçlü bir enflamatuar reaksiyon gibi sepsis özellikleri gelişti...

Watch this Scientific Journal Video about A Reproducible Intensive Care Unit-Oriented Endotoxin Model in Rats at JoVE.com

A Reproducible Intensive Care Unit-Oriented Endotoxin Model in Rats

Burada, sıçanlarda tekrarlanabilir bir yoğun bakım ünitesi odaklı endotoksin modeli sunuyoruz.

Sıçanlarda Tekrarlanabilir Yoğun Bakım Ünitesi Odaklı Bir Endotoksin Modeli

Sepsis and septic shock remain the leading cause of death in intensive care units. Despite significant improvements in sepsis management, mortality still ...

Bu protokol, fizyolojik ve moleküler parametrelerin tekrar tekrar değerlendirilebildiği sağlam ve tekrarlanabilir bir endotoksemi modelidir. Bu yaklaşım, sepsis araştırmalarındaki soruları cevaplamaya yardımcı olabilir. Modelimiz hayvan deneylerinin yerini almamakla birlikte, sürekli sedasyon yoluyla sepsis modellerini rafine eder ve tekrarlanan örnekleme yoluyla hayvan sayısını azaltır.Yeni başlayanlar arteriyel ve venöz kateterlerin yerleştirilmesiyle mücadele edebilir, ancak bu tekniklerde ustalaşmak için sadece sınırlı eğitim gereklidir. Tüm deney düzeneğinin görselleştirilmesi, araştırmacıların YBÜ'deki bir durumu daha yakından taklit etmek için modellerini kurmalarını veya uyarlamalarını kolaylaştırır. Anestezi uygulanan hayvanı bir ısıtma matına aktararak başlayın.Vücut ısısını 36.5 ila 37 santigrat derece arasında tutmak. Bir burun konisi ile oksijen sağlayarak hayvanın kendiliğinden nefes aldığından emin olun. Trakeostomi ve arteriyel ve venöz kateterlerin yerleştirilmesinden önce ayak parmağı sıkışma refleksinin yokluğu ile anestezi seviyesini doğrulayın.Gözleri korumak için bir merhem kullanın. Yeterli oksijenasyon için basınç ve oksijen doygunluğu izleme ile birlikte steril cerrahi aletler ve kateterler hazırlayın. Venöz erişimi kolaylaştırmak ve kuyruğu alkolle üç kez dezenfekte etmek için sıçanın proksimal kuyruğuna bir turnike uygulayın.Hava enjeksiyonundan kaçınarak iki lateral kuyruk damarından birine 26 gauge intravenöz kateter sürün. İntravenöz kateteri yerleştirdikten sonra turnikeyi çözün ve intravenöz kateteri yapışkan bantla yerine sabitleyin. Sürekli sıvı ve ilaç uygulaması için üç tıkayıcı pompaları intravenöz erişime bağlayın.Trakeostomiye hayvanın ön boyun bölgesini tıraş ederek başlayın ve ardından traş edilen cildi povidon iyot çözeltisi ile üç kez dezenfekte edin. 10 numaralı neşter bıçağı kullanarak iki santimetre boyuna bir kesi gerçekleştirin. Cildi 2-0 ipek dikişle geri çekin.Daha sonra cerrahi makasla açılacak gırtlak ve trakeayı açıkça hazırladı. Tek taraflı ventilasyonu önlemek için çok derine nüfuz etmemeye dikkat ederek trakeaya steril bir trakea kanülü yerleştirin. 2-O ipek sütür kullanarak kanülü yerine sabitleyin ve ardından basınç veya hacim kontrollü havalandırma için kanülü bir vantilatöre bağlayın.Deneyi kurmadan önce sıvı replasman protokollerini, vazokonstriktör uygulama protokollerini ve kürtaj kriterlerini tanımlayın. Sıçan kuyruğunu povidon iyot çözeltisi ile üç kez dezenfekte edin ve daha sonra kuyruk arterinin yaralanmasını önlemek için çok derin kesmemeye dikkat ederek cilt çemberini ventral tarafta bir santimetre uzunlamasına bir neşter kullanarak kesin. Arteri dikkatlice ortaya çıkarmak için cerrahi bir mikroskop kullanın.Arteri çevreleyen fasyayı cerrahi mikro makasla kesin. Daha sonra proksimal 6-0 ipek dikiş yaparak arterin distal kısmını yağlayın, ancak ipeği sıkmayın. Distal ve proksimal ipek sütür arasındaki artere 26 gauge'lik bir kateter yerleştirin ve ardından kateteri yerine sabitlemek için proksimal ipek sütürü sıkın.Sürekli arteriyel basınç ölçümü sağlamak için kateteri bir basınç dönüştürücüsüne bağlayın. Ek olarak, basınç dönüştürücüsüne bağlı kateter ile arteriyel kan örneklemesi için 26 gauge kateter arasına üç yönlü bir stopcock yerleştirin. Hayvan sabit bir duruma ulaştıktan sonra, LPS enjekte ederek sepsis indüklenir ve kan örnekleri toplanır.Kan örneklerinden sıvı kaybını Ringer'ın çözeltisi ile bir ila dört oranında değiştirin, hava embolisini önlemek için her zaman hava enjeksiyonundan kaçının. Ortalama arteriyel basınç, LPS stimülasyonu olan ve olmayan hayvanlarda sabit kalır. LPS ile tedavi edilen hayvanlar, negatif baz fazlalığı gibi sepsis özellikleri geliştirir.LPS ile tedavi edilen hayvanlar ayrıca, kemoattractant protein-1, monosit kemoattractant protein-1 ve interlökin-6 gibi plazma sitokinleri ile ölçülen güçlü bir enflamatuar reaksiyon geliştirdi. Bu protokolü denerken, sıvı ve vazopresör rejimlerini önceden tanımlamayı ve katı ve tekrarlanabilir araştırma verileri elde etmek için sonlandırma kriterlerini tanımlamayı unutmayın. Bu protokol diğer sepsis modellerine uyarlanabilir.Böylece bir araştırma sorusu en uygun yaklaşımla ve hayvan refahının azaltılması, rafine edilmesi, değiştirilmesi ilkelerine uygun olarak cevaplanır.

Research

JoVE Journal

Medicine

Spectral Karyotyping to Study Chromosome Abnormalities in Humans and Mice with Polycystic Kidney Disease

Polikistik Böbrek Hastalığı Olan İnsanlar ve Fareler kromozom anomalileri Eğitim Spektral Karyotipik

Conventional method to identify and classify individual chromosomes depends on the unique banding pattern of each chromosome in a specific species being ...

A Murine Closed-chest Model of Myocardial Ischemia and Reperfusion

Miyokard İskemi ve Reperfüzyon bir Mürin Kapalı göğüs Modeli

Surgical trauma by thoracotomy in open-chest models of coronary ligation induces an immune response which modifies different mechanisms involved in ...

Lavage-induced Surfactant Depletion in Pigs As a Model of the Acute Respiratory Distress Syndrome (ARDS)

Lavage-induced Surfactant Depletion in Pigs As a Model of the Acute Respiratory Distress Syndrome ARDS

Akut Solunum Sıkıntısı Sendromu Modeli itibariyle Domuzların lavaj kaynaklı Surfaktan tükenmesi (ARDS)

Various animal models of lung injury exist to study the complex pathomechanisms of human acute respiratory distress syndrome (ARDS) and evaluate future ...

A Model of Cardiac Remodeling Through Constriction of the Abdominal Aorta in Rats

Sıçanlarda Karın Aort Konstrüksiyon sayesinde Kardiyak Yaptırma Bir Model

Heart failure is one of the leading causes of death worldwide. It is a complex clinical syndromethat includes fatigue, dyspnea, exercise intolerance, and ...

A Model to Simulate Clinically Relevant Hypoxia in Humans

Bir Model İnsanlarda klinik İlgili ününüz Benzet

In case of apnea, arterial partial pressure of oxygen (pO2) decreases, while partial pressure of carbon dioxide (pCO2) increases. To avoid damage to ...

Use of a Central Venous Line for Fluids, Drugs and Nutrient Administration in a Mouse Model of Critical Illness

Kritik Hastalık Fare Modeli Sıvılar, Uyuşturucu ve Besin İdaresi için Santral Venöz Hattı Kullanımı

This protocol describes a centrally catheterized mouse model of prolonged critical illness. We combine the cecal ligation and puncture method to induce ...

Observational Study Protocol for Repeated Clinical Examination and Critical Care Ultrasonography Within the Simple Intensive Care Studies

Gözlem çalışması protokolü için tekrarlanan klinik muayene ve kritik bakım ultrasonografi basit yoğun bakım çalışmaları içinde

Longitudinal evaluations of critically ill patients by combinations of clinical examination, biochemical analysis and critical care ultrasonography (CCUS) ...

A Protocol to Set Up Needle-Free Connector with Positive Displacement on Central Venous Catheter in Intensive Care Unit

Yoğun bakım ünitesinde Merkezi venöz kateter üzerinde pozitif deplasmanlı Iğne Içermeyen konnektörü kurmak için bir protokol

Needle-free connectors were initially designed and promoted to avoid blood exposure for healthcare workers. Some recent data suggest that the latest ...

Inducing Acute Lung Injury in Mice by Direct Intratracheal Lipopolysaccharide Instillation

Doğrudan Intratracheal Lipopolysaccharide Instilasyon ile farelerde akut akciğer hasarının İndükleme

Airway administration of lipopolysaccharide (LPS) is a common way to study pulmonary inflammation and acute lung injury (ALI) in small animal models. ...

Halogenated Agent Delivery in Porcine Model of Acute Respiratory Distress Syndrome via an Intensive Care Unit Type Device

Akut Solunum Sıkıntısı Sendromunun Porcine Modelinde Yoğun Bakım Ünitesi Tipi Cihazla Halojenli Ajan Doğumu

Acute respiratory distress syndrome (ARDS) is a common cause of hypoxemic respiratory failure and death in critically ill patients, and there is an urgent ...