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•
10:24 min
March 18th, 2021
DOI :
10.3791/62025-v
Chapters
0:04
Introduction
0:30
Microstructured Single Cell Array Fabrication
3:16
Cell Seeding
4:21
Perfusion System
5:13
Time-Lapse Microscopy
6:44
Fluorescent Marker mRNA Transfection
7:34
Image Analysis and Fluorescence Readout
8:29
Results: Representative Image Analysis and Fluorescence Readout
9:34
Conclusion
Transcript
称为 LISCA 的单细胞阵列的活细胞成像也是数百个单个单元的荧光时间课程的自动读取。该方法的优点是,在相同的微环境中,从空间分离的细胞记录单个细胞反应,从而进行高效的排放分析,并具有出色的统计学。要制作单细胞阵列,请使用手术刀从 PDM 层中剪下包含六条微粉条的单个 PDM 杰作,并将杰作放在实验室长凳上,微型图案朝上。
使用剃须刀刀片将六条微图案条纹中的每一个剪切成 PDM 印章,切断一些图案区域,以确保邮票的边缘是开放的。接下来,小心地划伤六室滑梯盖滑梯的保护箔,以标记滑
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Summary
我们提出了一种利用微模式阵列从单个细胞获取荧光记者时间课程的方法。该协议描述了单细胞阵列的准备、活细胞扫描延时显微镜的设置和操作,以及用于自动预选、可视控制和跟踪每个粘附站点的细胞集成荧光时间课程的开源图像分析工具。
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