Name: separation of follicular cells and oocytes in ovarian follicles of zebrafish
Uploaded: 2021-04-18T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Separation of Follicular Cells and Oocytes in Ovarian Follicles of Zebrafish at JoVE.com

Dette forskningsarbejde blev støttet af National Natural Science Foundation of China [32060170, 31601205 og 31560334], gæsteforskerprojekt støttet af China Scholarship Council og fonden for State Key Laboratory of Freshwater Ecology and Biotechnology [2020FB05].

Alle de procedurer, der udføres i fiskeforsøg, er i overensstemmelse med reglerne fra Animal Experimentation Ethics Committee of Northwest Normal University.
1. Præparater
<ol><li>Dyr<ol>
<li>Brug voksne kvindelige zebrafisk med en kropslængde på 4-6 cm. BEMÆRK: Vi brugte zebrafisk fra et lokalt marked.</li>
		<li>Hav zebrafisken i et cirkuleret vandsystem med en 14 timers lys og 10 timers mørk cyklus ved ca. 28 °C.</li>
		<li>Foder fisk to gange dagligt med nyklækkede saltlage r...

<ol>
	<li>Clelland, E., Peng, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endocrine/paracrine+control+of+zebrafish+development.">Endocrine/paracrine control of zebrafish development.</a> Molecular and Cellular Endocrinology. 312, 42-52 (2009).</li><li>Ge, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intrafollicular+paracrine+communication+in+the+zebrafish+ovary:+the+state+of+the+art+of+an+emerging+model+for+the+study+of+vertebrate+folliculogenesis.">Intrafollicular paracrine communication in the zebrafish ovary: the state of the art of an emerging model for the study of vertebrate folliculogenesis.</a> Molecular and Cellular Endocrinology. 237, 1-10 (2005).</li><li>Li, J., Ge, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Zebrafish+as+a+model+for+studying+ovarian+development:+Recent+advances+from+targeted+gene+knockout+studies.">Zebrafish as a model for studying ovarian development: Recent advances from targeted gene knockout studies.</a> Molecular and Cellular Endocrinology. 507, 1-19 (2020).</li><li>Selman, K., Wallace, R. A., Sarka, A., Qi, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stages+of+oocyte+development+in+the+zebrafish,+Brachydanio+rerio.">Stages of oocyte development in the zebrafish, Brachydanio rerio.</a> Journal of Morphology. 218, 203-224 (1993).</li><li>Matzuk, M. M., Burns, K. H., Viveiros, M. M., Eppig, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intercellular+communication+in+the+mammalian+ovary:+oocytes+carry+the+conversation.">Intercellular communication in the mammalian ovary: oocytes carry the conversation.</a> Science. 296, 2178-2180 (2002).</li><li>Liu, L., Ge, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Growth+differentiation+factor+9+and+its+spatiotemporal+expression+and+regulation+in+the+zebrafish+ovary.">Growth differentiation factor 9 and its spatiotemporal expression and regulation in the zebrafish ovary.</a> Biology of Reproduction. 76, 294-302 (2007).</li><li>Zhou, R., Tsang, A. H., Lau, S. W., Ge, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pituitary+adenylate+cyclase-activating+polypeptide+(PACAP)+and+its+receptors+in+the+zebrafish+ovary:+evidence+for+potentially+dual+roles+of+PACAP+in+controlling+final+oocyte+maturation.">Pituitary adenylate cyclase-activating polypeptide (PACAP) and its receptors in the zebrafish ovary: evidence for potentially dual roles of PACAP in controlling final oocyte maturation.</a> Biology of Reproduction. 85, 615-625 (2011).</li><li>Li, J., Liu, Z., Wang, D., Cheng, C. H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Insulin-like+growth+factor+3+is+involved+in+oocyte+maturation+in+zebrafish.">Insulin-like growth factor 3 is involved in oocyte maturation in zebrafish.</a> Biology of Reproduction. 84, 476-486 (2011).</li><li>Pang, Y., Thomas, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+G+protein-coupled+estrogen+receptor+1,+GPER,+in+inhibition+of+oocyte+maturation+by+endogenous+estrogens+in+zebrafish.">Role of G protein-coupled estrogen receptor 1, GPER, in inhibition of oocyte maturation by endogenous estrogens in zebrafish.</a> Developmental Biology. 342, 194-206 (2010).</li><li>Peyton, C., Thomas, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Involvement+of+epidermal+growth+factor+receptor+signaling+in+estrogen+inhibition+of+oocyte+maturation+mediated+through+the+G+protein-coupled+estrogen+receptor+(Gper)+in+zebrafish+(Danio+rerio).">Involvement of epidermal growth factor receptor signaling in estrogen inhibition of oocyte maturation mediated through the G protein-coupled estrogen receptor (Gper) in zebrafish (Danio rerio).</a> Biology of Reproduction. 85, 42-50 (2011).</li><li>Welch, E. L., Eno, C. C., Nair, S., Lindeman, R. E., F, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functional+manipulation+of+maternal+gene+products+using+in+vitro+oocyte+maturation+in+zebrafish.">Functional manipulation of maternal gene products using in vitro oocyte maturation in zebrafish.</a> Journal of Visualized Experiments. (122), e55213 (2017).</li><li>Nair, S., Lindeman, R. E., Pelegri, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vitro+oocyte+culture-based+manipulation+of+zebrafish+maternal+genes.">In vitro oocyte culture-based manipulation of zebrafish maternal genes.</a> Developmental Dynamics. 242, 44-52 (2013).</li><li>Seki, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+a+reliable+in+vitro+maturation+system+for+zebrafish+oocytes.">Development of a reliable in vitro maturation system for zebrafish oocytes.</a> Reproduction. 135, 285-292 (2008).</li><li>Baars, D. L., Takle, K. A., Heier, J., Pelegri, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ploidy+manipulation+of+zebrafish+embryos+with+heat+shock+2+treatment.">Ploidy manipulation of zebrafish embryos with heat shock 2 treatment.</a> Journal of Visualized Experiments. , e54492 (2016).</li><li>Xie, S. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+technique+based+on+in+vitro+oocyte+injection+to+improve+CRISPR/Cas9+gene+editing+in+zebrafish.">A novel technique based on in vitro oocyte injection to improve CRISPR/Cas9 gene editing in zebrafish.</a> Scientific Reports. 6, 34555 (2016).</li><li>Li, J., Bai, L., Liu, Z., Wang, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dual+roles+of+PDE9a+in+meiotic+maturation+of+zebrafish+oocytes.">Dual roles of PDE9a in meiotic maturation of zebrafish oocytes.</a> Biochemical and Biophysical Research Communications. , (2020).</li></ol>

Vi beskriver her en ny metode til enkel og hurtig adskillelse af follikulære celler og oocytter fra zebrafisk æggestokkene follikler. Denne metode har flere fordele i forhold til den konventionelle metode. Primær blandt disse er den stærkt øgede lethed af adskillelse med høj effektivitet og effektivitet, da kun en enkelt og ekstern manipulation er påkrævet. Dette punkt øger anvendeligheden for forskere, der ikke er gode til mikroskopisk anatomi. Ifølge vores erfaring kan man med succes adskille follikulære cel...

Zebrafisk er en vigtig modelorganisme til undersøgelse af hvirveldyrudvikling og fysiologi. Zebrafisken kan tjene som en god model til at studere de molekylære mekanismer i æggestokkenes udvikling1,2,3. Mange funktioner i æggestokkene udvikling er meget bevaret under udviklingen fra fisk til pattedyr1,2. Svarende til de andre hvirveldyr, zebrafisk voksne har asynkrone æggestokke, der indeholder æggestokkene follikler af alle udviklingsstadier4. Follikel er det grundlæggende reproduktive element i æggestokken. Follikel består af oocyt, der er omgivet af et eller flere lag af somatiske celler kaldet follikulære celler. Udviklingen af follikler afhænger af den tovejskommunikation mellem oocytter og follikulære celler5. Det er vigtigt at adskille follikulære celler og oocytter fra æggestokkene follikler til forskellige forskningsformål såsom follikulær celle primære kultur, genekspression analyse, oocyt modning, og in vitro befrugtning.
Traditionelle adskillelsesmetoder omfatter mekanisk adskillelse ved tang og enzymatisk fordøjelse6,7,8,9,10. Men den mekaniske adskillelse med pincet er tidskrævende og besværlig. Det vil også forårsage den store skade på oocyten under adskillelsen. Selvom enzymfordøjelsesmetoden er enkel at betjene og kræver kort tid, skal behandlingstiden og enzymkoncentrationen valideres, og integriteten og overlevelsesraten for de isolerede oocytter er ikke ideel. Derfor har vi etableret en enkel metode til at adskille begge rum i forskellige udviklingsstadier ved hjælp af trukket glas kapillær rør.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr >
			<td >17&#945;,20&#946;-DHP</td>
			<td >Cayman</td>
			<td >16146-5 (5 mg)</td>
			<td ></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >24-well plate</td>
			<td >Corning</td>
			<td >3524</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Ampoule cutter</td>
			<td >AS ONE</td>
			<td >5-124-22 1 bag (100 pieces)</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Anhydrous Na2HPO4</td>
			<td >Kaixin Chemical</td>
			<td >500 g</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Brine shrimp</td>
			<td >Hongjie</td>
			<td >250 g</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >CaCl2</td>
			<td >Beichen Fangzheng</td>
			<td >500 g</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Culture dish</td>
			<td >Biosharp</td>
			<td >BS-90-D (10PCS/PK)</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >DAPI</td>
			<td >Solarbio</td>
			<td >S2110 (25mL)</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Dissecting Microscope</td>
			<td >ZEISS</td>
			<td >Stemi 305</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Dissection forcep</td>
			<td >VETUS</td>
			<td >HRC30</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Dissection scissor</td>
			<td >Kefu</td>
			<td >160 mm&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Fluorescence Stereomicroscope&#160;</td>
			<td >Leica</td>
			<td >M205C</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Glass capillary</td>
			<td >IWAKI</td>
			<td >IK-PAS-5P (200 pcs/PACK)</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Hoechst 33342</td>
			<td >Solarbio</td>
			<td >C0031 (1 mg)</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >KCl</td>
			<td >Beichen Fangzheng</td>
			<td >500 g</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >KH2PO4</td>
			<td >Kaixin Chemical</td>
			<td >500 g</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Leibovitz&#8217;s L-15 medium</td>
			<td >Gibco</td>
			<td >41300-039 (10&#215;1L)</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >MgSO4&#8226;7H2O</td>
			<td >Beichen Fangzheng</td>
			<td >500 g</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Micropipette tips</td>
			<td >Axygen</td>
			<td >MCT-150-C</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >NaCl</td>
			<td >Beichen Fangzheng</td>
			<td >500 g</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >NaHCO3</td>
			<td >Beichen Fangzheng</td>
			<td >500 g</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Penicilia-streptomycia</td>
			<td >Gibco</td>
			<td >#15140122 (100 mL)</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Stereomicroscope</td>
			<td >ZEISS</td>
			<td >Discover.v20</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

separation of follicular cells and oocytes in ovarian follicles of zebrafish

Zebrafisk er blevet en ideel model til at studere æggestokkenes udvikling af hvirveldyr. Follikel er den grundlæggende enhed af æggestokken, som består af oocytter og omgivende follikulære celler. Det er vigtigt at adskille både follikulære celler og oocytter til forskellige forskningsformål, såsom til primærkultur af follikulære celler, analyse af genekspression, oocytmodning og in vitro-befrugtning osv. Den konventionelle metode bruger pincet til at adskille begge rum, hvilket er besværligt, tidskrævende og har stor skade på oocyten. Her har vi etableret en enkel metode til at adskille begge rum ved hjælp af en trukket glas kapillær. Under et stereomikroskop kan oocytter og follikulære celler let adskilles ved pipetter i en trukket fin glaskapillær (diameteren afhænger af follikeldiameteren). Sammenlignet med den konventionelle metode har denne nye metode høj effektivitet i adskillelsen af både oocytter og follikulære celler og har lav skade på oocytterne. Endnu vigtigere er det, at denne metode kan anvendes på tidlige follikler, herunder på præ-vitellogenesis-fasen. Således kan denne enkle metode bruges til at adskille follikulære celler og oocytter af zebrafisk.

Denne metode kan bruges til at adskille follikulære celler og oocytter på forskellige stadier af æggestokkene follikel udvikling i zebrafisk. Figur 1 viser adskillelsen af zebrafisk oocytter og follikulære celler fra æggestokkene ved hjælp af et kapillærglasrør (figur 1). For at undersøge, om follikulærcellerne var adskilt fra intakte follikler, blev de intakte follikler og adskilte oocytter fra forskellige stadier af follikler fra PV-fasen til FG-fase...

Watch this Scientific Journal Video about Separation of Follicular Cells and Oocytes in Ovarian Follicles of Zebrafish at JoVE.com

Separation of Follicular Cells and Oocytes in Ovarian Follicles of Zebrafish

Her præsenterer vi en enkel metode til adskillelse af follikulære celler og oocytter i zebrafisk æggestokkene follikler, som vil lette undersøgelser af æggestokkene udvikling i zebrafisk.

Adskillelse af follikulære celler og oocytter i æggestokkene Follikler af zebrafisk

Zebrafish has become an ideal model to study the ovarian development of vertebrates. The follicle is the basic unit of the ovary, which consists of ...

Det overordnede mål med denne procedure er at adskille follikulære celler og Oocytes i æggestokkene follikulært zebrafisk. Follikulæren er den grundlæggende enhed af æggestokken, som består af Oocytterne og de omkringliggende follikulære celler. Det er det brede værktøj til at adskille både follikulær celle og udvendige rum for godt forskning politikker, herunder primær indfangning af follikulære celler og stiger på genekspression, alle mætning og in vitro befrugtning.For nylig er Zebrafish blevet en stærk model af Nissan, som studerer en kontrol af allerede udvikling. Her præsenterer vi en enkel metode, så adskiller follikulære celler og oocytter af zebrafisk follikulære, som vil lette undersøgelser af allerede udvikling i Zebrafish Den kommercielle, ingen masse eller de to adskiller om follikulære celler og alle sider af spins de bruger post, som har en labyrint, tidskrævende og havde stor skade på ydersiden. Her har vi etableret en enkel metode til to separate rum ved hjælp af eller en del briller Tamela sats under et rent rev.Vores Metro omfang, både udenfor og follikulære celler kan nemt fremstilles ved at skrive den trukket glas kapillær. For det første forberede en digter glas kapillær. Slå hovedet af glas kapillær på alkohol brænderen.Brug en fire sider til at strække glasset kapillær til rave kortet diameter. For det andet, desect at overate fra den voksne kvindelige fisk, isolere æggestokkene follikler fra æggestokken. Endelig bruge en pollet glas kapillær til at adskille follikulær celle og Oocyte fra æggestokkene follikler.Forbered glaskapillæren, skarpbeholderen, rigelig fræser, alkoholbrænder og en pincet. Lyv alkoholbrænderen, tag et glas kapillær med hjem og varm den ene ende af glaskapillæren på ilden af alkoholbrænder. Brug en pincet til at holde en anden ende af glas kapillær, stress glasset kapillær hurtigt og forsigtigt.Sæt glasaffaldet på skarpbeholderen. Brug den rigelige fræser Gretch på poolen med glas. Derefter bryde ud af pincet Forsigtigt at gøre en glat åbning af porten blik hurtigt brænde enden af glasset kapillær på alkohol brænder flere gange og gnid den åbne ende af rigelig kutter omhyggeligt.Tag hvordan akvariet fra det dyrkede vandsystem. Og nu binder de voksne kvinder ved at placere fisk på isvandet i mindst to til fem minutter, indtil fisk stopper Gills bevægelse. Tag fisken ud af isboksen og fjern den resterende vandfisk krop med håndklæde, placeret en fisk på D sektion plade med fire sæt.Fisk blev halshugget ved at servere Spang akkord ved hjælp af deres skarpe saks for at sikre døden. Brug dissekering saks til at skære som følger. Disseker fra Chloe skåret til gællerne langs midten af maven, skåret fra bredden af Chloe, skåret fra den forreste spids til rygsiden.Forsigtigt fjernet hud og muskler på den ene side af kroppen, udsætte de indre organer og tage sunde hele æggestokken med fire trin. Æggestokkene blev forsigtigt placeret straks i 100 millimeter i kultur, skålbeholder 60% L 50 median. Sendte et dissekerende mikroskop med transmitteret lysoptik baseret på størrelsen og morfologien af æggestokkenes follikler i forskellige stadier.Isoler disse æggestokke follikler manuelt ved hjælp af en øl af kappes fire sæt. Saml de isolerede æggestokkene follikler og læg dem i en anden kulturperler fad, der indeholder 60% L 50 medium, nice isolerede æggestokkene follikler vil blive brugt til at adskille follikulære celler og Oocytes. Sæt derefter en enhed til adskillelse.Brug et 30 centimeter plastrør. Den ene ende er forbundet med en en milliliter pipettespids med et filterelement. En anden ende er forbundet med en 200 mikroliter pipette spids.Under disecting mikroskop, skal du bruge munden til at styre luftstrømmen til at lade den defekte går flytter til poolen med glas kapillær derefter blæse dårskab går ud fra glasset kapillær. Under denne proces, follikulær celle og Oocytes af æggestokkene follikler kan adskilles. Dette er en adskillelse proces for en moden fase follikel.Under indåndingsprocessen løsnes follikulærcellelaget fra Oocyte, gør efter at have blæst follikulærcellen ud, og Oocyte kan adskilles. Dette er en fuld jorden fase follikel. Vi kan se, at follikulære cellelag er løsrevet fra Oocyte.Denne metode kan også anvendes i den tidlige fase æggestokkene follikler. Dette er en follikel på midten Latella Genesis fase. Dette er en follikel på tidlig vatella Genesis fase.Dette er en follikel på en pre-vatalla Genesis fase. Fra dette billede kan du se separationsprocessen. Panel et viser en intakt follikel på fuld vokset scenepanel.Panel to viser angulation af denne follikel i trukket glas kapillær. Panel tre viser follikulært blev blæst ud fra trukket glas kapillær. Panel fire angiver den vellykkede adskillelse F denuded Oocyte og follikulær celle.Selv denne metode, adskillelse af follikulær celle i Oocyte kan udføres på forskellige stadier follikler. Undersøg, om follikulære celler blev adskilt fra de intakte follikler. Intakt en follikel og er adskilt Oocyte fra forskellige stadier af follikler fra BV fase til FG fase blev plettet med DAPI.Kernen i follikulære celler kan farves af DAPI. Det blå signal fra DAPI blev observeret i intakte follikler, men ikke denuded Oocytes på disse forskellige stadier follikler. For yderligere at bekræfte den klare adskillelse, de intakte follikler og adskilt Oocytes var gutting til histologiske sektioner.DAPI med angivelse af resultater viste, at follikulære celler var klart fjernet og denuded Oocytes. Ved hjælp af denne metode, denuded Oocytes adskilt fra fuldvoksne fase follikler viste sig at gennemgå den spontane Oocyte modning. uden nogen form for behandling efter fire timers inkubation.Efter aktivering af vand, kan disse modnet Oocytes gennemgå den fulde chorion ekspansion. Dette resultat angiver den lave skade på Oocyte ved hjælp af denne metode. Således kan denne sennep bruges til at opnå denuded Oocyte til at studere Oocyte modnet ration af Zebra fisk.Follikulært lag af materiale til follikler kan fjernes af en kapillær glasrør. Disse kan befrugtes og overdrages til udklækningsfasen. Resultaterne tyder på, at denne metode kan bruges til In Vitro befrugtning i zebrafisk.Vi beskriver her en ny metode til hurtig og nem adskillelse af follikulær celle og Oocyte fra Zebra fisk æggestokkene Follikler. Denne metode har flere betydelige fordele, væltede metoder. Primær blandt disse er i høj grad at øge den lette adskillelse, da kun en enkelt og ekstern manipulation er påkrævet.Den øgede lethed af adskillelse øger tilgængeligheden af denne metode til de forskere, der ikke er dygtige til mikrodissection. For det andet, denne metode kan bruges til at adskille follikulær celle og Oocyte af æggestokkene follikler og tidlige udviklingsstadier, herunder PV, EBV MV fase, kan en sådan adskillelse ikke udføres på et tidligt stadium follikel ved hjælp af de nuværende metoder. For det tredje fører denne nye metode til mindre skade på Oocytes.Den denuded Oocytes adskilt af denne metode kan gennemgå Oocyte modning og kan befrugtes. Derudover kan denne metode også anvendes i andre fisk.

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Culture and Co-Culture of Mouse Ovaries and Ovarian Follicles

Kultur og Co-kultur Mouse æggestokke og ovariefollikler

The mammalian ovary is composed of ovarian follicles, each follicle consisting of a single oocyte surrounded by somatic granulosa cells, enclosed together ...

Analysis of Zebrafish Larvae Skeletal Muscle Integrity with Evans Blue Dye

Analyse af zebrafisk Larver Skeletmuskel Integritet med Evans blå farvestof

The zebrafish model is an emerging system for the study of neuromuscular disorders.  In the study of neuromuscular diseases, the integrity of the muscle ...

Isolation and Characterization of Single Cells from Zebrafish Embryos

Isolering og karakterisering af enkeltceller fra zebrafisk embryoer

The zebrafish (Danio rerio) is a powerful model organism to study vertebrate development. Though many aspects of zebrafish embryonic development have been ...

Immunomagnetic Separation of Fat Depot-specific Sca1high Adipose-derived Stem Cells (ASCs)

Immunomagnetic Separation of Fat Depot-specific Sca1high Adipose-derived Stem Cells ASCs

Immunomagnetisk Adskillelse af Fat Depot-specifikke Sca1<sup&gt; høj</sup&gt; adipøst afledte stamceller (ASC&#39;er)

The isolation of adipose-derived stem cells (ASCs) is an important method in the field of adipose tissue biology, adipogenesis, and extracellular matrix ...

Analysis of Chromosome Segregation, Histone Acetylation, and Spindle Morphology in Horse Oocytes

Analyse af kromosomsegregation, histonacetylering og spindelmorfologi i hesteococytter

The field of assisted reproduction has been developed to treat infertility in women, companion animals, and endangered species. In the horse, assisted ...

In Vitro Growth of Mouse Preantral Follicles Under Simulated Microgravity

In Vitro Growth of Mouse Preantral Follicles Under Simulated Microgravity

In Vitro Vækst af mus Preantral follikler Under simulerede vægtløshed

14 day-old mouse ovarian tissue and preantral follicles isolated from same-aged mice were incubated in a simulated microgravity culture system. We ...

Orthotopic Ovarian Transplantation Procedures to Investigate the Life- and Health-span Influence of Ovarian Senescence in Female Mice

Orthotopic æggestokkene Transplantation procedurer til at undersøge sundheds- og levetid indflydelse af æggestokkene gulne i hunmus

Ovarian transplantation was first conducted at Utah State University in 1963. In more recent work, heterochronic transplantation of mammalian ovaries is ...

Single-cell Photoconversion in Living Intact Zebrafish

Encellede Photoconversion i levende intakt zebrafisk

Animal and plant tissue is composed of distinct populations of cells. These cells interact over time to build and maintain the tissue and can cause ...

Computational Analysis of the Caenorhabditis elegans Germline to Study the Distribution of Nuclei, Proteins, and the Cytoskeleton

Computational Analysis of the Caenorhabditis elegans Germline to Study the Distribution of Nuclei, Proteins, and the Cytoskeleton

Beregningsmæssige analyse af Caenorhabditis elegans kønscelleoverførsel at studere Distribution kerner, proteiner og cytoskelettet

The Caenorhabditis elegans (C. elegans) germline is used to study several biologically important processes including stem cell development, apoptosis, and ...

Culture and Transfection of Zebrafish Primary Cells

Kultur og Transfektion af zebrafisk primærelementer

Zebrafish embryos are transparent and develop rapidly outside the mother, thus allowing for excellent in vivo imaging of dynamic biological processes in ...