Name: separation of follicular cells and oocytes in ovarian follicles of zebrafish
Uploaded: 2021-04-18T14:00:00
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この研究は中国国立自然科学財団[32060170、31601205および31560334]、中国奨学金協議会と淡水生態学とバイオテクノロジーの国家主要研究所の基金によって支援された客員研究員プロジェクト[2020FB05]によって支援されました。

魚の実験で行われる手順はすべて、ノースウェストノーマル大学動物実験倫理委員会の規則に従っています。
1. 準備
<ol><li>動物<ol>
<li>体長4~6cmの成虫の雌ゼブラフィッシュを使用してください。 注:私たちは地元の市場からゼブラフィッシュを使用しました。</li>
		<li>ゼブラフィッシュは、約28°Cで14時間光と10時間の暗いサイクルで循環水系に保管してください。</li>...

<ol>
	<li>Clelland, E., Peng, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endocrine/paracrine+control+of+zebrafish+development.">Endocrine/paracrine control of zebrafish development.</a> Molecular and Cellular Endocrinology. 312, 42-52 (2009).</li><li>Ge, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intrafollicular+paracrine+communication+in+the+zebrafish+ovary:+the+state+of+the+art+of+an+emerging+model+for+the+study+of+vertebrate+folliculogenesis.">Intrafollicular paracrine communication in the zebrafish ovary: the state of the art of an emerging model for the study of vertebrate folliculogenesis.</a> Molecular and Cellular Endocrinology. 237, 1-10 (2005).</li><li>Li, J., Ge, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Zebrafish+as+a+model+for+studying+ovarian+development:+Recent+advances+from+targeted+gene+knockout+studies.">Zebrafish as a model for studying ovarian development: Recent advances from targeted gene knockout studies.</a> Molecular and Cellular Endocrinology. 507, 1-19 (2020).</li><li>Selman, K., Wallace, R. A., Sarka, A., Qi, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stages+of+oocyte+development+in+the+zebrafish,+Brachydanio+rerio.">Stages of oocyte development in the zebrafish, Brachydanio rerio.</a> Journal of Morphology. 218, 203-224 (1993).</li><li>Matzuk, M. M., Burns, K. H., Viveiros, M. M., Eppig, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intercellular+communication+in+the+mammalian+ovary:+oocytes+carry+the+conversation.">Intercellular communication in the mammalian ovary: oocytes carry the conversation.</a> Science. 296, 2178-2180 (2002).</li><li>Liu, L., Ge, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Growth+differentiation+factor+9+and+its+spatiotemporal+expression+and+regulation+in+the+zebrafish+ovary.">Growth differentiation factor 9 and its spatiotemporal expression and regulation in the zebrafish ovary.</a> Biology of Reproduction. 76, 294-302 (2007).</li><li>Zhou, R., Tsang, A. H., Lau, S. W., Ge, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pituitary+adenylate+cyclase-activating+polypeptide+(PACAP)+and+its+receptors+in+the+zebrafish+ovary:+evidence+for+potentially+dual+roles+of+PACAP+in+controlling+final+oocyte+maturation.">Pituitary adenylate cyclase-activating polypeptide (PACAP) and its receptors in the zebrafish ovary: evidence for potentially dual roles of PACAP in controlling final oocyte maturation.</a> Biology of Reproduction. 85, 615-625 (2011).</li><li>Li, J., Liu, Z., Wang, D., Cheng, C. H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Insulin-like+growth+factor+3+is+involved+in+oocyte+maturation+in+zebrafish.">Insulin-like growth factor 3 is involved in oocyte maturation in zebrafish.</a> Biology of Reproduction. 84, 476-486 (2011).</li><li>Pang, Y., Thomas, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+G+protein-coupled+estrogen+receptor+1,+GPER,+in+inhibition+of+oocyte+maturation+by+endogenous+estrogens+in+zebrafish.">Role of G protein-coupled estrogen receptor 1, GPER, in inhibition of oocyte maturation by endogenous estrogens in zebrafish.</a> Developmental Biology. 342, 194-206 (2010).</li><li>Peyton, C., Thomas, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Involvement+of+epidermal+growth+factor+receptor+signaling+in+estrogen+inhibition+of+oocyte+maturation+mediated+through+the+G+protein-coupled+estrogen+receptor+(Gper)+in+zebrafish+(Danio+rerio).">Involvement of epidermal growth factor receptor signaling in estrogen inhibition of oocyte maturation mediated through the G protein-coupled estrogen receptor (Gper) in zebrafish (Danio rerio).</a> Biology of Reproduction. 85, 42-50 (2011).</li><li>Welch, E. L., Eno, C. C., Nair, S., Lindeman, R. E., F, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functional+manipulation+of+maternal+gene+products+using+in+vitro+oocyte+maturation+in+zebrafish.">Functional manipulation of maternal gene products using in vitro oocyte maturation in zebrafish.</a> Journal of Visualized Experiments. (122), e55213 (2017).</li><li>Nair, S., Lindeman, R. E., Pelegri, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vitro+oocyte+culture-based+manipulation+of+zebrafish+maternal+genes.">In vitro oocyte culture-based manipulation of zebrafish maternal genes.</a> Developmental Dynamics. 242, 44-52 (2013).</li><li>Seki, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+a+reliable+in+vitro+maturation+system+for+zebrafish+oocytes.">Development of a reliable in vitro maturation system for zebrafish oocytes.</a> Reproduction. 135, 285-292 (2008).</li><li>Baars, D. L., Takle, K. A., Heier, J., Pelegri, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ploidy+manipulation+of+zebrafish+embryos+with+heat+shock+2+treatment.">Ploidy manipulation of zebrafish embryos with heat shock 2 treatment.</a> Journal of Visualized Experiments. , e54492 (2016).</li><li>Xie, S. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+technique+based+on+in+vitro+oocyte+injection+to+improve+CRISPR/Cas9+gene+editing+in+zebrafish.">A novel technique based on in vitro oocyte injection to improve CRISPR/Cas9 gene editing in zebrafish.</a> Scientific Reports. 6, 34555 (2016).</li><li>Li, J., Bai, L., Liu, Z., Wang, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dual+roles+of+PDE9a+in+meiotic+maturation+of+zebrafish+oocytes.">Dual roles of PDE9a in meiotic maturation of zebrafish oocytes.</a> Biochemical and Biophysical Research Communications. , (2020).</li></ol>

ここでは、ゼブラフィッシュ卵巣卵胞から濾胞細胞と卵母細胞を簡単かつ迅速に分離するための新しい方法を説明する。この方法は、従来法に比していくつかの利点を有する。これらの中でも、単一の外部操作のみが必要となるため、高効率と有効性で大幅に増加した分離の容易さがあります。この点は、顕微鏡解剖学が苦手な研究者に対する適用性を高める。私たちの経験によると、ガラ?...

ゼブラフィッシュは脊椎動物の発達と生理学の研究のための主要なモデル生物です。ゼブラフィッシュは、卵巣の発達1、2、3の分子メカニズムを研究するための良いモデルとして役立ちます。卵巣の発達の多くの特徴は、魚から哺乳類1、2への進化の間に多く保存されている。他の脊椎動物と同様に、ゼブラフィッシュの成人は非同期卵巣を有し、全発育期4の卵巣卵胞を含む。卵胞は卵巣の基本的な生殖要素である。卵胞は卵胞細胞と呼ばれる体細胞の1つまたは複数の層で囲まれている卵母細胞から成っている。卵胞の発達は卵母細胞と濾胞細胞5の間の双方向通信に依存する。卵胞細胞の一次培養、遺伝子発現解析、卵母細胞成熟、体外受精などの異なる研究目的で、卵胞細胞と卵子を卵巣卵胞から分離することが重要です。
従来の分離方法には、鉗子と酵素消化6、7、8、9、10による機械的分離が含まれる。しかし、鉗子による機械的分離は時間がかかり、面倒です。また、分離中に卵母細胞に高い損傷を引き起こす。酵素消化法は操作が簡単で短時間を要しますが、処理時間と酵素濃度を検証する必要があり、単離された卵母細胞の完全性と生存率は理想的ではありません。そこで、引っ張られたガラスの毛管管を用いて、異なる発達段階で両方の区画を分離する簡単な方法を確立しました。

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr >
			<td >17&#945;,20&#946;-DHP</td>
			<td >Cayman</td>
			<td >16146-5 (5 mg)</td>
			<td ></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >24-well plate</td>
			<td >Corning</td>
			<td >3524</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Ampoule cutter</td>
			<td >AS ONE</td>
			<td >5-124-22 1 bag (100 pieces)</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Anhydrous Na2HPO4</td>
			<td >Kaixin Chemical</td>
			<td >500 g</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Brine shrimp</td>
			<td >Hongjie</td>
			<td >250 g</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >CaCl2</td>
			<td >Beichen Fangzheng</td>
			<td >500 g</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Culture dish</td>
			<td >Biosharp</td>
			<td >BS-90-D (10PCS/PK)</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >DAPI</td>
			<td >Solarbio</td>
			<td >S2110 (25mL)</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Dissecting Microscope</td>
			<td >ZEISS</td>
			<td >Stemi 305</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Dissection forcep</td>
			<td >VETUS</td>
			<td >HRC30</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Dissection scissor</td>
			<td >Kefu</td>
			<td >160 mm&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Fluorescence Stereomicroscope&#160;</td>
			<td >Leica</td>
			<td >M205C</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Glass capillary</td>
			<td >IWAKI</td>
			<td >IK-PAS-5P (200 pcs/PACK)</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Hoechst 33342</td>
			<td >Solarbio</td>
			<td >C0031 (1 mg)</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >KCl</td>
			<td >Beichen Fangzheng</td>
			<td >500 g</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >KH2PO4</td>
			<td >Kaixin Chemical</td>
			<td >500 g</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Leibovitz&#8217;s L-15 medium</td>
			<td >Gibco</td>
			<td >41300-039 (10&#215;1L)</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >MgSO4&#8226;7H2O</td>
			<td >Beichen Fangzheng</td>
			<td >500 g</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Micropipette tips</td>
			<td >Axygen</td>
			<td >MCT-150-C</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >NaCl</td>
			<td >Beichen Fangzheng</td>
			<td >500 g</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >NaHCO3</td>
			<td >Beichen Fangzheng</td>
			<td >500 g</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Penicilia-streptomycia</td>
			<td >Gibco</td>
			<td >#15140122 (100 mL)</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Stereomicroscope</td>
			<td >ZEISS</td>
			<td >Discover.v20</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

separation of follicular cells and oocytes in ovarian follicles of zebrafish

ゼブラフィッシュは、脊椎動物の卵巣の発達を研究するのに理想的なモデルとなっています。卵胞は卵巣の基本単位であり、卵母細胞および周囲の濾胞細胞からなる。卵胞細胞の一次培養、遺伝子発現の解析、卵母細胞成熟、体外受精など様々な研究目的で、卵胞細胞と卵母細胞の両方を分離することが重要です。従来の方法は、両方のコンパートメントを分離するために鉗子を使用し、これは面倒で時間がかかり、卵母細胞に高いダメージを与えます。ここでは、引っ張られたガラスキャピラリーを用いて、両方の区画を分離する簡単な方法を確立しました。立体顕微鏡では、卵母細胞と濾胞細胞は、引っ張られた細かいガラス毛細管でピペット処理することによって容易に分離することができる(直径は卵胞の直径に依存する)。従来の方法と比較して、この新しい方法は卵母細胞と濾胞細胞の両方を分離する効率が高く、卵母細胞への損傷が少ない。さらに重要なことは、この方法は、早期の卵胞に適用することができる前の早期発生期段階で。このように、この簡単な方法は、ゼブラフィッシュの濾胞細胞および卵母細胞を分離するために使用することができる。

この方法は、ゼブラフィッシュの卵巣卵胞の発達の異なる段階で濾胞細胞と卵母細胞を分離するために使用することができます。 図1 は、毛細管ガラス管を用いた卵巣卵胞からのゼブラフィッシュ卵母細胞および濾胞細胞の分離を示す(図1)。濾胞細胞が無傷の卵胞から分離されたかどうかを調べるには、PV段階からFG段階までの異なる段階の卵胞か...

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Separation of Follicular Cells and Oocytes in Ovarian Follicles of Zebrafish

ここでは、ゼブラフィッシュの卵巣卵胞で濾胞細胞と卵母細胞を分離するための簡単な方法を提示し、ゼブラフィッシュにおける卵巣の発達の調査を容易にする。

ゼブラフィッシュの卵巣卵胞における濾胞細胞と卵母細胞の分離

Zebrafish has become an ideal model to study the ovarian development of vertebrates. The follicle is the basic unit of the ovary, which consists of ...

この手順の全体的な目標は、ゼブラフィッシュの卵巣濾胞で濾胞細胞と卵母細胞を分離することです.卵胞は卵巣の基本単位であり、卵母細胞および周囲の濾胞細胞からなる。これは、濾胞細胞の一次捕獲および遺伝子発現、すべての飽和および体外受精の上昇を含むよく研究政策のための濾胞細胞および外のコンパートメントの両方を分離するための広い用具である。最近、ゼブラフィッシュは既に開発の制御を研究する日産の強力なモデルとなっています。ここでは、単純な方法を提示するので、ゼブラフィッシュの既に発達の調査を容易にするゼブラフィッシュ濾胞の濾胞細胞と卵母細胞を分離する商業、塊、または濾胞細胞に関する2つの分離とスピンのすべての側面は、迷路を有するポストを使用しており、時間がかかり、外部に高い損傷を与えた。ここでは、純粋なサンゴ礁の下でタメラレートを使用するか、または一部のガラスを使用して2つの別々のコンパートに簡単な方法を確立しました。私たちのメトロスコープは、外側と濾胞細胞の両方が引っ張られたガラスの毛細管を入力することによって容易に製造することができる。まず、詩人のガラス毛細血管を準備します。アルコールバーナーにガラス毛管の頭を打つ。ガラスキャピラリーをレイブカードの直径まで伸ばすには、4つの側面を使用します。第二に、成体雌魚から過剰に食い込む排剖は、卵巣から卵巣卵胞を単離する。最後に、ポーリングされたガラス毛細管を使用して、卵胞細胞と卵母細胞を卵巣卵胞から分離します。ガラスキャピラリー、シャープ容器、十分なカッター、アルコールバーナー、鉗子を準備します。アルコールバーナーを横にし、キャピラリーのグラスを家に持ち帰り、アルコールバーナーの火の上にガラス毛細血管の一端を加熱します。鉗子を使用してガラス毛細血管の別の端を保持し、ガラスの毛細管を素早く優しく強調します。ガラスの廃棄物をシャープ容器に入れます。ガラスでプールに十分なカッターGretchを使用してください。その後、穏やかに鉗子によって遮断し、ポートの視線の滑らかな開口部を作るために、すぐにアルコールバーナーにガラス毛細血管の端を数回燃やし、十分なカッターで開いた端を慎重にこすります。栽培された水系から魚の水槽を取る方法。そして今、魚がギルの動きを止めるまで、少なくとも2〜5分間氷水の上に魚を置くことによって、大人の女性を結び付けます。氷箱から魚を取り出し、残りの水魚体をタオルで取り除き、4セットのDセクションプレートに魚を置いた。魚は死を確実にするために鋭いはさみを使ってスパンコードを提供することによって首を切られた。はさみを解剖して次のように切ります。クロエから腹部の正中線に沿ってエラに切り取られた脱剖は、クロエの土手から切り取り、前先端から後側に切り取った。体の片側の皮膚と筋肉を穏やかに取り除き、内臓を露出させ、4つのステップで健康な卵巣全体を取る。卵巣を培養中の100ミリメートルに直ちに穏やかに入れ、容器60%L50中央値を容器に入れた。異なる段階の卵巣卵胞の大きさと形態に基づいて透過光光学で解剖顕微鏡を送った。4セットを争うビールを使用して、これらの卵巣卵胞を手動で分離する。分離された卵巣卵胞を収集し、60%L 50培地を含む別の培養皿に入れて、素敵な孤立した卵巣卵胞は、濾胞細胞および卵母細胞を分離するために使用される。次に、分離用のデバイスを設定します。30センチメートルのプラスチックチューブを使用してください。一端はフィルター要素と1ミリリットルのピペット先端と接続される。別の端は200マイクロリットルのピペットの先端と接続される。ディセッティング顕微鏡の下で、口を使って気流を制御し、欠陥のある人がガラス毛細血管でプールに移動し、ガラスの毛細血管から毛先を吹き飛ばします。この過程の間に、卵巣卵胞の濾胞細胞および卵母細胞は分離され得る。これは成熟した段階の卵胞のための分離プロセスである。吸入の過程の間に、濾胞細胞層は卵母細胞から剥離され、濾胞細胞と卵母細胞を吹き出した後に分離することができる。これは完全な地面の段階の毛包である。卵胞細胞層が卵母細胞から切り離されているのがわかります。この方法は、初期の卵巣卵胞にも適用することができる。これはラテッラ創世の段階の真ん中の卵胞です。これは初期のバテラ創世の段階で卵胞です。これはバタバラ創世前の段階での卵胞です。この写真から、分離のプロセスを見ることができます。パネル1は、完全に成長したステージパネルで無傷の卵胞を示しています。パネル2は、引っ張られたガラス毛細血管へのこの卵胞のアンギュレーションを示しています。パネル3は、引っ張られたガラス毛細血管から濾胞が吹き出されたことを示しています。パネル4は、正常な分離F裸卵細胞および濾胞細胞を示す。この方法でも、卵母細胞における濾胞細胞の分離は、異なる段階の卵胞で行うことができる。濾胞細胞が無傷の卵胞から分離されたかどうかを調査する。そのまま卵胞とは、BV段階からFG段階に異なる段階の卵胞から卵母細胞を分離し、DAPIで染色した。濾胞細胞の核は、DAPIによって染色することができる。DAPIの青色信号は、無傷の卵胞では観察されたが、これらの異なる段階の卵胞ではウーサイトを否定しなかった。さらに明確な分離を確認するために、無傷の卵胞と分離された卵母細胞は組織学的セクションにガットしていました。DAPI記載の結果は、濾胞細胞が明確に除去され、oocytesを否定したことを示した。この方法を用いて、完全に成長した段階の卵胞から分離された裸卵母細胞は、自発的な卵母細胞成熟を受けることが判明した。4時間のインキュベーション後に何の治療もせずに。水で活性化した後、これらの成熟した卵母細胞は、完全な絨毛の拡張を受けることができます。この結果は、この方法を使用して、Oocyte への低い損傷を示します。このように, このマスタードは、ゼブラ魚の卵母細胞成熟した配給を研究するための裸の卵母細胞を得るために使用することができます..毛包への物質の濾胞層は毛細管ガラス管によって除去することができる。これらは受精し、孵化段階に移すことができる。この結果は、この方法がゼブラ魚の体外受精に使用できることを示唆している。ここでは、シマウマ魚卵巣卵胞から濾胞細胞と卵母細胞を迅速かつ容易に分離するための新しい方法を説明する。この方法には、いくつかの重要な利点があり、方法論が覆されています。これらの中でも一次的に、単一および外部操作のみが必要となるため、分離の容易さを大幅に向上させることである。分離の容易さの増加は、マイクロ解剖に熟練していない研究者にこの方法の可用性を高める。第二に、この方法は、卵巣卵胞の濾胞細胞と卵母細胞を分離するために使用することができ、PV、EBV MV段階を含む、そのような分離は、現在の方法論を用いて初期段階の卵胞で行うことが出来ない。第三に、この新しい方法は、卵母細胞への損傷を減らします。この方法によって分離された裸の卵母細胞は、卵母細胞成熟を受けることができ、受精することができる。また、この方法は他の魚にも適用できます。

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Culture and Co-Culture of Mouse Ovaries and Ovarian Follicles

文化と共培養マウスの卵巣と卵胞

The mammalian ovary is composed of ovarian follicles, each follicle consisting of a single oocyte surrounded by somatic granulosa cells, enclosed together ...

Analysis of Zebrafish Larvae Skeletal Muscle Integrity with Evans Blue Dye

エバンスブルー色素でゼブラフィッシュ幼生骨格筋の整合性の分析

The zebrafish model is an emerging system for the study of neuromuscular disorders.  In the study of neuromuscular diseases, the integrity of the muscle ...

Isolation and Characterization of Single Cells from Zebrafish Embryos

ゼブラフィッシュ胚からの単一細胞の単離とキャラクタリゼーション

The zebrafish (Danio rerio) is a powerful model organism to study vertebrate development. Though many aspects of zebrafish embryonic development have been ...

Immunomagnetic Separation of Fat Depot-specific Sca1high Adipose-derived Stem Cells (ASCs)

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脂肪デポ固有のSca1の免疫磁気分離<sup&gt;高</sup&gt;脂肪由来幹細胞（ASCに）

The isolation of adipose-derived stem cells (ASCs) is an important method in the field of adipose tissue biology, adipogenesis, and extracellular matrix ...

Analysis of Chromosome Segregation, Histone Acetylation, and Spindle Morphology in Horse Oocytes

馬の卵母細胞における染色体分離、ヒストンアセチル化およびスピンドル形態の解析

The field of assisted reproduction has been developed to treat infertility in women, companion animals, and endangered species. In the horse, assisted ...

In Vitro Growth of Mouse Preantral Follicles Under Simulated Microgravity

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体外模擬微小重力下でのマウス前胞状卵胞の成長

14 day-old mouse ovarian tissue and preantral follicles isolated from same-aged mice were incubated in a simulated microgravity culture system. We ...

Orthotopic Ovarian Transplantation Procedures to Investigate the Life- and Health-span Influence of Ovarian Senescence in Female Mice

卵巣の老化雌マウスで寿命と健康影響を調査するため同所性卵巣移植手順

Ovarian transplantation was first conducted at Utah State University in 1963. In more recent work, heterochronic transplantation of mammalian ovaries is ...

Single-cell Photoconversion in Living Intact Zebrafish

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核の分布、蛋白質および細胞骨格を研究する線虫生殖細胞の解析

The Caenorhabditis elegans (C. elegans) germline is used to study several biologically important processes including stem cell development, apoptosis, and ...

Culture and Transfection of Zebrafish Primary Cells

文化、ゼブラフィッシュ初代培養細胞のトランスフェクション

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