Name: separation of follicular cells and oocytes in ovarian follicles of zebrafish
Uploaded: 2021-04-18T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Separation of Follicular Cells and Oocytes in Ovarian Follicles of Zebrafish at JoVE.com

Dette forskningsarbeidet ble støttet av National Natural Science Foundation of China [32060170, 31601205 og 31560334], gjesteforskerprosjekt støttet av China Scholarship Council og fondet til State Key Laboratory of Freshwater Ecology and Biotechnology [2020FB05].

Alle prosedyrene som utføres i fiskeforsøk er i samsvar med regelverket i Animal Experimentation Ethics Committee ved Northwest Normal University.
1. Forberedelser
<ol><li>Dyr<ol>
<li>Bruk voksen kvinnelig sebrafisk med en kroppslengde på 4-6 cm. MERK: Vi brukte sebrafisk fra et lokalt marked.</li>
		<li>Oppbevar sebrafisken i et sirkulert vannsystem med 14 timers lys og 10 timers mørk syklus ved ca. 28 °C.</li>
		<li>Fôr fisk to ganger daglig med nyutviklede saltlake reker.</li>
	<...

<ol>
	<li>Clelland, E., Peng, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endocrine/paracrine+control+of+zebrafish+development.">Endocrine/paracrine control of zebrafish development.</a> Molecular and Cellular Endocrinology. 312, 42-52 (2009).</li><li>Ge, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intrafollicular+paracrine+communication+in+the+zebrafish+ovary:+the+state+of+the+art+of+an+emerging+model+for+the+study+of+vertebrate+folliculogenesis.">Intrafollicular paracrine communication in the zebrafish ovary: the state of the art of an emerging model for the study of vertebrate folliculogenesis.</a> Molecular and Cellular Endocrinology. 237, 1-10 (2005).</li><li>Li, J., Ge, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Zebrafish+as+a+model+for+studying+ovarian+development:+Recent+advances+from+targeted+gene+knockout+studies.">Zebrafish as a model for studying ovarian development: Recent advances from targeted gene knockout studies.</a> Molecular and Cellular Endocrinology. 507, 1-19 (2020).</li><li>Selman, K., Wallace, R. A., Sarka, A., Qi, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stages+of+oocyte+development+in+the+zebrafish,+Brachydanio+rerio.">Stages of oocyte development in the zebrafish, Brachydanio rerio.</a> Journal of Morphology. 218, 203-224 (1993).</li><li>Matzuk, M. M., Burns, K. H., Viveiros, M. M., Eppig, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intercellular+communication+in+the+mammalian+ovary:+oocytes+carry+the+conversation.">Intercellular communication in the mammalian ovary: oocytes carry the conversation.</a> Science. 296, 2178-2180 (2002).</li><li>Liu, L., Ge, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Growth+differentiation+factor+9+and+its+spatiotemporal+expression+and+regulation+in+the+zebrafish+ovary.">Growth differentiation factor 9 and its spatiotemporal expression and regulation in the zebrafish ovary.</a> Biology of Reproduction. 76, 294-302 (2007).</li><li>Zhou, R., Tsang, A. H., Lau, S. W., Ge, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pituitary+adenylate+cyclase-activating+polypeptide+(PACAP)+and+its+receptors+in+the+zebrafish+ovary:+evidence+for+potentially+dual+roles+of+PACAP+in+controlling+final+oocyte+maturation.">Pituitary adenylate cyclase-activating polypeptide (PACAP) and its receptors in the zebrafish ovary: evidence for potentially dual roles of PACAP in controlling final oocyte maturation.</a> Biology of Reproduction. 85, 615-625 (2011).</li><li>Li, J., Liu, Z., Wang, D., Cheng, C. H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Insulin-like+growth+factor+3+is+involved+in+oocyte+maturation+in+zebrafish.">Insulin-like growth factor 3 is involved in oocyte maturation in zebrafish.</a> Biology of Reproduction. 84, 476-486 (2011).</li><li>Pang, Y., Thomas, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+G+protein-coupled+estrogen+receptor+1,+GPER,+in+inhibition+of+oocyte+maturation+by+endogenous+estrogens+in+zebrafish.">Role of G protein-coupled estrogen receptor 1, GPER, in inhibition of oocyte maturation by endogenous estrogens in zebrafish.</a> Developmental Biology. 342, 194-206 (2010).</li><li>Peyton, C., Thomas, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Involvement+of+epidermal+growth+factor+receptor+signaling+in+estrogen+inhibition+of+oocyte+maturation+mediated+through+the+G+protein-coupled+estrogen+receptor+(Gper)+in+zebrafish+(Danio+rerio).">Involvement of epidermal growth factor receptor signaling in estrogen inhibition of oocyte maturation mediated through the G protein-coupled estrogen receptor (Gper) in zebrafish (Danio rerio).</a> Biology of Reproduction. 85, 42-50 (2011).</li><li>Welch, E. L., Eno, C. C., Nair, S., Lindeman, R. E., F, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functional+manipulation+of+maternal+gene+products+using+in+vitro+oocyte+maturation+in+zebrafish.">Functional manipulation of maternal gene products using in vitro oocyte maturation in zebrafish.</a> Journal of Visualized Experiments. (122), e55213 (2017).</li><li>Nair, S., Lindeman, R. E., Pelegri, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vitro+oocyte+culture-based+manipulation+of+zebrafish+maternal+genes.">In vitro oocyte culture-based manipulation of zebrafish maternal genes.</a> Developmental Dynamics. 242, 44-52 (2013).</li><li>Seki, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+a+reliable+in+vitro+maturation+system+for+zebrafish+oocytes.">Development of a reliable in vitro maturation system for zebrafish oocytes.</a> Reproduction. 135, 285-292 (2008).</li><li>Baars, D. L., Takle, K. A., Heier, J., Pelegri, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ploidy+manipulation+of+zebrafish+embryos+with+heat+shock+2+treatment.">Ploidy manipulation of zebrafish embryos with heat shock 2 treatment.</a> Journal of Visualized Experiments. , e54492 (2016).</li><li>Xie, S. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+technique+based+on+in+vitro+oocyte+injection+to+improve+CRISPR/Cas9+gene+editing+in+zebrafish.">A novel technique based on in vitro oocyte injection to improve CRISPR/Cas9 gene editing in zebrafish.</a> Scientific Reports. 6, 34555 (2016).</li><li>Li, J., Bai, L., Liu, Z., Wang, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dual+roles+of+PDE9a+in+meiotic+maturation+of+zebrafish+oocytes.">Dual roles of PDE9a in meiotic maturation of zebrafish oocytes.</a> Biochemical and Biophysical Research Communications. , (2020).</li></ol>

Vi beskriver her en ny metode for enkel og rask separasjon av follikulære celler og oocytter fra sebrafisk eggstokksekkene. Denne metoden har flere fordeler i forhold til den konvensjonelle metoden. Primært blant disse er den sterkt økte separasjonen med høy effektivitet og effektivitet, da bare en enkelt og ekstern manipulering er nødvendig. Dette punktet øker anvendbarheten til forskere som ikke er flinke til mikroskopisk anatomi. Vår erfaring er at man med hell kan skille follikulære celler og oocytter fra en ...

Sebrafisk er en stor modellorganisme for studiet av virveldyrutvikling og fysiologi. Sebrafisken kan tjene som en god modell for å studere molekylære mekanismer for eggstokkutvikling1,2,3. Mange trekk ved ovarieutvikling er mye bevart under evolusjon fra fisk til pattedyr1,2. I likhet med de andre vertebratene har sebrafisk voksne asynkrone eggstokkene, som inneholder eggstokksekkene i alle utviklingsstadier4. Follikkelen er det grunnleggende reproduktive elementet i eggstokken. Follikkelen består av oocytten som er omgitt av ett eller flere lag med somatiske celler kalt follikulære celler. Utviklingen av follikler avhenger av toveis kommunikasjon mellom oocytter og follikulære celler5. Det er viktig å skille follikulære celler og oocytter fra eggstokksekkene til ulike forskningsformål som follikulær celle primærkultur, genuttrykksanalyse, oocyttmodning og in vitro befruktning.
Tradisjonelle separasjonsmetoder inkluderer mekanisk separasjon av tang og enzymatisk fordøyelse6,7,8,9,10. Imidlertid er den mekaniske separasjonen av tang tidkrevende og arbeidskrevende. Det vil også forårsake den høye skaden på oocytten under separasjon. Selv om enzym fordøyelsesmetoden er enkel å betjene og krever kort tid, bør behandlingstiden og enzymkonsentrasjonen valideres, og integriteten og overlevelsesgraden til de isolerte oocyttene er ikke ideelle. Derfor har vi etablert en enkel metode for å skille begge rommene på forskjellige utviklingsstadier ved hjelp av trukket glass kapillærrør.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr >
			<td >17&#945;,20&#946;-DHP</td>
			<td >Cayman</td>
			<td >16146-5 (5 mg)</td>
			<td ></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >24-well plate</td>
			<td >Corning</td>
			<td >3524</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Ampoule cutter</td>
			<td >AS ONE</td>
			<td >5-124-22 1 bag (100 pieces)</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Anhydrous Na2HPO4</td>
			<td >Kaixin Chemical</td>
			<td >500 g</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Brine shrimp</td>
			<td >Hongjie</td>
			<td >250 g</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >CaCl2</td>
			<td >Beichen Fangzheng</td>
			<td >500 g</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Culture dish</td>
			<td >Biosharp</td>
			<td >BS-90-D (10PCS/PK)</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >DAPI</td>
			<td >Solarbio</td>
			<td >S2110 (25mL)</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Dissecting Microscope</td>
			<td >ZEISS</td>
			<td >Stemi 305</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Dissection forcep</td>
			<td >VETUS</td>
			<td >HRC30</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Dissection scissor</td>
			<td >Kefu</td>
			<td >160 mm&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Fluorescence Stereomicroscope&#160;</td>
			<td >Leica</td>
			<td >M205C</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Glass capillary</td>
			<td >IWAKI</td>
			<td >IK-PAS-5P (200 pcs/PACK)</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Hoechst 33342</td>
			<td >Solarbio</td>
			<td >C0031 (1 mg)</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >KCl</td>
			<td >Beichen Fangzheng</td>
			<td >500 g</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >KH2PO4</td>
			<td >Kaixin Chemical</td>
			<td >500 g</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Leibovitz&#8217;s L-15 medium</td>
			<td >Gibco</td>
			<td >41300-039 (10&#215;1L)</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >MgSO4&#8226;7H2O</td>
			<td >Beichen Fangzheng</td>
			<td >500 g</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Micropipette tips</td>
			<td >Axygen</td>
			<td >MCT-150-C</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >NaCl</td>
			<td >Beichen Fangzheng</td>
			<td >500 g</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >NaHCO3</td>
			<td >Beichen Fangzheng</td>
			<td >500 g</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Penicilia-streptomycia</td>
			<td >Gibco</td>
			<td >#15140122 (100 mL)</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Stereomicroscope</td>
			<td >ZEISS</td>
			<td >Discover.v20</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

separation of follicular cells and oocytes in ovarian follicles of zebrafish

Sebrafisk har blitt en ideell modell for å studere eggstokkutviklingen av vertebrater. Follikkelen er den grunnleggende enheten av eggstokken, som består av oocytter og omkringliggende follikulære celler. Det er viktig å skille både follikulære celler og oocytter for ulike forskningsformål som for primærkultur av follikulære celler, analyse av genuttrykk, oocyttmodning og in vitro befruktning, etc. Den konvensjonelle metoden bruker tang for å skille begge rommene, som er arbeidskrevende, tidkrevende og har høy skade på oocytten. Her har vi etablert en enkel metode for å skille begge rommene ved hjelp av en trukket glasskapillær. Under et stereomikroskop kan oocytter og follikulære celler lett skilles ved pipettering i en trukket fin glasskapillær (diameteren avhenger av follikkeldiameteren). Sammenlignet med den konvensjonelle metoden har denne nye metoden høy effektivitet i å skille både oocytter og follikulære celler og har lav skade på oocyttene. Enda viktigere er at denne metoden kan brukes på tidlige follikler, inkludert på pre-vitellogenesis stadium. Dermed kan denne enkle metoden brukes til å skille follikulære celler og oocytter av sebrafisk.

Denne metoden kan brukes til å skille follikulære celler og oocytter på ulike stadier av ovarial follikkelutvikling i sebrafisk. Figur 1 viser separasjon av sebrafiskoocytter og follikulære celler fra eggstokksekkene ved hjelp av et kapillærglassrør (figur 1). For å undersøke om follikulære celler ble skilt fra intakte follikler, ble de intakte folliklene og separerte oocytter fra ulike stadier av follikler fra PV-stadiet til FG-scenen farget med DAPI (...

Watch this Scientific Journal Video about Separation of Follicular Cells and Oocytes in Ovarian Follicles of Zebrafish at JoVE.com

Separation of Follicular Cells and Oocytes in Ovarian Follicles of Zebrafish

Her presenterer vi en enkel metode for å skille follikulære celler og oocytter i sebrafisk eggstokksekkene, noe som vil lette undersøkelser av eggstokkutvikling i sebrafisk.

Separasjon av follikulære celler og oocytter i eggstokksekkene av sebrafisk

Zebrafish has become an ideal model to study the ovarian development of vertebrates. The follicle is the basic unit of the ovary, which consists of ...

Det overordnede målet med denne prosedyren er å skille follikulære celler og Oocytter i ovarie follikulær zebrafisk. Follikulær er den grunnleggende enheten til eggstokken, som består av Oocytter og de omkringliggende follikulære cellene. Det er det brede verktøyet for å skille både follikulærcellen og utvendige rom for brønnforskningspolitikk, inkludert primær fangst av follikulære celler og økning på genuttrykk, all metning og in vitro befruktning.Nylig har Zebrafish blitt en kraftig modell av Nissan, som studerer en kontroll over allerede utvikling. Her presenterer vi en enkel metode, så skiller follikulære celler og oocytter av Zebrafish follikulære som vil lette undersøkelser av allerede utvikling i Sebrafish Den kommersielle, ingen masse eller de to skiller om follikulære celler og alle sider av spinn bruker posten som har en labyrint, tidkrevende og hadde høy skade på utsiden. Her har vi etablert en enkel metode for to separate rom ved hjelp av eller delglass Tamela rate under et rent rev.Vårt Metro-omfang, både ute og follikulære celler, kan enkelt fremstilles ved å skrive inn den trukket glasskapillæren. For det første, lag en poet glass kapillær. Slå hodet av glass kapillær på alkoholbrenneren.Bruk en fire sider til å strekke glasskapillæren til ravekortdiameteren. For det andre, desect som overtar fra den voksne kvinnelige fisken, isolere eggstokksekkene fra eggstokken. Til slutt bruke en polled glass kapillær for å skille follikulær celle og Oocyte fra ovarie follikler.Forbered glasskapillæren, slipebeholderen, rikelig med kutter, alkoholbrenner og tang. Legg alkoholbrenneren, ta hjem et glass kapillær og varm den ene enden av glasskapillæren på brannen av alkoholbrenner. Bruk en tang til å holde en annen ende av glass kapillær, stress glass kapillær raskt og forsiktig.Sett glassavfallet på slipebeholderen. Bruk den store kutteren Gretch på bassenget med glass. Deretter brytes av tangene Forsiktig for å lage en jevn åpning av portblikket brenner raskt enden av glasskapillæren på alkoholbrenneren flere ganger og gni den åpne enden med rikelig kutter forsiktig.Ta hvordan fisketanken fra det dyrkede vannsystemet. Og nå knytter de voksne hunnene ved å plassere fisk på isvannet i minst to til fem minutter til fisken stopper Gill-bevegelsen. Ta ut fisken fra isboksen og fjern den gjenværende vannfiskkroppen med håndkle, sett en fisk på D-seksjonsplaten med fire sett.Fisk ble halshugget ved å servere Spang akkord ved hjelp av deres skarpe saks for å sikre døden. Bruk dissekering saks for å kutte som følger. Disseker fra Chloe kuttet til gjellene langs midtlinjen av magen, kuttet fra Chloes bank, kuttet fra den fremre spissen til dorsalsiden.Forsiktig fjernet huden og musklene på den ene siden av kroppen, eksponer de indre organene og ta sunn hele eggstokken med fire trinn. Eggstokkene ble forsiktig plassert umiddelbart i 100 millimeter i kultur, tallerkenbeholder 60% L 50 median. Sendte et dissekerende mikroskop med overført lysoptikk basert på størrelsen og morfologien til eggstokksekkene i forskjellige stadier.Isoler disse eggstokksekkene manuelt ved hjelp av en øl med vying fire sett. Samle de isolerte ovariesekkene og legg dem i en annen dyrket tallerken som inneholder 60% L 50 middels, fine isolerte eggstokksekkene vil bli brukt til å skille follikulære celler og Oocytter. Still deretter inn en enhet for separasjon.Bruk et plastrør på 30 centimeter. Den ene enden er forbundet med en en milliliter pipettespiss med et filterelement. En annen ende er forbundet med en 200 mikroliter pipettespiss.Under det disecting mikroskopet, bruk munnen til å kontrollere luftstrømmen for å la den defekte går beveger seg til bassenget med glass kapillær deretter blåse dårskap går ut fra glass kapillæren. Under denne prosessen kan follikulære celler og Oocytter av eggstokksekkene skilles. Dette er en separasjonsprosess for en moden fasesekk.Under innåndingsprosessen løsnes follikulært cellelag fra Oocyte, gjør etter å ha blåst ut follikulærcellen og Oocyte kan skilles. Dette er en full bakketrinn follikkel. Vi kan se at follikulært cellelag er løsrevet fra Oocyte.Denne metoden kan også brukes i tidlig stadium ovarial follikler. Dette er en follikkel på midten av Latella Genesis scenen. Dette er en follikkel på tidlig vatella Genesis stadium.Dette er en follikkel på et pre-vatalla Genesis stadium. Fra dette bildet kan du se separasjonsprosessen. Panel en viser en intakt follikkel på fullvoksen scenepanel.Panel to viser vinkelen på denne follikkelen i trukket glasskapillær. Panel tre viser at follikulæren ble blåst ut av den trukket glasskapillæren. Panel fire indikerer vellykket separasjon F denuded Oocyte og follikulær celle.Selv denne metoden, separasjon av follikulær celle i Oocyte kan utføres på forskjellige stadium follikler. Undersøk om follikulære celler ble skilt fra de intakte folliklene. Intakt en follikkel og er separert Oocyte fra ulike stadier av follikler fra BV scenen til FG scenen ble farget med DAPI.Kjernen i follikulære celler kan farges av DAPI. Det blå signalet fra DAPI ble observert i intakte follikler, men ikke benektet Oocytter på disse forskjellige stadiumsekkene. For ytterligere å bekrefte den klare separasjonen, sløyde de intakte folliklene og separerte Oocytter til de histologiske seksjonene.DAPI som sa resultater viste at follikulære celler ble tydelig fjernet og benektet Oocytter. Ved hjelp av denne metoden ble denuded Oocytes skilt fra fullvoksne scenefoskler funnet å gjennomgå den spontane Oocyte modningen. behandling etter fire timers inkubasjon.Etter aktivering med vann kan disse modne Oocytes gjennomgå hele chorion-utvidelsen. Dette resultatet indikerer den lave skaden på Oocyte ved hjelp av denne metoden. Dermed kan denne sennep brukes til å oppnå denuded Oocyte for å studere Oocyte modnet rasjon av Zebra fisk.Det follikulære laget av materiale til follikler kan fjernes av et kapillært glassrør. Disse kan befruktes og utvikles inn i klekkestadiet. Resultatene tyder på at denne metoden kan brukes til In Vitro befruktning i Zebra fisk.Vi beskriver her en ny metode for rask og enkel separasjon av follikulær celle og Oocyte fra Zebra fisk ovarial Follicles. Denne metoden har flere betydelige fordeler, veltet metoder. Primært blant disse er å øke den enkle separasjonen betydelig, da bare en enkelt og ekstern manipulering er nødvendig.Den økte separasjonsfriheten øker tilgjengeligheten av denne metoden til de forskerne som ikke er dyktige i mikrodeseksjon. For det andre kan denne metoden brukes til å skille follikulær celle og Oocyte av eggstokksekkene og tidlige utviklingsstadier, inkludert PV, EBV MV-stadium, slik separasjon kan ikke utføres på tidlig stadium follikkel ved hjelp av nåværende metoder. For det tredje fører denne nye metoden til mindre skade på Oocytes.De denuderte Oocytes skilt av denne metoden kan gjennomgå Oocyte modning og kan befruktes. I tillegg kan denne metoden også brukes i andre fisk.

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Culture and Co-Culture of Mouse Ovaries and Ovarian Follicles

Kultur og Co-Culture of Mouse Eggstokkene og ovariefollikler

The mammalian ovary is composed of ovarian follicles, each follicle consisting of a single oocyte surrounded by somatic granulosa cells, enclosed together ...

Analysis of Zebrafish Larvae Skeletal Muscle Integrity with Evans Blue Dye

Analyse av Sebrafisk Larver Skeletal Muscle Integrity med Evans blå Dye

The zebrafish model is an emerging system for the study of neuromuscular disorders.  In the study of neuromuscular diseases, the integrity of the muscle ...

Isolation and Characterization of Single Cells from Zebrafish Embryos

Isolering og karakterisering av enkeltceller fra sebrafisk embryo

The zebrafish (Danio rerio) is a powerful model organism to study vertebrate development. Though many aspects of zebrafish embryonic development have been ...

Immunomagnetic Separation of Fat Depot-specific Sca1high Adipose-derived Stem Cells (ASCs)

Immunomagnetic Separation of Fat Depot-specific Sca1high Adipose-derived Stem Cells ASCs

Immunomagnetisk Separasjon av Fat Depot spesifikke Sca1<sup&gt; høy</sup&gt; adipose-avledet stamceller (ASC)

The isolation of adipose-derived stem cells (ASCs) is an important method in the field of adipose tissue biology, adipogenesis, and extracellular matrix ...

Analysis of Chromosome Segregation, Histone Acetylation, and Spindle Morphology in Horse Oocytes

Analyse av kromosomsegregasjon, histonacetylering og spindelmorfologi i hesteokocytter

The field of assisted reproduction has been developed to treat infertility in women, companion animals, and endangered species. In the horse, assisted ...

In Vitro Growth of Mouse Preantral Follicles Under Simulated Microgravity

In Vitro Growth of Mouse Preantral Follicles Under Simulated Microgravity

In Vitro Veksten av musen Preantral follikler Under simulert mikrogravitasjon

14 day-old mouse ovarian tissue and preantral follicles isolated from same-aged mice were incubated in a simulated microgravity culture system. We ...

Orthotopic Ovarian Transplantation Procedures to Investigate the Life- and Health-span Influence of Ovarian Senescence in Female Mice

Orthotopic Ovarian transplantasjon prosedyrer for å undersøke og helse-levetid påvirkning av eggstokkene Senescence i kvinnelige mus

Ovarian transplantation was first conducted at Utah State University in 1963. In more recent work, heterochronic transplantation of mammalian ovaries is ...

Single-cell Photoconversion in Living Intact Zebrafish

Encellede Photoconversion i levende intakt sebrafisk

Animal and plant tissue is composed of distinct populations of cells. These cells interact over time to build and maintain the tissue and can cause ...

Computational Analysis of the Caenorhabditis elegans Germline to Study the Distribution of Nuclei, Proteins, and the Cytoskeleton

Computational Analysis of the Caenorhabditis elegans Germline to Study the Distribution of Nuclei, Proteins, and the Cytoskeleton

Beregningsorientert analyse av Caenorhabditis elegans Germline å studere distribusjon av kjerner, proteiner og Cytoskeleton

The Caenorhabditis elegans (C. elegans) germline is used to study several biologically important processes including stem cell development, apoptosis, and ...

Culture and Transfection of Zebrafish Primary Cells

Kultur og Transfection sebrafisk primære celler

Zebrafish embryos are transparent and develop rapidly outside the mother, thus allowing for excellent in vivo imaging of dynamic biological processes in ...