Name: separation of follicular cells and oocytes in ovarian follicles of zebrafish
Uploaded: 2021-04-18T14:00:00
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Este trabajo de investigación fue apoyado por la Fundación Nacional de Ciencias Naturales de China [32060170, 31601205 y 31560334], proyecto académico visitante apoyado por el Consejo de Becas de China y el fondo del Laboratorio Clave estatal de Ecología y Biotecnología de Agua Dulce [2020FB05].

Todos los procedimientos realizados en experimentos de peces están de acuerdo con las regulaciones del Comité de Ética de Experimentación Animal de la Universidad Normal del Noroeste.
1. Preparativos
<ol><li>animales<ol>
<li>Utilice pez cebra hembra adulto con una longitud corporal de 4-6 cm. NOTA: Utilizamos peces cebra de un mercado local.</li>
		<li>Mantenga el pez cebra en un sistema de agua circulante con una luz de 14 h y un ciclo oscuro de 10 h a unos 28 °C.</li>
		<li>Aliment...

<ol>
	<li>Clelland, E., Peng, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endocrine/paracrine+control+of+zebrafish+development.">Endocrine/paracrine control of zebrafish development.</a> Molecular and Cellular Endocrinology. 312, 42-52 (2009).</li><li>Ge, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intrafollicular+paracrine+communication+in+the+zebrafish+ovary:+the+state+of+the+art+of+an+emerging+model+for+the+study+of+vertebrate+folliculogenesis.">Intrafollicular paracrine communication in the zebrafish ovary: the state of the art of an emerging model for the study of vertebrate folliculogenesis.</a> Molecular and Cellular Endocrinology. 237, 1-10 (2005).</li><li>Li, J., Ge, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Zebrafish+as+a+model+for+studying+ovarian+development:+Recent+advances+from+targeted+gene+knockout+studies.">Zebrafish as a model for studying ovarian development: Recent advances from targeted gene knockout studies.</a> Molecular and Cellular Endocrinology. 507, 1-19 (2020).</li><li>Selman, K., Wallace, R. A., Sarka, A., Qi, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stages+of+oocyte+development+in+the+zebrafish,+Brachydanio+rerio.">Stages of oocyte development in the zebrafish, Brachydanio rerio.</a> Journal of Morphology. 218, 203-224 (1993).</li><li>Matzuk, M. M., Burns, K. H., Viveiros, M. M., Eppig, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intercellular+communication+in+the+mammalian+ovary:+oocytes+carry+the+conversation.">Intercellular communication in the mammalian ovary: oocytes carry the conversation.</a> Science. 296, 2178-2180 (2002).</li><li>Liu, L., Ge, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Growth+differentiation+factor+9+and+its+spatiotemporal+expression+and+regulation+in+the+zebrafish+ovary.">Growth differentiation factor 9 and its spatiotemporal expression and regulation in the zebrafish ovary.</a> Biology of Reproduction. 76, 294-302 (2007).</li><li>Zhou, R., Tsang, A. H., Lau, S. W., Ge, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pituitary+adenylate+cyclase-activating+polypeptide+(PACAP)+and+its+receptors+in+the+zebrafish+ovary:+evidence+for+potentially+dual+roles+of+PACAP+in+controlling+final+oocyte+maturation.">Pituitary adenylate cyclase-activating polypeptide (PACAP) and its receptors in the zebrafish ovary: evidence for potentially dual roles of PACAP in controlling final oocyte maturation.</a> Biology of Reproduction. 85, 615-625 (2011).</li><li>Li, J., Liu, Z., Wang, D., Cheng, C. H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Insulin-like+growth+factor+3+is+involved+in+oocyte+maturation+in+zebrafish.">Insulin-like growth factor 3 is involved in oocyte maturation in zebrafish.</a> Biology of Reproduction. 84, 476-486 (2011).</li><li>Pang, Y., Thomas, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+G+protein-coupled+estrogen+receptor+1,+GPER,+in+inhibition+of+oocyte+maturation+by+endogenous+estrogens+in+zebrafish.">Role of G protein-coupled estrogen receptor 1, GPER, in inhibition of oocyte maturation by endogenous estrogens in zebrafish.</a> Developmental Biology. 342, 194-206 (2010).</li><li>Peyton, C., Thomas, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Involvement+of+epidermal+growth+factor+receptor+signaling+in+estrogen+inhibition+of+oocyte+maturation+mediated+through+the+G+protein-coupled+estrogen+receptor+(Gper)+in+zebrafish+(Danio+rerio).">Involvement of epidermal growth factor receptor signaling in estrogen inhibition of oocyte maturation mediated through the G protein-coupled estrogen receptor (Gper) in zebrafish (Danio rerio).</a> Biology of Reproduction. 85, 42-50 (2011).</li><li>Welch, E. L., Eno, C. C., Nair, S., Lindeman, R. E., F, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functional+manipulation+of+maternal+gene+products+using+in+vitro+oocyte+maturation+in+zebrafish.">Functional manipulation of maternal gene products using in vitro oocyte maturation in zebrafish.</a> Journal of Visualized Experiments. (122), e55213 (2017).</li><li>Nair, S., Lindeman, R. E., Pelegri, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vitro+oocyte+culture-based+manipulation+of+zebrafish+maternal+genes.">In vitro oocyte culture-based manipulation of zebrafish maternal genes.</a> Developmental Dynamics. 242, 44-52 (2013).</li><li>Seki, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+a+reliable+in+vitro+maturation+system+for+zebrafish+oocytes.">Development of a reliable in vitro maturation system for zebrafish oocytes.</a> Reproduction. 135, 285-292 (2008).</li><li>Baars, D. L., Takle, K. A., Heier, J., Pelegri, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ploidy+manipulation+of+zebrafish+embryos+with+heat+shock+2+treatment.">Ploidy manipulation of zebrafish embryos with heat shock 2 treatment.</a> Journal of Visualized Experiments. , e54492 (2016).</li><li>Xie, S. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+technique+based+on+in+vitro+oocyte+injection+to+improve+CRISPR/Cas9+gene+editing+in+zebrafish.">A novel technique based on in vitro oocyte injection to improve CRISPR/Cas9 gene editing in zebrafish.</a> Scientific Reports. 6, 34555 (2016).</li><li>Li, J., Bai, L., Liu, Z., Wang, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dual+roles+of+PDE9a+in+meiotic+maturation+of+zebrafish+oocytes.">Dual roles of PDE9a in meiotic maturation of zebrafish oocytes.</a> Biochemical and Biophysical Research Communications. , (2020).</li></ol>

Aquí describimos un método novedoso para la separación simple y rápida de células foliculares y ocitos de folículos ováricos de pez cebra. Este método tiene varias ventajas sobre el método convencional. Primaria entre ellos está la mayor facilidad de separación con alta eficiencia y eficacia, ya que sólo se requiere una manipulación única y externa. Este punto aumenta la aplicabilidad a los investigadores que no son buenos en anatomía microscópica. Según nuestra experiencia, uno puede separar con éxito ...

El pez cebra es un organismo modelo importante para el estudio del desarrollo de vertebrados y la fisiología. El pez cebra puede servir como un buen modelo para estudiar los mecanismos moleculares del desarrollo ovárico1,2,3. Muchas características del desarrollo ovárico se conservan mucho durante la evolución de los peces a los mamíferos1,2. Al igual que los otros vertebrados, los adultos de pez cebra tienen ovarios asincrónicos, que contienen folículos ováricos de todas las etapas de desarrollo4. El folículo es el elemento reproductivo fundamental del ovario. El folículo consiste en el ócito que está rodeado por una o varias capas de células somáticas llamadas células foliculares. El desarrollo de folículos depende de la comunicación bidireccional entre ócitos y células foliculares5. Es vital separar las células foliculares y los ocitos de los folículos ováricos para diferentes propósitos de investigación como cultivo primario de células foliculares, análisis de expresión génica, maduración de ocitos y fertilización in vitro.
Los métodos de separación tradicionales incluyen separación mecánica por fórceps y digestión enzimática6,7,8,9,10. Sin embargo, la separación mecánica por fórceps requiere mucho tiempo y es laboriosa. También causará el alto daño al ócito durante la separación. Aunque el método de digestión enzimática es fácil de operar y requiere un corto tiempo, el tiempo de tratamiento y la concentración enzimática deben ser validados, y la integridad y la tasa de supervivencia de los ocitos aislados no son ideales. Por lo tanto, hemos establecido un método simple para separar ambos compartimentos en diferentes etapas de desarrollo utilizando tubos capilares de vidrio tirado.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr >
			<td >17&#945;,20&#946;-DHP</td>
			<td >Cayman</td>
			<td >16146-5 (5 mg)</td>
			<td ></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >24-well plate</td>
			<td >Corning</td>
			<td >3524</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Ampoule cutter</td>
			<td >AS ONE</td>
			<td >5-124-22 1 bag (100 pieces)</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Anhydrous Na2HPO4</td>
			<td >Kaixin Chemical</td>
			<td >500 g</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Brine shrimp</td>
			<td >Hongjie</td>
			<td >250 g</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >CaCl2</td>
			<td >Beichen Fangzheng</td>
			<td >500 g</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Culture dish</td>
			<td >Biosharp</td>
			<td >BS-90-D (10PCS/PK)</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >DAPI</td>
			<td >Solarbio</td>
			<td >S2110 (25mL)</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Dissecting Microscope</td>
			<td >ZEISS</td>
			<td >Stemi 305</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Dissection forcep</td>
			<td >VETUS</td>
			<td >HRC30</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Dissection scissor</td>
			<td >Kefu</td>
			<td >160 mm&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Fluorescence Stereomicroscope&#160;</td>
			<td >Leica</td>
			<td >M205C</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Glass capillary</td>
			<td >IWAKI</td>
			<td >IK-PAS-5P (200 pcs/PACK)</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Hoechst 33342</td>
			<td >Solarbio</td>
			<td >C0031 (1 mg)</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >KCl</td>
			<td >Beichen Fangzheng</td>
			<td >500 g</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >KH2PO4</td>
			<td >Kaixin Chemical</td>
			<td >500 g</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Leibovitz&#8217;s L-15 medium</td>
			<td >Gibco</td>
			<td >41300-039 (10&#215;1L)</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >MgSO4&#8226;7H2O</td>
			<td >Beichen Fangzheng</td>
			<td >500 g</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Micropipette tips</td>
			<td >Axygen</td>
			<td >MCT-150-C</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >NaCl</td>
			<td >Beichen Fangzheng</td>
			<td >500 g</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >NaHCO3</td>
			<td >Beichen Fangzheng</td>
			<td >500 g</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Penicilia-streptomycia</td>
			<td >Gibco</td>
			<td >#15140122 (100 mL)</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Stereomicroscope</td>
			<td >ZEISS</td>
			<td >Discover.v20</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

separation of follicular cells and oocytes in ovarian follicles of zebrafish

El pez cebra se ha convertido en un modelo ideal para estudiar el desarrollo ovárico de vertebrados. El folículo es la unidad básica del ovario, que consiste en ovocitos y células foliculares circundantes. Es vital separar tanto las células foliculares como los ocitos para diversos fines de investigación, tales como para el cultivo primario de células foliculares, análisis de la expresión génica, maduración de ocitos y fertilización in vitro, etc. El método convencional utiliza fórceps para separar ambos compartimentos, lo cual es laborioso, requiere mucho tiempo y tiene un alto daño al ócito. Aquí, hemos establecido un método simple para separar ambos compartimentos usando un capilar de vidrio tirado. Bajo un estereomicroscopio, los ócitos y las células foliculares se pueden separar fácilmente pipeteando en un capilar de vidrio fino tirado (el diámetro depende del diámetro del folículo). En comparación con el método convencional, este nuevo método tiene una alta eficiencia en la separación de ocitos y células foliculares y tiene un bajo daño a los ocitos. Más importante aún, este método se puede aplicar a los folículos en etapa temprana, incluso en la etapa previa a la vitellogénesis. Por lo tanto, este método simple se puede utilizar para separar las células foliculares y ocitos de pez cebra.

Este método se puede utilizar para separar células foliculares y ocitos en diferentes etapas del desarrollo de folículos ováricos en peces cebra. La Figura 1 muestra la separación de ocitos de pez cebra y células foliculares de folículos ováricos utilizando un tubo de vidrio capilar(Figura 1). Para investigar si las células foliculares estaban separadas de los folículos intactos, los folículos intactos y los ócitos separados de diferentes etapas de l...

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Separation of Follicular Cells and Oocytes in Ovarian Follicles of Zebrafish

Aquí, presentamos un método simple para separar células foliculares y ocitos en folículos ováricos de pez cebra, lo que facilitará las investigaciones del desarrollo ovárico en peces cebra.

Separación de células foliculares y ocitos en folículos ováricos de pez cebra

Zebrafish has become an ideal model to study the ovarian development of vertebrates. The follicle is the basic unit of the ovary, which consists of ...

El objetivo general de este procedimiento es separar las células foliculares y los ocitos en folicular ovárico del pez cebra. El folicular es la unidad básica del ovario, que consiste en los ovocitos y las células foliculares circundantes. Es la herramienta amplia para separar tanto la célula folicular como los compartimentos exteriores para políticas de investigación bien investigadas, incluida la captura primaria de células foliculares y aumentos de la expresión génica, toda la saturación y la fertilización in vitro.Recientemente, el pez cebra se ha convertido en un potente modelo de Nissan, que estudia un control del ya desarrollo. Aquí, presentamos un método simple, por lo que separa las células foliculares y los ocitos de folicular de pez cebra que facilitará las investigaciones del ya desarrollo en el pez cebra El comercial, ninguna masa o los dos separados sobre las células foliculares y todos los lados de los giros el están utilizando post que tiene un laberinto, lento y tenía un alto daño al exterior. Aquí, hemos establecido un método simple a dos compartimentos separados usando o parcialmente gafas Tamela tasa bajo un arrecife puro.Nuestro alcance metro, tanto fuera como las células foliculares se pueden fabricar fácilmente escribiendo el capilar de vidrio tirado. En primer lugar, preparar un capilar de vidrio poeta. Golpeó la cabeza del capilar de vidrio en el quemador de alcohol.Utilice cuatro lados para estirar el capilar de vidrio hasta el diámetro de la tarjeta rave. En segundo lugar, diseccionar que sobresalen de los peces hembra adultos, aislar los folículos ováricos del ovario. Finalmente usa un capilar de vidrio polinizado para separar la célula folicular y el Oocito de los folículos ováricos.Prepare el capilar de vidrio, un recipiente afilado, un cortador amplio, un quemador de alcohol y un fórceps. Acuéstese el quemador de alcohol, lleve a casa un vaso de capilar y caliente un extremo capilar de vidrio en el fuego del quemador de alcohol. Utilice un fórceps para sostener otro extremo del capilar de vidrio, estresar el capilar de vidrio rápida y suavemente.Ponga los residuos de vidrio en el recipiente de objetos punzantes. Utilice el amplio cortador Gretch en la piscina con vidrio. A continuación, romper por los fórceps suavemente para hacer una apertura suave de la mirada del puerto quemar rápidamente el extremo del capilar de vidrio en el quemador de alcohol varias veces y frotar el extremo abierto por un amplio cortador cuidadosamente.Tome cómo la pecera del sistema de agua cultivada. Y ahora las hembras adultas al colocar peces en el agua helada durante al menos dos a cinco minutos hasta que los peces detengan el movimiento de Gill. Saque el pescado de la caja de hielo y retire el cuerpo restante de peces de agua por toalla, coloque un pez en la placa de sección D con cuatro juegos.Los peces fueron decapitados sirviendo acordes de Spang usando sus tijeras afiladas para asegurar la muerte. Utilice tijeras diseccionantes para cortar de la siguiente manera. Diseccionar desde el corte de Chloe a las branquias a lo largo de la línea media del abdomen, cortado de la orilla de la Chloe, cortado de la punta anterior al lado dorsal.Retire suavemente la piel y los músculos de un lado del cuerpo, exponga los órganos internos y tome un ovario entero sano con cuatro pasos. Los ovarios fueron colocados suavemente inmediatamente en los 100 milímetros de cultivo, plato contenedor 60%L 50 mediana. Envió un microscopio diseccionador con óptica de luz transmitida basada en el tamaño y la morfología de folículos ováricos de diferentes etapas.Aísle estos folículos ováricos manualmente usando una cerveza de cuatro juegos. Recoger los folículos ováricos aislados y ponerlos en otro plato cultivado que contiene 60%L 50 medio, folículos ováricos aislados agradables se utilizarán para separar las células foliculares y Oocitos. A continuación, establezca un dispositivo para la separación.Utilice un tubo de plástico de 30 centímetros. Un extremo está conectado con una punta de pipeta de un mililitro con un elemento de filtro. Otro extremo está conectado con una punta de pipeta de 200 microlitros.Bajo el microscopio diseccionar, utilice la boca para controlar el flujo de aire para dejar que el defectuoso se mueva a la piscina con capilar de vidrio y luego sople la locura sale del capilar de vidrio. Durante este proceso, las células foliculares y los ocitos de folículos ováricos se pueden separar. Este es un proceso de separación para un folículo escénico maduro.Durante el proceso de inhalación, la capa celular folicular se separa del Oocito, lo hace después de soplar la célula folicular y se puede separar el Oocito. Este es un folículo de etapa terrestre completa. Podemos ver que la capa folicular de la célula está separada del Oocito.Este método también se puede aplicar en los folículos ováricos en etapa temprana. Este es un folículo en el escenario medio de Latella Genesis. Este es un folículo en la etapa temprana de vatella Génesis.Este es un folículo en una etapa pre-vatalla Génesis. Desde esta imagen, puede ver el proceso de separación. El panel uno muestra un folículo intacto en un panel de escenario completamente crecido.El panel dos muestra la angulación de este folículo en capilar de vidrio tirado. El panel tres muestra que el folicular fue soplado del capilar de vidrio tirado. El panel cuatro indica la separación exitosa F denuded Oocyte y célula folicular.Incluso este método, separación de células foliculares en Oocito se puede realizar en diferentes folículos escénicos. Investigue si las células foliculares fueron separadas de los folículos intactos. Intacto un folículo y está separado Oocito de diferentes etapas de folículos desde la etapa de BV hasta la etapa FG fueron teñidos con DAPI.El núcleo de las células foliculares puede ser manchado por DAPI. La señal azul de DAPI se observó en folículos intactos, pero no oocitos denostados en estos folículos de etapa diferente. Para confirmar aún más la clara separación, los folículos intactos y los oocitos separados estaban destripando a las secciones histológicas.Dapi afirmando resultados mostraron que las células foliculares fueron claramente removidas y denostadas Oocitos. Usando este método, se encontró que los ocitos denostados separados de los folículos escénicos adultos completos se sometieron a la maduración espontánea de Oocitos. sin ningún tratamiento después de cuatro horas de incubación.Después de la activación por agua, estos ocitos maduros pueden someterse a la expansión completa del coral. Este resultado indica el bajo daño al Oocito utilizando este método. Por lo tanto, esta mostaza se puede utilizar para obtener el oocito denuded para estudiar la ración madura de Oocyte de peces cebra.La capa folicular de material a folículos se puede eliminar mediante un tubo de vidrio capilar. Estos pueden ser fertilizados y descender a la etapa de eclosión. Los resultados sugieren que este método se puede utilizar para la fertilización in vitro en peces cebra.Aquí describimos un método novedoso para la separación rápida y fácil de células foliculares y oocitos de folículos ováricos de peces cebra. Este método tiene varias ventajas significativas, metodologías anuladas. La principal de ellas es aumentar en gran medida la facilidad de separación, ya que sólo se requiere una manipulación única y externa.La mayor facilidad de separación aumenta la disponibilidad de este método a aquellos investigadores no expertos en microdissección. En segundo lugar, este método se puede utilizar para separar la célula folicular y el oocito de folículos ováricos y las etapas tempranas del desarrollo, incluyendo PV, etapa EBV MV, dicha separación no se puede realizar en folículo en etapa temprana utilizando metodologías actuales. En tercer lugar, este nuevo método conduce a menos daño a los omacitos.Los ocitos denostados separados por este método pueden someterse a la maduración de Oocitos y pueden ser fertilizados. Además, este método también se puede aplicar en otros peces.

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Culture and Co-Culture of Mouse Ovaries and Ovarian Follicles

Cultura y Co-cultura de ratón ovarios y los folículos ováricos

The mammalian ovary is composed of ovarian follicles, each follicle consisting of a single oocyte surrounded by somatic granulosa cells, enclosed together ...

Investigación

Biología del Desarrollo

Analysis of Zebrafish Larvae Skeletal Muscle Integrity with Evans Blue Dye

Análisis de pez cebra larvas esquelético Integridad del músculo con el colorante azul de Evans

The zebrafish model is an emerging system for the study of neuromuscular disorders.  In the study of neuromuscular diseases, the integrity of the muscle ...

Isolation and Characterization of Single Cells from Zebrafish Embryos

Aislamiento y caracterización de células individuales a partir de embriones de pez cebra

The zebrafish (Danio rerio) is a powerful model organism to study vertebrate development. Though many aspects of zebrafish embryonic development have been ...

Immunomagnetic Separation of Fat Depot-specific Sca1high Adipose-derived Stem Cells (ASCs)

Immunomagnetic Separation of Fat Depot-specific Sca1high Adipose-derived Stem Cells ASCs

La separación inmunomagnética de Sca1 depósitos de grasa específica<sup&gt; alta</sup&gt; Células Madre derivadas de tejido adiposo (ASC)

The isolation of adipose-derived stem cells (ASCs) is an important method in the field of adipose tissue biology, adipogenesis, and extracellular matrix ...

Analysis of Chromosome Segregation, Histone Acetylation, and Spindle Morphology in Horse Oocytes

Análisis de la segregación cromosómica, acetilación de histonas y morfología de huso en ovocitos de caballo

The field of assisted reproduction has been developed to treat infertility in women, companion animals, and endangered species. In the horse, assisted ...

In Vitro Growth of Mouse Preantral Follicles Under Simulated Microgravity

In Vitro Growth of Mouse Preantral Follicles Under Simulated Microgravity

In Vitro Crecimiento de los folículos Preantral ratón bajo microgravedad simulada

14 day-old mouse ovarian tissue and preantral follicles isolated from same-aged mice were incubated in a simulated microgravity culture system. We ...

Orthotopic Ovarian Transplantation Procedures to Investigate the Life- and Health-span Influence of Ovarian Senescence in Female Mice

Ortotópico trasplante ovárico procedimientos para investigar la influencia de la vida y salud de la senescencia ovárica en ratones hembra

Ovarian transplantation was first conducted at Utah State University in 1963. In more recent work, heterochronic transplantation of mammalian ovaries is ...

Single-cell Photoconversion in Living Intact Zebrafish

Sola célula Photoconversion en pez cebra intacto de la vida

Animal and plant tissue is composed of distinct populations of cells. These cells interact over time to build and maintain the tissue and can cause ...

Computational Analysis of the Caenorhabditis elegans Germline to Study the Distribution of Nuclei, Proteins, and the Cytoskeleton

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Análisis computacional de lo elegans de Caenorhabditis del Germline para estudiar la distribución de núcleos, proteínas y citoesqueleto

The Caenorhabditis elegans (C. elegans) germline is used to study several biologically important processes including stem cell development, apoptosis, and ...

Culture and Transfection of Zebrafish Primary Cells

Cultura y transfección de células primarias de pez cebra

Zebrafish embryos are transparent and develop rapidly outside the mother, thus allowing for excellent in vivo imaging of dynamic biological processes in ...