Name: separation of follicular cells and oocytes in ovarian follicles of zebrafish
Uploaded: 2021-04-18T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Separation of Follicular Cells and Oocytes in Ovarian Follicles of Zebrafish at JoVE.com

Detta forskningsarbete stöddes av National Natural Science Foundation of China [32060170, 31601205 och 31560334], gästforskare projekt som stöds av China Scholarship Council och fonden för State Key Laboratory of Freshwater Ecology and Biotechnology [2020FB05].

Alla procedurer som utförs i fiskförsök är i enlighet med bestämmelserna i Animal Experimentation Ethics Committee of Northwest Normal University.
1. Förberedelser
<ol><li>Djur<ol>
<li>Använd vuxna kvinnliga zebrafiskar med en kroppslängd på 4-6 cm. Obs: Vi använde zebrafisk från en lokal marknad.</li>
		<li>Håll zebrafisken i ett cirkulerat vattensystem med en 14 h ljus och 10 h mörk cykel vid ca 28 °C.</li>
		<li>Mata fisk två gånger dagligen med nykläckta saltlakeräko...

<ol>
	<li>Clelland, E., Peng, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endocrine/paracrine+control+of+zebrafish+development.">Endocrine/paracrine control of zebrafish development.</a> Molecular and Cellular Endocrinology. 312, 42-52 (2009).</li><li>Ge, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intrafollicular+paracrine+communication+in+the+zebrafish+ovary:+the+state+of+the+art+of+an+emerging+model+for+the+study+of+vertebrate+folliculogenesis.">Intrafollicular paracrine communication in the zebrafish ovary: the state of the art of an emerging model for the study of vertebrate folliculogenesis.</a> Molecular and Cellular Endocrinology. 237, 1-10 (2005).</li><li>Li, J., Ge, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Zebrafish+as+a+model+for+studying+ovarian+development:+Recent+advances+from+targeted+gene+knockout+studies.">Zebrafish as a model for studying ovarian development: Recent advances from targeted gene knockout studies.</a> Molecular and Cellular Endocrinology. 507, 1-19 (2020).</li><li>Selman, K., Wallace, R. A., Sarka, A., Qi, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stages+of+oocyte+development+in+the+zebrafish,+Brachydanio+rerio.">Stages of oocyte development in the zebrafish, Brachydanio rerio.</a> Journal of Morphology. 218, 203-224 (1993).</li><li>Matzuk, M. M., Burns, K. H., Viveiros, M. M., Eppig, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intercellular+communication+in+the+mammalian+ovary:+oocytes+carry+the+conversation.">Intercellular communication in the mammalian ovary: oocytes carry the conversation.</a> Science. 296, 2178-2180 (2002).</li><li>Liu, L., Ge, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Growth+differentiation+factor+9+and+its+spatiotemporal+expression+and+regulation+in+the+zebrafish+ovary.">Growth differentiation factor 9 and its spatiotemporal expression and regulation in the zebrafish ovary.</a> Biology of Reproduction. 76, 294-302 (2007).</li><li>Zhou, R., Tsang, A. H., Lau, S. W., Ge, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pituitary+adenylate+cyclase-activating+polypeptide+(PACAP)+and+its+receptors+in+the+zebrafish+ovary:+evidence+for+potentially+dual+roles+of+PACAP+in+controlling+final+oocyte+maturation.">Pituitary adenylate cyclase-activating polypeptide (PACAP) and its receptors in the zebrafish ovary: evidence for potentially dual roles of PACAP in controlling final oocyte maturation.</a> Biology of Reproduction. 85, 615-625 (2011).</li><li>Li, J., Liu, Z., Wang, D., Cheng, C. H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Insulin-like+growth+factor+3+is+involved+in+oocyte+maturation+in+zebrafish.">Insulin-like growth factor 3 is involved in oocyte maturation in zebrafish.</a> Biology of Reproduction. 84, 476-486 (2011).</li><li>Pang, Y., Thomas, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+G+protein-coupled+estrogen+receptor+1,+GPER,+in+inhibition+of+oocyte+maturation+by+endogenous+estrogens+in+zebrafish.">Role of G protein-coupled estrogen receptor 1, GPER, in inhibition of oocyte maturation by endogenous estrogens in zebrafish.</a> Developmental Biology. 342, 194-206 (2010).</li><li>Peyton, C., Thomas, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Involvement+of+epidermal+growth+factor+receptor+signaling+in+estrogen+inhibition+of+oocyte+maturation+mediated+through+the+G+protein-coupled+estrogen+receptor+(Gper)+in+zebrafish+(Danio+rerio).">Involvement of epidermal growth factor receptor signaling in estrogen inhibition of oocyte maturation mediated through the G protein-coupled estrogen receptor (Gper) in zebrafish (Danio rerio).</a> Biology of Reproduction. 85, 42-50 (2011).</li><li>Welch, E. L., Eno, C. C., Nair, S., Lindeman, R. E., F, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functional+manipulation+of+maternal+gene+products+using+in+vitro+oocyte+maturation+in+zebrafish.">Functional manipulation of maternal gene products using in vitro oocyte maturation in zebrafish.</a> Journal of Visualized Experiments. (122), e55213 (2017).</li><li>Nair, S., Lindeman, R. E., Pelegri, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vitro+oocyte+culture-based+manipulation+of+zebrafish+maternal+genes.">In vitro oocyte culture-based manipulation of zebrafish maternal genes.</a> Developmental Dynamics. 242, 44-52 (2013).</li><li>Seki, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+a+reliable+in+vitro+maturation+system+for+zebrafish+oocytes.">Development of a reliable in vitro maturation system for zebrafish oocytes.</a> Reproduction. 135, 285-292 (2008).</li><li>Baars, D. L., Takle, K. A., Heier, J., Pelegri, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ploidy+manipulation+of+zebrafish+embryos+with+heat+shock+2+treatment.">Ploidy manipulation of zebrafish embryos with heat shock 2 treatment.</a> Journal of Visualized Experiments. , e54492 (2016).</li><li>Xie, S. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+technique+based+on+in+vitro+oocyte+injection+to+improve+CRISPR/Cas9+gene+editing+in+zebrafish.">A novel technique based on in vitro oocyte injection to improve CRISPR/Cas9 gene editing in zebrafish.</a> Scientific Reports. 6, 34555 (2016).</li><li>Li, J., Bai, L., Liu, Z., Wang, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dual+roles+of+PDE9a+in+meiotic+maturation+of+zebrafish+oocytes.">Dual roles of PDE9a in meiotic maturation of zebrafish oocytes.</a> Biochemical and Biophysical Research Communications. , (2020).</li></ol>

Vi beskriver här en ny metod för enkel och snabb separation av follikulära celler och äggceller från zebrafisk äggstockssäckar. Denna metod har flera fördelar jämfört med den konventionella metoden. Primärt bland dessa är den kraftigt ökade lättheten att separera med hög effektivitet och effektivitet, eftersom endast en enda och extern manipulering krävs. Denna punkt ökar tillämpligheten för forskare som inte är bra på mikroskopisk anatomi. Enligt vår erfarenhet kan man framgångsrikt separera folli...

Zebrafisk är en viktig modellorganism för studier av ryggradsdjursutveckling och fysiologi. Zebrafisken kan fungera som en bra modell för att studera de molekylära mekanismerna för äggstocksutveckling1,2,3. Många funktioner i äggstocksutveckling är mycket bevarade under evolutionen från fisk till däggdjur1,2. I likhet med de andra ryggradsdjuren har zebrafisk vuxna asynkrona äggstockar, innehållande äggstockssäckar i alla utvecklingsstadier4. Follikeln är äggstockens grundläggande reproduktiva element. Follikeln består av oocyten som är omgiven av ett eller flera lager av somatiska celler som kallas follikulära celler. Utvecklingen av folliklar beror på den dubbelriktade kommunikationen mellan oocyter och follikulära celler5. Det är viktigt att separera follikulära celler och oocyter från äggstockssäckar för olika forskningsändamål såsom follikulär cell primärkultur, genuttrycksanalys, oocytemognad och in vitro-befruktning.
Traditionella separationsmetoder inkluderar mekanisk separation med tång och enzymatisk matsmältning6,7,8,9,10. Den mekaniska separationen med tång är dock tidskrävande och mödosam. Det kommer också att orsaka de höga skadorna på äggcellen under separationen. Även om enzym matsmältningsmetoden är enkel att använda och kräver en kort tid, bör behandlingstiden och enzymkoncentrationen valideras, och integriteten och överlevnadsgraden för de isolerade äggcellerna är inte idealisk. Därför har vi etablerat en enkel metod för att separera båda facken i olika utvecklingsstadier med hjälp av dragna kapillärrör i glas.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr >
			<td >17&#945;,20&#946;-DHP</td>
			<td >Cayman</td>
			<td >16146-5 (5 mg)</td>
			<td ></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >24-well plate</td>
			<td >Corning</td>
			<td >3524</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Ampoule cutter</td>
			<td >AS ONE</td>
			<td >5-124-22 1 bag (100 pieces)</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Anhydrous Na2HPO4</td>
			<td >Kaixin Chemical</td>
			<td >500 g</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Brine shrimp</td>
			<td >Hongjie</td>
			<td >250 g</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >CaCl2</td>
			<td >Beichen Fangzheng</td>
			<td >500 g</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Culture dish</td>
			<td >Biosharp</td>
			<td >BS-90-D (10PCS/PK)</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >DAPI</td>
			<td >Solarbio</td>
			<td >S2110 (25mL)</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Dissecting Microscope</td>
			<td >ZEISS</td>
			<td >Stemi 305</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Dissection forcep</td>
			<td >VETUS</td>
			<td >HRC30</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Dissection scissor</td>
			<td >Kefu</td>
			<td >160 mm&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Fluorescence Stereomicroscope&#160;</td>
			<td >Leica</td>
			<td >M205C</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Glass capillary</td>
			<td >IWAKI</td>
			<td >IK-PAS-5P (200 pcs/PACK)</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Hoechst 33342</td>
			<td >Solarbio</td>
			<td >C0031 (1 mg)</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >KCl</td>
			<td >Beichen Fangzheng</td>
			<td >500 g</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >KH2PO4</td>
			<td >Kaixin Chemical</td>
			<td >500 g</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Leibovitz&#8217;s L-15 medium</td>
			<td >Gibco</td>
			<td >41300-039 (10&#215;1L)</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >MgSO4&#8226;7H2O</td>
			<td >Beichen Fangzheng</td>
			<td >500 g</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Micropipette tips</td>
			<td >Axygen</td>
			<td >MCT-150-C</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >NaCl</td>
			<td >Beichen Fangzheng</td>
			<td >500 g</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >NaHCO3</td>
			<td >Beichen Fangzheng</td>
			<td >500 g</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Penicilia-streptomycia</td>
			<td >Gibco</td>
			<td >#15140122 (100 mL)</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Stereomicroscope</td>
			<td >ZEISS</td>
			<td >Discover.v20</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

separation of follicular cells and oocytes in ovarian follicles of zebrafish

Zebrafisk har blivit en idealisk modell för att studera äggstocksutvecklingen hos ryggradsdjur. Follikeln är äggstockens grundläggande enhet, som består av oocyter och omgivande follikulära celler. Det är viktigt att separera både follikulära celler och oocyter för olika forskningsändamål såsom för primär odling av follikulära celler, analys av genuttryck, oocytemognad och in vitro-befruktning etc. Den konventionella metoden använder tång för att separera båda facken, vilket är mödosamt, tidskrävande och har hög skada på äggcellen. Här har vi etablerat en enkel metod för att separera båda facken med hjälp av en dragen glas kapillär. Under ett stereomikroskop kan oocyter och follikulära celler enkelt separeras genom pipettering i ett utdraget fint glas kapillär (diametern beror på follikeldiametern). Jämfört med den konventionella metoden har denna nya metod hög effektivitet vid separation av både oocyter och follikulära celler och har låg skada på äggcellerna. Ännu viktigare är att denna metod kan tillämpas på tidiga folliklar inklusive i pre-vitellogenesis-stadiet. Således kan denna enkla metod användas för att separera follikulära celler och oocyter av zebrafisk.

Denna metod kan användas för att separera follikulära celler och oocyter i olika stadier av äggstocks follikelutveckling hos zebrafisk. Figur 1 visar separationen av zebrafiskoocyter och follikulära celler från äggstockssäckar med hjälp av ett kapillärglasrör (figur 1). För att undersöka om follikulära celler separerades från intakta folliklar, var de intakta folliklarna och separerade oocyter från olika stadier av folliklar från PV-stadiet till...

Watch this Scientific Journal Video about Separation of Follicular Cells and Oocytes in Ovarian Follicles of Zebrafish at JoVE.com

Separation of Follicular Cells and Oocytes in Ovarian Follicles of Zebrafish

Här presenterar vi en enkel metod för att separera follikulära celler och äggceller i zebrafisk äggstockssäckar, vilket kommer att underlätta undersökningar av äggstocksutveckling hos zebrafisk.

Separation av follikulära celler och oocyter i äggstockssäckar av zebrafisk

Zebrafish has become an ideal model to study the ovarian development of vertebrates. The follicle is the basic unit of the ovary, which consists of ...

Det övergripande målet med detta förfarande är att separera follikulära celler och Oocyter i äggstockscancer follikulärt av Zebrafish. Follikeln är den grundläggande enheten i äggstocken, som består av Oocyterna och de omgivande follikulära cellerna. Det är det breda verktyget för att separera både follikulära celler och yttre fack för välforskningspolitik inklusive primär fångst av follikulära celler och ökningar på genuttryck, all mättnad och in vitro-befruktning.Nyligen har Zebrafish blivit en kraftfull modell av Nissan, som studerar en kontroll av redan utveckling. Här presenterar vi en enkel metod, så separerar follikulära celler och oocyter av Zebrafish follikulär som kommer att underlätta undersökningar av redan utveckling i Zebrafish Den kommersiella, ingen massa eller de två separerar om follikulära celler och alla sidor av spinn använder stolpe som har en labyrint, tidskrävande och hade hög skada på utsidan. Här har vi etablerat en enkel metod till två separata fack med eller delglas Tamela-hastighet under ett rent rev.Vår Metro-omfattning, både utanför och follikulära celler kan enkelt tillverkas genom att skriva den dragna glas kapillären. För det första, förbered en poet glas kapillär. Slå huvudet av glas kapillär på alkoholbrännaren.Använd en fyra sidor för att sträcka glas kapillären till ravekortets diameter. För det andra, desekera som övertar från den vuxna kvinnliga fisken, isolera äggstockssäckar från äggstocken. Slutligen använda en polled glas kapillär för att separera follikulär cell och Oocyte från äggstockscancer folliklar.Förbered glas kapillären, vass behållare, riklig fräs, alkoholbrännare och en tång. Ligg alkoholbrännaren, ta hem ett glas kapillär och värm ena änden av glas kapillär på elden av alkoholbrännare. Använd en tång för att hålla en annan ände av glas kapillär, stressa glas kapillären snabbt och försiktigt.Lägg glasavfallet i behållaren för vassa föremål. Använd den rikliga fräsen Gretch på poolen med glas. Bryt sedan av med tången Försiktigt för att få en jämn öppning av portblicken att snabbt bränna änden av glaskaperiet på alkoholbrännaren flera gånger och gnugga den öppna änden med riklig fräs noggrant.Ta hur fisktanken från det odlade vattensystemet. Och nu binder de vuxna honorna genom att placera fisk på isvattnet i minst två till fem minuter tills fisken stoppar Gills rörelse. Ta ut fisken från islådan och ta bort den återstående vattenfiskkroppen med handduk, placera en fisk på D-sektionsplattan med fyra uppsättningar.Fisk halshöggs genom att servera Spang ackord med hjälp av deras skarpa sax för att säkerställa döden. Använd dissekerande sax för att skära enligt följande. Dissekera från Chloe-snittet till gälarna längs bukens mittlinje, skuren från Chloes bank, skuren från den främre spetsen till den dorsala sidan.Försiktigt avlägsnade huden och musklerna på ena sidan av kroppen, exponera de inre organen och ta friska hela äggstocken med fyra steg. Äggstockarna placerades försiktigt omedelbart i 100 millimeter i kultur, diskbehållare 60%L 50 median. Skickade ett dissekerande mikroskop med överförd ljusoptik baserat på storleken och morfologin hos äggstockssäckar i olika stadier.Isolera dessa äggstockssäckar manuellt med en öl av tävlande fyra uppsättningar. Samla de isolerade äggstockssäckarna och lägg dem i en annan odlad maträtt som innehåller 60% L 50 medium, trevliga isolerade äggstockssäckar kommer att användas för att separera follikulära celler och Oocyter. Ställ sedan in en enhet för separation.Använd ett 30 centimeters plaströr. Ena änden är ansluten till en en milliliter pipettspets med ett filterelement. En annan ände är ansluten till en 200 mikroliter pipettspets.Under det disecting mikroskopet, använd munnen för att styra luftflödet för att låta de felaktiga gå till poolen med glas kapillär och sedan blåsa dårskapen går ut från glas kapillären. Under denna process kan follikulära celler och oocyter av äggstockssäckar separeras. Detta är en separationsprocess för en mogen stadium follikel.Under inandningsprocessen lossas follikulära cellskiktet från äggcellen, gör efter att ha blåst ut follikulära cellen och Oocyte kan separeras. Detta är en full grundstadium follikel. Vi kan se att follikulära cellskiktet är lossnat från Oocyten.Denna metod kan också tillämpas i tidigt skede äggstockssäckar. Detta är en follikel i mitten av Latella Genesis stadium. Detta är en follikel i början av Vatella Genesis stadium.Detta är en follikel på ett pre-vatalla Genesis stadium. Från den här bilden kan du se separationsprocessen. Panel ett visar en intakt follikel vid fullvuxen scenpanel.Panel två visar angulationen av denna follikel i dragen glas kapillär. Panel tre visar att follikeln blåstes ut från den dragna glas kapillären. Panel fyra indikerar den framgångsrika separationen F denuded Oocyte och follicular cell.Även denna metod, separation av follikulär cell i Oocyte kan utföras i olika skeden folliklar. Undersöka om follikulära celler separerades från intakta folliklar. Intakt en follikel och separeras Oocyte från olika stadier av folliklar från BV stadium till FG stadium var färgas med DAPI.Kärnan i follikulära celler kan färgas av DAPI. Den blå signalen av DAPI observerades i intakta folliklar men inte deuded Oocytes i dessa olika skede folliklar. För att ytterligare bekräfta den tydliga separationen, de intakta folliklarna och separerade Oocytes rensade till de histologiska avsnitten.DAPI ange resultat visade att follikulära celler var tydligt bort och denuded Oocytes. Med hjälp av denna metod konstaterades denuded Oocytes separerade från fullvuxna stadium folliklar att genomgå spontana Oocyte mognad. utan behandling efter fyra timmars inkubation.Efter aktivering med vatten kan dessa mogna Oocyter genomgå full chorion expansion. Detta resultat indikerar den låga skadan på Oocyten med denna metod. Således kan denna senap användas för att få den denuded Oocyte för att studera Oocyte mognadsransonen av Zebra fisk.Follikulärt lager av material till folliklar kan avlägsnas med ett kapillärglasrör. Dessa kan befruktas och devolve in i kläckningsstadiet. Resultaten tyder på att denna metod kan användas för in vitro-befruktning i Zebrafisk.Vi beskriver här en ny metod för snabb och enkel separation av follikulär cell och Oocyte från Zebra fisk äggstocks folliklar. Denna metod har flera betydande fördelar, välta metoder. Primärt bland dessa är att kraftigt öka enkelheten i separationen eftersom endast en enda och extern manipulation krävs.Den ökade lättheten i separationen ökar tillgängligheten av denna metod till de forskare som inte är skickliga på mikrodissektion. För det andra kan denna metod användas för att separera follikulär cell och Oocyt av äggstockssäckar och tidiga utvecklingsstadier, inklusive PV, EBV MV stadium, sådan separation kan inte utföras i tidigt skede follikel med nuvarande metoder. För det tredje leder denna nya metod till mindre skador på äggcellerna.De denuderade äggcellerna separerade med denna metod kan genomgå Oocyte mognad och kan befruktas. Dessutom kan denna metod också tillämpas i andra fiskar.

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Culture and Co-Culture of Mouse Ovaries and Ovarian Follicles

Kultur och Co-kultur av Mouse Äggstockar och folliklar

The mammalian ovary is composed of ovarian follicles, each follicle consisting of a single oocyte surrounded by somatic granulosa cells, enclosed together ...

Analysis of Zebrafish Larvae Skeletal Muscle Integrity with Evans Blue Dye

Analys av Zebrafish Larver skelettmuskulatur Integrity med Evans Blue Dye

The zebrafish model is an emerging system for the study of neuromuscular disorders.  In the study of neuromuscular diseases, the integrity of the muscle ...

Isolation and Characterization of Single Cells from Zebrafish Embryos

Isolering och karakterisering av enskilda celler från zebrafiskembryon

The zebrafish (Danio rerio) is a powerful model organism to study vertebrate development. Though many aspects of zebrafish embryonic development have been ...

Immunomagnetic Separation of Fat Depot-specific Sca1high Adipose-derived Stem Cells (ASCs)

Immunomagnetic Separation of Fat Depot-specific Sca1high Adipose-derived Stem Cells ASCs

Immunomagnetiska separation av fett Depot specifika Sca1<sup&gt; hög</sup&gt; Fetthärledda stamceller (ASC: er)

The isolation of adipose-derived stem cells (ASCs) is an important method in the field of adipose tissue biology, adipogenesis, and extracellular matrix ...

Analysis of Chromosome Segregation, Histone Acetylation, and Spindle Morphology in Horse Oocytes

Analys av kromosomsegregation, histonacetylering och spindelmorfologi i hästocyter

The field of assisted reproduction has been developed to treat infertility in women, companion animals, and endangered species. In the horse, assisted ...

In Vitro Growth of Mouse Preantral Follicles Under Simulated Microgravity

In Vitro Growth of Mouse Preantral Follicles Under Simulated Microgravity

In Vitro Tillväxt av mus Preantral folliklar Under simulerade tyngdlöshet

14 day-old mouse ovarian tissue and preantral follicles isolated from same-aged mice were incubated in a simulated microgravity culture system. We ...

Orthotopic Ovarian Transplantation Procedures to Investigate the Life- and Health-span Influence of Ovarian Senescence in Female Mice

Ortotop cystor Transplantation förfaranden att undersöka och hälsa-livslängd påverkan av äggstockarna åldras hos honmöss

Ovarian transplantation was first conducted at Utah State University in 1963. In more recent work, heterochronic transplantation of mammalian ovaries is ...

Single-cell Photoconversion in Living Intact Zebrafish

Single-cell Photoconversion i levande intakt zebrafiskar

Animal and plant tissue is composed of distinct populations of cells. These cells interact over time to build and maintain the tissue and can cause ...

Computational Analysis of the Caenorhabditis elegans Germline to Study the Distribution of Nuclei, Proteins, and the Cytoskeleton

Computational Analysis of the Caenorhabditis elegans Germline to Study the Distribution of Nuclei, Proteins, and the Cytoskeleton

Computational analys av den Caenorhabditis elegans könsceller att studera fördelningen av atomkärnor, proteiner och cytoskelettet

The Caenorhabditis elegans (C. elegans) germline is used to study several biologically important processes including stem cell development, apoptosis, and ...

Culture and Transfection of Zebrafish Primary Cells

Kultur och Transfection zebrafiskar primära celler

Zebrafish embryos are transparent and develop rapidly outside the mother, thus allowing for excellent in vivo imaging of dynamic biological processes in ...