Name: extraction and dissection of the domesticated pig brain
Uploaded: 2021-04-25T14:00:00
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作者要感谢农业、消费者和环境科学信息技术与传播服务学院的吉姆·克诺布劳赫和马丁·布斯·霍奇斯在拍摄、录制和编辑音频和视频方面的专业知识。

涉及动物学科的程序已获得伊利诺伊大学厄巴纳-香槟分校机构动物护理和使用委员会 （IACUC） 的批准
注：在安乐死之前，猪通过肌肉注射麻醉，结合了特拉佐尔：氯胺酮：西拉津（50.0毫克瓷砖胺HCl加上50.0毫克佐拉泽帕姆HCl） 重组时含有2.50毫升氯胺酮HCl（100克/升）和2.50毫升西拉津（100克/升），施用于0.06毫克/千克BW）。麻醉后，猪通过五巴比妥钠（390毫克/mL在1mL/5公斤BW）...

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此处描述的技术是为大约 4 周大的猪设计的。在猪被人道地安乐死后立即执行这些步骤，以确保脑组织结构的完整性得到维护，尤其是在考虑随后的生化检测时。在第一次学习技术时，使用地图集或纤维16 解剖指南是有帮助的。建议实验者在获取数据收集样本之前进行几次大脑提取和解剖。最困难的步骤是切除头骨。这一步将变得更加容易的经验，因为它在很大程度上需要第一?...

这头猪已被记录在案，并被公认为心血管系统1、胃肠道系统2、营养3、4、糖尿病5、毒理学6和外科技术7的可翻译动物模型。猪在神经科学中的使用开始增加，因为PubMed搜索关键词"猪脑动物模型"的结果是1996-2005年的四倍，比前10年8年，甚至更多的结果。猪模型之所以流行，一个主要原因是它与人类在生长、结构和大脑功能上的相似性。与人脑相比，猪脑表现出相似的陀螺图案、血管化和灰白物质分布9。此外，猪脑已被用于神经成像程序，唤起潜在的记录，并在建立神经外科技术8，9。然而，与其他动物模型不同，猪和人类经历的围产期大脑生长突飞猛进，而不是产前或产后生长突飞猛进。出生时，人类和猪脑的体重分别占成年脑重的27%和25%，而大鼠脑的体重占成年脑体重的12%，恒河猴脑的体重占成人体重的76%。
猪之所以被缓慢地作为神经科学的动物模型采用，原因之一是许多研究人员对这种动物不熟悉。研究人员可能不知道它在该领域的潜在用途，也可能不知道使用这种模型所需的适当技术。随着猪作为生物医学和产前模型的使用在神经科学中得到重视和使用，有必要建立标准化的组织去除程序，以确保在研究中准确比较数据。虽然涉及猪脑的解剖和手术技术已经发表在其他地方11，12，13，但需要简单和标准化的协议来收集猪脑组织，特别是用于生化检测。因此，本视频的目的是提供必要的知识，使研究人员能够进行标准化的大脑提取和解剖。这段视频展示了一种适当的技术，在保持皮层和脑部完好无损的同时去除猪脑，然后审查解剖几个关键大脑区域的方法。

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>#22 Scalpel Blades for #4 Handles</td>
			<td>Ted Pella, inc.</td>
			<td>549-4S-22</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>11 1/2&#34; Satterlee Bone Saw</td>
			<td>Leica Biosystems</td>
			<td>38DI13425</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>5 1/2&#34; Skull Breaker with Chisel End (Meat Hook)</td>
			<td>Leica Biosystems</td>
			<td>38DI37636</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>5-inch Heavy Duty Workshop Bench Vise</td>
			<td>Pony</td>
			<td>29050</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Butcher Knife 25cm</td>
			<td>Victorinox</td>
			<td>5.7403.25</td>
			<td>Sharpen before use</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CM40 Light Duty Drop Forged C Clamps</td>
			<td>Bessey</td>
			<td>00655BC3120</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Diamond Hone Knife Shaper</td>
			<td>Chef&#8217;s Choice</td>
			<td>436-3</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Shandon Stainless-Steel Scalpel Blade Handle #4</td>
			<td>ThermoScientific</td>
			<td>5334</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue Forceps</td>
			<td>Henry Schein</td>
			<td>101-5132</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vinyl Dissecting pad</td>
			<td>Carolina</td>
			<td>629006</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

extraction and dissection of the domesticated pig brain

使用猪作为一种前颅和可翻译的动物模型已被研究心血管系统、胃肠道系统和营养的研究领域所充分记录和接受，猪正越来越多地被用作神经科学中的一种大型动物模型。此外，猪是研究神经发育的公认模型，因为它显示的大脑生长和发展模式类似于人类。作为神经科学中不太常见的动物模型，对猪的手术和解剖程序在研究人员中可能并不熟悉或实践得那么充分。因此，一个标准化的视觉协议，详细说明一致的提取和解剖方法，可能证明有价值的研究人员与猪的工作。以下视频展示了一种技术，以消除猪脑，同时保持皮层和脑干完好无损，并审查方法解剖几个常见的调查的大脑区域，包括脑干，小脑，中脑，海马，纹状体，沙拉穆斯和前额叶皮质中。这段视频的目的是为研究人员提供必要的工具和知识，以持续对这头四周大的猪进行大脑提取和解剖。

本节描述了正确提取和解剖4周大猪脑后获得的结果示例。 图1 勾勒出每个大脑区域的形状，供解剖期间用作指南。切除小脑（图1B）后，部分脑部可能留在头骨中。这可以在隔离小脑所需的区域时删除。 表1 显示每个被解剖的大脑区域（n=5）的平均重量（平均±平均标准误差）。
<img alt="Figure 1"...

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Extraction and Dissection of the Domesticated Pig Brain

该协议详细介绍了清除猪脑的全部技术，并剖析了神经科学中常见的几个大脑区域。

驯养猪脑的提取和解剖

Use of the pig as a preclinical and translatable animal model has been well-documented and accepted by research fields investigating cardiovascular ...

下面的视频是猪脑切除和解剖的演示。在手术前或手术期间参考地图集或纤维解剖指南可能会有所帮助。一把大屠刀最适合斩首，因为它将允许在地图集和轴之间进行一次干净的切割。在开始新主题之前，确保刀子是锋利的。肉钩用于取出头骨。一个细长的工具，如手术刀手柄，用于从头骨中去除大脑。在切割头骨时，需要用螺丝或突起来固定头部。一旦动物按照既定协议被人道地安乐死，将按照如下程序进行。切在颈部的尿布上方，在肩膀和头顶之间。保护猪，在斩首期间将岁月移走。使用手术刀切开皮肤和头骨。在头骨中间进行初始切割，继续到头部后部。第二个横向切割应在头部后部。第三个切口也将横向将开始在这个鼻子的后部，并与眼睛内联，以确保容易访问头骨。使用骨锯，使前后切横向到中线。首先用锯轻轻标记切割区域，然后开始锯锯，直到您遇到来自头骨的阻力较小。稍微斜视锯向中线，同时切割，因为这将确保你切割头骨最薄的部分。如果切口离耳朵太近，就很难取出头骨。但是，如果切口太接近中线，开口将太小，无法去除大脑。在垂直侧面重复此过程以创建矩形窗口。确保窗户的每个角落被完全切割，这样头骨的一部分就可以被移除，露出下面的大脑。接下来，使用肉钩或弯曲的仪器撬出矩形头骨部分的位置。首先将钩子放入其中一个角落，并施加压力以弹出头骨帽。在某些情况下，脑膜将留在大脑中。如果发生这种情况，小心地使用钳子和钝剪刀，或者用手术刀去除脑膜而不割断大脑。作为参考，大脑在脑膜层被移除之前和之后应如下所示。切开头部后部的肌肉和脂肪，为小脑暴露做好准备。要暴露小脑，沿着头骨的后部进行两次横切。当做出这些削减时，注意不要切入暴露的大脑。一旦切口被切开，一只手放在鼻子上，一只手放在头骨上，然后施加向后压力，将头骨的后部从头部的其余部分拉开。正如这里所强调的，小脑隐藏在剩余的脑膜层后面。使用钝器的末端，如手术刀手柄，小心地将大脑与头骨分开，注意避免在这个过程中损害大脑。稍微倒置头部，以帮助哄骗大脑走出头骨，并使用温和的挖孔运动切断颅骨神经和删除大脑。这个过程需要耐心和实践来消除大脑和颅腔之间的所有剩余连接。在这个过程中，倒置猪头是有帮助的。继续使用钝器的扫荡动作来释放大脑。正如这里所强调的，小脑和脑系统可能很难去除，因为它们被塞进头骨腔。取出小脑和美杜拉或脑筋急转弯时要小心。当大脑与头骨完全分离时，大脑应该会自行脱落。头骨腔在大脑切除后应显示。在准备大脑区域解剖时，确保预先标记的容器井然有序，并且非常接近。示例保存方法包括在液氮中捕捉冷冻样品，或将其浸入防腐溶液中。一旦从颅腔中提取，整个大脑应该看起来如下。要去除梅杜拉或脑系统，使冠状切口到小脑。要去除小脑，在皮层后部进行冠状切割。要分离半球，使用连续运动防止损伤，沿着纵向裂缝进行中切。为了这个视频的目的，我们只会显示来自右半球的解剖。去除中脑寻找上级，和低劣的科利库利，这是大脑后部的两个颠簸。去除这些区域所需的脑组织量。要去除海马的位置，手术刀手柄在语料库的后部，并轻轻地推出海马。整个海马角将是豆形的。海马应该很容易推出时，挖你的手指在j运动，从后语料库卡洛苏姆开始。要去除纹状体或细胞核清除语料库的前部。考特核是条纹或条纹区域，颜色为灰色和白色，位于语料库卡洛苏姆的正下方。手术刀手柄角度去除这个区域，其中主要包括牛皮核。取出此组织后，您应该能够看到大脑区域所在的条纹模式。将前额皮质的内皮质从前陀螺解剖到体细胞，取出该部分最中位数的部分。切除前额皮质中位后，右皮层应保留。要去除沙拉穆斯，在中腹表面中心像结构一样拆下灯泡。沙拉穆斯有一个明显的球形，它看起来会比周围的组织稍暗。解剖组织样本完成后，应根据特定的实验结果妥善保存。这里展示的是被解剖的大脑区域，包括与幼猪一起工作时预期的相对大小和形状。掌握这些技术后，整个大脑提取和解剖过程将需要不到15分钟每个受试者，并产生一致的结果。

Research

JoVE Journal

Neuroscience

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科研

神经科学

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小容积回收-灌注-浸没式室系统中维持的急性海马切片的突触可塑性记录

Even though experiments on brain slices have been in use since 1951, problems remain that reduce the probability of achieving a stable and successful ...

Isolation and RNA Extraction of Neurons, Macrophages and Microglia from Larval Zebrafish Brains

斑马鱼脑幼虫神经元、巨噬细胞和小胶质的分离和 RNA 提取

To gain a detailed understanding of the role of different CNS cells during development or the establishment and progression of brain pathologies, it is ...

Dissection and Isolation of Murine Glia from Multiple Central Nervous System Regions

从多个中枢神经系统区域解剖和分离小鼠神经胶质细胞

The methods presented here demonstrate laboratory procedures for the dissection of four different regions of the central nervous system (CNS) from murine ...

Magnetic Resonance-Guided Stereotaxy for Infusions to the Pig Brain

磁共振引导立体定向输注猪脑

The overall goal of this procedure is to perform stereotaxy in the pig brain with real-time magnetic resonance (MR) visualization guidance to provide ...