Name: a step-by-step guide to mosquito electroantennography
Uploaded: 2021-03-10T14:30:00
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मैं सहायक चर्चाओं के लिए डॉ क्लेमेंट विनौगर और डॉ जेफरी रिफेल का आभारी हूं। निम्नलिखित अभिकर्मकों को बीईआई रिसोर्सेज, एनआईएआईडी, एनआईएच के माध्यम से प्राप्त किया गया था: एनोफिलीज स्टीफेंसी, स्ट्रेन एसटीई 2, एमआरए -128, मार्क क्यू बेनेडिक्ट द्वारा योगदान दिया गया; एडीज एजिप्टी, स्ट्रेन रॉक, एमआरए -734, डेविड डब्ल्यू सेवरसन द्वारा योगदान दिया गया; क्यूलेक्स क्विनक्वेफेसिएटस, स्ट्रेन जेएचबी, अंडे, एनआर -43025। लेखक ने डॉ जेक तू, डॉ निशा दुग्गल, डॉ जेम्स वेगर और जेफरी मारानो को क्यूलेक्स क्विनक्वेफेसिएटस और एनोफिलीज स्टीफेंसी (स्ट्रेन: लिस्टन) मच्छर के अंडे प्रदान करने के लिए धन्यवाद दिया। एडीज अल्बोपिक्टस और टॉक्सोराइनचाइट्स रुटिलस सेप्टेंट्रिओनालिस न्यू रिवर वैली क्षेत्र (वीए, यूएसए) में लेखक द्वारा एकत्र किए गए क्षेत्र मच्छरों से प्राप्त होते हैं। इस काम को जैव रसायन विभाग और फ्रैलिन लाइफ साइंस इंस्टीट्यूट द्वारा समर्थित किया गया था।

1. खारा घोल तैयार करना
<ol><li>पहले से ही खारा तैयार करें और फ्रिज में स्टोर करें।</li>
	<li>समाधान तैयार करने के लिए बेयेनबाक और मासिया26 का पालन करें। नोट: एमएम में खारा नुस्खा: 150.0 NaCl, 25.0 HEPES, 5.0 ग्लूकोज, 3.4 KCl, 1.8 NaHCO...

<ol>
	<li>World Health Organization. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=World+health+statistics+2019:+monitoring+health+for+the+SDGs,+sustainable+development+goals.">World health statistics 2019: monitoring health for the SDGs, sustainable development goals.</a> World Health Organization. , (2019).</li><li>Takken, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+olfaction+in+host-seeking+of+mosquitoes:+a+review.">The role of olfaction in host-seeking of mosquitoes: a review.</a> International Journal of Tropical Insect Science. 12 (1-2-3), 287-295 (1991).</li><li>Zwiebel, L. J., Takken, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Olfactory+regulation+of+mosquito-host+interactions.">Olfactory regulation of mosquito-host interactions.</a> Insect Biochemistry and Molecular Biology. 34 (7), 645-652 (2004).</li><li>Potter, C. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stop+the+biting:+targeting+a+mosquito's+sense+of+smell.">Stop the biting: targeting a mosquito's sense of smell.</a> Cell. 156 (5), 878-881 (2014).</li><li>Paluch, G., Bartholomay, L., Coats, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mosquito+repellents:+a+review+of+chemical+structure+diversity+and+olfaction.">Mosquito repellents: a review of chemical structure diversity and olfaction.</a> Pest Management Science. 66 (9), 925-935 (2010).</li><li>Schneider, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Electrophysiological+investigation+on+the+antennal+receptors+of+the+silk+moth+during+chemical+and+mechanical+stimulation.">Electrophysiological investigation on the antennal receptors of the silk moth during chemical and mechanical stimulation.</a> Experientia. 13 (2), 89-91 (1957).</li><li>Raguso, R. A., Light, D. M., Pickersky, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Electroantennogram+responses+of+Hyles+lineata+(Sphingidae:+Lepidoptera)+to+volatile+compounds+from+Clarkia+breweri+(Onagraceae)+and+other+moth-pollinated+flowers.">Electroantennogram responses of Hyles lineata (Sphingidae: Lepidoptera) to volatile compounds from Clarkia breweri (Onagraceae) and other moth-pollinated flowers.</a> Journal of Chemical Ecology. 22 (10), 1735-1766 (1996).</li><li>Schweitzer, E. S., Sanes, J. R., Hildebrand, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ontogeny+of+electroantennogram+responses+in+the+moth,+Manduca+sexta.">Ontogeny of electroantennogram responses in the moth, Manduca sexta.</a> Journal of Insect Physiology. 22 (7), 955-960 (1976).</li><li>Martel, V., Anderson, P., Hansson, B. S., Schlyter, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Peripheral+modulation+of+olfaction+by+physiological+state+in+the+Egyptian+leaf+worm+Spodoptera+littoralis+(Lepidoptera:+Noctuidae).">Peripheral modulation of olfaction by physiological state in the Egyptian leaf worm Spodoptera littoralis (Lepidoptera: Noctuidae).</a> Journal of Insect Physiology. 55 (9), 793-797 (2009).</li><li>Spaethe, J., Brockmann, A., Halbig, C., Tautz, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Size+determines+antennal+sensitivity+and+behavioral+threshold+to+odors+in+bumblebee+workers.">Size determines antennal sensitivity and behavioral threshold to odors in bumblebee workers.</a> Naturwissenschaften. 94 (9), 733-739 (2007).</li><li>Suchet, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Floral+scent+variation+in+two+Antirrhinum+majus+subspecies+influences+the+choice+of+na&#239;ve+bumblebees.">Floral scent variation in two Antirrhinum majus subspecies influences the choice of na&#239;ve bumblebees.</a> Behavioral Ecology and Sociobiology. 65 (5), 1015-1027 (2011).</li><li>De Jong, R., Pham-Del&#232;gue, M. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Electroantennogram+responses+related+to+olfactory+conditioning+in+the+honeybee+(Apis+mellifera+ligustica).">Electroantennogram responses related to olfactory conditioning in the honeybee (Apis mellifera ligustica).</a> Journal of Insect Physiology. 37 (4), 319-324 (1991).</li><li>Patte, F., Etcheto, M., Marfaing, P., Laffort, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Electroantennogram+stimulus-response+curves+for+59+odourants+in+the+honeybee,+Apis+mellifica.">Electroantennogram stimulus-response curves for 59 odourants in the honeybee, Apis mellifica.</a> Journal of Insect Physiology. 35 (9), 667-675 (1989).</li><li>Alcorta, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+the+electroantennogram+in+Drosophila+melanogaster+and+its+use+for+identifying+olfactory+capture+and+transduction+mutants.">Characterization of the electroantennogram in Drosophila melanogaster and its use for identifying olfactory capture and transduction mutants.</a> Journal of Neurophysiology. 65 (3), 702-714 (1991).</li><li>Park, K. C., Ochieng, S. A., Zhu, J., Baker, T. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Odor+discrimination+using+insect+electroantennogram+responses+from+an+insect+antennal+array.">Odor discrimination using insect electroantennogram responses from an insect antennal array.</a> Chemical Senses. 27 (4), 343-352 (2002).</li><li>Du, Y. J., Millar, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Electroantennogram+and+oviposition+bioassay+responses+of+Culex+quinquefasciatus+and+Culex+tarsalis+(Diptera:+Culicidae)+to+chemicals+in+odors+from+Bermuda+grass+infusions.">Electroantennogram and oviposition bioassay responses of Culex quinquefasciatus and Culex tarsalis (Diptera: Culicidae) to chemicals in odors from Bermuda grass infusions.</a> Journal of Medical Entomology. 36 (2), 158-166 (1999).</li><li>Costantini, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Electroantennogram+and+behavioural+responses+of+the+malaria+vector+Anopheles+gambiae+to+human-specific+sweat+components.">Electroantennogram and behavioural responses of the malaria vector Anopheles gambiae to human-specific sweat components.</a> Medical and Veterinary Entomology. 15 (3), 259-266 (2001).</li><li>Collins, L. E., Blackwell, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Electroantennogram+studies+of+potential+oviposition+attractants+for+Toxorhynchites+moctezuma+and+T.+amboinensis+mosquitoes.">Electroantennogram studies of potential oviposition attractants for Toxorhynchites moctezuma and T. amboinensis mosquitoes.</a> Physiological Entomology. 23 (3), 214-219 (1998).</li><li>Seenivasagan, T., Sharma, K. R., Sekhar, K., Ganesan, K., Prakash, S., Vijayaraghavan, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Electroantennogram,+flight+orientation,+and+oviposition+responses+of+Aedes+aegypti+to+the+oviposition+pheromone+n-heneicosane.">Electroantennogram, flight orientation, and oviposition responses of Aedes aegypti to the oviposition pheromone n-heneicosane.</a> Parasitology Research. 104 (4), 827-833 (2009).</li><li>Puri, S. N., Mendki, M. J., Sukumaran, D., Ganesan, K., Prakash, S., Sekhar, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Electroantennogram+and+behavioral+responses+of+Culex+quinquefasciatus+(Diptera:+Culicidae)+females+to+chemicals+found+in+human+skin+emanations.">Electroantennogram and behavioral responses of Culex quinquefasciatus (Diptera: Culicidae) females to chemicals found in human skin emanations.</a> Journal of Medical Entomology. 43 (2), 207-213 (2014).</li><li>Cooperband, M. F., McElfresh, J. S., Millar, J. G., Carde, R. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Attraction+of+female+Culex+quinquefasciatus+Say+(Diptera:+Culicidae)+to+odors+from+chicken+feces.">Attraction of female Culex quinquefasciatus Say (Diptera: Culicidae) to odors from chicken feces.</a> Journal of Insect Physiology. 54 (7), 1184-1192 (2008).</li><li>Dekker, T., Ignell, R., Ghebru, M., Glinwood, R., Hopkins, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+of+mosquito+repellent+odours+from+Ocimum+forskolei.">Identification of mosquito repellent odours from Ocimum forskolei.</a> Parasites &amp; Vectors. 4 (1), 183 (2011).</li><li>Choo, Y. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reverse+chemical+ecology+approach+for+the+identification+of+an+oviposition+attractant+for+Culex+quinquefasciatus.">Reverse chemical ecology approach for the identification of an oviposition attractant for Culex quinquefasciatus.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences. 115 (4), 714-719 (2018).</li><li>Wolff, G. H., Lahond&#232;re, C., Vinauger, C., Riffell, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neuromodulation+and+differential+learning+across+mosquito+species.">Neuromodulation and differential learning across mosquito species.</a> bioRxiv. , 755017 (2019).</li><li>Lahond&#232;re, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+olfactory+basis+of+orchid+pollination+by+mosquitoes.">The olfactory basis of orchid pollination by mosquitoes.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences. 117 (1), 708-716 (2020).</li><li>Beyenbach, K., Masia, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Membrane+conductances+of+principal+cells+in+Malpighian+tubules+of+Aedes+aegypti.">Membrane conductances of principal cells in Malpighian tubules of Aedes aegypti.</a> Journal of Insect Physiology. 48, 375-386 (2002).</li><li>Oesterle, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> The Pipette Cookbook. , (2018).</li><li>R Core Team. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=R:+A+language+and+environment+for+statistical+computing.">R: A language and environment for statistical computing.</a> R Foundation for Statistical Computing. , (2018).</li><li>Afify, A., Betz, J. F., Riabinina, O., Lahond&#232;re, C., Potter, C. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Commonly+used+insect+repellents+hide+human+odors+from+Anopheles+mosquitoes.">Commonly used insect repellents hide human odors from Anopheles mosquitoes.</a> Current Biology. 29 (21), 3669-3680 (2019).</li><li>Martin, F., Riveron, J., Alcorta, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Environmental+temperature+modulates+olfactory+reception+in+Drosophila+melanogaster.">Environmental temperature modulates olfactory reception in Drosophila melanogaster.</a> Journal of Insect Physiology. 57 (12), 1631-1642 (2011).</li><li>Qiu, Y. T., Gort, G., Torricelli, R., Takken, W., van Loon, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+blood-feeding+on+olfactory+sensitivity+of+the+malaria+mosquito+Anopheles+gambiae:+application+of+mixed+linear+models+to+account+for+repeated+measurements.">Effects of blood-feeding on olfactory sensitivity of the malaria mosquito Anopheles gambiae: application of mixed linear models to account for repeated measurements.</a> Journal of Insect Physiology. 59 (11), 1111-1118 (2013).</li><li>Taylor, B., Jones, M. D. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+circadian+rhythm+of+flight+activity+in+the+mosquito+Aedes+aegypti+(L.):+the+phase-setting+effects+of+light-on+and+light+off.">The circadian rhythm of flight activity in the mosquito Aedes aegypti (L.): the phase-setting effects of light-on and light off.</a> Journal of Experimental Biology. 51 (1), 59-70 (1969).</li><li>Eilerts, D. F., VanderGiessen, M., Bose, E. A., Broxton, K., Vinauger, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Odor-specific+daily+rhythms+in+the+olfactory+sensitivity+and+behavior+of+Aedes+aegypti+mosquitoes.">Odor-specific daily rhythms in the olfactory sensitivity and behavior of Aedes aegypti mosquitoes.</a> Insects. 9 (4), 147 (2018).</li><li>Krishnan, B., Dryer, S. E., Hardin, P. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Circadian+rhythms+in+olfactory+responses+of+Drosophila+melanogaster.">Circadian rhythms in olfactory responses of Drosophila melanogaster.</a> Nature. 400 (6742), 375-378 (1999).</li><li>Pelletier, J., Guidolin, A., Syed, Z., Cornel, A. J., Leal, W. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Knockdown+of+a+mosquito+odorant-binding+protein+involved+in+the+sensitive+detection+of+oviposition+attractants.">Knockdown of a mosquito odorant-binding protein involved in the sensitive detection of oviposition attractants.</a> Journal of Chemical Ecology. 36 (3), 245-248 (2010).</li></ol>

घ्राण मध्यस्थता व्यवहार कई कारकों से प्रभावित होते हैं, जिनमें शारीरिक (जैसे, उम्र, दिन का समय) और पर्यावरण (जैसे, तापमान, सापेक्ष आर्द्रता) शामिल हैं। इस प्रकार, ईएजी का संचालन करते समय, उन कीड़ो...

मच्छर पृथ्वी पर सबसे घातक जीव हैं, जो प्रति वर्ष एक मिलियन से अधिक लोगों के जीवन का दावा करते हैं और दुनिया की आधी से अधिक आबादी को उन रोगजनकों के संपर्क में आने के जोखिम में डालते हैं जो वे1 को काटते हैं। ये कीड़े संकेतों की एक विस्तृत श्रृंखला (यानी, थर्मल, दृश्य, यांत्रिक, घ्राण, श्रवण) पर भरोसा करते हैं ताकि संभोग और अंडाकार के लिए (पौधे और जानवर दोनों) पर फ़ीड करने के लिए एक मेजबान का पता लगाया जा सके, साथ ही लार्वा और वयस्क दोनों चरणों 2,3 पर शिकारियों से बचा जा सके। इन इंद्रियों के बीच, ओल्फैक्शन उपर्युक्त व्यवहारों में एक महत्वपूर्ण भूमिका निभाता है, विशेष रूप से गंध अणुओं 2,3 के मध्यम से लंबी दूरी का पता लगाने के लिए। एक मेजबान या एक अंडाकार साइट द्वारा उत्सर्जित गंध का पता विभिन्न विशिष्ट घ्राण रिसेप्टर्स (जैसे, जीआरएस, ओआर, आईआर) द्वारा लगाया जाता है जो मच्छर पैल्प्स प्रोबोसिस, टारसी और एंटीना 2,3 पर स्थित होते हैं।
चूंकि ओल्फैक्शन उनके मेजबान-मांग (पौधे और जानवर), संभोग और अंडाकार व्यवहार का एक प्रमुख घटक है, इस प्रकार यह मच्छर नियंत्रण के लिए नए उपकरण विकसित करने के लिए अध्ययन करने के लिए एक आदर्श लक्ष्य का गठन करताहै। विकर्षक (जैसे, डीईईटी, आईआर 3535, पिकारिडिन) और चारा (जैसे, बीजी सेंटिनल मानव लालच) पर शोधबेहद विपुल है, लेकिन मच्छर नियंत्रण में वर्तमान चुनौतियों (जैसे, कीटनाशक प्रतिरोध, आक्रामक प्रजातियां) के कारण, मच्छर जीव विज्ञान द्वारा सूचित नए कुशल नियंत्रण विधियों को विकसित करना आवश्यक है।
मच्छरों में यौगिकों या यौगिकों के मिश्रण की जैव सक्रियता का आकलन करने के लिए कई तकनीकों (जैसे, ओल्फैक्टोमीटर, लैंडिंग परख, इलेक्ट्रोफिजियोलॉजी) का उपयोग किया गया है। उनमें से, इलेक्ट्रोएंटेनोग्राफी (या इलेक्ट्रोएंटेनोग्राम (ईएजी)) का उपयोग यह निर्धारित करने के लिए किया जा सकता है कि मच्छर एंटीना द्वारा गंध का पता लगाया जाता है या नहीं। यह तकनीक शुरू में श्नाइडर6 द्वारा विकसित की गई थी और तब से कई अलग-अलग कीट जेनेरा में उपयोग की गई है, जिसमें पतंगे 7,8,9, भौंरा 10,11, मधुमक्खियां12,13 और फल मक्खियां14,15 शामिल हैं। इलेक्ट्रोएंटेनोग्राफी को विभिन्न प्रोटोकॉल का उपयोग करके भी नियोजित किया गया है, जिसमें मच्छरों में एकल या एकाधिक एंटीना शामिल हैं 16,17,18,19,20,21,22,23,24,25।
मच्छर अपेक्षाकृत छोटे और नाजुक कीड़े होते हैं जिनमें पतले एंटीना होते हैं। पतंगों या भौंरों जैसे बड़े कीड़ों पर ईएजी करना अपेक्षाकृत आसान है क्योंकि उनके बड़े आकार और मोटे एंटीना हैं, मच्छरों में ईएजी का संचालन चुनौतीपूर्ण हो सकता है। विशेष रूप से, एक अच्छा सिग्नल-टू-शोर अनुपात बनाए रखना और एक स्थायी उत्तरदायी तैयारी डेटा प्रजनन क्षमता और विश्वसनीयता के लिए दो प्रमुख आवश्यकताएं हैं।
यहां प्रस्तावित कम शोर ईएजी के लिए चरण-दर-चरण मार्गदर्शिका सीधे इन सीमाओं के समाधान प्रदान करती है और इस प्रोटोकॉल को एडीज, एनोफिलीज, क्यूलेक्स और टॉक्सोरिंचाइट्स सहित विभिन्न जेनेरा से कई मच्छर प्रजातियों पर लागू करती है, और मादा और पुरुषों दोनों के लिए तकनीक का वर्णन करती है। इलेक्ट्रोएंटेनोग्राफी बायोएक्टिव यौगिकों को स्क्रीन और निर्धारित करने का एक त्वरित लेकिन विश्वसनीय तरीका प्रदान करता है जिसे तब व्यवहार परख के साथ वैलेंस निर्धारित किए जाने के बाद चारा विकास में लाभ उठाया जा सकता है।

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Air table Clean Bench</td>
			<td>TMC</td>
			<td>https://www.techmfg.com/products/labtables/cleanbench63series/accessoriess</td>
			<td>Noise reducer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Analog-to-digital board</td>
			<td>National Instruments</td>
			<td>BNC-2090A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Benchtop Flowbuddy Complete</td>
			<td>Genesee Scientific</td>
			<td>59-122BC</td>
			<td>To anesthesize mosquitoes</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Borosillicate glass capillary</td>
			<td>Sutter Instrument</td>
			<td>B100-78-10</td>
			<td>To make the recording and references capillaries</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chemicals</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>Benzaldehyde: 418099-100 mL; Butyric acid: B103500-100mL; 1-Hexanol: 471402-100mL; Mineral oil: M8410-1L</td>
			<td>Chemicals used for the experiments presented here</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CO2</td>
			<td>Airgas or Praxair</td>
			<td>N/A</td>
			<td>To anesthesize mosquitoes</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cold Light Source</td>
			<td>Volpi</td>
			<td>NCL-150</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Disposable syringes</td>
			<td>BD</td>
			<td>1 mL (309628)&#160; / 3 mL (309657)</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electrode cables</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>5371</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electrode gel salt free</td>
			<td>Parkerlabs</td>
			<td>12-08-Spectra-360</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Faraday cage</td>
			<td>TMC</td>
			<td>https://www.techmfg.com/products/electric-and-magnetic-field-cancellation/faradaycages</td>
			<td>Noise reducer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Flowmeters</td>
			<td>Bel-art</td>
			<td>65 mm (H40406-0010) / 150 mm (H40407-0075)</td>
			<td>One of each</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GCMS vials and caps</td>
			<td>Thermo-fisher scientific</td>
			<td>2-SVWKA8-CPK</td>
			<td>To prepare odorant dilutions</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass syringes (Fortuna)</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>Z314307</td>
			<td>For odor delivery to the EAG prep</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Humbug</td>
			<td>Quest Scientific</td>
			<td>http://www.quest-sci.com/</td>
			<td>Noise reducer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2 mm Jack Holder, Narrow, 90 deg., With Wire</td>
			<td>A-M Systems</td>
			<td>675748</td>
			<td>Electrode holder</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Magnetic bases</td>
			<td>Kanetec</td>
			<td>MB-FX</td>
			<td>x 2</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MATLAB + Toolboxes</td>
			<td>Mathworks</td>
			<td>https://www.mathworks.com/products/matlab.html</td>
			<td>For delivering the pulses</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medical air</td>
			<td>Airgas or Praxair</td>
			<td>N/A</td>
			<td>For main airline</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscope</td>
			<td>Nikkon</td>
			<td>SMZ-800N</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micromanipulators Three-Axis Coarse/Fine Compact Micromanipulator</td>
			<td>Narishige</td>
			<td>MHW-3</td>
			<td>x 2</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microelectrode amplifier with headstage</td>
			<td>A-M Systems</td>
			<td>Model 1800</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mosquito rearing supplies</td>
			<td>Bioquip</td>
			<td>https://www.bioquip.com/Search/WebCatalog.asp</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needles</td>
			<td>BD</td>
			<td>25G (305127) / 21G (305165)</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pasteur pipettes</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>13-678-6A</td>
			<td>For odor delivery to the EAG prep</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PTFE Tubing of different diameters</td>
			<td>Mc Master Carr</td>
			<td>N/A</td>
			<td>To connect solenoid valve, flowmeter, airline ect.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>30V/5A DC Power Supply</td>
			<td>Dr. Meter</td>
			<td>PS-305DM</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>R version 3.5.1</td>
			<td>R project</td>
			<td>https://www.r-project.org/</td>
			<td>For data analyses</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Relay for solenoid valve</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Custom made</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silver wire 0.01&#8221;</td>
			<td>A-M Systems</td>
			<td>782500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Solenoid valve (3-way)</td>
			<td>The Lee Company</td>
			<td>LHDA0533115H</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>WinEDR software</td>
			<td>Strathclyde Electrophysiology Software</td>
			<td>WinEDR V3.9.1</td>
			<td>For EAG recording</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Whatman paper</td>
			<td>Cole Parmer</td>
			<td>UX-06648-03</td>
			<td>To load chemical in glass syringe / Pasteur pipette</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a step-by-step guide to mosquito electroantennography

मादा मच्छर पृथ्वी पर सबसे घातक जानवर हैं, जो रक्त-भोजन प्राप्त करते समय प्रसारित रोगजनकों के कारण हर साल 1 मिलियन से अधिक लोगों के जीवन का दावा करते हैं। खिलाने के लिए एक मेजबान का पता लगाने के लिए, मच्छर दृश्य, यांत्रिक, थर्मल और घ्राण सहित संवेदी संकेतों की एक विस्तृत श्रृंखला पर भरोसा करते हैं। अध्ययन में इलेक्ट्रोएंटेनोग्राफी (ईएजी) नामक तकनीक का विवरण दिया गया है, जो शोधकर्ताओं को यह आकलन करने की अनुमति देता है कि क्या मच्छर एकाग्रता-निर्भर तरीके से व्यक्तिगत रसायनों और रसायनों के मिश्रणों का पता लगा सकते हैं। गैस-क्रोमैटोग्राफी (जीसी-ईएजी) के साथ युग्मित होने पर, यह तकनीक एंटीना को एक पूर्ण हेडस्पेस / जटिल मिश्रण में उजागर करने की अनुमति देती है और यह निर्धारित करती है कि रुचि के नमूने में मौजूद कौन से रसायन, मच्छर का पता लगा सकते हैं। यह मेजबान शरीर की गंध के साथ-साथ पौधे के पुष्प गुलदस्ते या अन्य पारिस्थितिक रूप से प्रासंगिक गंध (जैसे, अंडाकार साइटों की गंध) पर लागू होता है। यहां, हमने एक प्रोटोकॉल का वर्णन किया है जो तैयारी प्रतिक्रिया समय की लंबी अवधि की अनुमति देता है और एडीज, क्यूलेक्स, एनोफिलीज और टॉक्सोरिंचाइट मच्छरों सहित कई जेनेरा से मादा और पुरुष दोनों मच्छरों पर लागू होता है। चूंकि सामान्य रूप से मच्छर-मेजबान इंटरैक्शन और मच्छर जीव विज्ञान में ओल्फैक्शन एक प्रमुख भूमिका निभाता है, ईएजी और जीसी-ईएजी नई रोग वेक्टर नियंत्रण रणनीतियों (जैसे, चारा) के विकास के लिए रुचि के यौगिकों को प्रकट कर सकते हैं। व्यवहार परख के साथ पूरक, प्रत्येक रसायन की वैलेंस (जैसे, आकर्षित, विकर्षक) निर्धारित की जा सकती है।

इलेक्ट्रोएंटेनोग्राफी यह निर्धारित करने के लिए एक शक्तिशाली उपकरण है कि क्या कीट एंटीना द्वारा रसायनों के रासायनिक या मिश्रण का पता लगाया जाता है। इसका उपयोग एकाग्रता की क्रमिक वृद्धि (यानी, खुराक व?...

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A Step-by-Step Guide to Mosquito Electroantennography

वर्तमान लेख में मादा और पुरुष दोनों सहित मच्छरों के कई जेनेरा में सफल और कम शोर इलेक्ट्रोएंटेनोग्राम के लिए एक चरण-दर-चरण प्रोटोकॉल का विवरण दिया गया है।

मच्छर इलेक्ट्रोएंटेनोग्राफी के लिए एक चरण-दर-चरण गाइड

Female mosquitoes are the deadliest animals on earth, claiming the lives of more than 1 million people every year due to pathogens they transmit when ...

इलेक्ट्रोएंटेनोग्राफी के लिए, विश्वसनीय परिणाम प्राप्त करने के लिए एक विशिष्ट और सुसंगत शारीरिक स्थिति में मच्छरों का उपयोग करना महत्वपूर्ण है। चरण-दर-चरण प्रोटोकॉल मच्छरों में स्थायी इलेक्ट्रोएंटेनोग्राफिक रिकॉर्डिंग की अनुमति देता है। विधि का उपयोग कई मच्छर प्रजातियों में किया जा सकता है, और पुरुषों और महिलाओं दोनों में।इलेक्ट्रोएंटेनोग्राफिक तकनीक को बीटल, मक्खियों, चुंबन कीड़े और चींटियों सहित अन्य कीट मॉडल में भी बदल दिया जा सकता है। शुरू करने के लिए, 20 डिग्री सेल्सियस फ्रीजर से गंध मिश्रण और विलायक नियंत्रण युक्त 1.5 मिलीलीटर एम्बर शीशियों को हटा दें जिसमें वे गिरावट को रोकने के लिए संग्रहीत होते हैं। इसके बाद, एक लेबल ग्लास सिरिंज के अंदर लोड किए गए फिल्टर पेपर के एक टुकड़े पर गंधक घोल के 10 माइक्रोलीटर पिपेट करें।प्रयोग के दिन मच्छरों को अलग करें। माइक्रोस्कोप के नीचे काम करते हुए, धीरे से बल की एक जोड़ी का उपयोग करके फिलामेंट्स के साथ दो बोरोसिलिकेट केशिकाओं की नोक को तोड़ें। इलेक्ट्रोएंटेनोग्राफी, या ईएजी प्रयोग चलाने से पहले, सुनिश्चित करें कि इलेक्ट्रोड धारक अंदर स्पष्ट हैं, जिसमें कोई बोरोसिलिकेट मलबा नहीं है।फिर इलेक्ट्रोड धारकों के चांदी के तारों को पांच मिनट के लिए शुद्ध ब्लीच में भिगोकर क्लोराइडाइजेशन करें, जब तक कि तार गहरे, मैट ग्रे न हो जाएं। इसके बाद तारों को धो लें। रबर स्टॉपर को ढीला करें और खारे घोल के साथ केशिका के अंदर भरने के लिए 20 गेज सुई का उपयोग करें।केशिकाओं को कुल्ला करें और दो केशिकाओं में तार डालें। केशिका के सिरे से तार की नोक को एक मिलीमीटर से कम रखें। केशिका को इलेक्ट्रोड धारक के अंदर रबर रिंग के माध्यम से बिना तोड़े पास करें और धीरे से रबर स्टॉपर को कसें, यह सत्यापित करने के बाद कि कोई हवा के बुलबुले मौजूद नहीं हैं।संदर्भ इलेक्ट्रोड धारक पर व्यापक उद्घाटन और रिकॉर्डिंग इलेक्ट्रोड धारक पर छोटे उद्घाटन के साथ केशिका का उपयोग करें। दो माउंटेड इलेक्ट्रोड धारकों को गीले सफाई पोंछे पर छोड़ दें ताकि सिर को माउंट करने के लिए तैयार होने तक नोक को सूखने से रोका जा सके। सुनिश्चित करें कि एयर टेबल ऊपर है।एयरलाइन में कोई रुकावट नहीं है और हवा चालू है। सत्यापित करें कि प्रयोग के बीच में इसे बदलने से बचने के लिए चिकित्सा हवा का टैंक भरा हुआ है और ह्यूमिडिफायर में बुलबुले की पुष्टि करता है। कंप्यूटर, सॉफ़्टवेयर अनुप्रयोग, और वाल्व बिजली आपूर्ति चालू करें।इंटरनेट कनेक्शन को सत्यापित करने के बाद, यह सत्यापित करने के लिए एक नियंत्रण पल्स वितरित करें कि दालों को वितरित करने वाला वाल्व कार्यात्मक है। बर्फ पर एक एल्यूमीनियम प्लेट रखें, जिसके ऊपर गीली सफाई पोंछे का एक टुकड़ा हो और एक कोने में इलेक्ट्रोड जेल का एक छोटा सा गुड़िया डालें। मच्छर को ठंडा होने देने के लिए बर्फ पर एक मच्छर का कप रखें।मच्छर के प्रत्येक एंटीना की नोक को माइक्रो कैंची से क्लिप करें। मच्छर को इलेक्ट्रोड जेल डोलोप के बगल में खींचने के लिए बल का उपयोग करें और प्रत्येक एंटीना की नोक को जेल में धीरे से डुबोएं। बल का उपयोग करके, मच्छर एंटीना को बाहर खींचें, जबकि उन्हें एक-दूसरे के बगल में रखें।माइक्रो कैंची का उपयोग करके मच्छर के सिर को काट लें। धीरे से जेल में संदर्भ इलेक्ट्रोड की नोक को डुबोएं और इसे गर्दन के संपर्क में रखें, जिससे सिर इससे चिपक जाए। संदर्भ हेड इलेक्ट्रोड को माइक्रो मैनिपुलेटर पर रखें।दोनों इलेक्ट्रोड धारकों को एम्पलीफायर से कनेक्ट करें। रिकॉर्डिंग इलेक्ट्रोड को एंटीना युक्तियों के जितना संभव हो उतना करीब रखने के लिए माइक्रो मैनिपुलेटर का उपयोग करें। फिर रिकॉर्डिंग इलेक्ट्रोड में एंटीना टिप्स डालें।एयरलाइन ट्यूबिंग को मच्छर के सिर की तैयारी के करीब, एक सेंटीमीटर पर रखें। एम्पलीफायर और शोर कम करने वाले को चालू करें और सुनिश्चित करें कि बेसलाइन सिग्नल शोर नहीं है। एक बार शोर का स्तर संतोषजनक होने के बाद, परीक्षण करने के लिए एयरलाइन छेद में पहली गंध सिरिंज डालें और फैराडे पिंजरे को बंद करें।फिर पल्स वितरित करने के लिए ईएजी सॉफ्टवेयर पर रिकॉर्ड पर क्लिक करें। मिलीवोल्ट में आयाम के रूप में ईएजी प्रतिक्रियाओं को मापें और फिर अगली गंध या एकाग्रता के साथ आगे बढ़ें। प्रयोग सफलतापूर्वक दर्शाता है कि मच्छर प्रजातियां विभिन्न रसायनों के लिए परिवर्तनीय घ्राण प्रतिक्रियाओं का प्रदर्शन कर सकती हैं।खनिज तेल के लिए प्रतिक्रिया की अनुपस्थिति थी, जिसे नकारात्मक नियंत्रण के रूप में इस्तेमाल किया गया था। विद्युत शोर के कारण परिणामों में त्रुटि को मगरमच्छ क्लिप का उपयोग करके फैराडे पिंजरे में तत्वों को ग्राउंड करके कम किया जा सकता है। मच्छरों की विभिन्न प्रजातियों के लिए एक ही गंधक की प्रतिक्रिया सीमा परिमाण में भिन्न हो सकती है।उदाहरण के लिए, एडीज एजिप्टी, एनोफिलीज स्टीफेंसी और क्यूलेक्स क्विनक्वेफेसियाटस की तुलना में टॉक्सोरहिनचाइट्स रुटिलस सेप्टेनट्रिओनालिस मच्छर बहुत बड़े ईएजी का उत्पादन करते हैं। सकारात्मक नियंत्रण, बेंजाल्डिहाइड के जवाब में एक बड़ा विक्षेपण देखा गया था। जबकि नकारात्मक नियंत्रण, खनिज तेल के लिए प्रतिक्रिया की कमी थी।इन औसत एंटीनल प्रतिक्रियाओं को बार आरेख में दिखाया गया है। इसके अतिरिक्त, प्रत्येक मच्छर प्रजाति के लिए एक विशिष्ट रसायन का पता लगाने की सीमा एंटीना, रसायन की बढ़ती सांद्रता और खुराक प्रतिक्रिया वक्र को प्लॉट करके निर्धारित की गई थी। तैयारी की महान प्रतिक्रिया सुनिश्चित करने के लिए, सिर को काटने और लगाने के बाद जितनी जल्दी हो सके रिकॉर्डिंग शुरू करना महत्वपूर्ण है।ईएजी यह निर्धारित करने की अनुमति देता है कि मच्छर एंटीना किसी दिए गए एकाग्रता पर किसी दिए गए रसायन का जवाब देते हैं या नहीं। हालांकि, यह इस रसायन के संतुलन को निर्धारित करने की अनुमति नहीं देता है। उदाहरण के लिए, चाहे वह एक आकर्षण या पश्चाताप हो।

Research

JoVE Journal

Biology

Protocol for Mosquito Rearing (A. gambiae)

Protocol for Mosquito Rearing A. gambiae

मच्छर पालन (ए gambiae) के लिए प्रोटोकॉल

This protocol describes mosquito rearing in the insectary. The insectary rooms are maintained at 28&deg;C and ~80% humidity, with a 12 hr. day/night ...

Building a Better Mosquito: Identifying the Genes Enabling Malaria and Dengue Fever Resistance in A. gambiae and A. aegypti Mosquitoes

बिल्डिंग एक बेहतर मच्छर: ए gambiae और ए aegypti मच्छरों में मलेरिया और डेंगू बुखार प्रतिरोध सक्रिय जीन की पहचान

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A Practical Approach to Genetic Inducible Fate Mapping: A Visual Guide to Mark and Track Cells In Vivo

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A Step-by-step Method for the Reconstitution of an ABC Transporter into Nanodisc Lipid Particles

Nanodisc लिपिड कणों में एक एबीसी ट्रांसपोर्टर के पुनर्गठन के लिए एक विधि कदम दर कदम

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Nonexperts के लिए Phylogenetics के लिए एक व्यावहारिक गाइड

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समस्या निवारण रणनीतियों के साथ आधुनिक मात्रात्मक फ्लोरोसेंट पश्चिमी सोख्ता के लिए एक गाइड

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सिंक्रोट्रॉन माइक्रो-सीटी के लिए हाई-थ्रूपुट कॉर्टिकल बोन सैंपल प्रोक्योरमेंट और एनालिसिस के लिए एक सेक्शनिंग, कोरिंग और इमेज प्रोसेसिंग गाइड

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A recently published DNA extraction protocol using magnetic beads and an automated DNA extraction instrument suggested that it is possible to extract high ...