Name: estimation of plant biomass lignin content using thioglycolic acid (tga)
Uploaded: 2021-07-24T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Estimation of Plant Biomass Lignin Content using Thioglycolic Acid TGA at JoVE.com

Ringraziamo il Dipartimento di Plant & Soil Science and Cotton Inc.

1. Preparazione di campioni vegetali
<ol><li>Raccogliere piante di cotone di due mesi dalla serra(figura 1A).</li>
	<li>Capovolgere delicatamente vasi vegetali per separare terreno e radici con radici laterale intatte allentando il terreno intorno alla pianta(Figura 1B).</li>
	<li>Lavare accuratamente le piante raccolte in vassoi riempiti d'acqua per rimuovere tutto lo sporco (per campioni di radici)(Figura 1C).</li>
	<li>Utilizza...

<ol>
	<li>Freudenberg, K., Neish, A. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Constitutionand Biosynthesis of Lignin. , 129 (1968).</li><li>Chio, C., Sain, M., Qin, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lignin+utilization:+A+review+of+lignin+depolymerization+from+various+aspects.">Lignin utilization: A review of lignin depolymerization from various aspects.</a> Renewable and Sustainable Energy Reviews. 107, 232-249 (2019).</li><li>Sun, Z., Fridrich, B., de Santi, A., Elangovan, S., Barta, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bright+Side+of+Lignin+Depolymerization:+Toward+New+Platform+Chemicals.">Bright Side of Lignin Depolymerization: Toward New Platform Chemicals.</a> Chemical Reviews. 118, 614-678 (2018).</li><li>Xu, F., Sun, R. 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M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Engineering+Plant+Biomass+Lignin+Content+and+Composition+for+Biofuels+and+Bioproducts.">Engineering Plant Biomass Lignin Content and Composition for Biofuels and Bioproducts.</a> Energies. 8, 7654-7676 (2015).</li><li>Mendu, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Global+bioenergy+potential+from+high-lignin+agricultural+residue.">Global bioenergy potential from high-lignin agricultural residue.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences. 109, 4014-4019 (2012).</li><li>Brinkmann, K., Blaschke, L., Polle, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+Different+Methods+for+Lignin+Determination+as+a+Basis+for+Calibration+of+Near-Infrared+Reflectance+Spectroscopy+and+Implications+of+Lignoproteins.">Comparison of Different Methods for Lignin Determination as a Basis for Calibration of Near-Infrared Reflectance Spectroscopy and Implications of Lignoproteins.</a> Journal of Chemical Ecology. 28, 2483-2501 (2002).</li><li>Moreira-Vilar, F. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Acetyl+Bromide+Method+Is+Faster,+Simpler+and+Presents+Best+Recovery+of+Lignin+in+Different+Herbaceous+Tissues+than+Klason+and+Thioglycolic+Acid+Methods.">The Acetyl Bromide Method Is Faster, Simpler and Presents Best Recovery of Lignin in Different Herbaceous Tissues than Klason and Thioglycolic Acid Methods.</a> PLoS One. 9, 110000 (2014).</li><li>Iwaasa, A. D., Beauchemin, K. A., Acharya, S. N., Buchanan-Smith, J. 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La lignina svolge un ruolo significativo nella crescita e nello sviluppo delle piante e recentemente è stata ampiamente studiata per applicazioni di biocarburanti, bioenergia e bioproduttivi. La lignina è ricca di composti aromatici che vengono conservati in tutte le pareti cellulari secondarie delle piante vascolari. Ha diverse applicazioni industriali come prodotti a pannelli in legno, bio disperdenti, flocculanti, schiume poliuretaline e in resine di circuitistampati 29,<sup class=...

La lignina è uno dei componenti portanti vitali delle pareti cellulari delle piante e il secondo polimero più abbondante sulla Terra1. Chimicamente, la lignina è un eteropolimero reticolato costituito da composti fenolici complessi ad alto peso molecolare che formano una fonte rinnovabile naturale di polimeri aromatici e sintesi di biomateriali2,3. Questo polimero naturale svolge ruoli significativi nella crescita delle piante, nello sviluppo, nella sopravvivenza, nel supporto meccanico, nella rigidità delle pareti cellulari, nel trasporto dell'acqua, nel trasporto di minerali, nella resistenza all'alloggio, nello sviluppo di tessuti e organi, nella deposizione di energia e nella protezione da stress biotici eabiotici 4,5,6,7. La lignina è composta principalmente da tre diversi monoligoli: coniferile, sinapil e alcoli p-coumarili derivati dalla via fenil propanoide8,9. La quantità di lignina e la composizione dei monomeri variano in base alle specie vegetali, al tipo di tessuto / organo e alle diverse fasi dello sviluppo delle piante10. La lignina è ampiamente classificata in legno tenero, legno duro e lignina d'erba basata sulla composizione della sorgente e del monolignolo. Il legno tenero è composto principalmente dal 95% di alcol di coniferile con il 4% di p-coumaryl e l'1% di alcoli sinapilici. Il legno duro ha alcoli di coniferile e sinapil in proporzioni uguali, mentre la lignina erba è composta da varie proporzioni di alcoli di coniferile, sinapile e p-coumaryl11,12. La composizione dei monomeri è critica in quanto determina la forza della lignina, la decomposizione e la degradazione della parete cellulare, nonché determina la struttura molecolare, la ramificazione e il collegamento incrociato con altri polisaccaridi13,14.
La ricerca sulla lignina sta acquisendo importanza nel foraggiamento, nell'industria tessile, nell'industria della carta e per il bioetanolo, i biocarburanti e i bio-prodotti a causa del suo basso costoe dell'elevata abbondanza 15,16. Vari metodi chimici (ad esempio, bromuro di acetile, detergenti acidi, ossidazione di Klason e permanganato) insieme a metodi strumentali (ad esempio, spettroscopia del vicino infrarosso (NIR), spettroscopia a risonanza magnetica nucleare (NMR) e spettrofotometria ultravioletta (UV) sono stati utilizzati per la quantificazione della lignina9,17. I metodi di analisi della lignina sono generalmente classificati in base alla radiazione elettromagnetica, alla gravimetria e alla solubilità. Il principio alla base della stima della lignina mediante radiazione elettromagnetica era basato sulla proprietà chimica della lignina con cui assorbe la luce a lunghezze d'onda specifiche. Questi risultati sono stati stimati in base al principio che la lignina ha una maggiore assorbanza UV rispetto ai carboidrati. Nel 1962, Bolker e Somerville usavano pellet di cloruro di potassio per stimare il contenuto di lignina nel legno18. Tuttavia, questo metodo presenta inconvenienti nella stima del contenuto di lignina provenienti da campioni erbacei a causa della presenza di composti fenolici non lignina e dell'assenza di un adeguato coefficiente di estinzione. Nel 1970, Fergus e Goring scoprirono che i massimi di assorbimento del composto guaiacyl e siringile erano a 280 nm e 270 nm, il che corresse la questione del coefficiente di estinzione del metodo19di Bolker e Somerville. Successivamente, la spettroscopia infrarossa, una tecnica altamente sensibile per caratterizzare i fenolici, è stata utilizzata anche per la stima della lignina con una piccola quantità di campioni di biomassa vegetale. Un esempio di tale tecnologia era la spettrofotometria di trasformazione di Fourier a riflessione diffusa. Questo metodo, tuttavia, manca di uno standard adeguato simile al metodo UV20. Successivamente, il contenuto di lignina è stato stimato da NIRS (spettroscopia vicino all'infrarosso) e NMR (spettroscopia di risonanza magnetica nucleare). Tuttavia, ci sono svantaggi in questi metodi, non alterano la struttura chimica della lignina, mantenendo la sua purezza20.
Il metodo gravimetrico klason è un metodo analitico diretto e più affidabile per la stima della lignina degli steli legnosi. La base per la stima gravimetrica della lignina è l'idrolisi/solubilizzazione di composti non lignina e la raccolta di lignina insolubile per la gravimetria21. In questo metodo, i carboidrati vengono rimossi per idrolisi della biomassa con H2SO4 concentrato per estrarre il residuo di lignina20,22. Il contenuto di lignina stimato con questo metodo è noto come lignina acida insolubile o lignina di Klason. L'applicazione del metodo Klason dipende dalle specie vegetali, dal tipo di tessuto e dal tipo di parete cellulare. La presenza di quantità variabili di componenti non lignina come tannini, polisaccaridi e proteine, si traduce in differenze proporzionali nella stima del contenuto di lignina acida insolubile/solubile. Pertanto, il metodo Klason è raccomandato solo per la stima della lignina della biomassa ad alto contenuto di lignina come gli steli legnosi17,23. I metodi di solubilità come il bromuro di acetile (AcBr), la lignina insolubile con acido e l'acido tioglicolico (TGA) sono metodi più comunemente usati per stimare il contenuto di lignina da varie fonti di biomassa vegetale. Kim et al. Il primo metodo estrae la lignina come residuo insolubile solubilizzando la cellulosa e l'emicellulosa, mentre il secondo metodo separa la lignina nella frazione solubile, lasciando la cellulosa e l'emicellulosa come residuo insolubile24.
Metodi analoghi utilizzati nella stima della lignina in base alla solubilità sono i metodi dell'acido tioglicolico (TGA) e del bromuro di acetile (AcBr)25. Sia il TGA che il bromuro di acetile stimano il contenuto di lignina misurando l'assorbanza della lignina solubilizzata a 280 nm; Tuttavia, il metodo AcBr degrada gli xilulici durante il processo di solubilizzazione della lignina e mostra un falso aumento del contenuto di lignina26. Il metodo tioglicolato (TGA) è il metodo più affidabile, in quanto dipende da un legame specifico con i gruppi tioether di gruppi di alcole benzile di lignina con TGA. La lignina legata al TGA viene precipitata in condizioni acide utilizzando HCl e il contenuto di lignina è stimato utilizzando la sua assorbanza a 280 nm27. Il metodo TGA presenta ulteriori vantaggi di meno modifiche strutturali, una forma solubile di stima della lignina, meno interferenze da componenti non di lignina e una stima precisa della lignina dovuta a un legame specifico con la TGA.
Questo metodo TGA viene modificato in base al tipo di campione di biomassa vegetale utilizzato per la stima del contenuto di lignina. Qui, abbiamo modificato e adattato il metodo TGA rapido delle cannucce di riso27 ai tessuti di cotone per stimare il contenuto di lignina. In breve, i campioni di piante in polvere essiccati sono stati sottoposti a tampone di solubilizzazione proteica ed estrazione di metanolo per rimuovere le proteine e la frazione solubile in alcool. Il residuo insolubile di alcol è stato trattato con TGA e lignina precipitata in condizioni acide. Una curva standard di lignina è stata generata usando lignina di bambù commerciale ed è stata ottenuta una linea di regressione (y = mx+c). Il valore "x" utilizza valori medi di assorbanza della lignina a 280 nm, mentre i valori "m" e "c" sono stati inseriti dalla linea di regressione per calcolare la concentrazione sconosciuta di lignina in campioni di biomassa delle piante di cotone. Questo metodo è diviso in cinque fasi: 1) preparazione di campioni vegetali; 2) lavare i campioni con acqua e metanolo; 3) trattamento del pellet con TGA e acido per far precipitare la lignina; 4) precipitazione della lignina; 5) la preparazione standard della curva e la stima del contenuto di lignina del campione. Le prime due fasi si concentrano principalmente sulla preparazione del materiale vegetale seguita da acqua, PSB (tampone di solubilizzazione proteica) ed estrazioni di metanolo per ottenere il materiale insolubile alcool. Quindi, è stato trattato con TGA (acido tioglicolico) e HCl per formare un complesso con lignina nella terza fase. Alla fine, l'HCl è stato utilizzato per precipitare la lignina, che è stata sciolta in idrossido di sodio per misurarne l'assorbanza a 280 nm28.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>BioSpectrophotometer kinetic</td>
			<td>Eppendorf kinetic</td>
			<td>6136000010</td>
			<td>For measuring absorbance at 280 nm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifuge</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td>5424</td>
			<td>For centrifuging&#160; samples</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Commercial bamboo lignin</td>
			<td>Aldrich</td>
			<td>1002171289</td>
			<td>Used in the preparation of the standard curve</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Distilled water</td>
			<td>Fischer Scientific</td>
			<td>16690382</td>
			<td>Used in the protocol</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Falcon tubes</td>
			<td>VWR</td>
			<td>734-0448</td>
			<td>Containers for solutions</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Freezer mill</td>
			<td>Spex Sample Prep</td>
			<td>68-701-15</td>
			<td>For fine grinding of plant tissue samples</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heat block/ Thermal mixer</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td>13527550</td>
			<td>For temperature controlled steps during lignin extraction</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hotplate stirrer</td>
			<td>Walter</td>
			<td>WP1007-HS</td>
			<td>Used for preparation of solutions</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hydrochloric acid (HCL)</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>221677</td>
			<td>Used in the protocol</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Incubator</td>
			<td>Fisherbrand</td>
			<td>150152633</td>
			<td>For thorough drying of plant tissue samples</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Measuring scale</td>
			<td>Mettler toledo</td>
			<td>30243386</td>
			<td>For measuring plant tissue weight, standards and microfuge tubes</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Methanol (100 %)</td>
			<td>Fischer Scientific</td>
			<td>67-56-1</td>
			<td>Used in the protocol</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microfuge tubes (2 mL)</td>
			<td>Microcentrifuge</td>
			<td>Z628034-500EA</td>
			<td>Containers for extraction of lignin</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Plant biomass gerinder</td>
			<td>Hanchen</td>
			<td>Amazon</td>
			<td>Used for crushing dried samples</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pH meter</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>AE150</td>
			<td>Measuring pH for solutions prepared for lignin extraction</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Temperature controlled incubator/oven</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>15-015-2633</td>
			<td>Used in the protocol</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Thioglycolic acid (TGA)</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>68-11-1</td>
			<td>Used in the protocol</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vacuum dryer</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td>22820001</td>
			<td>Used for drying samples</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vortex mixer</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td>3340001</td>
			<td>For proper mixing of samples</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

estimation of plant biomass lignin content using thioglycolic acid (tga)

La lignina è un polimero naturale che è il secondo polimero più abbondante sulla Terra dopo la cellulosa. La lignina è depositata principalmente nelle pareti cellulari secondarie vegetali ed è un eteropolimero aromatico composto principalmente da tre monoligoli di notevole importanza industriale. La lignina svolge un ruolo importante nella crescita e nello sviluppo delle piante, protegge dagli stress biotici e abiotici e nella qualità dei foraggi animali, del legno e dei prodotti industriali di lignina. Una stima accurata del contenuto di lignina è essenziale sia per la comprensione fondamentale della biosintesi della lignina che per le applicazioni industriali della biomassa. Il metodo dell'acido tioglicolico (TGA) è un metodo altamente affidabile per stimare il contenuto totale di lignina nella biomassa vegetale. Questo metodo stima il contenuto di lignina formando tioeteri con i gruppi alcolici benzili della lignina, solubili in condizioni alcaline e insolubili in condizioni acide. Il contenuto totale di lignina è stimato utilizzando una curva standard generata dalla lignina di bambù commerciale.

Due diverse linee sperimentali di cotone sono state confrontate per differenze nel loro contenuto di lignina in tessuti diversi. Il contenuto di lignina estratta di ciascun campione è stato misurato a 280 nm e ha registrato i rispettivi valori di assorbanza. I valori medi di assorbanza di ciascuna replica biologica sono stati confrontati con la linea di regressione della curva standard di lignina(tabella 2, figura 3C). La linea di regressione, y = mx + c, viene utilizzata p...

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Estimation of Plant Biomass Lignin Content using Thioglycolic Acid TGA

Qui presentiamo un metodo TGA modificato per la stima del contenuto di lignina nella biomassa vegetale erbacea. Questo metodo stima il contenuto di lignina formando specifici legami di tioetere con lignina e presenta un vantaggio rispetto al metodo Klason, in quanto richiede un campione relativamente piccolo per la stima del contenuto di lignina.

Stima del contenuto di Lignina da biomassa vegetale mediante acido tioglicolico (TGA)

Lignin is a natural polymer that is the second most abundant polymer on Earth after cellulose. Lignin is mainly deposited in plant secondary cell walls ...

La lignina è un eteropolimero complesso composto da tre monoligoli. È il secondo polimero più abbondante al mondo vicino alla cellulosa. Qui, dimostriamo il metodo dell'acido tioglicolico, che è il metodo più affidabile per la stima del contenuto di lignina.Questo metodo si basa sul principio che la lignina si lega all'acido tioglicolico attraverso legami di tioetere. Inoltre, abbiamo diviso questo protocollo in cinque fasi. Nella prima fase, prepariamo il materiale vegetale.Nella seconda fase, isoliamo l'estratto insolubile di alcol. Nella terza fase, precipitiamo la lignina usando acido tioglicolico e condizioni acide. Nella quarta fase, prepariamo la curva standard di lignina usando lignina di bambù industriale.Infine, nella quinta fase, stimiamo il contenuto di lignina utilizzando la curva standard preparata nella quarta fase. Il materiale vegetale viene raccolto, capovolto i vasi per separare le radici, lavato accuratamente in acqua, asciugato all'aria per due giorni, trasferito in contenitori etichettati e incubato nell'incubatrice a 49 gradi centigradi per una settimana a 10 giorni. Usando le forbici, il tessuto viene ulteriormente tagliato in pezzi di dimensioni da 1 mm a 3 mm.In alternativa, la smerigliatrice a biomassa viene utilizzata per schiacciare i tessuti vegetali. Utilizzare il tessuto radicale Accendere la smerigliatrice a biomassa raccogliere la polvere frantumata in contenitori preetito. Allo stesso modo, ripetere per il tessuto stelo e il tessuto fogliare.La polvere frantumata viene caricata nel vaso di macinazione che viene quindi collocata nel congelatore E eseguire il congelatore alla velocità di 10 CP per tre cicli. Pesare 20 mg della polvere di tessuto macinato e trasferirli in un tubo prefazione da 2 ml. Prendere nota del tubo vuoto e del tubo con polvere di tessuto e polvere di tessuto nel notebook del laboratorio.Incubare i tubi con tappo aperto a 60 gradi centigradi per un'ora. Dopo l'incubazione, aggiungere 1,8 ml di acqua a ciascuna centrifuga del vortice campione a 15.000 giri/min per 10 minuti. Scartare il supernatante Aggiungere 1,8 ml di metanolo.Vortice e incubare in un blocco centigrado preriscaldato di 60 gradi per 20 minuti Dopo la centrifuga di incubazione a 15.000 giri/min per 10 minuti. Ripetere questo passaggio ancora una volta. Dopo la centrifugazione scartare il supernatante e asciugare i pellet nell'essiccatore sottovuoto per due o tre ore o fino a quando il pallet non è completamente asciutto.Misurare e registrare il peso di ogni tubo nel notebook da laboratorio per la stima del contenuto di lignina alla fine. Includere anche il controllo positivo della lignina di bambù industriale a questo punto a partire da 0,5 mg a 4 mg nei triplicati. Aggiungere 1 ml di 3 normale acido cloridrico, insieme a cento microlitri di acido glicolico ad ogni vortice campione e incubare a 80 gradi centigradi per 3 ore.Dopo 3 ore di incubazione trasferirli su un rack e lasciare raffreddare per 10 minuti. quindi centrifugare a 15.000 giri/min per 10 minuti. Dopo la centrifugazione, il colore della soluzione è simile a questo.Scartare il supernatante. Aggiungere 1 ml di acqua. Centrifuga vortice a 15.000 giri/min per 10 minuti.Scartare il supernatante. Aggiungere 1 ml di 1 idrossido di sodio normale. Vortice e incubare a 37 gradi centigradi shaker durante la notte.Dopo la centrifugazione dell'incubazione notturna i tubi a 15.000 giri/min per 10 minuti. Trasferire i tubi freschi supernatanti preetichettati da 2 ml aggiungere 200 microlitri di acido cloridrico concentrato al supernatante. Mescolarli con una leggera inversione come mostrato qui.Incubarli in frigorifero a 4 gradi centigradi durante la notte. Dopo la centrifuga di incubazione a 15.000 giri/min per 10 minuti. Scartare il supernatante.Aggiungere 1 ml di idrossido di sodio. Vortice e incubare nello shaker a temperatura ambiente per 10-15 minuti. Utilizzare lo spettrofotometro per raccogliere le letture di assorbanza di 280 nanometri, Prendere 2 microlitri di idrossido di sodio come vuoto poiché la lignina precipitata viene sciolta in idrossido di sodio.Rendi lo spazio vuoto a zero. Allo stesso modo, ripetere per i campioni. Utilizzare due microlitri di ogni campione per raccogliere le letture di assorbanza nel notebook del laboratorio.Prendi tre letture per ogni campione per tre repliche tecniche. Nella prima colonna, abbiamo il numero di campione. Nella seconda colonna, abbiamo repliche biologiche in cui R1, R2, R3 rappresentano tre repliche biologiche di una linea sperimentale.Nella terza colonna, abbiamo mediato le letture di assorbanza ottenute a 280 nanometri. Abbiamo calcolato il contenuto di lignina nella quarta colonna usando la formula y=mx-c dove x è l'OD medio.m e i valori c vengono tracciati dalla linea di regressione della curva standard preparata. La quinta colonna è il peso dopo i lavaggi di metanolo e acqua.Quindi questo è il modo in cui viene utilizzato per la stima del contenuto di lignina in mg. Quindi dividiamo il valore ottenuto nella quarta colonna per quinta colonna per ottenere il valore per mg di contenuto di lignina nella sesta colonna. E questo valore viene moltiplicato per 1000 per ottenere il peso della parete cellulare per grammo.E il contenuto di lignina percentuale viene calcolato dividendo questo valore per 1000 e moltiplicando per 100. Infine, otteniamo la lignina media calcolando la media della lignina di tre repliche biologiche di ciascuna linea sperimentale che saranno confrontate con la media di un'altra linea sperimentale sotto forma di un grafico a barre per comprendere le differenze nel contenuto di lignina. Possiamo anche applicare il test t degli studenti per testare il loro livello di significatività.Nella colonna A, abbiamo la lignina di bambù commerciale, e poi il peso della lignina di bambù che è stata presa prima del TGA e le loro rispettive letture di assorbanza a 280 nanometri. Questi valori nella tabella A sono stati utilizzati per tracciare un grafico sparso nella colonna B, che ci fornisce la linea di regressione con valori m e c. In C, abbiamo confrontato i valori ottenuti utilizzando la curva standard e la linea sperimentale industriale di lignina di bambù uno e due sono stati confrontati sotto forma di grafico a barre e il risultato è che mostrano differenza tra loro.

Research

JoVE Journal

Biochemistry

Estimation of Plant Biomass Lignin Content using Thioglycolic Acid (TGA)

High-throughput Screening of Carbohydrate-degrading Enzymes Using Novel Insoluble Chromogenic Substrate Assay Kits

High-throughput screening degli enzimi carboidrati di degradazione Utilizzando Novel insolubile Chromogenic Substrate Assay Kit

Carbohydrates active enzymes (CAZymes) have multiple roles in vivo and are widely used for industrial processing in the biofuel, textile, detergent, paper ...

Ricerca

Biochimica

Combining Raman Imaging and Multivariate Analysis to Visualize Lignin, Cellulose, and Hemicellulose in the Plant Cell Wall

Combinazione di Raman Imaging e analisi multivariata per la visualizzazione di lignina, cellulosa e emicellulosa nella parete cellulare delle piante

The application of Raman imaging to plant biomass is increasing because it can offer spatial and compositional information on aqueous solutions. The ...

Determination of the Glycogen Content in Cyanobacteria

Determinazione del contenuto di glicogeno nei cianobatteri

Cyanobacteria accumulate glycogen as a major intracellular carbon and energy storage&#160;during photosynthesis. Recent developments in research have ...

High Throughput, Absolute Determination of the Content of a Selected Protein at Tissue Levels Using Quantitative Dot Blot Analysis (QDB)

High Throughput, Absolute Determination of the Content of a Selected Protein at Tissue Levels Using Quantitative Dot Blot Analysis QDB

High Throughput, assoluta determinazione del contenuto di una proteina selezionato presso i livelli del tessuto utilizzando quantitativi Dot Blot analisi (QDB)

Lacking a convenient, quantitative, high throughput immunoblot method for absolute determination of the content of a specific protein at cellular and ...

Spectrophotometric Determination of Phycobiliprotein Content in Cyanobacterium Synechocystis

Spectrophotometric Determination of Phycobiliprotein Content in Cyanobacterium Synechocystis

Determinazione spettrofotometrica del contenuto di Phycobiliprotein in Cyanobacterium Synechocystis

This is a simple protocol for the quantitative determination of phycobiliprotein content in the model cyanobacterium Synechocystis. Phycobiliproteins are ...

Affinity Purification of Chloroplast Translocon Protein Complexes Using the TAP Tag

Purificazione di affinità del cloroplasto Translocon proteina complessi usando il Tag di rubinetto

Chloroplast biogenesis requires the import of thousands of nucleus-encoded proteins into the plastid. The import of these proteins depends on the ...

Using High Content Imaging to Quantify Target Engagement in Adherent Cells

Con alto contenuto di Imaging per quantificare l'impegno di destinazione in cellule aderenti

Quantitating the interaction of small molecules with their intended protein target is critical for drug development, target validation and chemical probe ...

Using In Vitro Fluorescence Resonance Energy Transfer to Study the Dynamics Of Protein Complexes at a Millisecond Time Scale

Utilizzo In Vitro Fluorescence Resonance Energy Transfer per studiare la dinamica dei complessi della proteina ad una scala di tempo di millisecondo

Proteins are the primary operators of biological systems, and they usually interact with other macro- or small molecules to carry out their biological ...

Identifying Amino Acid Overproducers Using Rare-Codon-Rich Markers

Identificare gli amminoacidi sovraproduttori utilizzando marcatori rari-codoni-ricchi

To satisfy the ever-growing market for amino acids, high-performance production strains are needed. The amino acid overproducers are conventionally ...

Measuring Interactions between Fluorescent Probes and Lignin in Plant Sections by sFLIM Based on Native Autofluorescence

Misurazione delle interazioni tra sonde fluorescenti e lignina nelle sezioni delle piante mediante sFLIM in base all'autofluorescenza nativa

In lignocellulosic biomass (LB), the activity of enzymes is limited by the appearance of non-specific interactions with lignin during the hydrolysis ...