Name: cardiac response to &#946;-adrenergic stimulation determined by pressure-volume loop analysis
Uploaded: 2021-05-19T14:00:00
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우리는 마누엘라 리잘, 한스-피터 겐셰이머, 크리스틴 리히터, 그리고 하이델베르크 대학의 인터파쿨테르 바이오메디치니슈 포르충세인리치(IBF) 팀에 감사드립니다.
이 작품은 DZHK (독일 심장 혈관 연구 센터), BMBF (독일 교육 및 연구부), 바덴 뷔르템베르크 연방 국가 혁신 재단 및 도이치 포르스충스게마인샤프트 (DFG, 독일 연구 재단) 프로젝트 ID 239283807 - TRR 152, FOR 2289 및 공동 연구 센터 (SFB) 118에 의해 지원되었다.

모든 동물 실험은 카를스루에 지역 위원회와 하이델베르크 대학의 규정에 따라 승인및 수행되었다 (AZ 35-9185.82 / A-2/15, AZ 35-9185.82/A-18/15, AZ 35-9185.81/G131/15, AZ 35-9185.81/G121/17) 과학목적으로 사용되는 동물의 보호에 관한 유럽 의회의 지침 2010/63/EU지침에 부합한다. 이 프로토콜에 도시된 데이터는 야생 형 C57Bl6/N 남성 마우스(17± 1.4주)로부터 파생된다. 마우스는 하이델베르크 의학 학부의 동물 시설 (IB...

<ol>
	<li>Bacmeister, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inflammation+and+fibrosis+in+murine+models+of+heart+failure.">Inflammation and fibrosis in murine models of heart failure.</a> Basic Research in Cardiology. 114 (3), 19 (2019).</li><li>Hartupee, J., Mann, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neurohormonal+activation+in+heart+failure+with+reduced+ejection+fraction.">Neurohormonal activation in heart failure with reduced ejection fraction.</a> Nature Reviews Cardiology. 14 (1), 30-38 (2017).</li><li>Hasenfuss, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+human+cardiovascular+disease,+heart+failure+and+hypertrophy.">Animal models of human cardiovascular disease, heart failure and hypertrophy.</a> Cardiovascular Research. 39 (1), 60-76 (1998).</li><li>Lefkowitz, R. J., Rockman, H. A., Koch, W. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Catecholamines,+cardiac+beta-adrenergic+receptors,+and+heart+failure.">Catecholamines, cardiac beta-adrenergic receptors, and heart failure.</a> Circulation. 101 (14), 1634-1637 (2000).</li><li>Cingolani, O. H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pressure-volume+relation+analysis+of+mouse+ventricular+function.">Pressure-volume relation analysis of mouse ventricular function.</a> The American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology. 301, 2198-2206 (2011).</li><li>Bacmeister, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessment+of+PEEP-Ventilation+and+the+Time+Point+of+Parallel-Conductance+Determination+for+Pressure-Volume+Analysis+Under+beta-Adrenergic+Stimulation+in+Mice.">Assessment of PEEP-Ventilation and the Time Point of Parallel-Conductance Determination for Pressure-Volume Analysis Under beta-Adrenergic Stimulation in Mice.</a> Frontiers in Cardiovascular Medicine. 6, 36 (2019).</li><li>Segin, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cardiomyocyte-Specific+Deletion+of+Orai1+Reveals+Its+Protective+Role+in+Angiotensin-II-Induced+Pathological+Cardiac+Remodeling.">Cardiomyocyte-Specific Deletion of Orai1 Reveals Its Protective Role in Angiotensin-II-Induced Pathological Cardiac Remodeling.</a> Cells. 9 (5), (2020).</li><li>Clark, J. E., Marber, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Advancements+in+pressure-volume+catheter+technology+-+stress+remodelling+after+infarction.">Advancements in pressure-volume catheter technology - stress remodelling after infarction.</a> Experimental Physiology. 98 (3), 614-621 (2013).</li><li>Glower, D. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Linearity+of+the+Frank-Starling+relationship+in+the+intact+heart:+the+concept+of+preload+recruitable+stroke+work.">Linearity of the Frank-Starling relationship in the intact heart: the concept of preload recruitable stroke work.</a> Circulation. 71 (5), 994-1009 (1985).</li><li>Winter, E. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Left+ventricular+function+in+the+post-infarct+failing+mouse+heart+by+magnetic+resonance+imaging+and+conductance+catheter:+a+comparative+analysis.">Left ventricular function in the post-infarct failing mouse heart by magnetic resonance imaging and conductance catheter: a comparative analysis.</a> Acta Physiologica. 194 (2), 111-122 (2008).</li><li>Krenz, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Conductance,+admittance,+and+hypertonic+saline:+should+we+take+ventricular+volume+measurements+with+a+grain+of+salt.">Conductance, admittance, and hypertonic saline: should we take ventricular volume measurements with a grain of salt.</a> Journal of Applied Physiology. 107 (6), 1683-1684 (2009).</li><li>Pacher, P., Nagayama, T., Mukhopadhyay, P., Batkai, S., Kass, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measurement+of+cardiac+function+using+pressure-volume+conductance+catheter+technique+in+mice+and+rats.">Measurement of cardiac function using pressure-volume conductance catheter technique in mice and rats.</a> Nature Protocols. 3 (9), 1422-1434 (2008).</li><li>Wei, A. E., Maslov, M. Y., Pezone, M. J., Edelman, E. R., Lovich, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+pressure-volume+conductance+catheters+in+real-time+cardiovascular+experimentation.">Use of pressure-volume conductance catheters in real-time cardiovascular experimentation.</a> Heart, Lung and Circulation. 23 (11), 1059-1069 (2014).</li><li>van Hout, G. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Admittance-based+Pressure-Volume+Loops+versus+gold+standard+cardiac+magnetic+resonance+imaging+in+a+porcine+model+of+myocardial+infarction.">Admittance-based Pressure-Volume Loops versus gold standard cardiac magnetic resonance imaging in a porcine model of myocardial infarction.</a> Physiological Reports. 2 (4), 00287 (2014).</li><li>Wei, C. L., Shih, M. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Calibration+Capacity+of+the+Conductance-to-Volume+Conversion+Equations+for+the+Mouse+Conductance+Catheter+Measurement+System.">Calibration Capacity of the Conductance-to-Volume Conversion Equations for the Mouse Conductance Catheter Measurement System.</a> IEEE Transactions on Biomedical Engineering. 56 (6), 1627-1634 (2009).</li><li>Das, S., MacDonald, K., Chang, H. Y., Mitzner, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+simple+method+of+mouse+lung+intubation.">A simple method of mouse lung intubation.</a> Journal of Visualized Experiments. (73), e50318 (2013).</li><li>Faul, F., Erdfelder, E., Lang, A. G., Buchner, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=G*Power+3:+a+flexible+statistical+power+analysis+program+for+the+social,+behavioral,+and+biomedical+sciences.">G*Power 3: a flexible statistical power analysis program for the social, behavioral, and biomedical sciences.</a> Behavior Research Methods. 39 (2), 175-191 (2007).</li><li>Weiss, J. L., Frederiksen, J. W., Weisfeldt, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hemodynamic+determinants+of+the+time-course+of+fall+in+canine+left+ventricular+pressure.">Hemodynamic determinants of the time-course of fall in canine left ventricular pressure.</a> Journal of Clinical Investigation. 58 (3), 751-760 (1976).</li><li>Faul, F., Erdfelder, E., Lang, A. G., Buchner, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=G*Power+3:+a+flexible+statistical+power+analysis+program+for+the+social,+behavioral,+and+biomedical+sciences.">G*Power 3: a flexible statistical power analysis program for the social, behavioral, and biomedical sciences.</a> Behavioral Research Methods. 39 (2), 175-191 (2007).</li><li>Jacoby, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Direct+comparison+of+magnetic+resonance+imaging+and+conductance+microcatheter+in+the+evaluation+of+left+ventricular+function+in+mice.">Direct comparison of magnetic resonance imaging and conductance microcatheter in the evaluation of left ventricular function in mice.</a> Basic Research in Cardiology. 101 (1), 87-95 (2006).</li><li>Georgakopoulos, D., Kass, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Estimation+of+parallel+conductance+by+dual-frequency+conductance+catheter+in+mice.">Estimation of parallel conductance by dual-frequency conductance catheter in mice.</a> The American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology. 279 (1), 443-450 (2000).</li><li>Calligaris, S. D., Ricca, M., Conget, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cardiac+stress+test+induced+by+dobutamine+and+monitored+by+cardiac+catheterization+in+mice.">Cardiac stress test induced by dobutamine and monitored by cardiac catheterization in mice.</a> Journal of Visualized Experiments. (72), e50050 (2013).</li><li>Abraham, D., Mao, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cardiac+Pressure-Volume+Loop+Analysis+Using+Conductance+Catheters+in+Mice.">Cardiac Pressure-Volume Loop Analysis Using Conductance Catheters in Mice.</a> Journal of Visualized Experiments. (103), e52942 (2015).</li><li>Pearce, J. A., Porterfield, J. E., Larson, E. R., Valvano, J. W., Feldman, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Accuracy+considerations+in+catheter+based+estimation+of+left+ventricular+volume.">Accuracy considerations in catheter based estimation of left ventricular volume.</a> Conference proceedings - IEEE engineering in medicine and biology society. 2010, 3556-3558 (2010).</li><li>Nielsen, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Left+ventricular+volume+measurement+in+mice+by+conductance+catheter:+evaluation+and+optimization+of+calibration.">Left ventricular volume measurement in mice by conductance catheter: evaluation and optimization of calibration.</a> The American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology. 293 (1), 534-540 (2007).</li><li>Townsend, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measuring+Pressure+Volume+Loops+in+the+Mouse.">Measuring Pressure Volume Loops in the Mouse.</a> Journal of Visualized Experiments. (111), e53810 (2016).</li><li>Barnabei, M. S., Palpant, N. J., Metzger, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Influence+of+genetic+background+on+ex+vivo+and+in+vivo+cardiac+function+in+several+commonly+used+inbred+mouse+strains.">Influence of genetic background on ex vivo and in vivo cardiac function in several commonly used inbred mouse strains.</a> Physiological Genomics. 42 (2), 103-113 (2010).</li><li>Oosterlinck, W., Vanderper, A., Flameng, W., Herijgers, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Glucose+tolerance+and+left+ventricular+pressure-volume+relationships+in+frequently+used+mouse+strains.">Glucose tolerance and left ventricular pressure-volume relationships in frequently used mouse strains.</a> Journal of Biomedicine and Biotechnology. 2011, 281312 (2011).</li><li>Guo, X., Kono, Y., Mattrey, R., Kassab, G. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Morphometry+and+strain+distribution+of+the+C57BL/6+mouse+aorta.">Morphometry and strain distribution of the C57BL/6 mouse aorta.</a> The American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology. 283 (5), 1829-1837 (2002).</li><li>Weiss, R. M., Ohashi, M., Miller, J. D., Young, S. G., Heistad, D. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Calcific+aortic+valve+stenosis+in+old+hypercholesterolemic+mice.">Calcific aortic valve stenosis in old hypercholesterolemic mice.</a> Circulation. 114 (19), 2065-2069 (2006).</li></ol>

여기서, 우리는 증가하는 β-아드레너기자극하에서 마우스에서 생체 내 심장 기능을 분석하는 프로토콜을 제공한다. 절차는 유전자 변형 마우스 또는 내정간섭시 심장 기능 및 부력 예비군 (예를 들면, 이노트로피 및 크로노트로피)의 기준선 매개 변수를 모두 해결하는 데 사용할 수 있습니다. 심장 기능을 결정하는 다른 수단과 비교하여 압력 볼륨 루프(PVL) 측정의 가장 두드러진 장점은 본질적이...

심혈관 질환은 일반적으로 심장 기능에 영향을 미칩니다. 이 문제는 동물 성 질병 모델에서 생체 내 상세한 심장 기능을 평가하는 데 중요성을 지적합니다. 동물 실험은 3Rs(3R) 안내 원리(감소/정제/교체)의 프레임으로 둘러싸여 있습니다. 현재 발달 수준에서 전신 반응(즉, 심혈관 질환)과 관련된 복잡한 병리를 이해하는 경우, 주요 옵션은 사용 가능한 방법을 구체화하는 것이다. 정제는 또한 분석 및 결론의 힘을 향상 감소 감소로 인해 필요한 동물 수의 감소로 이어질 것입니다. 또한, 신경신경 자극에 의해 유도된 심장질환의 동물모델과 심장수축 측정을 병행하거나, 예를 들어 변경된 카테콜아민/β-부전 수치1,2,3,4등을모방한 대동맥 밴딩과 같은 압력 과부하에 의해, 전임상 연구를 위한 강력한 방법을 제공한다. 카테터 기반 방법은 심장수축도 5의심층 평가를 위해 가장 널리 사용되는 접근법으로 남아 있음을 고려하여, 우리는 이접근법의특정 파라미터의 평가를 포함하여 이전 경험을 기반으로 β-adrenergic 자극 동안 마우스에서 생체 내 심장 기능의 정제된 측정을 소개하는 것을 목표로 하고있다. 7.
이미징 또는 카테터 기반 기술을 포함하는 심장 혈역학 적 매개 변수 접근 방식을 결정하기 위해 사용할 수 있습니다. 두 옵션 모두 각각의 과학적 질문에 대해 신중하게 고려해야 할 장점과 단점을 동반합니다. 이미징 접근법은 에코카피그래피 및 자기 공명 영상(MRI)을 포함합니다. 둘 다 마우스에서 성공적으로 사용되었습니다. 심초음파 측정은 마우스의 높은 심박수에 필요한 고속 프로브에서 높은 초기 비용을 포함; 비교적 간단한 비침습적 접근 방식이지만 이상적으로 심장 구조를 인식하고 시각화하는 데 이상적으로 경험해야 하는 운전자들 사이에서는 변이합니다. 또한 압력 측정을 직접 수행할 수 없으며 크기 크기와 유량 측정의 조합으로 계산을 얻을 수 있습니다. 한편, 질병 진행 시, 예를 들어, 동일한 동물 및 심장 기능에서 여러 측정을 수행할 수 있다는 장점이 있다. 부피 측정과 관련하여, MRI는 금 표준 절차이지만, 에코카디그래피와 유사하게, 직접 압력 측정이 불가능하고 프리로드 종속 파라미터만8을얻을 수 있다. 제한 요인은 가용성, 분석 노력 및 운영 비용도 있습니다. 여기서 카테터 기반 방법은 심장 내 압력의 직접적인 모니터링과 사전 로드 모집 스트로크 작업(PRSW)9와같은 부하 독립적 수축 파라미터의 결정을 추가로 허용하는 좋은 대안이다. 그러나 압력 전도도 카테터(전도도 측정을 통해)에 의해 측정된 심실 부피는 MRI의 것보다 작지만 그룹 차이는 동일한범위(10)에서유지된다. 신뢰할 수 있는 볼륨 값을 결정하기 위해서는 해당 교정이 필요하며 이는 PVL 측정 중에 중요한 단계입니다. 상기 고독식식염수의 볼루스 주입 시 심근의 병렬 전도도에 대한 생체 내 분석과 부피 보정 된 큐벳(부피로전도의 변환)에서 혈액 전도도의 전생체측정을 결합한다11,12. 그 외에도, 심실 내부의 카테터의 위치와 심실의 세로 축을 따라 전극의 올바른 방향은 그들에 의해 생성 된 주변 전기 장의 검출 능력에 매우 중요합니다. 여전히 마우스 심장의 크기가 감소하면 카테터의 정맥 내 방향의 변화에 의해 생성 된 유물을 피할 수 있으며, 심지어 확장 된 심실5,10에서도유물은 β 인내 자극6,13에서진화 할 수 있습니다. 전도방법 추가로 착적단계의 개발이 나타났지만, 여기서 볼륨값은오히려 과대평가된다 14,15.
마우스는 심장 혈관 연구와 β 가장 중요한 전임상 모델 중 하나이기 때문에-심장의 부전 예비는 심장 생리학 및 병리학에 대한 핵심 적인 관심사이므로, 여기서 우리는 β-adrenergic 자극 중 PVL 측정에 의해 마우스에서 생체 내 심장 기능을 결정하는 정제 된 프로토콜을 제시합니다.

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	<tbody>
		<tr>
			<td>1.4F SPR-839 catheter</td>
			<td>Millar Instruments, USA</td>
			<td>840-8111</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1 ml syringes</td>
			<td>Beckton Dickinson, USA</td>
			<td>REF303172</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bio Amplifier</td>
			<td>ADInstruments, USA</td>
			<td>FE231</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bridge-Amplifier</td>
			<td>ADInstruments, USA</td>
			<td>FE221</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bovine Serum Albumin</td>
			<td>Roth, Germany</td>
			<td>8076.2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Buprenorphine hydrochloride</td>
			<td>Bayer, Germany</td>
			<td>4007221026402</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Calibration cuvette</td>
			<td>Millar, USA</td>
			<td>910-1049</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Differential pressure transducer MPX</td>
			<td>Hugo Sachs Elektronik- Harvard Apparatus, Germany</td>
			<td>Type 39912</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dumont Forceps #5/45</td>
			<td>Fine Science tools Inc.</td>
			<td>11251-35</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dumont Forceps #7B</td>
			<td>Fine Science tools Inc.</td>
			<td>11270-20</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Graefe Forceps</td>
			<td>Fine Science tools Inc.</td>
			<td>11051-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GraphPad Prism</td>
			<td>GraphPad Software</td>
			<td>Ver. 8.3.0</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EcoLab-PE-Micotube</td>
			<td>Smiths, USA</td>
			<td>004/310/168-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Etomidate Lipuro</td>
			<td>Braun, Germany</td>
			<td>2064006</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Excel</td>
			<td>Microsoft</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heparin</td>
			<td>Ratiopharm, Germany</td>
			<td>R26881</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hot plate and control unit</td>
			<td>Labotec, Germany</td>
			<td>Hot Plate 062</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isofluran</td>
			<td>Baxter, Germany</td>
			<td>HDG9623</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isofluran Vaporizer</td>
			<td>Abbot</td>
			<td>Vapor 19.3</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoprenalinhydrochloride</td>
			<td>Sigma-Aldrich, USA</td>
			<td>I5627</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fine Bore Polythene tubing 0.61 mm OD, 0.28 mm ID</td>
			<td>Smiths Medical International Ltd, UK</td>
			<td>Ref. 800/100/100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MiniVent ventilator for mice</td>
			<td>Hugo Sachs Elektronik- Harvard Apparatus, Germany</td>
			<td>Type 845</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MPVS Ultra PVL System</td>
			<td>Millar Instruments, USA</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaCl</td>
			<td>AppliChem, Germany</td>
			<td>A3597</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaCl 0.9% isotonic</td>
			<td>Braun, Germany</td>
			<td>2350748</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pancuronium-bromide</td>
			<td>Sigma-Aldrich, USA</td>
			<td>BCBQ8230V</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Perfusor 11 Plus</td>
			<td>Harvard Apparatus</td>
			<td>Nr. 70-2209</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Powerlab 4/35 control unit</td>
			<td>ADInstruments, USA</td>
			<td>PL3504</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rechargeable cautery-Set</td>
			<td>Faromed, Germany</td>
			<td>09-605</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scissors</td>
			<td>Fine Science tools Inc.</td>
			<td>140094-11</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Software LabChart 7 Pro</td>
			<td>ADInstruments, USA</td>
			<td>LabChart 7.3 Pro</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Standard mouse food</td>
			<td>LASvendi GmbH, Germany</td>
			<td>Rod18</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereo microscope</td>
			<td>Zeiss, Germany</td>
			<td>Stemi 508</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical suture 8/0</td>
			<td>Suprama, Germany</td>
			<td>Ch.B.03120X</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Venipuncture-cannula Venflon Pro Safty 20-gauge</td>
			<td>Beckton Dickinson, USA</td>
			<td>393224</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vessel Cannulation Forceps</td>
			<td>Fine Science tools Inc.</td>
			<td>00574-11</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Water bath</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific, USA</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe filter (Filtropur S 0.45)</td>
			<td>Sarstedt, Germany</td>
			<td>Ref. 83.1826</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
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cardiac response to &#946;-adrenergic stimulation determined by pressure-volume loop analysis

심장 기능의 결정은 심장에 특정 치료의 효과를 특성화하기 위해 심혈관 질환의 동물 모델에서 강력한 엔드포인트 분석이다. 유전 조작의 타당성 때문에 마우스는 심장 기능을 공부하고 새로운 잠재적인 치료 표적을 찾아서 가장 일반적인 포유류 동물 모형이 되었습니다. 여기서 우리는 기저 조건 동안 및 이소프로테레놀의 증가 농도의 정맥 주입에 의하여 β 부전 자극 의 밑에 압력 볼륨 루프 측정 및 분석을 사용하여 생체 내 심장 기능을 결정하는 프로토콜을 기술합니다. 우리는 개방 된 가슴 측정 중에 부정적인 영향을 개량하기 위한 긍정적 인 종기 기류 압력을 고려하여 환기 지원, 절차 중 통증으로 인한 통제 할 수없는 심근 스트레스를 피하기 위한 강력한 진통제 (Buprenorphine)를 포함한 정제 된 프로토콜을 제공합니다. 가능한 함정에 대한 절차및 논의에 대한 상세한 설명은 고도로 표준화되고 재현 가능한 압력 볼륨 루프 분석을 가능하게 하여 가능한 방법론적 편견을 방지하여 실험 집단에서 동물의 배제를 감소시킵니다.

압력 부피 루프(PVL) 측정은 약물의 심장 약동성을 분석하고 정상 및 병리학 적 조건에서 유전자 변형 마우스 모델의 심장 표현형을 조사하는 강력한 도구입니다. 이 프로토콜은 성인 마우스 모델에서 심장 β 부전 예비의 평가를 허용합니다. 여기서 우리는 주모덕 정맥 카테터를 통해 이소프로테레놀 농도를 주입하여 β-아레너지 자극에 대한 심장 반응에 초점을 맞춘 부프레노르핀(진통제) 및 판?...

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Cardiac Response to ÃƒÅ½Ã‚Â²-Adrenergic Stimulation Determined by Pressure-Volume Loop Analysis

여기에서 우리는 마우스에 있는 본질적인 심장 기능 및 β 부전 예비를 결정하기 위하여 정맥 내 주입된 isoproterenol의 증가 복용량에서 심장 압력 볼륨 루프 분석을 기술합니다. 우리는 압력 볼륨 루프 측정을 위해 수정 된 오픈 가슴 접근 방식을 사용하며, 여기에는 양극 기만 압력이있는 환기가 포함됩니다.

압력 볼륨 루프 분석에 의해 결정된 β 부전 자극에 대한 심장 반응

Determination of the cardiac function is a robust endpoint analysis in animal models of cardiovascular diseases in order to characterize effects of ...

우리는 긍정적 인 최종 만료 압력과 환기를 포함하는 우리의 오픈 가슴 접근 방식은 생체 내 심장 기능을 평가하고 분석하는 데 중요하며 베타 성기능 자극의 증가. 절차는 부하 독립적 인 심장 기능의 두 기준 매개 변수를 해결하기 위해 사용할 수 있습니다, 유전자 변형 마우스 또는 개입시 베타 아드레너기브 예비. 페달 반사에 대한 반응의 부족을 확인 한 후, 70 %에탄올로 마취 마우스의 왼쪽 뒷다리를 소독하고 왼쪽 대퇴 정맥을 노출하는 절개를합니다.상복부 동맥과 정맥을 소터리로 폭발시다. 대퇴정맥을 더 잘 보기 위해 시력 분야는 복부를 통한 봉합사에 의해 스며들게 됩니다. 그런 다음 봉합사가 카테터 접근에 단념하여 대퇴 정맥을 장식합니다.대퇴정맥 아래에 봉합사를 전달하고, 천추 부위에 매듭 두개골을 준비한다. 대퇴정맥을 1밀리리터 주사기에 부착된 제조된 마이크로 튜브로 구멍을 뚫고 매듭된 봉합사로 혈관 내부의 튜브를 고정시합니다. 유체 손실을 상쇄하기 위해 자동 주사기 펌프를 사용하여 0.9% 염화나트륨을 주입하고, 12.5%의 알부민을 15 마이크로리터 주입률로 보충하고, 노출된 조직을 사전 따뜻하게 0.9%의 염화나트륨으로 수화한다.흉부에 접근하려면 흉부에 70 %에탄올로 헹구고 xiphoid 과정 바로 아래에 피부를 절개하십시오. 가슴 근육과 가슴 벽을 무뚝뚝하게 분리하고 집게를 사용하여 흉벽이 잘 수 있도록 시포이드 과정을 들어 올려 다이어프램이 완전히 보일 때까지 하십시오. 아래에서 다이어프램을 절개하여 심장 정점을 노출하고 집게를 사용하여 심낭을 조심스럽게 제거합니다.왼쪽에 제한된 코스토절제술을 수행하고, 하류 전하 감소를 허용하기 위해 열등한 카발 정맥 아래에 봉합사를 전달합니다. 25 게이지 캐뉼라를 사용하여 심장 정점을 부드럽게 뚫고 모든 전극이 심실 내에 들어올 때까지 캐뉼라를 압력 볼륨 카테터로 교체하십시오. 그런 다음 직사각형 모양루프가 얻어질 때까지 카테터의 위치를 부드럽게 조정합니다.압력 볼륨 루프 측정을 획득하려면 관심 있는 심장 기능 매개 변수의 온라인 분석을 수행하고 정상 상태 심장 기능이 얻어지을 때까지 기다립니다. 종료 만료 위치에서 호흡보호구를 중지하고 기준 매개 변수를 기록합니다. 3~5초 후에는 집게를 사용하여 열등한 카발 정맥 아래에 봉합사를 들어 올려 사전 로드 독립적 인 매개 변수를 얻고 인공 호흡기를 켭니다.혈역학 파라미터가 안정화될 때까지 두 번째 폐색을 위해 30초 이상 기다립니다. 기저 조건에서 측정을 얻은 후, 주사기 펌프에 isoproterenol로드 주사기를 장착합니다. 새로운 정상 상태 심장 기능이 관찰 될 때까지 적어도 2 분 기다립니다.종료 만료 위치에서 호흡보호구를 중지하고 기준 매개 변수를 기록하기 전에. 3~5초 후에는 열등한 카발 정맥 아래에 봉합사를 들어 올려 독립적인 매개변수를 획득하고 두 번째 폐색을 위해 30초 이상 기다립니다. 그런 다음 다음 isoproterenol 농도를 포함하는 주사기를 장착하고 기준선을 반복하고 독립적 인 매개 변수 기록을 미리 로드합니다.병렬 전도성 교정을 수행하기 위해, 마지막 isoproterenol 용량 응답 측정 후, 대퇴 수두에 15 %의 염화 나트륨 용액로드 주사기를 연결하고, 조심스럽게 압력 볼륨 루프가 오른쪽으로 약간 이동할 때까지 고독용액의 5 마이크로 리터를 주입한다. 루프가 정상 상태로 돌아올 때까지 기다렸다가 종료 시 호흡보호구를 멈추고 15% 염화 나트륨의 10 마이크로리터 볼러스를 즉시 주입하십시오. 그런 다음 압력 볼륨 루프가 크게 확대되어 오른쪽으로 이동했는지 확인합니다.전도대 부피를 수행하기 위해, 카테터를 제거하기 전에 고독식식염수 볼루스가 완전히 희석될 때까지 5분간 기다린 후, 21게이지 캐뉼라를 장착한 1밀리리터 주사기를 사용하여 심장 박동의 좌심실에서 적어도 600마이크로리터의 혈액을 제거하십시오. 그런 다음 알려진 볼륨의 실린더와 함께 37도 섭씨 수조에서 미리 따뜻해지는 교정 큐벳으로 혈액을 옮기고 압력 볼륨 카테터를 각 실린더에 중앙에 배치하여 전도도를 기록할 수 있도록 합니다. 이 오픈 가슴 압력 볼륨 루프 측정 방법을 사용하여 카테터가 심실 내에 올바르게 배치되면 전체 심장 주기가 직사각형 모양의 압력 볼륨 루프로 표시됩니다.그림과 같이, systole는 두 심장 판막이 닫히는 동안 등소 수축의 단계로 시작됩니다. 심실 압력이 대동맥 압력을 초과하면 대동맥 판막이 열리고 혈액이 배출 단계에서 대동맥으로 펌핑됩니다. 그 후 대동맥 압력이 심실 압력을 초과하면 대동맥 판막이 닫히고 디아스톨이 시작됩니다.동위 부피 완화 중에 심실 압력이 심실 압력을 초과할 때까지 심실 압력이 떨어지고 승모 판막이 열립니다. 수동 확장기 충진, 최종 확장기 압력-볼륨 관계 특징 다음 심장 주기 시작 될 때까지 일어난다. 그것은 사전 부하와 무관 한 심장 기능을 결정할 수 있기 때문에, 압력 볼륨 분석 심장 기능에 대 한 자세한 통찰력을 제공할 수 있습니다., 심장 수축.예를 들어, 이 분석에서 이소프로테레놀은 각 측정된 심장 기능 및 심장 수축 파라미터에 상당한 영향을 미쳤다. 대조적으로, 이소프로테레놀 농도가 증가하는 반응으로 확장기 파라미터의 감소가 관찰되었다. 좌심실 내의 정확한 카테터 배치는 아티팩트 없이 재현 가능한 루프를 얻는 데 매우 중요합니다.카테터 배치를 최적화하기 위해, 우리는 열린 가슴 접근 방식을 선호합니다. PV 루프 측정에 이어, 동칭 성 결핍증을 결정할 수 있고, 조직을 분리하여 분자 및 조직 병리학적 변화를 식별하여 치료 및 유전적 변형에 의한 것입니다. 이 기술은 정상 및 병리학 적 조건하에서 마우스 모델에서 베타-adrenergic 예비를 분석하는 방법을 포장하고 다른 자극을 테스트하기위한 템플릿으로 사용될 수있다.

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Unit 1

Cardiac Response to &#946;-Adrenergic Stimulation Determined by Pressure-Volume Loop Analysis

Drugs Acting on Autonomic Nervous System: Adrenergic Agonists and Antagonists Agents

SCIENTISTS IN ACTION

A Murine Model of Muscle Training by Neuromuscular Electrical Stimulation

신경근육학 전기적 자극에 의​​해 근육 트레이닝의 Murine 모델

Neuromuscular electrical stimulation (NMES) is a common clinical modality that is widely used to restore1, maintain2 or enhance3-5 muscle functional ...

연구

의학

Cardiac Stress Test Induced by Dobutamine and Monitored by Cardiac Catheterization in Mice

심장 스트레스 테스트 Dobutamine에 의해 유도와 마우스의 심장 Catheterization에 의해 모니터링

Dobutamine is a &beta;-adrenergic agonist with an affinity higher for receptor expressed in the heart (&beta;1) than for receptors expressed in the ...

Measurement of the Pressure-volume Curve in Mouse Lungs

마우스 폐의 압력 볼륨 곡선의 측정

In recent decades the mouse has become the primary animal model of a variety of lung diseases. In models of emphysema or fibrosis, the essential ...

Cardiac Catheterization in Mice to Measure the Pressure Volume Relationship: Investigating the Bowditch Effect

Bowditch 효과 조사 : 압력 볼륨 관계를 측정하기 위해 마우스의 심장 도관

Animal models that mimic human cardiac disorders have been created to test potential therapeutic strategies. A key component to evaluating these ...

Real-time Pressure-volume Analysis of Acute Myocardial Infarction in Mice

쥐의 급성 심근 경색의 실시간 압력-볼륨 분석

Acute myocardial infarction can lead to acute heart failure and cardiogenic shock. The evaluation of hemodynamics is critical for the evaluation of any ...

Hemocompatibility Testing of Blood-Contacting Implants in a Flow Loop Model Mimicking Human Blood Flow

인간의 혈류를 모방하는 흐름 루프 모델에서 혈액 접촉 임플란트의 혈적합성 테스트

The growing use of medical devices (e.g., vascular grafts, stents, and cardiac catheters) for temporary or permanent purposes that remain in the ...

Biventricular Assessment of Cardiac Function and Pressure-Volume Loops by Closed-Chest Catheterization in Mice

생쥐의 폐쇄 흉부 카테터 삽입에 의한 심장 기능 및 압력-부피 루프의 양심실 평가

Assessment of cardiac function is essential to conduct cardiovascular and pulmonary-vascular preclinical research. Pressure-volume loops (PV loops) ...

A Large Animal Model for Acute Kidney Injury by Temporary Bilateral Renal Artery Occlusion

일시적인 양측 신장 동맥 폐색에 의한 급성 신장 손상에 대한 대형 동물 모델

Acute kidney injury (AKI) is associated with higher risk for morbidity and mortality post-operatively. Ischemia-reperfusion injury (IRI) is the most ...

In vitro Assessment of Cardiac Reprogramming by Measuring Cardiac Specific Calcium Flux with a GCaMP3 Reporter

GCaMP3 리포터와 심장 특정 칼슘 플럭스를 측정하여 심장 재프로그래밍의 체외 평가

Cardiac reprogramming has become a potentially promising therapy to repair a damaged heart. By introducing multiple transcription factors, including ...

Closed Chest Biventricular Pressure-Volume Loop Recordings with Admittance Catheters in a Porcine Model

돼지 모델의 입원 카테터가있는 폐쇄 흉부 쌍심실 압력 - 볼륨 루프 녹음

Pressure-volume (PV) loop recording enables the state-of-the-art investigation of load-independent variables of ventricular performance. Uni-ventricular ...