Name: quantitative metabolomics of saccharomyces cerevisiae using liquid chromatography coupled with tandem mass spectrometry
Uploaded: 2021-01-05T15:00:00
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Somos gratos aos atuais e antigos membros do laboratório Titorenko pelas discussões. Reconhecemos o Centro de Aplicações Biológicas da Espectrometria de Massa, o Centro de Genômica Estrutural e Funcional e o Centro de Microscopia e Imagem Celular (todos na Universidade de Concórdia) por serviços de destaque. Este estudo foi apoiado por bolsas do Conselho de Pesquisa em Ciências Naturais e Engenharia (NSERC) do Canadá (RGPIN 2014-04482 e CRDPJ 515900 - 17). K.M. foi apoiado pela Concordia University Armand C. Archambault Fellowship e pelo Prêmio de Excelência da Universidade de Concórdia.

1. Fazer e esterilizar um meio para o cultivo de leveduras
<ol><li>Faça 180 mL de um extrato completo de levedura com meio bactopepton (YP). O meio YP completo contém 1% (p/v) extrato de levedura e 2% (w/v) bactopeptone.</li>
	<li>Distribua 180 mL do meio YP igualmente em quatro frascos de 250 mL Erlenmeyer. Cada um desses frascos contém 45 mL do meio YP.</li>
	<li>Esterilize os frascos com meio YP autoclavando a 15 psi/121 °C por 45 min.</li>
</ol>2. Cepa de levedura tipo selvagem
<ol><li...

Para utilizar com sucesso o protocolo aqui descrito, siga as medidas preventivas descritas abaixo. Clorofórmio e metanol extraem várias substâncias de plásticos de laboratório. Portanto, lide com eles com cautela. Evite o uso de plásticos em etapas que envolvam contato com qualquer um desses dois solventes orgânicos. Use pipetas de vidro borossilicato para estas etapas. Levante essas pipetas com clorofórmio e metanol antes de usar. Use apenas pontas de micropipette e tubos feitos de polipropileno resistente a sol...

Metabólitos solúveis em água são intermediários de baixo peso molecular e produtos do metabolismo que contribuem para processos celulares essenciais. Esses processos evolutivamente conservados incluem a conversão de nutrientes em energia utilizável, síntese de macromoléculas, crescimento e sinalização celular, controle do ciclo celular, regulação da expressão genética, resposta ao estresse, regulação pós-translacional do metabolismo, manutenção da funcionalidade mitocondrial, tráfico celular vesicular, autofagia, envelhecimento celular e morte celular regulada1,2,3.
Muitos desses papéis essenciais de metabólitos solúveis em água foram descobertos por estudos na levedura S. cerevisiae1,3,4,7,9,14,15,16,17,18,19,20,21,22. Este eucariote unicelular é um organismo modelo útil para dissecar mecanismos através dos quais metabólitos solúveis em água contribuem para processos celulares devido à sua comodidade às análises biológicas bioquímicas avançadas, genéticas e moleculares23,24,25,26. Embora os métodos LC-MS/MS de metabolômica não-direcionada tenham sido utilizados para estudar os papéis de metabólitos solúveis em água emleveduras brotantes 3,18,22,27, este tipo de análise requer a melhoria de sua versatilidade, robustez, sensibilidade e capacidade de distinguir entre diferentes isômeros estruturais e formas estereotipadas desses metabólicos.
Os últimos anos são marcados por avanços significativos na aplicação dos métodos LC-MS/MS de metabolômica não direcionada ao perfil de metabólitos solúveis em água in vivo. No entanto, muitos desafios no uso dessa metodologia permanecem2,28,29,30,31,32,33,34,35,36. Esses desafios incluem o seguinte. Em primeiro lugar, as concentrações intracelulares de muitos metabólitos solúveis em água estão abaixo de um limiar de sensibilidade para os métodos atualmente utilizados. Em segundo lugar, a eficiência da saciamento da atividade metabólica é muito baixa, e a extensão do vazamento celular associado à extinção de metabólitos intracelulares é muito alta para os métodos atuais; portanto, os métodos atualmente utilizados subestimam as concentrações intracelulares de metabólitos solúveis em água. Em terceiro lugar, os métodos existentes não podem diferenciar os isômeros estruturais (ou seja, moléculas com a mesma fórmula química, mas conectividade atômica diferente) ou estereomers (ou seja, moléculas com a mesma fórmula química e conectividade atômica, mas com o arranjo atômico diferente no espaço) de metabólitos específicos; isso impede a anotação correta de certos metabólitos pelos métodos atualmente utilizados. Em quarto lugar, as bases de dados on-line espectrais existentes de íons-pais (MS1) e íons secundários (MS2) estão incompletas; isso afeta a identificação e a quantitação corretas de metabólitos específicos utilizando os dados brutos LC-MS/MS produzidos com a ajuda dos métodos atuais. Em quinto lugar, os métodos existentes não podem usar um único tipo de extração metabólito para recuperar todas ou a maioria das classes de metabólitos solúveis em água. Em sexto lugar, os métodos existentes não podem usar um único tipo da coluna LC para separar-se entre si todas ou a maioria das classes de metabólitos solúveis em água.
Aqui, otimizamos as condições para a extinção da atividade metabólica dentro das células de S. cerevisiae, mantendo a maioria dos metabólitos solúveis em água dentro dessas células antes da extração, e extraindo a maioria das classes de metabólitos solúveis em água de células de levedura. Desenvolvemos um método versátil, robusto e sensível para a identificação e quantificação baseada em LC-MS/MS de mais de 370 metabólitos solúveis em água extraídos de células S. cerevisiae. Este método de metabolomia não-direcionada permite avaliar as concentrações intracelulares de várias moléculas portadoras de energia, nucleotídeos, aminoácidos, monossacarídeos, intermediários de glicólise e intermediários do ciclo tricarboxílico. O método desenvolvido LC-MS/MS permite a identificação e quantificação de diferentes isômeros estruturais e formas estereosméricas de metabólitos solúveis em água com diversas propriedades estruturais, físicas e químicas.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td colspan="4">Chemicals</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acetonitrile</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>A9554</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ammonium acetate</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>A11450</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ammonium bicarbonate</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>9830</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bactopeptone</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>BP1420-2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chloroform</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>C297-4</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glucose</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>D16-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L-histidine</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>H8125</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L-leucine</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>L8912</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L-lysine</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>L5501</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Methanol</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>A4564</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Methanol</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>A4564</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Propidium iodide</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>R37108</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Uracil</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>U0750</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Yeast extract</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>BP1422-2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td colspan="4">Hardware equipment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>500 ml centrifuge bottles</td>
			<td>Beckman</td>
			<td>355664</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Agilent 1100 series LC system</td>
			<td>Agilent Technologies</td>
			<td>G1312A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Beckman Coulter Centrifuge</td>
			<td>Beckman</td>
			<td>6254249</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Beckman Coulter Centrifuge Rotor</td>
			<td>Beckman</td>
			<td>JA-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centra CL2 clinical centrifuge</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>004260F</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Digital thermometer</td>
			<td>Omega</td>
			<td>HH509</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Foam Tube Holder Kit with Retainer</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>02-215-388</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SeQuant ZIC-pHILIC zwitterionic-phase column (5&#181;m polymer 150 x 2.1 mm)</td>
			<td>Sigma Milipore</td>
			<td>150460</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Thermo Orbitrap Velos MS</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>ETD-10600</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultrasonic sonicator</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>15337416</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vortex</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>2215365</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ZORBAX Bonus-RP, 80&#197;, 2.1 x 150 mm, 5 &#181;m</td>
			<td>Agilent Technologies</td>
			<td>883725-901</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td colspan="4">Laboratory materials</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2-mL Glass sample vials with Teflon lined caps</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>60180A-SV9-1P</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass beads (acid-washed, 425-600 &#956;m)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>G8772</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hemacytometer</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>267110</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>15-mL High-speed glass centrifuge tubes with Teflon lined caps</td>
			<td>PYREX</td>
			<td>05-550</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td colspan="4">Software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Compound Discoverer 3.1</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>V3.1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td colspan="4">Yeast strain</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Yeast strain BY4742</td>
			<td>Dharmacon</td>
			<td>YSC1049</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

quantitative metabolomics of saccharomyces cerevisiae using liquid chromatography coupled with tandem mass spectrometry

Metabolômica é uma metodologia utilizada para a identificação e quantificação de muitos intermediários de baixo peso molecular e produtos do metabolismo dentro de uma célula, tecido, órgão, fluido biológico ou organismo. A metabolômica tradicionalmente se concentra em metabólitos solúveis em água. O metabolome solúvel em água é o produto final de uma complexa rede celular que integra vários fatores genômicos, epigenômicos, transcriômicos, proteômicos e ambientais. Assim, a análise metabolômica avalia diretamente o resultado da ação para todos esses fatores em uma infinidade de processos biológicos dentro de diversos organismos. Um desses organismos é o fermento saccharomyces cerevisiae, um eucariote unicelular com o genoma totalmente sequenciado. Como a S. cerevisiae é favorável a análises moleculares abrangentes, é usada como modelo para dissecar mecanismos subjacentes a muitos processos biológicos dentro da célula eucariótica. Um método analítico versátil para a avaliação quantitativa robusta, sensível e precisa do metabolome solúvel em água forneceria a metodologia essencial para dissecar esses mecanismos. Aqui apresentamos um protocolo para as condições otimizadas de atividade metabólica saciando e extração metabólito solúvel em água a partir de células de S. cerevisiae. O protocolo também descreve o uso de cromatografia líquida juntamente com espectrometria de massa tandem (LC-MS/MS) para a análise quantitativa dos metabólitos solúveis em água extraídos. O método LC-MS/MS de metabolômica não-direcionada descrito aqui é versátil e robusto. Permite a identificação e quantificação de mais de 370 metabólitos solúveis em água com diversas propriedades estruturais, físicas e químicas, incluindo diferentes isômeros estruturais e formas estereogômicas desses metabólitos. Estes metabólitos incluem várias moléculas portadoras de energia, nucleotídeos, aminoácidos, monossacarídeos, intermediários de glicólise e intermediários do ciclo tricarboxílico. O método LC-MS/MS de metabolômica não-direcionada é sensível e permite a identificação e a quantitação de alguns metabólitos solúveis em água em concentrações tão baixas quanto 0,05 pmol/μL. O método tem sido usado com sucesso para avaliar metabóboles solúveis em água de células de levedura silvestre e mutantes cultivadas em diferentes condições.

Para melhorar uma avaliação quantitativa de metabólitos solúveis em água dentro de uma célula de levedura, otimizamos as condições de saciamento celular para detecção metabólito. A extinção celular para este fim envolve uma prisão rápida de todas as reações enzimáticas dentro de uma célula31,33,37,38. Tal apreensão da atividade metabólica ce...

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Quantitative Metabolomics of Saccharomyces Cerevisiae Using Liquid Chromatography Coupled with Tandem Mass Spectrometry

Apresentamos um protocolo para identificação e quantitação das principais classes de metabólitos solúveis em água no levedura Saccharomyces cerevisiae. O método descrito é versátil, robusto e sensível. Permite a separação de isômeros estruturais e formas estereogômicas de metabólitos solúveis em água uns dos outros.

Metabolômica Quantitativa de Saccharomyces Cerevisiae Usando cromatografia líquida juntamente com espectrometria de massa tandem

Metabolomics is a methodology used for the identification and quantification of many low-molecular-weight intermediates and products of metabolism within ...

Este protocolo tem muitas vantagens sobre a metabolômica de levedura atualmente utilizada porque tem alta especificidade, alta sensibilidade, e também pode traçar muitas classes diferentes de metabólitos, incluindo moléculas isomericas, isobáricas, hidrofílicas e hidrofóbicas. O método de saciamento utilizado neste protocolo interrompe todas as reações enzimáticas, ao mesmo tempo em que reduz significativamente o vazamento de metabólitos das células. A biblioteca MS1 construída neste protocolo é das várias corridas MS2.Após a cultura da noite a 30 graus Celsius e 200 revoluções por minuto, determine o número de células de levedura por mililitro de cultura e adicione cinco mililitros de solução de 20% de glicose esterilizadas a cada um dos dois frascos erlenmeyer contendo 45 mililitros de YP médio autoclaved por frasco. Use uma pipeta de transferência estéril para adicionar cinco vezes 10 às sétimas células de levedura a cada frasco e cultivar as células de levedura por pelo menos 24 horas adicionais a 30 graus Celsius a 200 revoluções por minuto. Para extração metabólito, após cultura, colete as células de levedura por centrifugação e remova rapidamente o sobrenatário.Coloque o tubo em gelo seco e adicione dois mililitros de menos 20 graus Celsius clorofórmio, um mililitro de menos 20 graus Celsius metanol, um mililitro de água pura nano pura gelada, e 200 microlitres de 425 a 600 micron ácido lavado contas de vidro para as células. Quando as contas tiverem sido adicionadas, coloque o tubo coberto com papel alumínio em um kit portador de tubo de espuma com um retentor e vórtice a amostra por 30 minutos a velocidade média a quatro graus Celsius para facilitar a extração metabólito. Em seguida, incubar o tubo por 15 minutos no gelo antes de centrifugar a amostra para permitir a separação da fase aquosa superior dos detritos médios e proteínas e fases orgânicas inferiores.Use uma micropipette para transferir aproximadamente 400 microliters da fase aquosa superior para um tubo lavado e rotulado de 1,5 mililitro contendo 800 microliters de menos 20 graus Celsius acetonitrilo. Em seguida, centrifugar a amostra e transferir 800 microliters da porção superior do supernatante para um frasco de espectrometria de massa rotulado para armazenamento em grau zero até a análise de espectrometria de massa cromatografia líquida tandem. Para separar os metabólitos extraídos, ultrassonós o frasco amostral por 15 minutos, seguido por três vórtices de 10 segundos à temperatura ambiente.Após o vórtice, coloque o frasco na placa do poço do cromatógrafo líquido e coloque a coluna a 45 graus Celsius com uma taxa de fluxo de 0,25 mililitros por minuto e a placa do poço a zero graus Celsius. Em seguida, use a tabela para definir os gradientes de cromatografia líquida para a análise. Após a separação, utilize 10 volumes amostrais de microliter da injeção nos modos de ionização eletrospray positivo e negativo em um espectrômetro de massa equipado com ionização de eletropray aquecida para identificar e quantificar os metabólitos solúveis em água.Ao final da análise, abra os dados brutos em um programa de software de análise composta apropriado e utilize a biblioteca de fragmentação espectral em massa para combinar com o espectro de massa para anotar os metabólitos identificados na análise. As massas exatas dos padrões ms1 e isótopos também podem ser identificadas para permitir a anotação dos metabólitos usando bancos de dados on-line. Em seguida, use a biblioteca de bancos de dados e espectros para procurar os espectros MS2 dos dados brutos.No dia seguinte, depois de saciar as células de levedura, lave minuciosamente as células com 15 mililitros de tampão ABC e colete as células por centrifugação. Resuspenja a pelota em um mililitro de tampão ABC fresco e adicione 500 microliters da solução de iodeto de propídio às células. Vórtice a amostra três vezes por 10 segundos por vórtice e incubar as células por 10 minutos no gelo protegido da luz.No final da incubação, colete as células por centrifugação e lave as células três vezes com um mililitro de tampão ABC fresco por lavagem. Após a última lavagem, resuspenja a pelota em 300 microlitros de tampão ABC fresco e adicione 10 microlitros da suspensão celular resultante a um slide de microscópio. Use um microscópio de fluorescência para capturar imagens de microscopia de interferência diferencial e microscopia de fluorescência das células com os filtros definidos para um comprimento de onda de excitação de 593 nanômetros e um comprimento de onda de emissão de 636 nanômetros.Em seguida, use um programa apropriado de análise de imagem para contar o número total de células nas imagens de campo brilhante e fluorescência, e para determinar a intensidade da fluorescência da coloração para células individuais. O método de saciamento celular modificado causa danos significativamente menores à membrana plasmática e à parede celular do que o método de extinção de 80% de metanol não tamponado a menos 40 graus Celsius. De fato, quase todas as células submetidas à extinção usando o método modificado exibem emissão de fluorescência vermelha, característica das células de levedura em que a membrana plasmática e a parede celular não são danificadas.Em contraste, quase todas as células submetidas à saciedade usando o método não tamponado de 80% de metanol a 40 graus Celsius apresentaram emissão de fluorescência verde, característica das células de levedura em que a membrana plasmática e a parede celular são significativamente danificadas. O método de saciamento de células modificadas também causa um vazamento significativamente menor de metabólitos solúveis em água de células de levedura do que o método de extinção de 80% de metanol não tamponado a menos 40 graus Celsius. Os valores de mudança de tempo de retenção dos padrões metabólitos solúveis em água são significativamente mais baixos e as formas de pico são substancialmente mais nítidas para a coluna de fase zwitteriônica em comparação com a coluna de fase inversa.Outra vantagem do método de espectrometria de massa da cromatografia líquida tandem é a capacidade de usar a coluna de fase zwitteriônica para separar eficientemente diferentes metabólitos solúveis em água com diversas propriedades estruturais, físicas e químicas. Certifique-se de fazer o iodeto propidium em pé no escuro e também certifique-se de coletar a fase superior sem perturbar a fase média. Se qualquer MSP não puder ser anotado devido à falta da biblioteca espectral MS2, use uma RMN para ilustrar essa estrutura.

Research

JoVE Journal

Biochemistry

Quantitative Metabolomics of Saccharomyces Cerevisiae Using Liquid Chromatography Coupled with Tandem Mass Spectrometry

Resolving Affinity Purified Protein Complexes by Blue Native PAGE and Protein Correlation Profiling

Resolver purificada por afinidade complexos de proteínas por Azul Native PAGE e Proteína Correlação Profiling

Most proteins act in association with others; hence, it is crucial to characterize these functional units in order to fully understand biological ...

Bioquímica

A Tandem Liquid Chromatography&#8211;Mass Spectrometry-based Approach for Metabolite Analysis of Staphylococcus aureus

A Tandem Liquid ChromatographyÃƒÆ’Ã‚Â¢ÃƒÂ¢Ã¢â‚¬Å¡Ã‚Â¬ÃƒÂ¢Ã¢â€šÂ¬Ã…â€œMass Spectrometry-based Approach for Metabolite Analysis of Staphylococcus aureus

Uma abordagem baseada em Espectrometria Tandem Cromatografia Líquida de Massachusetts para análise de metabolitos de<em&gt; Staphylococcus aureus</em

In an effort to thwart bacterial pathogens, hosts often limit the availability of nutrients at the site of infection. This limitation can alter the ...

Lipid Droplet Isolation for Quantitative Mass Spectrometry Analysis

Isolamento de gotículas de gordura para análise quantitativa Espectrometria de Massa

Lipid droplets are vital to the replication of a variety of different pathogens, most prominently the Hepatitis C Virus (HCV), as the putative site of ...

Deep Proteome Profiling by Isobaric Labeling, Extensive Liquid Chromatography, Mass Spectrometry, and Software-assisted Quantification

Proteome profunda de criação de perfil por isobárica rotulagem extensa cromatografia líquida, espectrometria de massa e quantificação assistida por Software

Many exceptional advances have been made in mass spectrometry (MS)-based proteomics, with particular technical progress in liquid chromatography (LC) ...

Identification of Inositol Phosphate or Phosphoinositide Interacting Proteins by Affinity Chromatography Coupled to Western Blot or Mass Spectrometry

Identificação de fosfato de inositol ou proteínas Fosfoinositídeo interagindo por cromatografia de afinidade acoplada a Western blot ou espectrometria de massas

Inositol phosphates and phosphoinositides regulate several cellular processes in eukaryotes, including gene expression, vesicle trafficking, signal ...

Absolute Quantification of Cell-Free Protein Synthesis Metabolism by Reversed-Phase Liquid Chromatography-Mass Spectrometry

Quantificação absoluta do metabolismo da síntese de proteínas livres de células por cromatografia líquida de fase reversa-espectrometria

Cell-free protein synthesis (CFPS) is an emerging technology in systems and synthetic biology for the in vitro production of proteins. However, if CFPS is ...

Quantitative Analysis of the Cellular Lipidome of Saccharomyces Cerevisiae Using Liquid Chromatography Coupled with Tandem Mass Spectrometry

Quantitative Analysis of the Cellular Lipidome of Saccharomyces Cerevisiae Using Liquid Chromatography Coupled with Tandem Mass Spectrometry

Análise Quantitativa do Lipidome Celular de Saccharomyces Cerevisiae Usando Cromatografia Líquida Juntamente com Espectrometria de Massa de Tandem

Lipids are structurally diverse amphipathic molecules that are insoluble in water. Lipids are essential contributors to the organization and function of ...

Untargeted Liquid Chromatography-Mass Spectrometry-Based Metabolomics Analysis of Wheat Grain

Análise de metabolômica baseada em espectrometria líquida não direcionada

Understanding the interactions between genes, the environment and management in agricultural practice could allow more accurate prediction and management ...

Semi-Quantitative Analysis of Peptidoglycan by Liquid Chromatography Mass Spectrometry and Bioinformatics

Análise semiquantitativa de peptidoglicanos por cromatografia líquida, espectrometria de massas e bioinformática

Peptidoglycan is an important component of bacterial cell walls and a common cellular target for antimicrobials. Although aspects of peptidoglycan ...

Labelling and Visualization of Mitochondrial Genome Expression Products in Baker's Yeast Saccharomyces cerevisiae

Labelling and Visualization of Mitochondrial Genome Expression Products in Baker's Yeast Saccharomyces cerevisiae

Rotulagem e Visualização de Produtos de Expressão do Genoma Mitocondrial no Saccharomyces cerevisiae de Levedura de Baker

Mitochondria are essential organelles of eukaryotic cells capable of aerobic respiration. They contain circular genome and gene expression apparatus. A ...