Name: semi-quantitative determination of dopaminergic neuron density in the substantia nigra of rodent models using automated image analysis
Uploaded: 2021-02-02T12:30:00
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Los autores desean agradecer a todo el personal del Centro de Microscopía Óptica Avanzada (AOMF) de university health network por su tiempo y asistencia en el desarrollo de este protocolo.

Todos los procedimientos fueron aprobados por el Comité de Cuidado de Animales de la Red de Salud de la Universidad y se realizaron de acuerdo con las directrices y regulaciones establecidas por el Consejo Canadiense de Cuidado Animal.
1. Inyección estereotáctica
<ol><li>Ratas Sprague-Dawley hembras adultas de casas de pareja (250-280 g) en jaulas con ropa de cama de madera y acceso ad lib a alimentos y agua. Mantener la colonia de animales en un ciclo regular de luz/oscuridad de 12 h (lu...

<ol>
	<li>Kalia, L. V., Lang, A. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Parkinson's+disease.">Parkinson's disease.</a> Lancet. 386 (9996), 896-912 (2015).</li><li>West, M. J., Slomianka, L., Gundersen, H. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Unbiased+stereological+estimation+of+the+total+number+of+neurons+in+thesubdivisions+of+the+rat+hippocampus+using+the+optical+fractionator.">Unbiased stereological estimation of the total number of neurons in thesubdivisions of the rat hippocampus using the optical fractionator.</a> The Anatomical Record. 231 (4), 482-497 (1991).</li><li>Nair-Roberts, R. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stereological+estimates+of+dopaminergic,+GABAergic+and+glutamatergic+neurons+in+the+ventral+tegmental+area,+substantia+nigra+and+retrorubral+field+in+the+rat.">Stereological estimates of dopaminergic, GABAergic and glutamatergic neurons in the ventral tegmental area, substantia nigra and retrorubral field in the rat.</a> Neuroscience. 152 (4), 1024-1031 (2008).</li><li>Golub, V. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neurostereology+protocol+for+unbiased+quantification+of+neuronal+injury+and+neurodegeneration.">Neurostereology protocol for unbiased quantification of neuronal injury and neurodegeneration.</a> Frontiers in Aging Neuroscience. 7, 196 (2015).</li><li>Schmitz, C., Hof, P. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Design-based+stereology+in+neuroscience.">Design-based stereology in neuroscience.</a> Neuroscience. 130 (4), 813-831 (2005).</li><li>Penttinen, A. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Implementation+of+deep+neural+networks+to+count+dopamine+neurons+in+substantia+nigra.">Implementation of deep neural networks to count dopamine neurons in substantia nigra.</a> European Journal of Neuroscience. 48 (6), 2354-2361 (2018).</li><li>Yousef, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neuron+loss+and+degeneration+in+the+progression+of+TDP-43+in+frontotemporal+lobar+degeneration.">Neuron loss and degeneration in the progression of TDP-43 in frontotemporal lobar degeneration.</a> Acta Neuropathologica Communications. 5 (1), 68 (2017).</li><li>Koprich, J. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Expression+of+human+A53T+alpha-synuclein+in+the+rat+substantia+nigra+using+a+novel+AAV1/2+vector+produces+a+rapidly+evolving+pathology+with+protein+aggregation,+dystrophic+neurite+architecture+and+nigrostriatal+degeneration+with+potential+to+model+the+pathology+of+Parkinson's+disease.">Expression of human A53T alpha-synuclein in the rat substantia nigra using a novel AAV1/2 vector produces a rapidly evolving pathology with protein aggregation, dystrophic neurite architecture and nigrostriatal degeneration with potential to model the pathology of Parkinson's disease.</a> Molecular Neurodegeneration. 5, 43 (2010).</li><li>Koprich, J. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Progressive+neurodegeneration+or+endogenous+compensation+in+an+animal+model+of+Parkinson's+disease+produced+by+decreasing+doses+of+alpha-synuclein.">Progressive neurodegeneration or endogenous compensation in an animal model of Parkinson's disease produced by decreasing doses of alpha-synuclein.</a> PLoS One. 6 (3), 17698 (2011).</li><li>McKinnon, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Early-onset+impairment+of+the+ubiquitin-proteasome+system+in+dopaminergic+neurons+caused+by+alpha-synuclein.">Early-onset impairment of the ubiquitin-proteasome system in dopaminergic neurons caused by alpha-synuclein.</a> Acta Neuropathologica Communications. 8 (1), 17 (2020).</li><li>Henderson, M. X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spread+of+alpha-synuclein+pathology+through+the+brain+connectome+is+modulated+by+selective+vulnerability+and+predicted+by+network+analysis.">Spread of alpha-synuclein pathology through the brain connectome is modulated by selective vulnerability and predicted by network analysis.</a> Nature Neuroscience. 22 (8), 1248-1257 (2019).</li><li>Ip, C. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=AAV1/2-induced+overexpression+of+A53T-alpha-synuclein+in+the+substantia+nigra+results+in+degeneration+of+the+nigrostriatal+system+with+Lewy-like+pathology+and+motor+impairment:+a+new+mouse+model+for+Parkinson's+disease.">AAV1/2-induced overexpression of A53T-alpha-synuclein in the substantia nigra results in degeneration of the nigrostriatal system with Lewy-like pathology and motor impairment: a new mouse model for Parkinson's disease.</a> Acta Neuropathologica Communications. 5 (1), 11 (2017).</li><li>Webster, J. D., Dunstan, R. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Whole-slide+imaging+and+automated+image+analysis:+considerations+and+opportunities+in+the+practice+of+pathology.">Whole-slide imaging and automated image analysis: considerations and opportunities in the practice of pathology.</a> Veterinary Pathology. 51 (1), 211-223 (2014).</li></ol>

La evaluación confiable de la integridad del sistema dopaminérgico en modelos preclínicos del paladio es crítica determinar la eficacia de la terapéutica enfermedad-que modifica potencial. Por lo tanto, es importante controlar y minimizar las posibles confundciones que pueden reducir la fiabilidad y reproducibilidad de los datos histopatológicos. Los resultados cuantitativos cuidadosos pueden proporcionar más información que las descripciones cualitativas o semicuantitaticas por sí solas. Al mismo tiempo, debemo...

La enfermedad de Parkinson (EP) es un trastorno del movimiento neurodegenerativo prevalente caracterizado por la presencia de agregados proteicos que contienen α-sinucleína (α-syn) y la pérdida preferencial de neuronas dopaminérgicas en la sustancia nigra pars compacta (SNpc)1. La cuantificación del número de neuronas dopaminérgicas es una parte vital de la investigación de la EP, ya que permite la evaluación de la integridad del sistema nigroestriatal, lo que proporciona un criterio de valoración importante para evaluar la eficacia de la terapéutica potencial modificadora de la enfermedad. Actualmente, el estándar para la cuantificación del número celular es el conteo estereológico imparcial, que utiliza secciones transversales bidimensionales (2D) de tejido para estimar las características volumétricas en estructuras tridimensionales (3D)2,3,4. Los métodos estereológicos modernos basados en el diseño emplean procedimientos integrales de muestreo aleatorio y aplican protocolos de conteo (conocidos como sondas) para evitar artefactos potenciales y errores sistemáticos, lo que permite la detección confiable de diferencias sólo ligeramente mayores que la variación entre animales5. Si bien la estereología proporciona una poderosa herramienta analítica para los estudios histológicos in vivo, requiere mucho tiempo, asume una preparación uniforme de la muestra y requiere validación en varios pasos, lo que puede afectar la eficiencia cada vez más requerida para la investigación traslacional preclínica.
Los recientes avances tecnológicos en la ciencia digital permiten adoptar nuevas aplicaciones para evaluaciones más eficientes de la patología sin un estereomicroscopio, al tiempo que se llena una necesidad como sustituto de la estereología imparcial. Estos métodos aumentan la velocidad, reducen el error humano y mejoran la reproducibilidad de las técnicas estereológicas6,7. HALO es una de esas plataformas de análisis de imágenes para el análisis cuantitativo de tejidos en patología digital. Comprende una variedad de diferentes módulos e informes de expresión morfológica y multiplexada datos sobre una base de célula por célula a través de secciones de tejido entero utilizando algoritmos de reconocimiento de patrones. El módulo citonuclear FL mide la positividad inmunofluorescente de los marcadores fluorescentes en el núcleo o citoplasma. Esto permite informar del número de celdas positivas para cada marcador y la puntuación de intensidad para cada celda. El módulo se puede adaptar para proporcionar tamaños de célula individuales y mediciones de intensidad, aunque esta característica no es necesaria para la cuantificación de las neuronas dopaminérgicas.
El objetivo de este estudio es verificar este método con un modelo de neurodegeneración nigral previamente validado basado en vectores α-syn de neurodegeneraciónnigral 8,9,10. En este modelo, el mutante humano A53T α-syn se expresa en el SNpc por inyección estereotáctica del serotipo híbrido de virus adenoasociado 1/2 (AAV1/2), lo que resulta en una neurodegeneración significativa durante un período de 6 semanas. El SNpc no inyectado contralateral puede, en algunos estudios, servir como un control interno para el lado inyectado. Más comúnmente, la inyección de AAV-Empty Vector (AAV-EV) en una cohorte de control de animales se utiliza como un control negativo. Presentamos una guía paso a paso para estimar la densidad de neuronas dopaminérgicas que permanecen en el SNpc inyectado después de 6 semanas utilizando un software de análisis de imágenes automatizado(Figura 1).

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>A-Syn Antibody</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>32-8100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ABC Elite</td>
			<td>Vector Labs</td>
			<td>PK-6102</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alexa Fluor 488 secondary antibody</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>A-11008</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alexa Fluor 555 secondary antibody</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>A-28180</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alkaline phosphatase-conjugated anti-rabbit igG</td>
			<td>Jackson Immuno</td>
			<td>111-055-144</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Biotinylated anti-mouse IgG</td>
			<td>Vector Labs</td>
			<td>BA-9200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bovine Serum Albumin</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>A2153</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DAKO fluorescent mouting medium</td>
			<td>Agilent</td>
			<td>S3023</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HALO&#8482;</td>
			<td>Indica Labs</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Histo-Clear II</td>
			<td>Diamed</td>
			<td>HS202</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ImmPACT DAB Peroxidase substrate</td>
			<td>Vector Labs</td>
			<td>SK-4105</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LSM880 Confocal Microscope</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NeuN Antibody</td>
			<td>Millipore</td>
			<td>MAB377</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Normal Goat Serum</td>
			<td>Vector Labs</td>
			<td>S-1000-20</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>OCT</td>
			<td>Tissue-Tek</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Paraformaldehyde</td>
			<td>BioShop</td>
			<td>PAR070.1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sliding microtome</td>
			<td>Leica</td>
			<td>SM2010 R</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereo Investigator</td>
			<td>MBF Bioscience</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sucrose</td>
			<td>BioShop</td>
			<td>SUC700</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TH Antibody</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>P21962</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>VectaMount mounting medium</td>
			<td>Vector Labs</td>
			<td>H-5000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vector Blue Alkaline Phosphatase substrate</td>
			<td>Vector Labs</td>
			<td>SK-5300</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Zen Black Software</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Zen Blue Software</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

semi-quantitative determination of dopaminergic neuron density in the substantia nigra of rodent models using automated image analysis

La estimación del número de neuronas dopaminérgicas en el nigra del substantia es un método dominante en la investigación preclínica de la enfermedad de Parkinson. Actualmente, el conteo estereológico imparcial es el estándar para la cuantificación de estas células, pero sigue siendo un proceso laborioso y lento, que puede no ser factible para todos los proyectos. Aquí, describimos el uso de una plataforma de análisis de imágenes, que puede estimar con precisión la cantidad de celdas etiquetadas en una región predefinida de interés. Se describe un protocolo paso a paso para este método de análisis en el cerebro de rata y demostrar que puede identificar una reducción significativa en las neuronas positivas de la tirosina hidroxilasa debido a la expresión de mutante α-sinucleína en el nigra substantia. Se validó esta metodología mediante la comparación con los resultados obtenidos por estereología imparcial. En conjunto, este método proporciona un proceso eficiente en el tiempo y preciso para detectar cambios en el número de neuronas dopaminérgicas, y por lo tanto es adecuado para la determinación eficiente del efecto de las intervenciones en la supervivencia celular.

Mediante la aplicación de los métodos anteriores al tejido cerebral recogido 6 semanas después de las inyecciones de AAV, hemos demostrado que la inyección estereotáctica de AAV que expresa el mutante A53T α-syn (AAV-A53T) en el SNpc del cerebro de rata resulta en una reducción significativa en la densidad de las neuronas dopaminérgicas en comparación con la inyección del vector vacío AAV (AAV-EV) como un control(Figura 5A,B). El número malo de neuronas TH-positi...

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Semi-Quantitative Determination of Dopaminergic Neuron Density in the Substantia Nigra of Rodent Models using Automated Image Analysis

Aquí presentamos un método automatizado para la determinación semicuantita cuantitativa del número de neuronas dopaminérgicas en el compacta de las igualdades del nigra del substantia de la rata.

Determinación Semicuantita cuantitativa de la densidad de la neurona dopaminérgica en la sustancia negra de modelos de roedores utilizando el análisis automatizado de imágenes

Estimation of the number of dopaminergic neurons in the substantia nigra is a key method in pre-clinical Parkinson's disease research. Currently, unbiased ...

La estimación del número dopaminérgico de la neurona en el nigra del substantia es una medida dominante del resultado en la investigación de la enfermedad de Parkinson. Este protocolo acorta significativamente la carga de trabajo necesaria para estimar el número de neuronas. Este método proporciona un proceso eficiente y preciso para detectar cambios en el número de neuronas dopaminérgicas y es adecuado para determinar el efecto de las intervenciones sobre la supervivencia celular.Este método podría adaptarse fácilmente para proporcionar recuentos precisos de neuronas en diferentes regiones del cerebro, manteniendo al mismo tiempo las ventajas de costo y tiempo sobre los métodos estereológicos tradicionales. Para capturar imágenes IHC utilice el software acoplado a un microscopio confocal a un aumento de 10X. Abra el orificio del pasador a 1.5 unidades de área para capturar un plano ancho que totalizará 1.5 micro metros y establezca el enfoque en el lado inyectado del cerebro.En la pestaña de adquisición, marque la opción de imágenes de escaneo de teselas y establezca las dimensiones en 10 por cuatro. En el panel del modo de adquisición, establezca el zoom en 1.1 para evitar cualquier marca de costura entre las imágenes de escaneo de mosaicos. Establezca el tamaño del fotograma en 1024 por 1024 píxeles y el promedio en dos para garantizar la adquisición de imágenes de alta calidad.En el panel de canales, establezca la pista uno a Alexa 488 y la pista dos a Alexa 555. Cargue la diapositiva en el escenario y elija una sección con una fuerte tinción de TH. Haga clic en en vivo en el panel de adquisición.En el panel de canales, establezca la fuerza y la ganancia del láser en niveles que maximicen la señal y limiten el ruido de fondo. Utilice el indicador de rango para asegurarse de que las señales no están sobreexpuestas. Repita esto con varias diapositivas.En la pestaña adquisición, marque la casilla posiciones. Para comenzar a tomar imágenes, use el ocular y elija la primera sección que muestre una tinción de TH positiva. A continuación, establezca el foco en el punto de interés y mueva el escenario a la línea media de la sección.Esto guarda la posición en los ejes X, Y y Z y creará una imagen de un escaneo de mosaico que captura toda la sección. Repita esto para todas las demás diapositivas, incluido un sitio sin inyectar. Separe los archivos de imagen utilizando el software adecuado e impórtelos al software de análisis de imágenes automatizado.Defina una región de interés seleccionando la herramienta de anotación de lápiz para dibujar una anotación alrededor de la sustancia nigra pars compacta. Vaya a la pestaña de análisis y seleccione ajuste en tiempo real en el menú desplegable de análisis. Esto abre una ventana separada en la imagen de la sección que permite la modificación en tiempo real de los parámetros de análisis.En la sección de ampliación de análisis, seleccione el zoom de imagen adecuado. En la sección de detección celular seleccione el tinte nuclear como el tinte utilizado para la tinción de TH. Ajuste el umbral de contraste nuclear, la intensidad nuclear mínima, la agresividad de segmentación nuclear y los ajustes de tamaño nuclear mientras observa cuidadosamente la ventana de ajuste de tiempo.Repita este proceso con varias muestras. Una vez que se haya muestreado un número adecuado de imágenes y se haya ajustado el ajuste en tiempo real en consecuencia, guarde la configuración del análisis en el menú desplegable de acciones de configuración. Seleccione todas las imágenes que se analizarán y haga clic en analizar.Elija la configuración de análisis que se acaba de guardar y en la ventana de la región de análisis marque el cuadro capas de anotación, luego marque la capa uno y haga clic en analizar. Una vez completado, exporte los datos de análisis de resumen para todas las secciones seleccionando la opción exportar datos de análisis de objetos. Este conjunto de datos podría utilizarse para examinar los cambios en el tamaño de la célula en respuesta a una toxina o terapéutica.Seis semanas después de las inyecciones adeno asociadas del virus o de AAV, la inyección stereotactic del AAV que expresaba el synuclein alfa del mutante A53T en el nigra del substantia en el cerebro de la rata dio lugar a una reducción significativa en la densidad de neuronas dopaminérgicas. El número malo de neuronas positivas del TH por milímetro cuadrado en el nigra del substantia de ratas inyectadas con AAV-A35T fue disminuido perceptiblemente con respecto a el de ratas inyectadas con el vector vacío de AAV. Observaciones similares fueron hechas usando estereología imparcial.Al intentar este protocolo, tenga en cuenta que el software es tan útil como está entrenado para ser. Por lo tanto, se debe tener tiempo y cuidado para garantizar que una sola célula se identifique como una sola célula. El software se puede adaptar para medir una intensidad de fluorescencia de otras proteínas de interés como la alfa-sinucleína para determinar si los tratamientos pueden modular los niveles de proteínas.Esta técnica ha permitido una mayor eficiencia al probar el efecto de múltiples terapias potenciales sobre la densidad de neuronas dopaminérgicas.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Automated Sholl Analysis of Digitized Neuronal Morphology at Multiple Scales

Automatizado de Análisis de la morfología neuronal Sholl digitalizados en múltiples escalas

Neuronal morphology plays a significant role in determining how neurons function and communicate1-3.  Specifically, it affects the ability of neurons to ...

Investigación

Neurociencias

In ovo Electroporation in Chick Midbrain for Studying Gene Function in Dopaminergic Neuron Development

In ovo Electroporation in Chick Midbrain for Studying Gene Function in Dopaminergic Neuron Development

En electroporación in ovo en el mesencéfalo polluelo para estudiar la función génica en el desarrollo neuronal dopaminérgica

Dopaminergic neurons located in the ventral midbrain control movement, emotional behavior, and reward mechanisms1-3. The dysfunction of ventral midbrain ...

Visualization and Genetic Manipulation of Dendrites and Spines in the Mouse Cerebral Cortex and Hippocampus using In utero Electroporation

Visualization and Genetic Manipulation of Dendrites and Spines in the Mouse Cerebral Cortex and Hippocampus using In utero Electroporation

La visualización y la manipulación genética de las dendritas y espinas en la corteza cerebral y el hipocampo del ratón usando<em&gt; En el útero</em&gt; La electroporación

In utero electroporation (IUE) has become a powerful technique to study the development of different regions of the embryonic nervous system 1-5. To date ...

Comprehensive Profiling of Dopamine Regulation in Substantia Nigra and Ventral Tegmental Area

Perfiles Integral del Reglamento de la dopamina en la sustancia negra y el área tegmental ventral

Dopamine is a vigorously studied neurotransmitter in the CNS. Indeed, its involvement in locomotor activity and reward-related behaviour has fostered five ...

Directed Dopaminergic Neuron Differentiation from Human Pluripotent Stem Cells

Dirigida dopaminérgica Neurona La diferenciación de las células madre pluripotentes humanas

Dopaminergic (DA) neurons in the substantia nigra pars compacta  (also known as A9 DA neurons) are the specific cell type that is lost in ...

The Neuromuscular Junction: Measuring Synapse Size, Fragmentation and Changes in Synaptic Protein Density Using Confocal Fluorescence Microscopy

La unión neuromuscular: Medición Synapse Tamaño, fragmentación y los cambios en la densidad de proteína sináptica Uso confocal microscopía de fluorescencia

The neuromuscular junction (NMJ) is the large, cholinergic relay synapse through which mammalian motor neurons control voluntary muscle contraction. ...

Long-term Continuous EEG Monitoring in Small Rodent Models of Human Disease Using the Epoch Wireless Transmitter System

A largo plazo Monitoreo EEG continua en Modelos pequeño roedor de las enfermedades humanas Uso del Sistema Transmisor inalámbrico Epoch

Many progressive neurologic diseases in humans, such as epilepsy, require pre-clinical animal models that slowly develop the disease in order to test ...

High-density Electroencephalographic Acquisition in a Rodent Model Using Low-cost and Open-source Resources

De alta densidad Electroencefalográfica Adquisición en un modelo de roedor Uso de recursos de bajo costo y de código abierto

Advanced electroencephalographic analysis techniques requiring high spatial resolution, including electrical source imaging and measures of network ...

Low-Density Primary Hippocampal Neuron Culture

Baja densidad primaria del hipocampo Neurona Cultura

The ability to probe the structure and physiology of individual nerve cells in culture is crucial to the study of neurobiology, and allows for flexibility ...

Assessment of Dopaminergic Homeostasis in Mice by Use of High-performance Liquid Chromatography Analysis and Synaptosomal Dopamine Uptake

Evaluación de la Homeostasis dopaminérgica en ratones por medio de análisis de cromatografía líquida de alto rendimiento y absorción de la dopamina Synaptosomal

Dopamine (DA) is a modulatory neurotransmitter controlling motor activity, reward processes and cognitive function. Impairment of dopaminergic (DAergic) ...