Name: semi-quantitative determination of dopaminergic neuron density in the substantia nigra of rodent models using automated image analysis
Uploaded: 2021-02-02T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Semi-Quantitative Determination of Dopaminergic Neuron Density in the Substantia Nigra of Rodent Models using Automated Image Analysis at JoVE.com

Författarna vill tacka all personal vid Advanced Optical Microscopy Facility (AOMF) vid University Health Network för deras tid och hjälp med att utveckla detta protokoll.

Alla procedurer godkändes av University Health Network Animal Care Committee och utfördes i enlighet med riktlinjer och förordningar som fastställts av Canadian Council on Animal Care.
1. Stereotaktisk injektion
<ol><li>Parhus vuxna kvinnliga Sprague-Dawley råttor (250-280 g) i burar med trä sängkläder och ad lib tillgång till mat och vatten. Håll djurkolonin i en vanlig 12 h ljus / mörk cykel (lampor på 06:30) med konstant temperatur och fuktighet.</li>
	<li>Utför ensidig stere...

<ol>
	<li>Kalia, L. V., Lang, A. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Parkinson's+disease.">Parkinson's disease.</a> Lancet. 386 (9996), 896-912 (2015).</li><li>West, M. J., Slomianka, L., Gundersen, H. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Unbiased+stereological+estimation+of+the+total+number+of+neurons+in+thesubdivisions+of+the+rat+hippocampus+using+the+optical+fractionator.">Unbiased stereological estimation of the total number of neurons in thesubdivisions of the rat hippocampus using the optical fractionator.</a> The Anatomical Record. 231 (4), 482-497 (1991).</li><li>Nair-Roberts, R. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stereological+estimates+of+dopaminergic,+GABAergic+and+glutamatergic+neurons+in+the+ventral+tegmental+area,+substantia+nigra+and+retrorubral+field+in+the+rat.">Stereological estimates of dopaminergic, GABAergic and glutamatergic neurons in the ventral tegmental area, substantia nigra and retrorubral field in the rat.</a> Neuroscience. 152 (4), 1024-1031 (2008).</li><li>Golub, V. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neurostereology+protocol+for+unbiased+quantification+of+neuronal+injury+and+neurodegeneration.">Neurostereology protocol for unbiased quantification of neuronal injury and neurodegeneration.</a> Frontiers in Aging Neuroscience. 7, 196 (2015).</li><li>Schmitz, C., Hof, P. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Design-based+stereology+in+neuroscience.">Design-based stereology in neuroscience.</a> Neuroscience. 130 (4), 813-831 (2005).</li><li>Penttinen, A. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Implementation+of+deep+neural+networks+to+count+dopamine+neurons+in+substantia+nigra.">Implementation of deep neural networks to count dopamine neurons in substantia nigra.</a> European Journal of Neuroscience. 48 (6), 2354-2361 (2018).</li><li>Yousef, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neuron+loss+and+degeneration+in+the+progression+of+TDP-43+in+frontotemporal+lobar+degeneration.">Neuron loss and degeneration in the progression of TDP-43 in frontotemporal lobar degeneration.</a> Acta Neuropathologica Communications. 5 (1), 68 (2017).</li><li>Koprich, J. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Expression+of+human+A53T+alpha-synuclein+in+the+rat+substantia+nigra+using+a+novel+AAV1/2+vector+produces+a+rapidly+evolving+pathology+with+protein+aggregation,+dystrophic+neurite+architecture+and+nigrostriatal+degeneration+with+potential+to+model+the+pathology+of+Parkinson's+disease.">Expression of human A53T alpha-synuclein in the rat substantia nigra using a novel AAV1/2 vector produces a rapidly evolving pathology with protein aggregation, dystrophic neurite architecture and nigrostriatal degeneration with potential to model the pathology of Parkinson's disease.</a> Molecular Neurodegeneration. 5, 43 (2010).</li><li>Koprich, J. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Progressive+neurodegeneration+or+endogenous+compensation+in+an+animal+model+of+Parkinson's+disease+produced+by+decreasing+doses+of+alpha-synuclein.">Progressive neurodegeneration or endogenous compensation in an animal model of Parkinson's disease produced by decreasing doses of alpha-synuclein.</a> PLoS One. 6 (3), 17698 (2011).</li><li>McKinnon, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Early-onset+impairment+of+the+ubiquitin-proteasome+system+in+dopaminergic+neurons+caused+by+alpha-synuclein.">Early-onset impairment of the ubiquitin-proteasome system in dopaminergic neurons caused by alpha-synuclein.</a> Acta Neuropathologica Communications. 8 (1), 17 (2020).</li><li>Henderson, M. X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spread+of+alpha-synuclein+pathology+through+the+brain+connectome+is+modulated+by+selective+vulnerability+and+predicted+by+network+analysis.">Spread of alpha-synuclein pathology through the brain connectome is modulated by selective vulnerability and predicted by network analysis.</a> Nature Neuroscience. 22 (8), 1248-1257 (2019).</li><li>Ip, C. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=AAV1/2-induced+overexpression+of+A53T-alpha-synuclein+in+the+substantia+nigra+results+in+degeneration+of+the+nigrostriatal+system+with+Lewy-like+pathology+and+motor+impairment:+a+new+mouse+model+for+Parkinson's+disease.">AAV1/2-induced overexpression of A53T-alpha-synuclein in the substantia nigra results in degeneration of the nigrostriatal system with Lewy-like pathology and motor impairment: a new mouse model for Parkinson's disease.</a> Acta Neuropathologica Communications. 5 (1), 11 (2017).</li><li>Webster, J. D., Dunstan, R. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Whole-slide+imaging+and+automated+image+analysis:+considerations+and+opportunities+in+the+practice+of+pathology.">Whole-slide imaging and automated image analysis: considerations and opportunities in the practice of pathology.</a> Veterinary Pathology. 51 (1), 211-223 (2014).</li></ol>

Den tillförlitliga bedömningen av integriteten i det dopaminerga systemet i prekliniska modeller av PD är avgörande för att bestämma effektiviteten av potentiella sjukdomsmodifierande terapier. Därför är det viktigt att kontrollera och minimera potentiella confounds som kan minska tillförlitligheten och reproducerbarheten av histopatologiska data. Noggranna kvantitativa resultat kan ge mer information än enbart kvalitativa eller semikvantitativa beskrivningar. Samtidigt måste vi inse att tids- och resursbegr?...

Parkinsons sjukdom (PD) är en utbredd neurodegenerativ rörelsestörning som kännetecknas av närvaron av proteinaggregat som innehåller α-synuklein (α-syn) och den förmånliga förlusten av dopaminerga nervceller i substantia nigra pars compacta (SNpc)1. Kvantifiering av dopaminerga neuronnummer är en viktig del av PD-forskning eftersom det tillåter utvärdering av integriteten hos nigrostriatalsystemet, vilket ger en viktig slutpunkt för att bedöma effektiviteten hos potentiella sjukdomsmodifierande terapier. För närvarande är standarden för kvantifiering av cellnummer opartisk stereologisk räkning, som använder tvådimensionella (2D) tvärsnitt av vävnad för att uppskatta volymetriska egenskaper i tredimensionella (3D)strukturer 2,3,4. Moderna designbaserade stereologiska metoder använder omfattande slumpmässiga provtagningsförfaranden och tillämpar räkneprotokoll (så kallade sonder) för att undvika potentiella artefakter och systematiska fel, vilket möjliggör tillförlitlig upptäckt av skillnader som endast är något större än variation mellan djur5. Medan stereologi ger ett kraftfullt analysverktyg för histologiska studier in vivo, är det tidsintensivt, antar enhetlig provberedning och kräver validering i flera steg, vilket kan påverka effektiviteten som alltmer krävs för preklinisk translationell undersökning.
Den senaste tidens tekniska framsteg inom digital vetenskap gör det möjligt att anta nya tillämpningar för effektivare bedömningar av patologi utan stereomikroskop, samtidigt som det fyller ett behov som surrogat av opartisk stereologi. Dessa metoder ökar hastigheten, minskar mänskliga fel och förbättrar reproducerbarheten av stereologiska tekniker6,7. HALO är en sådan bildanalysplattform för kvantitativ vävnadsanalys i digital patologi. Den består av en mängd olika moduler och rapporterar morfologiska och multiplexerade uttrycksdata cell för cell över hela vävnadsavsnitt med hjälp av mönsterigenkänningsalgoritmer. Den cytonukleära FL-modulen mäter den immunofluorescerande positiviteten hos fluorescerande markörer i kärnan eller cytoplasman. Detta gör det möjligt att rapportera antalet celler som är positiva för varje markör och intensitetspoängen för varje cell. Modulen kan anpassas för att ge individuella cellstorlekar och intensitetsmätningar, även om denna funktion inte krävs för kvantifiering av dopaminerga nervceller.
Syftet med denna studie är att verifiera denna metod med en tidigare validerad viral vektorbaserad α-syn råtta modell av nigral neurodegeneration8,9,10. I denna modell uttrycks human mutant A53T α-syn i SNpc genom stereotaktisk injektion av adeno-associerade virus hybrid serotyp 1/2 (AAV1/2), vilket resulterar i betydande neurodegeneration under en period av 6 veckor. Den kontralaterala oinjected SNpc kan i vissa studier fungera som en intern kontroll för den injicerade sidan. Vanligare är att injektion av AAV-Tom Vektor (AAV-EV) i en kontrollkohort av djur används som en negativ kontroll. Vi presenterar en steg-för-steg guide för att uppskatta densiteten av dopaminerga nervceller kvar i den injicerade SNpc efter 6 veckor med hjälp av en automatiserad bildanalys programvara (Figur 1).

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>A-Syn Antibody</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>32-8100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ABC Elite</td>
			<td>Vector Labs</td>
			<td>PK-6102</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alexa Fluor 488 secondary antibody</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>A-11008</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alexa Fluor 555 secondary antibody</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>A-28180</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alkaline phosphatase-conjugated anti-rabbit igG</td>
			<td>Jackson Immuno</td>
			<td>111-055-144</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Biotinylated anti-mouse IgG</td>
			<td>Vector Labs</td>
			<td>BA-9200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bovine Serum Albumin</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>A2153</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DAKO fluorescent mouting medium</td>
			<td>Agilent</td>
			<td>S3023</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HALO&#8482;</td>
			<td>Indica Labs</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Histo-Clear II</td>
			<td>Diamed</td>
			<td>HS202</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ImmPACT DAB Peroxidase substrate</td>
			<td>Vector Labs</td>
			<td>SK-4105</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LSM880 Confocal Microscope</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NeuN Antibody</td>
			<td>Millipore</td>
			<td>MAB377</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Normal Goat Serum</td>
			<td>Vector Labs</td>
			<td>S-1000-20</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>OCT</td>
			<td>Tissue-Tek</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Paraformaldehyde</td>
			<td>BioShop</td>
			<td>PAR070.1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sliding microtome</td>
			<td>Leica</td>
			<td>SM2010 R</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereo Investigator</td>
			<td>MBF Bioscience</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sucrose</td>
			<td>BioShop</td>
			<td>SUC700</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TH Antibody</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>P21962</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>VectaMount mounting medium</td>
			<td>Vector Labs</td>
			<td>H-5000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vector Blue Alkaline Phosphatase substrate</td>
			<td>Vector Labs</td>
			<td>SK-5300</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Zen Black Software</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Zen Blue Software</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

semi-quantitative determination of dopaminergic neuron density in the substantia nigra of rodent models using automated image analysis

Uppskattning av antalet dopaminerga nervceller i substantia nigra är en nyckelmetod i preklinisk Parkinsons sjukdom forskning. För närvarande är opartisk stereologisk räkning standarden för kvantifiering av dessa celler, men det är fortfarande en mödosam och tidskrävande process, vilket kanske inte är genomförbart för alla projekt. Här beskriver vi användningen av en bild analys plattform, som exakt kan uppskatta mängden märkta celler i en fördefinierad region av intresse. Vi beskriver en steg-för-steg protokoll för denna analysmetod i råtta hjärnan och visa det kan identifiera en betydande minskning av tyrosin hydroxylase positiva nervceller på grund av att uttryck för mutant α-synuklein i substantia nigra. Vi validerade denna metod genom att jämföra med resultat som erhållits av opartisk stereologi. Sammantaget ger denna metod en tidseffektiv och exakt process för att upptäcka förändringar i dopaminerga neuronnummer, och är därför lämplig för effektiv bestämning av effekten av interventioner på cellens överlevnad.

Genom att tillämpa ovanstående metoder på hjärnvävnad som samlats in 6 veckor efter AAV injektioner, visade vi att stereotaktisk injektion av AAV uttrycker mutant A53T α-syn (AAV-A53T) i SNpc av råtta hjärnan resulterar i en betydande minskning av densiteten av dopaminerga nervceller jämfört med injektion av tom vektor AAV (AAV-EV) som en kontroll (Figur 5A,B). Det genomsnittliga antalet TH-positiva nervceller/mm2 i SNpc av råttor injiceras med AAV-EV v...

Watch this Scientific Journal Video about Semi-Quantitative Determination of Dopaminergic Neuron Density in the Substantia Nigra of Rodent Models using Automated Image Analysis at JoVE.com

Semi-Quantitative Determination of Dopaminergic Neuron Density in the Substantia Nigra of Rodent Models using Automated Image Analysis

Här presenterar vi en automatiserad metod för semikvantitativ bestämning av dopaminerga neuronnummer i råtta substantia nigra pars compacta.

Semikvantitativ bestämning av dopaminerg neurontäthet i substantia nigra av gnagaremodeller med hjälp av automatiserad bildanalys

Estimation of the number of dopaminergic neurons in the substantia nigra is a key method in pre-clinical Parkinson's disease research. Currently, unbiased ...

Uppskattning av dopaminerga nervceller i substantia nigra är ett viktigt resultatmått i Parkinsons sjukdom forskning. Detta protokoll förkortar avsevärt den arbets belastning som krävs för att uppskatta neuron nummer. Denna metod ger en tidseffektiv och korrekt process för att upptäcka förändringar i dopaminerga neuronnummer och är lämplig för att bestämma effekten av interventioner på cellens överlevnad.Denna metod kan enkelt anpassas för att ge exakta räkningar av nervceller i olika hjärnregioner samtidigt som kostnads- och tidsfördelar bibehålls jämfört med traditionella stereologiska metoder. För att fånga IHC-bilder använder du programvaran tillsammans med ett konfokalt mikroskop vid 10X förstoring. Öppna stifthålet till 1,5 områdesenheter för att fånga ett brett plan på totalt 1,5 mikrometer och ställ in fokus på den injicerade sidan av hjärnan.Kontrollera alternativet för panelskanning på anskaffningsfliken och ställ in dimensionerna på 10 gånger fyra. Under panelen för förvärvsläge ställer du in zoomen på 1.1 för att undvika sömmärken mellan panelskanningsbilderna. Ställ in bildstorleken på 1 024 med 1 024 pixlar och medelvärdet till två för att säkerställa högkvalitativ bildförvärv.I kanalpanelen satte spår ett till Alexa 488 och spår två till Alexa 555. Ladda bilden på scenen och välj en sektion med en stark TH-färgning. Klicka direkt på förvärvspanelen.I kanalpanelen ställer du in laserstyrkan och får till nivåer som maximerar signalen och begränsar bakgrundsljudet. Använd intervallindikatorn för att säkerställa att signalerna inte är överexponerade. Upprepa detta med flera bilder.Markera kryssrutan Positioner på anskaffningsfliken. För att börja avbildning, använd ögonstycket och välj det första avsnittet som visar positiv TH-färgning. Ställ sedan in fokus vid intressepunkten och flytta scenen till mitten av avsnittet.Detta sparar positionen i X-, Y- och Z-axlarna och kommer att avbilda en panelskanning som fångar hela avsnittet. Upprepa detta för alla andra bilder, inklusive en plats som inte har injicerats. Separera bildfiler med lämplig programvara och importera dem till automatiserad bildanalysprogramvara.Definiera en intresseregion genom att välja pennanteckningsverktyget för att rita en anteckning runt den väsentliga nigra pars compacta. Gå till analysfliken och välj realtidsjustering på analysmenyn i listrutan. Detta öppnar ett separat fönster på avsnittsbilden som möjliggör realtidsändring av analysparametrar.Välj lämplig bildzoom under avsnittet analysförstoring. Under celldetekteringsavsnittet väljer du kärnfärg som färgämne som används för TH-färgning. Justera kärnkontrasttröskeln, minsta kärnintensitet, kärnsegmenterings aggressivitet och kärnstorleksinställningar samtidigt som du noggrant tittar på tidsjusteringsfönstret.Upprepa den här processen med flera exempel. När ett lämpligt antal bilder har samplats och justeringen i realtid har justerats sparar du analysinställningarna i listrutan Inställningsåtgärder. Välj alla bilder som ska analyseras och klicka på analysera.Välj den analysinställning som just har sparats och markera rutan anteckningslager i analysfönstrets område och markera sedan lager ett och klicka på analysera. När du är klar exporterar du sammanfattningsanalysdata för alla avsnitt genom att välja alternativet att exportera objektanalysdata. Denna datamängd kan användas för att undersöka förändringar i cellstorlek som svar på ett toxin eller terapeutiskt.Sex veckor efter adeno associerade virus eller AAV injektioner, stereotaktisk injektion av AAV uttrycker mutant A53T alfa synuklein i substantia nigra i råtta hjärnan resulterade i en betydande minskning av densiteten av dopaminerga nervceller. Det genomsnittliga antalet TH-positiva nervceller per millimeter i substantia nigra av råttor injicerade med AAV-A35T minskade betydligt jämfört med antalet råttor som injicerades med AAV tom vektor. Liknande observationer gjordes med hjälp av opartisk stereologi.När du försöker detta protokoll kom ihåg att programvaran bara är så användbar som den är utbildad för att vara. Därför måste tid och försiktighet vidtas för att säkerställa att en enda cell identifieras som en enda cell. Programvaran kan anpassas för att mäta en fluorescensintensitet hos andra proteiner av intressen som alfasynuklein för att avgöra om behandlingar kan modulera proteinnivåer.Denna teknik har möjlig möjlighet till större effektivitet när man testar effekten av flera potentiella terapier på dopaminerg neurontäthet.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Automated Sholl Analysis of Digitized Neuronal Morphology at Multiple Scales

Automatiserad Sholl Analys av digitaliserade Neuronal Morfologi på flera skalor

Neuronal morphology plays a significant role in determining how neurons function and communicate1-3.  Specifically, it affects the ability of neurons to ...

In ovo Electroporation in Chick Midbrain for Studying Gene Function in Dopaminergic Neuron Development

In ovo Electroporation in Chick Midbrain for Studying Gene Function in Dopaminergic Neuron Development

I ovo elektroporering i Chick mitthjärnan för att studera genfunktion av dopaminerg Neuron utveckling

Dopaminergic neurons located in the ventral midbrain control movement, emotional behavior, and reward mechanisms1-3. The dysfunction of ventral midbrain ...

Visualization and Genetic Manipulation of Dendrites and Spines in the Mouse Cerebral Cortex and Hippocampus using In utero Electroporation

Visualization and Genetic Manipulation of Dendrites and Spines in the Mouse Cerebral Cortex and Hippocampus using In utero Electroporation

Visualisering och Genetic Manipulation av dendriter och ryggar i mus hjärnbarken och hippocampus med användning av<em&gt; I utero</em&gt; Elektroporering

In utero electroporation (IUE) has become a powerful technique to study the development of different regions of the embryonic nervous system 1-5. To date ...

Comprehensive Profiling of Dopamine Regulation in Substantia Nigra and Ventral Tegmental Area

Omfattande Profilering av dopamin förordning i substantia nigra och ventrala tegmentumområdet

Dopamine is a vigorously studied neurotransmitter in the CNS. Indeed, its involvement in locomotor activity and reward-related behaviour has fostered five ...

Directed Dopaminergic Neuron Differentiation from Human Pluripotent Stem Cells

Riktad dopaminerga nerv Differentiering från Human pluripotenta stamceller

Dopaminergic (DA) neurons in the substantia nigra pars compacta  (also known as A9 DA neurons) are the specific cell type that is lost in ...

The Neuromuscular Junction: Measuring Synapse Size, Fragmentation and Changes in Synaptic Protein Density Using Confocal Fluorescence Microscopy

Den neuromuskulära förbindelsen: Mäta Synapse Storlek, fragmentering och Förändringar i Synaptic Protein Densitet Använda Confocal fluorescensmikroskopi

The neuromuscular junction (NMJ) is the large, cholinergic relay synapse through which mammalian motor neurons control voluntary muscle contraction. ...

Long-term Continuous EEG Monitoring in Small Rodent Models of Human Disease Using the Epoch Wireless Transmitter System

Långsiktig Kontinuerlig EEG Övervakning av små gnagarmodeller av sjukdomar hos människan Använda Epoch trådlösa sändare System

Many progressive neurologic diseases in humans, such as epilepsy, require pre-clinical animal models that slowly develop the disease in order to test ...

High-density Electroencephalographic Acquisition in a Rodent Model Using Low-cost and Open-source Resources

Hög densitet Elektroencefalografi Förvärv i en Gnagarmodell Använda Låg kostnad och öppen källkod resurser

Advanced electroencephalographic analysis techniques requiring high spatial resolution, including electrical source imaging and measures of network ...

Low-Density Primary Hippocampal Neuron Culture

Low-density Primary hippocampus Neuron kultur

The ability to probe the structure and physiology of individual nerve cells in culture is crucial to the study of neurobiology, and allows for flexibility ...

Assessment of Dopaminergic Homeostasis in Mice by Use of High-performance Liquid Chromatography Analysis and Synaptosomal Dopamine Uptake

Bedömning av dopaminerga homeostas i möss genom användning av högpresterande vätskekromatografi analys och Synaptosomal dopamin upptag

Dopamine (DA) is a modulatory neurotransmitter controlling motor activity, reward processes and cognitive function. Impairment of dopaminergic (DAergic) ...