Name: collection and identification of pollen from honey bee colonies
Uploaded: 2021-01-19T14:00:00
Duration: 8 min 11 s
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ग्रेचेन जोन्स (यूएसडीए-एआरएस, एपीएमआरयू, कॉलेज स्टेशन, टीएक्स) को रंग छँटाई और एसिटोलिसिस विश्लेषण के साथ सहायता के लिए धन्यवाद देते हैं। इस शोध को ओरेगन स्टेट मधुमक्खीपालन द्वारा आरआरएस को प्रदान किए गए अनुसंधान धन द्वारा समर्थित किया गया था।

लेखकों के पास खुलासा करने के लिए कुछ भी नहीं है।

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>#8 hardware cloth</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>2.7 mm aperture</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10 mL graduated cylinder</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1000 uL micropipette tips</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1250 mL filter micropipette tips</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>15 x 75 mm glass slides</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Thickness: 0.93 mm - 1.05 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2 mL microcentrifuge tubes</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>250 mL graduated Borosilicate glass beakers (x3)</td>
			<td>VWR</td>
			<td>10754-952</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>50 mL graduated Borosilicate glass beakers (x6)</td>
			<td>VWR</td>
			<td>10754-946</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>95% EtOH</td>
			<td>Pharmco AAPER</td>
			<td>111000200DM55</td>
			<td>ACS/USP/Kosher grade</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Butyl vinyl gloves</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifuge</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>1060 x g maximum speed; horizontal swing preferred</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chemical safety goggles</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Color guide</td>
			<td>Pantone</td>
			<td>SKU: GP1601A</td>
			<td>Solid coated</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Coverslip of 1 or 1.5</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Thickness: 0.13 mm - 0.19 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Distilled water</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fume hood</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glacial acetic acid</td>
			<td>BDH Chemicals</td>
			<td>BDH3092</td>
			<td>ACS grade</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass funnel</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glycerin</td>
			<td>Humco</td>
			<td>103196001_1</td>
			<td>USP grade, 99.5%, anhydrous</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hazardous waste containers</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hive tool</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hot block</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Must reach 80 degree C</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lab coat with long sleeves</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Latex or polyurethane foam</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscope</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nailpolish, clear</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nitrile gloves</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>P1000 pipette</td>
			<td>VWR</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petri dish</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Plastic spoon</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Safranin</td>
			<td>Ward&#39;s Science</td>
			<td>470302-322</td>
			<td>Lab grade</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Smoker</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>For pollen trap installation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium bicarbonate</td>
			<td>EMD Millipore</td>
			<td>SX0320</td>
			<td>ACS grade, powder</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Squirt bottles (x2)</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sulfuric acid</td>
			<td>EMD Millipore</td>
			<td>SX1244</td>
			<td>ACS grade</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sundance Bottom Mount Pollen Trap</td>
			<td>Betterbee Beekeeping Supply</td>
			<td>PTRAPB</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tape</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Wooden stir sticks</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Wooden tooth picks</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

collection and identification of pollen from honey bee colonies

शोधकर्ता अक्सर पौधे के स्रोतों की पहचान करने के लिए मधुमक्खियों से कॉर्बिकुलर पराग एकत्र और विश्लेषण करते हैं, जिस पर वे पराग के लिए चारा करते हैं या पराग के माध्यम से मधुमक्खियों के कीटनाशक जोखिम का अनुमान लगाते हैं। यहां वर्णित शहद मधुमक्खियों से अपने पित्ती पर लौटने वाले कॉर्बिकुलर पराग को इकट्ठा करने के लिए एक प्रभावी पराग-फँसाने की विधि है। इस संग्रह विधि के परिणामस्वरूप बड़ी मात्रा में कॉर्बिकुलर पराग होता है जिसका उपयोग अनुसंधान उद्देश्यों के लिए किया जा सकता है। मधुमक्खियां कई पौधों की प्रजातियों से पराग एकत्र करती हैं, लेकिन आमतौर पर प्रत्येक संग्रह यात्रा के दौरान एक प्रजाति का दौरा करती हैं। इसलिए, प्रत्येक कॉर्बिकुलर पराग गोली मुख्य रूप से एक पौधे की प्रजातियों का प्रतिनिधित्व करती है, और प्रत्येक पराग गोली को रंग द्वारा वर्णित किया जा सकता है। यह पौधे के स्रोतों को अलग करने के लिए रंग द्वारा कॉर्बिकुलर पराग के नमूनों की छंटाई की अनुमति देता है। शोधकर्ता टैक्सोनोमिक पहचान के लिए एसिटोलाइज्ड पराग कणों की आकृति विज्ञान का विश्लेषण करके कॉर्बिकुलर पराग को और वर्गीकृत कर सकते हैं। इन विधियों का उपयोग आमतौर पर परागणकों से संबंधित अध्ययनों में किया जाता है जैसे परागण दक्षता, परागणक फोर्जिंग गतिशीलता, आहार की गुणवत्ता और विविधता। पराग जाल का उपयोग करके कॉर्बिकुलर पराग एकत्र करने, रंग द्वारा पराग को छांटने और पराग कणों को एसिटोलाइज करने के लिए विस्तृत तरीके प्रस्तुत किए जाते हैं। इसके अलावा पांच अलग-अलग फसल प्रणालियों में शहद मधुमक्खियों से एकत्र किए गए गोली रंगों की आवृत्ति और कॉर्बिकुलर पराग के कर से संबंधित परिणाम भी प्रस्तुत किए गए हैं।

पिछले एक अध्ययन ने निम्नलिखित कृषि फसलों में शहद मधुमक्खियों द्वारा एकत्र पराग की विविधता के आकलन की सूचना दी: बादाम, चेरी, हाईबश ब्लूबेरी, हाइब्रिड गाजर और घास का मैदान14। वर्णित विधियों का उपयोग करते हुए, कॉर्बिकुलर पराग एकत्र किया गया था, रंग द्वारा क्रमबद्ध किया गया था, और पराग विविधता का आकलन करने के लिए पहचाने गए प्रत्येक गोली रंग समूह के पौधे स्रोत। नीचे माउंट पराग जाल प्रत्येक फसल (चित्रा 1 ए) के लिए कई साइटों में कालोनियों पर स्थापित किए गए थे। प्रत्येक साइट से एकत्र पराग की मात्रा रंग छँटाई और एसिटोलिसिस विश्लेषण विधियों की नमूना वजन आवश्यकताओं को पूरा करने के लिए पर्याप्त थी। प्रत्येक पराग संग्रह नमूने में कई अलग-अलग रंग समूह (चित्रा 2 और चित्रा 3) थे। कुछ नमूनों में, पराग रंग समूहों में 4-5 छर्रों के रूप में कुछ होते हैं; हालाँकि, अधिकांश समूहों में उससे काफी अधिक था और इस प्रकार एसिटोलिसिस (चित्रा 4 और चित्रा 5) के लिए अपने स्वयं के लेबल वाले रंग समूह के रूप में कार्य किया। एसिटोलिसिस (चित्रा 6) के बाद, उज्ज्वल क्षेत्र प्रकाश माइक्रोस्कोपी प्रभावी ढंग से प्रत्येक अध्ययन स्थल (चित्रा 7) के आसपास के क्षेत्र से एकत्र वाउचर नमूनों के साथ रूपात्मक विशेषताओं की पुष्टि करके अपने सबसे कम संभव वर्गीकरण रैंक करने के लिए प्रत्येक रंग समूह की पहचान करने के लिए इस्तेमाल किया गया था। 
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/62064/62064fig01.jpg"> चित्रा 1: कॉर्बिकुलर पराग इकट्ठा करने के लिए एक शहद मधुमक्खी कॉलोनी पर स्थापित पराग जाल। (ए) नीचे-माउंट जाल छत्ते के नीचे बोर्ड के ऊपर और सीधे सबसे कम छत्ते बॉक्स के ऊपर रखा गया है। अन्य पराग जाल शैलियों में (बी) फ्रंट-माउंट और (सी) बरमा-छेद प्रवेश माउंट जाल शामिल हैं। <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62064/62064fig01large.jpg" target="_blank">कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/62064/62064fig02.jpg"> चित्रा 2: फँसाने तंत्र और पराग जाल के संग्रह ट्रे। लौटने वाले पराग फोर्जर्स को अपने छत्ते तक पहुंचने से पहले जाल फंसाने वाले तंत्र के माध्यम से निचोड़ना चाहिए। <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62064/62064fig02large.jpg" target="_blank">कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/62064/62064fig03.jpg"> चित्रा 3: पराग जाल का संग्रह ट्रे। कॉर्बिकुलर पराग को पराग जाल द्वारा लौटने वाले पराग फोर्जर्स के पैरों से स्क्रैप किया जाता है और संग्रह ट्रे में गिर जाता है। <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62064/62064fig03large.jpg" target="_blank">कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/62064/62064fig04.jpg"> चित्रा 4: रंग समूहों में कॉर्बिकुलर पराग के एक नमूने को सॉर्ट करना। कॉर्बिकुलर पराग को एकत्र किए गए विभिन्न रंग छर्रों के अनुपात की रिपोर्ट करने के लिए रंग समूहों में क्रमबद्ध करने के बाद सुखाया और तौला जा सकता है। <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62064/62064fig04large.jpg" target="_blank">कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।</a>
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/62064/62064fig05.jpg"> चित्रा 5: पैनटोन रंग गाइड का उपयोग करके रंग द्वारा क्रमबद्ध पराग छर्रों के चार समूह। रंग समूहों को (ए) ग्रे, पैनटोन 5855 सी, (बी) ब्राउन, पैनटोन 7557 सी, (सी) पीला, पैनटोन 458 सी, और (डी) हल्के भूरे रंग, पैनटोन 3547 सी <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62064/62064fig05large.jpg" target="_blank">के रूप में लेबल किया गया है। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।</a>
<img alt="Figure 6" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/62064/62064fig06.jpg"> चित्रा 6: धूआं हुड के अंदर एसिटोलिसिस उपकरण सेटअप। गर्मी ब्लॉक, अभिकर्मकों, विलायक अपशिष्ट और एसिड अपशिष्ट कंटेनर, लेबल बीकर, पिपेट, पिपेट युक्तियाँ, हलचल छड़ें, और धुआं हुड के अंदर स्थित माइक्रोसेंट्रिफ्यूज ट्यूब। <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62064/62064fig06large.jpg" target="_blank">कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।</a>
<img alt="Figure 7" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/62064/62064fig07.jpg"> चित्रा 7: दाग, एसिटोलाइज्ड पराग कणों का माइक्रोग्राफ। 40x आवर्धन पर एसिटोलाइज्ड सरसों (ब्रैसिकेसी) पराग कणों के कई पहलू। स्केल बार = 50.398 μm <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62064/62064fig07large.jpg" target="_blank">कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।</a>
बादाम फसल स्थानों से एकत्र पराग में अन्य फसलों से एकत्र पराग की तुलना में अपेक्षाकृत कम पराग विविधता थी, जिसमें औसतन 3.0 ± 0.5 गोली रंग और 3.2 ± 1.2 पौधे कर प्रति साइट (तालिका 2)14 था। शेष चार फसल प्रणालियों में चेरी में प्रति साइट 6.0 ± 1.5 पौधे कर के औसत के साथ उच्च पराग विविधता स्तर ± उच्च पराग विविधता स्तर था, 1.4 गोली रंगों ± ± 8.8 ± 1.4 गोली रंग और हाईबश ब्लूबेरी में प्रति साइट 13.0 पौधे कर ±, 7.0 ± 1.0 गोली रंग और 11.0 ± ± 0.0 पौधा कर प्रति साइट
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody><tr><td>पैदावार</td>
			<td>पराग गोली रंग/साइट (एसई) की औसत संख्या</td>
			<td>संयंत्र कर/साइट (एसई) की औसत संख्या</td>
			<td colspan="3">कुल कर की पहचान की गई</td>
		</tr><tr><td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>परिवार</td>
			<td>वंश</td>
			<td>प्रजातियां</td>
		</tr><tr><td>बादाम</td>
			<td>3.0 (0.5)</td>
			<td>3.2 (1.2)</td>
			<td>4</td>
			<td>3</td>
			<td>4</td>
		</tr><tr><td>ब्लूबेरी</td>
			<td>8.8 (1.4)</td>
			<td>13.5 (2.0)</td>
			<td>5</td>
			<td>10</td>
			<td>13</td>
		</tr><tr><td>गाजर</td>
			<td>7.0 (1.0)</td>
			<td>11.0 (0.0)</td>
			<td>3</td>
			<td>5</td>
			<td>6</td>
		</tr><tr><td>चेरी</td>
			<td>6.0 (2.0)</td>
			<td>8.0 (1.5)</td>
			<td>4</td>
			<td>7</td>
			<td>5</td>
		</tr><tr><td>घास का मैदान</td>
			<td>10.0 (0.0)</td>
			<td>13.0 (1.5)</td>
			<td>5</td>
			<td>4</td>
			<td>14</td>
		</tr></tbody></table>
तालिका 2: पांच फसल प्रणालियों में शहद मधुमक्खियों से एकत्र किए गए कॉर्बिकुलर पराग की विविधता। विविधता मैट्रिक्स में गोली रंगों की औसत संख्या (± एसई), पौधे कर की औसत संख्या (± एसई), और पहचाने गए कुल कर शामिल हैं। इस तालिका को14 से संशोधित किया गया है। संक्षिप्त नाम: एसई = मानक त्रुटि।

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Collection and Identification of Pollen from Honey Bee Colonies

हम शहद मधुमक्खियों से कॉर्बिकुलर पराग एकत्र करने के तरीकों के साथ-साथ टैक्सोनोमिक पहचान के लिए पराग के रंग छँटाई, एसिटोलिसिस और माइक्रोस्कोप स्लाइड तैयारी के लिए प्रोटोकॉल का वर्णन करते हैं। इसके अलावा, हम पराग जाल का उपयोग करके पांच फसल प्रणालियों से एकत्र किए गए कॉर्बिकुलर पराग की गोली रंग और वर्गीकरण विविधता प्रस्तुत करते हैं।

शहद मधुमक्खी कॉलोनियों से पराग का संग्रह और पहचान

Researchers often collect and analyze corbicular pollen from honey bees to identify the plant sources on which they forage for pollen or to estimate ...

इस प्रोटोकॉल में तीन तरीकों का वर्णन किया गया है: पराग जाल का उपयोग करके कॉर्बिकुलर पराग एकत्र करना, रंग द्वारा पराग को छांटना, और एसिटोलिसिस। इन विधियों का उपयोग आमतौर पर परागणकों से संबंधित अध्ययनों में किया जाता है, जैसे परागण दक्षता, परागणक फोर्जिंग गतिशीलता, और आहार की गुणवत्ता और विविधता। मधुमक्खी कालोनियों से पराग की थोक मात्रा एकत्र करने के लिए पराग फँसाने का एक आसान तरीका है।रंग द्वारा पराग छर्रों को छांटना पराग को वर्गीकृत करने का एक किफायती तरीका है जिसके लिए कम विशेषज्ञता की आवश्यकता होती है, और एसिटोलिसिस प्रत्येक गोली रंग से जुड़े पौधे टैक्सोन की पहचान करने की अनुमति देता है। प्रक्रिया का प्रदर्शन एलेन टोपिट्ज़होफर, संकाय अनुसंधान सहायक, और एमिली कार्सन, मेरी प्रयोगशाला से एक स्नातक अनुसंधान सहायक होगा। शुरू करने के लिए, निर्धारित करें कि वांछित मधुमक्खी स्थान से पराग को कब फंसाया जाए और पराग को फंसाने के लिए इष्टतम मधुमक्खी कॉलोनियों का चयन करें।दो मिनट के लिए कॉलोनी प्रवेश द्वार पर लौटने वाले फोर्जरों की गिनती करके कॉलोनी की ताकत का आकलन करें और फिर लौटने वाले फोर्जर्स की उच्चतम कुल संख्या वाली कॉलोनियों का चयन करें। लकड़ी के बर्तन के साथ पित्ती का चयन करें जो अच्छी स्थिति में है, अधिमानतः अतिरिक्त प्रवेश द्वार और विकृत ढक्कन के बिना। कम वैकल्पिक प्रवेश द्वार के साथ कॉलोनियों का उपयोग करें, क्योंकि ऐसी कॉलोनियों में लौटने वाली फोर्जर मधुमक्खियों को जाल प्रवेश द्वार पर फिर से उन्मुख होने की अधिक संभावना है।जब भी संभव हो दक्षिण-मुखी छत्ते प्रवेश द्वार का चयन करें। यदि पित्ती को पैलेटाइज किया जाता है, तो पड़ोसी छत्ते के प्रवेश द्वार में फोर्जर्स के बहाव से बचने के लिए किसी दिए गए फूस पर एक ही दिशा का सामना करने वाली प्रत्येक कॉलोनी पर पराग जाल स्थापित करें। यदि वांछित है, तो लार्वा की उपस्थिति के लिए फ्रेम का निरीक्षण करके कॉलोनी के ब्रूड घोंसले का आकलन करें और अपेक्षाकृत बड़ी मात्रा में लार्वा के साथ कॉलोनियों का चयन करें।अगला, चयनित मधुमक्खी कॉलोनियों पर पराग जाल स्थापित करें। फ्रंट-माउंट ट्रैप के लिए, स्टेपल, शिकंजा और टेप के साथ प्रवेश द्वार के सामने जाल संलग्न करें, या जाल को छत्ते के चारों ओर लिपटे बंजी डोरियों से कनेक्ट करें। कॉलोनी में अन्य सभी संभावित प्रवेश द्वारों को एक गैर-चिपकने वाला और मोल्ड करने योग्य सामग्री के साथ सील करें, जैसे कि लेटेक्स या पॉलीयूरेथेन फोम या बरमा छेद के लिए आठ हार्डवेयर कपड़े।छोटी दरारों के लिए चिपकने वाला टेप का उपयोग करें। यदि फ्रंट-माउंट जाल का उपयोग कर रहे हैं जो जमीनी स्तर के पित्ती पर हैं, तो ओस से नमी के नुकसान से बचने के लिए संग्रह टोकरी और घास के बीच रबर की चटाई जैसी बाधा रखें। स्थापना के 24 घंटे बाद और दिन की फोर्जिंग उड़ान शुरू होने से पहले पराग जाल के फंसाने के तंत्र को संलग्न करें।संग्रह ट्रे से कॉर्बिकुलर विशेष पराग इकट्ठा करें और इसे प्लास्टिक की थैलियों या अपकेंद्रित्र ट्यूबों में रखें, फिर इसे बर्फ के साथ कूलर में स्टोर करें। प्रतिनिधि उप-नमूने के रूप में 10 ग्राम पराग को बाहर निकालने के लिए स्कूपर या एक बड़े चम्मच का उपयोग करें। उप-नमूने से सभी मधुमक्खी भागों और मलबे को हटा दें, फिर समूहों के बीच अंतर करने के लिए पराग रंग और बनावट दोनों का उपयोग करके 10 ग्राम उप-नमूने से प्रत्येक पराग गोली को एक रंग समूह में सॉर्ट करें।डाउनस्ट्रीम चरणों के लिए प्रत्येक रंग समूह के कम से कम 0.25 ग्राम सुनिश्चित करने के लिए, किसी भी छर्रों को रखें जो कम से कम 0.25 ग्राम का रंग समूह बनाने के लिए पर्याप्त नहीं हैं। पैनटोन रंग गाइड का उपयोग करके प्रत्येक व्यक्तिगत रंग समूह को नाम दें। प्रत्येक रंग समूह से पराग छर्रों के 0.25 ग्राम वजन।उचित पीपीई पहनें। फिर, धीरे-धीरे 0.25 ग्राम रंग समूह पराग युक्त प्रत्येक माइक्रोसेंट्रिफ्यूज ट्यूब में ग्लेशियल अम्लीय एसिड के 500 माइक्रोलीटर जोड़ें। नेत्रहीन ट्यूब का निरीक्षण करते समय, पराग को 10 से 15 सेकंड के लिए एक साफ टूथपिक के साथ हिलाएं।1, 100 बार जी पर तीन मिनट के लिए नमूना अपकेंद्रित्र, फिर एसिड अपशिष्ट बीकर में सतह पर तैरनेवाला डिकेंट। एसीटोलिसिस मिश्रण तैयार करने के लिए, बीकर लेबल वाले एसिटोलिसिस मिश्रण में 10.8 मिलीलीटर ग्लेशियल अम्लीय एसिड जोड़ें। फिर, धीरे-धीरे स्टॉक समाधान से केंद्रित सल्फ्यूरिक एसिड के 1, 200 माइक्रोलीटर जोड़ें।धीरे-धीरे प्रत्येक ट्यूब में 1, 000 माइक्रोलीटर एसिटोलिसिस मिश्रण जोड़ें और 10 से 15 सेकंड के लिए एक साफ टूथपिक के साथ हलचल करें। नमूनों को 80 डिग्री सेल्सियस तक पहले से गरम गर्मी ब्लॉक पर रखें। पांच मिनट के लिए ट्यूबों सेते हैं, इनक्यूबेशन के माध्यम से आधे रास्ते में एक साफ टूथपिक के साथ अच्छी तरह से सरगर्मी।इनक्यूबेशन के बाद, धीरे-धीरे प्रत्येक ट्यूब में ग्लेशियल एसिटिक एसिड के 500 माइक्रोलीटर जोड़ें और 10 से 15 सेकंड के लिए एक साफ टूथपिक के साथ हलचल करें। नमूनों को अपकेंद्रित्र करें, फिर एसिड अपशिष्ट बीकर में प्रत्येक ट्यूब से सतह पर तैरनेवाला को डिकेंट करें। प्रत्येक ट्यूब में आसुत जल के 1, 000 माइक्रोलीटर जोड़कर और एक साफ टूथपिक के साथ सरगर्मी करके प्रत्येक नमूने को पानी से तीन बार कुल्लाएं।नमूनों को अपकेंद्रित्र करें और ट्यूबों से सतह पर तैरनेवाला को सोडियम बाइकार्बोनेट के बीकर में डिकेंट करें। फिर, पानी को दो बार दोहराएं। प्रत्येक ट्यूब में इथेनॉल बीकर से 95% इथेनॉल के 1, 000 माइक्रोलीटर जोड़ें और एक साफ टूथपिक के साथ हलचल करें।फिर, नमूनों को अपकेंद्रित्र करें और ट्यूबों से सतह पर तैरनेवाला को इथेनॉल अपशिष्ट बीकर में उतारें। सैफ्रानिन-ओ दाग स्टॉक समाधान मिलाएं और प्रत्येक ट्यूब में 5 से 10 बूंदें जोड़ें। 10 से 15 सेकंड के लिए टूथपिक के साथ हिलाओ और ट्यूब में टूथपिक छोड़ दें।प्रत्येक ट्यूब में इथेनॉल बीकर से 95% इथेनॉल के 1, 000 माइक्रोलीटर जोड़ें और हलचल करें। नमूनों को सेंट्रीफ्यूज करने के बाद, सतह पर तैरनेवाला को इथेनॉल अपशिष्ट बीकर में डिकेंट करें। प्रत्येक ट्यूब में ग्लिसरीन की 10 से 15 बूंदें जोड़ें और सामग्री को 10 से 15 सेकंड के लिए हिलाएं।परिवेश के कमरे के तापमान पर कम से कम दो घंटे के लिए इथेनॉल को वाष्पित करने के लिए धूआं हुड में ट्यूबों को खुला छोड़ दें। पराग पहचान के लिए लेबल माइक्रोस्कोप स्लाइड। एक ट्यूब से पराग अवशेषों की एक बूंद निकालें और इसे अपने लेबल वाले माइक्रोस्कोप स्लाइड के केंद्र में रखें, जिससे ड्रॉप थोड़ा फैल सके।स्लाइड पर ड्रॉप पर एक साफ कवर पर्ची रखें और स्पष्ट नेल पॉलिश के साथ स्लाइड पर कवर स्लिप को सील करें। वर्णित विधियों का उपयोग करते हुए, कॉर्बिकुलर पराग एकत्र किया गया था, रंग द्वारा क्रमबद्ध किया गया था, और पराग विविधता का आकलन करने के लिए प्रत्येक गोली रंग समूह के पौधे स्रोतों की पहचान की गई थी। प्रत्येक पराग संग्रह नमूने में कई अलग-अलग रंग समूह थे।कुछ नमूनों में, पराग रंग समूहों में चार से पांच छर्रों के रूप में कुछ होते हैं। हालांकि, अधिकांश समूहों में काफी अधिक था, और एसिटोलिसिस के लिए अपने स्वयं के लेबल वाले रंग समूह के रूप में कार्य किया। एसिटोलिसिस के बाद, उज्ज्वल क्षेत्र प्रकाश माइक्रोस्कोपी का उपयोग प्रत्येक अध्ययन स्थल के आसपास के क्षेत्र से एकत्र किए गए वाउचर नमूनों के साथ रूपात्मक विशेषताओं की पुष्टि करके प्रत्येक रंग समूह को अपने सबसे कम संभव वर्गीकरण रैंक में प्रभावी ढंग से पहचानने के लिए किया गया था।बादाम फसल स्थानों से एकत्र पराग में अन्य फसलों से एकत्र पराग की तुलना में अपेक्षाकृत कम पराग विविधता थी, प्रति साइट 3.2 पौधे कर में औसतन तीन गोली रंगों के साथ मधुमक्खी चारा पौधों पर पाए जाने वाले कृषि रसायनों को स्पष्ट करने के लिए कीटनाशकों के लिए क्रमबद्ध पराग का परीक्षण किया जा सकता है, या मधुमक्खियों के लिए इसके पोषण मूल्य को निर्धारित करने के लिए रासायनिक संरचना के लिए विश्लेषण किया जा सकता है। इस शोध के परिणामों ने उपनिवेशों द्वारा एकत्र पराग में देखी गई प्रजातियों की विविधता पर मूल्यवान अंतर्दृष्टि प्रदान की, जो बादाम फसल प्रणालियों में एकत्र पराग की काफी कम विविधता को उजागर करती है।

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In vivo Ca2+- Imaging of Mushroom Body Neurons During Olfactory Learning in the Honey Bee

में vivo Ca 2 + - हनी बी में घ्राण सीखना दौरान मशरूम शारीरिक न्यूरॉन्स की इमेजिंग

The in vivo and semi-in vivo preparation for Calcium imaging has been developed in our lab by Joerges, K&uuml;ttner and Galizia over ten years ago, to ...

Selecting and Isolating Colonies of Human Induced Pluripotent Stem Cells Reprogrammed from Adult Fibroblasts

मानव प्रेरित pluripotent स्टेम सेल का चयन और अलग कालोनियों वयस्क Fibroblasts से reprogrammed किया

Herein we present a protocol of reprogramming human adult fibroblasts into human induced pluripotent stem cells (hiPSC) using retroviral vectors encoding ...

Obtaining Specimens with Slowed, Accelerated and Reversed Aging in the Honey Bee Model

धीमा त्वरित और उलट हनी बी मॉडल में उम्र बढ़ने के साथ नमूनों को प्राप्त करने

Societies of highly social animals feature vast lifespan differences between closely related individuals. Among social insects, the honey bee is the best ...

Methods for Comparing Nutrients in Beebread Made by Africanized and European Honey Bees and the Effects on Hemolymph Protein Titers

Africanized और यूरोपीय हनी मधुमक्खियों द्वारा बनाया गया Beebread में पोषक तत्वों की तुलना के लिए तरीके और Hemolymph प्रोटीन titers पर प्रभाव

Honey bees obtain nutrients from pollen they collect and store in the hive as beebread. We developed methods to control the pollen source that bees ...

Dissection and Observation of Honey Bee Dorsal Vessel for Studies of Cardiac Function

विच्छेदन और हनी बी पृष्ठीय पोत का अवलोकन हृदय समारोह के अध्ययन के लिए

The European honey bee, Apis mellifera L., is a valuable agricultural and commercial resource noted for producing honey and providing crop pollination ...

Monitoring Colony-level Effects of Sublethal Pesticide Exposure on Honey Bees

निगरानी कॉलोनी-हनी मधुमक्खियों पर घातक कीटनाशक जोखिम के स्तर प्रभाव

The effects of sublethal pesticide exposure to honey bee colonies may be significant but difficult to detect in the field using standard visual assessment ...

A 3D Printed Pollen Trap for Bumble Bee (Bombus) Hive Entrances

A 3D Printed Pollen Trap for Bumble Bee Bombus Hive Entrances

Bumble मधुमक्खी(Bombus)छत्ता प्रवेश द्वार के लिए एक 3 डी मुद्रित पराग जाल

To verify the plant sources from which bumble bees forage for pollen, individuals must be collected to remove their corbicular pollen loads for analysis.  ...

Assessing Agrochemical Risk to Mated Honey Bee Queens

युक्त शहद मधुमक्खी क्वींस के लिए एग्रोकेमिकल जोखिम का आकलन

Current risk assessment strategies for honey bees rely heavily upon laboratory tests performed on adult or immature worker bees, but these methods may not ...

An Improved Method to Measure Pollen Hydration Profiles in Arabidopsis thaliana

A High-Resolution, Single-Grain, In Vivo Pollen Hydration Bioassay for Arabidopsis thaliana

A High-Resolution, Single-Grain, In Vivo Pollen Hydration Bioassay for Arabidopsis thaliana (Video) | JoVE 

एराबिडोप्सिस थैलियाना के लिए विवो पराग हाइड्रेशन बायोसेसे में एक उच्च-रिज़ॉल्यूशन, एकल-अनाज

Sexual reproduction in flowering plants requires initial interaction between the pollen grain and the stigmatic surface, where a molecular dialog is ...