Name: a mouse model for chronic pancreatitis via bile duct tnbs infusion
Uploaded: 2021-02-28T13:30:00
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Diese Studie wurde vom Department of Veterans Affairs (VA-ORD BLR & D Merit I01BX004536) unterstützt, und das National Institute of Health gewährt HW # 1R01DK105183, DK120394 und DK118529. Wir danken Dr. Hongju Wu für den Austausch technischer Erfahrungen.

Alle Verfahren wurden mit Genehmigung der Institutional Animal Care and Use Committees an der Medical University of South Carolina und dem Ralph H. Johnson Medical Center durchgeführt. C57BL/6J männliche Mäuse im Alter von 8-10 Wochen wurden in dieser Studie verwendet. Mäuse wurden unter einem Standard-12-Licht- / 12-Dunkel-Zyklus mit ad libitum Zugang zu Nahrung und Wasser untergebracht.
1. Herstellung von TNBS-Injektionslösung
<ol><li>Bereiten Sie 10% Ethanol in 0,9% Kochsalzlösung v...

<ol>
	<li>Klauss, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetically+induced+vs.+classical+animal+models+of+chronic+pancreatitis:+a+critical+comparison.">Genetically induced vs. classical animal models of chronic pancreatitis: a critical comparison.</a> The Federation of American Societies for Experimental Biology Journal. 32, 5778-5792 (2018).</li><li>Liao, Y. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Histone+deacetylase+2+is+involved+in+&#181;-opioid+receptor+suppression+in+the+spinal+dorsal+horn+in+a+rat+model+of+chronic+pancreatitis+pain.">Histone deacetylase 2 is involved in &#181;-opioid receptor suppression in the spinal dorsal horn in a rat model of chronic pancreatitis pain.</a> Molecular Medicine Reports. 17 (2), 2803-2810 (2018).</li><li>Gui, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Trypsin+activity+governs+increased+susceptibility+to+pancreatitis+in+mice+expressing+human+PRSS1R122H.">Trypsin activity governs increased susceptibility to pancreatitis in mice expressing human PRSS1R122H.</a> The Journal of Clinical Investigation. 130 (1), 189-202 (2020).</li><li>Sun, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adipose+Stem+Cell+Therapy+Mitigates+Chronic+Pancreatitis+via+Differentiation+into+Acinar-like+Cells+in+Mice.">Adipose Stem Cell Therapy Mitigates Chronic Pancreatitis via Differentiation into Acinar-like Cells in Mice.</a> Molecular Therapy. 25 (11), 2490-2501 (2017).</li><li>Aghdassi, A. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+for+investigating+chronic+pancreatitis.">Animal models for investigating chronic pancreatitis.</a> Fibrogenesis and Tissue Repair. 4 (1), 26 (2011).</li><li>Scoggins, C. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=p53-dependent+acinar+cell+apoptosis+triggers+epithelial+proliferation+in+duct-ligated+murine+pancreas.">p53-dependent acinar cell apoptosis triggers epithelial proliferation in duct-ligated murine pancreas.</a> American Journal of Physiology-Gastrointestinal and Liver Physiology. 279 (4), 827-836 (2000).</li><li>Bradley, E. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pancreatic+duct+pressure+in+chronic+pancreatitis.">Pancreatic duct pressure in chronic pancreatitis.</a> The American Journal of Surgery. 144 (3), 313-316 (1982).</li><li>Zhao, J. B., Liao, D. H., Nissen, T. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+pancreatitis:+can+it+be+translated+to+human+pain+study.">Animal models of pancreatitis: can it be translated to human pain study.</a> World Journal of Gastroenterology. 19 (42), 7222-7230 (2013).</li><li>Winston, J. H., He, Z. J., Shenoy, M., Xiao, S. Y., Pasricha, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+and+behavioral+changes+in+nociception+in+a+novel+rat+model+of+chronic+pancreatitis+for+the+study+of+pain.">Molecular and behavioral changes in nociception in a novel rat model of chronic pancreatitis for the study of pain.</a> Pain. 117 (1-2), 214-222 (2005).</li><li>Cattaruzza, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transient+receptor+potential+ankyrin+1+mediates+chronic+pancreatitis+pain+in+mice.">Transient receptor potential ankyrin 1 mediates chronic pancreatitis pain in mice.</a> American Journal of Physiology-Gastrointestinal and Liver Physiology. 304 (11), 1002-1012 (2013).</li><li>Bai, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anterior+insular+cortex+mediates+hyperalgesia+induced+by+chronic+pancreatitis+in+rats.">Anterior insular cortex mediates hyperalgesia induced by chronic pancreatitis in rats.</a> Molecular Brain. 12 (1), 76 (2019).</li><li>Puig-Div&#237;, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induction+of+chronic+pancreatic+disease+by+trinitrobenzene+sulfonic+acid+infusion+into+rat+pancreatic+ducts.">Induction of chronic pancreatic disease by trinitrobenzene sulfonic acid infusion into rat pancreatic ducts.</a> Pancreas. 13 (4), 417-424 (1996).</li><li>Zhang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=PAX4+Gene+Transfer+Induces+alpha-to-beta+Cell+Phenotypic+Conversion+and+Confers+Therapeutic+Benefits+for+Diabetes+Treatment.">PAX4 Gene Transfer Induces alpha-to-beta Cell Phenotypic Conversion and Confers Therapeutic Benefits for Diabetes Treatment.</a> Molecular Therapy. 24 (2), 251-260 (2016).</li><li>Ceppa, E. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Serine+proteases+mediate+inflammatory+pain+in+acute+pancreatitis.">Serine proteases mediate inflammatory pain in acute pancreatitis.</a> American Journal of Physiology-Gastrointestinal and Liver Physiology. 300 (6), 1033-1042 (2011).</li><li>Puig-Divi, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induction+of+chronic+pancreatic+disease+by+trinitrobenzene+sulfonic+acid+infusion+into+rat+pancreatic+ducts.">Induction of chronic pancreatic disease by trinitrobenzene sulfonic acid infusion into rat pancreatic ducts.</a> Pancreas. 13 (4), 417-424 (1996).</li><li>Xu, G. Y., Winston, J. H., Shenoy, M., Yin, H., Pasricha, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Enhanced+excitability+and+suppression+of+A-type+K++current+of+pancreas-specific+afferent+neurons+in+a+rat+model+of+chronic+pancreatitis.">Enhanced excitability and suppression of A-type K+ current of pancreas-specific afferent neurons in a rat model of chronic pancreatitis.</a> American Journal of Physiology-Gastrointestinal and Liver Physiology. 291 (3), 424-431 (2006).</li><li>Drewes, A. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pain+in+chronic+pancreatitis:+the+role+of+neuropathic+pain+mechanisms.">Pain in chronic pancreatitis: the role of neuropathic pain mechanisms.</a> Gut. 57 (11), 1616-1627 (2008).</li></ol>

Die Gallengangsinfusion von TNBS zur Induktion einer chronischen Pankreatitis ist bei Mäusen technisch anspruchsvoll, da bis zu 22,5% der Mäuse innerhalb von 3-4 Tagen nach der Medikamenteninfusion sterben können10. Hier verfeinerte dieser Bericht das Verfahren auf der Grundlage früherer Studien und reduzierte die frühe Maussterblichkeit auf <10%. Zum Beispiel kann das erhöhte Arzneimittelvolumen (von 35 μL auf 50μL) sicherstellen, dass die Medikamente die gesamte Bauchspeicheldrüse errei...

Chronische Pankreatitis (CP) ist eine chronisch entzündliche Erkrankung, die durch Atrophie der Bauchspeicheldrüse, Fibrose, Bauchschmerzen und eventuellen Verlust exokriner und endokriner Funktionen gekennzeichnet ist1. Aktuelle medizinische und chirurgische Behandlungen sind nicht heilend, sondern werden durchgeführt, um Symptome zu lindern, die die Folge der Krankheit sind: refraktäre Bauchschmerzen, endokrine und exokrine Dysfunktion. Daher sind wirksamere Behandlungen dringend erforderlich2. Tiermodelle sind ein wesentliches Werkzeug, um ein besseres Verständnis der Krankheit zu entwickeln und potenzielle Therapeutika zu untersuchen3. Es wurden mehrere Mausmodelle für CP entwickelt, von denen Cerulein- und/ oder Alkoholmodelle häufig verwendet werden. Cerulein, ein Oligopeptid, das die Pankreassekretion stimuliert, hat gezeigt, dass es ein CP-Modell mit Pankreasatrophie, Fibrose und anderen reproduzierbar induziert4. Ein anderes gängiges Modell verwendet serielle Injektionen von L-Arginin, das eine exokrine Insuffizienz erzeugt, die der bei menschlichen Patienten beobachtetenähnelt 5. CP kann auch durch vollständige oder partielle Pankreasgangligatur sowie Pankreasganghypertonie6,7induziert werden. Trotz der Vielfalt der für CP verfügbaren Tiermodelle reproduziert keines dieser Modelle effektiv die Bauchschmerzen von CP-Patienten8.
Frühere Studien zeigten, dass die lokale Pankreasinjektion von 2,4,6-Trinitrobenzolsulfonsäure (TNBS) die anhaltenden Schmerzen von CP-Patienten repliziert9,10,11. TNBS-behandelte Mäuse zeigten abdominale Überempfindlichkeit und erhöhtes schmerzbedingtes Verhalten sowie eine "generalisierte Überempfindlichkeit" gegen schmerzhafte Reize, ein Phänomen, das bei CP-Patienten beobachtet wurde10. Neben der genauen Nachahmung von CP-Schmerzen repliziert das TNBS-Modell auch andere pathologische Merkmale des menschlichen Zustands wie Fibrose, mononukleäre Zellinfiltration und Ersatz von Acinarzellen durch Fettgewebe10,12. Die TNBS-Infusion über den Gallengang ist jedoch ein technisch anspruchsvolles Verfahren bei Mäusen, das zum Tod führen kann. Unseres Wissens gibt es kein visuelles Protokoll, um zu zeigen, wie die Gallengangsinfusion durchgeführt wird. In diesem Artikel demonstrieren wir das Verfahren der Gallenabduktion von TNBS zur Erzeugung eines CP-Mausmodells. Dieses Verfahren wird dazu beitragen, wertvolle Tiermodelle für die Untersuchung von CP und anderen Pankreaserkrankungen zu generieren und kann verwendet werden, um andere Materialien (z. B. Virus, Zellen) in die Bauchspeicheldrüse einzuschmeißen13.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>10% Neutral buffered formalin v/v</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>23426796</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alcohol prep pads, sterile</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>22-363-750</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Animal Anesthesia system</td>
			<td>VetEquip, Inc.</td>
			<td>901806</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Buprenorphine hydrochloride, injection</td>
			<td>Par Sterile Products, LLC</td>
			<td>NDC 42023-179-05</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifuge tubes, 15 mL</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>0553859A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol, absolute (200 proof), molecular biology grade</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>BP2818500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Extra fine Micro Dissecting scissors 4&#8221; straight sharp</td>
			<td>Roboz Surgical Instrument Co.</td>
			<td>RS-5882</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Graefe forceps 4&#8221; extra delicate tip</td>
			<td>Roboz Surgical Instrument Co.</td>
			<td>RS-5136</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heated pad</td>
			<td>Amazon</td>
			<td>B07HMKMBKM</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hegar-Baumgartner Needle Holder 5.25&#8221;</td>
			<td>Roboz Surgical Instrument Co.</td>
			<td>RS-7850</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Insulin syringe with 31-gauge needle</td>
			<td>BD</td>
			<td>324909</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Iodine prep pads</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>19-027048</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>Piramal Critical Care</td>
			<td>NDC 66794-017-25</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro clip applying forceps 5.5&#8221;</td>
			<td>Roboz Surgical Instrument Co.</td>
			<td>RS-5410</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro clip, straight strong curved 1x6mm</td>
			<td>Roboz Surgical Instrument Co.</td>
			<td>RS-5433</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro clip, straight, 0.75mm clip width</td>
			<td>Roboz Surgical Instrument Co.</td>
			<td>RS-5420</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Picrylsulfonic acid solution, TNBS, 1M in H2O</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>92822-1ML</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polypropylene Suture 4-0</td>
			<td>Med-Vet International</td>
			<td>MV-8683</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polypropylene Suture 5-0</td>
			<td>Med-Vet International</td>
			<td>MV-8661</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium chloride, 0.9% intravenous solution</td>
			<td>VWR</td>
			<td>2B1322Q</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical drape, sterile</td>
			<td>Med-Vet International</td>
			<td>DR1826</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue Cassette</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>22-272416</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Von Frey filaments</td>
			<td>Bioseb</td>
			<td>EB2-VFF</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a mouse model for chronic pancreatitis via bile duct tnbs infusion

Chronische Pankreatitis (CP) ist eine komplexe Erkrankung mit Pankreasentzündung und Fibrose, Drüsenatrophie, Bauchschmerzen und anderen Symptomen. Mehrere Nagetiermodelle wurden entwickelt, um CP zu untersuchen, von denen das Gallengang 2,4,6-Trinitrobenzolsulfonsäure (TNBS) Infusionsmodell die Merkmale neuropathischer Schmerzen bei CP repliziert. Die Infusion von Gallengangsmedikamenten bei Mäusen ist jedoch technisch anspruchsvoll. Dieses Protokoll demonstriert das Verfahren der Gallengangs-TNBS-Infusion zur Erzeugung eines CP-Mausmodells. TNBS wurde durch die Ampulle von Vater im Zwölffingerdarm in die Bauchspeicheldrüse infundiert. Dieses Protokoll optimierte das Arzneimittelvolumen, die chirurgischen Techniken und die Handhabung während des Eingriffs. TNBS-behandelte Mäuse zeigten Merkmale von CP, die sich in Gewichtsreduktionen des Körpergewichts und der Bauchspeicheldrüse, Veränderungen des schmerzbedingten Verhaltens und einer abnormalen Pankreasmorphologie widerspiegeln. Mit diesen Verbesserungen war die Mortalität im Zusammenhang mit der TNBS-Injektion minimal. Dieses Verfahren ist nicht nur entscheidend für die Erstellung von Pankreaserkrankungsmodellen, sondern auch für die lokale Verabreichung von Pankreasmedikamenten.

Die Gallengangsinfusionsverfahren wurden optimiert, um die mit diesem Verfahren verbundene Maussterblichkeit zu reduzieren10. TNBS wurde zunächst in einem Gesamtvolumen von 35 μL oder 50 μL verabreicht. Die Injektion von TNBS in einem Volumen von 50 μL könnte die gesamte Bauchspeicheldrüse erreichen und einen homogeneren Krankheitsphänotyp induzieren (Abbildung 1B). Darüber hinaus könnte die Injektion von TNBS mit einer Insulinspritze mit 31G-Nadel die Infusi...

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A Mouse Model for Chronic Pancreatitis via Bile Duct TNBS Infusion

Chronische Pankreatitis (CP) ist eine Krankheit, die durch Entzündungen und Fibrose der Bauchspeicheldrüse gekennzeichnet ist, die oft mit hartnäckigen Bauchschmerzen verbunden sind. Dieser Artikel konzentriert sich auf die Verfeinerung der Technik, um ein Mausmodell von CP durch Gallengangsinfusion mit 2,4,6-Trinitrobenzolsulfonsäure (TNBS) zu erzeugen.

Ein Mausmodell für chronische Pankreatitis mittels Gallengangs-TNBS-Infusion

Chronic pancreatitis (CP) is a complex disease involving pancreatic inflammation and fibrosis, glandular atrophy, abdominal pain and other symptoms. ...

Chronische Pankreatitis ist eine komplexe Erkrankung mit Pankreasentzündungen, Fibrose, Bauchschmerzen und anderen Symptomen. Das Gallengangs-TNBS-Infusionsmodell repliziert die neuropathischen Schmerzen, die bei Patienten mit chronischer Pankreatitis beobachtet wurden. Dieses Gallengangs-TNBS-Infusionsprotokoll wurde optimiert, um die Erzeugung eines chronischen Pankreatitis-Modells bei Mäusen zu induzieren.Da die Gallengangsmedikamentenfusion bei Mäusen technisch anspruchsvoll ist, wird ihre Visualisierung für Forscher, die neu in der Methode sind, hilfreich sein. Verwenden Sie vor und zwei und drei Wochen nach der Operation Von Frey-Monofilamente, um verschiedene Kraftniveaus in aufsteigender Reihenfolge auf den Oberbauchbereich einer acht bis 10 Wochen alten, C57 schwarzen sechs Maus anzuwenden, 10 Mal für ein bis zwei Sekunden pro Anwendung. Erwägen Sie, den Rückzug oder das Lecken des Bauches als positive Reaktion zu erhöhen.Laden Sie als nächstes eine Insulinspritze, die mit einer 31-Gauge-Nadel ausgestattet ist, mit 50 Mikrolitern einer frisch zubereiteten 0,75-prozentigen TNBS-Lösung. Laden Sie eine zweite Spritze mit 50 Mikrolitern 10 Prozent Ethanol in Kochsalzlösung als Fahrzeugsteuerung und legen Sie beide Spritzen lichtgeschützt auf Eis. Nachdem Sie eine mangelnde Reaktion auf den Pedalreflex bestätigt haben, entfernen Sie die Haare aus der Bauchregion der betäubten Maus, indem Sie sich rasieren oder haarentfernungscreme auftragen und die Maus auf ein beheiztes Operationspad unter einem Seziermikroskop legen.Tragen Sie Tiersalbe auf jedes Auge auf und desinfizieren Sie die Operationsstelle mit drei sequenziellen zwei Prozent Jod und drei 70 Prozent Ethanoltüchern verwenden Sie eine Mikroschere, um in einer kontinuierlichen Bewegung einen Schnitt von 0,5 bis einem Zentimeter zu machen, und verwenden Sie Wattestäbchen, um den Zwölffingerdarm sanft freizulegen und den gemeinsamen Gallengang zu lokalisieren. Um den Fluss der Behandlung in die Leber und gallenblase zu verhindern, verwenden Sie das Mikroskop, um einen geraden Mikro-Hämoclip über den proximalen gemeinsamen Kanal zu legen, und führen Sie die Nadel der TNBS-geladenen Spritze durch die Papille des Vaters in den Pankreasgang ein. Verwenden Sie einen gekrümmten Mikro-Hämoclip, um die Nadel zu sichern, und geben Sie die Lösung im Laufe einer Minute in den Pankreasgang.Wenn die gesamte Lösung geliefert wurde, entfernen Sie vorsichtig die Mikroklemmen und bestätigen Sie, dass der Zwölffingerdarm in seine ursprüngliche Position zurückgekehrt ist. Vor dem Schließen der Bauchhöhle 500 Mikroliter von 36 bis 37 Grad Celsius sterile Kochsalzlösung hinzufügen, um dem Zwölffingerdarm zu helfen, in seine ursprüngliche Position zurückzukehren und die Wiederherstellung der Peristaltik zu unterstützen. Verwenden Sie eine kontinuierliche Naht mit einem Fünf-O-Stich, um den Schnitt in der Muskelschicht zu schließen, und schließen Sie die Haut mit einer unterbrochenen Naht mit einem Vier-O-Stich.Dann legen Sie die Maus in einen Erholungskäfig auf einem Heizkissen mit Überwachung bis zur vollständigen Liege. Überwachen Sie die Gesundheit und das Verhalten der Maus täglich in der ersten Woche nach der Operation auf Anzeichen von Stress, wie Vokalisieren, eine gebeugte Rückenhaltung oder reduzieren Sie die Fortbewegung und messen Sie das Körpergewicht jeden zweiten Tag. Wie beobachtet, führt die Injektion von 50 Mikrolitern Tinte, wie gezeigt, zur Infiltration der gesamten Bauchspeicheldrüse, was die Induktion eines homogeneren Krankheitsphänotyps ermöglicht.In dieser repräsentativen Analyse verloren die Mäuse in der Kontrollgruppe in den ersten drei Tagen nach der Operation etwa sechs Prozent ihres ursprünglichen Körpergewichts, bevor sie sich allmählich erholten und bis zum 21. Tag über 100% ihres ursprünglichen Körpergewichts zunahmen. Im Gegensatz dazu verloren Mäuse, die TNBS erhielten, in den ersten fünf Tagen nach der Operation etwa 15 Prozent ihres ursprünglichen Körpergewichts und gewannen bis zum 21. Tag knapp 100 Prozent ihres ursprünglichen Körpergewichts zurück. Im Vergleich zu Kontrollmäusen zeigten die TNBS-injizierten Tiere in der zweiten und dritten Woche nach der Operation eine erhöhte abdominale mechanische Überempfindlichkeit.Die Größe und das Gewicht pro Körpergewicht der Bauchspeicheldrüse waren bei TNBS-Mäusen im Vergleich zu Bauchspeicheldrüsen, die von Kontrolltieren geerntet wurden, signifikant reduziert, was auf eine ausgeprägte Pankreasatrophie bei TNBS-behandelten Tieren hindeutet, die mit den Befunden bei Menschen mit schwerer und langfristiger chronischer Pankreatitis übereinstimmt. Die histologische Analyse von Pankreasgewebeabschnitten von mit Kontrollethanol behandelten Mäusen zeigte eine normale Morphologie, während Gewebeabschnitte von TNBS-behandelten Mäusen eine leere Realisierung mit einem massiven Verlust von Acinarzellen zeigten, die durch Fettzellinfiltration und Fibrose ersetzt wurden. Zu verhindern, dass das injizierte TNBS in die Galblase und den Darm gelangt, ist wichtig, da ein TNBS gewebeschädigende Wirkungen hat.Halten Sie die Hand während der Infusion so stabil wie möglich, um eine Punktion dieses Gallengangs zu vermeiden. Neben der Induktion der Entwicklung einer chronischen Pankreatitis kann diese Gallengangsinfusionskunst für Mäuse für die Entwicklung der anderen Pankreaserkrankungsmodelle verwendet werden. Dieses TNBS-Modell der chronischen Pankreatitis Maus kann verwendet werden, um sowohl die Pathogenese als auch die Behandlung von chronischer Pankreatitis sowie anderer Pankreaserkrankungen zu untersuchen.

Research

JoVE Journal

Medicine

Cannulation of the Mouse Submandibular Salivary Gland via the Wharton's Duct

Kanülierung der Maus Submandibular Speicheldrüsen über die Wharton-Gang

Severe salivary gland hypofunction is frequently found in patients with Sj&ouml;gren's syndrome and those who receiving therapeutic 
irradiation in their ...

Forschung

Medizin

3-Dimensional Resin Casting and Imaging of Mouse Portal Vein or Intrahepatic Bile Duct System

3-Dimensional Resin Casting und Imaging of Mouse Pfortader oder intrahepatische Gallengang-System

In  organs, the correct architecture of vascular and ductal structures is  indispensable for proper physiological function, and the formation and  ...

A Model of Chronic Nutrient Infusion in the Rat

Ein Modell der chronischen Nährstoff Infusion in der Ratte

Chronic exposure to excessive levels of nutrients is postulated to  affect the function of several organs and tissues and to contribute to the  ...

A Laser-induced Mouse Model of Chronic Ocular Hypertension to Characterize Visual Defects

Ein Laser-induzierten Maus-Modell der chronischen Ocular Hypertension zu Sehfehler Charakterisierung

Glaucoma, frequently associated with elevated intraocular pressure (IOP), is one of the leading causes of blindness. We sought to establish a mouse model ...

Urinary Bladder Distention Evoked Visceromotor Responses as a Model for Bladder Pain in Mice

Harnblase Aufdehnung evozierte viszeromotorische Antworten als Modell für Bladder Pain in Mäuse

Approximately 3-8 million people in the United States suffer from interstitial cystitis/bladder pain syndrome (IC/BPS), a debilitating condition ...

Bile Duct Ligation in Mice: Induction of Inflammatory Liver Injury and Fibrosis by Obstructive Cholestasis

Gallengang-Ligation in Mice: Induktion von Entzündungsleber-Verletzung und Fibrose von obstruktiver Cholestase

In most vertebrates, the liver produces bile that is necessary to emulsify absorbed fats and enable the digestion of lipids in the small intestine as well ...

Surgical Injury to the Mouse Pancreas through Ligation of the Pancreatic Duct as a Model for Endocrine and Exocrine Reprogramming and Proliferation

Chirurgische Verletzung des Maus-Pankreas durch Ligatur des Pankreasganges als Modell für endokrine und exokrine Reprogrammierung und Proliferation

Expansion of pancreatic beta cells in vivo or ex vivo, or generation of beta cells by differentiation from an embryonic or adult stem cell, can provide ...

Pancreatic Duct Infusion: An Effective and Selective Method of Drug and Viral Delivery

Pankreasgang-Infusion: Eine effektive und selektive Methode der Medikamenten- und Virusabgabe

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Ileectomy-induced Bile Overaccumulation in Mouse Intestine

Overaccumulation Ileectomy-induzierten Galle im Darm der Maus

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Isometric Contractility Measurement of the Mouse Mesenteric Artery Using Wire Myography

Messung der isometrischen Kontraktilität der Maus mesenterialen Arterie mit Draht Myographie

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