Name: three and four-dimensional visualization and analysis approaches to study vertebrate axial elongation and segmentation
Uploaded: 2021-02-28T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Three and Four-Dimensional Visualization and Analysis Approaches to Study Vertebrate Axial Elongation and Segmentation at JoVE.com

我们要感谢Olivier Pourquié和Alexander Aulehla提供的LuVeLu报告菌株，SunJin实验室提供的RapiClear测试样本，Hugo Pereira帮助使用BigStitcher，Nuno Granjeiro帮助建立实时成像设备，IGC动物设施以及Mallo实验室的过去和现在的成员在这项工作过程中提供了有用的评论和支持。
我们感谢IGC高级成像设施的技术支持，该设施由葡萄牙资金参考# PPBI-POCI-01-0145-FEDER-022122和ref# PTDC/BII-BTI/32375/2017提供支持，由里斯本区域业务计划（Lisboa 2020）共同资助，根据葡萄牙2020年伙伴关系协议，通过欧洲区域发展基金（FEDER）和Fundação para a Ciência e a Tecnologia（FCT，葡萄牙）。本手稿中描述的工作得到了LISBOA-01-0145-FEDER-030254（FCT，葡萄牙）和SCML-MC-60-2014（葡萄牙Santa Casa da Misericórdia）向M.M，研究基础设施Congento，项目LISBOA-01-0145-FEDER-022170以及博士奖学金PD / BD / 128426 / 2017到A.D.的支持。

涉及动物的实验遵循葡萄牙（Portaria 1005/92）和欧洲（指令2010/63 / EU）关于住房，畜牧业和福利的立法。该项目由“塞内加尔古尔本基安研究所”伦理委员会和葡萄牙国家实体“食品和兽医协会”（许可证编号：014308）审查和批准。
1. 3D和4D成像的样品制备
注意：在这里，我们提供了有关如何解剖和制备小鼠E8.25至E10.5胚胎以进行活体成像（1.1），E7.5至E11.5?...

轴向伸长和分割是脊椎动物胚胎发育过程中发生的两个最复杂和最动态的过程。一段时间以来，使用3D和4D成像与单细胞跟踪已经应用于研究斑马鱼和鸡胚胎的这些过程，其可及性和培养条件有助于复杂的成像19，44，45，46，47，48，<sup class="...

脊椎动物身体轴的形成是胚胎发育过程中发生的高度复杂和动态的过程。在原肠胚形成结束时[在小鼠中，在胚胎日（E）8.0左右]，一组称为神经中层祖细胞（NMPs）的上胚层祖细胞成为头到尾序列中轴向延伸的关键驱动因素，在颈部，躯干和尾巴形成过程中产生神经管和旁轴中皮组织1，2，3，4.有趣的是，这些NMP在尾部外胚层中占据的位置似乎在分化成中胚层或神经外胚层5的决定中起着关键作用。虽然我们目前缺乏NMP的精确分子指纹，但这些细胞通常被认为共表达T（Brachyury）和Sox25，6。调节NMP命运决策的确切机制（即，它们是否采用神经或中皮途径）才刚刚开始被精确定义。 Tbx6 在原始条纹区域的表达是NMP命运决定的早期标志物，因为该基因参与中胚层6，7的诱导和规范。有趣的是，早期的中胚层细胞似乎表达高水平的Epha18，Wnt / β-catenin信号传导以及 Msgn1 也被证明在轴旁中胚层分化和sumite形成中起重要作用9，10。在单细胞水平上对NMP进行完整的时空分析肯定有助于充分了解控制中胚层规范的分子机制。
体细胞（椎骨前体）的形成是脊椎动物的一个关键特征。在轴向伸长过程中，轴旁中胚层被分割成一系列称为somites的双侧重复单元。茴香的数量和形成新节段所需的时间因物种11，12而异。Somitogenesing涉及周期性信号振荡（称为“分割时钟”），可以通过预定中胚层（例如 Lfng）中Notch，Wnt和Fgf信号通路的几个基因的循环表达来观察到11，12。目前的体细胞生成模型还假设存在“成熟波前”，这是一系列复杂的信号梯度，涉及Fgf，Wnt和视黄酸信号传导，定义了每个新索米特后边界的位置。因此，“分割时钟”和“成熟波前”之间的协调相互作用对于这些椎骨前体模块的产生至关重要，因为这些关键形态发生过程中的扰动可导致胚胎致死性或先天性畸形（例如脊柱侧弯）的形成13，14，15。
尽管最近在成像技术、生物影像分析方法和软件方面取得了重大进展，但大多数轴向伸长和体分裂的研究仍然依赖于单一/分离的二维图像数据（例如切片），这不允许完整的多维组织可视化，并使胚胎发育过程中发生的病理性畸形（即由于突变） 与 正常形态变异之间的明确区分复杂化16.3D成像已经发现了新的形态发生运动，以前没有通过标准2D方法17，18，19，20识别，突出了toto成像在了解脊椎动物体发生和轴向伸展机制方面的力量。
小鼠胚胎的3D和4D显微镜，特别是实时成像，在技术上具有挑战性，需要在样品制备，图像采集和数据预处理过程中采取关键步骤，以便进行准确和有意义的时空分析。在这里，我们描述了用于小鼠胚胎的活体成像和全装载免疫荧光染色的详细方案，可用于在轴向延伸和分割期间研究NMP和中胚层细胞。此外，我们还描述了一种用于老年胚胎和胎儿的光学投影断层扫描（OPT）的方案，该协议允许3D可视化和量化可能由体细胞生成期间的问题（例如骨融合和脊柱侧弯）引起的病理异常13，21，22。最后，我们说明了3D成像重建在脊椎动物分割和轴向伸长的研究和教学中的力量。

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Agarose low gelling temperature</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>A9414</td>
			<td>Used to mounting embryos (e.g. for OPT)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Amira software</td>
			<td>Thermofisher</td>
			<td>-</td>
			<td>Commerial software tool</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-Brachyury (Goat polyclonal)</td>
			<td>R and D Systems</td>
			<td>AF2085 RRID:AB_2200235</td>
			<td>For immunofluorescence</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-Sox2 (Rabbit monoclonal)</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab92494 RRID:AB_10585428</td>
			<td>For immunofluorescence</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-Tbx6 (Goat polyclonal)</td>
			<td>R and D Systems</td>
			<td>AF4744 RRID:AB_2200834</td>
			<td>For immunofluorescence</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-Laminin111 (Rabbit polyclonal)</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>L9393 RRID:AB_477163</td>
			<td>For immunofluorescence</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-goat 488 (Donkey polyclonal)</td>
			<td>Molecular Probes</td>
			<td>A11055 RRID:AB_2534102</td>
			<td>For immunofluorescence</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-rabbit 568 (Donkey polyclonal)</td>
			<td>ThermoFisher &#160; Scientific</td>
			<td>A10042 RRID:AB_2534017</td>
			<td>For immunofluorescence</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Benzyl Alcohol (99+%)</td>
			<td>(any)</td>
			<td>-</td>
			<td>Used to clear embryos (component of BABB)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Benzyl Benzoate (99+%)</td>
			<td>(any)</td>
			<td>-</td>
			<td>Used to clear embryos (component of BABB)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bovine serum albumin</td>
			<td>Biowest</td>
			<td>P6154</td>
			<td>For immunofluorescence</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Coverglass 20x20 mm #0</td>
			<td>(any)</td>
			<td>-</td>
			<td>100um thick</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Coverglass 20x20 mm #1</td>
			<td>(any)</td>
			<td>-</td>
			<td>170um thick</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Coverglass 20x60 mm #1.5</td>
			<td>(any)</td>
			<td>-</td>
			<td>To use as &#8220;slides&#8221;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DAPI (4&#8217;,6-Diamidino-2- Phenylindole Dihydrochloride)</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>D3571</td>
			<td>For immunofluorescence</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Drishti software</td>
			<td>(open source)</td>
			<td>-</td>
			<td>Free software tool</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EDTA</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>ED2SS</td>
			<td>For demineralization</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fiji/ImageJ software</td>
			<td>(open source)</td>
			<td>-</td>
			<td>Free software tool</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glycine</td>
			<td>NZYtech</td>
			<td>MB01401</td>
			<td>For immunofluorescence</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Huygens software</td>
			<td>Scientific Volume Imaging</td>
			<td>-</td>
			<td>Commerial software tool</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HyClone defined fetal bovine serum</td>
			<td>GE Healthcare</td>
			<td>#HYCLSH30070.03</td>
			<td>For live imaging</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hydrogen peroxide solution 30 %</td>
			<td>Milipore</td>
			<td>1085971000</td>
			<td>For clearing</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Imaris software</td>
			<td>Bitplane / Oxford instruments</td>
			<td>-</td>
			<td>Commerial software tool</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>iSpacers</td>
			<td>SunJin Lab</td>
			<td>(varies)</td>
			<td>Use as spacers for preparations</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L-glutamine</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>#25030&#8211;024</td>
			<td>For live imaging medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Low glucose DMEM</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>11054020</td>
			<td>For live imaging medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>M2 medium</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>M7167</td>
			<td>To dissect embryos</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Methanol</td>
			<td>VWR</td>
			<td>VWRC20847.307</td>
			<td>For dehydration and rehydration steps</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Methyl salicylate</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>M6752</td>
			<td>Used to clear embryos</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Paraformaldehyde</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>P6148</td>
			<td>Used in solution to fix embryos</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin-streptomycin</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>#P0781</td>
			<td>For live imaging medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PBS (Phosphate-buffered saline solution)</td>
			<td>Biowest</td>
			<td>L0615-500</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RapiClear</td>
			<td>SunJin Laboratory</td>
			<td>RapiClear 1.52</td>
			<td>Used to clear embryos</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Secure-Sea hybridization chambers</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>C5474</td>
			<td>Use as spacers for preparations</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>simLab software</td>
			<td>SimLab soft</td>
			<td>-</td>
			<td>Commerial software tool</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Slide, depression concave glass - 75x25 mm</td>
			<td>(any)</td>
			<td>-</td>
			<td>To mount thick embryos.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Triton X-100</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>T8787</td>
			<td>For immunofluorescence</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

three and four-dimensional visualization and analysis approaches to study vertebrate axial elongation and segmentation

体细胞发生是脊椎动物胚胎发育的标志。多年来，研究人员一直在使用包括离体和体外方法在内的各种技术在各种生物体中研究这一过程。然而，大多数研究仍然依赖于对二维（2D）成像数据的分析，这限制了对发育过程的正确评估，例如轴向延伸和涉及复杂3D空间中高度动态相互作用的发生。在这里，我们描述了允许小鼠实时成像采集，数据集处理，可视化和分析3D和4D的技术，以研究参与这些发育过程的细胞（例如，神经中胚层祖细胞）。我们还为小鼠胚胎中的光学投影断层扫描和全挂载免疫荧光显微镜（从样品制备到图像采集）提供分步方案，并展示了我们开发的用于处理和可视化3D图像数据的管道。我们扩展了其中一些技术的使用，并突出了不同可用软件（例如，Fiji/ImageJ，Drishti，Amira和Imaris）的特定功能，这些功能可用于提高我们当前对轴向延伸和somite形成（例如，3D重建）的理解。总而言之，这里描述的技术强调了3D数据可视化和分析在发育生物学中的重要性，并可能有助于其他研究人员在脊椎动物轴向延伸和分割的背景下更好地处理3D和4D图像数据。最后，这项工作还采用了新的工具来促进脊椎动物胚胎发育的教学。

本文显示的活体和免疫荧光成像的代表性结果均采用双光子系统获得，其中20×1.0 NA水物镜，激发激光调谐至960nm，GaAsP光电探测器（如Dias等人（2020）43中所述。光学投影断层扫描是使用定制的OPenT扫描仪完成的（如Gualda等人（2013）28中所述）。
实时成像（4D 分析） 对小鼠胚胎中轴向延伸期间LuVeLu报告活性的代表性分析，根据...

Watch this Scientific Journal Video about Three and Four-Dimensional Visualization and Analysis Approaches to Study Vertebrate Axial Elongation and Segmentation at JoVE.com

Three and Four-Dimensional Visualization and Analysis Approaches to Study Vertebrate Axial Elongation and Segmentation

在这里，我们描述了计算工具和方法，这些工具和方法允许在轴向伸长和分割的背景下可视化和分析小鼠胚胎的三维和四维图像数据，通过toto光学投影断层扫描以及通过使用多光子显微镜进行实时成像和全贴装免疫荧光染色获得。

研究脊椎动物轴向伸长和分割的三维和四维可视化分析方法

Somitogenesis is a hallmark of vertebrate embryonic development. For years, researchers have been studying this process in a variety of organisms using a ...

小鼠胚胎中的器官发生阶段仍然研究不善，部分原因是由于胚胎复合物结构的难以可视化。该协议描述了允许在轴向延伸和分割期间对小鼠胚胎进行3D和4D可视化和分析的技术。该技术的主要优点是，它允许研究人员研究和显示小鼠胚胎的复杂结构作为3D动态物体。该协议包含可用于研究影响哺乳动物椎骨和脊髓的先天性畸形（例如脊柱侧弯）的技术。这些技术也可以与体外模型系统一起使用，从而可以研究人类胚胎发育。为了准备胚胎第8.25天和第10.5天之间的小鼠胚胎以进行活体成像，在37摄氏度的预热M2培养基中解剖胚胎。使用干净的镊子轻轻取出卵黄囊，并用新鲜的M2培养基洗涤胚胎一次，以除去解剖过程中产生的血液和碎屑。在实时成像过程中，将胚胎在低葡萄糖DMEM培养基中孵育，该培养基补充了10%HyClone定义的FBS，两毫摩尔L-谷氨酰胺和1%青霉素链霉素，在37摄氏度加热室和65%氧气和5%二氧化碳环境中。为了制备用于免疫荧光显微镜的类似阶段的小鼠胚胎，而不是使用加热的M2，在冷PBS中解剖胚胎并固定在4%多聚甲醛中。在按照文本手稿中所述执行整个上样免疫荧光染色方案后，可以使用RapiClear实现组织清除。首先，将胚胎置于75×25毫米凹陷凹陷载玻片的中心，取出显微镜凹陷载玻片中的所有PBST并加入200微升的清除溶液，然后用盒子覆盖载玻片制备物。在避光10分钟后，当胚胎开始变得透明时，更换清除溶液并再等待20分钟。用盖玻片覆盖胚胎，从一侧开始，轻轻地向另一侧移动。该示例现在已准备好进行映像。对于使用水杨酸甲酯或BAB进行清除，请确保胚胎在100%甲醇中完全脱水，然后开始BABB和甲醇系列，浓度连续增加20%，每个步骤孵育20分钟。当BABB溶液达到100%时，对新鲜溶液进行两次额外的更改。准备一个20×60毫米的1.5盖玻片来安装胚胎，以避免压缩样品。添加由薄金属垫圈制成的垫片。使用牙签，细棉尖或巴斯德移液器将清除的胚胎转移到显微镜载玻片上。然后加入一滴安装介质，用另一个类似的盖板玻璃覆盖，并用熔化的石蜡密封，以更好地稳定制剂以避免气泡。将盖玻片放在一侧，然后逐渐轻轻地将其侧向滑动，必要时添加更多介质。样品现在可以在显微镜下成像。成像后，使用斐济/ ImageJ将胚胎重新定位为标准化的前后轴和背腹轴位置。减小斐济影像中的数据集大小，然后缩放并插入将数据集减小到小于 200 MB 所需的 X、Y 和 Z 比例值。确保已勾选创建新窗口选项。然后转到插件并打开3D查看器。在 3D 查看器窗口中，单击胚胎以将其选中，从而显示一个红色的 3D 框。使用此模式时，请使用鼠标控制数据集的旋转。确保胚胎的完美位置后，在3D查看器窗口中选择编辑，转换图像并导出转换后的图像。检查不同的正交平面，然后转到图像，然后堆叠并选择正交视图。当胚胎正确定位时，选择3D查看器窗口菜单，然后编辑，转换矩阵并将其保存到具有垫扩展名的文本文件中。使用斐济/图像J打开文本文件，删除前两行并重新保存。这将创建一个与 TransformJ 插件兼容的转换矩阵文件。切换到全分辨率数据集并执行操作插件 TransformJ 和 TransformJ 仿射。在新窗口中，浏览以搜索先前保存的矩阵文件，选择三次 B 样条插值并按各向同性重新取样，然后单击“确定”。正确重新定位胚胎后，修剪大部分创建的空白空间。要执行完整的 Z 投影图像，请单击堆栈、Z 投影，然后选择最大强度。然后绘制X和Y中包含整个胚胎的最小ROI.通过单击编辑，选择，恢复选择和裁剪（通过选择图像）切换到原始数据集图像窗口。通过选择图像和打开堆栈来修剪开头和结尾中不与胚胎组织相交的切片，单击工具，选择切片去除器，并指定要移除的第一个和最后一个切片，确保将增量更改为1。如果需要，请使用文本手稿中的说明进行进一步的分析和3D重建。为了对更成熟的胚胎进行3D分析，在冷的PBS中解剖胚胎第18.5天的胎儿，去除所有多余的胚胎膜，然后在新鲜的PBS中洗涤胎儿几次，以去除解剖过程中产生的血液和碎屑。将胎儿固定在PBS中4摄氏度的4%PFA中，持续五到七天。在PBS中洗涤胚胎几次后，通过在连续增加的甲醇溶液中孵育10%10直到达到100%甲醇，使胎儿脱水。在室温下在摇床上进行每次孵育25分钟。接下来，将胎儿分别在摇摇杯上分别在甲醇中5%过氧化氢中孵育一天，然后在甲醇中孵育10%过氧化氢孵育长达三天，直到胚胎失去所有天然色素沉着。在脱矿质水中逐渐以反向甲醇系列重新水化胚胎，每次在室温下在振荡器上孵育20分钟，然后将胚胎洗涤三次，每次在脱矿质水中洗涤30分钟。要将胎儿嵌入1%琼脂糖块中，用熔化的琼脂糖填充50毫升塑料管或注射器，然后将胎儿置于琼脂糖的垂直位置，并在琼脂糖凝固期间用镊子保持该位置。将带有块的模具在四摄氏度下放置30分钟，以使琼脂糖完全果冻，然后将琼脂糖块与胎儿一起从模具中取出，并将其放入装有去气化的水的容器中。在脱矿质水或PBS中稀释的甲醇浓度增加10%时，逐渐进行胎儿脱水，在摇床上将样品在室温下保持甲醇浓度至少45分钟，直到达到100%甲醇。通过将胎儿在每种浓度下通过一系列BABB溶液和甲醇2.5小时，使BAB浓度增加25%，直到达到100%BABB，从而清除胎儿。每天用新鲜的BAB溶液替换BAB溶液，直到胎儿完全透明。此过程可能需要三到五天。使用胶水将清除的琼脂糖块附着在OPT扫描仪的电机轴上，然后调整光学元件以获得整个胎儿的图像，并继续获取完整的投影数据集。4D实时成像技术能够对LuVeLu报告基因表达和胚胎第8.5天Snai1条件敲除胚胎进行动态分析。与预定中胚层上的正常LuVeLu信号一起，Snai1条件敲除胚胎在原始条纹产生的异位凸起中显示LuVeLu表达。整个安装免疫荧光测定允许检测潜在的NMP和中胚层分化的关键调节因子。白色和黄色箭头突出显示突变型和野生型胚胎的差异。整个支架免疫染色的3D渲染可以更好地理解研究中的组织或结构。在这种情况下，研究了尾部芽中潜在NMP的位置。3D组织重建对于理解和表征小鼠胚胎的形态缺陷也很重要。3D重建的交互式可视化也可以以用户友好的格式构建。例如，在 PDF 文件中。这些3D胚胎尾部结构可用于向更普通的受众说明3D模型的强大功能，并帮助研究教授脊椎动物的轴向伸长和分割。最后，使用OTP显微镜技术可以对更成熟的小鼠胚胎进行3D可视化。此处显示了动画渲染，突出显示了胚胎第18.5天胎儿的关键部分。要记住的最重要的事情是，结果必须忠实地代表在胚胎中观察到的内容。研究人员可以使用这些方法，而不仅仅是向图像呈现静态，还包括视频，三维重建，甚至数据的交互式3D模型。

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Differentiation of a Human Neural Stem Cell Line on Three Dimensional Cultures, Analysis of MicroRNA and Putative Target Genes

一个人类神经干细胞系的三维文化，微小RNA的分析和推测的靶基因分化

Neural stem cells (NSCs) are capable of self-renewal and differentiation into neurons, astrocytes and oligodendrocytes under specific local ...

科研

发育生物学

Ex Vivo Culture of Pharyngeal Arches to Study Heart and Muscle Progenitors and Their Niche

Ex Vivo Culture of Pharyngeal Arches to Study Heart and Muscle Progenitors and Their Niche

咽弓的体外培养研究心脏和肌肉祖细胞和自己的优势

The pharyngeal mesoderm of developing embryos contributes to broad regions of head and heart musculature. We have developed a novel method to study head ...

Visualization of Chondrocyte Intercalation and Directional Proliferation via Zebrabow Clonal Cell Analysis in the Embryonic Meckel&#8217;s Cartilage

Visualization of Chondrocyte Intercalation and Directional Proliferation via Zebrabow Clonal Cell Analysis in the Embryonic MeckelÃƒÂ¢Ã¢â€šÂ¬Ã¢â€žÂ¢s Cartilage

通过在胚胎梅克尔软骨Zebrabow克隆细胞分析软骨插层和定向扩散的可视化

Development of the vertebrate craniofacial structures requires precise coordination of cell migration, proliferation, adhesion and differentiation. ...

Kinetic Measurement and Real Time Visualization of Somatic Reprogramming

体细胞重编程的动力学测量和实时可视化

Somatic reprogramming has enabled the conversion of adult cells to induced pluripotent stem cells (iPSC) from diverse genetic backgrounds and disease ...

Analysis of Retinoic Acid-induced Neural Differentiation of Mouse Embryonic Stem Cells in Two and Three-dimensional Embryoid Bodies

二维和三维胚体小鼠胚胎干细胞的维甲酸诱导神经分化的分析

Mouse embryonic stem cells (ESCs) isolated from the inner mass of the blastocyst (typically at day E3.5), can be used as in vitro model system for ...

Visualization and Quantitative Analysis of Embryonic Angiogenesis in Xenopus tropicalis

Visualization and Quantitative Analysis of Embryonic Angiogenesis in Xenopus tropicalis

胚胎血管生成的可视化和定量分析<em&gt;热带非洲爪蟾</em

Blood vessels supply oxygen and nutrients throughout the body, and the formation of the vascular network is under tight developmental control. The ...

Using In Vivo and Tissue and Cell Explant Approaches to Study the Morphogenesis and Pathogenesis of the Embryonic and Perinatal Aorta

Using In Vivo and Tissue and Cell Explant Approaches to Study the Morphogenesis and Pathogenesis of the Embryonic and Perinatal Aorta

使用体内和组织和细胞外植体方法研究胚胎和围产期主动脉的形态和发病机制

The aorta is the largest artery in the body. The aortic wall is composed of an inner layer of endothelial cells, a middle layer of alternating elastic ...

Correlative Super-resolution and Electron Microscopy to Resolve Protein Localization in Zebrafish Retina

斑马鱼视网膜蛋白定位的相关超分辨和电镜观察

We present a method to investigate the subcellular protein localization in the larval zebrafish retina by combining super-resolution light microscopy and ...

Three-dimensional Rendering and Analysis of Immunolabeled, Clarified Human Placental Villous Vascular Networks

Immunolabeled, 澄清人胎盘长柔毛血管网络的三维渲染与分析

Nutrient and gas exchange between mother and fetus occurs at the interface of the maternal intervillous blood and the vast villous capillary network that ...

Computational Analysis of the Caenorhabditis elegans Germline to Study the Distribution of Nuclei, Proteins, and the Cytoskeleton

Computational Analysis of the Caenorhabditis elegans Germline to Study the Distribution of Nuclei, Proteins, and the Cytoskeleton

秀丽线虫生殖的计算分析研究细胞核、蛋白质和细胞骨架的分布

The Caenorhabditis elegans (C. elegans) germline is used to study several biologically important processes including stem cell development, apoptosis, and ...