Name: positron emission tomography imaging for in vivo measuring of myelin content in the lysolecithin rat model of multiple sclerosis
Uploaded: 2021-02-28T14:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Positron Emission Tomography Imaging for In Vivo Measuring of Myelin Content in the Lysolecithin Rat Model of Multiple Sclerosis at JoVE.com

β küpü ekipmanı (Molecubes NV, Belçika), São Paulo Araştırma Vakfı, FAPESP - Brezilya (#2018/15167-1) tarafından desteklendi. LES, FAPESP - Brezilya'dan (#2019/15654-2) doktora öğrencisi bursuna sahiptir.

Tüm prosedürler, Ulusal Hayvan Deneyleri Konseyi'nin (CONCEA, Brezilya) yönergelerine uygun olarak yürütüldü ve Sao Paulo Üniversitesi Tıp Fakültesi Hayvan Araştırmaları Etik Komitesi tarafından onaylandı (CEUA-FMUSP, Brezilya - protokol numarası: 25/15).
NOT: Bu protokolde, multipl sklerozun lysolecithin sıçan modelinin nasıl indüklendiğini ve miyelin PET görüntülerinin nasıl elde edilir ve analiz edilir.
1. Lysolecithin çözelti hazırlığ...

<ol>
	<li>Oh, J., Vidal-Jordana, A., Montalban, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multiple+sclerosis:+clinical+aspects.">Multiple sclerosis: clinical aspects.</a> Current Opinion in Neurology. 31 (6), 752-759 (2018).</li><li>Sand, I. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Classification,+diagnosis,+and+differential+diagnosis+of+multiple+sclerosis.">Classification, diagnosis, and differential diagnosis of multiple sclerosis.</a> Current Opinion in Neurology. 28 (3), 193-205 (2015).</li><li>Thompson, A. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Diagnosis+of+multiple+sclerosis:+2017+revisions+of+the+McDonald+criteria.">Diagnosis of multiple sclerosis: 2017 revisions of the McDonald criteria.</a> Lancet Neurology. 17 (2), 162-173 (2018).</li><li>Veronese, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantification+of+C-11+PIB+PET+for+imaging+myelin+in+the+human+brain:+a+test-retest+reproducibility+study+in+high-resolution+research+tomography.">Quantification of C-11 PIB PET for imaging myelin in the human brain: a test-retest reproducibility study in high-resolution research tomography.</a> Journal of Cerebral Blood Flow and Metabolism. 35 (11), 1771-1782 (2015).</li><li>Carvalho, R. H. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=C-11+PIB+PET+imaging+can+detect+white+and+grey+matter+demyelination+in+a+non-human+primate+model+of+progressive+multiple+sclerosis.">C-11 PIB PET imaging can detect white and grey matter demyelination in a non-human primate model of progressive multiple sclerosis.</a> Multiple Sclerosis and Related Disorders. 35, 108-115 (2019).</li><li>Stankoff, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaging+central+nervous+system+myelin+by+positron+emission+tomography+in+multiple+sclerosis+using+[methyl-(1)(1)C]-2-(4'-methylaminophenyl)-+6-hydroxybenzothiazole.">Imaging central nervous system myelin by positron emission tomography in multiple sclerosis using [methyl-(1)(1)C]-2-(4'-methylaminophenyl)- 6-hydroxybenzothiazole.</a> Annals of Neurology. 69 (4), 673-680 (2011).</li><li>Faria, D. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Myelin+positron+emission+tomography+(PET)+imaging+in+multiple+sclerosis.">Myelin positron emission tomography (PET) imaging in multiple sclerosis.</a> Neural Regeneration Research. 15 (10), 1842-1843 (2020).</li><li>Pietroboni, A. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Amyloid+PET+as+a+marker+of+normal-appearing+white+matter+early+damage+in+multiple+sclerosis:+correlation+with+CSF+-amyloid+levels+and+brain+volumes.">Amyloid PET as a marker of normal-appearing white matter early damage in multiple sclerosis: correlation with CSF -amyloid levels and brain volumes.</a> European Journal of Nuclear Medicine and Molecular Imaging. 46 (2), 280-287 (2019).</li><li>Pytel, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Amyloid+PET+findings+in+multiple+sclerosis+are+associated+with+cognitive+decline+at+18+months.">Amyloid PET findings in multiple sclerosis are associated with cognitive decline at 18 months.</a> Multiple Sclerosis and Related Disorders. 39, (2020).</li><li>Faria, D. d. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=PET+imaging+of+glucose+metabolism,+neuroinflammation+and+demyelination+in+the+lysolecithin+rat+model+for+multiple+sclerosis.">PET imaging of glucose metabolism, neuroinflammation and demyelination in the lysolecithin rat model for multiple sclerosis.</a> Multiple Sclerosis Journal. 20 (11), 1443-1452 (2014).</li><li>Rinaldi, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Galectin-1+circumvents+lysolecithin-induced+demyelination+through+the+modulation+of+microglial+polarization/phagocytosis+and+oligodendroglial+differentiation.">Galectin-1 circumvents lysolecithin-induced demyelination through the modulation of microglial polarization/phagocytosis and oligodendroglial differentiation.</a> Neurobiology of Disease. 96, 127-143 (2016).</li><li>Faria, D. d. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=PET+imaging+of+focal+demyelination+and+remyelination+in+a+rat+model+of+multiple+sclerosis+comparison+of+[C-11]MeDAS,+[C-11]CIC+and+[C-11]PIB.">PET imaging of focal demyelination and remyelination in a rat model of multiple sclerosis comparison of [C-11]MeDAS, [C-11]CIC and [C-11]PIB.</a> European Journal of Nuclear Medicine and Molecular Imaging. 41 (5), 995-1003 (2014).</li><li>Faria, D. d. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=PET+imaging+of+focal+demyelination+and+remyelination+in+a+rat+model+of+multiple+sclerosis:+comparison+of+[11C]MeDAS,+[11C]CIC+and+[11C]PIB.">PET imaging of focal demyelination and remyelination in a rat model of multiple sclerosis: comparison of [11C]MeDAS, [11C]CIC and [11C]PIB.</a> European Journal of Nuclear Medicine and Molecular Imaging. 41 (5), 995-1003 (2014).</li><li>vander Star, B. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+Vitro+and+In+Vivo+Models+of+Multiple+Sclerosis.">In Vitro and In Vivo Models of Multiple Sclerosis.</a> CNS &amp; Neurological Disorders-Drug Targets. 11 (5), 570-588 (2012).</li><li>Najm, F. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Drug-based+modulation+of+endogenous+stem+cells+promotes+functional+remyelination+in+vivo.">Drug-based modulation of endogenous stem cells promotes functional remyelination in vivo.</a> Nature. 522 (7555), 216 (2015).</li></ol>

Multipl skleroz çalışması için lysolecithin modelini kullanmanın en büyük avantajı, demyelinasyon (yaklaşık 1 hafta) ve remyelinasyon (yaklaşık 4 hafta) için hızlı zaman çizelgesi14. Bu model farelerde de indüklenebilir15, ancak, sıçanlarda indüksiyon, fare beyninin farelere kıyasla daha büyük boyutu nedeniyle in vivo PET görüntüleme için daha avantajlıdır.
İndüksiyon modelinin ilk adımı son derece dikka...

An erratum was issued for:&#160;<a href="https://www.jove.com/t/62094">Positron Emission Tomography Imaging for In Vivo Measuring of Myelin Content in the Lysolecithin Rat Model of Multiple Sclerosis</a>. The citation&#160;was updated.
The citation was updated from:
de Paula Faria, D., Cristiano Real, C., Estessi de Souza, L., Teles Garcez, A., Navarro Marques, F. L., Buchpiguel, C. A. Positron Emission Tomography Imaging for In Vivo Measuring of Myelin Content in the Lysolecithin Rat Model of Multiple Sclerosis. J. Vis. Exp. (168), e62094, doi:10.3791/62094 (2021).
to:
de Paula Faria, D., Real, C.C., Estessi de Souza, L., Teles Garcez, A., Navarro Marques, F. L., Buchpiguel, C. A. Positron Emission Tomography Imaging for In Vivo Measuring of Myelin Content in the Lysolecithin Rat Model of Multiple Sclerosis. J. Vis. Exp. (168), e62094, doi:10.3791/62094 (2021).

An erratum was issued for:&#160;<a href="https://www.jove.com/t/62094">Positron Emission Tomography Imaging for In Vivo Measuring of Myelin Content in the Lysolecithin Rat Model of Multiple Sclerosis</a>. The citation&#160;was updated.

Erratum: Positron Emission Tomography Imaging for In Vivo Measuring of Myelin Content in the Lysolecithin Rat Model of Multiple Sclerosis

Multipl skleroz (MS), merkezi sinir sistemini etkileyen, iltihaplanma, demyelinasyon ve aksonal kayıp1ile karakterize nöroinflamatuar bir hastalıktır. Bu hastalığın prognozu, tedavideki gelişmelerle bile değişkendir ve gençlerde nörolojik açıkların en yaygın nedenlerinden biridir1. MS tanısı manyetik rezonans görüntüleme (MRG) ile karakteristik lezyonların klinik bulguları ve görselleştirilmesi kriterlerine dayanmaktadır2,3.
Pozitron emisyon tomografisi (PET), MS ilerlemesinin ve terapötik etkilerin in vivo izlenmesi için yararlı bir araç olabilir. Karbon-11 (11C-PIB) ile etiketlenmiş Pittsburgh bileşik B radyotracer (PIB), β-amiloid plaklarını ölçmek için yaygın olarak kullanılır; ancak, son on yılda, miyelin içeriğini ölçmek ve dinamik demiyelinasyon ve remiyelinasyon göstermek için çalışılmıştır4,5,6.
Farklı amiloid PET izleyiciler (11C-PIB, 18F-florbetaben,18F-florbetapir, 18F-flütemetamol) miyelin ölçmek ve hastalık ilerlemesi ve terapötik yanıt hakkında önemli bilgiler sağlamak için kullanılabilir, demiyelinasyon ve remiyelinasyon süreçlerinin tanımlanmasına izin verir, nöroinflamasyonun müdahalesi olmadan, geleneksel manyetik rezonans görüntüleri (MRG)7ile ortaya çıkabilir. Amiloid PET görüntüleme, aktif hastalarda erken beyaz madde hasarı ile açıklanabilen aktif olmayan hastalara kıyasla aktif MS hastalarında izleyici alımında azalma olduğunu göstermiştir8. Alt amiloid izleyici alımı, bir takip çalışmasında bilişsel düşüşle de ilişkilendirildi ve bu tekniğin hastalığın patofizyolojisini ve klinik sonuçlarını incelemek için değerli bir araç olduğunu gösterdi9.
Lysolecithin (LPC) sıçan modeli, enjekte edilen toksin LPC'nin, iltihaplanmanın artmasına ve sonuç olarak demyelinasyon10,11ile sonuçlanan makrofajların yüksek bir tepkisine neden olduğu multipl sklerozun kimyasal kaynaklı bir modelidir. Demyelinasyon, yaklaşık 4 hafta içinde hızla tersine çevrilir, bu da bunu kemirgenlerdeki demyelinasyon ve remyelinasyon süreçlerini değerlendirmek için iyi bir model haline getirir. Bu model zaten PET görüntüleme kullanılarak değerlendirildi, iyi sonuçlar ve ölüm sonrası denemelerle korelasyon12.
Burada, lesolesithin sıçan modelinde 11C-PIB ile miyelin PET görüntüleme protokolünü sunuyoruz ve bu görüntüleme tekniğinin miyelin içeriğinin in vivo ölçümü için yararlı bir araç olduğunu gösteriyoruz.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Analytical Balance</td>
			<td>Marte</td>
			<td>AUWZZOD</td>
			<td>max: 220 g- min: 1 mg</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anestesia vaporizer</td>
			<td>Nanitech</td>
			<td>15800</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Beta-cube</td>
			<td>Molecubes</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bulldog clamp</td>
			<td>Stoelting</td>
			<td>5212043P</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>clorexidine</td>
			<td>Rioquimica</td>
			<td></td>
			<td>0.5%/100 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cotton swabs</td>
			<td>johnson e johnson</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dose calibrator</td>
			<td>Capintech</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Drill</td>
			<td>Kinzo powertools</td>
			<td>352901</td>
			<td>Model Q0M-DC3C</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Eppendorf tube</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td>30125150</td>
			<td>1.5 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Eye lubricant</td>
			<td>ADVFARMA</td>
			<td>30049099</td>
			<td>&#160;vaseline 15 g (pharmaceutical purity)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fine forceps</td>
			<td>Stoelting</td>
			<td>52102-38P</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gloves</td>
			<td>Descarpack</td>
			<td>212101</td>
			<td>&#160;6.5 size</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heating pad</td>
			<td>Softhear</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Injection Syringe</td>
			<td>Hamilton</td>
			<td>80314</td>
			<td>10&#181;, 32ga, model 701</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Insuline syringe</td>
			<td>BD</td>
			<td>328328</td>
			<td>1 mL insulin syringes with needle</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>Crist&#225;lia</td>
			<td>410525</td>
			<td>100 mL , concentration 1 mL/1 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ketoprofen or other analgesic</td>
			<td>Sanofi</td>
			<td></td>
			<td>100 mg/2 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>lidocaine</td>
			<td>Hipolabor</td>
			<td>1.1343.0102.001-5</td>
			<td>2%/20mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L-&#945;-Lysophosphatidylcholine from egg yolk</td>
			<td>Sigma-aldrich</td>
			<td>L-4129</td>
			<td>25 mg - &#8805;99%, Type I, powder</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needle holder</td>
			<td>Stoelting</td>
			<td>5212290P</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Oxygen</td>
			<td>White Martins</td>
			<td>7782-44-7</td>
			<td>Compressed gas</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PMOD software</td>
			<td>PMOD technologies</td>
			<td>Version 4.1</td>
			<td>module fuse it</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rat anesthesia mask</td>
			<td>KOPF</td>
			<td>Model 906</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Saline</td>
			<td>Farmace</td>
			<td>0543325/ 14-8</td>
			<td>0.9% sodium chloride for injection, 10 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scapel blades</td>
			<td>Stoelting</td>
			<td>52173-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scapel handles</td>
			<td>Stoelting</td>
			<td>52171P</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scissor</td>
			<td>Stoelting</td>
			<td>52136-50P</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Semi-analytical Balance</td>
			<td>Quimis</td>
			<td>BK-3000</td>
			<td>max:3,100 g; min:0.2 g</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>shaver</td>
			<td>Mega profissional</td>
			<td></td>
			<td>AT200 model</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereotactic Apparatus</td>
			<td>KOPF</td>
			<td>Nodel 900</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Universal holder with needle support</td>
			<td>KOPF</td>
			<td>Model 1772-F1</td>
			<td>Hamilton support for 5 and 10 &#181;L</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

positron emission tomography imaging for in vivo measuring of myelin content in the lysolecithin rat model of multiple sclerosis

Multipl skleroz (MS), merkezi sinir sisteminde genişleyen aksonal ve nöronal dejenerasyon ve demyelinasyon ile MS ilerlemesi sırasında motor işlev bozukluklarına, psişik engellilik ve bilişsel bozulmaya yol açan nöroinflamatuar bir hastalıktır. Pozitron emisyon tomografisi (PET), in vivo hücresel ve moleküler değişiklikleri ölçebilen bir görüntüleme tekniğidir.
Miyelin sağlamlığına yakınlığa sahip radyotracers, zaman içinde miyelin içerik değişikliklerinin in vivo görüntülenmesi için kullanılabilir. Miyelin içeriğinde bir artış veya azalma tespit etmek mümkündür, bu görüntüleme tekniğinin merkezi sinir sisteminin demiyelinasyon ve remiyelinasyon süreçlerini tespit edebileceği anlamına gelir. Bu protokolde, fokal demiyelinasyon lezyonunun (stereotaktik enjeksiyonla indüklenen) (yani multipl skleroz hastalığının bir modeli) bir modeli olan lesolesitilin sıçan modelinde miyelin değişikliklerini tespit etmek için PET görüntülemenin nasıl kullanılacağını gösteriyoruz. 11 C-PIB PET görüntüleme taban çizgisine ve sıçan beyninin sağ striatumunda (4 μL) ve korpus callosumunda (3 μL) %1 oranında stereotaksik enjeksiyondan 1 hafta ve 4 hafta sonra yapıldı ve fokal demiyelinasyon (1 hafta sonra enjeksiyon bölgesi) ve remiyelinasyon sürecinin (4 haftada enjeksiyon bölgesi) ölçülmesini sağladı.
Myelin PET görüntüleme, miyelin içeriğindeki in vivo değişiklikleri izlemek için ilginç bir araçtır ve bu da demiyelinasyon hastalığının ilerlemesini ve terapötik yanıtı izlemek için yararlı olabilir.

Şekil 1' de zaman içinde miyelin değişiklikleri olan açıklayıcı 11C-PIB PET görüntüsü gösterilmektedir. Taban çizgisi taramasında miyelin içeriğinde herhangi bir fark görülemez (yani demyelinasyon yoktur). 1 haftalık zaman noktası görüntüsünde, beyaz okla belirtildiği gibi fokal demiyelinlenmiş lezyonu (sağ yarımkürede) görmek mümkündür. Görüntüler 3 anatomik düzlemde (koronal, eksenel ve sagittal) sunulur ve hepsinde demiyelinlenmiş lezyonu ...

Watch this Scientific Journal Video about Positron Emission Tomography Imaging for In Vivo Measuring of Myelin Content in the Lysolecithin Rat Model of Multiple Sclerosis at JoVE.com

Positron Emission Tomography Imaging for In Vivo Measuring of Myelin Content in the Lysolecithin Rat Model of Multiple Sclerosis

Bu protokol, multipl sklerozun bir hayvan modelinde pozitron emisyon tomografisi (PET) görüntüleme ile in vivo miyelin değişikliklerini (demiyelinasyon ve remiyelinasyon) izlemeyi amaçlamaktadır.

Multipl Sklerozun Lysolecithin Rat Modelinde Miyelin İçeriğinin In Vivo Ölçümü için Pozitron Emisyon Tomografi Görüntüleme

Multiple sclerosis (MS) is a neuroinflammatory disease with expanding axonal and neuronal degeneration and demyelination in the central nervous system, ...

Bu protokol, multipl sklerozun lysolecithin sıçan modelinde karbonil ile etiketlenmiş PIB ile PET görüntüleme ile in-vivo miyelin zincirlerinin izlenmesi adıdır. Bu görüntüleme tekniği, farklı noktalardaki pozisyonların in-vivo görüntülerine izin verme yeteneğine sahiptir. Zaman içinde madencilik zincirlerinin verilerine nokta dokunuşu elde edin.Bu videoda, hayvan modelinin stereotaktik enjeksiyonla nasıl indüklenerek nasıl elde edeceğimizi ve analiz edeceğimizi gösteriyoruz. Madencilik PIP görüntüleri. Lysolecithin çözeltisi hazırlığı için gerekli malzemeyi çıkar cam bir tüp kullanarak elektronik bir dengede lysolecithin çözelti ağırlığını alın cam boruyu elektrik dengesinden çıkararak hücre hattını açın ve% 1'liklysolecithin çözeltisini hazırlamak için doğru hacmi alın.Hücre hattını plastik tüpe koyun plastik tüpü kapatın ve parmaklarınızı kullanarak sallayın. Doğru konumdaki hayvanla ameliyata hazırlanın enjekte Edin Hayvan gözlerinin hidrasyona karşı koruduğu göz kremini koyun. kesi bölgesinin temizlenmesi için %5 kodokser çözeltisi kullanın, kesi yapılacak olan yere lidoksin enjekte edin.Kafalarındaki kılları tıraş edin yaklaşık iki santimetrelik bir kesi yapın udak kelepçeleri ile dürbün devrini ortaya çıkararak bir bezle temiz alan ve bregma pozisyonunu işaretleyin bregma enjeksiyonu üzerindeki hemato şırıngı bu üç işaretli alanda doğru koordinatta yapılacaktır. Hemato iğnesini drute bölgesinden geçirin Enjeksiyona başlamak için ventrikal koordinata gidin, Ameliyatı bitirin, kesiği dikin. İzleyici enjeksiyonu için uygun bir yer kullanın.İzleyici intravenöz olarak enjekte edilmelidir ve penis damarında veya kuyruk damarında yapılabilir. Stereotaktik cerrahiden önce taban çizgisi zaman noktasının görüntü alımı yapılır. Ve diğer iki zaman, stereotaktik ameliyattan bir hafta ve dört hafta sonra.PET tarayıcı yazılımını açın ve görüntü alma sırasında taranacak görüş alanını seçin. Hayvanı yatağa yerleştirin. Hayvanın düz olduğundan emin olun.Hayvan gözlerini korumak için göz kremini alın. Hayvan yatağını örtün. Hayvan yatağını evcil hayvan tarayıcısının içine itin ve edinime başlayın.PET taramasının sonuna kadar kederli hayvanı kontrol edin. Bir günlük görüntü alımı bittiğinde. Hayvanı yataktan çıkar.Uzak yazılımı açın ve Fuse It'model seçin görüntü biyografisini seçin ve işlemlerle açın. Silindir yönü kullanın ve görüntüyü yükleyin. Eşleştirmeye gidin ve PET görüntüsünü açın.Beyni görünür hale getirmek için renk ölçeğini ayarlayın. Görüntüyü kırpmak ve pencere boyutunu tüm beyni kaplayacak şekilde ayarlamak için kırp'a basın. Parametreleri ekranın sağ alt tarafındadır mavi shift tuşuna basın'Hayvanın yazılımda doğru konumlandırıldığından emin olun.Doğru MRI şablonını seçin. ihtiyacınız varsa, PET ve MRI şablonu arasındaki kapsama kısıtlamasını ayarlayabilirsiniz. Aygıt düğmesine basın.Doğru beyin şablonlarını seçin. Daha sonra mevcut farklı beyin bölgelerine bakabilir ve hepsini seçebilir veya seçimini kaldırabilirsiniz. Anahat kılavuzlarına gidin, hepsi seçilir.Üst düğmede, bu istatistik verilerinde görünmesini istediğiniz parametreyi seçebilirsiniz. İstatistik düğmesine dokunabilir ve ardından KilobeckerCSS veya SUV arasında seçim yapabilirsiniz. Panoya kopyalayıp kapatın.Verileriniz bir Excel sayfasına yapıştırılabilir. Ve sanrıyı ölçmek için Yeni tahtaya gidin, bu birkaçını seçin ve uygulayın. Karşıt tarafta yeni bir boşluk oluşturabilirsiniz.Ve sonra S2B4 istatistik düğmesine gidin. Lezyonu enjeksiyondan bir hafta sonra, lezyonları ise enjeksiyondan dört hafta sonra görmek mümkündür. Hücre astarı arasında bir hafta ile dört hafta arasında anlamlı fark görülür.Bu protokolün ardından, ilgi çekici bölgeyi almanın, enjeksiyon bölgesi olmanın ve analiz edilecek ilke alanının üç adımını elde edeceksiniz. Büyük bir protokol öğrencisi olarak, lezyon almak zamanla madencilik zincirlerini sunar, burada madencilik ulusu azalmış iz alma ve yeniden tasarlama izi alımı ile temsil edilir. Lazer listeleme enjeksiyonu çok yavaş olmalı, doku zarar önlemek ve sadece peep PIP görüntüleme ile tespit edilecek madencilik zincirleri neden olduğunu vurgulamak önemlidir.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Positron Emission Tomography Imaging for In Vivo Measuring of Myelin Content in the Lysolecithin Rat Model of Multiple Sclerosis

Thinned-skull Cortical Window Technique for In Vivo Optical Coherence Tomography Imaging

Thinned-skull Cortical Window Technique for In Vivo Optical Coherence Tomography Imaging

Için inceltilmiş-kafatası Kortikal Pencere Tekniği<em&gt; In Vivo</em&gt; Optik Koherens Tomografi Görüntüleme

Optical coherence tomography (OCT) is a biomedical imaging technique  with high spatial-temporal resolution. With its minimally invasive approach OCT  has ...

Measuring Progressive Neurological Disability in a Mouse Model of Multiple Sclerosis

Multipl Skleroz Fare Modeli Progressive Nörolojik Engellilik Ölçümü

After intracerebral infection with the Theiler's Murine Encephalomyelitis Virus (TMEV), susceptible SJL mice develop a chronic-progressive demyelinating ...

A Protocol for Measuring Cue Reactivity in a Rat Model of Cocaine Use Disorder

Cue reaktivite kokain kullanımı bozukluğu bir sıçan modelinde ölçmek için bir protokol

Cocaine use disorder (CUD) follows a trajectory of repetitive self-administration during which previously neutral stimuli gain incentive value. Cue ...

Optical Coherence Tomography: Imaging Mouse Retinal Ganglion Cells In Vivo

Optical Coherence Tomography: Imaging Mouse Retinal Ganglion Cells In Vivo

Optik Koherens tomografi: Fare retina Ganglion hücreleri Vivo içinde görüntüleme

Structural changes in the retina are common manifestations of ophthalmic diseases. Optical coherence tomography (OCT) enables their identification in ...

Comprehensive Autopsy Program for Individuals with Multiple Sclerosis

Multipl skleroz bireyler için kapsamlı otopsi programı

We describe a rapid tissue donation program for individuals with multiple sclerosis (MS) that requires scientists and technicians to be on-call 24/7, 365 ...

Transpupillary Two-Photon In Vivo Imaging of the Mouse Retina

Transpupiller İki Foton Fare Retinasının In vivo Görüntülenmesi

The retina transforms light signals from the environment into electrical signals that are propagated to the brain. Diseases of the retina are prevalent ...

A Rat Model of EcoHIV Brain Infection

EcoHIV Beyin Enfeksiyonunun Bir Sıçan Modeli

It has been well studied that the EcoHIV infected mouse model is of significant utility in investigating HIV associated neurological complications. ...

In vivo Calcium Imaging in Mouse Inferior Olive

In vivo Calcium Imaging in Mouse Inferior Olive

In vivo Fare Kalitesiz Zeytinde Kalsiyum Görüntüleme

Inferior olive (IO), a nucleus in the ventral medulla, is the only source of climbing fibers that form one of the two input pathways entering the ...

In vivo Positron Emission Tomography to Reveal Activity Patterns Induced by Deep Brain Stimulation in Rats

In vivo Positron Emission Tomography to Reveal Activity Patterns Induced by Deep Brain Stimulation in Rats

İn vivo Sıçanlarda Derin Beyin Stimülasyonunun İndüklediği Aktivite Kalıplarını Ortaya Çıkarmak için Pozitron Emisyon Tomografisi

Deep brain stimulation (DBS) is an invasive neurosurgical technique based on the application of electrical pulses to brain structures involved in the ...

Primary Cultures of Rat Astrocytes and Microglia and Their Use in the Study of Amyotrophic Lateral Sclerosis

Sıçan Astrositleri ve Mikroglia'nın Birincil Kültürleri ve Amiyotrofik Lateral Skleroz Çalışmalarında Kullanımları

This protocol demonstrates how to prepare primary cultures of glial cells, astrocytes, and microglia from the cortices of Sprague Dawley rats and how to ...