Name: fat-covered islet transplantation using epididymal white adipose tissue
Uploaded: 2021-05-25T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Fat-Covered Islet Transplantation Using Epididymal White Adipose Tissue at JoVE.com

تم تمويل هذه الدراسة من خلال منحة معونة للبحث العلمي (C) (19K09839، NS) من وزارة التعليم والثقافة والرياضة والعلوم والتكنولوجيا في اليابان.

يتم تنفيذ الإجراء التالي في ثلاث خطوات. تتضمن الخطوة الأولى تحريض مرض السكري في الفئران المتلقية وعزل الجزر المانحة. تتضمن الخطوة الثانية إعداد الجزر قبل الزرع. في الخطوة الثالثة ، يتم إجراء زرع الجزر على الأنسجة الدهنية البربخية وتغطية الجزر باستخدام الأنسجة الدهنية. بعد ذلك ، تم تقييم ا...

<ol>
	<li>Barton, F. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improvement+in+outcomes+of+clinical+islet+transplantation:+1999-2010.">Improvement in outcomes of clinical islet transplantation: 1999-2010.</a> Diabetes Care. 35 (7), 1436-1445 (2012).</li><li>Balamurugan, A. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Islet+product+characteristics+and+factors+related+to+successful+human+islet+transplantation+from+the+Collaborative+Islet+Transplant+Registry+(CITR)+1999-2010.">Islet product characteristics and factors related to successful human islet transplantation from the Collaborative Islet Transplant Registry (CITR) 1999-2010.</a> American Journal of Transplantation. 14 (11), 2595-2606 (2014).</li><li>Collaborative Islet Transplant Registry. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Collaborative Islet Transplant Registry. Annual Report. , (2017).</li><li>Rajab, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Total+Pancreatectomy+and+Islet+Autotransplantation+Following+Treated+Hepatitis+C+Infection.">Total Pancreatectomy and Islet Autotransplantation Following Treated Hepatitis C Infection.</a> Cell Transplantation. 27 (10), 1569-1573 (2018).</li><li>Mellgren, A., Schnell Landstrom, A. H., Petersson, B., Andersson, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+renal+subcapsular+site+offers+better+growth+conditions+for+transplanted+mouse+pancreatic+islet+cells+than+the+liver+or+spleen.">The renal subcapsular site offers better growth conditions for transplanted mouse pancreatic islet cells than the liver or spleen.</a> Diabetologia. 29 (9), 670-672 (1986).</li><li>Hiller, W. F., Klempnauer, J., Luck, R., Steiniger, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Progressive+deterioration+of+endocrine+function+after+intraportal+but+not+kidney+subcapsular+rat+islet+transplantation.">Progressive deterioration of endocrine function after intraportal but not kidney subcapsular rat islet transplantation.</a> Diabetes. 40 (1), 134-140 (1991).</li><li>Yasunami, Y., Lacy, P. E., Finke, E. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+site+for+islet+transplantation--a+peritoneal-omental+pouch.">A new site for islet transplantation--a peritoneal-omental pouch.</a> Transplantation. 36 (2), 181-182 (1983).</li><li>Kin, T., Korbutt, G. S., Rajotte, R. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Survival+and+metabolic+function+of+syngeneic+rat+islet+grafts+transplanted+in+the+omental+pouch.">Survival and metabolic function of syngeneic rat islet grafts transplanted in the omental pouch.</a> American Journal of Transplantation. 3 (3), 281-285 (2003).</li><li>Kasoju, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bioengineering+a+pre-vascularized+pouch+for+subsequent+islet+transplantation+using+VEGF-loaded+polylactide+capsules.">Bioengineering a pre-vascularized pouch for subsequent islet transplantation using VEGF-loaded polylactide capsules.</a> Biomaterials Science. 8 (2), 631-647 (2020).</li><li>Sakata, N., Yoshimatsu, G., Kodama, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=White+Adipose+Tissue+as+a+Site+for+Islet+Transplantation.">White Adipose Tissue as a Site for Islet Transplantation.</a> Transplantology. 1 (2), 55-70 (2020).</li><li>Osama Gaber, A., Chamsuddin, A., Fraga, D., Fisher, J., Lo, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Insulin+independence+achieved+using+the+transmesenteric+approach+to+the+portal+vein+for+islet+transplantation.">Insulin independence achieved using the transmesenteric approach to the portal vein for islet transplantation.</a> Transplantation. 77 (2), 309-311 (2004).</li><li>Fujita, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Technique+of+endoscopic+biopsy+of+islet+allografts+transplanted+into+the+gastric+submucosal+space+in+pigs.">Technique of endoscopic biopsy of islet allografts transplanted into the gastric submucosal space in pigs.</a> Cell Transplantation. 22 (12), 2335-2344 (2013).</li><li>Sakata, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Strategy+for+clinical+setting+in+intramuscular+and+subcutaneous+islet+transplantation.">Strategy for clinical setting in intramuscular and subcutaneous islet transplantation.</a> Diabetes/Metabolism Research and Reviews. 30 (1), 1-10 (2014).</li><li>Cantarelli, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transplant+Site+Influences+the+Immune+Response+After+Islet+Transplantation:+Bone+Marrow+Versus+Liver.">Transplant Site Influences the Immune Response After Islet Transplantation: Bone Marrow Versus Liver.</a> Transplantation. 101 (5), 1046-1055 (2017).</li><li>White, S. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+risks+of+total+pancreatectomy+and+splenic+islet+autotransplantation.">The risks of total pancreatectomy and splenic islet autotransplantation.</a> Cell Transplantation. 9 (1), 19-24 (2000).</li><li>Itoh, T., Nishinakamura, H., Kumano, K., Takahashi, H., Kodama, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Spleen+Is+an+Ideal+Site+for+Inducing+Transplanted+Islet+Graft+Expansion+in+Mice.">The Spleen Is an Ideal Site for Inducing Transplanted Islet Graft Expansion in Mice.</a> PLoS One. 12 (1), 0170899 (2017).</li><li>Sakata, N., Yoshimatsu, G., Kodama, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Spleen+as+an+Optimal+Site+for+Islet+Transplantation+and+a+Source+of+Mesenchymal+Stem+Cells.">The Spleen as an Optimal Site for Islet Transplantation and a Source of Mesenchymal Stem Cells.</a> International Journal of Molecular Sciences. 19 (5), (2018).</li><li>Sakata, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+rat-to-mouse+bioartificial+pancreas+xenotransplantation+on+diabetic+renal+damage+and+survival.">Effect of rat-to-mouse bioartificial pancreas xenotransplantation on diabetic renal damage and survival.</a> Pancreas. 32 (3), 249-257 (2006).</li><li>Nagaya, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effectiveness+of+bioengineered+islet+cell+sheets+for+the+treatment+of+diabetes+mellitus.">Effectiveness of bioengineered islet cell sheets for the treatment of diabetes mellitus.</a> Journal of Surgical Research. 227, 119-129 (2018).</li><li>Weaver, J. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vasculogenic+hydrogel+enhances+islet+survival,+engraftment,+and+function+in+leading+extrahepatic+sites.">Vasculogenic hydrogel enhances islet survival, engraftment, and function in leading extrahepatic sites.</a> Science Advances. 3 (6), 1700184 (2017).</li><li>Dufour, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+an+ectopic+site+for+islet+transplantation,+using+biodegradable+scaffolds.">Development of an ectopic site for islet transplantation, using biodegradable scaffolds.</a> Tissue Engineering. 11 (9-10), 1323-1331 (2005).</li><li>Chen, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+epididymal+fat+pad+as+a+transplant+site+for+minimal+islet+mass.">The epididymal fat pad as a transplant site for minimal islet mass.</a> Transplantation. 84 (1), 122-125 (2007).</li><li>Sakata, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanism+of+Transplanted+Islet+Engraftment+in+Visceral+White+Adipose+Tissue.">Mechanism of Transplanted Islet Engraftment in Visceral White Adipose Tissue.</a> Transplantation. 104 (12), 2516-2527 (2020).</li><li>Navarro-Requena, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=PEG+hydrogel+containing+calcium-releasing+particles+and+mesenchymal+stromal+cells+promote+vessel+maturation.">PEG hydrogel containing calcium-releasing particles and mesenchymal stromal cells promote vessel maturation.</a> Acta Biomaterialia. 67, 53-65 (2018).</li><li>Phelps, E. A., Headen, D. M., Taylor, W. R., Thule, P. M., Garcia, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vasculogenic+bio-synthetic+hydrogel+for+enhancement+of+pancreatic+islet+engraftment+and+function+in+type+1+diabetes.">Vasculogenic bio-synthetic hydrogel for enhancement of pancreatic islet engraftment and function in type 1 diabetes.</a> Biomaterials. 34 (19), 4602-4611 (2013).</li><li>Manzoli, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunoisolation+of+murine+islet+allografts+in+vascularized+sites+through+conformal+coating+with+polyethylene+glycol.">Immunoisolation of murine islet allografts in vascularized sites through conformal coating with polyethylene glycol.</a> American Journal of Transplantation. 18 (3), 590-603 (2018).</li><li>Gotoh, M., Maki, T., Kiyoizumi, T., Satomi, S., Monaco, A. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+improved+method+for+isolation+of+mouse+pancreatic+islets.">An improved method for isolation of mouse pancreatic islets.</a> Transplantation. 40 (4), 437-438 (1985).</li><li>Brandhorst, D., Brandhorst, H., Hering, B. J., Bretzel, R. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Long-term+survival,+morphology+and+in+vitro+function+of+isolated+pig+islets+under+different+culture+conditions.">Long-term survival, morphology and in vitro function of isolated pig islets under different culture conditions.</a> Transplantation. 67 (12), 1533-1541 (1999).</li><li>Noguchi, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Low-temperature+preservation+of+isolated+islets+is+superior+to+conventional+islet+culture+before+islet+transplantation.">Low-temperature preservation of isolated islets is superior to conventional islet culture before islet transplantation.</a> Transplantation. 89 (1), 47-54 (2010).</li><li>Itoh, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Low+temperature+condition+prevents+hypoxia-induced+islet+cell+damage+and+HMGB1+release+in+a+mouse+model.">Low temperature condition prevents hypoxia-induced islet cell damage and HMGB1 release in a mouse model.</a> Cell Transplantation. 21 (7), 1361-1370 (2012).</li><li>Komatsu, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optimizing+Temperature+and+Oxygen+Supports+Long-term+Culture+of+Human+Islets.">Optimizing Temperature and Oxygen Supports Long-term Culture of Human Islets.</a> Transplantation. 103 (2), 299-306 (2019).</li><li>Unger, R. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lipid+overload+and+overflow:+metabolic+trauma+and+the+metabolic+syndrome.">Lipid overload and overflow: metabolic trauma and the metabolic syndrome.</a> Trends in Endocrinology, Metabolism. 14 (9), 398-403 (2003).</li><li>Mao, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+macroporous+heparin-releasing+silk+fibroin+scaffold+improves+islet+transplantation+outcome+by+promoting+islet+revascularisation+and+survival.">A macroporous heparin-releasing silk fibroin scaffold improves islet transplantation outcome by promoting islet revascularisation and survival.</a> Acta Biomaterialia. 59, 210-220 (2017).</li><li>Wang, K., Wang, X., Han, C. S., Chen, L. Y., Luo, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Scaffold-supported+Transplantation+of+Islets+in+the+Epididymal+Fat+Pad+of+Diabetic+Mice.">Scaffold-supported Transplantation of Islets in the Epididymal Fat Pad of Diabetic Mice.</a> Journal of Visualized Experiments. (125), e54995 (2017).</li><li>Wang, X., Wang, K., Zhang, W., Qiang, M., Luo, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+bilaminated+decellularized+scaffold+for+islet+transplantation:+Structure,+properties+and+functions+in+diabetic+mice.">A bilaminated decellularized scaffold for islet transplantation: Structure, properties and functions in diabetic mice.</a> Biomaterials. 138, 80-90 (2017).</li><li>Rios, P. D., Zhang, X., Luo, X., Shea, L. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mold-casted+non-degradable,+islet+macro-encapsulating+hydrogel+devices+for+restoration+of+normoglycemia+in+diabetic+mice.">Mold-casted non-degradable, islet macro-encapsulating hydrogel devices for restoration of normoglycemia in diabetic mice.</a> Biotechnology and Bioengineering. 113 (11), 2485-2495 (2016).</li></ol>

تتضمن طريقة زراعة الجزر المغطاة بالدهون تقنيات من تقنيتين مختلفتين للزراعة: زرع جزيرة داخل الصفاق وزرع جزيرة الأنسجة الدهنية. نظرا لأن الغشاء السطحي للأنسجة الدهنية البيضاء البربخية يعتبر النسيج الدهني الأبيض الذي يغطيه الصفاق والمرتبط بالبربخ ، يمكن تصنيف طريقة زرع الجزيرة المغطاة با?...

زرع الجزيرة هو علاج بديل خلوي للمرضى الذين يعانون من داء السكري الحاد. أظهرت التقارير الأخيرة أن معدلات استقلال الأنسولين بعد ثلاث سنوات من الزرع تتحسن بنسبة تصل إلى 44٪ 1 وأن ما يقرب من 80٪ من المتلقين الذين يتلقون أكثر من 600000 مكافئ إجمالي للجزيرة يحققون استقلال الأنسولين2. علاوة على ذلك ، في أحدث تقرير لسجل زراعة الجزر التعاوني ، تم الكشف عن أن مستويات الجلوكوز في الدم الصائم تم الحفاظ عليها عند 60-140 مجم / ديسيلتر لأكثر من 5 سنوات في أكثر من 70٪ من المرضى الذين خضعوا لعملية زرع جزيرة وحدها. حددت الدراسة أيضا أن حوالي 90٪ من المرضى الذين خضعوا لعملية زرع جزيرة بمفردهم أو زرع جزيرة بعد زرع الكلى لم يصابوا بأي أحداث سكر الدم شديدة لأكثر من 5 سنوات3.
على الرغم من تحسن النتائج السريرية لهذا العلاج ، إلا أنه لا يزال يتعين معالجة بعض القيود ، بما في ذلك ضرورة إنشاء موقع زرع مثالي. الكبد هو موقع زرع نموذجي لزراعة الجزر السريرية لأنه أكبر عضو يمكن أن يستوعب عددا كبيرا من الجزر. ومع ذلك ، في بعض المرضى ، يكون الكبد غير متوفر (على سبيل المثال ، بسبب ارتفاع ضغط الدم البابي و / أو التهاب الكبد و / أو تليف الكبد4) وبالتالي مواقع أخرى ، بما في ذلك الفضاء تحت المحفظة الكلوي5،6 ، الجيب omental7،8،9،10 ، المساريق 11 ، الجهاز الهضمي 12 ، العضلات الهيكلية 13 ، الأنسجة تحت الجلد13 ، نخاع العظام 14 ، والطحال 15 ، 16،17 ، تم اعتبارها مواقع زرع بديلة.
على الرغم من أنه يمكن إجراء عملية زرع الجزيرة داخل الصفاق بسهولة تحت التخدير الموضعي ، مما يجعل التجويف داخل الصفاق موقعا جذابا لزراعة الجزر السريرية ، إلا أنه عند الزرع ، تنتشر الجزر في جميع أنحاء التجويف داخل الصفاق بأكمله ، مما يجعل اكتشاف النقش الجزري وتأكيد engraftment الناجح أمرا صعبا. لذلك ، لا يتم التعرف على التجويف داخل الصفاق على نطاق واسع كموقع زرع سريري مثالي. بدلا من ذلك ، يتم استخدامه بشكل متكرر كنموذج تحكم للدراسات قبل السريرية للتحقيق في فعالية الجزر المزروعة المغلفة18 والجزر المهندسة بيولوجيا19. ومع ذلك ، من الصعب إجراء مقارنة دقيقة بين الجزر المهندسة بيولوجيا والجزر الضابطة بسبب التحديات في إجراء تقييم دقيق للنقش.
في المقابل ، تم الإبلاغ جيدا عن استخدام الأنسجة الدهنية البيضاء داخل الصفاق في الجيب 8 ، والمساريق ، والمواقع الأخرى خارج الكبد 10،20،21،22،23 والعديد من الدراسات التي تبحث في وظيفة الجزر المهندسة بيولوجيا المزروعة باستخدام الأنسجة الدهنية البيضاء كانت قادرة على الإبلاغ عن نتائج علاجية واعدة20،24،25 ، 26. نظرا لأن استخدام الأنسجة الدهنية البربخية يسهل اكتشاف الجزر المزروعة ، فقد تم تطوير "طريقة زرع الجزر المغطاة بالدهون" ، باستخدام الأنسجة الدهنية البربخية ، للتغلب على قيود زرع الجزر داخل الصفاق. في هذه الورقة ، تم وصف زراعة الجزر المغطاة بالدهون باستخدام الأنسجة الدهنية البربخية.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>4-0 Nylon</td>
			<td>Alfresa</td>
			<td>ER2004NA45-KF2</td>
			<td>Closing abdomen</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alexa 488-conjugated donkey anti-guinea pig</td>
			<td>Jackson Immunoresearch</td>
			<td>706-546-148</td>
			<td>Secondary antibody for insulin antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alexa 647-conjugated donkey anti-rabbit</td>
			<td>Jackson Immunoresearch</td>
			<td>711-606-152</td>
			<td>Secondary antibody for von Willebrand factor antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM, low glucose, pyruvate</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>11885084</td>
			<td>Culturing islets, transplanting islets</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Eosin</td>
			<td>Fujifilm Wako Chemicals</td>
			<td>051-06515</td>
			<td>Using for staining tissue by eosin</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Eppendorf Safe-Lock Tubes, 1.5 mL</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td>30120086</td>
			<td>Collecting islets&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Falcon 15 mL Conical Centrifuge Tubes</td>
			<td>Corning</td>
			<td>352095</td>
			<td>Collecting islets</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Falcon 40 &#181;m Cell Strainer</td>
			<td>Falcon</td>
			<td>352340</td>
			<td>Using for separating islets from other pancreatic tissue</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Falcon 50 mL Conical Centrifuge Tubes</td>
			<td>Corning</td>
			<td>352070</td>
			<td>Discarding excessive medium/buffer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Guinea pig anti-insulin</td>
			<td>Agilent Technologies Japan, Ltd. (Dako)</td>
			<td>IR002</td>
			<td>Primary antibody for murine insulin</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hematoxylin</td>
			<td>Muto Pure Chemicals Co., Ltd.</td>
			<td>30002</td>
			<td>Using for staining tissue by hematoxylin</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isodine solution 10%</td>
			<td>Shionogi&#38;Co., Ltd.</td>
			<td>no catalog number</td>
			<td>Using for disinfection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>Fujifilm Wako Chemicals</td>
			<td>095-06573</td>
			<td>Using for anesthesia</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Labcon 1000 &#181;L ZapSilk Low Retention Pipette Tips</td>
			<td>Labcon</td>
			<td>1177-965-008</td>
			<td>Using for separating islets from other pancreatic tissue</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Labcon 200 &#181;L ZapSilk Low Retention Pipette Tips</td>
			<td>Labcon</td>
			<td>1179-965-008</td>
			<td>Using for seeding islets onto epididymal white adipose tissue</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mintsensor</td>
			<td>Sanwa Kagaku Kenkyusho Co. Ltd.,</td>
			<td>8AEB02E</td>
			<td>Using for monitoring blood glucose</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pipetteman P-1000</td>
			<td>Gilson</td>
			<td>F123602</td>
			<td>Using for separating islets from other pancreatic tissue</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pipetteman P-200</td>
			<td>Gilson</td>
			<td>F123601</td>
			<td>Using for seeding islets onto epididymal white adipose tissue</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rabbit anti-vWF</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab6994</td>
			<td>Primary antibody for murine von Willebrand factor</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

fat-covered islet transplantation using epididymal white adipose tissue

زرع الجزيرة هو علاج بديل خلوي لمرض السكري الحاد. عادة ما يكون التجويف داخل الصفاق هو موقع الزرع لهذا الإجراء. ومع ذلك ، فإن زرع الجزيرة داخل الصفاق له بعض القيود ، بما في ذلك ضعف فعالية الزرع ، والقدرة على اكتشاف الكسب غير المشروع ، ونقص القدرة على استئصال الطعم لتحليل ما بعد الزرع. في هذه الورقة ، يتم استخدام "زرع الجزر المغطاة بالدهون" ، وهي طريقة زرع جزيرة داخل الصفاق تستخدم الأنسجة الدهنية البيضاء البربخية ، لتقييم الآثار العلاجية للجزر المهندسة بيولوجيا. تكمن بساطة الطريقة في بذر الجزر على الأنسجة الدهنية البيضاء البربخية واستخدام الأنسجة لتغطية الجزر. في حين يمكن تصنيف هذه الطريقة على أنها تقنية زرع جزيرة داخل الصفاق ، إلا أنها تشترك في الخصائص مع زراعة الأنسجة داخل جزيرة الدهون. تظهر طريقة زرع الجزر المغطاة بالدهون تأثيرات علاجية أكثر قوة من زراعة الأنسجة داخل الأنسجة الدهنية ، بما في ذلك تحسين مستويات الجلوكوز في الدم والأنسولين في البلازما وإمكانية إزالة الكسب غير المشروع. نوصي باعتماد هذه الطريقة لتقييم آليات نقش الجزر في الأنسجة الدهنية البيضاء والآثار العلاجية للجزر المهندسة بيولوجيا.

لمقارنة فعالية زرع الجزر المغطاة بالدهون مع تلك التي بعد زرع جزيرة داخل الصفاق ، تم زرع نفس العدد من الجزر على الصفاق في الفضاء النظير الأيسر للحيوانات المصابة بالسكري المتلقية للسيطرة. لوحظ أن مستويات الجلوكوز في الدم لدى الفئران المصابة بزراعة الجزر المغطاة بالدهون تنخفض تدريجيا وبشكل...

Watch this Scientific Journal Video about Fat-Covered Islet Transplantation Using Epididymal White Adipose Tissue at JoVE.com

Fat-Covered Islet Transplantation Using Epididymal White Adipose Tissue

طريقة زرع الجزر المغطاة بالدهون مناسبة للكشف عن الجزر الصغيرة المحفورة في التجويف داخل الصفاق. والجدير بالذكر أنه لا يتطلب استخدام عوامل الربط الحيوي أو الخياطة.

زرع جزيرة مغطاة بالدهون باستخدام الأنسجة الدهنية البيضاء البربخ

Islet transplantation is a cellular replacement therapy for severe diabetes mellitus. The intraperitoneal cavity is typically the transplant site for this ...

هذا البروتوكول يجعل من الممكن تقييم آلية engraftment الجزيرة في الأنسجة الدهنية البيضاء. الميزة الرئيسية لطريقة زرع الجزر المغطاة بالدهون هي أنه من السهل تقنيا تكرارها. يمكن تطبيق الطريقة على نماذج الأمراض الأخرى.على سبيل المثال ، يمكن استخدامه لإنشاء نموذج فأر للسرطان. وسيوضح هذا الإجراء ناواكي ساكاتا، الأستاذ المشارك في جامعة فوكوكا. تحت مجهر التشريح ، استخدم ماصة صغيرة P 200 لإزالة أي مكونات جزيرة إضافية من هضم البنكرياس بما في ذلك الأنسجة العنيبية والليفية.ثم استخدم مصفاة الخلايا لتصفية الخلايا العنيبية المفردة. انقل الجزر المفلترة إلى طبق استزراع جديد يحتوي على وسط الاستزراع المناسب أو محلول عازلة مكمل بمصل البقر أو الألبومين ، وقم بتدوير الطبق لوضع الجزر في المنتصف. باستخدام ماصة صغيرة P 200 ، اختر الجزر الفردية في أنبوب تجميع مناسب.ضع مصفاة خلية جديدة 40 ميكرومتر فوق أنبوب بلاستيكي سعة 50 ملليلتر. استخدم ماصة 1000 ميكرولتر لإضافة الجزر إلى المصفاة لفصل الجزر والخلايا العنيبية المفردة. استخدم ملقط لقلب المصفاة على طبق استزراع جديد غير معالج بحجم 60 أو 100 ملليلتر يحتوي على وسط زراعة أو محلول عازل مناسب ، مكمل بمصل بقري أو ألبومين.استخدم وسطا طازجا ، أو عازلا لطرد الجزر الصغيرة في طبق استزراع جديد ، ثم أضف ما يكفي من الوسط أو المخزن المؤقت إلى طبق الاستزراع للوصول إلى حجم إجمالي يبلغ حوالي 20 ملليلتر. عد الجزر تحت المجهر وقسم عدد الجزر بالتساوي بين أنابيب الطرد المركزي البلاستيكية الفردية سعة 1.5 ملليلتر وفقا لعدد الحيوانات المانحة. الطرد المركزي الجزر في 2 ، 100 غرام لمدة دقيقة واحدة في درجة حرارة الغرفة وتجاهل طاف .عادة ما يبقى حوالي 20 إلى 30 ميكرولترا من المحلول المتبقي في الأنبوب. بعد إزالة الشعر من البطن لمنع العدوى ، ضع الماوس في وضع ضعيف. بعد تطهير البطن والمنطقة الأربية شق الجلد في المنطقة المتوسطة السفلى ، وخلق شق الجلد الذي يبلغ طوله حوالي سنتيمترين.قم بتثبيت جدار البطن الأيسر بالملقط أو المبعدات واسحب الأنسجة إلى الجانب الأيسر من الماوس لتأمين المجال الجراحي. استخدم قطعة قطن لتعبئة الأمعاء الدقيقة والكبيرة إلى الجانب الأيمن من الماوس. يقع النسيج الدهني الأبيض الأيسر للبشرة في تجويف البطن في المنطقة الأربية اليسرى.تعبئة الأنسجة الدهنية البيضاء للبشرة والخصية اليسرى إلى خارج البطن وتمديد الأنسجة. استخدم ماصة صغيرة P 200 لجمع الحجم الكامل للجزر الصغيرة من أنبوب واحد سعة 1.5 ملليلتر ، مع الحرص على عدم ترك أي جزر صغيرة في الأنبوب عند التجميع. اسمح للجزر التي تم جمعها بالاستقرار في طرف الماصة عن طريق الجاذبية.ضع طرف الماصة الصغير برفق على الأنسجة الدهنية المنتفخة ، مع الحرص على منع التدفق المفرط للوسط أو المخزن المؤقت في الطرف. زرع بعناية الجزر على الأنسجة. بعد البذر ، تأكد من الموضع الصحيح للجزر تحت مجهر تشريح.قم بتغطية الجزر بالأنسجة الدهنية البيضاء للبشرة ، ثم ضع الخصية اليسرى تحت الأنسجة الدهنية البيضاء العرضية وأعد الأنسجة إلى التجويف داخل الصفاق. أغلق الجلد في طبقتين باستخدام خياطة 4-o. عند الانتهاء ، ضع الماوس تحت مصباح حراري وراقبه حتى الشفاء التام.لمقارنة فعالية زرع زرع الجزر المغطاة بالدهون مع ذلك بعد زرع جزيرة داخل الصفاق ، تم زرع نفس العدد من الجزر على الصفاق في الفضاء النظير الأيسر للحيوانات المصابة بالسكري المتلقية للسيطرة. لوحظ انخفاض مستويات الجلوكوز في الدم لدى الفئران المصابة بزراعة الجزر المغطاة بالدهون بشكل تدريجي وملحوظ مقارنة بالفئران المزروعة داخل جزيرة داخل الصفاق. تم إجراء اختبار تحمل الجلوكوز داخل الصفاق بعد شهر واحد من الزرع.تم الحفاظ على نسبة الجلوكوز في الدم في الفئران مع زرع جزيرة مغطاة بالدهون عند مستويات أقل من تلك التي لوحظت في الفئران المزروعة داخل جزيرة الصفاق. تم استخدام الفحص النسيجي لتقييم نقش الجزيرة في الأنسجة الدهنية البيضاء للبشرة. في الحيوانات المتلقية لزراعة الجزر المغطاة بالدهون ، كشف تلطيخ الهيماتوكسيلين الإيوسين عن وجود جزر داخل الأنسجة الدهنية البيضاء للبشرة.بالإضافة إلى ذلك ، سهل تلطيخ الأجسام المضادة المترافق الفلوري للجزر الإيجابية للأنسولين الكشف عن الأوعية الدقيقة الإيجابية لعامل فون ويلبراند داخل الأنسجة الدهنية البيضاء للبشرة لجميع الفئران المتلقية. للنجاح في هذا الإجراء ، تأكد من السماح للجزر بالاستقرار عند طرف الماصة تماما ، وزرعها على الأنسجة الدهنية دون انسكاب.

Research

JoVE Journal

Medicine

A Method for Murine Islet Isolation and Subcapsular Kidney Transplantation

وهناك طريقة لعزل جزيرة الفئران تحت المحفظة وزراعة الكلى

Since the early pioneering work of Ballinger and Reckard demonstrating that transplantation of islets of Langerhans into diabetic rodents could normalize ...

Transplantation of Pulmonary Valve Using a Mouse Model of Heterotopic Heart Transplantation

زرع صمام الرئوي عن طريق نموذج الفأر من غيري مكاني القلب زرع

Tissue engineered heart valves, especially decellularized valves, are starting to gain momentum in clinical use of reconstructive surgery with mixed ...

Cerenkov Luminescence Imaging of Interscapular Brown Adipose Tissue

كيرينكوف التلألؤ التصوير من الأنسجة الدهنية بين الكتفين براون

Brown adipose tissue (BAT), widely known as a &#8220;good fat&#8221; plays pivotal roles for thermogenesis in mammals. This special tissue is closely ...

Encapsulation Thermogenic Preadipocytes for Transplantation into Adipose Tissue Depots

التغليف حرارة Preadipocytes للزراعة إلى الدهنية مستودعات الأنسجة

Cell encapsulation was developed to entrap viable cells within semi-permeable membranes. The engrafted encapsulated cells can exchange low molecular ...

Creation and Transplantation of an Adipose-derived Stem Cell (ASC) Sheet in a Diabetic Wound-healing Model

Creation and Transplantation of an Adipose-derived Stem Cell ASC Sheet in a Diabetic Wound-healing Model

إنشاء وزرع للخلايا الجذعية المشتقة من الدهنية (ASC) ورقة في نموذج التئام السكري

Artificial skin has achieved considerable therapeutic results in clinical practice. However, artificial skin treatments for wounds in diabetic patients ...

Assessment of Human Adipose Tissue Microvascular Function Using Videomicroscopy

تقييم الدالة Microvascular الأنسجة الدهنية البشرية باستخدام فيديوميكروسكوبي

While obesity is closely linked to the development of metabolic and cardiovascular disease, little is known about mechanisms that govern these processes. ...

Transplantation of Adipose Tissue-Derived Stem Cell Sheet to Reduce Leakage After Partial Colectomy in A Rat Model

زرع صفحة الخلايا الجذعية المشتقة من الأنسجة الدهنية للحد من تسرب بعد Colectomy الجزئية في نموذج الفئران

Anastomotic leakage is a disastrous complication after colorectal surgery. Although current methods for leakage prevention have different levels of ...

Characterization of Immune Cells in Human Adipose Tissue by Using Flow Cytometry

تحديد خصائص الخلايا المناعية في الأنسجة الدهنية البشرية باستخدام التدفق الخلوي

Infiltration of immune cells in the subcutaneous and visceral adipose tissue (AT) deposits leads to a low-grade inflammation contributing to the ...

Whole Body and Regional Quantification of Active Human Brown Adipose Tissue Using 18F-FDG PET/CT

Whole Body and Regional Quantification of Active Human Brown Adipose Tissue Using 18F-FDG PET/CT

الجسم كله والإقليمية الكمي لنشاط الإنسان براون الأنسجة الدهنية باستخدام 18وفدج PET/CT

In endothermic animals, brown adipose tissue (BAT) is activated to produce heat for defending body temperature in response to cold. BAT&#39;s ability to ...

Inguinal Subcutaneous White Adipose Tissue (ISWAT) Transplantation Model of Murine Islets

Inguinal Subcutaneous White Adipose Tissue ISWAT Transplantation Model of Murine Islets

الاعلية الجلدية الجلدية الأنسجة الدهنية البيضاء (ISWAT) نموذج زرع الجزر المورين

Pancreatic islet transplantation is a well-established therapeutic treatment for type 1 diabetes. The kidney capsule is the most commonly used site for ...