Name: fat-covered islet transplantation using epididymal white adipose tissue
Uploaded: 2021-05-25T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Fat-Covered Islet Transplantation Using Epididymal White Adipose Tissue at JoVE.com

Bu çalışma, Japonya Eğitim, Kültür, Spor, Bilim ve Teknoloji Bakanlığı'ndan Bilimsel Araştırma için Yardım Fonu (C) (19K09839, NS) tarafından finanse edilmiştir.

Aşağıdaki yordam üç adımda gerçekleştirilir. İlk adım, alıcı farelerde diyabetin indüksiyonunu ve donör adacıklarının izolasyonunu içerir. İkinci adım, transplantasyondan önce adacıkların hazırlanmasını içerir. Üçüncü adımda epididim yağ dokusuna adacık nakli ve yağ dokusu kullanılarak adacıkların örtülmesi gerçekleştirilir. Bundan sonra, terapötik etkiler değerlendirildi. Farelerin kullanımı ve bu çalışmada gerçekleştirilen deneysel prosedürler "Laboratuvar Hayvanları...

<ol>
	<li>Barton, F. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improvement+in+outcomes+of+clinical+islet+transplantation:+1999-2010.">Improvement in outcomes of clinical islet transplantation: 1999-2010.</a> Diabetes Care. 35 (7), 1436-1445 (2012).</li><li>Balamurugan, A. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Islet+product+characteristics+and+factors+related+to+successful+human+islet+transplantation+from+the+Collaborative+Islet+Transplant+Registry+(CITR)+1999-2010.">Islet product characteristics and factors related to successful human islet transplantation from the Collaborative Islet Transplant Registry (CITR) 1999-2010.</a> American Journal of Transplantation. 14 (11), 2595-2606 (2014).</li><li>Collaborative Islet Transplant Registry. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Collaborative Islet Transplant Registry. Annual Report. , (2017).</li><li>Rajab, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Total+Pancreatectomy+and+Islet+Autotransplantation+Following+Treated+Hepatitis+C+Infection.">Total Pancreatectomy and Islet Autotransplantation Following Treated Hepatitis C Infection.</a> Cell Transplantation. 27 (10), 1569-1573 (2018).</li><li>Mellgren, A., Schnell Landstrom, A. H., Petersson, B., Andersson, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+renal+subcapsular+site+offers+better+growth+conditions+for+transplanted+mouse+pancreatic+islet+cells+than+the+liver+or+spleen.">The renal subcapsular site offers better growth conditions for transplanted mouse pancreatic islet cells than the liver or spleen.</a> Diabetologia. 29 (9), 670-672 (1986).</li><li>Hiller, W. F., Klempnauer, J., Luck, R., Steiniger, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Progressive+deterioration+of+endocrine+function+after+intraportal+but+not+kidney+subcapsular+rat+islet+transplantation.">Progressive deterioration of endocrine function after intraportal but not kidney subcapsular rat islet transplantation.</a> Diabetes. 40 (1), 134-140 (1991).</li><li>Yasunami, Y., Lacy, P. E., Finke, E. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+site+for+islet+transplantation--a+peritoneal-omental+pouch.">A new site for islet transplantation--a peritoneal-omental pouch.</a> Transplantation. 36 (2), 181-182 (1983).</li><li>Kin, T., Korbutt, G. S., Rajotte, R. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Survival+and+metabolic+function+of+syngeneic+rat+islet+grafts+transplanted+in+the+omental+pouch.">Survival and metabolic function of syngeneic rat islet grafts transplanted in the omental pouch.</a> American Journal of Transplantation. 3 (3), 281-285 (2003).</li><li>Kasoju, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bioengineering+a+pre-vascularized+pouch+for+subsequent+islet+transplantation+using+VEGF-loaded+polylactide+capsules.">Bioengineering a pre-vascularized pouch for subsequent islet transplantation using VEGF-loaded polylactide capsules.</a> Biomaterials Science. 8 (2), 631-647 (2020).</li><li>Sakata, N., Yoshimatsu, G., Kodama, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=White+Adipose+Tissue+as+a+Site+for+Islet+Transplantation.">White Adipose Tissue as a Site for Islet Transplantation.</a> Transplantology. 1 (2), 55-70 (2020).</li><li>Osama Gaber, A., Chamsuddin, A., Fraga, D., Fisher, J., Lo, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Insulin+independence+achieved+using+the+transmesenteric+approach+to+the+portal+vein+for+islet+transplantation.">Insulin independence achieved using the transmesenteric approach to the portal vein for islet transplantation.</a> Transplantation. 77 (2), 309-311 (2004).</li><li>Fujita, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Technique+of+endoscopic+biopsy+of+islet+allografts+transplanted+into+the+gastric+submucosal+space+in+pigs.">Technique of endoscopic biopsy of islet allografts transplanted into the gastric submucosal space in pigs.</a> Cell Transplantation. 22 (12), 2335-2344 (2013).</li><li>Sakata, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Strategy+for+clinical+setting+in+intramuscular+and+subcutaneous+islet+transplantation.">Strategy for clinical setting in intramuscular and subcutaneous islet transplantation.</a> Diabetes/Metabolism Research and Reviews. 30 (1), 1-10 (2014).</li><li>Cantarelli, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transplant+Site+Influences+the+Immune+Response+After+Islet+Transplantation:+Bone+Marrow+Versus+Liver.">Transplant Site Influences the Immune Response After Islet Transplantation: Bone Marrow Versus Liver.</a> Transplantation. 101 (5), 1046-1055 (2017).</li><li>White, S. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+risks+of+total+pancreatectomy+and+splenic+islet+autotransplantation.">The risks of total pancreatectomy and splenic islet autotransplantation.</a> Cell Transplantation. 9 (1), 19-24 (2000).</li><li>Itoh, T., Nishinakamura, H., Kumano, K., Takahashi, H., Kodama, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Spleen+Is+an+Ideal+Site+for+Inducing+Transplanted+Islet+Graft+Expansion+in+Mice.">The Spleen Is an Ideal Site for Inducing Transplanted Islet Graft Expansion in Mice.</a> PLoS One. 12 (1), 0170899 (2017).</li><li>Sakata, N., Yoshimatsu, G., Kodama, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Spleen+as+an+Optimal+Site+for+Islet+Transplantation+and+a+Source+of+Mesenchymal+Stem+Cells.">The Spleen as an Optimal Site for Islet Transplantation and a Source of Mesenchymal Stem Cells.</a> International Journal of Molecular Sciences. 19 (5), (2018).</li><li>Sakata, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+rat-to-mouse+bioartificial+pancreas+xenotransplantation+on+diabetic+renal+damage+and+survival.">Effect of rat-to-mouse bioartificial pancreas xenotransplantation on diabetic renal damage and survival.</a> Pancreas. 32 (3), 249-257 (2006).</li><li>Nagaya, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effectiveness+of+bioengineered+islet+cell+sheets+for+the+treatment+of+diabetes+mellitus.">Effectiveness of bioengineered islet cell sheets for the treatment of diabetes mellitus.</a> Journal of Surgical Research. 227, 119-129 (2018).</li><li>Weaver, J. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vasculogenic+hydrogel+enhances+islet+survival,+engraftment,+and+function+in+leading+extrahepatic+sites.">Vasculogenic hydrogel enhances islet survival, engraftment, and function in leading extrahepatic sites.</a> Science Advances. 3 (6), 1700184 (2017).</li><li>Dufour, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+an+ectopic+site+for+islet+transplantation,+using+biodegradable+scaffolds.">Development of an ectopic site for islet transplantation, using biodegradable scaffolds.</a> Tissue Engineering. 11 (9-10), 1323-1331 (2005).</li><li>Chen, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+epididymal+fat+pad+as+a+transplant+site+for+minimal+islet+mass.">The epididymal fat pad as a transplant site for minimal islet mass.</a> Transplantation. 84 (1), 122-125 (2007).</li><li>Sakata, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanism+of+Transplanted+Islet+Engraftment+in+Visceral+White+Adipose+Tissue.">Mechanism of Transplanted Islet Engraftment in Visceral White Adipose Tissue.</a> Transplantation. 104 (12), 2516-2527 (2020).</li><li>Navarro-Requena, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=PEG+hydrogel+containing+calcium-releasing+particles+and+mesenchymal+stromal+cells+promote+vessel+maturation.">PEG hydrogel containing calcium-releasing particles and mesenchymal stromal cells promote vessel maturation.</a> Acta Biomaterialia. 67, 53-65 (2018).</li><li>Phelps, E. A., Headen, D. M., Taylor, W. R., Thule, P. M., Garcia, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vasculogenic+bio-synthetic+hydrogel+for+enhancement+of+pancreatic+islet+engraftment+and+function+in+type+1+diabetes.">Vasculogenic bio-synthetic hydrogel for enhancement of pancreatic islet engraftment and function in type 1 diabetes.</a> Biomaterials. 34 (19), 4602-4611 (2013).</li><li>Manzoli, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunoisolation+of+murine+islet+allografts+in+vascularized+sites+through+conformal+coating+with+polyethylene+glycol.">Immunoisolation of murine islet allografts in vascularized sites through conformal coating with polyethylene glycol.</a> American Journal of Transplantation. 18 (3), 590-603 (2018).</li><li>Gotoh, M., Maki, T., Kiyoizumi, T., Satomi, S., Monaco, A. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+improved+method+for+isolation+of+mouse+pancreatic+islets.">An improved method for isolation of mouse pancreatic islets.</a> Transplantation. 40 (4), 437-438 (1985).</li><li>Brandhorst, D., Brandhorst, H., Hering, B. J., Bretzel, R. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Long-term+survival,+morphology+and+in+vitro+function+of+isolated+pig+islets+under+different+culture+conditions.">Long-term survival, morphology and in vitro function of isolated pig islets under different culture conditions.</a> Transplantation. 67 (12), 1533-1541 (1999).</li><li>Noguchi, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Low-temperature+preservation+of+isolated+islets+is+superior+to+conventional+islet+culture+before+islet+transplantation.">Low-temperature preservation of isolated islets is superior to conventional islet culture before islet transplantation.</a> Transplantation. 89 (1), 47-54 (2010).</li><li>Itoh, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Low+temperature+condition+prevents+hypoxia-induced+islet+cell+damage+and+HMGB1+release+in+a+mouse+model.">Low temperature condition prevents hypoxia-induced islet cell damage and HMGB1 release in a mouse model.</a> Cell Transplantation. 21 (7), 1361-1370 (2012).</li><li>Komatsu, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optimizing+Temperature+and+Oxygen+Supports+Long-term+Culture+of+Human+Islets.">Optimizing Temperature and Oxygen Supports Long-term Culture of Human Islets.</a> Transplantation. 103 (2), 299-306 (2019).</li><li>Unger, R. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lipid+overload+and+overflow:+metabolic+trauma+and+the+metabolic+syndrome.">Lipid overload and overflow: metabolic trauma and the metabolic syndrome.</a> Trends in Endocrinology, Metabolism. 14 (9), 398-403 (2003).</li><li>Mao, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+macroporous+heparin-releasing+silk+fibroin+scaffold+improves+islet+transplantation+outcome+by+promoting+islet+revascularisation+and+survival.">A macroporous heparin-releasing silk fibroin scaffold improves islet transplantation outcome by promoting islet revascularisation and survival.</a> Acta Biomaterialia. 59, 210-220 (2017).</li><li>Wang, K., Wang, X., Han, C. S., Chen, L. Y., Luo, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Scaffold-supported+Transplantation+of+Islets+in+the+Epididymal+Fat+Pad+of+Diabetic+Mice.">Scaffold-supported Transplantation of Islets in the Epididymal Fat Pad of Diabetic Mice.</a> Journal of Visualized Experiments. (125), e54995 (2017).</li><li>Wang, X., Wang, K., Zhang, W., Qiang, M., Luo, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+bilaminated+decellularized+scaffold+for+islet+transplantation:+Structure,+properties+and+functions+in+diabetic+mice.">A bilaminated decellularized scaffold for islet transplantation: Structure, properties and functions in diabetic mice.</a> Biomaterials. 138, 80-90 (2017).</li><li>Rios, P. D., Zhang, X., Luo, X., Shea, L. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mold-casted+non-degradable,+islet+macro-encapsulating+hydrogel+devices+for+restoration+of+normoglycemia+in+diabetic+mice.">Mold-casted non-degradable, islet macro-encapsulating hydrogel devices for restoration of normoglycemia in diabetic mice.</a> Biotechnology and Bioengineering. 113 (11), 2485-2495 (2016).</li></ol>

Yağ kaplı adacık nakli yöntemi, iki farklı nakil tekniğinden teknikler içerir: intraperitoneal adacık transplantasyonu ve intra-yağ dokusu adacık transplantasyonu. Epididim beyaz yağ dokusunun yüzey zarı, periton ile kaplanan ve epididimise bağlanan beyaz yağ dokusu olarak kabul edildiğinden, yağ kaplı adacık nakli yöntemi anatomik olarak intraperitoneal adacık transplantasyonu türü olarak kategorize edilebilir. Bununla birlikte, adacıkların alıcı hayvana teslim edildiği teknik, yağ içi doku...

Adacık transplantasyonu, şiddetli diabetes mellituslu hastalar için hücresel bir replasman tedavisidir. Son raporlar, transplantasyondan sonraki üç yıl içinde insülin bağımsızlığı oranlarının %44'e kadar iyileştiğini1 ve 600.000'den fazla toplam adacık eşdeğeri alan alıcıların yaklaşık %80'inin insülin bağımsızlığına ulaştığını göstermiştir2. Ayrıca, en son İşbirlikçi Adacık Nakli Kayıt raporunda, açlık kan şekeri seviyelerinin, tek başına adacık nakli yapılan hastaların% 70'inden fazlasında 5 yıllık bir süre boyunca 60-140 mg / dL'de tutulduğu ortaya konmuştur. Çalışma ayrıca, tek başına adacık nakli veya böbrek nakli sonrası adacık nakli yapılan hastaların yaklaşık% 90'ının 5 yıldan fazla bir süredir ciddi hipoglisemik olaylar geliştirmediğini belirlemiştir3.
Bu tedavinin klinik sonuçları iyileşiyor olsa da, optimal bir nakil bölgesi oluşturma gerekliliği de dahil olmak üzere bazı sınırlamalar hala ele alınmalıdır. Karaciğer, klinik adacık nakli için tipik bir nakil bölgesidir, çünkü yüksek hacimli adacıkları barındırabilen en büyük organdır. Bununla birlikte, bazı hastalarda karaciğer kullanılamaz (örneğin, portal hipertansiyon, hepatit ve / veya siroz4 nedeniyle) ve bu nedenle renal subkapsüler boşluk5,6, omental kese 7,8,9,10, mezenter 11, gastrointestinal sistem 12, iskelet kası 13, deri altı doku 13, kemik iliği 14 ve dalak 15 dahil olmak üzere diğer bölgeler ,16,17, alternatif nakil bölgeleri olarak kabul edilmiştir.
İntraperitoneal adacık transplantasyonu lokal anestezi altında kolaylıkla yapılabilmesine rağmen, intraperitoneal boşluğu klinik adacık nakli için cazip bir bölge haline getirse de, nakil sırasında adacıklar tüm intraperitoneal boşluğa dağılarak adacık engraftmanının saptanmasını ve başarılı engraftman doğrulamasını zorlaştırır. Bu nedenle, intraperitoneal boşluk ideal bir klinik nakil bölgesi olarak yaygın olarak tanınmamaktadır. Bunun yerine, nakledilen kapsüllenmiş18 ve biyomühendislik adacıkları19'un etkinliğini araştırmak için klinik öncesi çalışmalar için sıklıkla bir kontrol modeli olarak kullanılmaktadır. Bununla birlikte, biyomühendislik ve kontrol adacıkları arasında kesin bir karşılaştırma yapmak, doğru bir engraftman değerlendirmesi gerçekleştirmedeki zorluklar nedeniyle zordur.
Buna karşılık, omental poşet8, mezenter ve diğer ekstrahepatik lokalizasyonlarda intraperitoneal beyaz yağ dokusunun kullanımı iyi bildirilmiştir 10,20,21,22,23 ve beyaz yağ dokusu kullanılarak nakledilen biyomühendislik adacıklarının işlevini araştıran çalışmaların çoğu, umut verici terapötik sonuçlar bildirebilmiştir 20,24,25, 26. Epididim yağ dokusu kullanımı nakledilen adacıkların saptanmasını kolaylaştırdığından, intraperitoneal adacık transplantasyonunun sınırlamalarını aşmak için epididim yağ dokusunu kullanan "yağ kaplı adacık transplantasyonu yöntemi" geliştirilmiştir. Bu yazıda epididim yağ dokusu kullanılarak yağ kaplı adacık transplantasyonu anlatılmaktadır.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>4-0 Nylon</td>
			<td>Alfresa</td>
			<td>ER2004NA45-KF2</td>
			<td>Closing abdomen</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alexa 488-conjugated donkey anti-guinea pig</td>
			<td>Jackson Immunoresearch</td>
			<td>706-546-148</td>
			<td>Secondary antibody for insulin antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alexa 647-conjugated donkey anti-rabbit</td>
			<td>Jackson Immunoresearch</td>
			<td>711-606-152</td>
			<td>Secondary antibody for von Willebrand factor antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM, low glucose, pyruvate</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>11885084</td>
			<td>Culturing islets, transplanting islets</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Eosin</td>
			<td>Fujifilm Wako Chemicals</td>
			<td>051-06515</td>
			<td>Using for staining tissue by eosin</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Eppendorf Safe-Lock Tubes, 1.5 mL</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td>30120086</td>
			<td>Collecting islets&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Falcon 15 mL Conical Centrifuge Tubes</td>
			<td>Corning</td>
			<td>352095</td>
			<td>Collecting islets</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Falcon 40 &#181;m Cell Strainer</td>
			<td>Falcon</td>
			<td>352340</td>
			<td>Using for separating islets from other pancreatic tissue</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Falcon 50 mL Conical Centrifuge Tubes</td>
			<td>Corning</td>
			<td>352070</td>
			<td>Discarding excessive medium/buffer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Guinea pig anti-insulin</td>
			<td>Agilent Technologies Japan, Ltd. (Dako)</td>
			<td>IR002</td>
			<td>Primary antibody for murine insulin</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hematoxylin</td>
			<td>Muto Pure Chemicals Co., Ltd.</td>
			<td>30002</td>
			<td>Using for staining tissue by hematoxylin</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isodine solution 10%</td>
			<td>Shionogi&#38;Co., Ltd.</td>
			<td>no catalog number</td>
			<td>Using for disinfection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>Fujifilm Wako Chemicals</td>
			<td>095-06573</td>
			<td>Using for anesthesia</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Labcon 1000 &#181;L ZapSilk Low Retention Pipette Tips</td>
			<td>Labcon</td>
			<td>1177-965-008</td>
			<td>Using for separating islets from other pancreatic tissue</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Labcon 200 &#181;L ZapSilk Low Retention Pipette Tips</td>
			<td>Labcon</td>
			<td>1179-965-008</td>
			<td>Using for seeding islets onto epididymal white adipose tissue</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mintsensor</td>
			<td>Sanwa Kagaku Kenkyusho Co. Ltd.,</td>
			<td>8AEB02E</td>
			<td>Using for monitoring blood glucose</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pipetteman P-1000</td>
			<td>Gilson</td>
			<td>F123602</td>
			<td>Using for separating islets from other pancreatic tissue</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pipetteman P-200</td>
			<td>Gilson</td>
			<td>F123601</td>
			<td>Using for seeding islets onto epididymal white adipose tissue</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rabbit anti-vWF</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab6994</td>
			<td>Primary antibody for murine von Willebrand factor</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

fat-covered islet transplantation using epididymal white adipose tissue

Adacık transplantasyonu, şiddetli diabetes mellitus için hücresel bir replasman tedavisidir. İntraperitoneal boşluk tipik olarak bu prosedür için nakil bölgesidir. Bununla birlikte, intraperitoneal adacık transplantasyonunun, zayıf transplantasyon etkinliği, zor greft tespit yeteneği ve nakil sonrası analiz için greftektomi yeteneğinin eksikliği gibi bazı sınırlamaları vardır. Bu yazıda, biyomühendislik adacıklarının terapötik etkilerini değerlendirmek için epididim beyaz yağ dokusunu kullanan bir intraperitoneal adacık transplantasyonu yöntemi olan "yağ kaplı adacık transplantasyonu" kullanılmıştır. Yöntemin basitliği, adacıkların epididim beyaz yağ dokusuna tohumlanması ve dokuların adacıkları örtmek için kullanılmasında yatmaktadır. Bu yöntem intraperitoneal adacık transplantasyonu tekniği olarak sınıflandırılabilirken, intra-yağ dokusu adacık transplantasyonu ile ortak özellikler taşımaktadır. Bununla birlikte, yağ kaplı adacık transplantasyonu yöntemi, kan şekeri ve plazma insülin seviyelerinin iyileştirilmesi ve greft çıkarılması potansiyeli de dahil olmak üzere, yağ içi doku adacık transplantasyonundan daha sağlam terapötik etkiler göstermektedir. Beyaz yağ dokusuna adacık engraftmanının mekanizmalarını ve biyomühendislik adacıklarının terapötik etkilerini değerlendirmek için bu yöntemin benimsenmesini öneriyoruz.

Yağ kaplı adacık transplantasyonunun transplantasyon etkinliğini, intraperitoneal adacık transplantasyonundan sonrakiyle karşılaştırmak için, kontrol alıcısı diyabetik hayvanların sol parakolik boşluğundaki periton üzerine aynı sayıda adacık implante edildi. Yağ kaplı adacık nakli yapılan farelerin kan şekeri düzeylerinin, intraperitoneal adacık nakli yapılan farelere göre kademeli ve anlamlı olarak azaldığı gözlenmiştir (p = 0.0023; Şekil 3A). Transplanta...

Watch this Scientific Journal Video about Fat-Covered Islet Transplantation Using Epididymal White Adipose Tissue at JoVE.com

Fat-Covered Islet Transplantation Using Epididymal White Adipose Tissue

Bu yağ kaplı adacık nakli yöntemi, intraperitoneal boşlukta engrafe adacıkların tespiti için uygundur. Özellikle, biyobağlayıcı ajanların kullanılmasını veya dikiş atılmasını gerektirmez.

Epididim Beyaz Yağ Dokusu Kullanılarak Yağ Kaplı Adacık Nakli

Islet transplantation is a cellular replacement therapy for severe diabetes mellitus. The intraperitoneal cavity is typically the transplant site for this ...

Bu protokol, adacık engraftasyonunun beyaz yağ dokusuna mekanizmasını değerlendirmeyi mümkün kılar. Bu yağ kaplı adacık nakli yönteminin en büyük avantajı, teknik olarak çoğaltılmasının kolay olmasıdır. Yöntem diğer hastalık modellerine uygulanabilir.Örneğin, bir fare kanser modeli oluşturmak için kullanılabilir. Prosedürü gösteren, Fukuoka Üniversitesi'nde Doçent olan Naoaki Sakata olacak. Diseksiyon mikroskobu altında, asinar ve fibröz dokular da dahil olmak üzere pankreas sindirimlerinden ekstra adacık bileşenlerini çıkarmak için bir P 200 mikro pipet kullanın.Ardından, tek asinar hücreleri filtrelemek için bir hücre süzgeci kullanın. Filtrelenmiş adacıkları, sığır serumu veya albümin ile desteklenmiş uygun kültür ortamı veya tampon çözeltisi içeren yeni bir kültür kabına aktarın ve adacıkları merkeze yerleştirmek için çanağı döndürün. Bir P 200 mikro pipet kullanarak, tek tek adacıkları uygun bir toplama tüpüne seçin.50 mililitrelik plastik tüpün üzerine yeni bir 40 mikrometre hücre süzgeci yerleştirin. Adacıkları ve tek asinar hücreleri ayırmak üzere adacıkları süzgecin içine eklemek için 1000 mikrolitrelik bir pipet kullanın. Süzgeci, kültür ortamı veya sığır serumu veya albümin ile desteklenmiş uygun bir tampon çözeltisi içeren yeni bir 60 veya 100 mililitre boyutunda işlenmemiş kültür kabı üzerinde ters çevirmek için forseps kullanın.Adacıkları yeni bir kültür kabına yıkamak için taze ortam veya tampon kullanın, ardından kültür kabına yaklaşık 20 mililitrelik toplam hacme ulaşmak için yeterli ortam veya tampon ekleyin. Adacıkları mikroskop altında sayın ve adacık sayısını, donör hayvanların sayısına göre bireysel 1,5 mililitrelik plastik santrifüj tüpleri arasında eşit olarak bölün. Adacıkları oda sıcaklığında bir dakika boyunca 2, 100 G'de santrifüj edin ve süpernatanı atın.Yaklaşık 20 ila 30 mikrolitre artık çözelti tipik olarak tüpte kalacaktır. Enfeksiyonu önlemek için saçları karından çıkardıktan sonra fareyi sırtüstü pozisyona getirin. Karın ve kasık bölgesi dezenfekte edildikten sonra alt medyan bölgede cildi keserek yaklaşık iki santimetre uzunluğunda bir cilt kesisi oluşturur.Sol karın duvarını forseps veya retraktörlerle sıkıştırın ve cerrahi alanı sabitlemek için dokuyu farenin sol tarafına çekin. İnce ve kalın bağırsağı farenin sağ tarafına hareket ettirmek için pamuklu çubuk kullanın. Karın boşluğundaki sol epidermal beyaz yağ dokusu sol kasık bölgesinde bulunur.Epidermal beyaz yağ dokusunu ve sol testisi karın dışına doğru harekete geçirin ve dokuyu gerin. Tüm adacık hacmini 1,5 mililitrelik bir tüpten toplamak için bir P 200 mikro pipet kullanın ve toplandıktan sonra tüpte adacık kalmamasına dikkat edin. Toplanan adacıkların pipetin ucuna yerçekimi ile yerleşmesine izin verin.Mikro pipet ucunu şişmiş yağ dokusunun üzerine hafifçe yerleştirin ve uçtaki ortamın veya tamponun aşırı yıkanmasını önlemeye özen gösterin. Adacıkları dikkatlice doku üzerine tohumlayın. Tohumlamadan sonra, adacıkların diseksiyon mikroskobu altında doğru yerleştirildiğini onaylayın.Adacıkları epidermal beyaz yağ dokusu ile örtün, ardından sol testisi epizomal beyaz yağ dokusunun altına yerleştirin ve dokuları intraperitoneal boşluğa geri döndürün. 4-o dikiş kullanarak cildi iki kat halinde kapatın. İşiniz bittiğinde, fareyi bir ısı lambasının altına yerleştirin ve tamamen iyileşene kadar izleyin.Yağ kaplı adacık transplantasyonunun transplantasyon etkinliğini, intraperitoneal adacık transplantasyonundan sonrakiyle karşılaştırmak için, kontrol alıcısı diyabetik hayvanların sol parakolik boşluğundaki periton üzerine aynı sayıda adacık implante edildi. Yağ kaplı adacık nakli yapılan farelerin kan şekeri düzeylerinin, intraperitoneal adacık nakli yapılan farelere kıyasla kademeli ve anlamlı olarak azaldığı gözlenmiştir. İntraperitoneal glukoz tolerans testi transplantasyondan bir ay sonra yapıldı.Yağ kaplı adacık transplantasyonu olan farelerde kan şekeri, intraperitoneal adacık nakli yapılan farelerde gözlenenden daha düşük seviyelerde tutulmuştur. Histolojik inceleme, epidermal beyaz yağ dokusuna adacık engraftmanını değerlendirmek için kullanıldı. Yağ kaplı adacık nakli alan hayvanlarda, hematoksilin eosen boyaması, epidermal beyaz yağ dokusu içinde adacıkların varlığını ortaya koymuştur.Ek olarak, insülin pozitif adacıkların floresan konjuge antikor boyaması, tüm alıcı farelerin epidermal beyaz yağ dokusu içinde von Willebrand faktör pozitif mikro damarların saptanmasını kolaylaştırmıştır. Bu prosedürde başarılı olmak için, adacıkların pipetin ucuna tamamen yerleşmesine izin verdiğinizden emin olun ve dökülmeden yağ dokusuna tohumlayın.

Research

JoVE Journal

Medicine

A Method for Murine Islet Isolation and Subcapsular Kidney Transplantation

Murin Islet İzolasyon ve subkapsüler Böbrek Nakli Bir Yöntem

Since the early pioneering work of Ballinger and Reckard demonstrating that transplantation of islets of Langerhans into diabetic rodents could normalize ...

Transplantation of Pulmonary Valve Using a Mouse Model of Heterotopic Heart Transplantation

Heterotopik Kalp Nakli bir Fare Modeli Kullanarak Pulmoner Vana Nakli

Tissue engineered heart valves, especially decellularized valves, are starting to gain momentum in clinical use of reconstructive surgery with mixed ...

Cerenkov Luminescence Imaging of Interscapular Brown Adipose Tissue

Interskapular kahverengi adipoz dokuda arasında Çerenkov Lüminesans Görüntüleme

Brown adipose tissue (BAT), widely known as a &#8220;good fat&#8221; plays pivotal roles for thermogenesis in mammals. This special tissue is closely ...

Encapsulation Thermogenic Preadipocytes for Transplantation into Adipose Tissue Depots

Yağ Dokusu Depolarında içine Nakli Enkapsülasyon termojenik Preadipositler

Cell encapsulation was developed to entrap viable cells within semi-permeable membranes. The engrafted encapsulated cells can exchange low molecular ...

Creation and Transplantation of an Adipose-derived Stem Cell (ASC) Sheet in a Diabetic Wound-healing Model

Creation and Transplantation of an Adipose-derived Stem Cell ASC Sheet in a Diabetic Wound-healing Model

Oluşturma ve diyabetik yara iyileşmesi manken bir yağ elde edilen kök hücre (ASC) Sheet nakli

Artificial skin has achieved considerable therapeutic results in clinical practice. However, artificial skin treatments for wounds in diabetic patients ...

Assessment of Human Adipose Tissue Microvascular Function Using Videomicroscopy

İnsan yağ dokusu mikrovasküler işlevini kullanarak Videomicroscopy değerlendirilmesi

While obesity is closely linked to the development of metabolic and cardiovascular disease, little is known about mechanisms that govern these processes. ...

Transplantation of Adipose Tissue-Derived Stem Cell Sheet to Reduce Leakage After Partial Colectomy in A Rat Model

Bir sıçan modelinde kısmi kolektomi sonra kaçağı azaltmak için Yağ dokusundan elde edilen kök hücre sayfasının nakli

Anastomotic leakage is a disastrous complication after colorectal surgery. Although current methods for leakage prevention have different levels of ...

Characterization of Immune Cells in Human Adipose Tissue by Using Flow Cytometry

Akış Sitometresi kullanarak insan yağ dokusu içinde bağışıklık hücreleri karakterizasyonu

Infiltration of immune cells in the subcutaneous and visceral adipose tissue (AT) deposits leads to a low-grade inflammation contributing to the ...

Whole Body and Regional Quantification of Active Human Brown Adipose Tissue Using 18F-FDG PET/CT

Whole Body and Regional Quantification of Active Human Brown Adipose Tissue Using 18F-FDG PET/CT

18F-FDG PET/BT kullanarak yağ dokusu kahverengi tüm vücut ve bölgesel Quantification etkin insan

In endothermic animals, brown adipose tissue (BAT) is activated to produce heat for defending body temperature in response to cold. BAT&#39;s ability to ...

Inguinal Subcutaneous White Adipose Tissue (ISWAT) Transplantation Model of Murine Islets

Inguinal Subcutaneous White Adipose Tissue ISWAT Transplantation Model of Murine Islets

Inguinal Subkutan Beyaz Yağ Dokusu (ISWAT) Transplantasyon Modeli Murine Adacıkları

Pancreatic islet transplantation is a well-established therapeutic treatment for type 1 diabetes. The kidney capsule is the most commonly used site for ...