Name: fertility preservation in patients with severe ovarian dysfunction
Uploaded: 2021-03-25T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Fertility Preservation in Patients with Severe Ovarian Dysfunction at JoVE.com

We danken Tatsuji Ihana, Sachiyo Kurimoto, Kazuko Takahasih, Yuki Yoshizawa, Maho Arashi, Kentaro Fujita, Erina Kudo, Yuka Kurimoto en Mayuko Wakatsuki voor het ondersteunen van de drugsvrije IVA-procedure en prof. Aaron J.W. Hsueh (Stanford University School of Medicine, Stanford, CA) voor het kritisch lezen en bewerken van het manuscript. We danken ook Rebecca Truman en Gregory Truman voor het invoegen van Engelse vertelling. Deze studie werd ondersteund door The Japan Society for the Promotion of Science (JSPS), Scientific Research B (19H03801) en Challenging Exploratory Research (18K19624).

Schriftelijke geïnformeerde toestemming werd verkregen van elke POR-patiënt met afnemende ovariële reserve die zich inschreef voor de geneesmiddelvrije IVA-behandeling. Deze studie werd goedgekeurd door de Ethische Commissie van de Internationale Universiteit voor Gezondheid en Welzijn (Nr. 17-S-21). Klinische proef werd geregistreerd onder nummer UMIN000034464 en uitgevoerd in overeenstemming met de ethische code van de World Medical Association (Verklaring van Helsinki).
1. Ovariële cortex...

<ol>
	<li>Liang, T., Motan, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mature+Oocyte+Cryopreservation+for+Fertility+Preservation.">Mature Oocyte Cryopreservation for Fertility Preservation.</a> Advances in Experimental Medicine and Biology. 951, 155-161 (2016).</li><li>Yoon, T. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Live+births+after+vitrification+of+oocytes+in+a+stimulated+in+vitro+fertilization-embryo+transfer+program.">Live births after vitrification of oocytes in a stimulated in vitro fertilization-embryo transfer program.</a> Fertility and Sterility. 79 (6), 1323-1326 (2003).</li><li>Donnez, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Livebirth+after+orthotopic+transplantation+of+cryopreserved+ovarian+tissue.">Livebirth after orthotopic transplantation of cryopreserved ovarian tissue.</a> Lancet. 364 (9443), 1405-1410 (2004).</li><li>Meirow, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pregnancy+after+transplantation+of+cryopreserved+ovarian+tissue+in+a+patient+with+ovarian+failure+after+chemotherapy.">Pregnancy after transplantation of cryopreserved ovarian tissue in a patient with ovarian failure after chemotherapy.</a> New England Journal of Medicine. 353 (3), 318-321 (2005).</li><li>De Vos, M., Devroey, P., Fauser, B. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Primary+ovarian+insufficiency.">Primary ovarian insufficiency.</a> Lancet. 376 (9744), 911-921 (2010).</li><li>Scott, R. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Follicle-stimulating+hormone+levels+on+cycle+day+3+are+predictive+of+in+vitro+fertilization+outcome.">Follicle-stimulating hormone levels on cycle day 3 are predictive of in vitro fertilization outcome.</a> Fertility and Sterility. 51 (4), 651-654 (1989).</li><li>Ferraretti, A. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ESHRE+consensus+on+the+definition+of+'poor+response'+to+ovarian+stimulation+for+in+vitro+fertilization:+the+Bologna+criteria.">ESHRE consensus on the definition of 'poor response' to ovarian stimulation for in vitro fertilization: the Bologna criteria.</a> Human Reproduction. 26 (7), 1616-1624 (2011).</li><li>Huhtaniemi, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Advances+in+the+Molecular+Pathophysiology,+Genetics,+and+Treatment+of+Primary+Ovarian+Insufficiency.">Advances in the Molecular Pathophysiology, Genetics, and Treatment of Primary Ovarian Insufficiency.</a> Trends in Endocrinology and Metabolism. 29 (6), 400-419 (2018).</li><li>M&#281;czekalski, B., Maciejewska-Jeske, M., Podfigurna, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reproduction+in+premature+ovarian+insufficiency+patients+-+from+latest+studies+to+therapeutic+approach.">Reproduction in premature ovarian insufficiency patients - from latest studies to therapeutic approach.</a> Prz Menopauzalny. 17 (3), 117-119 (2018).</li><li>Baker, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Life+plans+and+family-building+options+for+women+with+primary+ovarian+insufficiency.">Life plans and family-building options for women with primary ovarian insufficiency.</a> Seminars in Reproductive Medicine. 29 (4), 362-372 (2011).</li><li>Englert, Y., Govaerts, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oocyte+donation:+particular+technical+and+ethical+aspects.">Oocyte donation: particular technical and ethical aspects.</a> Human Reproduction. 13, 90-97 (1998).</li><li>Englert, Y., Rodesch, C., Laruelle, C., Govoerts, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oocyte+donation:+ethical+aspects+related+to+the+donor.">Oocyte donation: ethical aspects related to the donor.</a> Contraception, Fertilite, Sexualite. 25 (3), 251-257 (1997).</li><li>Storgaard, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Obstetric+and+neonatal+complications+in+pregnancies+conceived+after+oocyte+donation:+a+systematic+review+and+meta-analysis.">Obstetric and neonatal complications in pregnancies conceived after oocyte donation: a systematic review and meta-analysis.</a> BJOG: An International Journal of Obstetrics and Gynaecology. 124 (4), 561-572 (2017).</li><li>Storgaard, M., Malchau, S., Loft, A., Larsen, E., Pinborg, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oocyte+donation+is+associated+with+an+increased+risk+of+complications+in+the+pregnant+woman+and+the+fetus.">Oocyte donation is associated with an increased risk of complications in the pregnant woman and the fetus.</a> Ugeskrift for Laeger. 179 (11), (2017).</li><li>Kawamura, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hippo+signaling+disruption+and+Akt+stimulation+of+ovarian+follicles+for+infertility+treatment.">Hippo signaling disruption and Akt stimulation of ovarian follicles for infertility treatment.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences. 110 (43), 17474-17479 (2013).</li><li>Hsueh, A. J., Kawamura, K., Cheng, Y., Fauser, B. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intraovarian+control+of+early+folliculogenesis.">Intraovarian control of early folliculogenesis.</a> Endocrine Reviews. 36 (1), 1-24 (2015).</li><li>Li, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Activation+of+dormant+ovarian+follicles+to+generate+mature+eggs.">Activation of dormant ovarian follicles to generate mature eggs.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 107 (22), 10280-10284 (2010).</li><li>Suzuki, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Successful+fertility+preservation+following+ovarian+tissue+vitrification+in+patients+with+primary+ovarian+insufficiency.">Successful fertility preservation following ovarian tissue vitrification in patients with primary ovarian insufficiency.</a> Human Reproduction. 30 (3), 608-615 (2015).</li><li>Tanaka, Y., Hsueh, A. J., Kawamura, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surgical+approaches+of+drug-free+in+activation+and+laparoscopic+ovarian+incision+to+treat+patients+with+ovarian+infertility.">Surgical approaches of drug-free in activation and laparoscopic ovarian incision to treat patients with ovarian infertility.</a> Fertility and Sterility. , (2020).</li><li>Kawamura, K., Ishizuka, B., Hsueh, A. J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Drug-free+in-vitro+activation+of+follicles+for+infertility+treatment+in+poor+ovarian+response+patients+with+decreased+ovarian+reserve.">Drug-free in-vitro activation of follicles for infertility treatment in poor ovarian response patients with decreased ovarian reserve.</a> Reproductive Biomedicine Online. 40 (2), 245-253 (2020).</li><li>Haino, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Determination+of+Follicular+Localization+in+Human+Ovarian+Cortex+for+Vitrification.">Determination of Follicular Localization in Human Ovarian Cortex for Vitrification.</a> Journal of Adolescent and Young Adult Oncology. 7 (1), 46-53 (2018).</li><li>Baird, D. T., Webb, R., Campbell, B. K., Harkness, L. M., Gosden, R. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Long-term+ovarian+function+in+sheep+after+ovariectomy+and+transplantation+of+autografts+stored+at+-196+C.">Long-term ovarian function in sheep after ovariectomy and transplantation of autografts stored at -196 C.</a> Endocrinology. 140 (1), 462-471 (1999).</li><li>Qin, Y., Jiao, X., Simpson, J. L., Chen, Z. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetics+of+primary+ovarian+insufficiency:+new+developments+and+opportunities.">Genetics of primary ovarian insufficiency: new developments and opportunities.</a> Human Reproduction Update. 21 (6), 787-808 (2015).</li><li>Domniz, N., Meirow, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Premature+ovarian+insufficiency+and+autoimmune+diseases.">Premature ovarian insufficiency and autoimmune diseases.</a> Best Practice &amp; Research: Clinical Obstetrics &amp; Gynaecology. 60, 42-55 (2019).</li><li>Laven, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Primary+Ovarian+Insufficiency.">Primary Ovarian Insufficiency.</a> Seminars in Reproductive Medicine. 34 (4), 230-234 (2016).</li><li>Grynberg, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fertility+preservation+in+Turner+syndrome.">Fertility preservation in Turner syndrome.</a> Fertility and Sterility. 105 (1), 13-19 (2016).</li><li>Tomao, F., Spinelli, G. P., Panici, P. B., Frati, L., Tomao, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ovarian+function,+reproduction+and+strategies+for+fertility+preservation+after+breast+cancer.">Ovarian function, reproduction and strategies for fertility preservation after breast cancer.</a> Critical Reviews in Oncology/Hematology. 76 (1), 1-12 (2010).</li><li>Kim, S., Lee, Y., Lee, S., Kim, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ovarian+tissue+cryopreservation+and+transplantation+in+patients+with+cancer.">Ovarian tissue cryopreservation and transplantation in patients with cancer.</a> Obstetrics &amp; Gynecology Science. 61 (4), 431-442 (2018).</li><li>Donnez, J., Dolmans, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ovarian+tissue+freezing:+current+status.">Ovarian tissue freezing: current status.</a> Current Opinion in Obstetrics and Gynecology. 27 (3), 222-230 (2015).</li><li>Wu, R. C., Kuo, P. L., Lin, S. J., Liu, C. H., Tzeng, C. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=X+chromosome+mosaicism+in+patients+with+recurrent+abortion+or+premature+ovarian+failure.">X chromosome mosaicism in patients with recurrent abortion or premature ovarian failure.</a> Journal of the Formosan Medical Association. 92 (11), 953-956 (1993).</li><li>De Munck, N., Vajta, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Safety+and+efficiency+of+oocyte+vitrification.">Safety and efficiency of oocyte vitrification.</a> Cryobiology. 78, 119-127 (2017).</li><li>Argyle, C. E., Harper, J. C., Davies, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oocyte+cryopreservation:+where+are+we+now.">Oocyte cryopreservation: where are we now.</a> Human Reproduction Update. 22 (4), 440-449 (2016).</li></ol>

In dit manuscript toonden we een gedetailleerd laboratoriumprotocol voor drugsvrije IVA. De drug-vrije IVA is een nieuwe benadering van onvruchtbaarheidsbehandeling voor POR-patiënt met afnemende ovariële reserve om secundaire follikelsgroei te bevorderen, resulterend in het opleveren van meer rijpe oöcyten na ovariële stimulatie en toenemend in succesvolle zwangerschap20. Bij 15 POR-patiënten met een afnemende ovariële reserve bereikte deze aanpak één spontane zwangerschap, in vitro bevru...

De ovariële functie neemt geleidelijk af tijdens het ouder worden en sommige pathofysiologische aandoeningen, waaronder karyotypeafwijkingen, auto-immuunziekten, chemo- en bestralingstherapieën en eierstokoperaties. Het behoud van de vruchtbaarheid is één van de beste opties voor ongehuwde vrouwen met ernstige ovariële disfunctie om hun potentieel voor toekomstige zwangerschap te bewaren. Voor vruchtbaarheidsbehoud, momenteel zijn twee methodes meestal beschikbaar op het onco-vruchtbaarheidsveld. Oöcyt cryopreservatie is een gevestigde procedure voor vruchtbaarheidsbehoud en vele succesvolle gevallen zijn gemeld1,2. Aan de andere kant werd cryopreservatie van eierstokweefsel ook vastgesteld voor vruchtbaarheidsbehoud bij kankerpatiënten, maar het is nog steeds een experimentele strategie3,4. In beide methoden zijn meerdere aantallen volwassen oöcyten nodig om zwangerschap te laten plaatsvinden. Over het algemeen vertoonden patiënten met voortijdige ovariële insufficiëntie (POI), die vóór de leeftijd van 40 jaar amenorroe worden, en vrouwen van middelbare leeftijd met een lage ovariële reserve een slechte ovariële respons (POR) op ovariële stimulatie voor het opleveren van volwassen oöcyten5,6,7. Bovendien vertoonden jonge patiënten met een laag aantal antrale follikels ook POR aan de ovariële stimulatie7. Deze patiënten hebben een zeer beperkt aantal opvraagbare oöcyten, zelfs na de juiste ovariële hyperstimulatie, waardoor meerdere dure procedures nodig zijn om een voldoende aantal oöcyten voor de zwangerschap te garanderen.
Oöcytdonatie gevolgd door in-vitrofertilisatie (IVF) met sperma- en embryotransfer (ET) van de man is de enige optie voor deze POI- en POR-patiënten die moeite hebben met het verkrijgen van hun eigen oöcyten8,9,10. Oöcytdonatie wordt echter gecompliceerd door ethische kwesties en auto-immuun - en zwangerschapscomplicaties11,12,13,14. Om deze problemen op te lossen, is de totstandbrenging van onvruchtbaarheidsbehandeling gebruikend de eigen oöcyten van patiënten gewenst. Voor POI-patiënten hebben we de in vitro activatie (IVA) benadering ontwikkeld om succesvolle follikelgroei en de generatie van volwassen oöcyten mogelijk te maken, waardoor een aantal zwangerschappen en bevallingen worden geleid15. In IVA hebben we eierstokschors gefragmenteerd na verwijdering van eierstokken onder laparoscopische chirurgie en ze twee dagen gekweekt om follikels te activeren door Akt-stimulerende geneesmiddelen en vervolgens heterotopische enting uit te voeren in kunstmatige zakjes gemaakt onder de serosa van eileiders onder tweede laparoscopische chirurgie15. Deze procedure bevorderde de groei van primordiale, primaire en secundaire follikels na fragmentatie van de eierstokschors om hippo-signaalverstoring16te bevorderen, gevolgd door twee dagen cultuur met Akt-signaleringstimulatoren17.
In tegenstelling tot ernstige POI-gevallen hebben POR-patiënten met een verminderde ovariële reserve meerdere secundaire follikels. Omdat Hippo signalering verstoring alleen effectief is in het bevorderen van secundaire follikelgroei16, hebben we onlangs succesvolle zwangerschappen en bevallingen aangetoond voor POR-patiënten die de medicijnvrije IVA-procedure gebruiken met corticale fragmentatie en orthotopische enting zonder behandeling van de Akt stimulerende geneesmiddelen. Geneesmiddelvrije IVA stimuleert het vroege stadium van eierstokfollikels om zich na slechts één operatie te ontwikkelen tot de preantrale follikelfase en verhoogde het aantal opgehaalde oöcyten voor IVF-embryotransfer15,18. De geneesmiddelvrije IVA-aanpak heeft verschillende voordelen ten opzichte van onze oorspronkelijke IVA door 1) het vermijden van potentieel follikelverlies tijdens de cultuur, 2) het minimaliseren van invasiviteit en kosten van de tweede operatie, 3) waarbij alleen korte termijn bedrust na de operatie betrokken is en 4) potentieel van spontane zwangerschap als gevolg van orthotopische enting. We hebben onlangs een videoartikel gepubliceerd met de chirurgische procedures van medicijnvrije IVA19 en gedetailleerde protocollen voor eierstokstimulatie na de operatie20. Hier presenteren we details over laboratoriummethoden die nodig zijn voor medicijnvrije IVA.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>4.5 onz specimen container</td>
			<td>FALCON</td>
			<td>354013</td>
			<td>Other products may also be suitable</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>60mm dish</td>
			<td>FALCON</td>
			<td>351007</td>
			<td>Other products may also be suitable</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>50 x 50 cm sterile drape</td>
			<td>HOGY Medical</td>
			<td>SR-823</td>
			<td>Any type of sterile produsts may also be suitable</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Disposable pippete</td>
			<td>FALCON</td>
			<td>357575</td>
			<td>Other products may also be suitable</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fine scissors, Curved</td>
			<td>WPI</td>
			<td>#14224-G</td>
			<td>Although other products may also be suitable, we strongly recommend use this products</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hot plate</td>
			<td>TOKAI HIT</td>
			<td>TPiE-SP</td>
			<td>Use at operation room to maintain the temperature of dishes containing ovarian tissue before transplantation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Human Serum Albumin Solution</td>
			<td>Irvine Scientific</td>
			<td>9988</td>
			<td>Medium for handling ovarian tissue</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>IVA cannule</td>
			<td>KITAZATO</td>
			<td>446030 IVA-6030E</td>
			<td>Specific cannula for tissue autografting</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>KAI medical Disposable scalpel</td>
			<td>WPI</td>
			<td>#5 10-A</td>
			<td>Although other products may also be suitable, we strongly recommend use this products</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro scissors, Curved</td>
			<td>WPI</td>
			<td>#503364</td>
			<td>Although other products may also be suitable, we strongly recommend use this products</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Modified HTF Medium-HEPES</td>
			<td>Irvine Scientific</td>
			<td>90126</td>
			<td>Medium for handling ovarian tissue</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile gauze</td>
			<td>Osaki Medical</td>
			<td>15004</td>
			<td>Any type of sterile produsts may also be suitable</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Swiss Tweezers, Curved Tips</td>
			<td>KAI</td>
			<td>#504505</td>
			<td>Although other products may also be suitable, we strongly recommend use this products</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

fertility preservation in patients with severe ovarian dysfunction

De ovariële functie neemt geleidelijk af tijdens het ouder worden en bij sommige pathofysiologische aandoeningen, waaronder karyotypeafwijkingen, auto-immuunziekten, chemo- en bestralingstherapieën, evenals eierstokoperaties. Bij ongehuwde vrouwen met ernstige ovariële disfunctie is vruchtbaarheidsbehoud belangrijk voor toekomstige zwangerschappen. Hoewel oöcyt cryopreservatie een gevestigde methode is voor vruchtbaarheidsbehoud, konden deze patiënten slechts een beperkt aantal oöcyten behouden, zelfs na ovariële hyperstimulatie, wat leidde tot herhaalde stimulaties om voldoende oöcyten te garanderen om toekomstige zwangerschap te garanderen. Om dit probleem op te lossen, hebben we onlangs een medicijnvrije in vitro activeringsprocedure (IVA) ontwikkeld, die ons in staat stelt om vroege stadia van eierstokfollikels te stimuleren om zich te ontwikkelen tot de preantrale follikelfase. Deze preantrale follikels kunnen reageren op het unieke protocol van gonadotropinestimulatie, wat resulteert in een verhoogd aantal opgehaalde oöcyten per ovariële stimulatie voor cryopreservatie. De geneesmiddelvrije IVA bestond uit de chirurgische aanpak en ovariële stimulatie. We verwijderden een deel van de cortex uit een of beide eierstokken van patiënten onder laparoscopische chirurgie. De ovariële corticale weefsels werden in kleine blokjes gesneden om de Hippo-signaleringsroute te verstoren en de ontwikkeling van follikels in een vroeg stadium te stimuleren. Deze kubussen werden orthotropisch geënt in resterende eierstokken en onder de serosa van beide eileiders. We hebben de chirurgische procedure van de geneesmiddelvrije IVA en het protocol van daaropvolgende eierstokstimulatie al gepubliceerd, maar hierin presenteren we de details van laboratoriummethoden die nodig zijn voor medicijnvrije IVA.

In de eerste publicatie van de IVA-benadering15hebben we de eierstokschorsblokjes één voor één getransplanteerd naar de entplaatsen onder laparoscopische chirurgie (figuur 1A). Omdat 100-150 eierstokblokjes werden gebruikt, duurde het 3-4 uur voor weefseltransplantatie onder laparoscopische chirurgie. Ook gingen sommige eierstokblokjes verloren voordat ze werden geënt. Omdat de IVA canule 20-30 kubussen in één keer naar een entplaats kon overbrengen<strong clas...

Watch this Scientific Journal Video about Fertility Preservation in Patients with Severe Ovarian Dysfunction at JoVE.com

Fertility Preservation in Patients with Severe Ovarian Dysfunction

We presenteren details over laboratoriumprocedures voor geneesmiddelvrije in-vitroactivatie (IVA) van ovariële follikels voor patiënten met ernstige ovariële disfunctie. Deze methode zou het aantal opvraagbare oöcyten per ovariële hyperstimulatie kunnen verhogen en het vruchtbaarheidsbehoud voor die patiënten ten goede komen.

Vruchtbaarheidsbehoud bij patiënten met ernstige ovariële disfunctie

Ovarian function progressively declines during aging and in some pathophysiological conditions including karyotype abnormality, autoimmune diseases, ...

Het doel van deze film is om de procedure van onze nieuwe benadering van patiënten met eierstokdisfunctie te demonstreren. Ovariële functie neemt geleidelijk af tijdens veroudering en sommige pathofysiologische aandoeningen, waaronder karyotypeafwijkingen, auto-immuunziekten, chemo- en bestralingstherapieën en eierstokoperaties. De meeste vrouwen van middelbare leeftijd met een lage ovariële reserve vertoonden een slechte ovariële respons op ovariële stimulatie voor het leveren van volwassen oöcyten.Bovendien vertoonden jonge patiënten met een laag aantal antrale follikels ook een slechte ovariële respons op de ovariële stimulatie. Het behoud van de vruchtbaarheid is belangrijk om het potentiële OCS voor toekomstige zwangerschap te bewaren. Voor vruchtbaarheidsbehoud, werd de cryopreservatie van de oöcyt gevestigd.Deze patiënten met een slechte ovariële respons konden echter een zeer beperkt aantal oöcyten ophalen, zelfs na een goede ovariële stimulatie, wat leidde tot de vereiste van herhaalde dure procedures om een voldoende aantal oöcyten te garanderen om één baby te garanderen. Om deze problemen op te lossen, hebben we onlangs de in vitro activerings-, IVA-procedure ontwikkeld, die ons in staat stelt om het vroege stadium van ovariële follikels te stimuleren om zich te ontwikkelen tot pre-antrale follikelfase. De oorspronkelijke IVA-procedure kan primordiale, primaire en secundaire follikelgroei bevorderen door fragmentatie van de eierstokschors, wat leidt tot verstoring van de hipposignalering.Dit wordt gevolgd door twee dagen cultiveren met Akt-signaalstimulator. Deze procedure is geschikt voor POI-patiënten met weinig resterende follikels. Deze procedure is echter een overmatige behandeling voor patiënten met meerdere secundaire follikels.Voor de patiënten die enkele resterende secundaire follikels hebben, hebben we de methode genaamd medicijnvrije IVA vastgesteld en hebben we al de mogelijkheid getest om secundaire follikelgroei te bevorderen door alleen de nijlpaardsignaleringsroute te verstoren. We hebben ook een aantal succesvolle gevallen van levering door drugsvrije IVA gehad. We hebben al de chirurgische procedure van de geneesmiddelvrije IVA en het protocol voor het volgen van eierstokstimulatie gepubliceerd.In deze video presenteren we de details van laboratoriummethoden die nodig zijn voor medicijnvrije IVA. We rekruteerden de patiënten voor medicijnvrije IVA op basis van de Bologna-criteria. De patiënten kunnen meerdere secundaire follikels hebben.In eerste instantie werd een deel van de cortex verwijderd uit een of beide eierstokken door laparoscopie. POR-patiënten zijn degenen die middelgrote eierstokken hadden. Bij de meeste patiënten haalden we slechts een deel van de corticale weefsels uit de eierstokken aan één of beide zijden.Geëxtraheerde kritieke weefsels werden onmiddellijk overgebracht naar een kweekschaal met kweekmedium met HEPES-buffer en ontleedden dit kleine weefsel in kleine blokjes voor verstoring van de nijlpaardsignalering. Details van de procedure worden in deze video getoond. Hippo signaleringsroute is essentieel om een optimale orgaangrootte te behouden.Dit traject bestaat uit verschillende negatieve groeiregulatoren. Zodra de nijlpaardsignalering is verstoord, worden de fosforyleringsniveaus van YAP, een van de negatieve groeiregulatoren die in een kinasecascade werken, verlaagd en worden de nucleaire niveaus van YAP verhoogd. YAP werkt samen met TEAD transcriptiefactoren om de downstream CCN-groeifactor te verhogen.Aan de andere kant is actinepolymerisatie van bolvormig acteren, G-actine, tot de filamenteuze vorm, F-actine, belangrijk voor het onderhoud en de voortbeweging van de celvorm. Eerder gemelde inductie van F-actinevorming verstoort nijlpaardsignalering en veroorzaakt overgroei in menselijke HeLa-cellen. We meldden eerder dat ovariële fragmentatie de vorming van F-actine verhoogt, en het leidt tot de afname van het fosforyleringsniveau van YAP.Het leidt tot een verhoogde expressie van ccn groeifactor. Na het snijden worden deze kubussen geënt in de resterende eierstok. Deze procedure kan de resterende secundaire follikelgroei bevorderen en leiden tot een verhoogd aantal gerijpte oöcyt.Drugsvrije IVA bestaat uit vier stappen. We hebben de chirurgische procedure voor medicijnvrije IVA al gepubliceerd. Raadpleeg die literatuur voor ovariële cortexextractie en auto-enting.Hier laten we de gedetailleerde procedures zien van laboratoriummethoden die nodig zijn voor medicijnvrije IVA. In stap één laten we zien hoe eierstokschorsfragmentatie wordt uitgevoerd. In stap twee laten we zien hoe we de eierstok corticale kubussen in het apparaat kunnen laden voor transplantatie, Hier zal ik fragmentatie van de eierstokschors laten zien.Deze studie werd goedgekeurd door de ethische commissie van ons instituut en alle procedures werden uitgevoerd in overeenstemming met de Ethische Code van de World Medical Association. Fragmentatie van de eierstokschors. De volgende gereedschappen die nodig zijn voor deze stap: een schaal, steriel gaas, fijne schaar, fijne tang en scalpel.We gebruiken meestal dit type schaal en steriel gaas, maar andere producten zoals plastic petrischaal, glazen schaal, enzovoort, kunnen ook geschikt zijn voor deze procedure, en elk type steriel gaas is ook geschikt. We raden echter ten zeerste het gebruik van deze vorm van tang en scalpel aan. Gebruik bovendien de hete plaat voor het handhaven van de temperatuur van de gerechten die weefsels bevatten Plaats onder het steriele laken.Corticale weefsels worden onmiddellijk overgebracht naar de schaal met mHTF. Maak een foto met de naam van de patiënt om te correleren met de gegevens van de patiënt. Noteer de grootte, dikte en conditie van het weefsel.Verwijder restpapier van medulla. Verwijder vóór weefselfragmentatie het medullaweefsel. Leg de cortex op het steriele gaas.Zoals te zien is in de video, wordt het gaas bevochtigd met medium. Breng tijdens deze procedure medium aan met een wegwerppipet voordat het oppervlak van de cortex is uitgedroogd. Verwijder restweefsels met een microschaar tot de dikte één tot twee millimeter bereikt.Bij POR-patiënten bevinden secundaire follikels zich dieper dan een millimeter van het cortexoppervlak, dus maak de weefsels niet minder dan een millimeter dik. Snijd één kant van de cortex van elk weefsel in een strook van één bij vijf millimeter voor histologische analyse om de aanwezigheid van resterende follikels te bepalen. Doe deze strip in een buis van 1,5 milliliter met kweekmedium en houd deze tot het bevestigen op vier graden Celsius.Bereiding van eierstok corticale kubussen. Na verwijdering van medullaweefsel is eierstokschors gefragmenteerd voor verstoring van de nijlpaardsignalering. Snijd eerst de cortex één voor één in stroken van 10 millimeter met scalpel.Snijd deze stroken vervolgens in kleine blokjes van één millimeter. In het medium is het weefsel glad en moeilijk te snijden. Voor eenvoudig snijden snijdt u de stroken door op de scalpel te drukken in plaats van eraan te trekken.Tel na het snijden het aantal kubussen en bereid het automatisch enten voor. Om de veranderingen van osmotische druk in het medium te voorkomen, voegt u het medium met mate toe voordat u het weefsel automatisch ent. Voor eierstok auto-enting, het gebruik van een canule-vormige apparaat zorgt voor gemakkelijker laden.Deze stap bevat twee stappen. Voorheen werden eierstokfragmenten één voor één getransplanteerd met behulp van een tang onder laparoscopie. Het duurde echter ongeveer drie tot vier uur voordat de operatie was voltooid.In deze procedure gebruiken we een cannulair apparaat gemaakt van een binnenspuit en een buitencilinder. Dit is een eenvoudige vorm en lichtgewicht. Bovendien heeft de punt van dit apparaat een ronde vorm.Er zijn geen scherpe punten die schade aan de transplantatieplaats voorkomen. Met dit type apparaat kunnen tot 20 tot 30 kubussen tegelijk naar de implantatieplaats worden gebracht. Dit leidt tot een efficiënte transplantatie en verkorting van de operatietijd.Het laden van ovariële corticale fragmenten. Bereiding van IVA canule. Bereid de IVA canule voor en was dit apparaat in mHTF.Herhaal aspirate en lossing medium meerdere malen. Vul de punt van een cannulair door ongeveer 100 microliter van het medium te aspireren. Dit om te voorkomen dat de kubussen eruit trekken tijdens het laden van weefselfragmenten.Corticale kubussen laden. Pluk een kubus met een fijne tang en doe deze in de punt van de cannul. Het aantal automatisch geënt kubussen hangt af van de grootte van de transplantatieplaats.Herhaal het één voor één laden van de kubussen totdat u het doelnummer hebt bereikt. Geef de canule na het laden van de kubussen zorgvuldig door aan de chirurg. Als de entplaats nog niet klaar is, moet het deel van de cannul dat ovariële kubussen bevat, door vingers worden vastgehouden om een daling van de temperatuur van kubussen te voorkomen.We hebben de klinische resultaten van geneesmiddelvrije IVA al gerapporteerd. Raadpleeg het gepubliceerde artikel over klinische resultaten. Dit laboratoriumprotocol vereiste 30 tot 50 minuten voor één patiënt.De gemiddelde tijd is voor 10 tot 20 minuten voor fragmentatie van de eierstokschors en 20 tot 30 minuten voor het laden van deze fragmenten op IVA-canule. Dit hangt af van de weefselgrootte, maar bijna alle patiënten kunnen in deze gemiddelde tijd worden voltooid. Conclusies. Geneesmiddelvrije IVA is een nieuwe benadering van onvruchtbaarheidsbehandeling voor POR-patiënten met een afnemende ovariële reserve.Dit laboratoriumprotocol leidt tot een vermindering van zowel de tijd die nodig is voor een operatie als het verlies van fragmenten tijdens de transplantatie. De laboratoriumtechniek van geneesmiddelvrije IVA zou de basis kunnen worden voor toekomstige toepassing van eierstokweefselkweek om volwassen oöcyten te verkrijgen zonder te enten.

Research

JoVE Journal

Medicine

A Contusion Model of Severe Spinal Cord Injury in Rats

Een Kneuzing Model van Severe ruggenmergletsel bij ratten

The translational potential of novel treatments should be investigated in severe spinal cord injury (SCI) contusion models. A detailed methodology is ...

Computerized Dynamic Posturography for Postural Control Assessment in Patients with Intermittent Claudication

Computerized dynamic posturography with the EquiTest is an objective technique for measuring postural strategies under challenging static and dynamic ...

Assessment of Vascular Function in Patients With Chronic Kidney Disease

Evaluatie van de vaatfunctie bij patiënten met chronische nierziekte

Patients with chronic kidney disease (CKD) have significantly increased risk of cardiovascular disease (CVD) compared to the general population, and this ...

Functional Human Liver Preservation and Recovery by Means of Subnormothermic Machine Perfusion

Functionele menselijke lever behoud en herstel door middel van Subnormothermic Machine perfusie

There is currently a severe shortage of liver grafts available for transplantation.  Novel organ preservation techniques are needed to expand the pool of ...

Introduction of Intracapsular Rotary-cut Procedures (IRCP): A Modified Hysteromyomectomy Procedures Facilitating Fertility Preservation

Introduction of Intracapsular Rotary-cut Procedures IRCP: A Modified Hysteromyomectomy Procedures Facilitating Fertility Preservation

Invoering van Intracapsular Rotary-cut Procedures (IRCP): A bewerkt Hysteromyomectomy Procedures vergemakkelijken van behoud van de vruchtbaarheid

Uterine fibroids are common benign tumors in the female reproductive system. A hysterectomy is the most effective treatment for symptomatic fibroids. For ...

Semi-quantitative Assessment Using [18F]FDG Tracer in Patients with Severe Brain Injury

Semi-quantitative Assessment Using [18F]FDG Tracer in Patients with Severe Brain Injury

Semi-kwantitatieve beoordeling [18F] FDG Tracer gebruiken bij patiënten met ernstige hersenletsel

Patients with severe traumatic brain injury (sTBI) have difficulty knowing whether they are accurately expressing their thoughts and emotions because of ...

Sodium Taurocholate Induced Severe Acute Pancreatitis in C57BL/6 Mice

Natrium taurocholaat geïnduceerde ernstige acute pancreatitis bij C57BL/6 muizen

Biliary acute pancreatitis induction by sodium taurocholate infusion has been widely used by the scientific community due to the representation of the ...

Digital Handwriting Analysis of Characters in Chinese Patients with Mild Cognitive Impairment

Digitale handschriftanalyse van karakters bij Chinese patiënten met milde cognitieve stoornissen

An increasing amount of evidence shows that cognitive deficits and movement dysfunctions are not separated. Patients with mild cognitive impairment (MCI) ...

Fertility Preservation Through Oocyte Vitrification: Clinical and Laboratory Perspectives

Vruchtbaarheidsbehoud door oöcyt vitrificatie: klinische en laboratoriumperspectieven

Preserving female fertility is crucial in a multifunctional healthcare system that takes care of patients' future quality of life. Oocyte cryopreservation ...

Fertility Sparing Procedure using Carbon Dioxide Fiber Laser Vaporization of Ovarian Endometrioma

Vruchtbaarheidssparende procedure met behulp van koolstofdioxidevezellaserverdamping van ovarium-endometrioom

The surgical management of endometrioma is still a matter of debate. Cystectomy, which is recognized as the standard technique, seems to be associated ...