Name: fertility preservation in patients with severe ovarian dysfunction
Uploaded: 2021-03-25T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Fertility Preservation in Patients with Severe Ovarian Dysfunction at JoVE.com

אנו מודים לטאטסוג'י איהאנה, סאצ'יו קורימוטו, קזוקו טקהאסיה, יוקי יושיזאווה, מאהו אראשי, קנטארו פוג'יטה, ארינה קודו, יוקה קורימוטו ומאיוקו וואקאצוקי על תמיכתם בהליך IVA ללא סמים ופרופ' אהרון ג'יי.וו הסוה (בית הספר לרפואה של אוניברסיטת סטנפורד, סטנפורד, קליפורניה) על קריאה ועריכה ביקורתית של כתב היד. אנו מודים גם לרבקה טרומן וגרגורי טרומן על שהכניסו קריינות אנגלית. מחקר זה נתמך על ידי האגודה היפנית לקידום המדע (JSPS), מחקר מדעי B (19H03801) ומחקר גישוש מאתגר (18K19624).

הסכמה מדעת בכתב התקבלה מכל חולה POR עם רזרבת שחלות פוחתת שנרשם לטיפול IVA ללא סמים. מחקר זה אושר על ידי הוועדה האתית של האוניברסיטה הבינלאומית לבריאות ורווחה (מס ' 17-S-21). הניסוי הקליני נרשם תחת מספר UMIN000034464 ובוצע בהתאם לקוד האתיקה של ההסתדרות הרפואית העולמית (הצהרת הלסינקי).
1. מיצו...

<ol>
	<li>Liang, T., Motan, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mature+Oocyte+Cryopreservation+for+Fertility+Preservation.">Mature Oocyte Cryopreservation for Fertility Preservation.</a> Advances in Experimental Medicine and Biology. 951, 155-161 (2016).</li><li>Yoon, T. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Live+births+after+vitrification+of+oocytes+in+a+stimulated+in+vitro+fertilization-embryo+transfer+program.">Live births after vitrification of oocytes in a stimulated in vitro fertilization-embryo transfer program.</a> Fertility and Sterility. 79 (6), 1323-1326 (2003).</li><li>Donnez, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Livebirth+after+orthotopic+transplantation+of+cryopreserved+ovarian+tissue.">Livebirth after orthotopic transplantation of cryopreserved ovarian tissue.</a> Lancet. 364 (9443), 1405-1410 (2004).</li><li>Meirow, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pregnancy+after+transplantation+of+cryopreserved+ovarian+tissue+in+a+patient+with+ovarian+failure+after+chemotherapy.">Pregnancy after transplantation of cryopreserved ovarian tissue in a patient with ovarian failure after chemotherapy.</a> New England Journal of Medicine. 353 (3), 318-321 (2005).</li><li>De Vos, M., Devroey, P., Fauser, B. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Primary+ovarian+insufficiency.">Primary ovarian insufficiency.</a> Lancet. 376 (9744), 911-921 (2010).</li><li>Scott, R. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Follicle-stimulating+hormone+levels+on+cycle+day+3+are+predictive+of+in+vitro+fertilization+outcome.">Follicle-stimulating hormone levels on cycle day 3 are predictive of in vitro fertilization outcome.</a> Fertility and Sterility. 51 (4), 651-654 (1989).</li><li>Ferraretti, A. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ESHRE+consensus+on+the+definition+of+'poor+response'+to+ovarian+stimulation+for+in+vitro+fertilization:+the+Bologna+criteria.">ESHRE consensus on the definition of 'poor response' to ovarian stimulation for in vitro fertilization: the Bologna criteria.</a> Human Reproduction. 26 (7), 1616-1624 (2011).</li><li>Huhtaniemi, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Advances+in+the+Molecular+Pathophysiology,+Genetics,+and+Treatment+of+Primary+Ovarian+Insufficiency.">Advances in the Molecular Pathophysiology, Genetics, and Treatment of Primary Ovarian Insufficiency.</a> Trends in Endocrinology and Metabolism. 29 (6), 400-419 (2018).</li><li>M&#281;czekalski, B., Maciejewska-Jeske, M., Podfigurna, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reproduction+in+premature+ovarian+insufficiency+patients+-+from+latest+studies+to+therapeutic+approach.">Reproduction in premature ovarian insufficiency patients - from latest studies to therapeutic approach.</a> Prz Menopauzalny. 17 (3), 117-119 (2018).</li><li>Baker, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Life+plans+and+family-building+options+for+women+with+primary+ovarian+insufficiency.">Life plans and family-building options for women with primary ovarian insufficiency.</a> Seminars in Reproductive Medicine. 29 (4), 362-372 (2011).</li><li>Englert, Y., Govaerts, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oocyte+donation:+particular+technical+and+ethical+aspects.">Oocyte donation: particular technical and ethical aspects.</a> Human Reproduction. 13, 90-97 (1998).</li><li>Englert, Y., Rodesch, C., Laruelle, C., Govoerts, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oocyte+donation:+ethical+aspects+related+to+the+donor.">Oocyte donation: ethical aspects related to the donor.</a> Contraception, Fertilite, Sexualite. 25 (3), 251-257 (1997).</li><li>Storgaard, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Obstetric+and+neonatal+complications+in+pregnancies+conceived+after+oocyte+donation:+a+systematic+review+and+meta-analysis.">Obstetric and neonatal complications in pregnancies conceived after oocyte donation: a systematic review and meta-analysis.</a> BJOG: An International Journal of Obstetrics and Gynaecology. 124 (4), 561-572 (2017).</li><li>Storgaard, M., Malchau, S., Loft, A., Larsen, E., Pinborg, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oocyte+donation+is+associated+with+an+increased+risk+of+complications+in+the+pregnant+woman+and+the+fetus.">Oocyte donation is associated with an increased risk of complications in the pregnant woman and the fetus.</a> Ugeskrift for Laeger. 179 (11), (2017).</li><li>Kawamura, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hippo+signaling+disruption+and+Akt+stimulation+of+ovarian+follicles+for+infertility+treatment.">Hippo signaling disruption and Akt stimulation of ovarian follicles for infertility treatment.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences. 110 (43), 17474-17479 (2013).</li><li>Hsueh, A. J., Kawamura, K., Cheng, Y., Fauser, B. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intraovarian+control+of+early+folliculogenesis.">Intraovarian control of early folliculogenesis.</a> Endocrine Reviews. 36 (1), 1-24 (2015).</li><li>Li, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Activation+of+dormant+ovarian+follicles+to+generate+mature+eggs.">Activation of dormant ovarian follicles to generate mature eggs.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 107 (22), 10280-10284 (2010).</li><li>Suzuki, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Successful+fertility+preservation+following+ovarian+tissue+vitrification+in+patients+with+primary+ovarian+insufficiency.">Successful fertility preservation following ovarian tissue vitrification in patients with primary ovarian insufficiency.</a> Human Reproduction. 30 (3), 608-615 (2015).</li><li>Tanaka, Y., Hsueh, A. J., Kawamura, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surgical+approaches+of+drug-free+in+activation+and+laparoscopic+ovarian+incision+to+treat+patients+with+ovarian+infertility.">Surgical approaches of drug-free in activation and laparoscopic ovarian incision to treat patients with ovarian infertility.</a> Fertility and Sterility. , (2020).</li><li>Kawamura, K., Ishizuka, B., Hsueh, A. J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Drug-free+in-vitro+activation+of+follicles+for+infertility+treatment+in+poor+ovarian+response+patients+with+decreased+ovarian+reserve.">Drug-free in-vitro activation of follicles for infertility treatment in poor ovarian response patients with decreased ovarian reserve.</a> Reproductive Biomedicine Online. 40 (2), 245-253 (2020).</li><li>Haino, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Determination+of+Follicular+Localization+in+Human+Ovarian+Cortex+for+Vitrification.">Determination of Follicular Localization in Human Ovarian Cortex for Vitrification.</a> Journal of Adolescent and Young Adult Oncology. 7 (1), 46-53 (2018).</li><li>Baird, D. T., Webb, R., Campbell, B. K., Harkness, L. M., Gosden, R. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Long-term+ovarian+function+in+sheep+after+ovariectomy+and+transplantation+of+autografts+stored+at+-196+C.">Long-term ovarian function in sheep after ovariectomy and transplantation of autografts stored at -196 C.</a> Endocrinology. 140 (1), 462-471 (1999).</li><li>Qin, Y., Jiao, X., Simpson, J. L., Chen, Z. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetics+of+primary+ovarian+insufficiency:+new+developments+and+opportunities.">Genetics of primary ovarian insufficiency: new developments and opportunities.</a> Human Reproduction Update. 21 (6), 787-808 (2015).</li><li>Domniz, N., Meirow, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Premature+ovarian+insufficiency+and+autoimmune+diseases.">Premature ovarian insufficiency and autoimmune diseases.</a> Best Practice &amp; Research: Clinical Obstetrics &amp; Gynaecology. 60, 42-55 (2019).</li><li>Laven, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Primary+Ovarian+Insufficiency.">Primary Ovarian Insufficiency.</a> Seminars in Reproductive Medicine. 34 (4), 230-234 (2016).</li><li>Grynberg, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fertility+preservation+in+Turner+syndrome.">Fertility preservation in Turner syndrome.</a> Fertility and Sterility. 105 (1), 13-19 (2016).</li><li>Tomao, F., Spinelli, G. P., Panici, P. B., Frati, L., Tomao, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ovarian+function,+reproduction+and+strategies+for+fertility+preservation+after+breast+cancer.">Ovarian function, reproduction and strategies for fertility preservation after breast cancer.</a> Critical Reviews in Oncology/Hematology. 76 (1), 1-12 (2010).</li><li>Kim, S., Lee, Y., Lee, S., Kim, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ovarian+tissue+cryopreservation+and+transplantation+in+patients+with+cancer.">Ovarian tissue cryopreservation and transplantation in patients with cancer.</a> Obstetrics &amp; Gynecology Science. 61 (4), 431-442 (2018).</li><li>Donnez, J., Dolmans, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ovarian+tissue+freezing:+current+status.">Ovarian tissue freezing: current status.</a> Current Opinion in Obstetrics and Gynecology. 27 (3), 222-230 (2015).</li><li>Wu, R. C., Kuo, P. L., Lin, S. J., Liu, C. H., Tzeng, C. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=X+chromosome+mosaicism+in+patients+with+recurrent+abortion+or+premature+ovarian+failure.">X chromosome mosaicism in patients with recurrent abortion or premature ovarian failure.</a> Journal of the Formosan Medical Association. 92 (11), 953-956 (1993).</li><li>De Munck, N., Vajta, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Safety+and+efficiency+of+oocyte+vitrification.">Safety and efficiency of oocyte vitrification.</a> Cryobiology. 78, 119-127 (2017).</li><li>Argyle, C. E., Harper, J. C., Davies, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oocyte+cryopreservation:+where+are+we+now.">Oocyte cryopreservation: where are we now.</a> Human Reproduction Update. 22 (4), 440-449 (2016).</li></ol>

בכתב יד זה, הראינו פרוטוקול מעבדה מפורט עבור IVA ללא סמים. IVA ללא סמים היא גישה חדשה של טיפול פוריות עבור חולה POR עם ירידה בשחלות מילואים כדי לקדם צמיחה זקיקים משניים, וכתוצאה מכך מניב ביציות בוגרות יותר לאחר גירוי השחלות וגדל בהריון מוצלח20. ב 15 חולי POR עם רזרבת השחלות פוחתת, גישה ז...

תפקוד השחלות יורד בהדרגה במהלך ההזדקנות וכמה מצבים פתופיזיולוגיים כולל חריגות קריוטיפיות, מחלות אוטואימוניות, טיפולי כימותרפיה והקרנות וניתוחי שחלות. שימור פוריות היא אחת האפשרויות הטובות ביותר עבור נשים לא נשואות עם תפקוד לקוי של השחלות חמורות כדי לשמר את הפוטנציאל שלהם להריון בעתיד. לשימור פוריות, כיום שתי שיטות זמינות בעיקר בתחום אונקו-פוריות. Oocyte cryopreservation הוא הליך מבוסס היטב לשימור פוריות ומקרים מוצלחים רבים דווחו1,2. מצד שני, cryopreservation רקמת השחלות הוקמה גם לשימור פוריות בחולי סרטן אבל זה עדיין אסטרטגיה ניסיונית3,4. בשתי השיטות, מספר רב של ביציות בוגרות נדרשים כדי שההריון יתרחש. בדרך כלל, חולים עם אי ספיקת שחלות מוקדמת (POI), אשר הופכים אמנוריאה לפני גיל 40, ונשים בגיל העמידה עם רזרבה השחלות נמוכה הראו תגובה השחלות עניים (POR) כדי גירוי השחלות להניב ביציות בוגרות5,6,7. יתר על כן, חולים צעירים עם מספר נמוך של זקיקים antral הראו גם POR לגירוי השחלות7. חולים אלה יש מספר מוגבל מאוד של ביציות לאחזור גם לאחר hyperstimulation השחלות הנכון, ובכך דורש הליכים יקרים מרובים כדי להבטיח מספר מספיק של ביציות להריון.
תרומת ביצית ואחריה הפריה חוץ גופית (הפריה חוץ גופית) עם הזרע של הבעל והעברת עוברים (ET) היא האפשרות היחידה עבור חולי POI ו- POR אלה המתקשים להשיג ביציות משלהם8,9,10. עם זאת, תרומת ביצית מסובכת על ידי בעיות אתיות, כמו גם סיבוכים אוטואימוניים והריון11,12,13,14. כדי לפתור בעיות אלה, הקמת טיפול פוריות באמצעות ביציות של המטופלים עצמו רצוי. עבור חולי POI, פיתחנו את הגישה להפעלה במבחנה (IVA) כדי לאפשר צמיחה מוצלחת של זקיקים ויצירת ביציות בוגרות, המוביל מספר הריונות ומשלוחים15. ב- IVA, פיצלנו את קליפות השחלות לאחר הסרת השחלות בניתוח לפרוסקופי ותרביתנו אותן במשך יומיים כדי להפעיל זקיקים על ידי תרופות מגרה אקט ולאחר מכן לבצע השתלה הטרוטופית בחזרה לתוך שקיות מלאכותיות שנעשו מתחת לסרוסה של חצוצרות תחת ניתוח לפרוסקופי שני15. הליך זה קידם צמיחה של זקיקים ראשוניים, ראשוניים ומשניים לאחר פיצול קליפת המוח השחלתית כדי לקדם את שיבוש איתות היפו16, ואחריו יומיים תרבות עם Akt איתות גירויים17.
בניגוד למקרי POI חמורים, חולי POR עם ירידה בשחלות מילואים יש זקיקים משניים מרובים. מכיוון שהפרעה באיתות היפו לבדה יעילה בקידום צמיחת זקיקמשנית 16, הדגמנו לאחרונה הריונות ומשלוחים מוצלחים לחולי POR באמצעות הליך IVA ללא סמים הכולל פיצול קליפת המוח והשתלה אורתוטופית ללא טיפול בתרופות מגרה Akt. IVA ללא סמים מגרה שלב מוקדם של זקיקי השחלות להתפתח לשלב הזקיק preantral לאחר ניתוח אחד בלבד והגדיל את מספר הביציות שאוחזרו עבור העברת הפריה חוץ גופית-עובר15,18. הגישה IVA ללא סמים יש מספר יתרונות לעומת IVA המקורי שלנו על ידי 1) הימנעות אובדן זקיק פוטנציאלי במהלך התרבות, 2) מזעור פולשנות ועלויות של הניתוח השני, 3) מעורבים רק לטווח קצר לאחר הניתוח מנוחה במיטה ו 4) פוטנציאל של הריון ספונטני עקב השתלה אורתוטופית. לאחרונה פרסמנו מאמר וידאו המציג את ההליכים הכירורגיים של IVA ללא סמים19 ופרוטוקולים מפורטים של גירוי השחלות לאחר הניתוח20. כאן, אנו מציגים פרטים של שיטות מעבדה הנדרשות עבור IVA ללא סמים.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>4.5 onz specimen container</td>
			<td>FALCON</td>
			<td>354013</td>
			<td>Other products may also be suitable</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>60mm dish</td>
			<td>FALCON</td>
			<td>351007</td>
			<td>Other products may also be suitable</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>50 x 50 cm sterile drape</td>
			<td>HOGY Medical</td>
			<td>SR-823</td>
			<td>Any type of sterile produsts may also be suitable</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Disposable pippete</td>
			<td>FALCON</td>
			<td>357575</td>
			<td>Other products may also be suitable</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fine scissors, Curved</td>
			<td>WPI</td>
			<td>#14224-G</td>
			<td>Although other products may also be suitable, we strongly recommend use this products</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hot plate</td>
			<td>TOKAI HIT</td>
			<td>TPiE-SP</td>
			<td>Use at operation room to maintain the temperature of dishes containing ovarian tissue before transplantation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Human Serum Albumin Solution</td>
			<td>Irvine Scientific</td>
			<td>9988</td>
			<td>Medium for handling ovarian tissue</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>IVA cannule</td>
			<td>KITAZATO</td>
			<td>446030 IVA-6030E</td>
			<td>Specific cannula for tissue autografting</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>KAI medical Disposable scalpel</td>
			<td>WPI</td>
			<td>#5 10-A</td>
			<td>Although other products may also be suitable, we strongly recommend use this products</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro scissors, Curved</td>
			<td>WPI</td>
			<td>#503364</td>
			<td>Although other products may also be suitable, we strongly recommend use this products</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Modified HTF Medium-HEPES</td>
			<td>Irvine Scientific</td>
			<td>90126</td>
			<td>Medium for handling ovarian tissue</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile gauze</td>
			<td>Osaki Medical</td>
			<td>15004</td>
			<td>Any type of sterile produsts may also be suitable</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Swiss Tweezers, Curved Tips</td>
			<td>KAI</td>
			<td>#504505</td>
			<td>Although other products may also be suitable, we strongly recommend use this products</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

fertility preservation in patients with severe ovarian dysfunction

תפקוד השחלות יורד בהדרגה במהלך ההזדקנות ובתנאים פתופיזיולוגיים מסוימים כולל חריגות קריוטיפיות, מחלות אוטואימוניות, טיפולי כימותרפיה והקרנות, כמו גם ניתוחי שחלות. אצל נשים לא נשואות עם תפקוד לקוי של השחלות חמורות, שימור פוריות חשוב עבור הריונות עתידיים. למרות ההקפאה ביצית היא שיטה הוקמה לשימור פוריות, חולים אלה יכולים רק לשמר מספר מוגבל של ביציות גם לאחר גירוי יתר השחלות, המוביל גירויים חוזרים ונשנים כדי להבטיח מספיק ביציות כדי להבטיח הריון בעתיד. כדי לפתור בעיה זו, פיתחנו לאחרונה הליך הפעלה במבחנה ללא סמים (IVA), המאפשרים לנו לעורר שלבים מוקדמים של זקיקי השחלות להתפתח לשלב הזקיק preantral. זקיקים טרום-אנליטיים אלה יכולים להגיב לפרוטוקול הייחודי של גירוי גונדוטרופין, וכתוצאה מכך מספר מוגבר של ביציות מאוחזרות לכל גירוי השחלות עבור cryopreservation. IVA ללא סמים מורכב הגישה הכירורגית וגירוי השחלות. הסרנו חלק מקליפת המוח מהשחלה אחת או משתיהן מחולים שעברו ניתוח לפרוסקופי. רקמות קליפת המוח השחלות נחתכו לקוביות קטנות כדי לשבש את מסלול איתות היפו ולעורר את התפתחות זקיקים בשלב מוקדם. קוביות אלה הושתלו אורתוטרופית לתוך השחלות הנותרות, כמו גם מתחת לסרוסה של שתי החצוצרות. כבר פרסמנו את ההליך הכירורגי של IVA ללא סמים ואת הפרוטוקול של גירוי השחלות הבאים, אבל בזאת אנו מציגים את הפרטים של שיטות מעבדה הנדרשות עבור IVA ללא סמים.

בפרסום הראשון של גישהIVA 15, השתלנו את קוביות קליפת המוח השחלות בזה אחר זה לתוך אתרי השתלה תחת ניתוח לפרוסקופי (איור 1A). בגלל 100-150 קוביות השחלות שימשו, זה לקח 3-4 שעות להשתיל רקמה תחת ניתוח לפרוסקופי. כמו כן, כמה קוביות השחלות אבדו לפני השתלה. מכיוון שהקנולה של IVA יכול...

Watch this Scientific Journal Video about Fertility Preservation in Patients with Severe Ovarian Dysfunction at JoVE.com

Fertility Preservation in Patients with Severe Ovarian Dysfunction

אנו מציגים פרטים של נהלי מעבדה להפעלה במבחנה ללא סמים (IVA) של זקיקי השחלות לחולים עם תפקוד לקוי של השחלות חמורות. שיטה זו יכולה להגדיל את מספר ביציות לאחזור לכל hyperstimulation השחלות לטובת שימור פוריות עבור חולים אלה.

שימור פוריות בחולים עם תפקוד לקוי של השחלות חמורות

Ovarian function progressively declines during aging and in some pathophysiological conditions including karyotype abnormality, autoimmune diseases, ...

מטרת הסרט היא להדגים את ההליך של הגישה החדשה שלנו לחולים עם תפקוד לקוי של השחלות. תפקוד השחלות יורד בהדרגה במהלך ההזדקנות וכמה מצבים פתופיזיולוגיים כולל חריגות קריוטיף, מחלות אוטואימוניות, טיפולי כימותרפיה והקרנות וניתוחי שחלות. רוב הנשים בגיל העמידה עם עתודה נמוכה השחלות הראו תגובה השחלות עניים גירוי השחלות להניב ביציות בוגרת.יתר על כן, חולים צעירים עם מספר נמוך של זקיקי antral הראו גם תגובה השחלות עניים לגירוי השחלות. שימור פוריות חשוב כדי לשמור את OCS הפוטנציאלי להריון עתידי. לשימור פוריות, ההקפאה ביצית הוקמה.עם זאת, אלה חולים תגובה השחלות המסכן יכול לאחזר מספר מוגבל מאוד של ביציות גם לאחר גירוי השחלות הנכון, המוביל את הדרישה של הליכים יקרים חוזרים ונשנים כדי להבטיח מספר מספיק של ביציות כדי להבטיח תינוק אחד. כדי לפתור בעיות אלה, פיתחנו לאחרונה את ההפעלה במבחנה, הליך IVA, המאפשר לנו לעורר את השלב המוקדם של זקיקי השחלות להתפתח לשלב זקיק טרום antral. הליך IVA המקורי יכול לקדם צמיחה ראשונית, ראשונית ומשנית זקיק על ידי פיצול קליפת המוח השחלות, המוביל שיבוש איתות היפופוטם.לאחר מכן, יומיים של פולחן עם ממריץ איתות Akt. הליך זה מתאים לחולי POI עם מעט זקיקים שיורית. עם זאת, הליך זה הוא טיפול מוגזם עבור חולים שיש להם זקיקים משניים מרובים.עבור חולים שיש להם כמה זקיקים משניים שיורית, הקמנו את השיטה שנקראת IVA ללא סמים וכבר בדקנו את האפשרות של קידום צמיחת זקיק משני על ידי רק לשבש את מסלול איתות היפופוטם. היו לנו גם כמה מקרים מוצלחים של משלוח על ידי IVA ללא סמים. כבר פרסמנו את ההליך הכירורגי של IVA ללא סמים ואת הפרוטוקול של גירוי השחלות הבאים.בסרטון זה, אנו מציגים את הפרטים של שיטות מעבדה הנדרשות עבור IVA ללא סמים. גייסנו את המטופלים ל-IVA ללא סמים בהתבסס על הקריטריונים של בולוניה. לחולים יכולים להיות מספר זקיקים משניים.בהתחלה, חלק מקליפת המוח הוסר מן השחלה אחת או שתיהן על ידי לפרוסקופיה. חולי POR הם אלה שהיו להם שחלות בגודל בינוני. ברוב החולים, הוצאנו רק חלק מהרקמות הקורטיקליות מהשחלות בצד אחד או בשני הצדדים.רקמות קריטיות שחולצו הועברו מיד לצלחת תרבות המכילה מדיום תרבות עם חיץ HEPES, ונותחו את הרקמה הקטנה הזו לקוביות קטנות לשיבוש איתות היפופוטם. פרטי ההליך יוצגו בסרטון וידאו זה. מסלול איתות היפו הוא חיוני כדי לשמור על גודל איבר אופטימלי.מסלול זה מורכב ממספר רגולטורים שליליים לצמיחה. לאחר איתות היפופוטם הוא שיבש, רמות זרחן של YAP, אחד הרגולטורים צמיחה שלילית הפועלים מפל קינאז, הוא ירד ורמות הגרעין של YAP הוא גדל. YAP פועל בתיאום עם גורמי שעתוק TEAD כדי להגדיל את גורם הגדילה של CCN במורד הזרם.מצד שני, פילמור actin של משחק כדורי, G-actin, לצורה הסיבית, F-actin, חשוב עבור תחזוקת צורת התא ותנועה. דיווח בעבר אינדוקציה של היווצרות F-actin משבש היפופוטם איתות וגורם overgrowth בתאי HeLa אנושיים. דיווחנו בעבר פיצול השחלות להגדיל את היווצרות F-actin, וזה מוביל לירידה של רמת זרחון של YAP.זה מוביל לביטוי מוגבר של גורם גדילה CCN. לאחר החיתוך, קוביות אלה מושתלות בשחלה הנותרת. הליך זה יכול לקדם את הצמיחה זקיק משני שיורית ולהוביל למספר מוגבר של ביצית התבגר.IVA ללא סמים מורכב מארבעה שלבים. כבר פרסמנו את ההליך הכירורגי עבור IVA ללא סמים. אנא עיין בספרות זו עבור מיצוי קליפת המוח השחלות השתלה אוטומטית.כאן אנו מראים את נהלי הפרטים של שיטות מעבדה הנדרשות עבור IVA ללא סמים. בשלב הראשון, אנו מראים כיצד מתבצע פיצול קליפת המוח השחלתית. בשלב השני, אנו מראים כיצד לטעון את קוביות קליפת המוח השחלות לתוך המכשיר להשתלה, כאן, אני אראה פיצול קליפת המוח השחלות.מחקר זה אושר על ידי הוועדה האתית של המכון שלנו, וכל ההליכים בוצעו בהתאם לקוד האתיקה של ההסתדרות הרפואית העולמית. פיצול קליפת המוח השחלות. הכלים הבאים הנדרשים לשלב זה:מנה, גזה סטרילית, מספריים עדינות, מלקחיים עדינים ואזמל.אנחנו בדרך כלל משתמשים בסוג זה של צלחת גזה סטרילית אבל מוצרים אחרים כמו צלחת פטרי פלסטיק, צלחת זכוכית, וכולי, עשוי גם להיות מתאים להליך זה, וכל סוג של גזה סטרילית הוא גם מתאים. עם זאת אנו ממליצים בחום על השימוש בצורה זו של מלקחיים ואזמל. בנוסף, השתמש בצלחת החמה לשמירה על הטמפרטורה של הכלים המכילים רקמות מקום מתחת לווילון סטרילי.רקמות קליפת המוח מועברות מיד לתוך המנה המכילה mHTF. צלם תמונה עם שם המטופל כדי לתאם את נתוני המטופל. רשום את הגודל, העובי והמצב של הרקמה.הסר רקמת מדולה שיורית. לפני פיצול הרקמות, הסר את רקמת המדולה. שים את קליפת המוח על הגזה הסטרילית.כפי שמוצג בסרטון, הגזה לחה עם מדיום. במהלך הליך זה, יש למרוח מדיום עם פיפטה חד פעמית לפני שפני השטח של קליפת המוח מתייבשים. הסר שאריות רקמות עם מספריים מיקרו עד עובי מגיע אחד עד שני מילימטרים.בחולי POR, זקיקים משניים ממוקמים עמוק יותר ממילימטר אחד מפני השטח של קליפת המוח, ולכן אינם הופכים את הרקמות לפחות ממילימטר בעובי. חותכים צד אחד של קליפת המוח של כל רקמה לרצועה מדידה אחד אחד על ידי חמישה מילימטר לניתוח היסטולוגי כדי לקבוע את נוכחותם של זקיקים שיורית. שים את הרצועה הזאת לתוך צינור 1.5 מיליליטר עם מדיום תרבות ולשמור על ארבע מעלות צלזיוס עד תיקון.הכנת קוביות קליפת המוח השחלות. לאחר הסרת רקמת medulla, קליפת המוח השחלות מקוטע עבור היפופוטם איתות הפרעה. בהתחלה, לחתוך את קליפת המוח לתוך אחד אחד על ידי 10 רצועות מילימטר באמצעות אזמל.ואז לחתוך רצועות אלה לקוביות קטנות קוביות מילימטר אחד. במדיום, הרקמה חלקלקה וקשה לחתוך. לחיתוך קל, חותכים את הרצועות על ידי לחיצה על האזמל ולא על ידי משיכתו.לאחר החיתוך, לספור את מספר הקוביות ולהכין את השתלה אוטומטית. כדי למנוע את השינויים של לחץ אוסמוטי במדיום, להוסיף את המדיום במתינות לפני השתלה אוטומטית של הרקמה. עבור השתלה אוטומטית בשחלות, השימוש במכשיר בצורת קנולה מאפשר טעינה קלה יותר.שלב זה מכיל שני שלבים. בעבר, שברי השחלות הושתלו בזה אחר זה באמצעות מלקחיים תחת לפרוסקופיה. עם זאת, זה לקח בערך שלוש עד ארבע שעות כדי להשלים את הניתוח.בהליך זה, אנו משתמשים במכשיר בצורת צינורית העשוי ממזרק פנימי וצילינדר חיצוני. זוהי צורה פשוטה וקלת משקל. בנוסף, קצה התקן זה הוא בעל צורה עגולה.אין נקודות חדות שנמנעות מפגיעה באתר ההשתלה. שימוש בסוג זה של מכשיר מאפשר להביא עד 20 עד 30 קוביות לאתר ההשתלה בבת אחת. זה מוביל להשתלה יעילה והפחתה בזמן הניתוח.טוען שברי קליפת המוח השחלות. הכנת קנולה IVA. הכן את הצינורית IVA ולשטוף את המכשיר הזה mHTF.חזור על שאיפה ופריקה בינונית מספר פעמים. מלא את קצה הקנוולר על ידי שאיפה של כ -100 מיקרוליטרים של המדיום. זאת כדי למנוע מהקוביות לצייר במהלך טעינת שברי רקמות.טוען קוביות קליפת המוח. בחר קוביה על ידי מלקחיים עדינים ולשים אותו בקצה של cannular. מספר הקוביות המושתלות תלוי בגודל אתר ההשתלה.חזור על טעינת הקוביות בזו אחר זו עד שתגיע למספר היעד. לאחר טעינת הקוביות, מעבירים את הצינורית למנתח בזהירות. אם אתר ההשתלה אינו מוכן, החלק של הקנולר המכיל קוביות השחלות הוא להיות מוחזק על ידי האצבעות, כדי למנוע ירידה בטמפרטורה של קוביות.כבר דיווחנו על התוצאות הקליניות של IVA ללא תרופות. עיין במאמר שפורסם על תוצאות קליניות. פרוטוקול מעבדה זה נדרש 30 עד 50 דקות עבור חולה אחד.הזמן הממוצע הוא במשך 10 עד 20 דקות עבור פיצול קליפת המוח השחלות, ו 20 עד 30 דקות עבור טעינת שברים אלה קנולה IVA. זה תלוי בגודל הרקמה, אבל כמעט כל החולים יכולים להיות גמורים בזמן ממוצע זה. מסקנות. IVA ללא סמים היא גישה חדשה של טיפול פוריות לחולי POR עם רזרבת השחלות פוחתת.פרוטוקול מעבדה זה מוביל להפחתת הזמן הנדרש לניתוח ולאובדן שברים במהלך ההשתלה. טכניקת המעבדה של IVA ללא סמים יכול להיות הבסיס של יישום עתידי של תרבות רקמת השחלות כדי להשיג ביציות בוגרת ללא השתלה.

Research

JoVE Journal

Medicine

A Contusion Model of Severe Spinal Cord Injury in Rats

דגם חבורה של פגיעה בחוט השדרה חמורה בחולדות

The translational potential of novel treatments should be investigated in severe spinal cord injury (SCI) contusion models. A detailed methodology is ...

Computerized Dynamic Posturography for Postural Control Assessment in Patients with Intermittent Claudication

Computerized dynamic posturography with the EquiTest is an objective technique for measuring postural strategies under challenging static and dynamic ...

Assessment of Vascular Function in Patients With Chronic Kidney Disease

הערכה של תפקוד כלי דם בחולים עם מחלת כליות כרונית

Patients with chronic kidney disease (CKD) have significantly increased risk of cardiovascular disease (CVD) compared to the general population, and this ...

Functional Human Liver Preservation and Recovery by Means of Subnormothermic Machine Perfusion

אדם תפקודי כבד שימור ושחזור על ידי אמצעי Subnormothermic מכונת זלוף

There is currently a severe shortage of liver grafts available for transplantation.  Novel organ preservation techniques are needed to expand the pool of ...

Introduction of Intracapsular Rotary-cut Procedures (IRCP): A Modified Hysteromyomectomy Procedures Facilitating Fertility Preservation

Introduction of Intracapsular Rotary-cut Procedures IRCP: A Modified Hysteromyomectomy Procedures Facilitating Fertility Preservation

מבוא מההליכים רוטרי-קאט Intracapsular (IRCP): A שונו נהלים Hysteromyomectomy בקידום שימור פוריות

Uterine fibroids are common benign tumors in the female reproductive system. A hysterectomy is the most effective treatment for symptomatic fibroids. For ...

Semi-quantitative Assessment Using [18F]FDG Tracer in Patients with Severe Brain Injury

Semi-quantitative Assessment Using [18F]FDG Tracer in Patients with Severe Brain Injury

הערכה כמותית למחצה באמצעות מעקב FDG [18F] בחולים עם פגיעה מוחית חמורה

Patients with severe traumatic brain injury (sTBI) have difficulty knowing whether they are accurately expressing their thoughts and emotions because of ...

Sodium Taurocholate Induced Severe Acute Pancreatitis in C57BL/6 Mice

נתרן Taurocholate המושרה חמור דלקת לבלב חריפה ב C57BL/6 עכברים

Biliary acute pancreatitis induction by sodium taurocholate infusion has been widely used by the scientific community due to the representation of the ...

Digital Handwriting Analysis of Characters in Chinese Patients with Mild Cognitive Impairment

ניתוח כתב יד דיגיטלי של תווים בחולים סינים עם פגיעה קוגניטיבית קלה

An increasing amount of evidence shows that cognitive deficits and movement dysfunctions are not separated. Patients with mild cognitive impairment (MCI) ...

Fertility Preservation Through Oocyte Vitrification: Clinical and Laboratory Perspectives

שימור פוריות באמצעות ויטריפיקציה של אוציט: פרספקטיבות קליניות ומעבדתיות

Preserving female fertility is crucial in a multifunctional healthcare system that takes care of patients' future quality of life. Oocyte cryopreservation ...

Fertility Sparing Procedure using Carbon Dioxide Fiber Laser Vaporization of Ovarian Endometrioma

הליך חוסך פוריות באמצעות אידוי לייזר סיבי פחמן דו חמצני של אנדומטריומה שחלתית

The surgical management of endometrioma is still a matter of debate. Cystectomy, which is recognized as the standard technique, seems to be associated ...