Name: fertility preservation in patients with severe ovarian dysfunction
Uploaded: 2021-03-25T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Fertility Preservation in Patients with Severe Ovarian Dysfunction at JoVE.com

Tatsuji Ihana, Sachiyo Kurimoto, Kazuko Takahasih, Yuki Yoshizawa, Maho Arashi, Kentaro Fujita, Erina Kudo, Yuka Kurimoto ve Mayuko Wakatsuki'ye ilaçsız IVA prosedürünü desteklemiş oldukları için ve Prof. Aaron J.W. Hsueh'e (Stanford Üniversitesi Tıp Fakültesi, Stanford, CA) makalenin eleştirel okunması ve düzenlenmesi için teşekkür ederiz. Rebecca Truman ve Gregory Truman'a da İngilizce anlatım ekledikleri için teşekkür ederiz. Bu çalışma Japonya Bilimi Destekleme Derneği (JSPS), Bilimsel Araştırma B (19H03801) ve Zorlu Keşif Araştırmaları (18K19624) tarafından desteklendi.

İlaçsız IVA tedavisine kaydolan yumurtalık rezervi azalan her POR hastasından yazılı bilgilendirilmiş onam alındı. Bu çalışma Uluslararası Sağlık ve Refah Üniversitesi etik komitesi (No. 17-S-21) tarafından onaylanmıştır. Klinik çalışma UMIN000034464 numarası altında kaydedilmiş ve Dünya Tabipler Birliği Etik Kuralları (Helsinki Bildirgesi) uyarınca gerçekleştirilmiştir.
1. Yumurtalık korteksi ekstraksiyonu
<ol><li>Yumurtalık korteksinin bir kısmını (10...

<ol>
	<li>Liang, T., Motan, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mature+Oocyte+Cryopreservation+for+Fertility+Preservation.">Mature Oocyte Cryopreservation for Fertility Preservation.</a> Advances in Experimental Medicine and Biology. 951, 155-161 (2016).</li><li>Yoon, T. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Live+births+after+vitrification+of+oocytes+in+a+stimulated+in+vitro+fertilization-embryo+transfer+program.">Live births after vitrification of oocytes in a stimulated in vitro fertilization-embryo transfer program.</a> Fertility and Sterility. 79 (6), 1323-1326 (2003).</li><li>Donnez, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Livebirth+after+orthotopic+transplantation+of+cryopreserved+ovarian+tissue.">Livebirth after orthotopic transplantation of cryopreserved ovarian tissue.</a> Lancet. 364 (9443), 1405-1410 (2004).</li><li>Meirow, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pregnancy+after+transplantation+of+cryopreserved+ovarian+tissue+in+a+patient+with+ovarian+failure+after+chemotherapy.">Pregnancy after transplantation of cryopreserved ovarian tissue in a patient with ovarian failure after chemotherapy.</a> New England Journal of Medicine. 353 (3), 318-321 (2005).</li><li>De Vos, M., Devroey, P., Fauser, B. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Primary+ovarian+insufficiency.">Primary ovarian insufficiency.</a> Lancet. 376 (9744), 911-921 (2010).</li><li>Scott, R. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Follicle-stimulating+hormone+levels+on+cycle+day+3+are+predictive+of+in+vitro+fertilization+outcome.">Follicle-stimulating hormone levels on cycle day 3 are predictive of in vitro fertilization outcome.</a> Fertility and Sterility. 51 (4), 651-654 (1989).</li><li>Ferraretti, A. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ESHRE+consensus+on+the+definition+of+'poor+response'+to+ovarian+stimulation+for+in+vitro+fertilization:+the+Bologna+criteria.">ESHRE consensus on the definition of 'poor response' to ovarian stimulation for in vitro fertilization: the Bologna criteria.</a> Human Reproduction. 26 (7), 1616-1624 (2011).</li><li>Huhtaniemi, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Advances+in+the+Molecular+Pathophysiology,+Genetics,+and+Treatment+of+Primary+Ovarian+Insufficiency.">Advances in the Molecular Pathophysiology, Genetics, and Treatment of Primary Ovarian Insufficiency.</a> Trends in Endocrinology and Metabolism. 29 (6), 400-419 (2018).</li><li>M&#281;czekalski, B., Maciejewska-Jeske, M., Podfigurna, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reproduction+in+premature+ovarian+insufficiency+patients+-+from+latest+studies+to+therapeutic+approach.">Reproduction in premature ovarian insufficiency patients - from latest studies to therapeutic approach.</a> Prz Menopauzalny. 17 (3), 117-119 (2018).</li><li>Baker, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Life+plans+and+family-building+options+for+women+with+primary+ovarian+insufficiency.">Life plans and family-building options for women with primary ovarian insufficiency.</a> Seminars in Reproductive Medicine. 29 (4), 362-372 (2011).</li><li>Englert, Y., Govaerts, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oocyte+donation:+particular+technical+and+ethical+aspects.">Oocyte donation: particular technical and ethical aspects.</a> Human Reproduction. 13, 90-97 (1998).</li><li>Englert, Y., Rodesch, C., Laruelle, C., Govoerts, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oocyte+donation:+ethical+aspects+related+to+the+donor.">Oocyte donation: ethical aspects related to the donor.</a> Contraception, Fertilite, Sexualite. 25 (3), 251-257 (1997).</li><li>Storgaard, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Obstetric+and+neonatal+complications+in+pregnancies+conceived+after+oocyte+donation:+a+systematic+review+and+meta-analysis.">Obstetric and neonatal complications in pregnancies conceived after oocyte donation: a systematic review and meta-analysis.</a> BJOG: An International Journal of Obstetrics and Gynaecology. 124 (4), 561-572 (2017).</li><li>Storgaard, M., Malchau, S., Loft, A., Larsen, E., Pinborg, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oocyte+donation+is+associated+with+an+increased+risk+of+complications+in+the+pregnant+woman+and+the+fetus.">Oocyte donation is associated with an increased risk of complications in the pregnant woman and the fetus.</a> Ugeskrift for Laeger. 179 (11), (2017).</li><li>Kawamura, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hippo+signaling+disruption+and+Akt+stimulation+of+ovarian+follicles+for+infertility+treatment.">Hippo signaling disruption and Akt stimulation of ovarian follicles for infertility treatment.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences. 110 (43), 17474-17479 (2013).</li><li>Hsueh, A. J., Kawamura, K., Cheng, Y., Fauser, B. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intraovarian+control+of+early+folliculogenesis.">Intraovarian control of early folliculogenesis.</a> Endocrine Reviews. 36 (1), 1-24 (2015).</li><li>Li, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Activation+of+dormant+ovarian+follicles+to+generate+mature+eggs.">Activation of dormant ovarian follicles to generate mature eggs.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 107 (22), 10280-10284 (2010).</li><li>Suzuki, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Successful+fertility+preservation+following+ovarian+tissue+vitrification+in+patients+with+primary+ovarian+insufficiency.">Successful fertility preservation following ovarian tissue vitrification in patients with primary ovarian insufficiency.</a> Human Reproduction. 30 (3), 608-615 (2015).</li><li>Tanaka, Y., Hsueh, A. J., Kawamura, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surgical+approaches+of+drug-free+in+activation+and+laparoscopic+ovarian+incision+to+treat+patients+with+ovarian+infertility.">Surgical approaches of drug-free in activation and laparoscopic ovarian incision to treat patients with ovarian infertility.</a> Fertility and Sterility. , (2020).</li><li>Kawamura, K., Ishizuka, B., Hsueh, A. J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Drug-free+in-vitro+activation+of+follicles+for+infertility+treatment+in+poor+ovarian+response+patients+with+decreased+ovarian+reserve.">Drug-free in-vitro activation of follicles for infertility treatment in poor ovarian response patients with decreased ovarian reserve.</a> Reproductive Biomedicine Online. 40 (2), 245-253 (2020).</li><li>Haino, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Determination+of+Follicular+Localization+in+Human+Ovarian+Cortex+for+Vitrification.">Determination of Follicular Localization in Human Ovarian Cortex for Vitrification.</a> Journal of Adolescent and Young Adult Oncology. 7 (1), 46-53 (2018).</li><li>Baird, D. T., Webb, R., Campbell, B. K., Harkness, L. M., Gosden, R. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Long-term+ovarian+function+in+sheep+after+ovariectomy+and+transplantation+of+autografts+stored+at+-196+C.">Long-term ovarian function in sheep after ovariectomy and transplantation of autografts stored at -196 C.</a> Endocrinology. 140 (1), 462-471 (1999).</li><li>Qin, Y., Jiao, X., Simpson, J. L., Chen, Z. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetics+of+primary+ovarian+insufficiency:+new+developments+and+opportunities.">Genetics of primary ovarian insufficiency: new developments and opportunities.</a> Human Reproduction Update. 21 (6), 787-808 (2015).</li><li>Domniz, N., Meirow, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Premature+ovarian+insufficiency+and+autoimmune+diseases.">Premature ovarian insufficiency and autoimmune diseases.</a> Best Practice &amp; Research: Clinical Obstetrics &amp; Gynaecology. 60, 42-55 (2019).</li><li>Laven, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Primary+Ovarian+Insufficiency.">Primary Ovarian Insufficiency.</a> Seminars in Reproductive Medicine. 34 (4), 230-234 (2016).</li><li>Grynberg, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fertility+preservation+in+Turner+syndrome.">Fertility preservation in Turner syndrome.</a> Fertility and Sterility. 105 (1), 13-19 (2016).</li><li>Tomao, F., Spinelli, G. P., Panici, P. B., Frati, L., Tomao, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ovarian+function,+reproduction+and+strategies+for+fertility+preservation+after+breast+cancer.">Ovarian function, reproduction and strategies for fertility preservation after breast cancer.</a> Critical Reviews in Oncology/Hematology. 76 (1), 1-12 (2010).</li><li>Kim, S., Lee, Y., Lee, S., Kim, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ovarian+tissue+cryopreservation+and+transplantation+in+patients+with+cancer.">Ovarian tissue cryopreservation and transplantation in patients with cancer.</a> Obstetrics &amp; Gynecology Science. 61 (4), 431-442 (2018).</li><li>Donnez, J., Dolmans, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ovarian+tissue+freezing:+current+status.">Ovarian tissue freezing: current status.</a> Current Opinion in Obstetrics and Gynecology. 27 (3), 222-230 (2015).</li><li>Wu, R. C., Kuo, P. L., Lin, S. J., Liu, C. H., Tzeng, C. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=X+chromosome+mosaicism+in+patients+with+recurrent+abortion+or+premature+ovarian+failure.">X chromosome mosaicism in patients with recurrent abortion or premature ovarian failure.</a> Journal of the Formosan Medical Association. 92 (11), 953-956 (1993).</li><li>De Munck, N., Vajta, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Safety+and+efficiency+of+oocyte+vitrification.">Safety and efficiency of oocyte vitrification.</a> Cryobiology. 78, 119-127 (2017).</li><li>Argyle, C. E., Harper, J. C., Davies, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oocyte+cryopreservation:+where+are+we+now.">Oocyte cryopreservation: where are we now.</a> Human Reproduction Update. 22 (4), 440-449 (2016).</li></ol>

Bu yazıda, ilaçsız IVA için ayrıntılı bir laboratuvar protokolü gösterdik. İlaçsız IVA, ikincil folikül büyümesini teşvik etmek için yumurtalık rezervi azalan POR hastası için yeni bir kısırlık tedavisi yaklaşımıdır, yumurtalık stimülasyonundan sonra daha olgun oositler elde edilmesine ve başarılı gebelikte artmasına neden olur20. Yumurtalık rezervi azalan 15 POR hastasında, bu yaklaşım bir spontan gebelik elde etti, in vitro fertilizasyon-embriyo transferi, de...

Yumurtalık fonksiyonu yaşlanma sırasında ve karyotip anormalliği, otoimmün hastalıklar, kemoterapi ve radyasyon tedavileri ve yumurtalık ameliyatları gibi bazı patofizyolojik durumlar sırasında giderek azalır. Doğurganlığın korunması, gelecekteki gebelik potansiyellerini korumak için şiddetli yumurtalık disfonksiyonu olan evli olmayan kadınlar için en iyi seçeneklerden biridir. Doğurganlığın korunması için, şu anda çoğunlukla onko-doğurganlık alanında iki yöntem mevcuttur. Oosit kriyoprezervasyonu, doğurganlığın korunması için iyi kurulmuş bir prosedürdür ve birçok başarılı vaka bildirilmiştir1,2. Öte yandan, kanser hastalarında doğurganlığın korunması için yumurtalık dokusu kriyoprezervasyonu da kurulmuştur, ancak yine de deneysel bir stratejidir3,4. Her iki yöntemde de gebeliğin gerçekleşmesi için birden fazla sayıda olgun oosit gereklidir. Genellikle, prematüre yumurtalık yetersizliği (POI) olan hastalar, 40 yaşından önce amenore haline gelen ve düşük yumurtalık rezervine sahip orta yaşlı kadınlar, olgun oositler5,6,7vermek için yumurtalık stimülasyonuna zayıf yumurtalık yanıtı (POR) göstermiştir. Ayrıca, antral folikül sayısı düşük olan genç hastalar da yumurtalık stimülasyonuna POR göstermiştir7. Bu hastalar, uygun yumurtalık hiperstimülasyonundan sonra bile çok sınırlı sayıda alınabilir oositlere sahiptir, bu nedenle hamilelik için yeterli sayıda oosit sağlamak için birden fazla pahalı prosedür gerektirir.
Oosit bağışı ve ardından kocanın sperm ve embriyo transferi (ET) ile in vitro fertilizasyon (IVF) kendi oositlerini elde etmekte zorlanan bu POI ve POR hastaları için tek seçenek8,9,10. Bununla birlikte, oosit bağışı etik konuların yanı sıra otoimmün ve gebelik komplikasyonları11 , 12,13,14ile karmaşıktır. Bu sorunların çözümü için hastaların kendi oositleri kullanılarak kısırlık tedavisinin kurulması istenmek istenmemektedir. İçN hastaları için, başarılı folikül büyümesine ve olgun oositlerin üretilmesine izin vermek için in vitro aktivasyon (IVA) yaklaşımını geliştirdik, bir dizi hamilelik ve doğuma öncülükediyoruz 15. IVA'da, laparoskopik cerrahi altında yumurtalıkların çıkarılmasından sonra yumurtalık kortekslerini parçaladık ve Akt uyarıcı ilaçlarla folikülleri aktive etmek için iki gün boyunca kültürledik ve daha sonra ikinci laparoskopik cerrahi altında Fallop tüplerinin serosasının altında yapılan yapay torbalara heterotopik greftleme gerçekleştirdik15. Bu prosedür, Hippo sinyal bozulmasını teşvik etmek için yumurtalık korteks parçalanması sonrası ilkel, birincil ve ikincil foliküllerin büyümesini teşvik etti16, ardından Akt sinyal uyarıcıları ile iki günlük kültür17.
Şiddetli İçN vakalarının aksine, yumurtalık rezervi azalmış POR hastalarında birden fazla sekonder folikül vardır. Hippo sinyal bozulması tek başına ikincil folikül büyümesini teşvik etmede etkili olduğundan16, son zamanlarda Akt uyarıcı ilaçların tedavisi olmadan kortikal parçalanma ve ortotopik greftleme içeren ilaçsız IVA prosedürünü kullanarak POR hastaları için başarılı gebelikler ve doğumlar gösterdik. İlaçsız IVA, yumurtalık foliküllerinin erken evresini sadece bir ameliyattan sonra preantral folikül aşamasına gelişmesi için uyarır ve IVF-embriyo transferi için alınan oosit sayısını artırır15,18. İlaçsız IVA yaklaşımı, orijinal IVA'mızla karşılaştırıldığında 1) kültür sırasında potansiyel folikül kaybından kaçınmak, 2) ikinci ameliyatın invazivliğini ve maliyetlerini en aza indirmek, 3) sadece kısa süreli ameliyat sonrası yatak istirahatini ve 4) ortotopik aşılamaya bağlı spontan gebelik potansiyelini içeren çeşitli avantajlara sahiptir. Kısa bir süre önce ilaçsız IVA19'un cerrahi prosedürlerini ve ameliyattan sonra yumurtalık stimülasyonunun ayrıntılı protokollerini gösteren bir video makale yayınladık20. Burada, ilaçsız IVA için gerekli laboratuvar yöntemlerinin ayrıntılarını sunuyoruz.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>4.5 onz specimen container</td>
			<td>FALCON</td>
			<td>354013</td>
			<td>Other products may also be suitable</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>60mm dish</td>
			<td>FALCON</td>
			<td>351007</td>
			<td>Other products may also be suitable</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>50 x 50 cm sterile drape</td>
			<td>HOGY Medical</td>
			<td>SR-823</td>
			<td>Any type of sterile produsts may also be suitable</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Disposable pippete</td>
			<td>FALCON</td>
			<td>357575</td>
			<td>Other products may also be suitable</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fine scissors, Curved</td>
			<td>WPI</td>
			<td>#14224-G</td>
			<td>Although other products may also be suitable, we strongly recommend use this products</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hot plate</td>
			<td>TOKAI HIT</td>
			<td>TPiE-SP</td>
			<td>Use at operation room to maintain the temperature of dishes containing ovarian tissue before transplantation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Human Serum Albumin Solution</td>
			<td>Irvine Scientific</td>
			<td>9988</td>
			<td>Medium for handling ovarian tissue</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>IVA cannule</td>
			<td>KITAZATO</td>
			<td>446030 IVA-6030E</td>
			<td>Specific cannula for tissue autografting</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>KAI medical Disposable scalpel</td>
			<td>WPI</td>
			<td>#5 10-A</td>
			<td>Although other products may also be suitable, we strongly recommend use this products</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro scissors, Curved</td>
			<td>WPI</td>
			<td>#503364</td>
			<td>Although other products may also be suitable, we strongly recommend use this products</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Modified HTF Medium-HEPES</td>
			<td>Irvine Scientific</td>
			<td>90126</td>
			<td>Medium for handling ovarian tissue</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile gauze</td>
			<td>Osaki Medical</td>
			<td>15004</td>
			<td>Any type of sterile produsts may also be suitable</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Swiss Tweezers, Curved Tips</td>
			<td>KAI</td>
			<td>#504505</td>
			<td>Although other products may also be suitable, we strongly recommend use this products</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

fertility preservation in patients with severe ovarian dysfunction

Yumurtalık fonksiyonu yaşlanma sırasında ve karyotip anormalliği, otoimmün hastalıklar, kemoterapi ve radyasyon terapileri ve yumurtalık ameliyatları da dahil olmak üzere bazı patofizyolojik durumlarda giderek azalır. Şiddetli yumurtalık disfonksiyonu olan evli olmayan kadınlarda, doğurganlık koruması gelecekteki gebelikler için önemlidir. Her ne kadar oosit kriyoprezervasyonu doğurganlığın korunması için yerleşik bir yöntem olsa da, bu hastalar yumurtalık hiperstimülasyonundan sonra bile sadece sınırlı sayıda oosit koruyabilir ve gelecekteki gebeliği garanti etmek için yeterli oosit sağlamak için tekrarlanan stimülasyonlara yol açabilir. Bu sorunu çözmek için, yakın zamanda yumurtalık foliküllerinin erken evrelerini preantral folikül aşamasına kadar geliştirmemizi sağlayan ilaçsız bir in vitro aktivasyon (IVA) prosedürü geliştirdik. Bu preantral foliküller gonadotropin stimülasyonunun benzersiz protokolüne yanıt verebilir, bu da kriyoprezervasyon için yumurtalık stimülasyonu başına alınan oosit sayısının artmasına neden olur. İlaçsız IVA cerrahi yaklaşım ve yumurtalık stimülasyonundan oluşuyordu. Laparoskopik cerrahi altındaki hastalardan bir veya her iki yumurtalıktan korteksin bir kısmını çıkardık. Yumurtalık kortikal dokuları, Hippo sinyal yolunu bozmak ve erken evre foliküllerin gelişimini teşvik etmek için küçük küpler halinde kesildi. Bu küpler ortotropik olarak kalan yumurtalıklara ve her iki Fallop tüpünün serosasının altına aşılandı. İlaçsız IVA'nın cerrahi prosedürünü ve sonraki yumurtalık stimülasyon protokolünü zaten yayınladık, ancak burada ilaçsız IVA için gerekli laboratuvar yöntemlerinin ayrıntılarını sunuyoruz.

IVA yaklaşım15'inilk yayınında yumurtalık kortikal küplerini laparoskopik cerrahi altında aşılama bölgelerine tek tek naklettik (Şekil 1A). 100-150 yumurtalık küpü kullanıldığı için laparoskopik cerrahi altında doku nakli 3-4 saat sürdü. Ayrıca, aşılamadan önce bazı yumurtalık küpleri kaybedildi. Çünkü IVA canül bir seferde 20-30 küpü bir aşılama bölgesine aktarabiliyordu(Şekil 1B), ameliyat süresin...

Watch this Scientific Journal Video about Fertility Preservation in Patients with Severe Ovarian Dysfunction at JoVE.com

Fertility Preservation in Patients with Severe Ovarian Dysfunction

Ağır yumurtalık disfonksiyonu olan hastalar için yumurtalık foliküllerinin ilaçsız in vitro aktivasyonu (IVA) için laboratuvar prosedürlerinin ayrıntılarını sunuyoruz. Bu yöntem yumurtalık hiperstimülasyonu başına alınabilir oosit sayısını artırabilir ve bu hastalar için doğurganlık korumasına fayda sağlayabilir.

Şiddetli Yumurtalık Disfonksiyonu Olan Hastalarda Doğurganlığın Korunması

Ovarian function progressively declines during aging and in some pathophysiological conditions including karyotype abnormality, autoimmune diseases, ...

Bu filmin amacı yumurtalık disfonksiyonu olan hastalara yeni yaklaşımımızın prosedürünü göstermektir. Yumurtalık fonksiyonu yaşlanma sırasında ve karyotip anormalliği, oto immün hastalıklar, kemoterapi ve radyasyon tedavileri ve yumurtalık ameliyatları gibi bazı patofizyolojik durumlar sırasında giderek azalır. Yumurtalık rezervi düşük olan orta yaşlı kadınların çoğu, olgun oositler vermek için yumurtalık stimülasyonuna zayıf yumurtalık tepkisi gösterdi.Ayrıca, antral folikül sayısı düşük olan genç hastalarda da yumurtalık stimülasyonuna karşı zayıf yumurtalık yanıtı gösterildi. Doğurganlık koruması, potansiyel OCS'yi gelecekteki hamilelik için kurtarmak için önemlidir. Doğurganlığın korunması için oosit kriyoprezervasyonu kuruldu.Bununla birlikte, bu zayıf yumurtalık yanıtı hastaları, uygun yumurtalık stimülasyonundan sonra bile çok sınırlı sayıda oosit alabilir ve bir bebeği garanti etmek için yeterli sayıda oosit sağlamak için tekrarlanan pahalı prosedürlerin gerekliliğine yol açabilir. Bu sorunları çözmek için, yakın zamanda yumurtalık foliküllerinin erken evresini antral folikül öncesi evreye kadar uyarmamızı sağlayan in vitro aktivasyon, IVA prosedürünü geliştirdik. Orijinal IVA prosedürü, yumurtalık korteksi parçalanması ile ilkel, birincil ve ikincil folikül büyümesini teşvik edebilir ve su aygırı sinyal bozulmasına yol açabilir.Bunu daha sonra Akt sinyal uyarıcısı ile iki günlük kültleme takip ediyor. Bu işlem az sayıda kalıntı folikül içeren poi hastaları için uygundur. Ancak bu işlem birden fazla sekonder folikülleri olan hastalar için aşırı bir tedavidir.Bazı kalıntı sekonder folikülleri olan hastalar için ilaçsız IVA adı verilen yöntemi kurduk ve sadece suaygırı sinyal yolunu bozarak sekonder folikül büyümesini teşvik etme olasılığını test ettik. Ayrıca ilaçsız IVA ile başarılı teslimat durumlarımız oldu. İlaçsız IVA'nın cerrahi prosedürünü ve yumurtalık stimülasyonunu takip protokolünü zaten yayınladık.Bu videoda ilaçsız IVA için gerekli laboratuvar yöntemlerinin detaylarını sunuyoruz. Bologna kriterlerine göre hastaları ilaçsız IVA için işe aldık. Hastalarda birden fazla sekonder folikül olabilir.İlk başta, korteksin bir kısmı laparoskopi ile bir veya her iki yumurtalıktan çıkarıldı. POR hastaları orta boy yumurtalıkları olanlardır. Hastaların çoğunda kortikal dokuların sadece bir kısmını bir veya her iki taraftaki yumurtalıklardan çıkardık.Çıkarılan kritik dokular hemen HEPES tamponlu kültür ortamı içeren bir kültür çanağine aktarıldı ve bu küçük dokuyu su aygırı sinyal bozulması için küçük küpler halinde parçalara ayrıştırıldı. Prosedürün ayrıntıları bu videoda gösterilecektir. Su aygırı sinyal yolu, optimum organ boyutunu korumak için gereklidir.Bu yol birkaç negatif büyüme düzenleyiciden oluşur. Suaygırı sinyali bozulduğunda, kinaz çağlayanında hareket eden negatif büyüme düzenleyicilerinden biri olan YAP'ın fosforilasyon seviyeleri azalır ve YAP'ın nükleer seviyeleri artar. YAP, aşağı akış CCN büyüme faktörünü artırmak için TEAD transkripsiyon faktörleri ile birlikte hareket eder.Öte yandan, globüler etkinin, G-actin'in filamentli forma, F-actin'e aktisin polimerizasyonu hücre şekli bakımı ve hareket için önemlidir. Daha önce bildirilen F-actin oluşumu suaygırı sinyalini bozar ve insan HeLa hücrelerinde aşırı büyüme indükler. Daha önce yumurtalık parçalanmasının F-aktüer oluşumunu artırdığını ve YAP'ın fosforilasyon seviyesinin düşmesine yol açtığını bildirmiştik.CCN büyüme faktörünün daha fazla ifade etmesine yol açar. Kesildikten sonra, bu küpler kalan yumurtalığa aşılanır. Bu prosedür artık ikincil folikül büyümesini teşvik edebilir ve olgunlaşmış oosit sayısının artmasına neden olabilir.İlaçsız IVA dört adımdan oluşur. İlaçsız IVA için cerrahi prosedürü zaten yayınladık. Yumurtalık korteksi ekstraksiyonu ve otomatik aşılama için lütfen bu literatüre bakın.Burada ilaçsız IVA için gerekli laboratuvar yöntemlerinin ayrıntılı prosedürlerini gösteriyoruz. Birinci adımda yumurtalık korteks parçalanmasının nasıl yapıldığını gösteriyoruz. İkinci adımda, yumurtalık kortikal küplerinin nakil için cihaza nasıl yüklendiğini gösteriyoruz, burada yumurtalık korteksi parçalanmasını göstereceğim.Bu çalışma enstitümüzün etik kurulu tarafından onaylanmış ve tüm prosedürler Dünya Tabipler Birliği Etik Kuralları'na uygun olarak gerçekleştirilmiştir. Yumurtalık korteksi parçalanması. Bu adım için aşağıdaki araçlar gereklidir: bir yemek, steril gazlı bez, ince makas, ince forseps ve neşter.Genellikle bu tür bir tabak ve steril gazlı bez kullanırız, ancak plastik Petri kabı, cam tabak, vesaire gibi diğer ürünler de bu prosedür için uygun olabilir ve her türlü steril gazlı bez de uygundur. Bununla birlikte, bu forseps ve neşter şeklinin kullanılmasını şiddetle tavsiye ediyoruz. Ek olarak, doku içeren yemeklerin sıcaklığını korumak için sıcak plakayı kullanın Steril örtünün altına yerleştirin.Kortikal dokular hemen mHTF içeren çanağa aktarılır. Hastanın verileriyle ilişkili olarak hastanın adının olduğu bir resim çekin. Dokunun boyutunu, kalınlığını ve durumunu kaydedin.Kalan medulla dokusunu çıkarın. Doku parçalanmadan önce medulla dokusunu çıkarın. Korteksi steril gazlı bezin üzerine koy.Videoda gösterildiği gibi, gazlı bez orta ile nemlendirilir. Bu işlem sırasında, korteks yüzeyi kurumadan önce tek kullanımlık pipet ile orta uygulayın. Kalınlık bir ila iki milimetreye ulaşana kadar kalan dokuları mikro makasla çıkarın.POR hastalarında, sekonder foliküller korteks yüzeyinden bir milimetreden daha derin bulunur, bu nedenle dokuları bir milimetreden daha az kalınlıkta yapmayın. Kalıntı foliküllerin varlığını belirlemek için histolojik analiz için her dokunun korteksinin bir tarafını tek tek beş milimetre ölçen bir şerit halinde kesin. Bu şeridi kültür ortası ile 1,5 mililitre tüpe koyun ve sabitleyene kadar dört santigrat derecede tutun.Yumurtalık kortikal küplerinin hazırlanması. Medulla dokusunun çıkarılmasından sonra, yumurtalık kortikal su aygırı sinyal bozulması için parçalanır. İlk başta, korteksi neşter kullanarak tek tek 10 milimetrelik şeritler halinde kesin.Sonra bu şeritleri bir milimetre küp küp küçük küpler halinde kesin. Ortamda, doku kaygandır ve kesilmesi zordur. Kolay kesim için şeritleri üzerine çekmek yerine neşterin üzerine bastırarak kesin.Kestikten sonra, küp sayısını sayın ve otomatik aşılamayı hazırlayın. Ortamdaki ozmotik basınç değişikliklerini önlemek için, doku otomatik aşılamadan önce ortamı ölçülü olarak ekleyin. Yumurtalık otomatik greftleme için, kolay yükleme için kolay yükleme sağlar, bir cannula şeklinde cihaz kullanımı.Bu adım iki adım içerir. Daha önce yumurtalık parçaları laparoskopi altında önseçimler kullanılarak tek tek nakledilmiştir. Ancak ameliyatın tamamlanması yaklaşık üç ila dört saat sürdü.Bu prosedürde, bir iç şırıng ve bir dış silindirden yapılmış cannular şeklinde bir cihaz kullanıyoruz. Bu basit bir şekil ve hafiftir. Ek olarak, bu cihazın ucu yuvarlak bir şekildedir.Nakil bölgesinin zarar görmesini önleyen keskin bir nokta yok. Bu tür bir cihazın kullanılması, implantasyon bölgesine aynı anda 20 ila 30 küp getirilmesine izin verir. Bu da ameliyat süresinde verimli transplantasyona ve azalmaya yol açar.Yumurtalık kortikal parçaları yükleniyor. IVA cannula hazırlanması. IVA cannula'yı hazırlayın ve bu cihazı mHTF'de yıkayın.Aspirat ve deşarj ortamını birkaç kez tekrarlayın. Ortamın yaklaşık 100 mikrolitresini aspire ederek bir cannular'ın ucunu doldurun. Bu, doku parçası yüklemesi sırasında küplerin dışarı çıkmasını önlemektir.Kortikal küpler yükleniyor. İnce tokalardan bir küp seçin ve cannular'ın ucuna koyun. Otomatik aşılanmış küplerin sayısı nakil bölgesinin büyüklüğüne bağlıdır.Hedef sayıya ulaşana kadar küpleri tek tek yüklemeyi tekrarlayın. Küpleri yükledikten sonra, damarı cerraha dikkatlice geçirin. Aşılama bölgesi hazır değilse, küplerin sıcaklığının düşmesini önlemek için cannular'ın yumurtalık küpleri içeren kısmı parmakla tutulmalıdır.İlaçsız IVA'nın klinik sonuçlarını zaten bildirdik. Lütfen klinik sonuçlar hakkında yayınlanan makaleye bakın. Bu laboratuvar protokolü bir hasta için 30 ila 50 dakika gerektiriyor.Ortalama süre yumurtalık korteksi parçalanması için 10 ila 20 dakika ve bu parçaları IVA kanülüne yüklemek için 20 ila 30 dakikadır. Bu doku büyüklüğüne bağlıdır, ancak hemen hemen tüm hastalar bu ortalama sürede bitirilebilir. Sonuç. İlaçsız IVA, yumurtalık rezervi azalan POR hastaları için kısırlık tedavisinin yeni bir yaklaşımıdır.Bu laboratuvar protokolü hem ameliyat için gereken sürenin azalmasına hem de nakil sırasında parça kaybına yol açar. İlaçsız IVA'nın laboratuvar tekniği, greftleme olmadan olgun oositler elde etmek için yumurtalık doku kültürünün gelecekteki uygulamasının temeli haline gelebilir.

Research

JoVE Journal

Medicine

A Contusion Model of Severe Spinal Cord Injury in Rats

Sıçanlarda Şiddetli Spinal Kord Yaralanması bir bere modeli

The translational potential of novel treatments should be investigated in severe spinal cord injury (SCI) contusion models. A detailed methodology is ...

Computerized Dynamic Posturography for Postural Control Assessment in Patients with Intermittent Claudication

Aralıklı topallama Hastalarda Postural Kontrol Değerlendirme için bilgisayarlı dinamik postürografi

Computerized dynamic posturography with the EquiTest is an objective technique for measuring postural strategies under challenging static and dynamic ...

Assessment of Vascular Function in Patients With Chronic Kidney Disease

Kronik Böbrek Hastalarında Vasküler Fonksiyon Değerlendirilmesi

Patients with chronic kidney disease (CKD) have significantly increased risk of cardiovascular disease (CVD) compared to the general population, and this ...

Functional Human Liver Preservation and Recovery by Means of Subnormothermic Machine Perfusion

Subnormothermic Makine Perfüzyon Yoluyla Fonksiyonel İnsan Karaciğer Koruma ve Kurtarma

There is currently a severe shortage of liver grafts available for transplantation.  Novel organ preservation techniques are needed to expand the pool of ...

Introduction of Intracapsular Rotary-cut Procedures (IRCP): A Modified Hysteromyomectomy Procedures Facilitating Fertility Preservation

Introduction of Intracapsular Rotary-cut Procedures IRCP: A Modified Hysteromyomectomy Procedures Facilitating Fertility Preservation

Giriş juatify Rotary kesim işlemleri (IRCP): A değiştiren Hysteromyomectomy yordamlar doğurganlık koruma kolaylaştırılması

Uterine fibroids are common benign tumors in the female reproductive system. A hysterectomy is the most effective treatment for symptomatic fibroids. For ...

Semi-quantitative Assessment Using [18F]FDG Tracer in Patients with Severe Brain Injury

Semi-quantitative Assessment Using [18F]FDG Tracer in Patients with Severe Brain Injury

Yarı kantitatif değerlendirmesi ağır beyin hasarı olan hastalarda [18F] FDG izleyici kullanarak

Patients with severe traumatic brain injury (sTBI) have difficulty knowing whether they are accurately expressing their thoughts and emotions because of ...

Sodium Taurocholate Induced Severe Acute Pancreatitis in C57BL/6 Mice

C57BL/6 Farelerde Sodyum Taurokolat İndüklenen Şiddetli Akut Pankreatit

Biliary acute pancreatitis induction by sodium taurocholate infusion has been widely used by the scientific community due to the representation of the ...

Digital Handwriting Analysis of Characters in Chinese Patients with Mild Cognitive Impairment

Hafif Bilişsel Bozukluğu Olan Çinli Hastalarda Karakterlerin Dijital El Yazısı Analizi

An increasing amount of evidence shows that cognitive deficits and movement dysfunctions are not separated. Patients with mild cognitive impairment (MCI) ...

Fertility Preservation Through Oocyte Vitrification: Clinical and Laboratory Perspectives

Oosit Vitrifikasyonu ile Doğurganlığın Korunması: Klinik ve Laboratuvar Perspektifleri

Preserving female fertility is crucial in a multifunctional healthcare system that takes care of patients' future quality of life. Oocyte cryopreservation ...

Fertility Sparing Procedure using Carbon Dioxide Fiber Laser Vaporization of Ovarian Endometrioma

Yumurtalık Endometriomunun Karbondioksit Fiber Lazer Buharlaştırılması Kullanılarak Doğurganlık Koruyucu Prosedür

The surgical management of endometrioma is still a matter of debate. Cystectomy, which is recognized as the standard technique, seems to be associated ...