Name: implantation of combined telemetric ecg and blood pressure transmitters to determine spontaneous baroreflex sensitivity in conscious mice
Uploaded: 2021-02-14T14:00:00
Duration: 9 min 56 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Implantation of Combined Telemetric ECG and Blood Pressure Transmitters to Determine Spontaneous Baroreflex Sensitivity in Conscious Mice at JoVE.com

עבודה זו נתמכה על ידי קרן המחקר הגרמנית [FE 1929/1-1 ו- WA 2597/3-1]. אנו מודים לסנדרה דירשל על הסיוע הטכני המצוין ולג'וליה רילינג על הייעוץ הווטרינרי.

<ol>
	<li>Landgren, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=On+the+excitation+mechanism+of+the+carotid+baroceptors.">On the excitation mechanism of the carotid baroceptors.</a> Acta Physiologica Scandinavica. 26 (1), 1-34 (1952).</li><li>Heyman, C., Neil, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reflexogenic+areas+of+the+cardiovascular+system.">Reflexogenic areas of the cardiovascular system.</a> British Journal of Surgery. 46 (195), 92 (1958).</li><li>Lu, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+ion+channel+ASIC2+is+required+for+baroreceptor+and+autonomic+control+of+the+circulation.">The ion channel ASIC2 is required for baroreceptor and autonomic control of the circulation.</a> Neuron. 64 (6), 885-897 (2009).</li><li>Fadel, P. J., Raven, P. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+investigations+into+the+arterial+and+cardiopulmonary+baroreflexes+during+exercise.">Human investigations into the arterial and cardiopulmonary baroreflexes during exercise.</a> Experimental Physiology. 97 (1), 39-50 (2012).</li><li>Nagura, S., Sakagami, T., Kakiichi, A., Yoshimoto, M., Miki, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acute+shifts+in+baroreflex+control+of+renal+sympathetic+nerve+activity+induced+by+REM+sleep+and+grooming+in+rats.">Acute shifts in baroreflex control of renal sympathetic nerve activity induced by REM sleep and grooming in rats.</a> The Journal of Physiology. 558, 975-983 (2004).</li><li>Crandall, C. G., Cui, J., Wilson, T. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+heat+stress+on+baroreflex+function+in+humans.">Effects of heat stress on baroreflex function in humans.</a> Acta Physiologica Scandinavica. 177 (3), 321-328 (2003).</li><li>Crandall, M. E., Heesch, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Baroreflex+control+of+sympathetic+outflow+in+pregnant+rats:+effects+of+captopril.">Baroreflex control of sympathetic outflow in pregnant rats: effects of captopril.</a> The American Journal of Physiology. 258 (6), 1417-1423 (1990).</li><li>Mortara, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Arterial+baroreflex+modulation+of+heart+rate+in+chronic+heart+failure:+clinical+and+hemodynamic+correlates+and+prognostic+implications.">Arterial baroreflex modulation of heart rate in chronic heart failure: clinical and hemodynamic correlates and prognostic implications.</a> Circulation. 96 (10), 3450-3458 (1997).</li><li>La Rovere, M. T., Bigger, J. T., Marcus, F. I., Mortara, A., Schwartz, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Baroreflex+sensitivity+and+heart-rate+variability+in+prediction+of+total+cardiac+mortality+after+myocardial+infarction.+ATRAMI+(Autonomic+Tone+and+Reflexes+After+Myocardial+Infarction)+Investigators.">Baroreflex sensitivity and heart-rate variability in prediction of total cardiac mortality after myocardial infarction. ATRAMI (Autonomic Tone and Reflexes After Myocardial Infarction) Investigators.</a> Lancet. 351 (9101), 478-484 (1998).</li><li>Robinson, T. G., Dawson, S. L., Eames, P. J., Panerai, R. B., Potter, J. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cardiac+baroreceptor+sensitivity+predicts+long-term+outcome+after+acute+ischemic+stroke.">Cardiac baroreceptor sensitivity predicts long-term outcome after acute ischemic stroke.</a> Stroke. 34 (3), 705-712 (2003).</li><li>Fenske, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=cAMP-dependent+regulation+of+HCN4+controls+the+tonic+entrainment+process+in+sinoatrial+node+pacemaker+cells.">cAMP-dependent regulation of HCN4 controls the tonic entrainment process in sinoatrial node pacemaker cells.</a> Nature Communications. 11 (1), 5555 (2020).</li><li>Fenske, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comprehensive+multilevel+in+vivo+and+in+vitro+analysis+of+heart+rate+fluctuations+in+mice+by+ECG+telemetry+and+electrophysiology.">Comprehensive multilevel in vivo and in vitro analysis of heart rate fluctuations in mice by ECG telemetry and electrophysiology.</a> Nature Protocols. 11 (1), 61-86 (2016).</li><li>Thireau, J., Zhang, B. L., Poisson, D., Babuty, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heart+rate+variability+in+mice:+a+theoretical+and+practical+guide.">Heart rate variability in mice: a theoretical and practical guide.</a> Experimental Physiology. 93 (1), 83-94 (2008).</li><li>Cesarovic, N., Jirkof, P., Rettich, A., Arras, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Implantation+of+radiotelemetry+transmitters+yielding+data+on+ECG,+heart+rate,+core+body+temperature+and+activity+in+free-moving+laboratory+Mice.">Implantation of radiotelemetry transmitters yielding data on ECG, heart rate, core body temperature and activity in free-moving laboratory Mice.</a> Journal of Visualized Experiments. (57), e3260 (2011).</li><li>Alam, M. A., Parks, C., Mancarella, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=long-term+blood+pressure+measurement+in+freely+moving+mice+using+telemetry.">long-term blood pressure measurement in freely moving mice using telemetry.</a> Journal of Visualized Experiments. (111), e53991 (2016).</li><li>Optical and electrophysiological approaches to examine the role of cAMP-dependent regulation of the sinoatrial pacemaker channel HCN4. Dissertation, LMU Munich Available from: <a target="_blank" href="https://edoc.ub.uni-muenchen.de/24431/1/Brox_Verena.pdf">https://edoc.ub.uni-muenchen.de/24431/1/Brox_Verena.pdf</a> (2019)</li><li>Just, A., Faulhaber, J., Ehmke, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Autonomic+cardiovascular+control+in+conscious+mice.">Autonomic cardiovascular control in conscious mice.</a> American Journal of Physiology-Regulatory, Integrative and Comparative Physiology. 279 (6), 2214-2221 (2000).</li><li>Parati, G., Di Rienzo, M., Mancia, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=How+to+measure+baroreflex+sensitivity:+from+the+cardiovascular+laboratory+to+daily+life.">How to measure baroreflex sensitivity: from the cardiovascular laboratory to daily life.</a> Journal of Hypertension. 18 (1), 7-19 (2000).</li><li>Robbe, H. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessment+of+baroreceptor+reflex+sensitivity+by+means+of+spectral+analysis.">Assessment of baroreceptor reflex sensitivity by means of spectral analysis.</a> Hypertension. 10 (5), 538-543 (1987).</li><li>Pinna, G. D., Maestri, R., Raczak, G., La Rovere, M. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measuring+baroreflex+sensitivity+from+the+gain+function+between+arterial+pressure+and+heart+period.">Measuring baroreflex sensitivity from the gain function between arterial pressure and heart period.</a> Clinical Science. 103 (1), 81-88 (2002).</li><li>Pinna, G. D., Maestri, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=New+criteria+for+estimating+baroreflex+sensitivity+using+the+transfer+function+method.">New criteria for estimating baroreflex sensitivity using the transfer function method.</a> Medical and Biological Engineering and Computing. 40 (1), 79-84 (2002).</li><li>Laude, D., Baudrie, V., Elghozi, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Applicability+of+recent+methods+used+to+estimate+spontaneous+baroreflex+sensitivity+to+resting+mice.">Applicability of recent methods used to estimate spontaneous baroreflex sensitivity to resting mice.</a> American Journal of Physiology-Regulatory, Integrative and Comparative Physiology. 294 (1), 142-150 (2008).</li><li>Ma, X., Abboud, F. M., Chapleau, M. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analysis+of+afferent,+central,+and+efferent+components+of+the+baroreceptor+reflex+in+mice.">Analysis of afferent, central, and efferent components of the baroreceptor reflex in mice.</a> American Journal of Physiology-Regulatory, Integrative and Comparative Physiology. 283 (5), 1033-1040 (2002).</li><li>Fleming, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Impaired+Baroreflex+Function+in+Mice+Overexpressing+Alpha-Synuclein.">Impaired Baroreflex Function in Mice Overexpressing Alpha-Synuclein.</a> Frontiers in Neurology. 4 (103), (2013).</li></ol>

משמעות השיטה ביחס לשיטות חלופיות בעבודה הנוכחית אנו מציגים פרוטוקול מפורט לכימות BRS ספונטני בשיטת הרצף. גישה זו משתמשת בשינויים ספונטניים של BP ורפלקס HR הנמדדים באמצעות טלמטריה של אק"ג ו-BP. היתרון בשיטה זו הוא שניתן לרשום את שני הפרמטרים בבעלי חיים מודעים, נעים בחופשיות וללא מעצורים מבלי להפריע לבעלי חיים על ידי כניסה לחדר בו מבוצעות המדידות או אפילו על ידי אינטראקציה פיזית הנדרשת להזרקת סמים. נקודה זו חשובה מאוד מכיוון שהוכח בבירור כי הפרעות כאלה מפריעות באופן חמור להקלטות משאבי אנוש ו- BP. לדוגמה, הזרקת תרופות דורשת קיבוע של העכברים, מה שגורם לתגובת לחץ מקסימלית המגבירה את HR עד 650-700 פעימות לדקה. כדי לעקוף את תגובות הלחץ הללו, BRS נקבע בעבר בעכברים מורדמים. עם זאת, חומרי הרדמה סטנדרטיים המשמשים ברפואה וטרינרית כגון קטמין/קסילזין או איזופלורן גורמים לברדיקרדיה ומשפיעים על תגובות רפלקס אוטונומיות, ומגבילים את תוקפן של גישות אלה ואת פרשנות התוצאות. כדי להתגבר חלקית על מגבלות אלה נעשה שימוש במכשירים מושתלים להעברת תרופות, כלומר משאבות אוסמוטיות, שיכולות לשחרר תרופות לחלל הצפק. עם זאת, עם משאבות אוסמוטיות לא ניתן להחיל בולוס של מינון מוגדר של תרופה המגבילה את היישום של מכשירים כאלה. לחלופין, צנתרי עירוי מורכבים17 ניתן להשתיל בעכברים על מנת לתת תרופות. עם זאת, צנתרים אלה קשים לטיפול ודורשים מיומנויות כירורגיות דומות לאלה הנדרשות להשתלת מכשירים טלמטריים, תוך הפקת תוצאות מדעיות פחותות בהשוואה למדידות של BRS ספונטני. לצד הבעיות הטכניות הקשורות למדידת BRS באמצעות הזרקת תרופות, ישנן כמה מגבלות הקשורות לפעולת התרופה כשלעצמה. גישות מסורתיות לקביעת BRS כוללות זריקות בולוס של תרופות vasoactive. עם זאת, הזרקת בולוס של מכווצי כלי דם (למשל, פנילפרין) או מרחיבי כלי דם (למשל, נתרן nitroprusside) נחשבו גירוי מוגזם ולא פיזיולוגי להסתגלות רפלקס HR לשינויים BP18. ניתן לכמת את הפעילות הספונטנית של רפלקס הברצפטור גם באמצעות שיטות ספקטרליות. אחת השיטות הללו מעריכה BRS בתחום התדרים על ידי חישוב היחס בין שינויים בדופק לשינויים בלחץ הדם בתחום תדרים מסוים18,19. שיטות ספקטרליות אחרות כרוכות בקביעת פונקציית ההעברה של BP ו- HR או בכימות הקוהרנטיות בין BP ל- HR20,21. שיטות אלה דורשות גם רכישה טלמטרית של פרמטרים ספונטניים של BP ו- HR ובעוד שהן מתאימות לקביעת BRS ספונטני, הן דורשות כלים חישוביים אינטנסיביים ומאתגרות ליישום. יתר על כן, כל השיטות הספקטרליות סובלות מהמגבלה שאותות לא נייחים מונעים יישום של שיטות ספקטרליות. בפרט, שיאים ספקטרליים הנגרמים על ידי מקצבי נשימה יכולים להיות מופחתים בחולים אנושיים על ידי בקשה מהמטופל להפסיק לנשום, בעוד שזה כמובן לא אפשרי בעכברים. לכן, יחס האות לרעש הוא לעתים קרובות נמוך למדי בעכברים. בהתחשב במגבלות השיטות שנדונו לעיל, אנו מעדיפים את שיטת הרצף לקביעת BRS בעכברים. יתרון ניכר של שיטה זו הוא העובדה שמדובר בטכניקה לא פולשנית המספקת נתונים על BRS ספונטני בתנאי אמת22. נקודה חשובה נוספת היא שמשך הרצפים המנותחים בשיטת הרצף קצר למדי, וכולל 3-5 פעימות. ויסות רפלקס של HR על ידי עצב vagal הוא מהיר מאוד היטב בתוך מסגרת הזמן של רצפים אלה. לכן, שיטת הרצף מתאימה היטב להעריך את תרומתו של העצב הווגאלי ל- BRS. לעומת זאת, הוויסות של מערכת העצבים הסימפתטית איטי בהרבה. למעשה, במהלך רצפים קצרים אלה ניתן להניח שהפעילות של מערכת העצבים הסימפתטית היא כמעט קבועה. לכן, השיטה מותאמת אישית כדי לזהות באופן סלקטיבי שינויים רפלקס של HR מונע על ידי פעילות עצב התועה.
פרשנות נתוני BRS לצורך פענוח של תפקוד לקוי של BRS או נתוני BRS כשלעצמם, חשוב לקחת בחשבון את הרמות התפקודיות האינדיבידואליות המעורבות ברפלקס הברצפטור. ברמה העצבית, מרכיבים רגשיים, מרכזיים או תוססים של הרפלקס עשויים להיות מושפעים23. ברמה הקרדיווסקולרית, היענות מופחתת או מוגזמת של הצומת הסינואפרוזדורי לקלט ANS עשויה להיות נוכחת11,24. שינוי בכל רמה יכול להוביל לשינויים ב- BRS. על מנת לנתח האם מנגנונים עצביים ו / או לבביים אחראים לשינויים שנצפו ב- BRS, ניתן להשתמש בגישות למחיקת גנים ספציפיים ללב או נוירון, הפלות או עריכת גנים.
שלבים קריטיים בפרוטוקול השלב המתוחכם והקריטי ביותר בפרוטוקול זה הוא הכנה וקנולציה של עורק התרדמה השמאלי (שלב 2.3). המתח של תפר החסימה הקאודלי צריך להיות גבוה מספיק כדי לעצור לחלוטין את זרימת הדם לפני קנולציה. אחרת, אפילו דליפה קטנה של דם במהלך קנולציה יכולה להגביל מאוד את הראות או אפילו לגרום לעכבר לדמם למוות. קנולציה צריכה להיות מוצלחת בניסיון הראשון. עם זאת, עם כישלון הניסיון הראשון, עדיין ניתן לנסות בזהירות קנולציה.
חתך קו האמצע והתעלה התת עורית מהצוואר לאגף השמאלי (שלב 2.3) חייבים להיות גדולים מספיק כדי להכניס את המשדר בקלות ללא כוח, אך חייבים גם להיות קטנים ככל האפשר כדי לשמור על המשדר במקומו. אחרת, יהיה צורך לנעול אותו למקומו עם חומר תפר או דבק רקמות. מאז עכברים יש עור עדין מאוד, נמק של העור יכול להתרחש אם המנהרה עבור המשדר הוא קטן מדי.
אם אלקטרודות האק"ג ארוכות מכדי להיכנס לתעלה התת עורית (שלב 2.4), יש צורך ליצור קצה חדש על ידי קיצור האלקטרודה לאורך מתאים. האלקטרודה חייבת לשכב שטוחה כנגד הגוף לכל אורך העופרת. אלקטרודות ארוכות מדי יפריעו לבעלי החיים והם ינסו לפתוח את הפצע כדי להסיר את המשדר, וכתוצאה מכך סיכון לגירוי רקמות ולחישה של הפצע. מוליכים קצרים מדי ניתנים כמובן להארכה וייתכן שבמקרה זה לא ניתן למקם את האלקטרודות באופן כזה שהן מתאימות לתצורת איינתובן II. לכן אנו ממליצים לקבוע את האורך האופטימלי של מוליכי האק"ג על עכבר מת מאותו מין, משקל ורקע גנטי.
יש לתת לעכברים זמן החלמה ארוך יותר לאחר השתלת המשדר אם אין להם שעון ביולוגי תקין וזה לא הפנוטיפ של קו העכבר הנחקר (שלב 2.7). סיבה נוספת להפרעות בשעון הביולוגי יכולה להיות בידוד אקוסטי לקוי של מתקן בעלי החיים או אנשי הצוות הנכנסים לחדר במהלך המדידה.
ניתוח נתוני ECG, BP ו- BRS הוא ישר קדימה (שלב 2.8). הצעד הקריטי ביותר הוא להוציא פעימות חוץ רחמיות, הפסקות סינוסים, פרקים הפרעות קצב או קטעים עם אותות באיכות נמוכה מניתוח נתונים.

רפלקס הברורצפטור העורקי הוא מערכת בקרת המשוב העיקרית בבני אדם המספקת שליטה לטווח קצר - ואוליגם לטווח ארוך יותר 1,2 - על לחץ הדם העורקי (ABP). רפלקס זה חוצץ הפרעות ב- BP המתרחשות בתגובה לגורמים פיזיולוגיים או סביבתיים. הוא מספק שינויים רפלקס מיידיים בקצב הלב, נפח שבץ והתנגדות עורקים היקפית כוללת. מקורו של הרפלקס בקצות העצבים התחושתיים בקשת אבי העורקים ובסינוסים של התרדמה. מסופי עצבים אלה מרכיבים את הברצפטורים העורקיים. הסומטה של מסופי העצבים בקשת אבי העורקים ממוקמים בגנגליון הנודוזה ואילו אלה של מסופי העצבים בסינוס התרדמה ממוקמים בגנגליון הפטרוסלי. הרפלקס מופעל על-ידי עלייה בלחץ הדם, אשר מותחת ומפעילה את קצות העצבים של הבררצפטור (איור 1A). ההפעלה גורמת למטחים פוטנציאליים לפעולה המועברים באופן מרכזי דרך מדכא אבי העורקים האפרנטי ועצבי סינוס התרדמה לגרעיני גזע המוח הקרדיווסקולריים כגון גרעין טרקטוס סוליטרי והגרעין הגבי של העצב הואגלי. שינויים בפעילות העצבית האפרנטית בתורו מווסתים את הפעילות האוטונומית הגמישה. פעילות מוגברת של עצבי baroreceptor מפחיתה את הפעילות הסימפתטית ומגבירה את הפעילות העצבית הפאראסימפתטית. לפיכך, ההשלכות של הפעלת baroreceptors הן ירידה בקצב הלב, תפוקת הלב, ואת התנגדות כלי הדם אשר יחד לנטרל ולאגור את העלייה בלחץ הדם3. לעומת זאת, ירידה בפעילות העצבים הברורצפטורים מגבירה את הפעילות הסימפתטית ומפחיתה את הפעילות העצבית הפאראסימפתטית, מה שמגביר את קצב הלב, תפוקת הלב ותנגודת כלי הדם ובכך מנטרל את הירידה בלחץ הדם.
מחקרים רבים בבני אדם ובבעלי חיים הוכיחו כי ניתן להתאים את רפלקס הברורצפטור בתנאים פיזיולוגיים כגון פעילות גופנית4, שינה5, לחץ חום6 או הריון7. בנוסף, ישנן עדויות לכך שהברפלקס נפגע באופן כרוני במחלות לב וכלי דם, כגון יתר לחץ דם, אי ספיקת לב, אוטם שריר הלב ושבץ. למעשה, תפקוד לקוי של baroreflex משמש גם כסמן פרוגנוסטי במספר מחלות לב וכלי דם 8,9,10. יתר על כן, תפקוד לקוי של baroreflex קיים גם הפרעות של ANS. בהתחשב בחשיבותו של רפלקס הברורצפטור למצבי בריאות ומחלות, הערכת in vivo של רפלקס זה היא מרכיב חשוב במחקר אוטונומי וקרדיווסקולרי עם השלכות קליניות חמורות מסוימות.
קווי עכברים גנטיים הם כלים חיוניים במחקר לב וכלי דם. מחקרי In vivo של קווי עכברים כאלה מספקים תובנות חשובות על פיזיולוגיה ופתופיזיולוגיה של הלב וכלי הדם, ובמקרים רבים משמשים כמערכות מודל פרה-קליניות למחלות לב וכלי דם. כאן אנו מספקים פרוטוקול לרישום טלמטרי in vivo ECG ו-BP בעכברים מודעים, בלתי מרוסנים ונעים בחופשיות, ומתארים כיצד ניתן לקבוע רגישות ל-baroreflex מהקלטות אלה באמצעות שיטת הרצף (איור 1B). השיטה המיושמת נקראת שיטת הרצף, מכיוון שסדרת פעימות לפעימה של מרווחי BP סיסטולי (SBP) ו- RR נבדקות עבור רצפים קצרים של שלוש פעימות או יותר במהלך עלייה או ירידה ספונטנית ב- SBP עם הסתגלות רפלקס של HR. שיטה זו היא תקן הזהב לקביעת רגישות baroreflex מאז רק מנגנוני רפלקס ספונטניים נחקרים. הטכניקה עדיפה על טכניקות ישנות יותר שכללו הליכים פולשניים כגון הזרקה של תרופות vasoactive כדי לגרום לשינויים BP.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/62101/62101fig1v2.jpg"> איור 1: ייצוג סכמטי של הערכת רגישות baroreflex ו- baroreflex באמצעות שיטת הרצף . (A) מהלך הברפלקס במהלך עלייה חריפה בלחץ הדם. עלייה קצרת טווח ב- ABP מורגשת על ידי baroreceptors הממוקם בקשת אבי העורקים ובסינוס התרדמה. מידע זה מועבר למערכת העצבים המרכזית וגורם לירידה בפעילות העצבים הסימפתטיים במקביל לעלייה בפעילות הפאראסימפתטית. שחרור אצטילכולין מקצות העצבים הממוקמים באזור הצומת הסינואפרוזדורי גורם לירידה של cAMP השליח השני בתאי קוצב הצומת הסינואפרוזדורי ומכאן לירידה בקצב הלב. לירידה קצרת טווח בלחץ הדם יש השפעה הפוכה. (B) מעקב סכמטי של BP במהלך רצף למעלה (לוח שמאלי עליון) ורצף למטה (לוח ימני עליון) של שלוש פעימות רצופות. רצף למעלה קשור לעלייה מקבילה במרווחי RR (פאנל שמאלי תחתון) המקבילה לירידה ב- HR. רצף למטה קשור לירידה מקבילה במרווחי RR (פאנל ימני תחתון) המקבילה לעלייה במשאבי אנוש. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62101/62101fig1v2large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.</a>

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr >
			<td >Acepromazine maleate (Tranquisol KH) Solution Injectable 0.5 mg/mL</td>
			<td >CP-Pharma, Germany</td>
			<td >1229</td>
			<td >anesthesia</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >B.Braun Injekt-F 1 mL syringe</td>
			<td >Wolfram Droh GmbH, Germany</td>
			<td >9166017V</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Bepanthen eye and nose ointment</td>
			<td >Bayer AG, Germany</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Blunt dissecting scissors</td>
			<td >Fine Science Tools GmbH, Germany</td>
			<td >14078-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Carprofen (Carprosol) 50 mg/mL</td>
			<td >CP-Pharma, Germany</td>
			<td >115</td>
			<td>preemptive and post-operative pain relief</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Cutasept F skin desinfectant</td>
			<td >BODE Chemie GmbH, Germany</td>
			<td >9803650</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Cotton Tipped Applicator sterile</td>
			<td >Paul Boettger GmbH &#38; Co. KG, Germany</td>
			<td>09-119-9100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Forceps - Micro-Blunted Tips</td>
			<td >Fine Science Tools GmbH, Germany</td>
			<td >11253-25</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Forceps - straight</td>
			<td >Fine Science Tools GmbH, Germany</td>
			<td >11008-13</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Gauze swabs with cut edges, 7.5x7.5 cm, cotton</td>
			<td >Paul Hartmann AG. Germany</td>
			<td >401723</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >HD&#8209;X11, Combined telemetric ECG and BP transmitters&#160;</td>
			<td >Data Sciences International, United States</td>
			<td ></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Homothermic blanket system with flexible probe</td>
			<td >Harvard Apparatus, United States</td>
			<td ></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Hot bead sterilizer</td>
			<td >Fine Science Tools GmbH, Germany</td>
			<td >18000-45</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Ketamine 10%</td>
			<td >Ecuphar GmbH, Germany</td>
			<td >799-760</td>
			<td>anesthesia</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Magnet</td>
			<td >Data Sciences International, United States</td>
			<td ></td>
			<td>transmitter turn on/off</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Needle holder, Olsen-Hegar with suture cutter</td>
			<td >Fine Science Tools GmbH, Germany</td>
			<td >12502-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Needle single use No. 17, 0.55 x 25 mm</td>
			<td >Henke-Sass Wolf GmbH, Germany</td>
			<td>4710005525</td>
			<td>24 G needle</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Needle single use No. 20, 0.40 x 20 mm</td>
			<td >Henke-Sass Wolf GmbH, Germany</td>
			<td >4710004020</td>
			<td>27 G needle</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Needle-suture combination, sterile, absorbable (6-0 USP, metric 0.7, braided)</td>
			<td >Resorba Medical, Germany</td>
			<td >PA10273</td>
			<td>lead fixation</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Needle-suture combination, sterile, silk (5-0 USP, metric 1.5, braided)</td>
			<td >Resorba Medical, Germany</td>
			<td >4023</td>
			<td>skin closure</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >OPMI&#160;1FR&#160;pro,&#160;Dissecting&#160;microscope</td>
			<td >Zeiss, Germany</td>
			<td ></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Pilca depilatory mousse</td>
			<td >Werner Schmidt Pharma GmbH, Germany</td>
			<td>6943151</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >PVP-Iodine hydrogel 10%</td>
			<td >Ratiopharm, Germany</td>
			<td ></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Ringer&#39;s lactate solution</td>
			<td >B. Braun Melsungen AG, Germany</td>
			<td >401-951</td>
			<td>&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Sensitive plasters, Leukosilk</td>
			<td >BSN medical GmbH, Germany</td>
			<td >102100</td>
			<td>surgical tape</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Sodium chloride solution 0.9% sterile Miniplasco Connect 5 ml</td>
			<td >B. Braun Melsungen AG, Germany</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Surgibond tissue adhesive</td>
			<td >SMI, Belgium</td>
			<td >ZG2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Suture, sterile, silk, non-needled (5-0 USP, metric 1 braided)</td>
			<td >Resorba Medical, Germany</td>
			<td >G2105</td>
			<td>lead preparation, ligation sutures</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Trimmer, Wella Contura type 3HSG1</td>
			<td >Procter &#38; Gamble</td>
			<td ></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Vessel Cannulation Forceps</td>
			<td >Fine Science Tools GmbH, Germany</td>
			<td >18403-11</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Xylazine (Xylariem) 2%</td>
			<td >Ecuphar GmbH, Germany</td>
			<td >797469</td>
			<td>anesthesia</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Data acquisition and analysis</td>
			<td >Source</td>
			<td ></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >DSI Data Exchange Matrix</td>
			<td >Data Sciences International, United States</td>
			<td ></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >DSI Dataquest ART 4.33</td>
			<td >Data Sciences International, United States</td>
			<td ></td>
			<td>data aquisition software</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >DSI Ponemah</td>
			<td >Data Sciences International, United States</td>
			<td ></td>
			<td>data aquisition software</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >DSI PhysioTel HDX-11 for mice</td>
			<td >Data Sciences International, United States</td>
			<td ></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >DSI PhysioTel receivers RPC1</td>
			<td >Data Sciences International, United States</td>
			<td ></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >ecgAUTO v3.3.5.11</td>
			<td >EMKA Technologies</td>
			<td ></td>
			<td>ECG and BP analysis software</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Microsoft Excel</td>
			<td >Microsoft Corporation, United States</td>
			<td ></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

implantation of combined telemetric ecg and blood pressure transmitters to determine spontaneous baroreflex sensitivity in conscious mice

לחץ דם (BP) וקצב לב (HR) נשלטים שניהם על ידי מערכת העצבים האוטונומית (ANS) והם שזורים זה בזה באופן הדוק עקב מנגנוני רפלקס. הברופלקס הוא מנגנון הומיאוסטטי מרכזי לנטרול שינויים חריפים וקצרי טווח ב-BP העורקי ולשמירה על BP בטווח פיזיולוגי צר יחסית. BP מורגש על ידי baroreceptors הממוקם בקשת אבי העורקים ובסינוס התרדמה. כאשר BP משתנה, אותות מועברים למערכת העצבים המרכזית ולאחר מכן מועברים לענפים הפאראסימפתטיים והסימפתטיים של מערכת העצבים האוטונומית כדי להתאים את HR. עלייה ב- BP גורמת לירידה רפלקס ב- HR, ירידה ב- BP גורמת לעלייה רפלקס ב- HR.
רגישות Baroreflex (BRS) היא הקשר הכמותי בין שינויים ב- BP עורקי לבין שינויים מקבילים ב- HR. מחלות לב וכלי דם קשורות לעיתים קרובות לתפקוד לקוי של baroreflex. במחקרים שונים BRS מופחת דווח למשל באי ספיקת לב, אוטם שריר הלב או מחלת עורקים כליליים. 
קביעת BRS דורשת מידע הן מ- BP והן מ- HR, אשר ניתן להקליט בו זמנית באמצעות מכשירים טלמטריים. ההליך הכירורגי מתואר החל מהחדרת חיישן הלחץ לעורק התרדמה השמאלי ומיקום קצהו בקשת אבי העורקים כדי לפקח על לחץ העורקי ולאחר מכן מיקום תת עורי של המשדר ואלקטרודות האק"ג. אנו מתארים גם טיפול נמרץ לאחר הניתוח וניהול משככי כאבים. לאחר תקופה של שבועיים של התאוששות לאחר הניתוח, רישומי אק"ג ו-BP ארוכי טווח מבוצעים בעכברים בהכרה וללא מעצורים. לבסוף, אנו כוללים דוגמאות של הקלטות באיכות גבוהה וניתוח של רגישות baroreceptor ספונטני באמצעות שיטת רצף.

Watch this Scientific Journal Video about Implantation of Combined Telemetric ECG and Blood Pressure Transmitters to Determine Spontaneous Baroreflex Sensitivity in Conscious Mice at JoVE.com

Implantation of Combined Telemetric ECG and Blood Pressure Transmitters to Determine Spontaneous Baroreflex Sensitivity in Conscious Mice

הברופלקס הוא מנגנון ויסות קצב הלב על ידי מערכת העצבים האוטונומית בתגובה לשינויים בלחץ הדם. אנו מתארים טכניקה כירורגית להשתלת משדרי טלמטריה למדידה רציפה וסימולטנית של אלקטרוקרדיוגרמה ולחץ דם בעכברים. זה יכול לקבוע רגישות ספונטנית baroreflex, סמן פרוגנוסטי חשוב למחלות לב וכלי דם.

השתלת משדרי אק"ג ולחץ דם טלמטריים משולבים לקביעת רגישות ספונטנית לברפלקס בעכברים מודעים

Blood pressure (BP) and heart rate (HR) are both controlled by the autonomic nervous system (ANS) and are closely intertwined due to reflex mechanisms. ...

רגישות Baroreflex מתארת את הקשר בין שינויים בלחץ הדם העורקי לבין שינויים רפלקס בקצב הלב. כאשר לחץ הדם עולה, קצב הלב יורד ולהיפך. האלקטרוקרדיוגרמה הטלמטרית המשולבת ומדידות לחץ הדם בעכברים מודעים מאפשרות קביעת רגישות לברפלקס.היתרון העיקרי של טכניקה זו על פני שיטות ישנות יותר לקביעת רגישות baroreflex הוא שהיא מודדת את הרפלקס הספונטני. העכברים ערים ואין צורך לרסן אותם. אין צורך בהליכים פולשניים כגון הזרקת תרופות vasoactive כדי לגרום לשינויים בלחץ הדם.baroreflex יכול לשמש לריבוד הסיכון של חולים עם מחלות לב כגון יתר לחץ דם עורקי, אוטם שריר הלב, ואי ספיקת לב. שינויים פתולוגיים של רגישות baroreflex קשורים בסיכון מוגבר לתמותה לבבית. לכן זהו סמן פרוגנוסטי חשוב למחלות לב וכלי דם.הפרטים המיקרוכירורגיים כגון ניקוב וקנולציה של עורק התרדמה הם השלבים המאתגרים ביותר של הפרוטוקול. יש להקפיד על מתח מספיק על התפרים כדי לעצור זמנית את זרימת הדם ולהרים מעט את העורק לצורך קנולציה. התחל באמצעות גוזם כדי לגלח את האזור הכירורגי של עכבר מורדם מתחת לסנטר לכיוון שרירי החזה הרוחביים.לאחר מיקום העכבר במצב שכיבה, יש למרוח משחת עיניים כדי להגן על עיני החיה במהלך ההרדמה. יש למרוח קרם דפילטורי על אזור הניתוח שגולח בעבר. לאחר שלוש עד ארבע דקות, יש להסיר את השיער ואת קרם השיער באמצעות פד צמר גפן ומים חמימים, ולוודא כי העור נקי וללא שאריות שיער או קרם, כך שהפצע לא יהיה מזוהם במהלך הניתוח.בצע חתך קו אמצע ישר של 1 עד 1.5 ס"מ דרך עור הצוואר החל מיד מתחת לסנטר. יצירת חלל תת עורי משני צידי החתך על ידי הפרדת העור מרקמת החיבור שמתחתיה באמצעות מספריים לדיסקציה קהה, תוך זהירות שלא לצבוט את העור חזק מדי עם המלקחיים, מה שעלול לגרום לנמק ולהוביל לריפוי פצע לקוי לאחר הניתוח. להפריד את בלוטות parotid ו submandibular באמצעות אפליקטורים קצה כותנה לחשוף את השרירים מעל קנה הנשימה.משוך את בלוטת הרוק השמאלית עם מלקחיים מעוקלים כדי לזהות את עורק התרדמה השמאלי הממוקם לרוחב לקנה הנשימה. בזהירות לנתח את עורק התרדמה מרקמה סמוכה באמצעות מלקחיים מעוקלים, להיות זהיר מאוד לא לפגוע עצב vagal כי הוא פועל לאורך כלי השיט. יש להמשיך בדיסקציה קהה כדי לחשוף את עורק התרדמה השמאלי לאורך של כ-10 מילימטרים ולהפריד אותו לחלוטין מהפאשיה של כלי הדם ומהעצב התועה.מעבירים תפר משי שאינו נספג חמש על אפס מתחת לחלק המבודד של עורק התרדמה תוך הרמה קלה של כלי הדם עם מלקחיים מעוקלים כדי להפחית את החיכוך בין התפרים לעורק התרדמה. מניחים את התפר באופן גולגולתי רק בסמיכות לביפורקציה של עורק התרדמה. לאחר מכן יוצרים קשר וקושרים אותו לצמיתות את הכלי.תקן את שני הקצוות של תפר חסימת הגולגולת לשולחן הניתוח עם סרט ניתוח. מעבירים תפר חסימה שני מתחת לעורק התרדמה ומניחים אותו במרחק של כחמישה מילימטרים לתפר הגולגולת, תוך קשירת קשר רופף. תקן את שני קצוות התפרים עם סרט כירורגי.מקמו תפר שלישי בין תפר החסימה הגולגולתי לתפר החסימה הקאודלי כדי לשמור על הצנתר במקומו תוך כדי קנולציה של העורק וליצור קשר רופף. משוך בעדינות את תפר החסימה הקאודלי וקבע אותו במתח כדי לעצור זמנית את זרימת הדם ולהרים מעט את העורק. בזהירות לחדור את העורק פרוקסימלי לתפר חסימת הגולגולת עם המחט המכופפת.תוך כדי הגבהה קלה של עורק התרדמה עם המחט המכופפת, אוחזים את הצנתר במלקחיים לקנולציית כלי דם, מכניסים אותו לנקב הקטן ונותנים לו להחליק לאט לתוך כלי השיט. במקביל, משכו בעדינות לאחור את המחט המכופפת. כאשר הצנתר מגיע לתפר החסימה הקאודלי, הדקו מעט את התפר הבטוח כדי לשמור על הצנתר במקומו.שחררו את תפר החסימה הקאודלי כך שניתן יהיה להזיז את הצנתר עוד יותר עד שקצהו ממוקם בקשת אבי העורקים. לאחר מיקום נכון, לאבטח את הקטטר עם כל שלושת התפרים לחתוך את הקצוות קצר ככל האפשר מבלי למשוך את הקשרים חזק מדי. יוצרים תעלה תת עורית מהצוואר המכוונת לכיוון האגף השמאלי של החיה ויוצרים כיס קטן באמצעות מספריים קטנים וקהים לניתוח.השקו את המנהרה במזרק של מיליליטר אחד מלא בתמיסת נתרן כלורי סטרילית חמה של 0.9% והכניסו כ-300 מיקרוליטר של התמיסה לתוך השקית. בזהירות להרים את העור עם מלקחיים קהה ולהכניס את גוף מכשיר המשדר לתוך השקית, נזהר לא למשוך את קטטר לחץ הדם מתוך עורק התרדמה. יוצרים תעלה דקה לשריר החזה הימני בעזרת מספריים מנתחים קהים, ומכניסים את העופרת השלילית למנהרה באמצעות מלקחיים קהים.תקן את הקצה הסופי של העופרת באמצעות תפר לשריר החזה באמצעות חומר תפר נספג שש על אפס. יוצרים לולאה בעופרת החיובית, מקמים את קצהו באזור הצלעות הקאודליות השמאליות, ומבססים את מיקומה באמצעות תפר נספג בגודל שש על אפס. סגור את העור עם קשרים בודדים באמצעות חומר תפר חמש על אפס שאינו נספג.בנוסף, יש למרוח כמות קטנה של דבק רקמות על כל קשר כדי למנוע מהחיה לנשוך את התפר ולמנוע הלחשה. החל 10% povidone יוד הידרוג'ל על הפצע כדי למנוע זיהום הפצע במהלך שלב ההחלמה. להקלה מקדימה על כאבים, הזריקו לקרפרופן נתרן כלורי 0.9% באופן תת-עורי בזמן שהעכבר עדיין תחת הרדמה.מקמו מחצית מהכלוב על משטח חימום המכוון לטמפרטורה של 36 מעלות צלזיוס למשך 12 שעות לאחר הניתוח והעבירו את העכבר לאזור החם כך שלבעל החיים תהיה אפשרות להישאר באזור החם או לעבור לחלק הקריר יותר של הכלוב כשהוא ער. לאחר איסוף הנתונים, בדקו את מעקב לחץ הדם והאק"ג ובדקו רצף של שלוש שעות של פעילות נמוכה. כדי לבצע רגישות baroreflex או ניתוח BRS, פתח את לוח ניתוח BRS.בדוק ידנית כל רצף המוצג בלוח ולא כלל פעימות חוץ רחמיות, הפסקות סינוסים, אירועים אריתמיים או נתונים רועשים כדי להוציא אותם בהצלחה מהניתוח. פרוטוקול זה יכול לשמש לניתוח BRS מדויק ולמגוון רחב של פרמטרים הנגזרים מאק"ג או BP כמו מרווחי אק"ג, השתנות BP וזיהוי הפרעות קצב. עכבר בריא שהתאושש מספיק מניתוח מראה עלייה פיזיולוגית של פעילות, קצב לב ו- BP במהלך השלב החשוך.שיטת הרצף שימשה לקביעת BRS שבו לחץ הדם הסיסטולי ומרווחי RR נבדקו על בסיס פעימה לפעימה במהלך רצפים קצרים של שלוש פעימות או יותר עם עלייה או ירידה ספונטנית בלחץ הדם הסיסטולי. כדי להעריך את המתאם בין RR ולחץ דם סיסטולי, שני הפרמטרים הותוו זה כנגד זה וחושב שיפוע קו הרגרסיה הליניארי עבור כל רצף. המספר הכולל של רצפים לכל 1, 000 פעימות ורווח ממוצע של BRS ספונטני המשתקף על ידי שיפועי קווי הרגרסיה הליניארית המחושבים מה- RR על ידי יחס לחץ הדם הסיסטולי הם פרמטרים מעניינים בניתוח.במהלך שלבים של פעילות גבוהה יותר, איכות האות עשויה לרדת ולגרום לרעש. קביעת שני ערכים נמוכים למקדם המתאם המינימלי גורמת גם לגילויים שגויים של רצפים שאינם משקפים פעילות baroreflex, אלא נובעים מחרוזים אריתמיים. לצורך פענוח נתוני רגישות הברצפטור, חשוב לקחת בחשבון את הרמות התפקודיות המעורבות ברפלקס הברורצפטור (baroreceptor reflex).ברמה העצבית, מרכיבים רגשיים, מרכזיים או תוססים של הרפלקס עשויים להשתנות. ברמה הקרדיווסקולרית, היענות מופחתת או מוגברת של בלוטת הסינוס עלולה לגרום לשינויים ברגישות הברורצפטור (baroreceptor). עם נתונים אלה, לא ניתן רק לקבוע רגישות baroreflex ואת הפונקציה של בלוטת הלב sinoatrial, אלא גם מגוון רחב של א.ק.ג ופרמטרים הנגזרים מלחץ דם.אלה כוללים, למשל, לחץ דם סיסטולי ודיאסטולי, מרווחי א.ק.ג, השתנות קצב הלב או מקצבי ציקדה.

Research

JoVE Journal

Medicine

Pressure Controlled Ventilation to Induce Acute Lung Injury in Mice

לחץ אוורור מבוקר כדי לגרום פגיעה ריאות חריפה על עכברים

Murine models are extensively used to investigate acute injuries of different organs systems (1-34). Acute lung injury (ALI), which occurs with prolonged ...

Hyperinsulinemic-euglycemic Clamps in Conscious, Unrestrained Mice

Hyperinsulinemic-euglycemic Clamps ב, עכברים מודעת בלתי מרוסנת

Type 2 diabetes is characterized by a defect in insulin action. The hyperinsulinemic-euglycemic clamp, or insulin clamp, is widely considered the "gold ...

Implantation of Radiotelemetry Transmitters Yielding Data on ECG, Heart Rate, Core Body Temperature and Activity in Free-moving Laboratory Mice

השרשה של משדרי Radiotelemetry מניבים נתוני אק&quot;ג, קצב הלב, טמפרטורת הגוף Core ו פעילות חינם נעים עכברי מעבדה

The laboratory mouse is the animal species of choice for most biomedical research, in both the academic sphere and the pharmaceutical industry. Mice are a ...

Femoral Arterial and Venous Catheterization for Blood Sampling, Drug Administration and Conscious Blood Pressure and Heart Rate Measurements

צנתור עורקי ורידי הירך עבור דגימה דם, והתרופות ולחץ דם מודעת דרג מדידות הלב

In multiple fields of study, access to the circulatory system in laboratory studies is necessary. Pharmacological studies in rats using chronically ...

Orthotopic Implantation and Peripheral Immune Cell Monitoring in the II-45 Syngeneic Rat Mesothelioma Model

ניטור נייד Orthotopic השרשה והיקפי חיסון במודל השני-45 syngeneic עכברוש מזותליומה

The enormous upsurge of interest in immune-based treatments for cancer such as vaccines and immune checkpoint inhibitors, and increased understanding of ...

Long-term Blood Pressure Measurement in Freely Moving Mice Using Telemetry

מדידת לחץ דם לטווח ארוך בעכברים לנוע בחופשיות באמצעות טלמטריה

During the development of new vasoactive agents, arterial blood pressure monitoring is crucial for evaluating the efficacy of the new proposed drugs. ...

Novel Approach for Simultaneous Recording of Renal Sympathetic Nerve Activity and Blood Pressure with Intravenous Infusion in Conscious, Unrestrained Mice.

בגישה חדשנית עבור הקלטה בו זמנית של פעילות העצבים הסימפתטית כליות, לחץ דם עם עירוי תוך ורידי, בהכרה, עכברים ערככם.

Renal sympathetic nerves contribute significantly to both physiological and pathophysiological phenomena. Evaluating renal sympathetic nerve activity ...

Assessment of Respiratory Function in Conscious Mice by Double-chamber Plethysmography

הערכה של תפקוד מערכת הנשימה בעכברים בהכרה על ידי כפול-תא Plethysmography

Air volume changes created by a conscious subject breathing spontaneously within a body box are at the basis of plethysmography, a technique used to ...

Ultrasound Imaging of the Thoracic and Abdominal Aorta in Mice to Determine Aneurysm Dimensions

אולטראסאונד הדמיה של העורקים בית החזה והבטן בעכברים כדי לקבוע מידות מפרצת

Contemporary high-resolution ultrasound instruments have sufficient resolution to facilitate the measurement of mouse aortas. These instruments have been ...

Implantation of an Isoproterenol Mini-Pump to Induce Heart Failure in Mice

השרשה של מיני משאבה איזופרופיל כדי לגרום לאי ספיקת לב בעכברים

Isoproterenol (ISO), is a non-selective beta-adrenergic agonist, that is used widely to induce cardiac injury in mice. While the acute model mimics ...