Name: implantation of combined telemetric ecg and blood pressure transmitters to determine spontaneous baroreflex sensitivity in conscious mice
Uploaded: 2021-02-14T14:00:00
Duration: 9 min 56 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Implantation of Combined Telemetric ECG and Blood Pressure Transmitters to Determine Spontaneous Baroreflex Sensitivity in Conscious Mice at JoVE.com

この研究は、ドイツ研究財団[FE 1929/1-1およびWA 2597/3-1]の支援を受けました。優れた技術支援を提供してくれたサンドラ・ディルシュルと獣医のアドバイスをしてくれたジュリア・リリングに感謝します。

<ol>
	<li>Landgren, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=On+the+excitation+mechanism+of+the+carotid+baroceptors.">On the excitation mechanism of the carotid baroceptors.</a> Acta Physiologica Scandinavica. 26 (1), 1-34 (1952).</li><li>Heyman, C., Neil, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reflexogenic+areas+of+the+cardiovascular+system.">Reflexogenic areas of the cardiovascular system.</a> British Journal of Surgery. 46 (195), 92 (1958).</li><li>Lu, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+ion+channel+ASIC2+is+required+for+baroreceptor+and+autonomic+control+of+the+circulation.">The ion channel ASIC2 is required for baroreceptor and autonomic control of the circulation.</a> Neuron. 64 (6), 885-897 (2009).</li><li>Fadel, P. 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Dissertation, LMU Munich Available from: <a target="_blank" href="https://edoc.ub.uni-muenchen.de/24431/1/Brox_Verena.pdf">https://edoc.ub.uni-muenchen.de/24431/1/Brox_Verena.pdf</a> (2019)</li><li>Just, A., Faulhaber, J., Ehmke, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Autonomic+cardiovascular+control+in+conscious+mice.">Autonomic cardiovascular control in conscious mice.</a> American Journal of Physiology-Regulatory, Integrative and Comparative Physiology. 279 (6), 2214-2221 (2000).</li><li>Parati, G., Di Rienzo, M., Mancia, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=How+to+measure+baroreflex+sensitivity:+from+the+cardiovascular+laboratory+to+daily+life.">How to measure baroreflex sensitivity: from the cardiovascular laboratory to daily life.</a> Journal of Hypertension. 18 (1), 7-19 (2000).</li><li>Robbe, H. 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代替方法に関するこの方法の意義 本研究では、シーケンス法を用いて自発的なBRSを定量するための詳細なプロトコルを提示する。このアプローチは、ECGおよびBPテレメトリによって測定された自発的な血圧および反射HRの変化を利用します。この方法の利点は、測定が行われる部屋に足を踏み入れることによって、または薬物の注射に必要な物理的相互作用によってさえ、動物を邪魔することなく、意識のある、自由に動く、拘束されていない動物に両方のパラメータを記録できることです。このような障害がHRおよびBPの記録に深刻な干渉を与えることが明確に示されているため、この点は非常に重要です。例えば、薬物の注射はマウスの固定を必要とし、それはHRを650〜700bpmまで増加させる最大ストレス応答を引き起こす。これらのストレス応答を回避するために、BRSは麻酔をかけたマウスにおいて以前に決定されている。しかし、ケタミン/キシラジンやイソフルランなどの獣医学で使用される標準的な麻酔薬は徐脈を誘発し、自律神経反射反応に影響を与えるため、これらのアプローチの妥当性と結果の解釈が制限されています。これらの制限を部分的に克服するために、埋め込み型薬物送達装置、すなわち、腹腔内に薬物を放出することができる浸透圧ポンプが使用された。しかしながら、浸透圧ポンプでは、そのような装置の適用を制限する規定用量の薬物のボーラスを適用することは不可能である。あるいは、複雑な輸液カテーテル17 薬物を投与するためにマウスに移植することができる。ただし、これらのカテーテルは取り扱いが難しく、テレメトリデバイスの埋め込みに必要なものに匹敵する外科的スキルが必要ですが、自発的なBRSの測定と比較して科学的結果は低くなります。薬物の注射を使用したBRSの測定に関連する技術的な問題に加えて、薬物作用自体に関連するいくつかの制限があります。BRSを決定するための伝統的なアプローチには、血管作用薬のボーラス注射が含まれます。しかし、血管収縮薬(例えば、フェニレフリン)または血管拡張薬(例えば、ニトロプルシドナトリウム)のボーラス注射は、BPの変化に対する反射HR適応のための過剰かつ非生理学的刺激と考えられてきた。18.圧受容器反射の自発的活動は、スペクトル法を用いて定量化することもできる。これらの方法の1つは、特定の周波数帯域における心拍数の変化と血圧の変化の比率を計算することにより、周波数領域でBRSを評価します。18,19.他のスペクトル法には、BPとHRの伝達関数の決定、またはBPとHRの間のコヒーレンスの定量化が含まれます。20,21.これらの方法は、自発的なBPおよびHRパラメータのテレメトリ取得も必要とし、自発的なBRSの決定には適していますが、集中的な計算ツールが必要であり、適用が困難です。さらに、すべてのスペクトル法は、非定常信号がスペクトル法の適用を妨げるという制限に悩まされています。特に、呼吸リズムによって誘発されるスペクトルピークは、患者に呼吸を止めるように頼むことによってヒト患者で減少させることができるが、これはマウスでは明らかに不可能である。したがって、マウスでは信号対雑音比が非常に低いことがよくあります。上記の方法の限界を考えると、マウスのBRSを決定するためのシーケンス法を支持します。この方法の大きな利点は、実生活条件下での自発的なBRSに関するデータを提供する非侵襲的手法であるという事実です。22.もう1つの重要な点は、シーケンス法を使用して分析されたシーケンスの持続時間が非常に短く、3〜5拍が含まれることです。迷走神経によるHRの反射調節は非常に速く、これらのシーケンスの時間枠内で十分に可能です。したがって、シーケンス法は、BRSに対する迷走神経の寄与を評価するのに非常に適しています。対照的に交感神経系による調節ははるかに遅い。実際、これらの短いシーケンスの間、交感神経系の活動はほぼ一定であると仮定することができます。したがって、この方法は、迷走神経活動によって駆動されるHRの反射変化を選択的に検出するようにカスタマイズされる。
BRSデータの解釈 BRS機能障害またはBRSデータ自体の解釈のためには、圧受容器反射に関与する個々の機能レベルを考慮することが重要です。ニューロンレベルでは、反射の求心性、中枢性または遠心性の成分が影響を受ける可能性があります23。心血管レベルでは、ANS入力に対する洞房結節の応答性の低下または誇張が存在する可能性があります11,24。各レベルでの変更は、BRS の変更につながる可能性があります。ニューロンおよび/または心臓のメカニズムがBRSの観察された変化の原因であるかどうかを分析するために、心臓またはニューロン特異的な遺伝子欠失、ノックダウンまたは遺伝子編集アプローチを使用できます。
プロトコルの重要なステップ このプロトコルで最も洗練された重要なステップは、左頸動脈の準備とカニューレ挿入です(ステップ2.3)。尾側閉塞縫合糸の張力は、カニューレ挿入前に血流を完全に停止させるのに十分高くなければならない。そうしないと、カニューレ挿入中のわずかな血液漏れでも、視界が大幅に制限されたり、マウスが出血して死亡したりする可能性があります。カニュレーションは最初の試みで成功するはずです。ただし、最初の試行が失敗した場合でも、カニューレ挿入を慎重に再試行することは可能です。
正中線切開と首から左脇腹までの皮下トンネル(ステップ2.3)は、力を入れずに送信機を簡単に導入するのに十分な大きさである必要がありますが、送信機を所定の位置に保つためにできるだけ小さくする必要があります。それ以外の場合は、縫合材料または組織接着剤で所定の位置にロックする必要があります。マウスは非常にデリケートな皮膚を持っているので、送信機のトンネルが小さすぎると皮膚の壊死が起こる可能性があります。
ECG電極が長すぎて皮下トンネルに収まらない場合(ステップ2.4)、電極を適切な長さに短くして新しいチップを形成する必要があります。電極は、リードの全長にわたって本体に対して平らになければなりません。電極が長すぎると動物が邪魔になり、傷口を開いて伝達物質を外そうとし、組織の炎症や創傷裂開のリスクがあります。もちろん、短すぎるリード線は延長できず、この場合、アイントホーフェンIIの構成に対応するように電極を配置できない場合があります。したがって、同じ性別、体重、および遺伝的背景の死んだマウスのECGリードの最適な長さを決定することをお勧めします。
マウスが正常な概日リズムを持たず、これが研究中のマウス系統の表現型ではない場合、伝達物質移植後の回復時間を長くする必要があります(ステップ2.7)。概日リズムの乱れの別の理由は、動物施設または測定中に部屋に入る人員の不十分な音響隔離である可能性があります。
ECG、BP、BRSのデータ分析は簡単です(ステップ2.8)。最も重要なステップは、異所性拍動、洞休止、不整脈エピソード、または低品質の信号を含むセクションをデータ分析から除外することです。

動脈圧受容器反射は、動脈血圧(ABP)の短期的(そしておそらくより長期的な1,2)制御を提供するヒトの主要なフィードバック制御システムです。この反射は、生理学的または環境的トリガーに応答して発生するBPの摂動を緩衝します。心拍数、脳卒中量、および末梢動脈抵抗の迅速な反射変化を提供します。反射は、大動脈弓と頸動脈洞の感覚神経終末に由来します。これらの神経終末は動脈圧受容器を構成する。大動脈弓の神経終末の体細胞は結節神経節に位置し、頸動脈洞の神経終末の体細胞は錐体神経節に位置する。反射は血圧の上昇によって引き起こされ、圧受容器神経終末を伸ばして活性化します(図1A)。活性化は、求心性大動脈圧および頸動脈洞神経を介して、迷走神経の核路および背側核などの心血管脳幹核に中枢的に伝達される活動電位ボレーをもたらす。求心性神経活動の変化は、自律神経遠心性活動を調節します。圧受容器神経の活動の増加は交感神経を低下させ、副交感神経の活動を増加させる。したがって、圧受容器の活性化の結果は、心拍数、心拍出量、および血管抵抗の低下であり、これらは一緒になって血圧の上昇を打ち消し、緩衝します3。対照的に、圧受容器神経の活動が低下すると、交感神経が増加し、副交感神経の活動が低下し、心拍数、心拍出量、血管抵抗が増加し、血圧の低下が相殺されます。
人間と動物での多くの研究は、圧受容器反射が運動4、睡眠5、熱ストレス6、または妊娠7などの生理学的条件下で調整できることを示しました。さらに、圧反射は、高血圧、心不全、心筋梗塞、脳卒中などの心血管疾患で慢性的に障害されているという証拠があります。実際、圧反射機能障害は、いくつかの心血管疾患における予後マーカーとしても利用されている8、9、10。さらに、圧反射の機能不全は、ANSの障害にも存在する。健康および疾患状態に対する圧受容器反射の重要性を考えると、この反射のin vivo推定は、特定の深刻な臨床的意味を持つ自律神経および心血管研究の重要な要素です。
遺伝子マウス系統は、心臓血管研究に不可欠なツールです。このようなマウス系統のin vivo研究は、心血管生理学および病態生理学に関する貴重な洞察を提供し、多くの場合、心血管疾患の前臨床モデルシステムとして機能します。ここでは、意識のある、拘束されていない、自由に動くマウスにおけるテレメトリーin vivoECGおよびBP記録のプロトコルを提供し、シーケンス法を使用してこれらの記録から圧反射感度を決定する方法について説明します(図1B)。適用された方法は、HRの反射適応を伴うSBPの自発的な増加または減少の間に3つ以上の拍動の短いシーケンスについて、収縮期血圧(SBP)およびRR間隔の拍間一連のスクリーニングが行われるため、シーケンス法と呼ばれます。この方法は、自発反射メカニズムのみが調査されるため、圧反射感度決定のゴールドスタンダードです。この技術は、血圧変化を誘発するための血管作用薬の注射などの侵襲的処置を伴う古い技術よりも優れています。
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/62101/62101fig1v2.jpg"> 図1:シーケンス法を用いた圧反射および圧反射感度評価の概略図。 (A)血圧の急激な上昇時の圧反射の経過。ABPの短期的な上昇は、大動脈弓および頸動脈洞に位置する圧受容器によって感知される。この情報は中枢神経系に伝達され、副交感神経活動の増加と並行して交感神経活動の低下を誘発します。洞房結節領域に位置する神経終末からのアセチルコリンの放出は、洞房結節ペースメーカー細胞におけるセカンドメッセンジャーcAMPの減少を誘発し、したがって心拍数の低下を誘発する。血圧の短期間の低下は逆の効果があります。(B)3つの連続したビートのアップシーケンス(左上のパネル)とダウンシーケンス(右上のパネル)の間の概略的なBPトレース。アップシーケンスは、RR間隔の並行増加(左下のパネル)に関連しており、これはHRの減少に相当します。ダウンシーケンスは、RR間隔の平行減少(右下パネル)に関連しており、これはHRの増加に相当します。 <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62101/62101fig1v2large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するには、ここをクリックしてください。</a>

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr >
			<td >Acepromazine maleate (Tranquisol KH) Solution Injectable 0.5 mg/mL</td>
			<td >CP-Pharma, Germany</td>
			<td >1229</td>
			<td >anesthesia</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >B.Braun Injekt-F 1 mL syringe</td>
			<td >Wolfram Droh GmbH, Germany</td>
			<td >9166017V</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Bepanthen eye and nose ointment</td>
			<td >Bayer AG, Germany</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Blunt dissecting scissors</td>
			<td >Fine Science Tools GmbH, Germany</td>
			<td >14078-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Carprofen (Carprosol) 50 mg/mL</td>
			<td >CP-Pharma, Germany</td>
			<td >115</td>
			<td>preemptive and post-operative pain relief</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Cutasept F skin desinfectant</td>
			<td >BODE Chemie GmbH, Germany</td>
			<td >9803650</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Cotton Tipped Applicator sterile</td>
			<td >Paul Boettger GmbH &#38; Co. KG, Germany</td>
			<td>09-119-9100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Forceps - Micro-Blunted Tips</td>
			<td >Fine Science Tools GmbH, Germany</td>
			<td >11253-25</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Forceps - straight</td>
			<td >Fine Science Tools GmbH, Germany</td>
			<td >11008-13</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Gauze swabs with cut edges, 7.5x7.5 cm, cotton</td>
			<td >Paul Hartmann AG. Germany</td>
			<td >401723</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >HD&#8209;X11, Combined telemetric ECG and BP transmitters&#160;</td>
			<td >Data Sciences International, United States</td>
			<td ></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Homothermic blanket system with flexible probe</td>
			<td >Harvard Apparatus, United States</td>
			<td ></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Hot bead sterilizer</td>
			<td >Fine Science Tools GmbH, Germany</td>
			<td >18000-45</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Ketamine 10%</td>
			<td >Ecuphar GmbH, Germany</td>
			<td >799-760</td>
			<td>anesthesia</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Magnet</td>
			<td >Data Sciences International, United States</td>
			<td ></td>
			<td>transmitter turn on/off</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Needle holder, Olsen-Hegar with suture cutter</td>
			<td >Fine Science Tools GmbH, Germany</td>
			<td >12502-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Needle single use No. 17, 0.55 x 25 mm</td>
			<td >Henke-Sass Wolf GmbH, Germany</td>
			<td>4710005525</td>
			<td>24 G needle</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Needle single use No. 20, 0.40 x 20 mm</td>
			<td >Henke-Sass Wolf GmbH, Germany</td>
			<td >4710004020</td>
			<td>27 G needle</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Needle-suture combination, sterile, absorbable (6-0 USP, metric 0.7, braided)</td>
			<td >Resorba Medical, Germany</td>
			<td >PA10273</td>
			<td>lead fixation</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Needle-suture combination, sterile, silk (5-0 USP, metric 1.5, braided)</td>
			<td >Resorba Medical, Germany</td>
			<td >4023</td>
			<td>skin closure</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >OPMI&#160;1FR&#160;pro,&#160;Dissecting&#160;microscope</td>
			<td >Zeiss, Germany</td>
			<td ></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Pilca depilatory mousse</td>
			<td >Werner Schmidt Pharma GmbH, Germany</td>
			<td>6943151</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >PVP-Iodine hydrogel 10%</td>
			<td >Ratiopharm, Germany</td>
			<td ></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Ringer&#39;s lactate solution</td>
			<td >B. Braun Melsungen AG, Germany</td>
			<td >401-951</td>
			<td>&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Sensitive plasters, Leukosilk</td>
			<td >BSN medical GmbH, Germany</td>
			<td >102100</td>
			<td>surgical tape</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Sodium chloride solution 0.9% sterile Miniplasco Connect 5 ml</td>
			<td >B. Braun Melsungen AG, Germany</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Surgibond tissue adhesive</td>
			<td >SMI, Belgium</td>
			<td >ZG2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Suture, sterile, silk, non-needled (5-0 USP, metric 1 braided)</td>
			<td >Resorba Medical, Germany</td>
			<td >G2105</td>
			<td>lead preparation, ligation sutures</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Trimmer, Wella Contura type 3HSG1</td>
			<td >Procter &#38; Gamble</td>
			<td ></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Vessel Cannulation Forceps</td>
			<td >Fine Science Tools GmbH, Germany</td>
			<td >18403-11</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Xylazine (Xylariem) 2%</td>
			<td >Ecuphar GmbH, Germany</td>
			<td >797469</td>
			<td>anesthesia</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Data acquisition and analysis</td>
			<td >Source</td>
			<td ></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >DSI Data Exchange Matrix</td>
			<td >Data Sciences International, United States</td>
			<td ></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >DSI Dataquest ART 4.33</td>
			<td >Data Sciences International, United States</td>
			<td ></td>
			<td>data aquisition software</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >DSI Ponemah</td>
			<td >Data Sciences International, United States</td>
			<td ></td>
			<td>data aquisition software</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >DSI PhysioTel HDX-11 for mice</td>
			<td >Data Sciences International, United States</td>
			<td ></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >DSI PhysioTel receivers RPC1</td>
			<td >Data Sciences International, United States</td>
			<td ></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >ecgAUTO v3.3.5.11</td>
			<td >EMKA Technologies</td>
			<td ></td>
			<td>ECG and BP analysis software</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Microsoft Excel</td>
			<td >Microsoft Corporation, United States</td>
			<td ></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

implantation of combined telemetric ecg and blood pressure transmitters to determine spontaneous baroreflex sensitivity in conscious mice

血圧(BP)と心拍数(HR)は、どちらも自律神経系(ANS)によって制御されており、反射メカニズムによって密接に絡み合っています。圧反射は、動脈血圧の急性で短期的な変化に対抗し、血圧を比較的狭い生理学的範囲に維持するための重要な恒常性メカニズムです。BPは、大動脈弓および頸動脈洞に位置する圧受容器によって感知される。血圧が変化すると、信号は中枢神経系に伝達され、自律神経系の副交感神経および交感神経枝に伝達されてHRを調整します。血圧の上昇はHRの反射減少を引き起こし、BPの低下はHRの反射増加を引き起こします。
圧反射感度(BRS)は、動脈血圧の変化とそれに対応するHRの変化との間の定量的関係です。 心血管疾患はしばしば圧反射機能障害と関連しています。様々な研究において、BRSの減少は、例えば、心不全、心筋梗塞、または冠状動脈疾患において報告されている。 
BRSの決定には、BPとHRの両方からの情報が必要であり、テレメトリデバイスを使用して同時に記録できます。外科的処置は、圧力センサーを左頸動脈に挿入し、動脈圧を監視するために大動脈弓にその先端を配置することから始まり、続いて送信機とECG電極の皮下配置が説明されています。また、術後集中治療と鎮痛管理についても説明します。手術後の回復の2週間後、長期ECGおよびBP記録が意識のあるマウスおよび拘束されていないマウスで実行されます。最後に、高品質の録音の例と、シーケンス法を使用した自発的圧受容器感受性の分析を紹介します。

ECGおよびBP生データの肯定的な結果 このプロトコルを使用すると、高品質のECGおよびBPデータを取得でき(図4および補足ファイル14)、正確なBRS分析だけでなく、ECG間隔(図4B、上パネル)、血圧パラメータ(図4B、下パネル)、心拍数および血圧変動など、幅広いECGまたはBP由来のパラメータの分析も可能です。 不整脈の検出など12,13,14,15。
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/62101/62101fig4v2.jpg"> 図4:テレメトリーECGおよびBP記録。 (A)代表的な高品質のECGトレース(上パネル)および対応する高品質の生のBP記録(下パネル)。(B)心電図トレースの拡大率(上パネル)。P波、QRS複合体、T波およびRR間隔が示される。対応するBPデータの倍率(下パネル)。拡張期血圧(DBP)および収縮期血圧(SBP)が示されます。 <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62101/62101fig4v2large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するには、ここをクリックしてください。</a>
概日リズムの肯定的な結果 手術から十分に回復した健康なマウスは、活動(暗)期に活性、HRおよびBPの生理学的増加を示す(図5)。多くの異なる要因がこの規則的な概日リズムを乱す可能性があります。これらには、心理的ストレス、音響または電気ノイズ、痛みが含まれます。たとえば、手術直後の急性疼痛状態は、心拍数の増加と活動の低下を同時にもたらします。したがって、概日リズムは動物の健康と幸福の重要な指標であり、BRS分析の前に定期的にチェックする必要があります。
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/62101/62101fig5v2.jpg"> 図5:概日リズムの変動を決定するための長期テレメトリ測定の分析。 心拍数(A)、活動(B)、収縮期血圧(C)、拡張期血圧(D)の概日リズムは、9匹のオスの野生型C57BL / 6Jマウスから12時間の明暗サイクルで平均されました。灰色の領域は活動(暗い)段階を表し、白い領域は動物の休止(明るい)段階を表します。すべてのパラメータは、動物の活動(暗)期に生理学的に上昇します。データは平均+/- SEMで表されます。 <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62101/62101fig5v2large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するには、ここをクリックしてください。</a>
BRS分析の肯定的な結果 プロトコルセクション2.8で説明されているように分析を実行した後、ソフトウェアはアップシーケンスとダウンシーケンスをそれぞれ検出します。SBPの自発的な上昇または下降を伴う3拍以上の短いシーケンス中に、SBPおよびRR間隔の変化が拍間ベースで検査されるため、使用される方法はシーケンス法と呼ばれます(図6)。3心拍にわたるSBPの継続的な上昇は、副交感神経活動の反射増加を引き起こし、その結果、より長いRR間隔に相当するHRを遅くします。反射HR適応の待ち時間は1ビートです。このようなシーケンスは図6Aに示され、アップシーケンスとして定義されています。対照的に、HRの並行上昇(RR間隔の減少)を伴う3拍にわたるSBPの連続的な減少は、ダウンシーケンスとして定義される(図6B)。RRとSBPの相関を評価するために、両方のパラメータを互いにプロットし、線形回帰直線の傾き(ms/mmHg)をシーケンスごとに計算します(図6A、B、下のパネル)。アップシーケンスとダウンシーケンスでソートした後、アップシーケンスとダウンシーケンスについて、それぞれ1000ビートあたりの平均シーケンス数(図6C)と自発BRSの平均ゲインを計算できます(図6D、E)。自発BRSのゲインは、RR/SBP関係から計算された線形回帰直線の傾きに反映されます。通常のBRS値からの偏差には、さまざまな原因が考えられます。これらには、ANS入力の変化または自律神経系入力に対する洞房結節の応答性の変化が含まれます。図6には迷走神経入力に対する洞房結節の誇張された応答性を伴う洞調症候群(SSS)に対するマウスモデルにおけるBRSの増加が示されている11。
<img alt="Figure 6" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/62101/62101fig6v2.jpg"> 図6:シーケンス法を用いたBRSの推定。 (A)野生型C57BL/6Jマウスの、HRの減少に相当するRR間隔の並行増加(中央パネル)に関連する3つの連続した拍動のアップシーケンス(上のパネル)中の代表的なBPトレース。RR間隔をSBPに対してプロットした(下のパネル)。上部と中央のパネル(WT、黒丸)に描かれたアップシーケンスの回帰直線(赤線)の傾きは4.10 ms/mmHgでした。洞不全症候群マウスモデルの代表的なRR/SBP関係は、BRSの上昇を示す6.49 ms/mmHgの増加をもたらした(SSS、灰色の円)。(B)SBPの低下(上パネル)とそれに続くRR間隔の減少(中央パネル)を伴う野生型マウスの代表的なダウンシーケンスで、BRSスロープは4.51 ms/mmHg(下パネル;WT、黒丸)。7.10 ms/mmHgの傾きを持つ病気洞症候群モデルマウス(SSS、灰色の円)の代表的なRR/SBP関係。赤い矢印の方向は、シーケンスの方向(上または下のシーケンス)を示します。(C)WTおよびSSSマウスの1000拍当たりの配列の総量。(D)WTマウスとSSSマウスのアップシーケンスのRR/SBP関係の平均傾き。(E)WTマウスとSSSマウスのダウンシーケンスのRR/SBP関係の平均傾き。(C−E)における統計は、病気洞症候群モデルマウスの雄6匹のWT動物および8匹の雄動物の結果から行った。箱ひげ図には、正中線、perc 25/75、および最小値/最大値が表示されます。開いている記号は平均値を表します。 <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62101/62101fig6v2large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するには、ここをクリックしてください。</a>
生データ品質に対する否定的な結果 特に、活動量が多い段階では信号品質が低下する可能性があります(図7 および 補足ファイル15,16)。これは、動物の動きによるBPカテーテルまたはECGリードのいずれか、あるいは両方の一時的な変位または誤った位置によって引き起こされる可能性があります。また、骨格筋の活動がECGリードから検出され、ノイズを誘発する可能性があります(図7B、上のパネル)。上記のソフトウェア設定では、これらの低品質のビートは検出されないため、分析から除外されます。それにもかかわらず、分析された生データの手動検査は必須です。
<img alt="Figure 7" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/62101/62101fig7v2.jpg"> 図7:低品質の生信号の例。 (A)心電図信号(上パネル)は良好に検出されるが、BP信号(下パネル)の品質は低い。(B)心電図(上パネル)とBP(下パネル)信号の質が十分ではありません。 <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62101/62101fig7v2large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するには、ここをクリックしてください。</a>
BRS分析の否定的な結果 プロトコルセクション2.8.3にリストされているBRS分析設定は、一般に、アップシーケンスとダウンシーケンスを迅速かつ正確に検出するために不可欠です。回帰直線の最小相関係数は 0.75 に設定されます。最小相関係数の設定値が低すぎると、圧反射活動を反映しず、不整脈拍動に起因する配列が誤って検出されます(図8)。BRS分析では、洞調律が安定したエピソードのみを分析する必要があります。異所性拍動またはその他の不整脈イベント、例えば洞休止は、ECGおよびBP分析ソフトウェアのHRVオプションで見つけることができ、無効にする必要があります。
<img alt="Figure 8" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/62101/62101fig8v2.jpg"> 図8:圧反射活動を反映しない配列 。 (A)軽度の洞性不整脈を有するマウスのECGトレース。(B)SBPの自発的な増加を示すBP記録。(C)対応するRR間隔は、BPの増加に伴うHRの減少を示す。 (D)SBPおよび対応するRR間隔のプロット。回帰直線の相関係数が低いことは、HR低下が圧反射の活動ではなく洞性不整脈によって引き起こされたことを示しています。(E)副鼻腔の一時停止を描いた生のECGトレース。(F)対応する生のBP信号。副鼻腔の休止は拡張期血圧の低下を引き起こします。その後の拍動の収縮期血圧はほとんど影響を受けません。 <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62101/62101fig8v2large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するには、ここをクリックしてください。</a>
補足ファイル1:手術プロトコル。 外科的処置と術後ケアの文書化のためのテンプレート。 <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62101/SupplementalFile1.pdf" target="_blank">このファイルをダウンロードするには、ここをクリックしてください。</a>
補足ファイル2:データクエストA.R.TデータをECGAUTOソフトウェアで分析するためのIOXデータに変換します。 被験者リスト(左)で動物を選択し、波形リスト(右)で圧力とECGを選択します。OKを押してデータを変換します。 <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62101/SupplementalFile2.pdf" target="_blank">このファイルをダウンロードするには、ここをクリックしてください。</a>
補足ファイル3:BRS分析のためのECG設定。 リストされているようにパラメータを設定し、[OK]を押して設定を適用します。 <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62101/SupplementalFile3.pdf" target="_blank">このファイルをダウンロードするには、ここをクリックしてください。</a>
補足ファイル 4: BRS 分析の BP 設定。 リストされているようにパラメータを設定し、[OK]を押して設定を適用します。設定を簡単にロードできるように、設定を設定ファイルとして保存します。 <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62101/SupplementalFile4.pdf" target="_blank">このファイルをダウンロードするには、ここをクリックしてください。</a>
補足ファイル5:「セクション」のリスト/ファイルウィンドウのパラメータ。 セクション > txt ヘッダー (選択済み) の下でエクスポートするセクションを選択し、[適用] を押します。<a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62101/SupplementalFile5.pdf" target="_blank">このファイルをダウンロードするには、ここをクリックしてください。</a>
補足ファイル6:「ステップ」のリスト/ファイルウィンドウのパラメータ。 txtヘッダー(選択済み)>ステップでエクスポートするステップデータを選択し、[適用]を押します。<a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62101/SupplementalFile6.pdf" target="_blank">このファイルをダウンロードするには、ここをクリックしてください。</a>
補足ファイル7:「ビート」のリスト/ファイルウィンドウのパラメータ。ビート>txtヘッダー(選択済み)の下にエクスポートする値を選択し、Apply!を押します。BRS分析では、チェックされたパラメータが必要です。数字で示されている選択の順序に注意してください。<a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62101/SupplementalFile7.pdf" target="_blank">このファイルをダウンロードするには、ここをクリックしてください。</a>
補足ファイル 8: テンプレート BRS スプレッドシート ファイル。 アップシーケンスとダウンシーケンスの自動ソートと分析のためのスプレッドシートテンプレート。 <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62101/TemplateBRS.xlsx" target="_blank">このファイルをダウンロードするには、ここをクリックしてください。</a>
補足ファイル 9: 結果ファイル I からの関連データのコピー 結果ファイルから列(圧力)_BRS_deltaP、(圧力)_BRS_#、および(圧力)_BRS_slopeをコピーします。 <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62101/SupplementalFile9.pdf" target="_blank">このファイルをダウンロードするには、ここをクリックしてください。</a>
補足ファイル 10: データの並べ替えと分析のためのスプレッドシート テンプレート ファイル (TemplateBRS) I. コピーしたデータを、TemplateBRS スプレッドシート ファイルの "アップ シーケンス" スプレッドシートとダウン シーケンス" スプレッドシートのそれぞれの列に貼り付けます。 <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62101/SupplementalFile10.pdf" target="_blank">このファイルをダウンロードするには、ここをクリックしてください。</a>
補足ファイル 11: 結果ファイルからの関連データのコピー II. 結果ファイルから列(圧力)_BRS_SBPをコピーします。 <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62101/SupplementalFile11.pdf" target="_blank">このファイルをダウンロードするには、ここをクリックしてください。</a>
補足ファイル 12: データのソートと分析のためのスプレッドシートテンプレートファイル (TemplateBRS) II. コピーしたSBPデータをTemplateBRSスプレッドシートファイルの「すべてのシーケンス」スプレッドシートに貼り付けて、シーケンスの総数を計算します。 <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62101/SupplementalFile12.pdf" target="_blank">このファイルをダウンロードするには、ここをクリックしてください。</a>
補足ファイル13:シーケンスのフィルタリングと分析。 TemplateBRS スプレッドシート ファイルの "アップ シーケンス" スプレッドシートで、(圧力)_BRS_# 列フィルターのドロップダウン メニューを開き、パラメーターを変更せずに [OK ] を押します。これにより、データが自動的にソートされ、3ビートのシーケンスの計算が更新されます。「ダウンシーケンス」スプレッドシートに対してこれを繰り返します。 <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62101/SupplementalFile13.pdf" target="_blank">このファイルをダウンロードするには、ここをクリックしてください。</a>
補足ファイル14:ECGおよびBP分析ソフトウェアで検出された高品質の記録のスクリーンショット。 上のトレース(ECG)は各Rピークの検出を示し、下のトレース(BP)は各拡張期血圧(DP)および収縮期血圧(SP)ピークの検出を示します。正常に検出されたピークの下の領域は赤でマークされます。 <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62101/SupplementalFile14.pdf" target="_blank">このファイルをダウンロードするには、ここをクリックしてください。</a>
補足ファイル15:BPパラメータが部分的にしか検出されない低品質のBP記録のスクリーンショット。 上のトレース(ECG)は各Rピークの検出を示し、下のトレース(BP)は検出されたBPピーク間のギャップを示します。拡張期血圧(DP)と収縮期血圧(SP)の検出されたピークは、赤い領域でマークされています。 <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62101/SupplementalFile15.pdf" target="_blank">このファイルをダウンロードするには、ここをクリックしてください。</a>
補足ファイル16:ECGおよびBPパラメータを検出できなかった低品質のECGおよびBP記録のスクリーンショット。 上のトレース(ECG)は、ECGパラメータを検出できなかった領域(紫色の背景)を示しています。BP検出(低トレース)も信号品質が低いため失敗しました。 <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62101/SupplementalFile16.pdf" target="_blank">このファイルをダウンロードするには、ここをクリックしてください。</a>

Watch this Scientific Journal Video about Implantation of Combined Telemetric ECG and Blood Pressure Transmitters to Determine Spontaneous Baroreflex Sensitivity in Conscious Mice at JoVE.com

Implantation of Combined Telemetric ECG and Blood Pressure Transmitters to Determine Spontaneous Baroreflex Sensitivity in Conscious Mice

圧反射は、血圧の変化に応答する自律神経系による心拍数調節機構です。マウスの心電図と血圧を連続的かつ同時に測定するためのテレメトリ送信機を埋め込む外科的手法について説明します。これは、心血管疾患の重要な予後マーカーである自発的圧反射感受性を決定することができる。

意識のあるマウスにおける自発的な圧反射感受性を決定するための遠隔ECGと血圧伝達器の組み合わせの埋め込み

Blood pressure (BP) and heart rate (HR) are both controlled by the autonomic nervous system (ANS) and are closely intertwined due to reflex mechanisms. ...

圧反射感度は、動脈血圧の変化と心拍数の反射変化との関係を表します。血圧が上昇すると心拍数が低下し、逆もまた同様です。意識のあるマウスにおける遠隔心電図と血圧測定を組み合わせることで、圧反射感度の決定が可能になります。圧反射感度を決定するための古い方法に対するこの技術の主な利点は、自発反射を測定することです。マウスは目を覚ましており、拘束する必要はありません。血圧変化を誘発するために血管作用薬を注射するなどの侵襲的な手順は必要ありません。圧反射は、動脈性高血圧、心筋梗塞、心不全などの心疾患患者のリスク層別化に使用できます。圧反射感受性の病理学的変化は、心臓死亡のリスク増加と関連している。したがって、心血管疾患の重要な予後マーカーです。頸動脈の穿刺やカニューレ挿入などの顕微手術の詳細は、プロトコルの最も困難なステップです。一時的に血流を停止し、カニューレ挿入のために動脈をわずかに持ち上げるために、縫合糸に十分な張力があることを確認するように注意する必要があります。トリマーを使用して、麻酔をかけたマウスの手術領域をあごの下から横胸筋に向かって剃ることから始めます。マウスを仰臥位にした後、麻酔中に動物の目を保護するために眼軟膏を塗布します。以前に剃った手術部位に脱毛クリームを塗ります。3〜4分後、綿パッドと温水を使用して髪と脱毛クリームを取り除き、皮膚が清潔で、手術中に傷が汚染されないように髪の毛やクリームが残っていないことを確認します。あごのすぐ下から首の皮膚を通して1〜1.5センチメートルの直線正中線切開を行います。鉗子で皮膚を強くつまみすぎて壊死を引き起こし、手術後の創傷治癒障害につながる可能性のある鉗子で皮膚を結合組織から分離することにより、切開の両側に皮下スペースを作成します。綿の先端アプリケーターを使用して耳下腺と顎下腺を分離し、気管の上にある筋肉組織を露出させます。湾曲した解剖鉗子で左唾液腺を引っ込めて、気管の横方向に位置する左頸動脈を特定します。血管に沿って走っている迷走神経を傷つけないように細心の注意を払って、湾曲した鉗子を使用して隣接する組織から頸動脈を慎重に解剖します。鈍的解離を続け、左頸動脈を約10ミリメートルの長さに露出させ、血管筋膜および迷走神経から完全に分離します。縫合糸と頸動脈の間の摩擦を減らすために湾曲した鉗子で血管をわずかに持ち上げながら、頸動脈の孤立した部分の下に非吸収性の5×ゼロシルク縫合糸を通過させます。頸動脈の分岐部のすぐ近くに頭蓋に縫合糸を配置します。次に、結び目を形成し、それを結び、血管を永久に結紮します。頭蓋閉塞縫合の両端をサージカルテープで手術台に固定します。頸動脈の下に2番目の咬合縫合糸を通し、頭蓋縫合糸から約5ミリメートルの距離で尾側に配置し、緩い結び目を結びます。両縫合糸の端をサージカルテープで固定します。頭蓋と尾の閉塞縫合糸の間に3番目の縫合糸を配置して、動脈をカニューレ挿入しながらカテーテルを所定の位置に保ち、緩い結び目を作ります。尾側咬合縫合糸をそっと引っ張り、緊張させて一時的に血流を止め、動脈をわずかに持ち上げます。曲がった針で頭蓋閉塞縫合糸の近位の動脈を慎重に貫通します。曲がった針で頸動脈を少し持ち上げながら、血管カニューレ鉗子でカテーテルをつかみ、小さな穿刺に導入し、ゆっくりと血管内に滑り込ませます。同時に、曲がった針をそっと引き戻します。カテーテルが尾側咬合縫合糸に到達したら、固定縫合糸を少し締めてカテーテルを所定の位置に保ちます。尾側閉塞縫合糸を緩めて、カテーテルの先端が大動脈弓に配置されるまでカテーテルをさらに動かせるようにします。適切に配置されたら、3つの縫合糸すべてでカテーテルを固定し、結び目をきつく引っ張らずに両端をできるだけ短く切ります。動物の左脇腹に向けられた首から皮下トンネルを形成し、小さな鈍い解剖ハサミを使用して小さなポーチを形成します。温かい滅菌0.9%塩化ナトリウム溶液で満たされた1ミリリットルのシリンジでトンネルを灌漑し、約300マイクロリットルの溶液をポーチに入れます。鈍い鉗子で皮膚を慎重に持ち上げ、血圧カテーテルを頸動脈から引き抜かないように注意しながら、送信機装置本体をポーチに入れます。鈍い解剖ハサミで右胸筋への細いトンネルを形成し、鈍い鉗子を使用して負のリードをトンネルに配置します。リードの末端を、6×0吸収性縫合材料を使用して胸筋にステッチで固定します。正のリードにループを形成し、その先端を左尾肋骨領域に配置し、6 x 0吸収性縫合糸を使用してその位置を固定します。ファイブバイゼロの非吸収性縫合材料を使用して、シングルノットで皮膚を閉じます。さらに、動物が縫合糸を噛まないようにし、裂開を防ぐために、すべての結び目に少量の組織接着剤を塗布します。回復段階での創傷感染を防ぐために、10%ポビドンヨードヒドロゲルを創傷に塗布する。先制的な痛みを和らげるために、マウスがまだ麻酔下にある間に、0.9%塩化ナトリウムにカルプロフェンを皮下注射します。.手術後12時間、摂氏36度に設定された加熱プラットフォームにケージの半分を配置し、マウスを暖かい場所に移して、動物が暖かい場所にとどまるか、目覚めたときにケージの涼しい部分に移動するかを選択できるようにします。データ収集に続いて、血圧とECGトレースを検査し、低活動の3時間のシーケンスをスクリーニングします。圧反射感度または BRS 解析を実行するには、BRS 解析パネルを開きます。パネルに表示されるすべてのシーケンスを手動で検査し、異所性拍動、洞休止、不整脈イベント、またはノイズの多いデータを除外して、分析から正常に除外します。このプロトコルは、正確なBRS分析と、ECG間隔、血圧変動、不整脈検出などの幅広いECGまたはBP派生パラメータに使用できます。手術から十分に回復した健康なマウスは、暗期に活動、心拍数、および血圧の生理学的増加を示します。シーケンス法を使用してBRSを決定し、収縮期血圧の自発的な上昇または下降を伴う3つ以上の拍動の短いシーケンス中に収縮期血圧とRR間隔を拍動ごとに調べました。RRと収縮期血圧の相関を評価するために、両方のパラメータを互いにプロットし、線形回帰直線の傾きをシーケンスごとに計算しました。収縮期血圧関係によってRRから計算された線形回帰直線の傾きによって反映される1,000拍当たりの総配列数および自発的BRSの平均ゲインは、分析において関心のあるパラメータである。活動量が多い段階では、信号品質が低下し、ノイズが発生する可能性があります。最小相関係数に2つの低い値を設定すると、圧反射活動を反映しないが不整脈ビーズに起因する配列の誤検出も生じる。圧受容器感受性データの解釈のためには、圧受容器反射に関与する機能レベルを考慮することが重要である。ニューロンレベルでは、反射の求心性、中枢性、または遠心性の成分が変化し得る。心血管レベルでは、洞結節の応答性の低下または増加は圧受容器感受性の変化を引き起こす可能性がある。このデータを使用して、圧反射感度と心臓洞房結節の機能だけでなく、広範囲のECGおよび血圧由来のパラメータも決定します。これらには、例えば、収縮期血圧および拡張期血圧、ECG間隔、心拍変動、または蝉のリズムが含まれる。

Research

JoVE Journal

Medicine

Pressure Controlled Ventilation to Induce Acute Lung Injury in Mice

マウスにおける急性肺障害を誘発するために圧力制御された換気

Murine models are extensively used to investigate acute injuries of different organs systems (1-34). Acute lung injury (ALI), which occurs with prolonged ...

Hyperinsulinemic-euglycemic Clamps in Conscious, Unrestrained Mice

意識、無拘束マウスにおける高インスリン血症、正常血糖クランプ

Type 2 diabetes is characterized by a defect in insulin action. The hyperinsulinemic-euglycemic clamp, or insulin clamp, is widely considered the "gold ...

Implantation of Radiotelemetry Transmitters Yielding Data on ECG, Heart Rate, Core Body Temperature and Activity in Free-moving Laboratory Mice

自由に動く実験用マウスの心電図上のデータ、心拍数、体温および活動の要因となるRadiotelemetryトランスミッターの注入

The laboratory mouse is the animal species of choice for most biomedical research, in both the academic sphere and the pharmaceutical industry. Mice are a ...

Femoral Arterial and Venous Catheterization for Blood Sampling, Drug Administration and Conscious Blood Pressure and Heart Rate Measurements

血液サンプリング、医薬品の管理と意識血圧および心拍数測定のための大腿動脈および静脈カテーテル

In multiple fields of study, access to the circulatory system in laboratory studies is necessary. Pharmacological studies in rats using chronically ...

Orthotopic Implantation and Peripheral Immune Cell Monitoring in the II-45 Syngeneic Rat Mesothelioma Model

II-45同系ラット中皮腫モデルにおける同所移植と末梢免疫細胞の監視

The enormous upsurge of interest in immune-based treatments for cancer such as vaccines and immune checkpoint inhibitors, and increased understanding of ...

Long-term Blood Pressure Measurement in Freely Moving Mice Using Telemetry

テレメトリを使用して自由に動くマウスにおける長期血圧測定

During the development of new vasoactive agents, arterial blood pressure monitoring is crucial for evaluating the efficacy of the new proposed drugs. ...

Novel Approach for Simultaneous Recording of Renal Sympathetic Nerve Activity and Blood Pressure with Intravenous Infusion in Conscious, Unrestrained Mice.

腎交感神経活動と意識、持続静脈内投与による血圧の同時記録への新しいアプローチ気ままなマウス。

Renal sympathetic nerves contribute significantly to both physiological and pathophysiological phenomena. Evaluating renal sympathetic nerve activity ...

Assessment of Respiratory Function in Conscious Mice by Double-chamber Plethysmography

ダブル室容積脈波による意識下マウスにおける呼吸機能の評価

Air volume changes created by a conscious subject breathing spontaneously within a body box are at the basis of plethysmography, a technique used to ...

Ultrasound Imaging of the Thoracic and Abdominal Aorta in Mice to Determine Aneurysm Dimensions

マウス脳動脈瘤のサイズを調べるために胸部、腹部の大動脈の超音波断層像

Contemporary high-resolution ultrasound instruments have sufficient resolution to facilitate the measurement of mouse aortas. These instruments have been ...

Implantation of an Isoproterenol Mini-Pump to Induce Heart Failure in Mice

マウスの心不全を誘発するイソプロテレノールミニポンプの移植

Isoproterenol (ISO), is a non-selective beta-adrenergic agonist, that is used widely to induce cardiac injury in mice. While the acute model mimics ...