Name: implantation of combined telemetric ecg and blood pressure transmitters to determine spontaneous baroreflex sensitivity in conscious mice
Uploaded: 2021-02-14T14:00:00
Duration: 9 min 56 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Implantation of Combined Telemetric ECG and Blood Pressure Transmitters to Determine Spontaneous Baroreflex Sensitivity in Conscious Mice at JoVE.com

Este trabalho foi apoiado pela Fundação Alemã de Pesquisa [FE 1929/1-1 e WA 2597/3-1]. Agradecemos a Sandra Dirschl pela excelente assistência técnica e a Julia Rilling pela assessoria veterinária.

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	<li>Landgren, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=On+the+excitation+mechanism+of+the+carotid+baroceptors.">On the excitation mechanism of the carotid baroceptors.</a> Acta Physiologica Scandinavica. 26 (1), 1-34 (1952).</li><li>Heyman, C., Neil, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reflexogenic+areas+of+the+cardiovascular+system.">Reflexogenic areas of the cardiovascular system.</a> British Journal of Surgery. 46 (195), 92 (1958).</li><li>Lu, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+ion+channel+ASIC2+is+required+for+baroreceptor+and+autonomic+control+of+the+circulation.">The ion channel ASIC2 is required for baroreceptor and autonomic control of the circulation.</a> Neuron. 64 (6), 885-897 (2009).</li><li>Fadel, P. J., Raven, P. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+investigations+into+the+arterial+and+cardiopulmonary+baroreflexes+during+exercise.">Human investigations into the arterial and cardiopulmonary baroreflexes during exercise.</a> Experimental Physiology. 97 (1), 39-50 (2012).</li><li>Nagura, S., Sakagami, T., Kakiichi, A., Yoshimoto, M., Miki, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acute+shifts+in+baroreflex+control+of+renal+sympathetic+nerve+activity+induced+by+REM+sleep+and+grooming+in+rats.">Acute shifts in baroreflex control of renal sympathetic nerve activity induced by REM sleep and grooming in rats.</a> The Journal of Physiology. 558, 975-983 (2004).</li><li>Crandall, C. G., Cui, J., Wilson, T. 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Dissertation, LMU Munich Available from: <a target="_blank" href="https://edoc.ub.uni-muenchen.de/24431/1/Brox_Verena.pdf">https://edoc.ub.uni-muenchen.de/24431/1/Brox_Verena.pdf</a> (2019)</li><li>Just, A., Faulhaber, J., Ehmke, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Autonomic+cardiovascular+control+in+conscious+mice.">Autonomic cardiovascular control in conscious mice.</a> American Journal of Physiology-Regulatory, Integrative and Comparative Physiology. 279 (6), 2214-2221 (2000).</li><li>Parati, G., Di Rienzo, M., Mancia, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=How+to+measure+baroreflex+sensitivity:+from+the+cardiovascular+laboratory+to+daily+life.">How to measure baroreflex sensitivity: from the cardiovascular laboratory to daily life.</a> Journal of Hypertension. 18 (1), 7-19 (2000).</li><li>Robbe, H. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessment+of+baroreceptor+reflex+sensitivity+by+means+of+spectral+analysis.">Assessment of baroreceptor reflex sensitivity by means of spectral analysis.</a> Hypertension. 10 (5), 538-543 (1987).</li><li>Pinna, G. D., Maestri, R., Raczak, G., La Rovere, M. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measuring+baroreflex+sensitivity+from+the+gain+function+between+arterial+pressure+and+heart+period.">Measuring baroreflex sensitivity from the gain function between arterial pressure and heart period.</a> Clinical Science. 103 (1), 81-88 (2002).</li><li>Pinna, G. 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Importância do método em relação a métodos alternativos No presente trabalho, apresentamos um protocolo detalhado para quantificar a SBR espontânea usando o método de sequências. Essa abordagem utiliza alterações espontâneas da PA e da FC reflexa, medidas pelo ECG e telemetria da PA. A vantagem desse método é que ambos os parâmetros podem ser registrados em animais conscientes, em movimento livre, sem perturbar os animais, caminhando até a sala onde as medições são realizadas ou mesmo pela interação física necessária para a injeção de drogas. Esse ponto é muito importante, pois foi claramente demonstrado que tais distúrbios interferem severamente nos registros da FC e da PA. Por exemplo, a injeção de drogas requer fixação dos camundongos, o que causa uma resposta máxima ao estresse que aumenta a FC até 650-700 bpm. Para contornar essas respostas ao estresse, a SBR foi previamente determinada em camundongos anestesiados. Entretanto, os anestésicos padrão utilizados em medicina veterinária, como cetamina/xilazina ou isoflurano, induzem bradicardia e influenciam as respostas reflexas autonômicas, limitando a validade dessas abordagens e a interpretação dos resultados. Para superar parcialmente essas limitações, foram utilizados dispositivos de liberação de fármacos implantáveis, ou seja, bombas osmóticas, capazes de liberar fármacos para a cavidade peritoneal. No entanto, com bombas osmóticas não é possível aplicar um bolus de uma dose definida de fármaco limitando a aplicação de tais dispositivos. Alternativamente, cateteres de infusão complexos17 pode ser implantado em camundongos para administração de medicamentos. No entanto, esses cateteres são de difícil manuseio e requerem habilidades cirúrgicas comparáveis àquelas necessárias para o implante de dispositivos telemétricos, ao mesmo tempo em que produzem menos resultados científicos quando comparados às medidas da SB espontânea. Além das questões técnicas associadas à mensuração da SBR por injeção de fármacos, existem algumas limitações relacionadas à ação da droga per se. As abordagens tradicionais para a determinação da SBR incluem injeções em bolus de drogas vasoativas. No entanto, a injeção em bolus de vasoconstritores (por exemplo, fenilefrina) ou vasodilatadores (por exemplo, nitroprussiato de sódio) tem sido considerada um estímulo excessivo e não fisiológico para a adaptação da FC reflexa às alterações da PA18. A atividade espontânea do reflexo barorreceptor também pode ser quantificada usando métodos espectrais. Um desses métodos avalia a SBR no domínio da frequência por meio do cálculo da razão entre as alterações da FC e as alterações da pressão arterial em uma banda de frequência específica18,19. Outros métodos espectrais envolvem a determinação da função de transferência da PA e FC ou a quantificação da coerência entre PA e FC20,21. Esses métodos também requerem aquisição telemétrica de parâmetros espontâneos de PA e FC e, embora sejam apropriados para a determinação da SBR espontânea, requerem ferramentas computacionais intensivas e são difíceis de aplicar. Além disso, todos os métodos espectrais sofrem a limitação de que sinais não estacionários impedem a aplicação de métodos espectrais. Em particular, os picos espectrais induzidos por ritmos respiratórios podem ser reduzidos em pacientes humanos pedindo ao paciente para parar de respirar, enquanto isso obviamente não é possível em camundongos. Portanto, a relação sinal-ruído é frequentemente bastante baixa em camundongos. Dadas as limitações dos métodos discutidos acima, favorecemos o método de sequência para determinação da SBR em camundongos. Uma vantagem considerável desse método é o fato de ser uma técnica não invasiva que fornece dados sobre a SBR espontânea em condições reais22. Outro ponto importante é que a duração das sequências analisadas pelo método de sequências é bastante curta, envolvendo 3-5 batimentos. A regulação reflexa da FC pelo nervo vago é muito rápida e bem dentro do tempo dessas sequências. Portanto, o método de sequência é bem adequado para avaliar a contribuição do nervo vago para a SBR. Em contraste, a regulação pelo sistema nervoso simpático é muito mais lenta. De fato, durante essas sequências curtas, a atividade do sistema nervoso simpático pode ser assumida como quase constante. Portanto, o método é personalizado para detectar seletivamente alterações reflexas da FC impulsionadas pela atividade do nervo vago.
Interpretação dos dados da SBR Para a interpretação da disfunção da SBR ou dos dados da SB per se, é importante considerar os níveis funcionais individuais que estão envolvidos no reflexo barorreceptor. No nível neuronal, componentes aferentes, centrais ou eferentes do reflexo podem estar afetados23. No nível cardiovascular, pode estar presente responsividade reduzida ou exagerada do nó sinoatrial à entrada do SNA11,24. Uma mudança em cada nível poderia levar a mudanças no BRS. A fim de dissecar se mecanismos neuronais e/ou cardíacos são responsáveis pelas alterações observadas na SBR, abordagens de deleção gênica cardíaca ou específica de neurônio, knock down ou edição gênica podem ser usadas.
Etapas críticas do protocolo A etapa mais sofisticada e crítica desse protocolo é o preparo e a canulação da artéria carótida esquerda (Passo 2.3). A tensão da sutura de oclusão caudal deve ser suficientemente alta para interromper completamente o fluxo sanguíneo antes da canulação. Caso contrário, mesmo um pequeno vazamento de sangue durante a canulação pode restringir severamente a visibilidade ou até mesmo fazer com que o camundongo sangre até a morte. A canulação deve ser bem sucedida na primeira tentativa. No entanto, após o fracasso da primeira tentativa, ainda é possível repetir cuidadosamente a canulação.
A incisão mediana e o túnel subcutâneo do pescoço para o flanco esquerdo (Passo 2.3) devem ser grandes o suficiente para introduzir facilmente o transmissor sem força, mas também devem ser tão pequenos quanto possível para manter o transmissor no lugar. Caso contrário, será necessário travá-lo na posição com material de sutura ou adesivo tecidual. Como os ratos têm uma pele muito delicada, a necrose da pele pode ocorrer se o túnel para o transmissor for muito pequeno.
Se os eletrodos de ECG forem muito longos para caber no túnel subcutâneo (Passo 2.4), é necessário formar uma nova ponta, encurtando o eletrodo para um comprimento adequado. O eléctrodo deve estar encostado ao corpo durante todo o comprimento do cabo. Eletrodos muito longos perturbarão os animais e eles tentarão abrir a ferida para remover o transmissor, resultando em risco de irritação do tecido e deiscência da ferida. Os eletrodos muito curtos não podem, naturalmente, ser estendidos e pode ser que, neste caso, os eletrodos não possam ser posicionados de tal forma que correspondam à configuração de Einthoven II. Portanto, recomendamos determinar o comprimento ideal dos eletrodos de ECG em um camundongo morto do mesmo sexo, peso e origem genética.
Os ratinhos devem receber um tempo de recuperação mais longo após a implantação do transmissor se não tiverem um ritmo circadiano normal e este não for o fenótipo da linhagem de ratinhos em estudo (passo 2.7). Outra razão para os ritmos circadianos perturbados pode ser o isolamento acústico inadequado do biotério ou a entrada de pessoal na sala durante a medição.
A análise dos dados de ECG, PA e SBR é direta (Passo 2.8). O passo mais crítico é excluir da análise dos dados batimentos ectópicos, pausas sinusais, episódios arrítmicos ou cortes com sinais de baixa qualidade.

O reflexo barorreceptor arterial é o principal sistema de controle de feedback em humanos que proporciona um controle da pressão arterial (PA) em curto prazo e, possivelmente, também em longoprazo1,2. Esse reflexo tampona perturbações na PA que ocorrem em resposta a gatilhos fisiológicos ou ambientais. Proporciona mudanças reflexas imediatas na frequência cardíaca, volume sistólico e resistência arterial periférica total. O reflexo origina-se nas terminações nervosas sensitivas do arco aórtico e seios carotídeos. Esses terminais nervosos compõem os barorreceptores arteriais. Os somatas dos terminais nervosos no arco aórtico estão localizados no gânglio nodoso, enquanto os dos terminais nervosos no seio carotídeo estão localizados no gânglio petroso. O reflexo é desencadeado pelo aumento da pressão arterial, que estica e ativa os terminais nervosos barorreceptores (Figura 1A). A ativação resulta em voleios de potencial de ação que são transmitidos centralmente através dos nervos aferentes depressores da aorta e do seio carotídeo para núcleos cardiovasculares do tronco cerebral, como o núcleo do trato solitário e o núcleo dorsal do nervo vago. Alterações na atividade nervosa aferente, por sua vez, modulam a atividade eferente autonômica. O aumento da atividade dos nervos barorreceptores diminui a atividade simpática e aumenta a atividade nervosa parassimpática. Assim, as consequências da ativação dos barorreceptores são a redução da frequência cardíaca, do débito cardíaco e da resistência vascular que, em conjunto, neutralizam e tamponam o aumento da pressão arterial3. Por outro lado, a diminuição da atividade dos nervos barorreceptores aumenta a atividade simpática e diminui a atividade nervosa parassimpática, o que aumenta a frequência cardíaca, o débito cardíaco e a resistência vascular e, assim, neutraliza a diminuição da pressão arterial.
Numerosos estudos em humanos e animais têm demonstrado que o reflexo barorreceptor pode ser ajustado em condições fisiológicas como exercício4, sono5, estresse térmico6 ou gravidez7. Além disso, há evidências de que o barorreflexo é cronicamente prejudicado em doenças cardiovasculares, como hipertensão, insuficiência cardíaca, infarto do miocárdio e acidente vascular cerebral. De fato, a disfunção barorreflexa também é utilizada como marcador prognóstico em diversas doenças cardiovasculares8,9,10. Além disso, a disfunção do barorreflexo também está presente nas desordens do SNA. Dada a importância do reflexo barorreceptor para estados de saúde e doença, a estimativa in vivo desse reflexo é um componente importante da pesquisa autonômica e cardiovascular com certas implicações clínicas sérias.
Linhagens genéticas de camundongos são ferramentas essenciais na pesquisa cardiovascular. Estudos in vivo de tais linhagens de camundongos fornecem informações valiosas sobre fisiologia e fisiopatologia cardiovascular e, em muitos casos, servem como sistemas modelo pré-clínicos para doenças cardiovasculares. Aqui fornecemos um protocolo para registro telemétrico in vivo de ECG e PA em camundongos conscientes, irrestritos e em movimento livre e descrevemos como a sensibilidade barorreflexa pode ser determinada a partir desses registros usando o método de sequência (Figura 1B). O método aplicado é chamado de método sequencial, pois as séries batimento a batimento da PA sistólica (PAS) e dos intervalos RR são triadas para sequências curtas de três ou mais batimentos durante aumento ou diminuição espontânea da PAS com adaptação reflexa da FC. Este método é o padrão-ouro para a determinação da sensibilidade barorreflexa, uma vez que apenas os mecanismos reflexos espontâneos são investigados. A técnica é superior às técnicas mais antigas, que envolviam procedimentos invasivos, como a injeção de drogas vasoativas para induzir alterações da PA.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/62101/62101fig1v2.jpg"> Figura 1: Representação esquemática da avaliação da sensibilidade barorreflexa e barorreflexa pelo método sequencial. (A) Curso do barorreflexo durante um aumento agudo da pressão arterial. Um aumento em curto prazo da PA é detectado por barorreceptores localizados no arco aórtico e seio carotídeo. Essa informação é transmitida ao sistema nervoso central e induz uma diminuição da atividade nervosa simpática em paralelo com um aumento da atividade parassimpática. A liberação de acetilcolina das terminações nervosas localizadas na região do nó sinoatrial induz uma diminuição do segundo AMPc mensageiro nas células do marcapasso do nó sinoatrial e, consequentemente, uma redução da frequência cardíaca. Uma diminuição a curto prazo da pressão arterial tem o efeito oposto. (B) Traçados esquemáticos da PA durante uma sequência ascendente (painel superior esquerdo) e sequência descendente (painel superior direito) de três batimentos consecutivos. Uma sequência ascendente está associada a um aumento paralelo nos intervalos RR (painel inferior esquerdo) que é equivalente a uma diminuição na FC. Uma sequência descendente está associada a uma diminuição paralela nos intervalos RR (painel inferior direito) que equivale a um aumento <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62101/62101fig1v2large.jpg" target="_blank">na</a> FC.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr >
			<td >Acepromazine maleate (Tranquisol KH) Solution Injectable 0.5 mg/mL</td>
			<td >CP-Pharma, Germany</td>
			<td >1229</td>
			<td >anesthesia</td>
		</tr>
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			<td >Wolfram Droh GmbH, Germany</td>
			<td >9166017V</td>
			<td></td>
		</tr>
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		</tr>
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		</tr>
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			<td >115</td>
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		</tr>
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		</tr>
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		</tr>
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		</tr>
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			<td >401723</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >HD&#8209;X11, Combined telemetric ECG and BP transmitters&#160;</td>
			<td >Data Sciences International, United States</td>
			<td ></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Homothermic blanket system with flexible probe</td>
			<td >Harvard Apparatus, United States</td>
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			<td></td>
		</tr>
		<tr >
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		</tr>
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			<td>anesthesia</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Magnet</td>
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		</tr>
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		</tr>
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		</tr>
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			<td >Henke-Sass Wolf GmbH, Germany</td>
			<td >4710004020</td>
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		</tr>
		<tr >
			<td >Needle-suture combination, sterile, absorbable (6-0 USP, metric 0.7, braided)</td>
			<td >Resorba Medical, Germany</td>
			<td >PA10273</td>
			<td>lead fixation</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Needle-suture combination, sterile, silk (5-0 USP, metric 1.5, braided)</td>
			<td >Resorba Medical, Germany</td>
			<td >4023</td>
			<td>skin closure</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >OPMI&#160;1FR&#160;pro,&#160;Dissecting&#160;microscope</td>
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			<td ></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
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			<td >Werner Schmidt Pharma GmbH, Germany</td>
			<td>6943151</td>
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		</tr>
		<tr >
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			<td ></td>
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			<td >B. Braun Melsungen AG, Germany</td>
			<td >401-951</td>
			<td>&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Sensitive plasters, Leukosilk</td>
			<td >BSN medical GmbH, Germany</td>
			<td >102100</td>
			<td>surgical tape</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Sodium chloride solution 0.9% sterile Miniplasco Connect 5 ml</td>
			<td >B. Braun Melsungen AG, Germany</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Surgibond tissue adhesive</td>
			<td >SMI, Belgium</td>
			<td >ZG2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Suture, sterile, silk, non-needled (5-0 USP, metric 1 braided)</td>
			<td >Resorba Medical, Germany</td>
			<td >G2105</td>
			<td>lead preparation, ligation sutures</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Trimmer, Wella Contura type 3HSG1</td>
			<td >Procter &#38; Gamble</td>
			<td ></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Vessel Cannulation Forceps</td>
			<td >Fine Science Tools GmbH, Germany</td>
			<td >18403-11</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Xylazine (Xylariem) 2%</td>
			<td >Ecuphar GmbH, Germany</td>
			<td >797469</td>
			<td>anesthesia</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Data acquisition and analysis</td>
			<td >Source</td>
			<td ></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >DSI Data Exchange Matrix</td>
			<td >Data Sciences International, United States</td>
			<td ></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >DSI Dataquest ART 4.33</td>
			<td >Data Sciences International, United States</td>
			<td ></td>
			<td>data aquisition software</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >DSI Ponemah</td>
			<td >Data Sciences International, United States</td>
			<td ></td>
			<td>data aquisition software</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >DSI PhysioTel HDX-11 for mice</td>
			<td >Data Sciences International, United States</td>
			<td ></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >DSI PhysioTel receivers RPC1</td>
			<td >Data Sciences International, United States</td>
			<td ></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >ecgAUTO v3.3.5.11</td>
			<td >EMKA Technologies</td>
			<td ></td>
			<td>ECG and BP analysis software</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Microsoft Excel</td>
			<td >Microsoft Corporation, United States</td>
			<td ></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

implantation of combined telemetric ecg and blood pressure transmitters to determine spontaneous baroreflex sensitivity in conscious mice

A pressão arterial (PA) e a frequência cardíaca (FC) são controladas pelo sistema nervoso autônomo (SNA) e estão intimamente interligadas devido a mecanismos reflexos. O barorreflexo é um mecanismo homeostático chave para neutralizar alterações agudas e de curto prazo na PA arterial e manter a PA em uma faixa fisiológica relativamente estreita. A PA é detectada por barorreceptores localizados no arco aórtico e seio carotídeo. Quando a PA se altera, os sinais são transmitidos ao sistema nervoso central e são então comunicados aos ramos parassimpático e simpático do sistema nervoso autônomo para ajustar a FC. Um aumento na PA causa uma diminuição reflexa na FC, uma queda na PA causa um aumento reflexo na FC.
A sensibilidade barorreflexa (SBR) é a relação quantitativa entre alterações na PA arterial e alterações correspondentes na FC. Em vários estudos, foi relatada redução da SBR em, por exemplo, insuficiência cardíaca, infarto do miocárdio ou doença arterial coronariana. 
A determinação da SBR requer informações tanto da PA quanto da FC, que podem ser registradas simultaneamente por meio de aparelhos telemétricos. O procedimento cirúrgico é descrito iniciando-se com a inserção do sensor de pressão na artéria carótida esquerda e posicionamento de sua ponta no arco aórtico para monitorização da pressão arterial, seguido da colocação subcutânea dos eletrodos transmissor e ECG. Descrevemos também os cuidados intensivos pós-operatórios e o manejo analgésico. Após um período de duas semanas de recuperação pós-cirurgia, os registros de ECG e PA de longo prazo são realizados em camundongos conscientes e irrestritos. Finalmente, incluímos exemplos de gravações de alta qualidade e a análise da sensibilidade espontânea dos barorreceptores usando o método de sequência.

Resultados positivos para dados brutos de ECG e PA Usando este protocolo, dados de ECG e PA de alta qualidade podem ser adquiridos (Figura 4 e Arquivo Suplementar 14), permitindo não apenas uma análise precisa da SBR, mas também a análise de uma ampla gama de parâmetros derivados do ECG ou da PA, por exemplo, intervalos de ECG (Figura 4B, painel superior), parâmetros de pressão arterial (Figura 4B, painel inferior), frequência cardíaca e variabilidade da pressão arterial, detecção de arritmias etc12,13,14,15.
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/62101/62101fig4v2.jpg"> Figura 4: Registros telemétricos de ECG e PA. (A) Traçado de ECG representativo e de alta qualidade (painel superior) e correspondentes registros brutos de PA de alta qualidade (painel inferior). (B) Ampliação dos traços de ECG (painel superior). Onda P, complexo QRS, onda T e intervalo RR são indicados. Ampliação dos dados de PA correspondentes (painel inferior). A PA diastólica (PAD) e a PA sistólica (PAS) estão indicadas. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62101/62101fig4v2large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
Resultados positivos para ritmo circadiano Um camundongo hígido que se recuperou suficientemente da cirurgia apresenta aumento fisiológico da atividade, FC e PA durante a fase de atividade (escuro) (Figura 5). Muitos fatores diferentes podem perturbar esse ritmo circadiano regular. Estes incluem estresse psicológico, ruído acústico ou elétrico e dor. Por exemplo, uma condição de dor aguda imediatamente após a cirurgia resultaria em um aumento na frequência cardíaca com uma diminuição simultânea da atividade. Portanto, o ritmo circadiano é um importante indicador para a saúde e bem-estar animal e deve ser verificado rotineiramente antes da análise da SBR.
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/62101/62101fig5v2.jpg"> Figura 5: Análise das medidas de telemetria de longo prazo para determinar as variações do ritmo circadiano. O ritmo circadiano da frequência cardíaca (A), atividade (B), pressão arterial sistólica (C) e pressão arterial diastólica (D) foi medido em 9 camundongos C57BL/6J selvagens machos durante ciclos claros e escuros de 12 h. Áreas cinzentas retratam a fase de atividade (escura) e áreas brancas retratam a fase de repouso (clara) dos animais. Todos os parâmetros são fisiologicamente elevados durante a fase de atividade (escura) do animal. Os dados são representados como média +/- MEV. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62101/62101fig5v2large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
Resultados positivos para a análise da SBR Após a realização da análise conforme descrito na seção 2.8 do protocolo, o software detectará sequências ascendentes e descendentes, respectivamente. O método utilizado é denominado método sequencial, uma vez que as mudanças nos intervalos PAS e RR são examinadas batimento a batimento durante sequências curtas de três ou mais batimentos com elevação ou queda espontânea da PAS (Figura 6). Uma elevação contínua da PAS ao longo de três batimentos cardíacos causa um aumento reflexo da atividade parassimpática e, em consequência, retarda a FC, o que equivale a intervalos RR mais longos. A latência para a adaptação da FC reflexa é de um batimento. Tal sequência é mostrada na Figura 6A e é definida como uma sequência ascendente. Em contraste, uma queda contínua da PAS ao longo de três batimentos com elevação paralela da FC (diminuição do intervalo RR) é definida como uma sequência descendente (Figura 6B). Para avaliar a correlação entre FR e PAS, ambos os parâmetros são plotados entre si e a inclinação (ms/mmHg) da reta de regressão linear é calculada para cada sequência (Figura 6A,B, painéis inferiores). Após a classificação por sequências para cima e para baixo, pode-se calcular o número médio de sequências por 1000 batimentos (Figura 6C) e o ganho médio de SBR espontânea para as sequências para cima e para baixo, respectivamente (Figura 6D,E). O ganho da SB espontânea é refletido pela inclinação da reta de regressão linear calculada a partir da relação RR/PAS. O desvio dos valores normais da SBR pode ter várias causas. Estes incluem alterações na entrada do SNA ou alterações na responsividade do nó sinoatrial à entrada do sistema nervoso autônomo. Na Figura 6 é mostrado aumento da SBR em um modelo de camundongo para síndrome do seio doente (SSS) com responsividade exagerada do nó sinoatrial à entradavagal11.
<img alt="Figure 6" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/62101/62101fig6v2.jpg"> Figura 6: Estimativa da SBR pelo método de sequências. (A) Traço representativo da PA de um camundongo selvagem C57BL/6J durante uma sequência ascendente de três batimentos consecutivos (painel superior) associado a um aumento paralelo no intervalo RR (painel médio) que é equivalente a uma diminuição na FC. Os intervalos RR foram plotados contra a PAS (painel inferior). A inclinação da reta de regressão (linha vermelha) para a sequência ascendente representada no painel superior e médio (WT, círculos pretos) foi de 4,10 ms/mmHg. Uma relação RR/PAS representativa do modelo de camundongos com síndrome do seio doente produziu um aumento da inclinação de 6,49 ms/mmHg, indicando SBR elevada (SSS, círculos cinzentos). (B) Sequência descendente representativa de um camundongo selvagem com queda da PAS (painel superior) e subsequente diminuição do intervalo RR (painel médio) que resulta em inclinação da SBR de 4,51 ms/mmHg (painel inferior; WT, círculos pretos). Relação RR/PAS representativa do modelo de camundongos com síndrome do seio doente (SSS, grey circles) com inclinação de 7,10 ms/mmHg. A orientação das pontas de seta vermelhas indica a direção das sequências (sequência para cima ou para baixo). (C) Quantidade total de sequências por 1000 batimentos para camundongos WT e SSS. (D) Inclinação média da relação RR/PAS para sequências up para camundongos WT e SSS. (E) Inclinação média da relação RR/PAS para sequências descendentes de camundongos WT e SSS. A estatística em (C-E) foi realizada a partir dos resultados de seis animais WT machos e oito animais machos do modelo camundongo com síndrome do seio doente. Boxplots mostram a linha mediana, perc 25/75 e valor min/max; Os símbolos abertos representam o valor médio. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62101/62101fig6v2large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
Resultado negativo para a qualidade dos dados brutos Especialmente durante as fases de maior atividade, a qualidade do sinal pode diminuir (Figura 7 e Arquivos Suplementares 15,16). Isso pode ser causado por deslocamento temporário ou posição incorreta do cateter de PA ou das derivações de ECG ou de ambos devido ao movimento do animal. Além disso, a atividade muscular esquelética pode ser detectada a partir das derivações do ECG e induzir ruído (Figura 7B, painel superior). Com as configurações de software descritas acima, esses batimentos de baixa qualidade não são detectados e, portanto, são excluídos da análise. No entanto, a inspeção manual dos dados brutos analisados é obrigatória.
<img alt="Figure 7" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/62101/62101fig7v2.jpg"> Figura 7: Exemplos de sinais brutos de baixa qualidade. (A) O sinal de ECG (painel superior) é detectado com boa qualidade, mas a qualidade do sinal BP (painel inferior) é baixa. (B) As qualidades do sinal de ECG (painel superior) e BP (painel inferior) não são suficientes. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62101/62101fig7v2large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
Resultados negativos para a análise da SBR As configurações de análise BRS listadas na seção 2.8.3 do protocolo são, em geral, essenciais para a detecção rápida e correta de sequências ascendentes e descendentes. O coeficiente de correlação mínimo para a reta de regressão é definido como 0,75. O estabelecimento de valores muito baixos para o coeficiente de correlação mínimo resulta em falsas detecções de sequências que não refletem a atividade barorreflexa, mas resultam de batimentos arrítmicos (Figura 8). Para a análise da SBR devem ser analisados apenas os episódios com ritmo sinusal estável. Batimentos ectópicos ou outros eventos arrítmicos, por exemplo, pausas sinusais, podem ser encontrados com a opção VFC do software de análise de ECG e PA e devem ser invalidados.
<img alt="Figure 8" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/62101/62101fig8v2.jpg"> Figura 8: Sequências que não refletem a atividade barorreflexa . (A) Traçado eletrocardiográfico de camundongo com disritmia sinusal leve. (B) Registro da PA mostrando aumento espontâneo da PAS. (C) Intervalos RR correspondentes indicam diminuição da FC com o aumento da PA. (D) Gráfico da PAS e intervalos RR correspondentes. O baixo coeficiente de correlação da reta de regressão indica que a redução da FC não foi causada pela atividade do barorreflexo, mas sim pela disritmia sinusal. (E) Vestígio bruto de ECG mostrando uma pausa sinusal. (F) Sinal de PA bruto correspondente. A pausa sinusal provoca queda da pressão arterial diastólica. A pressão arterial sistólica do batimento subsequente quase não é afetada. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62101/62101fig8v2large.jpg" target="_blank">Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.</a>
Arquivo Suplementar 1: Protocolo cirúrgico. Gabarito para documentação do procedimento cirúrgico e cuidados pós-operatórios. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62101/SupplementalFile1.pdf" target="_blank">Clique aqui para baixar este arquivo.</a>
Arquivo suplementar 2: Convertendo dados do Dataquest A.R.T em dados IOX para análise no software ecgAUTO. Selecione animais na lista de sujeitos (esquerda) e Pressão e ECG na lista de formas de onda (direita). Pressione OK para converter dados. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62101/SupplementalFile2.pdf" target="_blank">Clique aqui para baixar este arquivo.</a>
Arquivo suplementar 3: configurações de ECG para análise de BRS. Defina os parâmetros conforme listado, pressione ok e aplique a configuração. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62101/SupplementalFile3.pdf" target="_blank">Clique aqui para baixar este arquivo.</a>
Arquivo suplementar 4: Configurações de PA para análise de BRS. Defina os parâmetros conforme listado, pressione ok e aplique a configuração. Salve a configuração como um arquivo de configuração para poder carregar as configurações facilmente. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62101/SupplementalFile4.pdf" target="_blank">Clique aqui para baixar este arquivo.</a>
Arquivo suplementar 5: Parâmetros na janela de lista/arquivo para "seções". Escolha as seções a serem exportadas sob as seções > cabeçalho txt (selecionado) e pressione Aplicar!. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62101/SupplementalFile5.pdf" target="_blank">Clique aqui para baixar este arquivo.</a>
Arquivo suplementar 6: Parâmetros na janela de lista/arquivo para "etapas". Escolha os dados da etapa a serem exportados nas etapas > cabeçalho txt (selecionado) e pressione Aplicar!. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62101/SupplementalFile6.pdf" target="_blank">Clique aqui para baixar este arquivo.</a>
Arquivo suplementar 7: Parâmetros na janela de lista/arquivo para "batidas". Escolha os valores a serem exportados sob o cabeçalho beats > txt (selecionado) e pressione Aplicar!. Para a análise da BRS são necessários os parâmetros assinalados. Observe a ordem de seleção indicada pelos números. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62101/SupplementalFile7.pdf" target="_blank">Clique aqui para baixar este arquivo.</a>
Arquivo suplementar 8: arquivo de planilha TemplateBRS. Modelo de planilha para classificação automatizada e análise de sequências para cima e para baixo. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62101/TemplateBRS.xlsx" target="_blank">Clique aqui para baixar este arquivo.</a>
Arquivo Suplementar 9: Copiando dados relevantes do Arquivo de Resultados I. Copie as colunas (Pressão)_BRS_deltaP, (Pressão)_BRS_# e (Pressão)_BRS_slope do Arquivo de Resultados. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62101/SupplementalFile9.pdf" target="_blank">Clique aqui para baixar este arquivo.</a>
Arquivo suplementar 10: Arquivo de modelo de planilha (TemplateBRS) para classificação e análise de dados I. Cole os dados copiados nas respectivas colunas da planilha "Sequências para cima" e "Sequências para baixo" no arquivo de planilha TemplateBRS. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62101/SupplementalFile10.pdf" target="_blank">Clique aqui para baixar este arquivo.</a>
Arquivo Suplementar 11: Copiando dados relevantes do Arquivo de Resultados II. Copie a coluna (Pressão)_BRS_SBP do arquivo de resultados. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62101/SupplementalFile11.pdf" target="_blank">Clique aqui para baixar este arquivo.</a>
Arquivo suplementar 12: Um arquivo de modelo de planilha (TemplateBRS) para classificação e análise de dados II. Cole os dados SBP copiados na planilha "Todas as sequências" no arquivo de planilha TemplateBRS para calcular o número total de sequências. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62101/SupplementalFile12.pdf" target="_blank">Clique aqui para baixar este arquivo.</a>
Arquivo suplementar 13: Filtrando e analisando as sequências. Na planilha "Sequências para cima" do arquivo de planilha TemplateBRS, abra o menu suspenso do filtro de coluna (Pressão)_BRS_# e pressione OK sem alterar nenhum parâmetro. Isso classificará automaticamente os dados e atualizará os cálculos para sequências com 3 batidas. Repita isso para a planilha "Sequências para baixo". <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62101/SupplementalFile13.pdf" target="_blank">Clique aqui para baixar este arquivo.</a>
Arquivo suplementar 14: Captura de tela de uma gravação de alta qualidade detectada com o software de análise de ECG e BP. O traçado superior (ECG) mostra a detecção de cada pico R e o traçado inferior (PA) mostra a detecção de cada pico de pressão diastólica (PD) e pressão sistólica (PS). As áreas sob picos detectados com sucesso são marcadas em vermelho. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62101/SupplementalFile14.pdf" target="_blank">Clique aqui para baixar este arquivo.</a>
Arquivo suplementar 15: Captura de tela de uma gravação de PA de baixa qualidade onde os parâmetros de PA são detectados apenas parcialmente. O traçado superior (ECG) mostra a detecção de cada pico R, mas o traçado inferior (BP) mostra lacunas entre os picos de PA detectados. Os picos detectados de pressão diastólica (PD) e pressão sistólica (PS) são marcados com áreas vermelhas. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62101/SupplementalFile15.pdf" target="_blank">Clique aqui para baixar este arquivo.</a>
Arquivo suplementar 16: Captura de tela de um registro de ECG e PA de baixa qualidade onde os parâmetros de ECG e PA não puderam ser detectados. O traçado superior (ECG) mostra uma região (fundo roxo) onde os parâmetros do ECG não puderam ser detectados. A detecção de PA (rastreamento mais baixo) também falhou devido à baixa qualidade do sinal. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62101/SupplementalFile16.pdf" target="_blank">Clique aqui para baixar este arquivo.</a>

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Implantation of Combined Telemetric ECG and Blood Pressure Transmitters to Determine Spontaneous Baroreflex Sensitivity in Conscious Mice

O barorreflexo é um mecanismo de regulação da frequência cardíaca pelo sistema nervoso autônomo em resposta a alterações da pressão arterial. Descrevemos uma técnica cirúrgica para implantar transmissores de telemetria para medição contínua e simultânea de eletrocardiograma e pressão arterial em camundongos. Isso pode determinar a sensibilidade barorreflexa espontânea, um importante marcador prognóstico para doença cardiovascular.

Implantação de ECG Telemétrico Combinado e Transmissores de Pressão Arterial para Determinação da Sensibilidade Barorreflexa Espontânea em Camundongos Conscientes

Blood pressure (BP) and heart rate (HR) are both controlled by the autonomic nervous system (ANS) and are closely intertwined due to reflex mechanisms. ...

A sensibilidade barorreflexa descreve a relação entre alterações na pressão arterial e alterações reflexas na frequência cardíaca. Quando a pressão arterial aumenta, a frequência cardíaca diminui e vice-versa. As medidas combinadas de eletrocardiograma telemétrico e pressão arterial em camundongos conscientes permitem a determinação da sensibilidade barorreflexa.A principal vantagem dessa técnica em relação aos métodos mais antigos para determinação da sensibilidade barorreflexa é que ela mede o reflexo espontâneo. Os ratos estão acordados e não precisam ser contidos. Não são necessários procedimentos invasivos, como a injeção de drogas vasoativas para induzir alterações da pressão arterial.O barorreflexo pode ser usado para estratificação de risco de pacientes com doença cardíaca, como hipertensão arterial, infarto do miocárdio e insuficiência cardíaca. Alterações patológicas da sensibilidade barorreflexa estão associadas ao aumento do risco de mortalidade cardíaca. É, portanto, um importante marcador prognóstico para doença cardiovascular.Os detalhes microcirúrgicos como punção e canulação da artéria carótida são as etapas mais desafiadoras do protocolo. Deve-se tomar cuidado para garantir que haja tensão suficiente nas suturas para interromper temporariamente o fluxo sanguíneo e levantar levemente a artéria para canulação. Comece usando um aparador para raspar a área cirúrgica de um camundongo anestesiado abaixo do queixo em direção aos músculos peitorais transversais.Após posicionar o camundongo em decúbito dorsal, aplique pomada ocular para proteger os olhos do animal durante a anestesia. Aplicar creme depilatório na área cirúrgica previamente raspada. Após três a quatro minutos, remova o cabelo e o creme depilatório usando um algodão e água morna, certificando-se de que a pele esteja limpa e livre de qualquer resíduo de cabelo ou creme para que a ferida não seja contaminada durante a operação.Faça uma incisão reta de um a 1,5 centímetro na linha média através da pele do pescoço, começando imediatamente abaixo do queixo. Crie um espaço subcutâneo em ambos os lados da incisão, separando a pele do tecido conjuntivo subjacente com tesoura de dissecção romba, tomando cuidado para não beliscar a pele muito fortemente com a pinça, o que pode causar necrose e levar à cicatrização prejudicada após a cirurgia. Separe as glândulas parótida e submandibular com aplicadores de ponta de algodão para expor a musculatura que recobre a traqueia.Retrair a glândula salivar esquerda com pinça de dissecção curva para identificar a artéria carótida esquerda localizada lateralmente à traqueia. Dissecar cuidadosamente a artéria carótida do tecido adjacente com pinça curva, tomando muito cuidado para não lesar o nervo vago que corre ao longo do vaso. Continue a dissecção romba para expor a artéria carótida esquerda a cerca de 10 milímetros de comprimento e separá-la completamente da fáscia vascular e do nervo vago.Passar uma sutura de seda cinco por zero inabsorvível sob a porção isolada da artéria carótida enquanto levanta levemente o vaso sanguíneo com pinça curva para reduzir o atrito entre as suturas e a artéria carótida. Coloque a sutura cranialmente apenas proximalmente à bifurcação da artéria carótida. Em seguida, forme um nó e amarre-o para ligar permanentemente o vaso.Fixar ambas as extremidades da sutura da oclusão craniana na mesa cirúrgica com fita cirúrgica. Passar uma segunda sutura de oclusão por baixo da artéria carótida e colocá-la caudalmente a aproximadamente cinco milímetros de distância da sutura craniana, amarrando um nó solto. Fixar ambas as extremidades da sutura com fita adesiva cirúrgica.Posicionar uma terceira sutura entre a sutura de oclusão cranial e caudal para manter o cateter no lugar enquanto se canula a artéria e fazer um nó frouxo. Puxe suavemente a sutura de oclusão caudal e fixe-a com tensão para interromper temporariamente o fluxo sanguíneo e levantar levemente a artéria. Penetrar cuidadosamente a artéria proximal à sutura da oclusão craniana com a agulha dobrada.Ao elevar levemente a artéria carótida com a agulha dobrada, segure o cateter com pinça de canulação do vaso, introduza-o na pequena punção e deixe-o deslizar lentamente para dentro do vaso. Simultaneamente, puxe suavemente para trás a agulha dobrada. Quando o cateter atingir a sutura de oclusão caudal, aperte levemente a sutura segura para manter o cateter no lugar.Soltar a sutura da oclusão caudal para que o cateter possa ser movimentado até que sua ponta seja posicionada no arco aórtico. Uma vez posicionado corretamente, prenda o cateter com as três suturas e corte as extremidades o mais curto possível sem puxar os nós com muita força. Formar um túnel subcutâneo a partir do pescoço direcionado para o flanco esquerdo do animal e formar uma pequena bolsa usando uma pequena tesoura dissecante romba.Irrigar o túnel com uma seringa de um mililitro preenchida com solução quente estéril de cloreto de sódio a 0,9% e introduzir aproximadamente 300 microlitros da solução na bolsa. Levante cuidadosamente a pele com pinça romba e introduza o corpo do dispositivo transmissor na bolsa, tomando cuidado para não puxar o cateter de pressão arterial para fora da artéria carótida. Formar um túnel fino para o músculo peitoral direito com tesoura dissecante romba e colocar o eletrodo negativo no túnel usando pinça romba.Fixar a extremidade terminal do cabo-eletrodo com um ponto no músculo peitoral usando material de sutura absorvível seis por zero. Formar uma alça no eletrodo positivo, posicionar sua ponta na região da costela caudal esquerda e fixar sua posição com um fio absorvível seis por zero. Fechar a pele com nós únicos com material de sutura inabsorvível cinco por zero.Além disso, aplique uma pequena quantidade de adesivo tecidual em cada nó para evitar que o animal morda a sutura e evite deiscências. Aplique hidrogel de iodopovidona a 10% na ferida para prevenir a infecção da ferida durante a fase de recuperação. Para alívio preemptivo da dor, injetar carprofeno em cloreto de sódio a 0,9% por via subcutânea enquanto o camundongo ainda estiver sob anestesia.Posicione metade da gaiola em uma plataforma de aquecimento regulada para 36 graus Celsius por 12 horas após a cirurgia e transfira o mouse para a área quente para que o animal tenha a opção de permanecer na área quente ou mover-se para a parte mais fria da gaiola quando acordado. Após a aquisição dos dados, inspecione os traços da pressão arterial e do ECG e rastreie uma sequência de três horas de baixa atividade. Para realizar a análise da sensibilidade barorreflexa ou da BRS, abra o painel de análise da BRS.Inspecione manualmente cada sequência exibida no painel e exclua batimentos ectópicos, pausas sinusais, eventos arrítmicos ou dados ruidosos para excluí-los com êxito da análise. Esse protocolo pode ser usado para análise precisa da SBR e uma ampla gama de parâmetros derivados do ECG ou da PA, como intervalos de ECG, variabilidade da PA e detecção de arritmias. Um camundongo saudável que se recuperou suficientemente da cirurgia mostra um aumento fisiológico de atividade, frequência cardíaca e PA durante a fase escura.O método de sequência foi utilizado para determinar a SBR, onde a pressão arterial sistólica e os intervalos RR foram examinados batimento a batimento durante sequências curtas de três ou mais batimentos com aumento ou queda espontânea da pressão arterial sistólica. Para avaliar a correlação entre FR e pressão arterial sistólica, ambos os parâmetros foram plotados um contra o outro e a inclinação da reta de regressão linear foi calculada para cada sequência. O número total de sequências por 1.000 batimentos e o ganho médio da SB espontânea refletido pelas inclinações das retas de regressão linear calculadas a partir da FR pela relação pressão arterial sistólica são parâmetros de interesse na análise.Durante as fases de maior atividade, a qualidade do sinal pode diminuir e induzir ruído. A definição de dois valores baixos para o coeficiente de correlação mínimo também resulta em falsas detecções de sequências que não refletem a atividade barorreflexa, mas resultam de esferas arrítmicas. Para a interpretação dos dados de sensibilidade dos barorreceptores, é importante considerar os níveis funcionais envolvidos no reflexo barorreceptor.No nível neuronal, os componentes aferentes, centrais ou eferentes do reflexo podem estar alterados. No nível cardiovascular, a responsividade reduzida ou aumentada do nó sinusal pode causar alterações na sensibilidade dos barorreceptores. Com esses dados, não se pode apenas determinar a sensibilidade barorreflexa e a função do nó sinoatrial cardíaco, mas também uma ampla gama de parâmetros derivados do ECG e da pressão arterial.Estes incluem, por exemplo, pressão arterial sistólica e diastólica, intervalos de ECG, variabilidade da frequência cardíaca ou ritmos de cigarra.

Research

JoVE Journal

Medicine

Pressure Controlled Ventilation to Induce Acute Lung Injury in Mice

Ventilação a pressão controlada para induzir lesão pulmonar aguda em ratos

Murine models are extensively used to investigate acute injuries of different organs systems (1-34). Acute lung injury (ALI), which occurs with prolonged ...

Medicina

Hyperinsulinemic-euglycemic Clamps in Conscious, Unrestrained Mice

Hiperinsulinêmico euglicêmico-Clamps em Consciente, Ratos Unrestrained

Type 2 diabetes is characterized by a defect in insulin action. The hyperinsulinemic-euglycemic clamp, or insulin clamp, is widely considered the "gold ...

Implantation of Radiotelemetry Transmitters Yielding Data on ECG, Heart Rate, Core Body Temperature and Activity in Free-moving Laboratory Mice

Implantação de Transmissores de radiotelemetria Cedendo Dados sobre ECG, freqüência cardíaca, temperatura corporal e atividade em camundongos de laboratório de movimento livre

The laboratory mouse is the animal species of choice for most biomedical research, in both the academic sphere and the pharmaceutical industry. Mice are a ...

Femoral Arterial and Venous Catheterization for Blood Sampling, Drug Administration and Conscious Blood Pressure and Heart Rate Measurements

Cateterismo arterial e venoso femoral para coleta de sangue, Drug Administration e Pressão Arterial Consciente e Medidas de freqüência cardíaca

In multiple fields of study, access to the circulatory system in laboratory studies is necessary. Pharmacological studies in rats using chronically ...

Orthotopic Implantation and Peripheral Immune Cell Monitoring in the II-45 Syngeneic Rat Mesothelioma Model

Orthotopic Implantação e Acompanhamento Peripheral Imune celular no Modelo II-45 Rat Singênico mesotelioma

The enormous upsurge of interest in immune-based treatments for cancer such as vaccines and immune checkpoint inhibitors, and increased understanding of ...

Long-term Blood Pressure Measurement in Freely Moving Mice Using Telemetry

Longo prazo medição de pressão arterial em ratos movimentando-se livremente utilizar telemetria

During the development of new vasoactive agents, arterial blood pressure monitoring is crucial for evaluating the efficacy of the new proposed drugs. ...

Novel Approach for Simultaneous Recording of Renal Sympathetic Nerve Activity and Blood Pressure with Intravenous Infusion in Conscious, Unrestrained Mice.

Nova abordagem para gravação simultânea da atividade do nervo simpático Renal e pressão arterial com infusão intravenosa em consciente, ratos desenfreados.

Renal sympathetic nerves contribute significantly to both physiological and pathophysiological phenomena. Evaluating renal sympathetic nerve activity ...

Assessment of Respiratory Function in Conscious Mice by Double-chamber Plethysmography

Avaliação da função respiratória em ratos conscientes por pletismografia dobro-câmara

Air volume changes created by a conscious subject breathing spontaneously within a body box are at the basis of plethysmography, a technique used to ...

Ultrasound Imaging of the Thoracic and Abdominal Aorta in Mice to Determine Aneurysm Dimensions

Ecografia da Aorta torácica e Abdominal em ratos para determinar as dimensões de aneurisma

Contemporary high-resolution ultrasound instruments have sufficient resolution to facilitate the measurement of mouse aortas. These instruments have been ...

Implantation of an Isoproterenol Mini-Pump to Induce Heart Failure in Mice

Implante de uma Minibomba isoproterenol para induzir insuficiência cardíaca em camundongos

Isoproterenol (ISO), is a non-selective beta-adrenergic agonist, that is used widely to induce cardiac injury in mice. While the acute model mimics ...