Name: implantation of combined telemetric ecg and blood pressure transmitters to determine spontaneous baroreflex sensitivity in conscious mice
Uploaded: 2021-02-14T14:00:00
Duration: 9 min 56 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Implantation of Combined Telemetric ECG and Blood Pressure Transmitters to Determine Spontaneous Baroreflex Sensitivity in Conscious Mice at JoVE.com

Este trabajo fue apoyado por la Fundación Alemana de Investigación [FE 1929/1-1 y WA 2597/3-1]. Agradecemos a Sandra Dirschl por su excelente asistencia técnica y a Julia Rilling por su asesoramiento veterinario.

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Dissertation, LMU Munich Available from: <a target="_blank" href="https://edoc.ub.uni-muenchen.de/24431/1/Brox_Verena.pdf">https://edoc.ub.uni-muenchen.de/24431/1/Brox_Verena.pdf</a> (2019)</li><li>Just, A., Faulhaber, J., Ehmke, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Autonomic+cardiovascular+control+in+conscious+mice.">Autonomic cardiovascular control in conscious mice.</a> American Journal of Physiology-Regulatory, Integrative and Comparative Physiology. 279 (6), 2214-2221 (2000).</li><li>Parati, G., Di Rienzo, M., Mancia, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=How+to+measure+baroreflex+sensitivity:+from+the+cardiovascular+laboratory+to+daily+life.">How to measure baroreflex sensitivity: from the cardiovascular laboratory to daily life.</a> Journal of Hypertension. 18 (1), 7-19 (2000).</li><li>Robbe, H. 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Importancia del método con respecto a métodos alternativos En el presente trabajo, presentamos un protocolo detallado para cuantificar BRS espontáneo utilizando el método de secuencia. Este enfoque utiliza cambios espontáneos de PA y FC refleja medidos por telemetría de ECG y PA. La ventaja de este método es que ambos parámetros se pueden registrar en animales conscientes, que se mueven libremente y sin restricciones sin molestar a los animales al entrar en la habitación donde se realizan las mediciones o incluso mediante la interacción física requerida para la inyección de drogas. Este punto es muy importante ya que se ha demostrado claramente que tales alteraciones interfieren gravemente con las grabaciones de FC y PA. Por ejemplo, la inyección de drogas requiere la fijación de los ratones, lo que provoca una respuesta de estrés máxima que aumenta la FC hasta 650-700 lpm. Para eludir estas respuestas al estrés, BRS se ha determinado previamente en ratones anestesiados. Sin embargo, los anestésicos estándar utilizados en medicina veterinaria como la ketamina/xilazina o el isoflurano inducen bradicardia e influyen en las respuestas reflejas autonómicas, lo que limita la validez de estos enfoques y la interpretación de los resultados. Para superar parcialmente estas limitaciones se utilizaron dispositivos implantables de administración de fármacos, es decir, bombas osmóticas, que pueden liberar fármacos en la cavidad peritoneal. Sin embargo, con las bombas osmóticas no es posible aplicar un bolo de una dosis definida de fármaco que limite la aplicación de tales dispositivos. Alternativamente, catéteres de infusión complejos17 Se puede implantar en ratones para administrar medicamentos. Sin embargo, estos catéteres son difíciles de manejar y requieren habilidades quirúrgicas comparables a las requeridas para la implantación de dispositivos telemétricos, mientras que producen menos resultados científicos en comparación con las mediciones de BRS espontáneo. Además de los problemas técnicos asociados con la medición de BRS mediante inyección de drogas, existen algunas limitaciones relacionadas con la acción del fármaco per se. Los enfoques tradicionales para determinar BRS incluyen inyecciones en bolo de fármacos vasoactivos. Sin embargo, la inyección en bolo de vasoconstrictores (p. ej., fenilefrina) o vasodilatadores (p. ej., nitroprusiato de sodio) se ha considerado un estímulo excesivo y no fisiológico para la adaptación refleja de la FC a los cambios en la PA.18. La actividad espontánea del reflejo barorreceptor también se puede cuantificar utilizando métodos espectrales. Uno de estos métodos evalúa BRS en el dominio de la frecuencia mediante el cálculo de la relación entre los cambios en la FC y los cambios en la presión arterial en una banda de frecuencia específica18,19. Otros métodos espectrales implican la determinación de la función de transferencia de PA y FC o la cuantificación de la coherencia entre PA y FC20,21. Estos métodos también requieren la adquisición telemétrica de parámetros espontáneos de PA y FC y, si bien son apropiados para la determinación de BRS espontáneo, requieren herramientas computacionales intensivas y son difíciles de aplicar. Además, todos los métodos espectrales adolecen de la limitación de que las señales no estacionarias impiden la aplicación de métodos espectrales. En particular, los picos espectrales inducidos por los ritmos respiratorios pueden reducirse en pacientes humanos pidiéndole al paciente que deje de respirar, mientras que esto obviamente no es posible en ratones. Por lo tanto, la relación señal-ruido es con frecuencia bastante baja en ratones. Dadas las limitaciones de los métodos discutidos anteriormente, favorecemos el método de secuencia para determinar BRS en ratones. Una ventaja considerable de este método es el hecho de que es una técnica no invasiva que proporciona datos sobre BRS espontáneo en condiciones de la vida real.22. Otro punto importante es que la duración de las secuencias analizadas utilizando el método de secuencia es bastante corta, involucrando 3-5 latidos. La regulación refleja de la FC por el nervio vago es muy rápida y bien dentro del marco temporal de estas secuencias. Por lo tanto, el método de secuencia es muy adecuado para evaluar la contribución del nervio vago al BRS. Por el contrario, la regulación por el sistema nervioso simpático es mucho más lenta. De hecho, durante estas secuencias cortas se puede suponer que la actividad del sistema nervioso simpático es casi constante. Por lo tanto, el método está personalizado para detectar selectivamente cambios reflejos de la FC impulsados por la actividad del nervio vago.
Interpretación de los datos de BRS Para la interpretación de la disfunción BRS o los datos de BRS per se es importante considerar los niveles funcionales individuales que están involucrados en el reflejo barorreceptor. A nivel neuronal, los componentes aferentes, centrales o eferentes del reflejo pueden verse afectados23. A nivel cardiovascular, la capacidad de respuesta reducida o exagerada del nódulo sinoauricular a la entrada del SNA podría estar presente 11,24. Un cambio en cada nivel podría conducir a cambios en el BRS. Para diseccionar si los mecanismos neuronales y/o cardíacos son responsables de los cambios observados en BRS, se podrían utilizar enfoques de deleción génica, knock down o edición de genes específicos de neuronas o cardíacas.
Pasos críticos en el protocolo El paso más sofisticado y crítico en este protocolo es la preparación y canulación de la arteria carótida izquierda (Paso 2.3). La tensión de la sutura de oclusión caudal debe ser lo suficientemente alta como para detener completamente el flujo sanguíneo antes de la canulación . De lo contrario, incluso una pequeña fuga de sangre durante la canulación puede restringir severamente la visibilidad o incluso hacer que el ratón se desangre hasta la muerte. La canulación debe tener éxito en el primer intento. Sin embargo, tras el fracaso del primer intento, todavía es posible volver a intentar cuidadosamente la canulación .
La incisión en la línea media y el túnel subcutáneo desde el cuello hasta el flanco izquierdo (Paso 2.3) deben ser lo suficientemente grandes como para introducir fácilmente el transmisor sin fuerza, pero también deben ser lo más pequeños posible para mantener el transmisor en su lugar. De lo contrario, uno tendrá que bloquearlo en su posición con material de sutura o adhesivo tisular. Dado que los ratones tienen una piel muy delicada, la necrosis de la piel puede ocurrir si el túnel para el transmisor es demasiado pequeño.
Si los electrodos de ECG son demasiado largos para caber en el túnel subcutáneo (Paso 2.4), es necesario formar una nueva punta acortando el electrodo a una longitud adecuada. El electrodo debe estar plano contra el cuerpo en toda la longitud del cable. Los electrodos demasiado largos molestarán a los animales e intentarán abrir la herida para eliminar el transmisor, lo que provocará un riesgo de irritación tisular y dehiscencia de la herida. Por supuesto, los cables demasiado cortos no se pueden extender y puede ser que en este caso los electrodos no se puedan colocar de tal manera que correspondan a la configuración de Einthoven II. Por lo tanto, recomendamos determinar la longitud óptima de las derivaciones del ECG en un ratón muerto del mismo sexo, peso y antecedentes genéticos.
Los ratones deben tener un tiempo de recuperación más largo después de la implantación del transmisor si no tienen un ritmo circadiano normal y este no es el fenotipo de la línea de ratones en estudio (paso 2.7). Otra razón para los ritmos circadianos alterados podría ser el aislamiento acústico inadecuado de la instalación de animales o del personal que ingresa a la habitación durante la medición.
El análisis de datos de ECG, PA y BRS es sencillo (Paso 2.8). El paso más crítico es excluir los latidos ectópicos, las pausas sinusales, los episodios arrítmicos o las secciones con señales de baja calidad del análisis de datos.

El reflejo barorreceptor arterial es el principal sistema de control de retroalimentación en humanos que proporciona un control a corto plazo, y posiblemente también a largo plazo1,2, de la presión arterial (PAA). Este reflejo amortigua las perturbaciones en la PA que ocurren en respuesta a desencadenantes fisiológicos o ambientales. Proporciona cambios reflejos rápidos en la frecuencia cardíaca, el volumen sistólico y la resistencia arterial periférica total. El reflejo se origina en las terminaciones nerviosas sensoriales en el arco aórtico y los senos carotídeos. Estas terminales nerviosas forman los barorreceptores arteriales. Los somáteres de las terminales nerviosas en el arco aórtico se encuentran en el ganglio nodoso, mientras que los de las terminales nerviosas en el seno carotídeo se encuentran en el ganglio petroso. El reflejo se desencadena por un aumento de la presión arterial, que estira y activa las terminales nerviosas barorreceptoras (Figura 1A). La activación da como resultado descargas potenciales de acción que se transmiten centralmente a través del depresor aórtico aferente y los nervios del seno carotídeo a los núcleos del tronco encefálico cardiovascular, como el núcleo tractus solitarii y el núcleo dorsal del nervio vago. Los cambios en la actividad nerviosa aferente a su vez modulan la actividad eferente autónoma. El aumento de la actividad de los nervios barorreceptores disminuye la actividad simpática y aumenta la actividad del nervio parasimpático. Así, las consecuencias de la activación de los barorreceptores son una reducción de la frecuencia cardíaca, del gasto cardíaco y de la resistencia vascular que en conjunto contrarrestan y amortiguan el aumento de la presión arterial3. Por el contrario, la disminución de la actividad de los nervios barorreceptores aumenta la actividad del nervio simpático y disminuye la actividad del nervio parasimpático, lo que aumenta la frecuencia cardíaca, el gasto cardíaco y la resistencia vascular y, por lo tanto, contrarresta la disminución de la presión arterial.
Numerosos estudios en humanos y animales han demostrado que el reflejo barorreceptor se puede ajustar en condiciones fisiológicas como el ejercicio4, el sueño5, el estrés por calor6 o el embarazo7. Además, hay evidencia de que el barorreflejo está crónicamente deteriorado en enfermedades cardiovasculares, como hipertensión, insuficiencia cardíaca, infarto de miocardio y accidente cerebrovascular. De hecho, la disfunción barorrefleja también es utilizada como marcador pronóstico en varias enfermedades cardiovasculares 8,9,10. Además, la disfunción del barorreflejo también está presente en los trastornos del SNA. Dada la importancia del reflejo barorreceptor para la salud y los estados de enfermedad, la estimación in vivo de este reflejo es un componente importante de la investigación autonómica y cardiovascular con ciertas implicaciones clínicas graves.
Las líneas genéticas de ratón son herramientas esenciales en la investigación cardiovascular. Los estudios in vivo de tales líneas de ratones proporcionan información valiosa sobre la fisiología cardiovascular y la fisiopatología y, en muchos casos, sirven como sistemas modelo preclínicos para enfermedades cardiovasculares. Aquí proporcionamos un protocolo para el registro telemétrico in vivo de ECG y PA en ratones conscientes, sin restricciones y que se mueven libremente y describimos cómo se puede determinar la sensibilidad barorrefleja a partir de estas grabaciones utilizando el método de secuencia (Figura 1B). El método aplicado se denomina método de secuencia, porque la serie latido a latido de intervalos sistólicos de PA (PAS) y RR se examinan para secuencias cortas de tres o más latidos durante el aumento o disminución espontáneos de la PAS con adaptación refleja de la FC. Este método es el estándar de oro para la determinación de la sensibilidad barorrefleja, ya que solo se investigan los mecanismos reflejos espontáneos. La técnica es superior a las técnicas más antiguas que involucraban procedimientos invasivos como la inyección de fármacos vasoactivos para inducir cambios en la PA.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/62101/62101fig1v2.jpg"> Figura 1: Representación esquemática de la evaluación de la sensibilidad barorrefleja y barorrefleja utilizando el método de secuencia . (A) Curso del barorreflejo durante un aumento agudo de la presión arterial. Un aumento a corto plazo en la PA es detectado por barorreceptores ubicados en el arco aórtico y el seno carotídeo. Esta información se transmite al sistema nervioso central e induce una disminución de la actividad nerviosa simpática en paralelo con un aumento de la actividad parasimpática. La liberación de acetilcolina de las terminaciones nerviosas ubicadas en la región del nódulo sinoauricular induce una disminución del segundo mensajero cAMP en las células marcapasos del nodo sinoauricular y, por lo tanto, una reducción en la frecuencia cardíaca. Una disminución a corto plazo de la presión arterial tiene el efecto contrario. (B) Trazas esquemáticas de BP durante una secuencia hacia arriba (panel superior izquierdo) y hacia abajo (panel superior derecho) de tres latidos consecutivos. Una secuencia ascendente se asocia con un aumento paralelo en los intervalos RR (panel inferior izquierdo) que es equivalente a una disminución en la FC. Una secuencia descendente se asocia con una disminución paralela en los intervalos RR (panel inferior derecho) que es equivalente a un aumento en la FC. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62101/62101fig1v2large.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.</a>

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		<tr >
			<td >Acepromazine maleate (Tranquisol KH) Solution Injectable 0.5 mg/mL</td>
			<td >CP-Pharma, Germany</td>
			<td >1229</td>
			<td >anesthesia</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >B.Braun Injekt-F 1 mL syringe</td>
			<td >Wolfram Droh GmbH, Germany</td>
			<td >9166017V</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
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			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Blunt dissecting scissors</td>
			<td >Fine Science Tools GmbH, Germany</td>
			<td >14078-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Carprofen (Carprosol) 50 mg/mL</td>
			<td >CP-Pharma, Germany</td>
			<td >115</td>
			<td>preemptive and post-operative pain relief</td>
		</tr>
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		</tr>
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		</tr>
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		</tr>
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			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Gauze swabs with cut edges, 7.5x7.5 cm, cotton</td>
			<td >Paul Hartmann AG. Germany</td>
			<td >401723</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >HD&#8209;X11, Combined telemetric ECG and BP transmitters&#160;</td>
			<td >Data Sciences International, United States</td>
			<td ></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Homothermic blanket system with flexible probe</td>
			<td >Harvard Apparatus, United States</td>
			<td ></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
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			<td></td>
		</tr>
		<tr >
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			<td >799-760</td>
			<td>anesthesia</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Magnet</td>
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		</tr>
		<tr >
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		</tr>
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			<td >Needle single use No. 17, 0.55 x 25 mm</td>
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		</tr>
		<tr >
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			<td >Henke-Sass Wolf GmbH, Germany</td>
			<td >4710004020</td>
			<td>27 G needle</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Needle-suture combination, sterile, absorbable (6-0 USP, metric 0.7, braided)</td>
			<td >Resorba Medical, Germany</td>
			<td >PA10273</td>
			<td>lead fixation</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Needle-suture combination, sterile, silk (5-0 USP, metric 1.5, braided)</td>
			<td >Resorba Medical, Germany</td>
			<td >4023</td>
			<td>skin closure</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >OPMI&#160;1FR&#160;pro,&#160;Dissecting&#160;microscope</td>
			<td >Zeiss, Germany</td>
			<td ></td>
			<td></td>
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		<tr >
			<td >Pilca depilatory mousse</td>
			<td >Werner Schmidt Pharma GmbH, Germany</td>
			<td>6943151</td>
			<td></td>
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		<tr >
			<td >PVP-Iodine hydrogel 10%</td>
			<td >Ratiopharm, Germany</td>
			<td ></td>
			<td></td>
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		<tr >
			<td >Ringer&#39;s lactate solution</td>
			<td >B. Braun Melsungen AG, Germany</td>
			<td >401-951</td>
			<td>&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Sensitive plasters, Leukosilk</td>
			<td >BSN medical GmbH, Germany</td>
			<td >102100</td>
			<td>surgical tape</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Sodium chloride solution 0.9% sterile Miniplasco Connect 5 ml</td>
			<td >B. Braun Melsungen AG, Germany</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Surgibond tissue adhesive</td>
			<td >SMI, Belgium</td>
			<td >ZG2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Suture, sterile, silk, non-needled (5-0 USP, metric 1 braided)</td>
			<td >Resorba Medical, Germany</td>
			<td >G2105</td>
			<td>lead preparation, ligation sutures</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Trimmer, Wella Contura type 3HSG1</td>
			<td >Procter &#38; Gamble</td>
			<td ></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Vessel Cannulation Forceps</td>
			<td >Fine Science Tools GmbH, Germany</td>
			<td >18403-11</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Xylazine (Xylariem) 2%</td>
			<td >Ecuphar GmbH, Germany</td>
			<td >797469</td>
			<td>anesthesia</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Data acquisition and analysis</td>
			<td >Source</td>
			<td ></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >DSI Data Exchange Matrix</td>
			<td >Data Sciences International, United States</td>
			<td ></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >DSI Dataquest ART 4.33</td>
			<td >Data Sciences International, United States</td>
			<td ></td>
			<td>data aquisition software</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >DSI Ponemah</td>
			<td >Data Sciences International, United States</td>
			<td ></td>
			<td>data aquisition software</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >DSI PhysioTel HDX-11 for mice</td>
			<td >Data Sciences International, United States</td>
			<td ></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >DSI PhysioTel receivers RPC1</td>
			<td >Data Sciences International, United States</td>
			<td ></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >ecgAUTO v3.3.5.11</td>
			<td >EMKA Technologies</td>
			<td ></td>
			<td>ECG and BP analysis software</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Microsoft Excel</td>
			<td >Microsoft Corporation, United States</td>
			<td ></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

implantation of combined telemetric ecg and blood pressure transmitters to determine spontaneous baroreflex sensitivity in conscious mice

La presión arterial (PA) y la frecuencia cardíaca (FC) están controladas por el sistema nervioso autónomo (SNA) y están estrechamente entrelazadas debido a mecanismos reflejos. El barorreflejo es un mecanismo homeostático clave para contrarrestar los cambios agudos a corto plazo en la PA arterial y para mantener la PA en un rango fisiológico relativamente estrecho. La PA es detectada por barorreceptores ubicados en el arco aórtico y el seno carotídeo. Cuando la PA cambia, las señales se transmiten al sistema nervioso central y luego se comunican a las ramas parasimpática y simpática del sistema nervioso autónomo para ajustar la FC. Un aumento en la PA causa una disminución refleja en la FC, una caída en la PA causa un aumento reflejo en la FC.
La sensibilidad barorrefleja (BRS) es la relación cuantitativa entre los cambios en la PA arterial y los cambios correspondientes en la FC. Las enfermedades cardiovasculares a menudo se asocian con una función barorrefleja deteriorada. En varios estudios se ha informado de BRS reducido en, por ejemplo, insuficiencia cardíaca, infarto de miocardio o enfermedad arterial coronaria. 
La determinación de BRS requiere información tanto de PA como de FC, que se puede registrar simultáneamente utilizando dispositivos telemétricos. El procedimiento quirúrgico se describe comenzando con la inserción del sensor de presión en la arteria carótida izquierda y el posicionamiento de su punta en el arco aórtico para monitorear la presión arterial, seguido de la colocación subcutánea del transmisor y los electrodos de ECG. También describimos los cuidados intensivos postoperatorios y el manejo analgésico. Después de un período de dos semanas de recuperación postoperatoria, se realizan registros de ECG y PA a largo plazo en ratones conscientes y sin restricciones. Finalmente, incluimos ejemplos de registros de alta calidad y el análisis de la sensibilidad espontánea de los barorreceptores utilizando el método de secuencia.

Resultados positivos para los datos brutos de ECG y PA Usando este protocolo se pueden adquirir datos de ECG y PA de alta calidad (Figura 4 y Archivo Suplementario 14), lo que permite no solo un análisis preciso de BRS sino también un análisis de una amplia gama de parámetros derivados de ECG o PA, por ejemplo, intervalos de ECG (Figura 4B, panel superior), parámetros de presión arterial (Figura 4B, panel inferior), frecuencia cardíaca y variabilidad de la presión arterial, detección de arritmias, etc.12,13,14,15.
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/62101/62101fig4v2.jpg"> Figura 4: Registros telemétricos de ECG y PA. (A) Traza de ECG representativa de alta calidad (panel superior) y registros de PA sin procesar de alta calidad correspondientes (panel inferior). (B) Aumento de las trazas de ECG (panel superior). Se indican la onda P, el complejo QRS, la onda T y el intervalo RR. Ampliación de los datos de PA correspondientes (panel inferior). La PA diastólica (PAD) y la PA sistólica (PAS) están indicadas. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62101/62101fig4v2large.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.</a>
Resultados positivos para el ritmo circadiano Un ratón sano que se ha recuperado suficientemente de la cirugía muestra un aumento fisiológico de la actividad, la FC y la PA durante la fase de actividad (oscura) (Figura 5). Muchos factores diferentes pueden alterar este ritmo circadiano regular. Estos incluyen estrés psicológico, ruido acústico o eléctrico y dolor. Por ejemplo, una condición de dolor agudo inmediatamente después de la cirugía resultaría en un aumento de la frecuencia cardíaca con una disminución simultánea de la actividad. Por lo tanto, el ritmo circadiano es un indicador importante para la salud y el bienestar de los animales y debe verificarse rutinariamente antes del análisis BRS.
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/62101/62101fig5v2.jpg"> Figura 5: Análisis de mediciones de telemetría a largo plazo para determinar las variaciones del ritmo circadiano. El ritmo circadiano de la frecuencia cardíaca (A), la actividad (B), la presión arterial sistólica (C) y la presión arterial diastólica (D) promediaron 9 ratones machos C57BL / 6J de tipo salvaje durante ciclos de luz y oscuridad de 12 h. Las áreas grises representan la fase de actividad (oscura) y las áreas blancas representan la fase de reposo (luz) de los animales. Todos los parámetros son fisiológicamente elevados durante la fase de actividad (oscuridad) del animal. Los datos se representan como media +/- SEM. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62101/62101fig5v2large.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.</a>
Resultados positivos para el análisis BRS Después de realizar el análisis como se describe en la sección 2.8 del protocolo, el software detectará secuencias ascendentes y descendentes, respectivamente. El método utilizado se denomina método de secuencia, ya que los cambios en los intervalos PAS y RR se examinan latido a latido durante secuencias cortas de tres o más latidos con un aumento o disminución espontáneo de la PAS (Figura 6). Una elevación continua de la PAS durante tres latidos del corazón provoca un aumento reflejo de la actividad parasimpática y, en consecuencia, ralentiza la FC, lo que equivale a intervalos de RR más largos. La latencia para la adaptación de FC refleja es de un latido. Dicha secuencia se muestra en la Figura 6A y se define como una secuencia hacia arriba. En contraste, una disminución continua de la PAS durante tres latidos con aumento paralelo de la FC (disminución en el intervalo RR) se define como una secuencia descendente (Figura 6B). Para evaluar la correlación entre RR y PAS, ambos parámetros se trazan entre sí y se calcula la pendiente (ms/mmHg) de la línea de regresión lineal para cada secuencia (Figura 6A,B, paneles inferiores). Después de ordenar por secuencias hacia arriba y hacia abajo, el número promedio de secuencias por 1000 latidos (Figura 6C) y la ganancia promedio de BRS espontáneos se pueden calcular para secuencias ascendentes y descendentes, respectivamente (Figura 6D, E). La ganancia de BRS espontáneo se refleja en la pendiente de la línea de regresión lineal calculada a partir de la relación RR/PAS. La desviación de los valores normales de BRS puede tener varias causas. Estos incluyen cambios en la entrada del SNA o cambios en la capacidad de respuesta del nódulo sinoauricular a la entrada del sistema nervioso autónomo. En la Figura 6 se muestra un aumento del BRS en un modelo de ratón para el síndrome del seno enfermo (SSS) con una respuesta exagerada del nódulo sinoauricular a la entrada vagal11.
<img alt="Figure 6" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/62101/62101fig6v2.jpg"> Figura 6: Estimación de BRS utilizando el método de secuencia. (A) Traza de PA representativa de un ratón C57BL / 6J de tipo salvaje durante una secuencia ascendente de tres latidos consecutivos (panel superior) asociada con un aumento paralelo en el intervalo RR (panel medio) que es equivalente a una disminución en la FC. Los intervalos RR se graficaron contra la PAS (panel inferior). La pendiente de la línea de regresión (línea roja) para la secuencia ascendente representada en el panel superior y medio (WT, círculos negros) fue de 4,10 ms/mmHg. Una relación representativa RR/PAS del modelo de ratón con síndrome del seno enfermo produjo una pendiente aumentada de 6,49 ms/mmHg, lo que indica BRS elevado (SSS, círculos grises). (B) Secuencia descendente representativa de un ratón de tipo salvaje con una caída en la PAS (panel superior) y una disminución posterior en el intervalo RR (panel medio) que da como resultado una pendiente BRS de 4.51 ms/mmHg (panel inferior; WT, círculos negros). Una relación representativa RR/PAS del modelo de ratón con síndrome del seno enfermo (SSS, círculos grises) con una pendiente de 7,10 ms/mmHg. La orientación de las puntas de flecha rojas indica la dirección de las secuencias (secuencia hacia arriba o hacia abajo). (C) Cantidad total de secuencias por 1000 latidos para ratones WT y SSS. (D) Pendiente media de la relación RR/PAS para secuencias up para ratones WT y SSS. (E) Pendiente media de la relación RR/PAS para secuencias descendentes para ratones WT y SSS. Las estadísticas en (C-E) se realizaron a partir de los resultados de seis animales WT machos y ocho animales machos del modelo de ratón con síndrome del seno enfermo. Los diagramas de caja muestran la línea mediana, perc 25/75, y el valor min/max; Los símbolos abiertos representan el valor medio. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62101/62101fig6v2large.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.</a>
Resultado negativo para la calidad de los datos sin procesar Especialmente durante las fases de mayor actividad, la calidad de la señal puede disminuir (Figura 7 y Archivos suplementarios 15,16). Esto puede ser causado por un desplazamiento temporal o una posición incorrecta del catéter de PA o de las derivaciones del ECG o de ambos debido al movimiento del animal. Además, la actividad del músculo esquelético puede detectarse a partir de las derivaciones del ECG e inducir ruido (Figura 7B, panel superior). Con la configuración de software descrita anteriormente, estos ritmos de baja calidad no se detectan y, por lo tanto, se excluyen del análisis. Sin embargo, la inspección manual de los datos brutos analizados es obligatoria.
<img alt="Figure 7" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/62101/62101fig7v2.jpg"> Figura 7: Ejemplos de señales brutas de baja calidad. (A) La señal de ECG (panel superior) se detecta con buena calidad, pero la calidad de la señal BP (panel inferior) es baja. (B) Las cualidades de la señal de ECG (panel superior) y BP (panel inferior) no son suficientes. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62101/62101fig7v2large.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.</a>
Resultados negativos para el análisis BRS Los ajustes de análisis BRS enumerados en la sección 2.8.3 del protocolo son, en general, esenciales para la detección rápida y correcta de secuencias ascendentes y descendentes. El coeficiente de correlación mínimo para la línea de regresión se establece en 0,75. El establecimiento de valores demasiado bajos para el coeficiente de correlación mínimo da como resultado detecciones falsas de secuencias que no reflejan la actividad barorrefleja, sino que son el resultado de latidos arrítmicos (Figura 8). Para el análisis de BRS sólo se deben analizar los episodios con ritmo sinusal estable. Los latidos ectópicos u otros eventos arrítmicos, por ejemplo, pausas sinusales, se pueden encontrar con la opción de VFC del software de análisis de ECG y PA y deben invalidarse.
<img alt="Figure 8" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/62101/62101fig8v2.jpg"> Figura 8: Secuencias que no reflejan la actividad barorrefleja . (A) Traza de ECG de un ratón con arritmia sinusal leve. (B) Registro de PA que representa un aumento espontáneo de la PAS. (C) Los intervalos RR correspondientes indican una disminución de la FC tras el aumento de la PA. (D) Gráfica de PAS e intervalos RR correspondientes. El bajo coeficiente de correlación de la línea de regresión indica que la reducción de la FC no fue causada por la actividad del barorreflejo sino más bien por la arritmia sinusal. (E) Traza de ECG sin procesar que representa una pausa sinusal. (F) Señal BP bruta correspondiente. La pausa sinusal causa una caída en la presión arterial diastólica. La presión arterial sistólica del latido posterior casi no se ve afectada. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62101/62101fig8v2large.jpg" target="_blank">Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.</a>
Archivo complementario 1: Protocolo quirúrgico. Plantilla para la documentación del procedimiento quirúrgico y la atención postoperatoria. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62101/SupplementalFile1.pdf" target="_blank">Haga clic aquí para descargar este archivo.</a>
Archivo complementario 2: Conversión de datos Dataquest A.R.T en datos IOX para su análisis en el software ecgAUTO. Seleccione animales en la lista de sujetos (izquierda) y Presión y ECG en la lista de formas de onda (derecha). Pulse OK para convertir datos. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62101/SupplementalFile2.pdf" target="_blank">Haga clic aquí para descargar este archivo.</a>
Archivo complementario 3: Configuración de ECG para el análisis BRS. Establezca los parámetros como se indican, presione ok y aplique la configuración. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62101/SupplementalFile3.pdf" target="_blank">Haga clic aquí para descargar este archivo.</a>
Archivo complementario 4: Configuración de PA para el análisis BRS. Establezca los parámetros como se indican, presione ok y aplique la configuración. Guarde la configuración como un archivo de configuración para poder cargar la configuración fácilmente. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62101/SupplementalFile4.pdf" target="_blank">Haga clic aquí para descargar este archivo.</a>
Archivo complementario 5: Parámetros en la ventana de lista/archivo para "secciones". Elija las secciones que desea exportar en las secciones > txt header (selected) y pulse Apply!. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62101/SupplementalFile5.pdf" target="_blank">Haga clic aquí para descargar este archivo.</a>
Archivo complementario 6: Parámetros en la ventana de lista/archivo para "pasos". Elija los datos de paso que desea exportar en los pasos > encabezado txt (seleccionado) y pulse ¡Aplicar!. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62101/SupplementalFile6.pdf" target="_blank">Haga clic aquí para descargar este archivo.</a>
Archivo complementario 7: Parámetros en la ventana de lista/archivo para "beats". Elija los valores que desea exportar bajo el encabezado beats > txt (seleccionado) y pulse ¡Aplicar!. Para el análisis BRS son necesarios los parámetros marcados. Tenga en cuenta el orden de selección indicado por los números. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62101/SupplementalFile7.pdf" target="_blank">Haga clic aquí para descargar este archivo.</a>
Archivo complementario 8: archivo de hoja de cálculo TemplateBRS. Plantilla de hoja de cálculo para la clasificación y el análisis automatizados de secuencias hacia arriba y hacia abajo. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62101/TemplateBRS.xlsx" target="_blank">Haga clic aquí para descargar este archivo.</a>
Archivo complementario 9: Copia de datos relevantes del archivo de resultados I. Copie las columnas (Presión)_BRS_deltaP, (Presión)_BRS_# y (Presión)_BRS_slope del archivo de resultados. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62101/SupplementalFile9.pdf" target="_blank">Haga clic aquí para descargar este archivo.</a>
Archivo complementario 10: Archivo de plantilla de hoja de cálculo (TemplateBRS) para clasificación y análisis de datos I. Pegue los datos copiados en las columnas respectivas de la hoja de cálculo "Secuencias ascendentes" y "Secuencias descendentes" en el archivo de hoja de cálculo TemplateBRS. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62101/SupplementalFile10.pdf" target="_blank">Haga clic aquí para descargar este archivo.</a>
Archivo complementario 11: Copia de datos relevantes del archivo de resultados II. Copie la columna (Presión)_BRS_SBP del archivo de resultados. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62101/SupplementalFile11.pdf" target="_blank">Haga clic aquí para descargar este archivo.</a>
Archivo complementario 12: Un archivo de plantilla de hoja de cálculo (TemplateBRS) para la clasificación y el análisis de datos II. Pegue los datos SBP copiados en la hoja de cálculo "Todas las secuencias" del archivo de hoja de cálculo TemplateBRS para calcular el número total de secuencias. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62101/SupplementalFile12.pdf" target="_blank">Haga clic aquí para descargar este archivo.</a>
Archivo complementario 13: Filtrado y análisis de las secuencias. En la hoja de cálculo "Subir secuencias" del archivo de hoja de cálculo TemplateBRS, abra el menú desplegable del filtro de columna (Presión)_BRS_# y pulse OK sin cambiar ningún parámetro. Esto ordenará automáticamente los datos y actualizará los cálculos para secuencias con 3 tiempos. Repita esto para la hoja de cálculo "Secuencias hacia abajo". <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62101/SupplementalFile13.pdf" target="_blank">Haga clic aquí para descargar este archivo.</a>
Archivo complementario 14: Captura de pantalla de una grabación de alta calidad detectada con software de análisis de ECG y PA. El trazado superior (ECG) muestra la detección de cada pico R y el trazado inferior (PA) muestra la detección de cada pico de presión diastólica (DP) y presión sistólica (SP). Las áreas bajo picos detectados correctamente están marcadas en rojo. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62101/SupplementalFile14.pdf" target="_blank">Haga clic aquí para descargar este archivo.</a>
Archivo complementario 15: Captura de pantalla de una grabación de PA de baja calidad donde los parámetros de PA solo se detectan parcialmente. La traza superior (ECG) muestra la detección de cada pico R, pero la traza inferior (PA) muestra brechas entre los picos de PA detectados. Los picos detectados de presión diastólica (DP) y presión sistólica (SP) están marcados con áreas rojas. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62101/SupplementalFile15.pdf" target="_blank">Haga clic aquí para descargar este archivo.</a>
Archivo complementario 16: Captura de pantalla de un ECG de baja calidad y registro de PA donde no se pudieron detectar los parámetros de ECG y PA. La traza superior (ECG) muestra una región (fondo púrpura) donde no se pudieron detectar los parámetros del ECG. La detección de BP (traza inferior) también falló debido a la baja calidad de la señal. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62101/SupplementalFile16.pdf" target="_blank">Haga clic aquí para descargar este archivo.</a>

Watch this Scientific Journal Video about Implantation of Combined Telemetric ECG and Blood Pressure Transmitters to Determine Spontaneous Baroreflex Sensitivity in Conscious Mice at JoVE.com

Implantation of Combined Telemetric ECG and Blood Pressure Transmitters to Determine Spontaneous Baroreflex Sensitivity in Conscious Mice

El barorreflejo es un mecanismo de regulación de la frecuencia cardíaca por el sistema nervioso autónomo en respuesta a los cambios en la presión arterial. Describimos una técnica quirúrgica para implantar transmisores de telemetría para la medición continua y simultánea del electrocardiograma y la presión arterial en ratones. Esto puede determinar la sensibilidad barorrefleja espontánea, un marcador pronóstico importante para la enfermedad cardiovascular.

Implantación de ECG telemétrico combinado y transmisores de presión arterial para determinar la sensibilidad barorrefleja espontánea en ratones conscientes

Blood pressure (BP) and heart rate (HR) are both controlled by the autonomic nervous system (ANS) and are closely intertwined due to reflex mechanisms. ...

La sensibilidad barorrefleja describe la relación entre los cambios en la presión arterial y los cambios reflejos en la frecuencia cardíaca. Cuando la presión arterial aumenta, la frecuencia cardíaca disminuye y viceversa. Las mediciones combinadas de electrocardiograma telemétrico y presión arterial en ratones conscientes permiten la determinación de la sensibilidad barorrefleja.La principal ventaja de esta técnica sobre los métodos más antiguos para determinar la sensibilidad barorrefleja es que mide el reflejo espontáneo. Los ratones están despiertos y no necesitan ser restringidos. No se requieren procedimientos invasivos como inyectar fármacos vasoactivos para inducir cambios en la presión arterial.El barorreflejo se puede utilizar para la estratificación del riesgo de pacientes con enfermedades cardíacas como hipertensión arterial, infarto de miocardio e insuficiencia cardíaca. Los cambios patológicos de la sensibilidad barorrefleja se asocian con un mayor riesgo de mortalidad cardíaca. Por lo tanto, es un marcador pronóstico importante para la enfermedad cardiovascular.Los detalles microquirúrgicos, como perforar y canular la arteria carótida, son los pasos más desafiantes del protocolo. Se debe tener cuidado para asegurarse de que haya suficiente tensión en las suturas para detener temporalmente el flujo sanguíneo y levantar ligeramente la arteria para la canulación . Comience usando un recortador para afeitar el área quirúrgica de un ratón anestesiado desde debajo de la barbilla hacia los músculos pectorales transversales.Después de colocar al ratón en posición supina, aplique ungüento ocular para proteger los ojos del animal durante la anestesia. Aplique crema depilatoria en el área quirúrgica previamente afeitada. Después de tres a cuatro minutos, retire el vello y la crema depilatoria con un disco de algodón y agua tibia, asegurándose de que la piel esté limpia y libre de vello o crema residual para que la herida no se contamine durante la operación.Haga una incisión recta de una a 1,5 centímetros en la línea media a través de la piel del cuello comenzando inmediatamente debajo de la barbilla. Cree un espacio subcutáneo a ambos lados de la incisión separando la piel del tejido conectivo subyacente con tijeras de disección romas, teniendo cuidado de no pellizcar la piel demasiado fuerte con los fórceps, lo que puede causar necrosis y conducir a una cicatrización de heridas deteriorada después de la cirugía. Separe las glándulas parótidas y submandibulares usando aplicadores de punta de algodón para exponer la musculatura que recubre la tráquea.Retraiga la glándula salival izquierda con pinzas de disección curvas para identificar la arteria carótida izquierda ubicada lateralmente a la tráquea. Diseccionar cuidadosamente la arteria carótida del tejido adyacente usando fórceps curvos, teniendo mucho cuidado de no lesionar el nervio vago que corre a lo largo del vaso. Continúe la disección contundente para exponer la arteria carótida izquierda a unos 10 milímetros de longitud y sepárela completamente de la fascia vascular y el nervio vago.Pase una sutura de seda no absorbible de cinco por cero debajo de la porción aislada de la arteria carótida mientras levanta ligeramente el vaso sanguíneo con fórceps curvos para reducir la fricción entre las suturas y la arteria carótida. Coloque la sutura cranealmente solo proximalmente a la bifurcación de la arteria carótida. Luego forma un nudo y átalo para ligar permanentemente el recipiente.Fije ambos extremos de la sutura de oclusión craneal a la mesa de cirugía con cinta quirúrgica. Pase una segunda sutura de oclusión debajo de la arteria carótida y colóquela caudalmente a una distancia de aproximadamente cinco milímetros de la sutura craneal, atando un nudo suelto. Fije ambos extremos de la sutura con cinta quirúrgica.Coloque una tercera sutura entre la sutura de oclusión craneal y caudal para mantener el catéter en su lugar mientras canula la arteria y haga un nudo suelto. Tire suavemente de la sutura de oclusión caudal y fíjela con tensión para detener temporalmente el flujo sanguíneo y levantar ligeramente la arteria. Penetre cuidadosamente la arteria proximal a la sutura de oclusión craneal con la aguja doblada.Mientras eleva ligeramente la arteria carótida con la aguja doblada, agarre el catéter con pinzas de canulación de vaso, introdúzcalo en la punción pequeña y deje que se deslice lentamente en el vaso. Simultáneamente, tire suavemente hacia atrás de la aguja doblada. Cuando el catéter alcance la sutura de oclusión caudal, apriete ligeramente la sutura segura para mantener el catéter en su lugar.Afloje la sutura de oclusión caudal para que el catéter se pueda mover aún más hasta que su punta se coloque en el arco aórtico. Una vez colocado correctamente, asegure el catéter con las tres suturas y corte los extremos lo más corto posible sin apretar demasiado los nudos. Forma un túnel subcutáneo desde el cuello dirigido hacia el flanco izquierdo del animal y forma una pequeña bolsa con pequeñas tijeras romas de disección.Irrigar el túnel con una jeringa de un mililitro llena de solución tibia estéril de cloruro de sodio al 0,9% e introducir aproximadamente 300 microlitros de la solución en la bolsa. Levante cuidadosamente la piel con fórceps romos e introduzca el cuerpo del dispositivo transmisor en la bolsa, teniendo cuidado de no sacar el catéter de presión arterial de la arteria carótida. Forme un túnel delgado hacia el músculo pectoral derecho con tijeras de disección romas y coloque la derivación negativa en el túnel usando pinzas romas.Fije el extremo terminal del cable con una puntada al músculo pectoral utilizando material de sutura absorbible de seis por cero. Forme un bucle en la derivación positiva, coloque su punta en la región de la costilla caudal izquierda y asegure su posición usando una sutura absorbible de seis por cero. Cerrar la piel con nudos simples utilizando material de sutura no absorbible de cinco por cero.Además, aplique una pequeña cantidad de adhesivo tisular en cada nudo para evitar que el animal muerda la sutura y evitar la dehiscencia. Aplique hidrogel de yodo de povidona al 10% en la herida para prevenir la infección de la herida durante la fase de recuperación. Para el alivio preventivo del dolor, inyecte carprofeno en cloruro de sodio al 0,9% por vía subcutánea mientras el ratón todavía está bajo anestesia.Coloque la mitad de la jaula en una plataforma de calentamiento a 36 grados centígrados durante 12 horas después de la cirugía y transfiera el ratón al área cálida para que el animal tenga la opción de permanecer en el área cálida o moverse a la parte más fría de la jaula cuando esté despierto. Después de la adquisición de datos, inspeccione la presión arterial y los rastros de ECG y detecte una secuencia de tres horas de baja actividad. Para realizar la sensibilidad barorrefleja o el análisis BRS, abra el panel de análisis BRS.Inspeccione manualmente cada secuencia mostrada en el panel y excluya latidos ectópicos, pausas sinusales, eventos arrítmicos o datos ruidosos para excluirlos correctamente del análisis. Este protocolo se puede utilizar para el análisis preciso de BRS y una amplia gama de parámetros derivados de ECG o BP, como intervalos de ECG, variabilidad de PA y detecciones de arritmias. Un ratón sano que se ha recuperado suficientemente de la cirugía muestra un aumento fisiológico de la actividad, la frecuencia cardíaca y la presión arterial durante la fase oscura.El método de secuencia se utilizó para determinar BRS donde la presión arterial sistólica y los intervalos RR se examinaron latido a latido durante secuencias cortas de tres o más latidos con un aumento o disminución espontánea de la presión arterial sistólica. Para evaluar la correlación entre RR y presión arterial sistólica, ambos parámetros se graficaron entre sí y se calculó la pendiente de la línea de regresión lineal para cada secuencia. El número total de secuencias por 1.000 latidos y la ganancia media de BRS espontánea reflejada por las pendientes de las líneas de regresión lineal calculadas a partir del RR por la relación de presión arterial sistólica son parámetros de interés en el análisis.Durante las fases de mayor actividad, la calidad de la señal puede disminuir e inducir ruido. El establecimiento de dos valores bajos para el coeficiente de correlación mínimo también da como resultado detecciones falsas de secuencias que no reflejan la actividad barorrefleja, sino que son el resultado de perlas arrítmicas. Para la interpretación de los datos de sensibilidad de los barorreceptores, es importante considerar los niveles funcionales implicados en el reflejo barorreceptor.A nivel neuronal, los componentes aferentes, centrales o eferentes del reflejo pueden estar alterados. A nivel cardiovascular, la reducción o aumento de la capacidad de respuesta del nódulo sinusal puede causar cambios en la sensibilidad de los barorreceptores. Con estos datos, no solo se puede determinar la sensibilidad barorrefleja y la función del nódulo sinoauricular cardíaco, sino también una amplia gama de parámetros derivados del ECG y la presión arterial.Estos incluyen, por ejemplo, presión arterial sistólica y diastólica, intervalos de ECG, variabilidad de la frecuencia cardíaca o ritmos de cigarra.

Research

JoVE Journal

Medicine

Pressure Controlled Ventilation to Induce Acute Lung Injury in Mice

La presión de la ventilación controlada para inducir la lesión pulmonar aguda en ratones

Murine models are extensively used to investigate acute injuries of different organs systems (1-34). Acute lung injury (ALI), which occurs with prolonged ...

Investigación

Medicina

Hyperinsulinemic-euglycemic Clamps in Conscious, Unrestrained Mice

Hiperinsulinémico euglucémico abrazaderas en ratones conscientes, sin freno

Type 2 diabetes is characterized by a defect in insulin action. The hyperinsulinemic-euglycemic clamp, or insulin clamp, is widely considered the "gold ...

Implantation of Radiotelemetry Transmitters Yielding Data on ECG, Heart Rate, Core Body Temperature and Activity in Free-moving Laboratory Mice

Implantación de transmisores de radiotelemetría Ceder los datos en el ECG, frecuencia cardiaca, la temperatura corporal y la actividad en ratones de laboratorio de movimiento libre

The laboratory mouse is the animal species of choice for most biomedical research, in both the academic sphere and the pharmaceutical industry. Mice are a ...

Femoral Arterial and Venous Catheterization for Blood Sampling, Drug Administration and Conscious Blood Pressure and Heart Rate Measurements

El cateterismo femoral arterial y venosa para muestras de sangre, la Administración de Drogas y la presión arterial consciente y mediciones del ritmo cardíaco

In multiple fields of study, access to the circulatory system in laboratory studies is necessary. Pharmacological studies in rats using chronically ...

Orthotopic Implantation and Peripheral Immune Cell Monitoring in the II-45 Syngeneic Rat Mesothelioma Model

Ortotópico Implantación y Seguimiento de la célula inmune periférica en el modelo II-45 Singénico Rata Mesotelioma

The enormous upsurge of interest in immune-based treatments for cancer such as vaccines and immune checkpoint inhibitors, and increased understanding of ...

Long-term Blood Pressure Measurement in Freely Moving Mice Using Telemetry

A largo plazo de medida de la presión arterial en ratones con libertad de movimientos mediante telemetría

During the development of new vasoactive agents, arterial blood pressure monitoring is crucial for evaluating the efficacy of the new proposed drugs. ...

Novel Approach for Simultaneous Recording of Renal Sympathetic Nerve Activity and Blood Pressure with Intravenous Infusion in Conscious, Unrestrained Mice.

Nuevo enfoque para la grabación simultánea de la actividad nerviosa simpática Renal y presión arterial con la infusión intravenosa en consciente, libre de ratones.

Renal sympathetic nerves contribute significantly to both physiological and pathophysiological phenomena. Evaluating renal sympathetic nerve activity ...

Assessment of Respiratory Function in Conscious Mice by Double-chamber Plethysmography

Evaluación de la función respiratoria en ratones conscientes por Pletismografía de doble cámara

Air volume changes created by a conscious subject breathing spontaneously within a body box are at the basis of plethysmography, a technique used to ...

Ultrasound Imaging of the Thoracic and Abdominal Aorta in Mice to Determine Aneurysm Dimensions

Imágenes por ultrasonido de la Aorta torácica y Abdominal en ratones para determinar dimensiones de aneurisma

Contemporary high-resolution ultrasound instruments have sufficient resolution to facilitate the measurement of mouse aortas. These instruments have been ...

Implantation of an Isoproterenol Mini-Pump to Induce Heart Failure in Mice

Implantación de una minibomba de isoproterenol para inducir insuficiencia cardíaca en ratones

Isoproterenol (ISO), is a non-selective beta-adrenergic agonist, that is used widely to induce cardiac injury in mice. While the acute model mimics ...