Name: whole-mount staining, visualization, and analysis of fungiform, circumvallate, and palate taste buds
Uploaded: 2021-02-11T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Whole-Mount Staining, Visualization, and Analysis of Fungiform, Circumvallate, and Palate Taste Buds at JoVE.com

Agradecemos a Kavisca Kuruparanantha por suas contribuições para a coloração de tecidos e a imagem de papilas gustativas circunvalolantes, Jennifer Xu por coloração e imagem de inervação à papila, Kaytee Horn para cuidados com animais e genotipagem, e Liqun Ma por sua coloração tecidual dos paladares macios. Este projeto foi apoiado por R21 DC014857 e R01 DC007176 para R.F.K e F31 DC017660 para L.O.

NOTA: Todos os animais foram atendidos de acordo com as diretrizes estabelecidas pela Política de Serviços Públicos de Saúde dos EUA sobre o Cuidado Humano e Uso de Animais de Laboratório e o Guia do NIH para o Cuidado e Uso de Animais de Laboratório. Os camundongos Phox2b-Cre (cepa MMRRC 034613-UCD, NP91Gsat/Mmcd) ou ratos TrkBCreER (Ntrk2tm3.1(cre/ERT2)Ddg) foram criados com ratos repórteres tdTomato (Ai14). AdvillinCreER47 foram criados com Phox2...

O desenvolvimento de uma abordagem para coletar e manchar consistentemente papilas gustativas inteiras de três regiões de sabor da cavidade oral (fungos, circunvallato e paladar) proporciona melhorias significativas para a análise de células transdutoras de paladar, rastreamento de células recém-incorporadas, inervação e relações entre essas estruturas. Além disso, facilita a localização de um potencial marcador de neurônio secundário dentro ou fora de uma população rotulada50. Is...

As papilas gustativas são coleções de 50-100 células epiteliais especializadas que ligam subconjuntos de estímulos de gosto químico presentes na cavidade oral. Acredita-se que as células transdutoras de sabor existam como tipos1,2,3,4,5,6,7,8,9, inicialmente baseadas em critérios de microscopia eletrônica que foram posteriormente correlacionados com marcadores moleculares. As células tipo II expressam fosfolipase C-beta 2 (PLCβ2)2 e canal de cação potencial receptor transitório, subfamília M membro 51 e incluem células que transduem doce, amargo e umami1,10. As células tipo III expressam anidragem carbônica 4 (Car4)11 e proteína associada à sinapstosômica 258 e denotam células que respondem principalmente ao sabor azedo11. As células que transduem salgados não foram tão claramente delineadas12,13,14, mas poderiam potencialmente incluir células tipo I, Tipo II e Tipo III15,16,17,18,19. O ambiente de paladar é complexo e dinâmico, uma vez que as células transdutoras de sabor se transformam continuamente durante toda a idade adulta e são substituídas por progenitores basais3,20,21. Essas células transdutoras de sabor se conectam a fibras nervosas pseudo-unipolar do gânglio geniculado e petrosal, que passam informações de gosto para o tronco cerebral. Esses neurônios foram categorizados principalmente com base no tipo de informação de sabor que carregam22,23 porque as informações sobre sua morfologia têm sido evasivas até recentemente24. As células tipo II comunicam-se com fibras nervosas através da proteína moduladora de homeostase de cálcio 1 íon canais25, enquanto as células tipo III se comunicam através de sinapses clássicas8,26. Maior caracterização das células do paladar - incluindo linhagens do tipo celular transdutor, fatores que influenciam sua diferenciação e as estruturas de arbores de conexão são todas áreas de investigação ativa.
Estudos de paladar têm sido dificultados por vários desafios técnicos. Os tecidos heterogênios e densos que compõem a língua reduzem significativamente a permeabilidade de anticorpos para a imunohistoquímica27,28,29. Esses obstáculos têm exigido protocolos de secção que resultam na divisão de papilas gustativas entre as seções para que as medidas sejam aproximadas com base em seções representativas ou resumidas em todas as seções. Anteriormente, seções finas representativas têm sido usadas para aproximar os valores de volume e a contagem de células transdutoras30. Seção serial mais espessa permite a imagem de todas as seções de paladar e a soma das medidas de cada seção31. Cortando seções tão grossas e selecionando apenas vieses de paladar inteiros amostrando para papilas gustativas menores32,33,34. As estimativas de inervação nervosa das papilas gustativas seccionadas foram baseadas em análises dos números depixels 13,35, se quantificadas em todos os36,37,38. Essas medidas ignoram completamente a estrutura e o número de arbors nervosas individuais, porque as árvores são divididas (e geralmente mal rotuladas). Por fim, embora descascar o epitélio permita que papilas gustativas inteiras sejam manchadas39,40, ela também remove fibras nervosas gustativas e pode interromper as relações normais entre as células. Portanto, as investigações das relações estruturais dentro das papilas gustativas têm sido limitadas por causa dessa interrupção causada pelas abordagens de coloração.
A coleta de estrutura completa elimina a necessidade de seções representativas e permite a determinação de medições de valor absoluto de volumes, contagem de células e morfologias estruturais41. Essa abordagem também aumenta a precisão, limita o viés e reduz a variabilidade técnica. Este último elemento é importante porque as papilas gustativas apresentam considerável variabilidade biológica dentrode 34,42 e entre as regiões43,44, e análises de paladar inteiros permitem que números de células absolutas sejam comparados entre o controle e as condições experimentais. Além disso, a capacidade de coletar papilas gustativas intactas permite a análise das relações físicas entre diferentes células transdutoras e suas fibras nervosas associadas. Como as células transdutoras de sabor podem se comunicar entre si45 e se comunicar com as fibras nervosas46,essas relações são importantes para a função normal. Assim, as condições de perda de função podem não ser devido à perda de células, mas sim a mudanças nas relações celulares. Fornecido aqui é um método para coletar papilas gustativas inteiras para obter os benefícios de medidas absolutas para análises de volume de refino tanto para paladar quanto para suas innervações, contagem de células de paladar e formas, e para facilitar análises de relações transdutor-células e morfologias nervosas-arboriológicas. Dois fluxos de trabalho também são apresentados a jusante deste novo método de montagem total para preparação de tecidos: 1) para análise do volume da papila gustativa e inervação total e 2) para rotulagem genética de células esparsas de neurônios de paladar (com subconjuntos de células transdutoras de paladar rotuladas) e análises subsequentes da morfologia da árvore do nervo do paladar, números de tipos de células de sabor e suas formas, e o uso de software de análise de imagem para analisar as relações físicas entre células transdutoras e aquelas entre transdutores células e suas arboris nervosas. Juntos, esses fluxos de trabalho fornecem uma nova abordagem para a preparação de tecidos e para as análises de papilas gustativas inteiras e a morfologia completa de suas arboridades inervas.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr >
			<td >2,2,2-Tribromoethanol</td>
			<td >ACROS Organics</td>
			<td >AC421430100</td>
			<td ></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >2-Methylbutane</td>
			<td>ACROS</td>
			<td>126470025</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >AffiniPure Fab Fragment Donkey Anti-Rabbit IgG</td>
			<td>Jackson ImmunoResearch</td>
			<td>711-007-003</td>
			<td>15.5&#956;L/mL</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Alexa Fluor&#174; 647 AffiniPure Donkey Anti-Rat IgG</td>
			<td>Jackson Immuno Research</td>
			<td>712-605-150</td>
			<td>(1:500)</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >AutoQuant X3 software</td>
			<td>&#160;Media Cybernetics</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Blunt End Forceps</td>
			<td>Fine Science Tools&#160;</td>
			<td>FST 91100-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Click-iT&#8482; Plus EdU Cell Proliferation Kit</td>
			<td>Molecular Probes</td>
			<td>C10637</td>
			<td>Follow kit instructions&#160;</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Coverglass</td>
			<td>Marienfeld</td>
			<td>107242</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Cytokeratin-8</td>
			<td>Developmental Studies Hybridoma Bank (DSHB), (RRID: AB_531826)&#160;</td>
			<td>Troma1 supernatant</td>
			<td>(1:50, store at 4&#176;C)</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Dissection Scissors (coarse)</td>
			<td>Roboz</td>
			<td>RS-5619</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Dissection Scissors (fine)</td>
			<td>Moria</td>
			<td>MC19B</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Donkey anti-Rabbit IgG (H+L) Highly Cross-Adsorbed Secondary Antibody, Alexa Fluor 488</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>A21206</td>
			<td>(1:500)</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Donkey anti-Rabbit, Alexa Fluor&#174; 555</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>A31572</td>
			<td>(1:500)</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >DyLight&#8482; 405 AffiniPure Fab Fragment Bovine Anti-Goat IgG</td>
			<td>Jackson Immuno Research</td>
			<td>805-477-008</td>
			<td>(1:500)</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Fluoromount G</td>
			<td>Southern Biotech</td>
			<td>0100-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Glass slides</td>
			<td>Fisher Scientific (Superfrost Plus Miscroscope Slides)</td>
			<td>12-550-15</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Goat anti-Car4</td>
			<td>R&#38;D Systems&#160;</td>
			<td>AF2414</td>
			<td>(1:500)</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Imaris&#160;</td>
			<td>Bitplane&#160;</td>
			<td>pixel-based image analysis software</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Neurolucida 360 + Explorer</td>
			<td>MBF Biosciences</td>
			<td>3D vector based image analysis software</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Normal Donkey Serum</td>
			<td>Jackson Immuno Research</td>
			<td>017-000-121</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Normal Rabbit Serum&#160;</td>
			<td>Equitech-Bio, Inc</td>
			<td>SR30</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Olympus FV1000</td>
			<td></td>
			<td >(multi-Argon laser with wavelengths 458, 488, 515 and additional HeNe lasers emitting 543 and 633)</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Paraformaldehyde</td>
			<td>EMD</td>
			<td>PX0055-3</td>
			<td>4% in 0.1M PB</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Rabbit anti-dsRed</td>
			<td>Living Colors DsRed Polyclonal Antibody; Clontech Clontech Laboratories, Inc. (632496)</td>
			<td>632496</td>
			<td>(1:500)</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Rabbit anti-PLC&#946;2&#160;</td>
			<td>Santa Cruz Biotechnology</td>
			<td>Cat# sc-206</td>
			<td>(1:500)</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Sodium Phosphate Dibasic Anhydrous</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>BP332-500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Sodium Phosphate Monobasic</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>BP330-500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >tert-Amyl alcohol</td>
			<td>Aldrich Chemical Company</td>
			<td>8.06193</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Tissue Molds</td>
			<td>Electron Microscopy Sciences</td>
			<td>70180</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Tissue-Tek&#174;&#160;O.C.T. Compound</td>
			<td>Sakura</td>
			<td>4583</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Triton X-100</td>
			<td>BIO-RAD</td>
			<td>#161-0407</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Zenon&#8482; Alexa Fluor&#8482; 555 Rabbit IgG Labeling Kit</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>Z25305</td>
			<td>Follow kit instructions&#160;</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

whole-mount staining, visualization, and analysis of fungiform, circumvallate, and palate taste buds

As papilas gustativas são coleções de células transdutoras especializadas para detectar subconjuntos de estímulos químicos na cavidade oral. Essas células transdutoras se comunicam com fibras nervosas que levam essa informação para o cérebro. Como as células transdutoras de paladar morrem continuamente e são substituídas ao longo da vida adulta, o ambiente de paladar é complexo e dinâmico, exigindo análises detalhadas de seus tipos celulares, suas localizações e quaisquer relações físicas entre elas. Análises detalhadas foram limitadas pela heterogeneidade e densidade do tecido da língua que reduziram significativamente a permeabilidade do anticorpo. Esses obstáculos requerem protocolos de secção que resultam na divisão de papilas gustativas entre as seções para que as medidas sejam apenas aproximadas, e as relações celulares sejam perdidas. Para superar esses desafios, os métodos aqui descritos envolvem a coleta, imagem e análise de papilas gustativas inteiras e arboris terminais individuais de três regiões de sabor: papilas fungiformes, papilas circunvallantes e paladar. A coleta de papilas gustativas inteiras reduz o viés e a variabilidade técnica e pode ser usada para relatar números absolutos para características como volume de paladar, invação total de paladar, contagem de células transdutoras e morfologia de arboris terminais individuais. Para demonstrar as vantagens deste método, este artigo proporciona comparações de papila gustativa e volumes de inervação entre papilas gustativas fungiformes e circunvallantes utilizando um marcador geral de paladar e um rótulo para todas as fibras de sabor. Um fluxo de trabalho para o uso de rotulagem genética de células esparsas de neurônios de sabor (com subconjuntos rotulados de células transdutoras de sabor) também é fornecido. Este fluxo de trabalho analisa as estruturas de arbores individuais de paladar-nervo, números de tipo celular e as relações físicas entre as células usando o software de análise de imagem. Juntos, esses fluxos de trabalho fornecem uma nova abordagem para a preparação e análise de tecidos de papilas gustativas inteiras e a morfologia completa de suas arboris inervas.

A coloração do epitélio lingual com anticorpos para dsRed e queratina-8 (um marcador geral de paladar) rotulou tanto as papilas gustativas inteiras quanto toda a inervação do paladar em Phox2b-Cre:tdTomato ratos50,51 (Figura 3A). A imagem dessas papilas gustativas de seus poros para suas bases deu a maior resolução x-y imagens de avião(Figura 3A, B). A função de contorno do pro...

Watch this Scientific Journal Video about Whole-Mount Staining, Visualization, and Analysis of Fungiform, Circumvallate, and Palate Taste Buds at JoVE.com

Whole-Mount Staining, Visualization, and Analysis of Fungiform, Circumvallate, and Palate Taste Buds

Este artigo descreve métodos para preparação de tecidos, coloração e análise de papilas gustativas de fungos, circunvallato e paladar inteiros que produzem consistentemente papilas gustativas inteiras e intactas (incluindo as fibras nervosas que os inervam) e mantêm as relações entre estruturas dentro das papilas gustativas e a papila circundante.

Colorindo, Visualização e Análise de Papilas de Fungos, Circunvalolados e Paladar

Taste buds are collections of taste-transducing cells specialized to detect subsets of chemical stimuli in the oral cavity. These transducing cells ...

Este fluxo de trabalho de dissecção e análise de todo o montagem fornece uma nova abordagem para analisar a morfologia completa das arboris nervosas de paladar individuais, transduzindo números do tipo celular e as relações físicas entre as células. Coletar todo o epitélio lingual nos permite medir o número absoluto de células e o volume de inervação dentro de toda a papila gustativa. Essa abordagem é mais precisa do que as estimativas da estrutura celular com base na amostragem de seções, o que reduz a variabilidade técnica.Este também é o primeiro método que fornece análise detalhada das células gustativas em relação à sua inervação. Esse método pode aprimorar investigações sobre os circuitos potenciais dentro da papila gustativa, bem como processos de doenças e quimioterápicos que interrompem a função normal do sabor. Na maioria desses casos, não está claro qual estrutura ou relacionamento é interrompido, então manter todos esses fatores intactos permite todas as análises dentro de uma única preparação.O erro mais comum é tentar evitar danificar o epitélio por não dissecar perto o suficiente da parte inferior do epitélio. É imperativo remover o máximo de tecido subjacente possível antes de congelar o tecido no molde do tecido. Também é importante garantir que o epitélio esteja na parte inferior do molde do tecido.Comece descongelando e enxaguando a língua em 0,1 tampão molar fosfato. Em seguida, coloque 1/2 da língua anterior contendo as papilas fungiformes em um deslizamento de vidro sob um microscópio dissecando. Use fórceps e tesouras de dissecção para remover o músculo e mantenha o tecido aberto à medida que o epitélio lingual é curvo, garantindo uma orientação plana do tecido mantendo as lâminas da tesoura de dissecção grosseira paralela à epitélio.Descarte o epitélio ventral não queratinizado da língua, pois não contém papilas gustativas. Em seguida, use uma tesoura de dissecção fina para dissecção mais próxima à parte inferior do epitélio queratinizado. Use fórceps sem corte para colocar um pedaço de epitélio em um molde de tecido e garantir que ele se deite plano.Em seguida, adicione uma gota de composto de temperatura de corte ideal, ou OCT, ao tecido. Coloque o molde de tecido em uma base metálica previamente resfriada sob o escopo de dissecação, em seguida, continue a tocar o tecido levemente com os fórceps até que o OCT tenha congelado, garantindo que o tecido congele o mais plano possível. Uma vez que o OCT tenha congelado, adicione rapidamente oct adicional e coloque o molde em um béquer de 2-metilbutano resfriado até congelar.Monte o molde OCT no criostat e corte-o em seções de 20 mícrons. Colete cada seção e visualize-a sob o microscópio de luz para avaliar sua proximidade com a base do epitélio. Depois que o tecido for raspado da parte inferior do epitélio, descongele o epitélio e enxágue-o duas vezes em 0,1 pb molar em um agitador.Corte o paladar duro anterior à junção do paladar macio e duro, em seguida, separe o paladar macio do tecido subjacente, certificando-se de que quaisquer fragmentos ósseos restantes sejam cortados e removendo músculos adicionais e tecido conjuntivo. Segure o paladar com fórceps sem corte e remova as glândulas restantes e perca tecido conjuntivo raspando-os suavemente com uma lâmina de barbear. Botões de paladar inteiros e toda a inervação do paladar em camundongos Phox2b-Cre TdTomato foram rotulados pela coloração do epitélio lingual com anticorpos para DsRed e queratina oito.O volume da papila gustativa foi medido e não revelou correlações entre volumes de paladar e volumes de inervação nas regiões de medição de fungos ou circunvalladas. A administração de uma baixa dose de tamoxifen em camundongos TrkB CreER TdTomato causa recombinação genética e rotulagem de um pequeno número de neurônios. Uma papila gustativa de montagem inteira manchada com marcadores celulares transdutores de sabor, anidrato 4 e fosfolipase C beta dois é mostrado aqui.Esta papila gustativa tem duas arbors terminais rotuladas, que são mostradas com a papila gustativa removida após a reconstrução das fibras. O uso de um software de imagem baseado em pixels celulares para determinar a proximidade mais próxima entre fibras nervosas e células transdutoras de sabor revelou que de 19 células transdutoras de sabor, a árvore terminal azul estava dentro de 200 nanômetros da anidrádrada carbonoica azul clara quatro mais células. A árvore terminal associada ao rastreamento verde é mostrada em magenta e está dentro de 200 nanômetros da anidrádrada carbonoica azul clara e escura quatro células.A queratina de montagem total oito e 5-ethynyl-2'deoxyuridina ou a coloração da EdU de papilas gustativas fungiformes revelaram que as células rotuladas pela EdU estavam presentes dentro e fora das papilas gustativas. Os núcleos magenta e roxo são observados fora da queratina oito mais borda da papila gustativa. As células amarelas, teal e azul estavam dentro da papila.Ao tentar este protocolo, a dissecção tecidual e as etapas de congelamento são cruciais. Esses métodos de dissecção tecidual podem ser seguidos pela coloração de uma variedade de células e estruturas para analisar as relações dentro da papila gustativa e fora da papila gustativa, mas dentro da papila. Esta é a primeira análise de arbors de gosto inteiro dentro da papila gustativa, bem como suas relações com células transdutoras de sabor.A preservação e a coloração de vários desses elementos em uma única preparação ampliam as possibilidades de análise e refinam as medidas possíveis.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Visualization of the Embryonic Nervous System in Whole-mount Drosophila Embryos

Visualization of the Embryonic Nervous System in Whole-mount Drosophila Embryos

Visualização do Sistema Nervoso embrionárias no Whole-mount Drosophila Os embriões

The Drosophila embryo is an attractive model system for investigating the cellular and molecular basis of neuronal development. Here we describe the ...

Neurociência

Dissection of a Mouse Eye for a Whole Mount of the Retinal Pigment Epithelium

Dissecação de um olho do rato para um monte inteiro do epitélio pigmentar da retina

The retinal pigment epithelium (RPE) lies at the back of the mammalian eye, just under the neural retina, which contains the photoreceptors (rods and ...

Reproducible Mouse Sciatic Nerve Crush and Subsequent Assessment of Regeneration by Whole Mount Muscle Analysis

Reprodutível mouse esmagamento do nervo ciático e subsequente avaliação de Regeneração por Análise Whole Mount muscular

Regeneration in the peripheral nervous system (PNS) is widely studied both for its relevance to human disease and to understand the robust regenerative ...

Isolation and Culture of Human Fungiform Taste Papillae Cells

Isolamento e Cultura de Células Papila fungiforme Humanos Taste

Taste cells are highly specialized, with unique histological, molecular and physiological characteristics that permit detection of a wide range of simple ...

Visualization and Genetic Manipulation of Dendrites and Spines in the Mouse Cerebral Cortex and Hippocampus using In utero Electroporation

Visualization and Genetic Manipulation of Dendrites and Spines in the Mouse Cerebral Cortex and Hippocampus using In utero Electroporation

Visualização e manipulação genética de dendritos e espinhas no córtex cerebral e hipocampo do rato usando<em&gt; In utero</em&gt; Eletroporação

In utero electroporation (IUE) has become a powerful technique to study the development of different regions of the embryonic nervous system 1-5. To date ...

Whole Mount Immunofluorescent Staining of the Neonatal Mouse Retina to Investigate Angiogenesis In vivo

Whole Mount Immunofluorescent Staining of the Neonatal Mouse Retina to Investigate Angiogenesis In vivo

Whole Mount coloração de imunofluorescência do Rato Retina Neonatal para investigar angiogênese<em&gt; In vivo</em

Angiogenesis  is the complex process of new blood vessel formation defined by the sprouting  of new blood vessels from a pre-existing vessel network. ...

Dissection of the Transversus Abdominis Muscle for Whole-mount Neuromuscular Junction Analysis

Dissection of the Transversus Abdominis Muscle for Whole-mount Neuromuscular Junction Analysis

Dissecção do Músculo Transversus Abdominis para Análise de Junção Neuromuscular de Montagem Integral

Analysis of neuromuscular junction morphology can give important insight into the physiological status of a given motor neuron. Analysis of thin flat ...

Whole Mount Immunolabeling of Olfactory Receptor Neurons in the Drosophila Antenna

Whole Mount Immunolabeling of Olfactory Receptor Neurons in the Drosophila Antenna

Monte todo imunomarcação de Neurônios Receptores Olfatórios no<em&gt; Drosophila</em&gt; Antena

Odorant molecules bind to their target receptors in a precise and coordinated manner. Each receptor recognizes a specific signal and relays this ...

Whole-mount Imaging of Mouse Embryo Sensory Axon Projections

Todo-mount imagem de embrião de rato Projeções Sensorial Axon

The visualization of full-length neuronal projections in embryos is essential to gain an understanding of how mammalian neuronal networks develop. Here we ...

Whole Mount Labeling of Cilia in the Main Olfactory System of Mice

Monte todo Rotulagem de Cilia na Olfativo Sistema de Ratos Principal

The mouse olfactory system comprises 6-10 million olfactory sensory neurons in the epithelium lining the nasal cavity. Olfactory neurons extend a single ...