Name: a plate-based assay for the measurement of endogenous monoamine release in acute brain slices
Uploaded: 2021-08-11T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Plate-Based Assay for the Measurement of Endogenous Monoamine Release in Acute Brain Slices at JoVE.com

وقد تم دعم هذا العمل من خلال منح صندوق بدء Fondecyt N 11191049 إلى J.A.P. ومنحة المعاهد القومية للصحة DA038598 إلى G.E.T.

وقد أجريت جميع التجارب، بما في ذلك مناولة الحيوانات وجمع الأنسجة، وفقا لجامعة فلوريدا ولجنة رعاية الحيوانات واستخدامها المؤسسية التابعة لكلية مدينة نيويورك، وذلك في أعقاب البروتوكول المعتمد 201508873 (UF) و 1071 (CCNY). للكواشف و المخزن المؤقت الرجاء الرجوع إلى الملف التكميلي.
<p class="jove_t...

وقد أجريت قياسات إطلاق مونوامين لسنوات في عدد من النظم مثل خلايا heterologous, الثقافات العصبية, التنابتوسومات الدماغ, شرائح الدماغ الحادة في الجسم الحي السابق, والحيوانات كلها13,20,41,42,58,64,65,66,67,68<sup class=...

ويرتبط عدد كبير من الأمراض العصبية والنفسية مع dysregulation أو الصيانة غير كافية من الناقل العصبي مونوامين (الدوبامين [DA], السيروتونين [5-HT], النورادرينالين [NE]) homeostasis1,2,3. وتشمل هذه الشروط، على سبيل المثال لا الحصر، الاكتئاب1،2، الفصام2، القلق2، الإدمان4، انقطاع الطمث5،6،7، pain8، ومرض باركنسون3. على سبيل المثال، أظهرت العديد من نماذج الفئران من انقطاع الطمث أن خلل التنظيم أو الحد من مونوامين داخل قرن آمون، قشرة الجبهي، والمزمع قد تكون مرتبطة مع كل من الاكتئاب والتدهور المعرفي، والذي ينظر إليه في النساء اللواتي يعانين من انقطاع الطمث. وقد تم فحص خلل تنظيم مونوامين في هذه النماذج على نطاق واسع باستخدام HPLC-ECD, على الرغم من أن الدراسات لم تميز بين محتوى الناقل العصبي المقاس مقابل الافراج عن الناقل العصبي 5,6,7. يتم إطلاق مونوامينات كلاسيكيا في الفضاء خارج الخلية من خلال Ca2 + تعتمد على الافراج عن المركبات9، ويتم إعادة تدويرها مرة أخرى من خلال نظام إعادة امتصاص غشاء البلازما الخاصة بهم (ناقل الدوبامين، DAT؛ الناقل السيروتونين، SERT؛ ناقل النورادرينالين، NET)10،11. وعلى العكس من ذلك، تشير البيانات إلى أن هؤلاء الناقلين قادرون على إطلاق أو إطلاق مونوامينات الإيفلاكس، حيث أن المخدرات التي تتعاطى مثل الأمفيتامين (AMPH) و 3,4-Methylenedioxymethamphetamine (MDMA) معروفة بإطلاق DA و 5-HT، على التوالي من خلال أنظمة النقل الخاصة بهم12,13,14,15,16,17 . وبالتالي ، فإن الفهم الآلي السليم لديناميكيات إطلاق أحادي الأمين أمر بالغ الأهمية لتطوير علاجات دوائية محددة ومستهدفة.
وقد استخدمت مجموعة واسعة من التقنيات لدراسة إطلاق أحادي الأمين مثل المسح السريع Cyclic Voltammetry (FSCV)18، في التحليل الدقيق في الجسم الحي13، والتصوير19، والتنبيب المسبق مع مونوامينات 20 ذات السمية الإشعاعية، وعلم البصريات، ومؤخرا، أجهزة الاستشعار الفلورية المشفرة وراثيا وقياس الفوتومتر21،22 . FSCV وفي الغسيل المجهري في الجسم الحي هي التقنيات الأولية المستخدمة لدراسة إطلاق مونوامين. يستخدم FSCV لدراسة إطلاق الإكسيتوتيك المحفز ، في المقام الأول ، DA في شرائح الدماغ الحادة وفي vivo23. لأن FSCV يستخدم الأقطاب الكهربائية لتحفيز أو استحضار الإفراج, المصدر الرئيسي لإطلاق الناقل العصبي هو Ca2 +تعتمد على الافراج عن المركبات18,24,25,26,27,28,29,30,31 . في التحليل الدقيق في الجسم الحي إلى جانب تدابير HPLC التغيرات في مستويات الناقل العصبي خارج الخلية باستخدام مسبار وضعت في منطقة الدماغ من الفائدة13,32. على غرار FSCV ، هناك قيد كبير على غسيل الكلى الدقيق في الجسم الحي هو صعوبة تحديد مصدر إطلاق الناقل العصبي: إطلاق المركبات المعتمدة Ca2 + أو الناقل التابع. والجدير بالذكر أن كلا الأسلوبين يسمحان بالقياس المباشر لإطلاق أحادي الأمين. من خلال التقدم الأخير في علم الوراثة البصرية ، تظهر الأبحاث الكشف عن إصدار 5-HT و DA في فترة زمنية قصيرة مع خصوصية رائعة من نوع الخلية21،22. ومع ذلك، تتطلب هذه الاستراتيجيات تقنيات ومعدات معقدة ومكلفة، وتقيس بشكل غير مباشر إطلاق مونوامين، وتحديدا من خلال ربط أحادي الأمين بالمستقبلات. وعلاوة على ذلك، تستخدم مونوامينات ذات علامات إشعاعية أيضا لدراسة ديناميات مونوامين. قد يتم تحميلها مسبقا مونوامينات ذات العلامات المشعة في مختلف النظم النموذجية مثل خلايا heterologous الإفراط في التعبير عن كل ناقل مونوامين20,33,34,35,36,37,38,39,40, الخلايا العصبية الأولية20, synaptosomes3,39,41, 42، وشرائح الدماغ الحادة43,44. ومع ذلك ، فإن النشاط الإشعاعي يشكل ضررا محتملا للمجرب ، وقد لا يقوم التحليل المسمى بالتريتيوم بتلخيص ديناميكيات مونوامين الذاتية 4545.46 بأمانة. وقد سمحت أنظمة التخسين الفائقة جنبا إلى جنب مع أساليب الكشف خارج الخط مثل HPLC-ECD للكشف عن مونوامينات من مصادر أنسجة متعددة. هنا، يوفر هذا البروتوكول كطريقة محسنة ومنخفضة التكلفة وبسيطة ودقيقة باستخدام شرائح الدماغ الحادة لقياس مباشرة القاعدية الذاتية وتحفيز إطلاق مونوامين.
شرائح الدماغ الحادة تسمح لاختبار الفرضيات الميكانيكية، في المقام الأول لأنها تحافظ على البيئة الدقيقة التشريحية في الجسم الحي، والحفاظ على نقاط الاشتباك العصبي سليمة47،48،49،50،51،52. في عدد قليل من الدراسات، تم استخدام شرائح الدماغ الحادة أو أنسجة الدماغ المفرومة بالتزامن مع تقنية التغميس الفائق باستخدام KCl لتحفيز إطلاق Ca2+ بوساطة53,54,55,56. وكانت أنظمة التخسين الفائق حاسمة لتعزيز فهم الميدان لآليات إطلاق الناقل العصبي، بما في ذلك مونوامينات. ومع ذلك ، فإن هذه الأنظمة مكلفة نسبيا ، ويتراوح عدد الغرف المتاحة لتحليل الأنسجة من 4 إلى 12. وبالمقارنة، فإن الطريقة المعروضة هنا غير مكلفة، وتسمح بقياس 48 عينة من الأنسجة، ويمكن صقلها لاستخدام ما يصل إلى 96 عينة من الأنسجة. يحتوي كل بئر داخل اللوحة ذات ال 48 بئرا على حاملات أنسجة تستخدم مرشحات لفصل المنتج الصادر عن الأنسجة ، ثم يتم جمع مونوامينات تم إطلاقها وتحليلها من قبل HPLC-ECD. الأهم من ذلك، تسمح هذه الطريقة للقياس المتزامن لإطلاق سراح 5-HT، DA، وNE من مناطق الدماغ المختلفة مثل قشرة الجبهي، والحصين، والمزمع الظهري بعد العلاج مع العوامل الدوائية التي تعدل إطلاق مونوامين. وهكذا، يمكن للمجرب الإجابة على أسئلة متعددة باستخدام نظام متعدد الآبار غير مكلفة أن يزيد من عدد العينات التي تم اختبارها، وبالتالي تقليل عدد الحيوانات المستخدمة.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>48 Well plate</td>
			<td>NA</td>
			<td>NA</td>
			<td>Assay</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acetonitrile</td>
			<td>Fischer Scientific</td>
			<td>A998-1</td>
			<td>Mobile Phase</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Calcium Chloride Ahydrous</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>C1016</td>
			<td>Modified Artifical Cerebrospinal Fluid OR Efflux Buffer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Clarity Software</td>
			<td>Anetc</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Citric Acid</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td></td>
			<td>Mobile Phase</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>D-(+)-Glucose</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>1002608421</td>
			<td>Dissection Buffer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMF</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>D4551</td>
			<td>MTT Assay</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EDTA-Na2</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td></td>
			<td>Mobile Phase</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GraphPad Software</td>
			<td>Graphpad Software, Inc</td>
			<td></td>
			<td>Statistical Analysis</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glycerol</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>G5516</td>
			<td>Lysis buffer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HEPES</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>H3375</td>
			<td>Lysis buffer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HPLC, Decade Amperometric</td>
			<td>Anetc</td>
			<td></td>
			<td>HPLC, LC-EC system</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HPLC</td>
			<td>Amuza</td>
			<td></td>
			<td>HPLC HTEC-510.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L-Asrobic Acid</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>A5960</td>
			<td>Dissection Buffer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Magnesium Sulfate</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>7487-88-9</td>
			<td>KH Buffer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microcentrifuge Filter Units UltraFree</td>
			<td>Millipore</td>
			<td>C7554</td>
			<td>Assay - 6 to fit in 48 well plate</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MTT</td>
			<td>Thermo Fisher</td>
			<td>M6494</td>
			<td>MTT Assay</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nanosep</td>
			<td>VWR</td>
			<td>29300-606</td>
			<td>Assay; protein assay</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Octanesulfonic acid</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>V800010</td>
			<td>Mobile Phase</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pargyline Clorohydrate</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>P8013</td>
			<td>Modified Artifical Cerebrospinal Fluid OR Efflux Buffer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphoric Acid</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td></td>
			<td>Mobile Phase</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Potassium Chloride</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>12636</td>
			<td>KH Buffer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Potassium Phosphate Monobasic</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>1001655559</td>
			<td>KH Buffer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Precisonary VF-21-0Z</td>
			<td>Precissonary</td>
			<td></td>
			<td>Compresstome</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Protease Inhibitor Cocktail</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>P2714</td>
			<td>Lysis buffer.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium Bicarbonate</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>S5761</td>
			<td>Dissection Buffer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium Bicarbonate</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>S5761</td>
			<td>Dissection Buffer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium Chloride</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>S3014</td>
			<td>KH Buffer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium Dodecyl Sulfate</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>L3771</td>
			<td>Lysis buffer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Triton X-100</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>T8787</td>
			<td>MTT Assay / Lysis buffer</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a plate-based assay for the measurement of endogenous monoamine release in acute brain slices

ترتبط الناقلات العصبية مونوامين مع العديد من الأمراض العصبية والنفسية. وقد أظهرت النماذج الحيوانية من هذه الظروف التعديلات في إطلاق الناقل العصبي مونوامين وديناميات امتصاص. هناك حاجة إلى طرق معقدة تقنيا مثل الفيزيولوجيا الكهربية ، المسح السريع Cyclic Voltammetry (FSCV) ، والتصوير ، في التحليل الدقيق في الجسم الحي ، optogenetics ، أو استخدام النشاط الإشعاعي لدراسة وظيفة مونوامين. الطريقة المعروضة هنا هي نهج محسن من خطوتين للكشف عن إطلاق مونوامين في شرائح الدماغ الحادة باستخدام لوحة من 48 بئرا تحتوي على حاملات الأنسجة لفحص إطلاق مونوامين ، والكروماتوغرافيا السائلة عالية الأداء إلى جانب الكشف الكهروكيميائية (HPLC-ECD) لقياس إطلاق مونوامين. باختصار، تم الحصول على أقسام دماغ الفئران التي تحتوي على مناطق ذات أهمية، بما في ذلك قشرة الجبهي، قرن آمون، والمرحلة الظهرية باستخدام تقطيع الأنسجة أو الهزاز. تم تشريح هذه المناطق ذات الاهتمام من الدماغ كله واحتضانها في عازل فسيولوجي أكسجين. تم فحص الجدوى طوال الدورة الزمنية التجريبية ، من قبل 3-(4،5-dimethylthiazol-2-yl)-2،5-ديبينيلتيترازوليوم بروميد (MTT) المقايسة. تم احتضان مناطق الدماغ تشريح حاد في ظروف المخدرات المختلفة التي من المعروف أن تحفز إطلاق مونوامين من خلال الناقل (الأمفيتامين) أو من خلال تفعيل إطلاق المركبات الخارجية (KCl). بعد الحضانة ، تم جمع المنتجات الصادرة في الناتات وتحليلها من خلال نظام HPLC-ECD. هنا ، يتم الكشف عن إطلاق أحادي الأمين القاعدي من قبل HPLC من شرائح الدماغ الحادة. تدعم هذه البيانات النتائج السابقة في الجسم الحي وفي المختبر التي تظهر أن AMPH و KCl يحفزان إطلاق أحادي الأمين. وهذه الطريقة مفيدة بشكل خاص لدراسة الآليات المرتبطة بإطلاق سراح أحادي الأمين يعتمد على الناقل، وتوفر فرصة لفحص المركبات التي تؤثر على إطلاق مونوامين بطريقة سريعة ومنخفضة التكلفة.

تصف هذه التقنية استخدام شرائح الدماغ لقياس إطلاق مونوامينات داخلية باستخدام HPLC مع الكشف الكهروكيميائية القائمة في لوحة 48 جيدا مع حامل الأنسجة الداخلية. يتم تصوير الإعداد التجريبي في الشكل 1 والشكل 2. في البداية ، لضمان بقاء الأنسجة بحلول ?...

Watch this Scientific Journal Video about A Plate-Based Assay for the Measurement of Endogenous Monoamine Release in Acute Brain Slices at JoVE.com

A Plate-Based Assay for the Measurement of Endogenous Monoamine Release in Acute Brain Slices

هذه الطريقة يقدم تقنية بسيطة للكشف عن إطلاق مونوامين الذاتية باستخدام شرائح الدماغ الحادة. يستخدم الإعداد لوحة من 48 بئرا تحتوي على حامل نسيج لإطلاق مونوامين. يتم تحليل مونوامين الصادرة من قبل HPLC إلى جانب الكشف عن الكهروكيميائية. بالإضافة إلى ذلك، توفر هذه التقنية طريقة فحص لاكتشاف المخدرات.

A المقايسة المستندة إلى لوحة لقياس إطلاق مونوامين الذاتية في شرائح الدماغ الحادة

Monoamine neurotransmitters are associated with numerous neurologic and psychiatric ailments. Animal models of such conditions have shown alterations in ...

هذه التقنية هي تكييف من الأساليب الشائعة الاستخدام لفحص إطلاق مونوامين، مما يسمح بقياس الإطلاق الذاتية بدلا من مونوامينات محملة مسبقا تحت ظروف دوائية متعددة في وقت واحد. المزايا الرئيسية لهذه التقنية هي أنها فعالة من حيث التكلفة إلى حد ما ، ويمكن فحص حالات دوائية متعددة في وقت واحد ، ويمكننا دراسة إطلاق مونوامين داخلي مع القدرة على التمييز بين إطلاق المركبات والنقل بوساطة. لإعداد شرائح الدماغ من البالغين 250 إلى 350 غرام الفئران الذكور بعد الحصاد، وضعت على الفور الدماغ والجليد الباردة الأوكسجين تشريح العازلة، والحصول على 300 ميكرون أقسام الدماغ التاجي من كل منطقة من المناطق ذات الاهتمام.لمزيد من تشريح شرائح الدماغ ، قم بتحريك الأنسجة بعناية إلى الشرائح الزجاجية واستخدم أطلس دماغ الفئران لتحديد المخطط الظهري استنادا إلى بنيته المخططة الداكنة ، وتحديد قرن آمون استنادا إلى قربه من القشرة وبنيته الحلزونية الفريدة. فصل نصفي الكرة الأرضية الأيمن والأيسار لاستخدامها كشرائح التحكم والتجريبية. يمكن تشريح المخطط الظهري إلى لكمتين ملليمترتين.ثم استخدم ماصة نقل البلاستيك مع طرف معدل لنقل العينات إلى حاويات صغيرة مغمورة في عازلة تشريح الجليد البارد المؤكسيج مع فقاعات الأكسجين. للحث على إطلاق مونوامين، نقل عينات الأنسجة إلى كل بئر من العرف جعل 48 غرفة إيفلوكس جيدا تحتوي على 0.5 إلى ملليلتر واحد من العازلة efflux لكل بئر مع محتدما لطيف مستمر والسماح للعينات لاسترداد لمدة 30 إلى 50 دقيقة في 37 درجة مئوية. في نهاية فترة التوازن، قم بتحريك حامل الأنسجة مع أنسجة الدماغ إلى الآبار التي تحتوي على 500 ميكرولتر من عازل اللوكس المؤكسيج مع أو بدون عامل دوائي، والتنصت على حامل على حافة البئر لمنع الحد الأدنى من نقل العازلة بين الآبار لاحتضان 20 دقيقة في 37 درجة مئوية.في نهاية الحضانة ، قم بنقل الحامل إلى مجموعة جديدة من الآبار تحتوي على 500 ميكرولتر من العازلة efflux مع أو بدون الدواء المثير للاهتمام وإعادة الطبق إلى حاضنة ثقافة الخلية لمدة 20 دقيقة إضافية. خلال الحضانة الثانية نقل المحلول من الآبار من الحضانة الأولى إلى أنابيب الطرد المركزي الدقيق التي تحتوي على 50 ميكرولتر من حمض بيركلوريك أو فوسفوريك عادي واحد على الجليد، وتسمية الأنابيب رقم واحد "في نهاية الحضانة الثانية، نقل حامل الأنسجة إلى آبار فارغة مع لوحة على الجليد ونقل الناسخات من الحضانة الثانية إلى أنابيب الطرد المركزي الدقيق الجديدة التي تحتوي على 50 ميكرولتر من واحد بيركلوريك العادي أو الفوسفوري حمض على الجليد. تسمية هذه الأنابيب رقم اثنين "عندما تم نقل جميع المضادات، إضافة ملليلتر واحد من الجليد البارد تشريح العازلة إلى كل بئر من الأنسجة واستخدام ملاقط صغيرة لنقل كل عينة من الأنسجة إلى أنبوب جديد microcentrifuge.قم بإزالة العازلة من أنابيب العينة وتخزين الأنسجة عند ناقص 80 درجة مئوية، ثم نقل حلول الحضانة التي تم جمعها إلى أنابيب فلتر الطرد المركزي للطرد المركزي ووضع الخيوط على الجليد حتى تحليل HPLC. تعيين إمكانات النماء المبكر ومعدل التدفق إلى توصية الشركة المصنعة للكشف عن مونوامينات. تحميل و aliquot المناسبة من كل عينة، بما في ذلك معايير الارسال العصبي في HPLC للحقن التلقائي والكشف والسماح للأداة لإكمال التحليل.ثم استخدم برنامج تحليل HPLC للحصول على بيانات الكروماتوغراف وتحليلها باستخدام منحنى قياسي يتكون من كل أحادي الأمين للحصول على المنطقة تحت المنحنى استنادا إلى إرشادات الشركة المصنعة. بعد ست ساعات من التحليل الوظيفي، تظل عينات الأنسجة قابلة للتطبيق، في حين أن العينات المحتضنة بنسبة 1٪ تريتون X-100 تظهر انخفاضا كبيرا في تحويل MTT. العلاج الحاد لمدة 20 دقيقة من أقسام الدماغ فرس النهر والقشرة الجبهية مع الأمفيتامين يحفز زيادة كبيرة في مستوى خارج الخلية من كل مونوامين.عندما يتم معالجة العينات مسبقا مع فلوكستين, مثبط إعادة امتصاص السيروتونين انتقائية, زيادة الأمفيتامين الناجمة في السيروتونين خارج الخلية داخل قرن آمون والقشرة الجبهية لا يحدث, في حين أن الزيادة في إنتاج الدوبامين خارج الخلية والنورادرينالين لا تتأثر. بالإضافة إلى ذلك ، فإن العلاج الحاد لمدة 20 دقيقة من اللكمات المخطط الظهري مع الأمفيتامين يحفز على زيادة 35 ضعفا في التعبير عن مستوى الدوبامين خارج الخلية ، في حين أن علاج لكمة المخطط الظهري مع الكوكايين ، وهو مانع نقل أحادي الأمين ، يؤدي إلى تثبيط كبير للدوبامين خارج الخلية الناجم عن الأمفيتامين. زيادة تركيز كلوريد البوتاسيوم خارج الخلية لاستحضار إزالة الاستقطاب الغشاء يكفي للحث على إطلاق الإكسوسيتوتيك من مونوامين بالمقارنة مع ظروف السيطرة غير المعالجة، ولا فلوكستين ولا علاج الكوكايين يمنع هذه الزيادة المستحثة الاستقطاب العميق.من الضروري أن يكون هناك أقسام قطع نظيفة ، وتوطين دقيق لللكمات ، والحفاظ على الأكسجين المستمر طوال التجربة. يمكن استخدام أقسام الدماغ بعد التجارب لمزيد من المعالجة والتحليل الكيميائي الحيوي ، مثل النشاف الغربي والأنسجة.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Preparation of Acute Subventricular Zone Slices for Calcium Imaging

إعداد شرائح الحاد المنطقة Subventricular للتصوير الكالسيوم

The subventricular zone (SVZ) is one of the two neurogenic zones in the postnatal brain. The SVZ contains densely packed cells, including neural ...

Dual Electrophysiological Recordings of Synaptically-evoked Astroglial and Neuronal Responses in Acute Hippocampal Slices

تسجيلات الكهربية المزدوجة للSynaptically-استجابات Astroglial والخلايا العصبية في الحصين شرائح الحاد

Astrocytes form together with neurons tripartite synapses, where they integrate and modulate neuronal activity. Indeed, astrocytes sense neuronal inputs ...

In vivo Postnatal Electroporation and Time-lapse Imaging of Neuroblast Migration in Mouse Acute Brain Slices

In vivo Postnatal Electroporation and Time-lapse Imaging of Neuroblast Migration in Mouse Acute Brain Slices

في الجسم الحي بعد الولادة التثقيب الكهربائي والوقت الفاصل بين التصوير من أرومة عصبية الهجرة في الدماغ الحادة ماوس شرائح

The subventricular zone (SVZ) is one of the main neurogenic niches in the postnatal brain. Here, neural progenitors proliferate and give rise to ...

Electrophysiological and Morphological Characterization of Neuronal Microcircuits in Acute Brain Slices Using Paired Patch-Clamp Recordings

الكهربية والمورفولوجية توصيف العصبية الحادة رقائق في الدماغ عن طريق شرائح الموثوقة التصحيح، المشبك التسجيلات

The combination of patch clamp recordings from two (or more) synaptically coupled neurons (paired recordings) in acute brain slice preparations with ...

Preparation of Acute Brain Slices Using an Optimized N-Methyl-D-glucamine Protective Recovery Method

Preparation of Acute Brain Slices Using an Optimized N-Methyl-D-glucamine Protective Recovery Method

إعداد شرائح الدماغ الحادة باستخدام محسن N-الميثيل-د-أسلوب استرداد واقية جلوكاميني

This protocol is a practical guide to the N-methyl-D-glucamine (NMDG) protective recovery method of brain slice preparation. Numerous recent studies have ...

In-depth Physiological Analysis of Defined Cell Populations in Acute Tissue Slices of the Mouse Vomeronasal Organ

في التحليل المتعمق الفسيولوجية لبالسكان خلية المعرفة في الحادة الأنسجة شرائح من الميكعي الجهاز ماوس

In most mammals, the vomeronasal organ (VNO) is a chemosensory structure that detects both hetero- and conspecific social cues. Vomeronasal sensory ...

Recording Synaptic Plasticity in Acute Hippocampal Slices Maintained in a Small-volume Recycling-, Perfusion-, and Submersion-type Chamber System

تسجيل اللدونة متشابك في شرائح هيبوكامبال الحاد تحتفظ في صغيرة الحجم-إعادة التدوير، ونضح-، وغمر من نوع نظام الدائرة

Even though experiments on brain slices have been in use since 1951, problems remain that reduce the probability of achieving a stable and successful ...

Application of Automated Image-guided Patch Clamp for the Study of Neurons in Brain Slices

تطبيق الآلي صورة موجهة المشبك التصحيح لدراسة الخلايا العصبية في شرائح الدماغ

Whole-cell patch clamp is the gold-standard method to measure the electrical properties of single cells. However, the in vitro patch clamp remains a ...

Assessment of Long-term Depression Induction in Adult Cerebellar Slices

تقييم الحث علي الاكتئاب علي المدى الطويل في شرائح البالغين المخيخار

Synaptic plasticity provides a mechanism for learning and memory. For cerebellar motor learning, long-term depression (LTD) of synaptic transmissions from ...