Name: a plate-based assay for the measurement of endogenous monoamine release in acute brain slices
Uploaded: 2021-08-11T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Plate-Based Assay for the Measurement of Endogenous Monoamine Release in Acute Brain Slices at JoVE.com

Dit werk werd ondersteund door subsidies Fondecyt Initiation Fund N 11191049 aan J.A.P. en NIH-subsidie DA038598 aan G.E.T.

Alle experimenten, inclusief dierbehandeling en weefselverzameling, werden uitgevoerd in overeenstemming met de Universiteit van Florida en het City College of New York Institutional Animal Care and Use Committee (IACUC), volgens het goedgekeurde protocol 201508873 (UF) en 1071 (CCNY). Voor reagentia en buffer verwijzen wij u naar het Aanvullend Dossier.
1. Bereid acute schijfjes rattenhersenen
OPMERKING: In dit experiment werden volwassen mannelijke ...

Monoamine-afgiftemetingen worden al jaren uitgevoerd in een aantal systemen zoals heterologe cellen, neuronale culturen, hersensynaptosomen, ex vivo acute hersenplakken en hele dieren13,20,41,42,58,64,65,66,67,68</sup...

Een overvloed aan neurologische en psychiatrische ziekten worden geassocieerd met ontregeling of onvoldoende onderhoud van monoamine neurotransmitter (dopamine [DA], serotonine [5-HT], noradrenaline [NE]) homeostase1,2,3. Deze aandoeningen omvatten, maar zijn niet beperkt tot, depressie1,2, schizofrenie2, angst2, verslaving4, menopauze5,6,7, pijn8 en de ziekte van Parkinson3. Verschillende rattenmodellen van de menopauze hebben bijvoorbeeld aangetoond dat de ontregeling of vermindering van monoaminen in de hippocampus, prefrontale cortex en striatum kan worden geassocieerd met zowel depressie als cognitieve achteruitgang, wat wordt gezien bij vrouwen die de menopauze ervaren. De ontregeling van monoaminen in deze modellen is uitgebreid onderzocht met behulp van HPLC-ECD, hoewel de studies geen onderscheid maakten tussen gemeten neurotransmittergehalte versus neurotransmitterafgifte5,6,7. Monoaminen worden klassiek vrijgegeven in de extracellulaire ruimte via Ca2 +-afhankelijke vesiculaire afgifte9, en worden gerecycled via hun respectieve plasmamembraanheropnamesysteem (dopaminetransporter, DAT; serotoninetransporter, SERT; noradrenalinetransporter, NET)10,11. Omgekeerd suggereren gegevens dat deze transporters monoaminen kunnen vrijgeven of effluxeren, aangezien van misbruikmiddelen zoals amfetamine (AMPH) en 3,4-methyleendioxymethamfetamine (MDMA) bekend is dat ze DA en 5-HT vrijgeven, respectievelijk via hun transportersystemen12,13,14,15,16,17 . Een goed mechanistisch begrip van de dynamiek van monoamineafgifte is dus cruciaal voor het ontwikkelen van specifieke en gerichte farmacotherapieën.
Een breed scala aan technieken is gebruikt om monoamineafgifte te bestuderen, zoals Fast Scan Cyclic Voltammetry (FSCV)18, in vivo microdialyse13, imaging19, pre-integratie met radioactief gelabelde monoaminen20, optogenetica en meer recent, genetisch gecodeerde fluorescerende sensoren en fotometrie21,22 . FSCV en in vivo microdialyse zijn de primaire technieken die worden gebruikt voor het bestuderen van de afgifte van monoamine. FSCV wordt gebruikt om de gestimuleerde exocytotische afgifte van voornamelijk DA in acute hersenschijfjes en in vivo23 te bestuderen. Omdat FSCV elektroden gebruikt om afgifte te stimuleren of op te roepen, is de primaire bron van afgifte van neurotransmitters Ca2 + -afhankelijke vesiculaire afgifte18,24,25,26,27,28,29,30,31 . In vivo microdialyse in combinatie met HPLC meet veranderingen in extracellulaire neurotransmitterniveaus met behulp van een sonde geplaatst in een hersengebied van belang13,32. Net als bij FSCV is een belangrijke beperking van in vivo microdialyse de moeilijkheid om de bron van neurotransmitterafgifte te bepalen: Ca2 + afhankelijke vesiculaire afgifte of transporterafhankelijk. Opmerkelijk is dat beide methoden de directe meting van monoamineafgifte mogelijk maken. Door de recente vooruitgang van de optogenetica toont onderzoek detectie van 5-HT en DA-afgifte in een korte tijdspanne met prachtige celtype specificiteit21,22. Deze strategieën vereisen echter complexe en kostbare technieken en apparatuur en meten indirect de afgifte van monoamine, met name door monoaminebinding aan receptoren. Verder worden radioactief gelabelde monoaminen ook gebruikt voor het bestuderen van monoaminedynamica. Radioactief gelabelde monoaminen kunnen vooraf worden geladen in verschillende modelsystemen, zoals heterologe cellen die elke monoaminetransporter overexpressie geven20,33,34,35,36,37,38,39,40, primaire neuronen20, synaptosomen33,39,41, 42, en acute hersenplakken43,44. Radioactiviteit vormt echter potentiële schade voor de experimentator en de tritium-gelabelde analyten kunnen de endogene monoaminedynamiek niet getrouw samenvatten45,46. Superfusiesystemen in combinatie met offline detectiemethoden zoals HPLC-ECD hebben de detectie van monoaminen uit meerdere weefselbronnen mogelijk gemaakt. Hier biedt dit protocol als een geoptimaliseerde en goedkope, eenvoudige en nauwkeurige methode met behulp van acute hersenplakken om endogene basale en gestimuleerde monoamineafgifte direct te meten.
Acute hersenplakken maken het mogelijk om mechanistische hypothesen te testen, voornamelijk omdat ze de in vivo anatomische micro-omgeving behouden en intacte synapsen behouden47,48,49,50,51,52. In enkele studies zijn acute hersenplakken of gehakt hersenweefsel gebruikt in combinatie met een superfusietechniek met behulp van KCl om Ca2 + gemedieerde afgifte te stimuleren53,54,55,56. Superfusiesystemen zijn van cruciaal belang geweest om het begrip van het veld van neurotransmitterafgiftemechanismen, waaronder monoaminen, te bevorderen. Deze systemen zijn echter relatief duur en het aantal kamers dat beschikbaar is voor weefselanalyse varieert van 4-12. Ter vergelijking: de hier gepresenteerde methode is goedkoop, maakt het mogelijk om 48 weefselmonsters te meten en kan worden verfijnd om maximaal 96 weefselmonsters te gebruiken. Elke put in de 48-putplaat bevat weefselhouders die filters gebruiken om het vrijgegeven product van het weefsel te scheiden, en vrijgegeven monoaminen worden vervolgens verzameld en geanalyseerd door HPLC-ECD. Belangrijk is dat deze methode de gelijktijdige meting van 5-HT, DA en NE-afgifte mogelijk maakt uit verschillende hersengebieden zoals de prefrontale cortex, de hippocampus en het dorsale striatum na behandeling met farmacologische middelen die de afgifte van monoamine moduleren. Zo kan de experimentator meerdere vragen beantwoorden met behulp van een goedkoop multi-well-systeem dat het aantal geteste monsters verhoogt en daardoor het aantal gebruikte dieren vermindert.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>48 Well plate</td>
			<td>NA</td>
			<td>NA</td>
			<td>Assay</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acetonitrile</td>
			<td>Fischer Scientific</td>
			<td>A998-1</td>
			<td>Mobile Phase</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Calcium Chloride Ahydrous</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>C1016</td>
			<td>Modified Artifical Cerebrospinal Fluid OR Efflux Buffer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Clarity Software</td>
			<td>Anetc</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Citric Acid</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td></td>
			<td>Mobile Phase</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>D-(+)-Glucose</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>1002608421</td>
			<td>Dissection Buffer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMF</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>D4551</td>
			<td>MTT Assay</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EDTA-Na2</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td></td>
			<td>Mobile Phase</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GraphPad Software</td>
			<td>Graphpad Software, Inc</td>
			<td></td>
			<td>Statistical Analysis</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glycerol</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>G5516</td>
			<td>Lysis buffer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HEPES</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>H3375</td>
			<td>Lysis buffer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HPLC, Decade Amperometric</td>
			<td>Anetc</td>
			<td></td>
			<td>HPLC, LC-EC system</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HPLC</td>
			<td>Amuza</td>
			<td></td>
			<td>HPLC HTEC-510.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L-Asrobic Acid</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>A5960</td>
			<td>Dissection Buffer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Magnesium Sulfate</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>7487-88-9</td>
			<td>KH Buffer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microcentrifuge Filter Units UltraFree</td>
			<td>Millipore</td>
			<td>C7554</td>
			<td>Assay - 6 to fit in 48 well plate</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MTT</td>
			<td>Thermo Fisher</td>
			<td>M6494</td>
			<td>MTT Assay</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nanosep</td>
			<td>VWR</td>
			<td>29300-606</td>
			<td>Assay; protein assay</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Octanesulfonic acid</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>V800010</td>
			<td>Mobile Phase</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pargyline Clorohydrate</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>P8013</td>
			<td>Modified Artifical Cerebrospinal Fluid OR Efflux Buffer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphoric Acid</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td></td>
			<td>Mobile Phase</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Potassium Chloride</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>12636</td>
			<td>KH Buffer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Potassium Phosphate Monobasic</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>1001655559</td>
			<td>KH Buffer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Precisonary VF-21-0Z</td>
			<td>Precissonary</td>
			<td></td>
			<td>Compresstome</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Protease Inhibitor Cocktail</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>P2714</td>
			<td>Lysis buffer.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium Bicarbonate</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>S5761</td>
			<td>Dissection Buffer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium Bicarbonate</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>S5761</td>
			<td>Dissection Buffer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium Chloride</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>S3014</td>
			<td>KH Buffer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium Dodecyl Sulfate</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>L3771</td>
			<td>Lysis buffer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Triton X-100</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>T8787</td>
			<td>MTT Assay / Lysis buffer</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a plate-based assay for the measurement of endogenous monoamine release in acute brain slices

Monoamine neurotransmitters worden geassocieerd met tal van neurologische en psychiatrische aandoeningen. Diermodellen van dergelijke omstandigheden hebben veranderingen in de afgifte en opnamedynamiek van monoamine-neurotransmitters aangetoond. Technisch complexe methoden zoals elektrofysiologie, Fast Scan Cyclic Voltammetry (FSCV), beeldvorming, in vivo microdialyse, optogenetica of gebruik van radioactiviteit zijn vereist om de monoaminefunctie te bestuderen. De hier gepresenteerde methode is een geoptimaliseerde tweestapsbenadering voor het detecteren van monoamineafgifte in acute hersenplakken met behulp van een 48-well plaat met weefselhouders voor het onderzoeken van monoamineafgifte en hoogwaardige vloeistofchromatografie in combinatie met elektrochemische detectie (HPLC-ECD) voor monoamine-afgiftemeting. Kortom, rattenhersensecties met interessante gebieden, waaronder prefrontale cortex, hippocampus en dorsaal striatum, werden verkregen met behulp van een weefselsnijder of vibratome. Deze interessegebieden werden ontleed uit de hele hersenen en geïncubeerd in een zuurstofrijke fysiologische buffer. De levensvatbaarheid werd onderzocht gedurende het experimentele tijdsverloop, door middel van 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-difenyltetrazoliumbromide (MTT) assay. De acuut ontleedde hersengebieden werden geïncubeerd in verschillende medicijnomstandigheden waarvan bekend is dat ze monoamineafgifte induceren via de transporter (amfetamine) of door de activering van exocytotische vesiculaire afgifte (KCl). Na incubatie werden de vrijgekomen producten in het supernatant verzameld en geanalyseerd via een HPLC-ECD-systeem. Hier wordt basale monoamineafgifte gedetecteerd door HPLC uit acute hersenplakken. Deze gegevens ondersteunen eerdere in vivo en in vitro resultaten waaruit blijkt dat AMPH en KCl monoamineafgifte induceren. Deze methode is met name nuttig voor het bestuderen van mechanismen die verband houden met monoaminetransporterafhankelijke afgifte en biedt de mogelijkheid om verbindingen die de afgifte van monoamine beïnvloeden op een snelle en goedkope manier te screenen.

Deze techniek beschrijft het gebruik van hersenplakken om de afgifte van endogene monoaminen te meten met behulp van HPLC met elektrochemische detectie op basis van een 48-putplaat met een interne weefselhouder. De experimentele opstelling is weergegeven in figuur 1 en figuur 2. Aanvankelijk werd, om de levensvatbaarheid van het weefsel tegen het einde van het experiment te garanderen, een MTT-test (3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2...

Watch this Scientific Journal Video about A Plate-Based Assay for the Measurement of Endogenous Monoamine Release in Acute Brain Slices at JoVE.com

A Plate-Based Assay for the Measurement of Endogenous Monoamine Release in Acute Brain Slices

Deze methode introduceert een eenvoudige techniek voor de detectie van endogene monoamineafgifte met behulp van acute hersenplakken. De opstelling maakt gebruik van een 48-well plaat met daarin een weefselhouder voor monoamineafgifte. Vrijgegeven monoamine wordt geanalyseerd door HPLC in combinatie met elektrochemische detectie. Bovendien biedt deze techniek een screeningsmethode voor het ontdekken van geneesmiddelen.

Een op platen gebaseerde test voor de meting van endogene monoamineafgifte in acute hersenplakken

Monoamine neurotransmitters are associated with numerous neurologic and psychiatric ailments. Animal models of such conditions have shown alterations in ...

Deze techniek is een aanpassing van veelgebruikte methoden voor het onderzoeken van monoamineafgifte, waardoor de endogene afgifte kan worden gemeten in plaats van vooraf geladen radioactief gelabelde monoaminen onder meerdere farmacologische omstandigheden tegelijk. De belangrijkste voordelen van deze techniek zijn dat het redelijk kosteneffectief is, meerdere farmacologische aandoeningen tegelijk kunnen worden onderzocht en we endogene monoamineafgifte kunnen bestuderen met het vermogen om onderscheid te maken tussen vesiculaire en transporter-gemedieerde afgifte. Om hersenplakken van volwassen 250 tot 350 gram mannelijke ratten na de oogst te bereiden, plaatste onmiddellijk de hersenen en ijskoude zuurstofrijke dissectiebuffer en verkreeg 300 micron coronale hersensecties uit elk gebied van belang.Voor verdere dissectie van de hersenplakken, verplaats de weefsels zorgvuldig naar glazen dia's en gebruik een rattenhersenatlas om het dorsale striatum te identificeren op basis van zijn donkere dwarsgestreepte structuur en om de hippocampus te identificeren op basis van de nabijheid van de cortex en zijn unieke spiraalstructuur. Scheid de rechter- en linkerhersenhelft voor hun gebruik als controle- en experimentele plakjes. Het dorsale striatum kan verder worden ontleed in twee millimeter stoten.Gebruik vervolgens een plastic transferpipet met een aangepaste punt om de monsters over te brengen in kleine containers ondergedompeld in zuurstofrijke ijskoude dissectiebuffer met zuurstofborrelen. Om monoamineafgifte te induceren, brengt u de weefselmonsters over naar elke put van een op maat gemaakte 48 put effluxkamer met 0,5 tot één milliliter effluxbuffer per put met constant zacht borrelen en laat u de monsters gedurende 30 tot 50 minuten herstellen bij 37 graden Celsius. Verplaats aan het einde van de evenwichtsperiode de weefselhouder met hersenweefsel naar putjes met 500 microliter zuurstofrijke effluxbuffer met of zonder farmacologisch middel en tik de houder op de rand van de put om de minimale overdracht van buffer tussen putten te voorkomen gedurende een incubatie van 20 minuten bij 37 graden Celsius.Verplaats de houder aan het einde van de incubatie naar een nieuwe set putten met 500 microliter effluxbuffer met of zonder het medicijn van belang en breng de plaat nog eens 20 minuten terug naar de celkweekincubator. Breng tijdens de tweede incubatie de oplossing van de putten van de eerste incubatie over in microcentrifugebuizen met 50 microliter van één normaal perchloorzuur of fosforzuur op ijs en label de buizen nummer één"Aan het einde van de tweede incubatie verplaatst u de weefselhouder naar lege putten met de plaat op ijs en brengt u de supernatanten over van de tweede incubatie naar nieuwe microcentrifugebuizen met 50 microliter van één normale perchloor of fosforzuur zuur op ijs. Label deze buizen nummer twee "Wanneer alle supernatanten zijn overgebracht, voegt u een milliliter ijskoude dissectiebuffer toe aan elke put weefsel en gebruikt u een klein pincet om elk weefselmonster over te brengen naar een nieuwe microcentrifugebuis.Verwijder de buffer uit de monsterbuizen en bewaar de weefsels bij min 80 graden Celsius, breng vervolgens de verzamelde incubatieoplossingen over in microcentrifugefilterbuizen voor centrifugering en plaats het filtraat op ijs tot HPLC-analyse. Stel het potentieel van de ECD en het debiet in op de aanbeveling van de fabrikant voor het detecteren van monoaminen. Belasting en passend aliquot van elk monster, inclusief neurotransmitterstandaarden in de HPLC voor automatische injectie en detectie en laat het instrument de analyse voltooien.Gebruik vervolgens de HPLC-analysesoftware om de chromatografische gegevens te verkrijgen en te analyseren met behulp van een standaardcurve die uit elk monoamine bestaat om het gebied onder de curve te verkrijgen op basis van de richtlijnen van de fabrikant. Na zes uur functionele analyse blijven weefselmonsters levensvatbaar, terwijl monsters geïncubeerd met 1% Triton X-100 een significante vermindering van MTT-transformatie laten zien. Acute behandeling van 20 minuten van hippocampale en prefrontale cortex hersensecties met amfetamine induceert een significante toename van het extracellulaire niveau van elke monoamine.Wanneer de monsters worden voorbehandeld met fluoxetine, een selectieve serotonineheropnameremmer, induceert de amfetamine een toename van extracellulaire serotonine in de hippocampus en de prefrontale cortex niet, terwijl de toename van extracellulaire dopamine- en noradrenalineproductie niet wordt beïnvloed. Bovendien induceert acute behandeling van 20 minuten van dorsale striatumstoten met amfetamine een 35-voudige toename van extracellulaire dopamineniveau-expressie, terwijl dorsale striatum punchbehandeling met cocaïne, een monoaminetransporterblokker, resulteert in een significante remming van amfetamine geïnduceerde extracellulaire dopamine. Het verhogen van de concentratie van extracellulair kaliumchloride om membraandepolarisatie op te roepen is voldoende om de exocytotische afgifte van monoaminen te induceren in vergelijking met onbehandelde controleomstandigheden, en noch fluoxetine noch cocaïnebehandeling blokkeert deze diepe polarisatie geïnduceerde toename.Het is absoluut noodzakelijk om schone gesneden secties te hebben, een nauwkeurige lokalisatie van ponsen en om consistente oxygenatie te behouden gedurende het hele experiment. De hersensecties kunnen na experimenten worden gebruikt voor verdere biochemische verwerking en analyse, zoals western blotting en histologie.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Preparation of Acute Subventricular Zone Slices for Calcium Imaging

Voorbereiding van Acute subventriculaire zone Schijfjes voor Calcium Imaging

The subventricular zone (SVZ) is one of the two neurogenic zones in the postnatal brain. The SVZ contains densely packed cells, including neural ...

Dual Electrophysiological Recordings of Synaptically-evoked Astroglial and Neuronal Responses in Acute Hippocampal Slices

Dubbele Elektrofysiologische Opnames van synaptisch-opgeroepen astrogliale en Neuronale responsen bij acute hippocampus Slices

Astrocytes form together with neurons tripartite synapses, where they integrate and modulate neuronal activity. Indeed, astrocytes sense neuronal inputs ...

In vivo Postnatal Electroporation and Time-lapse Imaging of Neuroblast Migration in Mouse Acute Brain Slices

In vivo Postnatal Electroporation and Time-lapse Imaging of Neuroblast Migration in Mouse Acute Brain Slices

In vivo Postnatale Elektroporatie en time-lapse imaging van neuroblast Migratie in Muis Acute Brain Slices

The subventricular zone (SVZ) is one of the main neurogenic niches in the postnatal brain. Here, neural progenitors proliferate and give rise to ...

Electrophysiological and Morphological Characterization of Neuronal Microcircuits in Acute Brain Slices Using Paired Patch-Clamp Recordings

Elektrofysiologische en morfologische analyse van neuronale Microschake in Acute Brain Slices Met behulp Paired Patch-Clamp Recordings

The combination of patch clamp recordings from two (or more) synaptically coupled neurons (paired recordings) in acute brain slice preparations with ...

Preparation of Acute Brain Slices Using an Optimized N-Methyl-D-glucamine Protective Recovery Method

Preparation of Acute Brain Slices Using an Optimized N-Methyl-D-glucamine Protective Recovery Method

Voorbereiding van Acute hersenen segmenten met behulp van een geoptimaliseerde N-Methyl-D-glucamine beschermende herstelmethode

This protocol is a practical guide to the N-methyl-D-glucamine (NMDG) protective recovery method of brain slice preparation. Numerous recent studies have ...

In-depth Physiological Analysis of Defined Cell Populations in Acute Tissue Slices of the Mouse Vomeronasal Organ

Een grondige fysiologische analyse van Defined Cell Populaties in Acute Tissue Slices van de Muis Vomeronasal

In most mammals, the vomeronasal organ (VNO) is a chemosensory structure that detects both hetero- and conspecific social cues. Vomeronasal sensory ...

Recording Synaptic Plasticity in Acute Hippocampal Slices Maintained in a Small-volume Recycling-, Perfusion-, and Submersion-type Chamber System

Synaptische plasticiteit opnemen in Acute Hippocampal plakjes onderhouden in een kleine volumes Recycling-, perfusie-, en onderdompeling-type kamer systeem

Even though experiments on brain slices have been in use since 1951, problems remain that reduce the probability of achieving a stable and successful ...

Application of Automated Image-guided Patch Clamp for the Study of Neurons in Brain Slices

Toepassing van geautomatiseerde beeldgeleide patchclamp voor de studie van neuronen in hersenschijven

Whole-cell patch clamp is the gold-standard method to measure the electrical properties of single cells. However, the in vitro patch clamp remains a ...

Assessment of Long-term Depression Induction in Adult Cerebellar Slices

Beoordeling van langdurige depressie inductie in volwassen cerebellaire schijfjes

Synaptic plasticity provides a mechanism for learning and memory. For cerebellar motor learning, long-term depression (LTD) of synaptic transmissions from ...