Name: patient-derived tumor explants as a "live" preclinical platform for predicting drug resistance in patients
Uploaded: 2021-02-07T14:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Patient-Derived Tumor Explants As a "Live" Preclinical Platform for Predicting Drug Resistance in Patients at JoVE.com

Мы благодарим хирургов и патологоанатомов в университетских больницах Лестера NHS Trust за предоставление хирургической резецированной опухолевой ткани. Мы также благодарим гистологический центр в рамках Core Biotechnology Services за помощь в обработке тканей и секционировании тканевых блоков FFPE и Kees Straatman за поддержку с использованием Vectra Polaris. Это исследование было поддержано и профинансировано консорциумом Explant, состоящим из четырех партнеров: Университета Лестера, Токсикологического подразделения MRC, Лаборатории терапевтических открытий Рака Великобритании и LifeArc. Дополнительную поддержку оказал Центр экспериментальной онкологической медицины CRUK-NIHR Leicester (C10604/A25151). Финансирование GM, CD и NA было предоставлено программой Breast Cancer Now's Catalyst Program (2017NOVPCC1066), которая поддерживается финансированием Pfizer.

1. Сбор тканей
<ol><li>После операции перенесите свежерезецированные образцы опухоли человека в трубку, содержащую 25 мл свежей питательной среды (модифицированная среда Eagle от Dulbecco, дополненная 4,5 г / л глюкозы и L-глутамина + 1% (v / v) сыворотки для телят плода + 1% пенициллина-стрептом?...

В данной работе описываются методы генерации, медикаментозного лечения и анализа ФДЭ и подчеркиваются преимущества платформы как доклинической модельной системы. Культивирование ex vivo свежерезецированной опухоли, которое не предполагает ее деконструкции, позволяет сохранить архите?...

Разработка эффективных и безопасных противоопухолевых агентов требует соответствующих доклинических моделей, которые также могут дать представление о механизмах действия, которые могут облегчить идентификацию прогностических и фармакодинамических биомаркеров. Известно, что меж- и внутриопухолевая гетерогенность1,2,3,4,5 и TME6,7,8,9,10,11,12 влияют на реакции на противоопухолевые препараты, и многие существующие доклинические модели рака, такие как клеточные линии, органоиды и мышиные модели, не способны полностью приспособиться к этим критическим Функции. «Идеальная» модель — это модель, которая может повторять сложные пространственные взаимодействия злокачественных и незлокачественных клеток в опухолях, а также отражать региональные различия в опухолях. В этой статье основное внимание уделяется PDE как новой платформе, которая может выполнять многие из этих требований13.
Первый пример использования ФДЭ человека, также известный как гистокультуры, относится к концу 1980-х годов, когда Hoffman et al. генерировали срезы свежерезецированных опухолей человека и культивировали их в коллагеновой матрице14,15. Это включало в себя создание системы 3D-культур, которая сохраняла архитектуру тканей, обеспечивая поддержание стромальных компонентов и клеточных взаимодействий в TME. Не деконструируя исходную опухоль, Hoffman et al.16 провозгласили новый подход к трансляционным исследованиям, и с этого времени многие группы оптимизировали различные методы экспланта с целью сохранения целостности тканей и получения точных данных о лекарственном ответе17,18,19,20,21,22,23,24 , хотя некоторые различия между протоколами очевидны. Butler et al. культивировали экспланты в желатиновых губках, чтобы помочь диффузии питательных веществ и лекарств через образец20,21,25,тогда как Majumder et al. создали опухолевую экосистему путем культивирования эксплантов поверх матрицы, состоящей из опухолевых и стромальных белков в присутствии аутологичной сыворотки, полученной от того же пациента22, 23г.
Совсем недавно наша группа установила протокол, в соответствии с которым экспланты генерируются путем фрагментации опухолей на кусочки размером 2 - 3 мм3,которые затем помещаются без дополнительных компонентов на проницаемые мембраны на воздушно-жидкостном интерфейсе культуральной системы24. Взятые вместе, эти многочисленные исследования продемонстрировали, что ФДЭ позволяют культивировать неповрежденные, живые фрагменты опухолей человека, которые сохраняют пространственную архитектуру и региональную гетерогенность исходных опухолей. В оригинальных экспериментах экспланты или гистокультуры обычно подвергали гомогенизации после медикаментозной обработки, после чего к гомогенизированным образцам применяли различные анализы жизнеспособности, такие как анализ реакции на гистокультурные лекарственные средства20,21,анализ МТТ (3-(6)-2,5-дифенилтетразолия бромида), анализ лактатдегидрогеназы или анализ на основе ресазурина26,27,28 . Недавний прогресс в методах анализа конечных точек, особенно цифровой патологии, теперь расширил репертуар тестов и анализов конечных точек, которые могут быть выполнены на эксплантатах29,30. Чтобы применить эти новые технологии, вместо гомогенизации экспланты фиксируются в формалине, встраиваются в парафин (FFPE), а затем анализируются с использованием методов иммуноокрашения, что позволяет пространственное профилирование. Примеры этого подхода были задокументированы для немелкоклеточного рака легкого (НМРЛ), рака молочной железы, колоректального рака и эксплантов мезотелиомы, при этом иммуногистохимическое окрашивание для маркера пролиферации Ki67 и апоптотического маркера, расщепленной поли-АДФ рибозной полимеразы (cPARP), использовалось для мониторинга изменений в пролиферации клеток и гибели клеток24,31,32,33,34.
Мультиплексированная иммунофлуоресценция особенно поддается пространственному профилированию ответов на лекарственные средства в эксплантатах в конечной точке35. Например, можно измерить релокализацию и пространственное распределение специфических классов иммунных клеток, таких как макрофаги или Т-клетки, в пределах ТМЭ при медикаментозномлечении 13,36,37,38и исследовать, может ли терапевтический агент способствовать переходу от «холодной опухоли» к «горячей опухоли»39. . В последние годы эта группа сосредоточилась на получении ФДЭ из различных типов опухолей (НМРЛ, рак почек, рак молочной железы, колоректальный рак, меланома) и тестировании ряда противоопухолевых агентов, включая химиотерапию, ингибиторы малых молекул и ингибиторы иммунных контрольных точек (ИКИ). Методы анализа конечных точек были оптимизированы для включения мультиплексированной иммунофлуоресценции, чтобы обеспечить пространственное профилирование биомаркеров для жизнеспособности, а также биомаркеров для различных компонентов TME.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Acetic acid</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>320099</td>
			<td>Staining reagent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Antibody Diluent / Block, 1x</td>
			<td>Perkin Elmer</td>
			<td>ARD1001EA</td>
			<td>Antibody diluent/blocking buffer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Barnstead NANOpure Diamond</td>
			<td>Barnstead</td>
			<td></td>
			<td>Ultra Pure (UP) H2O machine</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Citric Acid Monohydrate</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>C7129</td>
			<td>Reagent for citrate buffer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Costar Multiple Well Cell Culture Plates</td>
			<td>Corning Incorporated</td>
			<td>3516</td>
			<td>6 multiwell plate</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DAPI Dilactate</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>D3571</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>100 x 17 mm Dish, Nunclon Delta</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>150350</td>
			<td>100 mm diameter dish for tissue culture</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM (1x) Dubelcco&#39;s Modified Eagle Medium + 4.5 g/L D-Glucose + 110 mg/mL Sodium Pyruvate</td>
			<td>Gibco (Life Technologies)</td>
			<td>10569-010</td>
			<td>Tissue culture medium (500 mL)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DPX mountant</td>
			<td>VWR</td>
			<td>360294H</td>
			<td>Mounting medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DPX mountant</td>
			<td>Merck</td>
			<td>6522</td>
			<td>Mounting medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>3609</td>
			<td>Reagent for TE buffer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Eosin</td>
			<td>CellPath</td>
			<td>RBC-0100-00A</td>
			<td>Staining reagent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Foetal Bovine Serum</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>10500-064</td>
			<td>For use in tissue culture medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>37% Formaldehyde</td>
			<td>Fisher (Acros)</td>
			<td>119690010</td>
			<td>10% Formalin</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>iGenix, microwave oven IG2095</td>
			<td>iGenix</td>
			<td>IG2095</td>
			<td>Microwave used for antigen retreival</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Industrial methylated spirit (IMS)</td>
			<td>Genta Medical</td>
			<td>199050</td>
			<td>99% Industrial Denatured Alcohol (IDA)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>InForm Advanced Image Analysis Software</td>
			<td>Akoya Biosciences</td>
			<td>InForm</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Leica ASP3000 Tissue Processor</td>
			<td>Leica Biosystems</td>
			<td></td>
			<td>Automated Vacuum Tissue Processor</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Leica Arcadia H and C</td>
			<td>Leica Biosystems</td>
			<td></td>
			<td>Embedding wax bath</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Leica RM2125RT</td>
			<td>Leica Biosystems</td>
			<td></td>
			<td>Rotary microtome</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Leica ST4040 Linear Stainer</td>
			<td>Leica Biosystems</td>
			<td></td>
			<td>H&#38;E stainer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mayer&#39;s Haematoxylin</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>GHS132-1L</td>
			<td>Staining reagent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Millicell Cell Culture Inserts, 30 mm, hydrophilic PTFE, 0.4 &#181;m</td>
			<td>Merck Milipore</td>
			<td>PICMORG50</td>
			<td>Organotypic culture insert disc</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Novolink Polymer Detection System</td>
			<td>Leica Biosystems</td>
			<td>RE7150-K</td>
			<td>DAB staining kit</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>OPAL 480</td>
			<td>Akoya Biosciences</td>
			<td>FP1500001KT</td>
			<td>Fluorophore with Dimethyl Sulfoxide (DMSO) diluent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>OPAL 520</td>
			<td>Akoya Biosciences</td>
			<td>FP1487001KT</td>
			<td>Fluorophore with Dimethyl Sulfoxide (DMSO) diluent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>OPAL 570</td>
			<td>Akoya Biosciences</td>
			<td>FP1488001KT</td>
			<td>Fluorophore with Dimethyl Sulfoxide (DMSO) diluent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>OPAL 620</td>
			<td>Akoya Biosciences</td>
			<td>FP1495001KT</td>
			<td>Fluorophore with Dimethyl Sulfoxide (DMSO) diluent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>OPAL 650</td>
			<td>Akoya Biosciences</td>
			<td>FP1496001KT</td>
			<td>Fluorophore with Dimethyl Sulfoxide (DMSO) diluent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>OPAL 690</td>
			<td>Akoya Biosciences</td>
			<td>FP1497001KT</td>
			<td>Fluorophore with Dimethyl Sulfoxide (DMSO) diluent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>OPAL 780 / OPAL TSA-DIG Reagent</td>
			<td>Akoya Biosciences</td>
			<td>FP1501001KT</td>
			<td>Fluorophore with Dimethyl Sulfoxide (DMSO) diluent and TSA-DIG reagent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Opal Polymer HRP Ms Plus Rb, 1x</td>
			<td>Perkin Elmer</td>
			<td>ARH1001EA</td>
			<td>HRP polymer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin/streptomycin solution</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>11548876</td>
			<td>For use in tissue culture medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PhenoChart Whole Slide Contextual Viewer</td>
			<td>Akoya Biosciences</td>
			<td>PhenoChart</td>
			<td>Viewer software for scanned images</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphate Buffered Saline Tablets</td>
			<td>Thermo Scientific Oxoid</td>
			<td>BR0014G</td>
			<td>PBS</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1x Plus Amplification Diluent</td>
			<td>Perkin Elmer</td>
			<td>FP1498</td>
			<td>Fluorophore diluent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Prolong Diamond Antifade Mountant</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>P36961</td>
			<td>Mounting medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Slide Carrier</td>
			<td>Perkin Elmer</td>
			<td></td>
			<td>To load slides into Slide Carrier Hotel for scanning with Vectra Polaris</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium Chloride</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>S/3160/63</td>
			<td>10% Formalin</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium Hydroxide pellets</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>S/4920/53</td>
			<td>Reagent for citrate buffer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tenatex Toughened Wax - Pink (500 g)</td>
			<td>KEMDENT</td>
			<td>1-601</td>
			<td>Dental wax surface</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Thermo Scientific&#160;Shandon Sequenza Slide Rack for Immunostaining Center</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>10098889</td>
			<td>Holder for slides and slide clips</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Thermo Scientific Shandon Plastic Coverplates</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>11927774</td>
			<td>Slide clips</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tris(hydroxymethyl)aminomethane (Tris)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>252859</td>
			<td>Reagent for TE buffer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>VectaShield</td>
			<td>Vecta Laboratories</td>
			<td>H-1000-10</td>
			<td>Mounting medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vectra Polaris Slide Scanner</td>
			<td>Perkin Elmer</td>
			<td>Vectra Polaris</td>
			<td>Slide scanner</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Xylene</td>
			<td>Genta Medical</td>
			<td>XYL050</td>
			<td>De-waxing agent</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

patient-derived tumor explants as a "live" preclinical platform for predicting drug resistance in patients

Понимание лекарственной устойчивости и разработка новых стратегий сенсибилизации высокорезистентных видов рака зависят от наличия подходящих доклинических моделей, которые могут точно прогнозировать реакцию пациентов. Одним из недостатков существующих доклинических моделей является невозможность контекстуально сохранить микроокружение опухоли человека (TME) и точно представить внутриопухолевую гетерогенность, тем самым ограничивая клиническую трансляцию данных. Напротив, представляя культуру живых фрагментов опухолей человека, платформа эксплантата, полученная от пациента (ФДЭ), позволяет исследовать лекарственные реакции в трехмерном (3D) контексте, который максимально точно отражает патологические и архитектурные особенности исходных опухолей. Предыдущие отчеты с ФДЭ документировали способность платформы отличать хемочувствительные опухоли от хеморезистентных, и было показано, что эта сегрегация является прогностической реакцией пациентов на одну и ту же химиотерапию. Одновременно ФДЭ позволяют исследовать молекулярные, генетические и гистологические особенности опухолей, которые предсказывают реакции на лекарства, тем самым выявляя биомаркеры для стратификации пациентов, а также новые интервенционные подходы к сенсибилизации резистентных опухолей. В этом документе подробно описывается методология ФДЭ, от сбора образцов пациентов до анализа конечных точек. В нем приводится подробное описание методов экстраплантного получения и культивирования, выделяя индивидуальные условия для конкретных опухолей, где это уместно. Для анализа конечных точек основное внимание уделяется мультиплексированной иммунофлуоресценции и мультиспектральной визуализации для пространственного профилирования ключевых биомаркеров как в опухолевых, так и в стромальных областях. Комбинируя эти методы, можно генерировать количественные и качественные данные о лекарственном ответе, которые могут быть связаны с различными клинико-патологическими параметрами и, таким образом, потенциально могут быть использованы для идентификации биомаркеров.

Мультиспектральная визуализация гистологических срезов, окрашенных mIF, позволяет идентифицировать и фенотипировать отдельные клеточные популяции и идентифицировать опухолевые и стромальные компоненты в эксплантном TME(рисунок 2). Мультиспектральная визуализация осо?...

Watch this Scientific Journal Video about Patient-Derived Tumor Explants As a "Live" Preclinical Platform for Predicting Drug Resistance in Patients at JoVE.com

Patient-Derived Tumor Explants As a "Live" Preclinical Platform for Predicting Drug Resistance in Patients

В этой статье описываются методы генерации, медикаментозного лечения и анализа эксплантов, полученных от пациента, для оценки реакций на лекарства от опухоли в живой, соответствующей пациенту, доклинической модельной системе.

Экспланты опухолей, полученные от пациентов, как «живая» доклиническая платформа для прогнозирования лекарственной устойчивости у пациентов

An understanding of drug resistance and the development of novel strategies to sensitize highly resistant cancers rely on the availability of suitable ...

Экспланты, полученные от пациента, являются краткосрочным методом, обеспечивающим немедленные данные о реакции на лекарства, которые могут точно прогнозировать результаты лечения пациентов. Платформы PD позволяют исследовать лекарственные реакции в 3D-контексте, который максимально точно отражает патологические и архитектурные особенности регионарных опухолей. Экспланты могут предложить новое понимание метаболизма и механизма действия лекарственного средства и облегчить идентификацию новых фармакодинамических биомаркеров.Перед началом эксперимента очистите все хирургическое оборудование 70% раствором промышленных метилированных спиртов. Наполните 10-сантиметровое культуральное блюдо 25 миллилитрами свежей среды на льду. Используя пинцет, перенесите образец на поверхность зубного воска и используйте два лезвия кожного трансплантата, чтобы разрезать ткань на фрагменты размером примерно два-три кубических миллиметра.Переложите экспланты в 10-сантиметровую посуду и поместите шесть-девять кусочков ткани в одну миллилитровую трубку, содержащую 10% небуферизованный раствор формалина для 24-часовой инкубации при комнатной температуре. Заполните нужное количество лунок шестилуночной плиты 1,5 миллилитрами свежей среды на скважину. И поместите в каждый колодец органотипическую культурную тарелку, чтобы она плавала поверх среды.Поместите от шести до девяти эксплантов на каждый вставной диск и храните в течение 16 часов в инкубаторе 5% углекислого газа, чтобы обеспечить восстановление. На следующий день добавьте свежую среду и препарат в каждую лунку новой тарелки. Включите колодец для управления транспортным средством.Когда все лекарственные средства будут приготовлены, используйте пинцет для переноса одной вставки в каждую лунку новой пластины из шести лунок для инкубации от 24 до 48 часов в инкубаторе углекислого газа. После лечения препаратом перекладывают диски в новые шесть луночных пластин, содержащих 10% формалина. И добавьте несколько капель 10% формалина в верхнюю часть каждого экспланта, чтобы обеспечить полное покрытие фиксатором в течение 24 часов инкубации при комнатной температуре.На следующий день замочите соответствующее количество небольших гистологических губок в 70% промышленном метилированном растворе. И поместите губки внутрь гистологических кассет. Когда все губки будут помещены, переместите все экспланты из того же состояния лечения лекарством на одну губку с обработанной препаратом стороной каждой эксплантации, контактирующей с вставленным диском.Поместите еще одну предварительно замоченную губку поверх каждого экспланта и закройте кассету, чтобы закрепить экспланты в кассете. Затем погружают кассеты в 70% промышленный метилированный раствор, прежде чем приступать к гистологической обработке. После сканирования выполните обучающий анализ и загрузите сканы, содержащие штампы для обучения, в соответствующее программное обеспечение для анализа.В однорежимном представлении перемещайтесь по изображениям и выбирайте сканы для анализа и сканирования с внутренней флуоресценцией. При внутреннем флуоресцентном сканировании в одном представлении щелкните автофлуоресцентный выбор, чтобы нарисовать сегмент на участке незапятнанной ткани. Щелкните Изменить маркеры и цвета и введите имена маркеров в поле, связанном с каждым флуорофором.Нажмите кнопку Подготовить изображения, чтобы позволить программному обеспечению вычесть интенсивность внутренней флуоресценции из всех загруженных изображений. Щелкните шаг сегмента ткани в верхней части экрана, чтобы открыть окно тренировки сегментации тканей. На панели «Категории тканей» введите название каждой категории тканей, подлежащей сегментации.Нажмите кнопку Нарисовать, чтобы нарисовать области вокруг групп клеток в интересующей категории тканей. Затем переключитесь на следующую категорию тканей и нарисуйте новые области. Когда все области обучения будут определены, используйте сегментатор тканей тренировки и подождите, пока точность обучения установится.Возможно до значения, близкого к 100%Нажмите сегментировать все, чтобы сегментировать ткани. После проверки качества сегментации тканей щелкните сегментацию клеток и выберите клеточные компартменты для сегментации. Чтобы настроить ядерный компонент, используйте ползунок типичной интенсивности для настройки порогового значения, используемого для обнаружения ядерных пикселей.Обратная связь в реальном времени предоставляется окном предварительного просмотра. Чтобы разделить кластеры ядерных пикселей, на панели разделения ядерных компонентов выберите кнопку, которая лучше всего описывает качество окрашивания ядер, и используйте ползунок для настройки чувствительности к расщеплению. Затем щелкните Сегментировать все, чтобы сегментировать все изображения.Когда все изображения будут сегментированы, на панели фенотипов добавьте список фенотипов, которые необходимо обнаружить, и введите имя фенотипов в соответствующее текстовое поле. Нажмите редактировать фенотипы, чтобы выбрать определенную ячейку и выбрать соответствующий фенотип в раскрывающемся меню. После завершения отбора для обучения нажмите на классификатор поездов, чтобы оценить результат каждого фенотипа.Перейдите к фенотипу всех, сохраните проект и нажмите экспорт. Выберите вкладку пакетного анализа и загрузите проект в пакетный алгоритм или поле проекта. Чтобы экспортировать изображения и таблицы, выберите все поля в параметрах экспорта, нажмите кнопку Добавить слайды и загрузите все изображения, содержащие штампы для ранее подготовленных пакетов.Затем нажмите кнопку «Запустить», чтобы начать пакетный анализ одного штампа и экспортировать соответствующие данные, когда они были получены. Мультиспектральная визуализация эксплантной ткани НМРЛ, окрашенной для маркеров жизнеспособности клеток, позволяет идентифицировать и фенотипировать отдельные клеточные популяции, а также идентифицировать опухолевые и стромальные компоненты в микросреде экстраплантной опухоли. Тканевая и клеточная сегментация пятен маркера жизнеспособности клеток мультиспектральных изображений, как показано на рисунке, может быть использована для количественной оценки гибели и пролиферации клеток в эксплантатах, полученных пациентами, обработанными препаратами, представляющими интерес.Например, в этом анализе в образцах тканей из опухолей, обработанных ниволумабом, было идентифицировано большее количество умирающих клеток по сравнению с контрольными образцами опухоли. Кроме того, как показано на рисунке, способность извлекать пространственную информацию из окрашенных рассечений, позволяет рассчитывать межклеточные расстояния. Экспланты также могут быть использованы для обширного пространственного профилирования или массовой цитометрии, что позволяет одновременно профилировать сотни биомаркеров с дополнительным разрешением при сохранении 3D-структуры образца.ПД могут предсказать эффективность иммунотерапии. Например, можно было бы различать чувствительные или устойчивые случаи к ингибиторам иммунных контрольных точек и исследовать механизмы, лежащие в основе этого различия.

Research

JoVE Journal

Cancer Research

Development and Maintenance of a Preclinical Patient Derived Tumor Xenograft Model for the Investigation of Novel Anti-Cancer Therapies

Разработка и ведение доклинической пациента Derived Опухоль модели ксенотрансплантата для исследования принципиально новых видов лечения рака

Patient derived tumor xenograft (PDTX) models provide a necessary platform in facilitating anti-cancer drug development prior to human trials. Human tumor ...

Labeling of Breast Cancer Patient-derived Xenografts with Traceable Reporters for Tumor Growth and Metastasis Studies

Маркировку рака молочной железы на пациента получены ксенотрансплантатов с прослеживаемы Репортеров для опухолевого роста и метастазирования исследований

The use of preclinical models to study tumor biology and response to treatment is central to cancer research. Long-established human cell lines, and many ...

Patient-derived Orthotopic Xenograft Models for Human Urothelial Cell Carcinoma and Colorectal Cancer Tumor Growth and Spontaneous Metastasis

Пациент полученных ортотопические ксенотрансплантат Модели для человека Уротелиальной карциномы клеток и колоректального рака опухоли роста и спонтанного метастаза

Cancer patients have poor prognoses when lymph node (LN) involvement is present in both high-grade urothelial cell carcinoma (HG-UCC) of the bladder and ...

Patient-derived Heterogeneous Xenograft Model of Pancreatic Cancer Using Zebrafish Larvae as Hosts for Comparative Drug Assessment

Пациент полученных гетерогенных Xenograft Модель рака поджелудочной железы использованием черыщения зебрав в качестве хозяев для сравнительной оценки наркотиков

Patient-derived tumor xenograft (PDX) and cell-derived tumor xenograft (CDX) are important techniques for preclinical assessment, medication guidance and ...

Establishment of Gastric Cancer Patient-derived Xenograft Models and Primary Cell Lines

Создание желудка рака пациента полученных Ксенотрансплантат Модели и первичные линии клеток

The use of preclinical models to advance our understanding of tumor biology and investigate the efficacy of therapeutic agents is key to cancer research. ...

Enhanced Viability for Ex vivo 3D Hydrogel Cultures of Patient-Derived Xenografts in a Perfused Microfluidic Platform

Улучшенная жизнеспособность для Ex vivo 3D гидрогелевых культур ксенотрансплантатов, полученных пациентами, в переливной микрофлюидной платформе

Patient-derived xenografts (PDX), generated when resected patient tumor tissue is engrafted directly into immunocompromised mice, remain biologically ...

Drug Screening of Primary Patient Derived Tumor Xenografts in Zebrafish

Скрининг наркотиков первичного пациента, полученных опухоли Xenografts в зебрафиш

Patient derived xenograft models are critical in defining how different cancers respond to drug treatment in an in vivo system. Mouse models are the ...

High-Throughput In Vitro Assay using Patient-Derived Tumor Organoids

High-Throughput In Vitro Assay using Patient-Derived Tumor Organoids

Высокопроизводительный анализ in vitro с использованием органоидов опухолей, полученных от пациента

Patient-derived tumor organoids (PDOs) are expected to be a preclinical cancer model with better reproducibility of disease than traditional cell culture ...

Multiparametric Tumor Organoid Drug Screening Using Widefield Live-Cell Imaging for Bulk and Single-Organoid Analysis

Многопараметрический скрининг опухолевых органоидных препаратов с использованием широкоугольной визуализации живых клеток для объемного и одноорганоидного анализа

Patient-derived tumor organoids (PDTOs) hold great promise for preclinical and translational research and predicting the patient therapy response from ex ...

Orthotopic Implantation of Patient-Derived Cancer Cells in Mice Recapitulates Advanced Colorectal Cancer

Ортотопическая имплантация раковых клеток, полученных от пациентов, у мышей повторяет прогрессирующий колоректальный рак

Over the last decade, more sophisticated preclinical colorectal cancer (CRC) models have been established using patient-derived cancer cells and 3D ...