Name: a syngeneic orthotopic osteosarcoma sprague dawley rat model with amputation to control metastasis rate
Uploaded: 2021-05-03T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Syngeneic Orthotopic Osteosarcoma Sprague Dawley Rat Model with Amputation to Control Metastasis Rate at JoVE.com

Финансирование NIH через Национальный институт рака, грант # CA228582. Шун Исияма в настоящее время получает грант от Toray Medical Co., Ltd.

Все процедуры и эксперименты с участием крыс проводились в соответствии с протоколами, утвержденными Комитетом по уходу и использованию животных Джона Хопкинса.
1. Протокол клеточной культуры SD rat OS UMR-106
<ol><li>Выращивают клетки в DMEM, дополненном 10% (v/v) FBS, пенициллином (10 Ед/...

<ol>
	<li>Link, M. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effect+of+adjuvant+chemotherapy+on+relapse-free+survival+in+patients+with+osteosarcoma+of+the+extremity.">The effect of adjuvant chemotherapy on relapse-free survival in patients with osteosarcoma of the extremity.</a> New England Journal of Medicine. 314 (25), 1600-1606 (1986).</li><li>Bielack, S. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prognostic+factors+in+high-grade+osteosarcoma+of+the+extremities+or+trunk:+an+analysis+of+1,702+patients+treated+on+neoadjuvant+cooperative+osteosarcoma+study+group+protocols.">Prognostic factors in high-grade osteosarcoma of the extremities or trunk: an analysis of 1,702 patients treated on neoadjuvant cooperative osteosarcoma study group protocols.</a> Journal of Clinical Oncology. 20 (3), 776-790 (2002).</li><li>Botter, S. M., Neri, D., Fuchs, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recent+advances+in+osteosarcoma.">Recent advances in osteosarcoma.</a> Current Opinion in Pharmacology. 16, 15-23 (2014).</li><li>Ek, E. T. H., Dass, C. R., Choong, P. F. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Commonly+used+mouse+models+of+osteosarcoma.">Commonly used mouse models of osteosarcoma.</a> Critical Reviews in Oncology Hematology. 60 (1), 1-8 (2006).</li><li>Guijarro, M. V., Ghivizzani, S. C., Gibbs, C. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+in+osteosarcoma.">Animal models in osteosarcoma.</a> Frontiers Oncology. 4, 189 (2014).</li><li>Janeway, K. A., Walkley, C. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modeling+human+osteosarcoma+in+the+mouse:+From+bedside+to+bench.">Modeling human osteosarcoma in the mouse: From bedside to bench.</a> Bone. 47 (5), 859-865 (2010).</li><li>Mohseny, A. B., Hogendoorn, P. C., Cleton-Jansen, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Osteosarcoma+models:+from+cell+lines+to+zebrafish.">Osteosarcoma models: from cell lines to zebrafish.</a> Sarcoma. 2012, 417271 (2012).</li><li>Khanna, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+orthotopic+model+of+murine+osteosarcoma+with+clonally+related+variants+differing+in+pulmonary+metastatic+potential.">An orthotopic model of murine osteosarcoma with clonally related variants differing in pulmonary metastatic potential.</a> Clinical &amp; Experimental Metastasis. 18 (3), 261-271 (2000).</li><li>Martin, T. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Parathyroid+hormone-responsive+adenylate+cyclase+in+induced+transplantable+osteogenic+rat+sarcoma.">Parathyroid hormone-responsive adenylate cyclase in induced transplantable osteogenic rat sarcoma.</a> Nature. 260 (5550), 436-438 (1976).</li><li>Fisher, J. L., Mackie, P. S., Howard, M. L., Zhou, H., Choong, P. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+expression+of+the+urokinase+plasminogen+activator+system+in+metastatic+murine+osteosarcoma:+an+in+vivo+mouse+model.">The expression of the urokinase plasminogen activator system in metastatic murine osteosarcoma: an in vivo mouse model.</a> Clinical Cancer Research. 7 (6), 1654-1660 (2001).</li><li>Yu, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Establishment+of+reproducible+osteosarcoma+rat+model+using+orthotopic+implantation+technique.">Establishment of reproducible osteosarcoma rat model using orthotopic implantation technique.</a> Oncology Reports. 21 (5), 1175-1180 (2009).</li><li>Zhang, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Homologous+mesenchymal+stem+cells+promote+the+emergence+and+growth+of+pulmonary+metastases+of+the+rat+osteosarcoma+cell+line+UMR-106.">Homologous mesenchymal stem cells promote the emergence and growth of pulmonary metastases of the rat osteosarcoma cell line UMR-106.</a> Oncology Letters. 8 (1), 127-132 (2014).</li><li>Gabrielson, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heat+shock+protein+90+and+ErbB2+in+the+cardiac+response+to+doxorubicin+injury.">Heat shock protein 90 and ErbB2 in the cardiac response to doxorubicin injury.</a> Cancer Research. 67 (4), 1436-1441 (2007).</li><li>Sysa-Shah, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bidirectional+cross-regulation+between+ErbB2+and+&#946;-adrenergic+signalling+pathways.">Bidirectional cross-regulation between ErbB2 and &#946;-adrenergic signalling pathways.</a> Cardiovascular Research. 109 (3), 358-373 (2016).</li><li>Wachtman, L. M., Browning, M. D., Bedja, D., Pin, S., Gabrielson, K. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Validation+of+the+use+of+long-term+indwelling+jugular+catheters+in+a+rat+model+of+cardiotoxicity.">Validation of the use of long-term indwelling jugular catheters in a rat model of cardiotoxicity.</a> Journal of American Association Laboratory Animal Science. 45, 55-64 (2006).</li><li>Abdou, A. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Prognostic+role+of+Ezrin+and+HER2/neu+expression+in+osteosarcoma.">The Prognostic role of Ezrin and HER2/neu expression in osteosarcoma.</a> Applied Immunohistochemistry &amp; Molecular Morphology. 24 (5), 355-363 (2016).</li><li>Hughes, D. P., Thomas, D. G., Giordano, T. J., McDonagh, K. T., Baker, L. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Essential+erbB+family+phosphorylation+in+osteosarcoma+as+a+target+for+CI-1033+inhibition.">Essential erbB family phosphorylation in osteosarcoma as a target for CI-1033 inhibition.</a> Pediatric Blood &amp; Cancer. 46 (5), 614-623 (2006).</li><li>Wen, Y. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epidermal+growth+factor+receptor+in+osteosarcoma:+expression+and+mutational+analysis.">Epidermal growth factor receptor in osteosarcoma: expression and mutational analysis.</a> Human Pathology. 38 (8), 1184-1191 (2007).</li><li>Khanna, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Toward+a+drug+development+path+that+targets+metastatic+progression+in+osteosarcoma.">Toward a drug development path that targets metastatic progression in osteosarcoma.</a> Clinical Cancer Research. 20 (16), 4200-4209 (2014).</li></ol>

У крыс с имплантатами ОС большеберцовой кости развиваются измеримые опухоли к 3 неделям после имплантации. Если конечности с опухолями ампутируют через 3 недели после имплантации, частота метастазирования в легкие значительно снижается. ОС являются как остеолитическими, так и остеобл?...

Остеосаркома (ОС) является наиболее распространенной первичной опухолью кости у детей, подростков и молодых людей. Самый последний прогресс в лечении ОС произошел в 1980-х годах, когда было показано, что многоагентная химиотерапия улучшает общую выживаемость по сравнению с одной только хирургией1. ОС развивается во время быстрого роста костей, обычно происходящего в длинных трубчатых костях, таких как бедренная кость, большеберцовая кость и плечевая кость. Они характеризуются остеолитическим, остеобластным или смешанным внешним видом с заметной периостальной реакцией2. Химиотерапия и хирургическая резекция могут улучшить исход для пациентов с 5-летней выживаемостью для 65% пациентов2,3. К сожалению, пациенты с ОС высокой степени с метастатическим заболеванием имеют 20% выживаемость. ОС вторгается регионально и метастазирует в основном в легкие или другие кости и более распространен у мужчин. Наиболее насущной потребностью для этих молодых пациентов является новая терапия, которая предотвращает и устраняет жизнеспособность отдаленных метастазов.
Рассмотрены доклинические модели ОС4,5,6,7 и разработано несколько доступных иммунокомпетентных моделей с использованием ампутации ортотопической ОС. В 2000 году была разработана важная модель с использованием мышей BALB/c с ортотопической сингенной ОС и ампутацией8. По сравнению с этой моделью мыши, модель крыс основана на генетически перерожденных и в 10 раз более крупных животных, что приводит к некоторым преимуществам. Крысиная модель UMR106 была разработана из 32P индуцированной ОС у крысы Sprague Dawley (SD), которая была выведена в клеточную линию9. В 2001 году ортотопическая имплантация UMR106-01 была впервые описана в имплантированные большеберцовые кости афимических мышей с быстрым, последовательным развитием первичной опухоли и рентгенологическими, гистологическими особенностями, общими с ОС у человека. Легочные метастазы развивались и зависели от ортотопического размещения UMR106 в костном микроокружении10. В 2009 году Yu et al.11 установили воспроизводимую ортотопическую модель ОС бедренной кости крысы с использованием клеток UMR106 у более крупных самцов SD-крыс. Успешные имплантации опухолей и частота метастазирования в легкие у крыс без ампутации были аналогичны данным, представленным здесь. В этом исследовании была выполнена дополнительная ампутация к модели с использованием молодых крыс, которая показала, что сроки первичного удаления опухоли имеют решающее значение для моделирования ОС, особенно связанных с метастатическим прогрессированием. Благодаря этому уточнению ампутация и визуализация in vivo улучшают эту модель для доклинических исследований для оценки новых лекарств для ОС.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>AKT</td>
			<td>Cell Signaling TECHNOLOGY</td>
			<td>4685S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>absorbable suture</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>J214H</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>&#946;-actin</td>
			<td>SANTA CRUZ BIOTECHNOLOGY</td>
			<td>sc-47778</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>&#946;2-AR antibody</td>
			<td>SANTA CRUZ BIOTECHNOLOGY</td>
			<td>sc-569</td>
			<td>replaced by &#946;2-AR (E-3): sc-271322</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bis&#8211;Tris gels</td>
			<td>Thermo Fisher</td>
			<td>NP0321PK2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Buprenorphine SR Lab</td>
			<td>ZooPharm</td>
			<td>IZ-70000-201908</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CD3 antibody</td>
			<td>Dako</td>
			<td>#A0452</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CD68 antibody</td>
			<td>eBioscience</td>
			<td>#14-0688-82</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chemiluminescent substrate</td>
			<td>cytiva</td>
			<td>RPN2232</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CL-Xposure film</td>
			<td>Thermo Fisher</td>
			<td>34089</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Complete Anesthesia System</td>
			<td>EVETEQUIP</td>
			<td>922120</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>diaminobenzidine</td>
			<td>VECTOR LABORATORIES</td>
			<td>SK-4100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Doxorubicin</td>
			<td>Actavis</td>
			<td>NDC 45963-733-60</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EGFR antibody</td>
			<td>SANTA CRUZ BIOTECHNOLOGY</td>
			<td>sc-03</td>
			<td>replaced by EGFR (A-10): sc-373746</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ERBB2 antibody</td>
			<td>SANTA CRUZ BIOTECHNOLOGY</td>
			<td>sc-284</td>
			<td>replaced by Neu (3B5): sc-33684</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ERBB4 antibody</td>
			<td>SANTA CRUZ BIOTECHNOLOGY</td>
			<td>sc-283</td>
			<td>replaced by ErbB4 (C-7): sc-8050</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ERK antibody</td>
			<td>SANTA CRUZ BIOTECHNOLOGY</td>
			<td>sc-514302</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>eye lubricant</td>
			<td>PHARMADERM</td>
			<td>NDC 0462-0211-38</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hamilton syringe (100 &#181;L)</td>
			<td>Hamilton</td>
			<td>Model 1710 SN SYR</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>horseradish peroxidase-linked secondary antibody</td>
			<td>cytiva</td>
			<td>NA934</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HRP polymer detection kit</td>
			<td>VECTOR LABORATORIES</td>
			<td>MP-7401</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HRP polymer detection kit</td>
			<td>VECTOR LABORATORIES</td>
			<td>MP-7402</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>isoflurane</td>
			<td>BUTLER SCHEIN</td>
			<td>NDC 11695-6776-2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>isoflurane vaporizer</td>
			<td>EVETEQUIP</td>
			<td>911103</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>UMR-106 cell</td>
			<td>ATCC</td>
			<td>CRL-1661</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>X-ray</td>
			<td>Faxitron</td>
			<td>UltraFocus</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>X-ray processor</td>
			<td>Hope X-Ray Peoducts Inc</td>
			<td>MicroMax X-ray Processor</td>
			<td>Hope Processors are not available in USA anymore</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>wound clips</td>
			<td>BECTON DICKINSON</td>
			<td>427631</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a syngeneic orthotopic osteosarcoma sprague dawley rat model with amputation to control metastasis rate

Самый последний прогресс в лечении остеосаркомы (ОС) произошел в 1980-х годах, когда было показано, что многоагентная химиотерапия улучшает общую выживаемость по сравнению с одной только хирургией. Для решения этой проблемы целью исследования является уточнение менее известной модели ОС у крыс с комплексным гистологическим, визуальным, биологическим, имплантационным и ампутационным хирургическим подходом, который продлевает выживание. Мы использовали иммунокомпетентную, беспородную модель Sprague-Dawley (SD), сингенную модель крысы с имплантированной клеточной линией ОС UMR106 (происходящей от SD-крысы) с ортотопическими имплантатами опухоли большеберцовой кости у 3-недельных самцов и самок крыс для моделирования педиатрической ОС. Мы обнаружили, что у крыс развиваются воспроизводимые первичные и метастатические опухоли легких, и что ампутации конечностей через 3 недели после имплантации значительно снижают частоту легочных метастазов и предотвращают неожиданные смерти. Гистологически первичные и метастатические ОС у крыс были очень похожи на ОС человека. Используя методы иммуногистохимии, исследование показывает, что ОС крыс инфильтрированы макрофагами и Т-клетками. Исследование экспрессии белка клеток ОС показывает, что эти опухоли экспрессируют киназы семейства ErbB. Поскольку эти киназы также высоко экспрессируются в большинстве ОС человека, эта модель крыс может быть использована для тестирования ингибиторов пути ErbB для терапии.

Иммунокомпетентные SD беспородные крысы используются для этих исследований ОС, которые предлагают животную модель с интактной иммунной системой. Мы использовали клеточную линию UMR106 от ATCC, разработанную из клеток, которые были первоначально выделены из ОС крысы SD. Мы имплантировали кле...

Watch this Scientific Journal Video about A Syngeneic Orthotopic Osteosarcoma Sprague Dawley Rat Model with Amputation to Control Metastasis Rate at JoVE.com

A Syngeneic Orthotopic Osteosarcoma Sprague Dawley Rat Model with Amputation to Control Metastasis Rate

Здесь описана сингенная ортотопическая имплантация с последующей процедурой ампутации остеосаркомы со спонтанным легочным метастазированием, которая может быть использована для доклинического исследования биологии метастазирования и разработки новых терапевтических средств.

Модель сингенной ортотопической остеосаркомы Sprague Dawley Rat с ампутацией для контроля скорости метастазирования

The most recent advance in the treatment of osteosarcoma (OS) occurred in the 1980s when multi-agent chemotherapy was shown to improve overall survival ...

Имплантация клеток остеосаркомы внутри микроокружения большеберцовой кости способствует метастазированию в легкие. Эта модель также может быть полезна для изучения механизмов легочного метастазирования или новых методов лечения рака, которые требуют неповрежденной иммунной системы. После того, как опухоль была установлена, ампутация необходима для контроля скорости метастазирования в долгосрочных исследованиях выживаемости.Мы используем яремные инъекции, чтобы обеспечить визуализацию внутривенной доставки лекарств. Инъекция в яремную вену полезна для многих других моделей заболеваний, для которых требуется точная доставка лекарств. Мы использовали этот метод для доставки наночастиц и радиоактивных лиганов для визуализации in vivo.Мы советуем новым пользователям попрактиковаться в удалении конечности от пяти до 10 усыпленных крыс, прежде чем пытаться провести эксперимент по освоению механики ампутации конечностей без потери крови. После подтверждения отсутствия реакции на рефлекс полового члена закрепите анестезируемую крысу в носовом конусе на тепловизионной грелке в положении лежа на спине. Удалить волосы на правой ноге, вплоть до вентральной и спинной нижней части живота.Используйте марлю или спрей для дезинфекции хирургической области 70% этанолом и соответствующим разбавленным антисептиком и нанесите мазь на глаза животного. Используя сверлообразное движение, чтобы сделать отверстие, вставьте иглу 22-го калибра, отмеченную в 10 миллиметрах от кончика 10 миллиметров, в диафиз большеберцовой кости в середине большеберцового плато, протягивая иглу через метафиз в диафиз. После удаления иглы осторожно смешайте интересующую суспензию опухолевой клетки, чтобы получить однородную клеточную суспензию, и загрузите 7,5 х 10 до четвертой части клеток в 20 микролитрах PBS в шприц Гамильтона.Отметьте шприц Гамильтона ячейками в 10 миллиметрах от кончика иглы и вставьте иглу до 10-миллиметровой отметки в отверстие, сделанное иглой 22-го калибра. Затем аккуратно выгрузите весь объем клеток в полость костного мозга, и поместите крысу в клетку на грелку с контролем до полного покоя. Для внутривенного введения доксорубицина после подтверждения анестезии используйте тщательное рассечение для визуализации правой или левой яремной вены и вставьте иглу в вышележащую мышечную ткань.Направьте иглу к головке в просвет яремной вены, так как она визуализируется в яремной вене перед грудной мышцей, и втяните небольшой объем крови в кончик иглы, чтобы подтвердить точное введение. Когда игла на месте, медленно вводите от 100 до 150 микролитров двух миллиграммов на килограмм доксорубицина в течение одной минуты. Раствор должен быть виден внутри вены во время родов.Когда весь раствор будет доставлен, используйте стерильную марлю, чтобы оказать мягкое давление на вену, и используйте три-четыре раневых зажима, чтобы закрыть разрез. После подтверждения седации удалите волосы на правой ноге, вплоть до вентральной и спинной нижней части живота, и поместите крысу в лежачее положение на грелке. Очистите кожу от середины икры до чуть выше тазобедренного сустава правой нижней части живота, как показано на рисунке, и нанесите мазь на глаза животного.Используя стерильные перчатки и инструменты, протяните ногу через вентиляционное отверстие стерильной хирургической драпировки и сделайте окружной кожный разрез прямо проксимально к удушью. Деглавировать заднюю конечность, чтобы обнажить бедренную артерию и вену на вентрально-медиальной поверхности задней конечности, и использовать 4-0 рассасывающихся швов для оспаривания сосудов на уровне средней бедренной кости и трансекции дистально. Зажмите вену дистально, чтобы уменьшить утечку во время рассечения мышц и используйте тупое рассечение для абдукции тазобедренного сустава боковым вращением наружу.Найдите и расчлените головку бедренной кости от вертлужной впадины и удалите любую оставшуюся ткань, сохраняя ногу прикрепленной к телу. Введите блок брызг в вертлужную впадину и седалищный нерв примерно шестью миллиграммами на килограмм ропивакаина и используйте простой прерванный рассасывающийся шов 4-0, чтобы закрыть мускулатуру над вертлужной впадиной. Затем используйте раневые зажимы, помещенные от пяти до 10 миллиметров, чтобы закрыть края кожи.Рентгеновская визуализация для наблюдения за опухолью позволяет подтвердить инвазию костной опухоли и может быть выполнена на недавно ампутированных или закрепленных формалином конечностях. Рентгеновская визуализация также позволяет оценить рентгенографическую морфологию легких с метастазами и без них, обеспечивая быстрый и простой метод определения необходимости эвтаназии для предотвращения ненужных спонтанных смертей. При остеосаркоме крыс морфология как остеолитической, так и остеобластной опухоли может быть подтверждена гистопатологией ампутированной конечности.Обратите внимание, что кортикальная кость отсутствует в этом примере и что соседняя кость была заменена или укреплена новой тканой костью, которая ориентирована перпендикулярно существующему стволу коры. Островки незрелых остеоидов также могут быть идентифицированы внутри опухоли. На этих снимках может наблюдаться микроскопическая морфология репрезентативных метастазов в легкие, некоторые с минерализованными костовидными и опухолевыми сосудистыми эмболами.Иммуноокрашивание опухолей первичной остеосаркомы может выявить инфильтрацию опухолей популяциями иммунных клеток, такими как CD68-положительные макрофаги или CD3-положительные Т-клетки. Западное блоттинг лизатов белка опухолевых клеток может быть использовано для определения экспрессии протеинкиназ, рецепторов протеинкиназы и других белков, которые взаимодействуют с этими путями. Для имплантации большеберцовой кости, как только будет сделано первое отверстие большеберцовой кости, продолжайте держать ногу в недоминирующей руке под тем же углом, чтобы сохранить кожу и костные отверстия выровненными, чтобы облегчить введение иглы Гамильтона.Для яремной инъекции вставьте иглу в мышцу, но не наклоняйте иглу слишком сильно, чтобы избежать пропуска вены. Для ампутации сначала практикуйте дисартикуляцию на усыпленных крысах.

Research

JoVE Journal

Cancer Research

Fluorescent Orthotopic Mouse Model of Pancreatic Cancer

Флуоресцентные Ортотопическая Мышь Модель панкреатического рака

Pancreatic cancer remains one of the cancers for which survival has not improved substantially in the last few decades. Only 7% of diagnosed patients will ...

Murine Experimental Model of Original Tumor Development and Peritoneal Metastasis via Orthotopic Inoculation with Ovarian Carcinoma Cells

Murine Experimental Model of Original Tumor Development and Peritoneal Metastasis via Orthotopic Inoculation with Ovarian Carcinoma Cells

Мышиные Экспериментальная модель самобытного развития опухолевого и перитонеальный метастаз<em&gt; с помощью</em&gt; Ортотопическая Заражение клеток карциномы яичников

Epithelial ovarian carcinoma (EOC) is associated with a poor prognosis because it shows peritoneal dissemination. To improve the prognosis, it is ...

A Portal Vein Injection Model to Study Liver Metastasis of Breast Cancer

Воротной вены для инъекций модель для изучения печени метастазирования рака молочной железы

Breast cancer is the leading cause of cancer-related mortality in women worldwide. Liver metastasis is involved in upwards of 30% of cases with breast ...

Practical Considerations in Studying Metastatic Lung Colonization in Osteosarcoma Using the Pulmonary Metastasis Assay

Практические соображения в изучении метастатического легких колонизации в остеосаркома, используя Assay легочных метастазов

The pulmonary metastasis assay (PuMA) is an ex vivo lung explant and closed cell culture system that permits researchers to study the biology of lung ...

A Preclinical Mouse Model of Osteosarcoma to Define the Extracellular Vesicle-mediated Communication Between Tumor and Mesenchymal Stem Cells

Доклинические мыши модель остеосаркома определить внеклеточного везикул опосредованной коммуникации между опухоли и мезенхимальных стволовых клеток

Within the tumor microenvironment, resident or recruited mesenchymal stem cells (MSCs) contribute to malignant progression in multiple cancer types. Under ...

A Syngeneic Pancreatic Cancer Mouse Model to Study the Effects of Irreversible Electroporation

Модель мышь сингенных рака поджелудочной железы для изучения последствий необратимой электропорации

Pancreatic cancer (PC), a disease which kills approximately 40,000 patients each year in the US, has successfully evaded several therapeutic approaches ...

A Bioluminescent and Fluorescent Orthotopic Syngeneic Murine Model of Androgen-dependent and Castration-resistant Prostate Cancer

Биолюминесцентных и флуоресцентный ортотопическая сингенных мышиных модель андроген зависимых и кастрация стойкие рака простаты

Orthotopic tumor modeling is a valuable tool for pre-clinical prostate cancer research, as it has multiple advantages over both subcutaneous and ...

Immunophenotyping of Orthotopic Homograft (Syngeneic) of Murine Primary KPC Pancreatic Ductal Adenocarcinoma by Flow Cytometry

Immunophenotyping of Orthotopic Homograft Syngeneic of Murine Primary KPC Pancreatic Ductal Adenocarcinoma by Flow Cytometry

Иммунофенотипирование ортотопическая Homograft (сингенных) из мышиных первичной КЗК аденокарциномы поджелудочной железы протоковой подачей Cytometry

Homograft (syngeneic) tumors are the workhorse of today&#39;s immuno-oncology (I/O) preclinical research. The tumor microenvironment (TME), particularly ...

Orthotopic Transplantation of Syngeneic Lung Adenocarcinoma Cells to Study PD-L1 Expression

Ортотопическая трансплантация клеток аденокарциномы сингенных легкого учиться выражение PD-L1

The use of mouse models is indispensable for studying the pathophysiology of various diseases. With respect to lung cancer, several models are available, ...

Acellular and Cellular Lung Model to Study Tumor Metastasis

Бесклеточной и клеточных легких модель для изучения метастазов опухоли

It is difficult to isolate tumor cells at different points of tumor progression. We created an ex vivo lung model that can show the interaction of tumor ...