Name: doxycycline loaded collagen-chitosan composite scaffold for the accelerated healing of diabetic wounds
Uploaded: 2021-08-21T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Doxycycline Loaded Collagen-Chitosan Composite Scaffold for the Accelerated Healing of Diabetic Wounds at JoVE.com

Gli autori ringraziano il Dr. Ashish D Wadhwani. (Professore assistente e capo, Dipartimento di biotecnologie farmaceutiche, JSS College of Pharmacy, Ooty, India) per l'assistenza negli studi di vitalità cellulare in vitro.
Gli autori ringraziano il Dipartimento di Scienza e Tecnologia - Fondo per il miglioramento delle infrastrutture scientifiche e tecnologiche nelle università e nelle istituzioni educative superiori (DST-FIST), Nuova Delhi, per aver supportato il nostro dipartimento.
Gli autori ringraziano anche il Sig. Sanju. S e il signor Sriram. Narukulla M. Pharm studenti per il loro supporto nelle riprese video.
Questa ricerca è stata supportata dalla JSS Academy of Higher Education & Research (JSSAHER).

Tutte le procedure sugli animali eseguite sono state approvate dal comitato etico istituzionale per gli animali del JSS College of Pharmacy, Ooty, India.
1. Preparazione di impalcature porose caricate con DOX con metodo di liofilizzazione
<ol><li>Aggiungere 1,2 g di COL a 100 mL di acqua (ad esempio Millipore) e tenere da parte per il gonfiore.</li>
	<li>Mescolare la dispersione gonfia del COL a 2000 giri/min durante la notte per garantire la completa dissoluzione del COL.</li>
	<li>Preparar...

<ol>
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J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Matrix+metalloproteinase-9+delays+wound+healing+in+a+murine+wound+model.">Matrix metalloproteinase-9 delays wound healing in a murine wound model.</a> Surgery. 147 (2), 295-302 (2010).</li><li>Gill, S. E., Parks, W. 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R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Curcumin+loaded+chitosan+nanoparticles+impregnated+into+collagen-alginate+scaffolds+for+diabetic+wound+healing.">Curcumin loaded chitosan nanoparticles impregnated into collagen-alginate scaffolds for diabetic wound healing.</a> International Journal Of Biological Macromolecules. 93, 1519-1529 (2016).</li><li>Hsieh, W. -. C., Chang, C. -. P., Lin, S. -. 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S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+simplified+method+for+the+analysis+of+hydroxyproline+in+biological+tissues.">A simplified method for the analysis of hydroxyproline in biological tissues.</a> Clinical Biochemistry. 29 (3), 225-229 (1996).</li><li>Charulatha, V., Rajaram, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Influence+of+different+crosslinking+treatments+on+the+physical+properties+of+collagen+membranes.">Influence of different crosslinking treatments on the physical properties of collagen membranes.</a> Biomaterials. 24 (5), 759-767 (2003).</li><li>Rehakova, M., Bako&#353;, D., Vizarova, K., Sold&#225;n, M., Jur&#237;ckov&#225;, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Properties+of+collagen+and+hyaluronic+acid+composite+materials+and+their+modification+by+chemical+crosslinking.">Properties of collagen and hyaluronic acid composite materials and their modification by chemical crosslinking.</a> Journal of Biomedical Materials Research: An Official Journal of The Society for Biomaterials and The Japanese Society for Biomaterials. 30 (3), 369-372 (1996).</li><li>Chang, M. -. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Doxycycline+enhances+survival+and+self-renewal+of+human+pluripotent+stem+cells.">Doxycycline enhances survival and self-renewal of human pluripotent stem cells.</a> Stem Cell Reports. 3 (2), 353-364 (2014).</li><li>Dovi, J. V., He, L. K., DiPietro, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Accelerated+wound+closure+in+neutrophil-depleted+mice.">Accelerated wound closure in neutrophil-depleted mice.</a> Journal of Leukocyte Biology. 73 (4), 448-455 (2003).</li><li>Lindeman, J. H., Abdul-Hussien, H., van Bockel, J. H., Wolterbeek, R., Kleemann, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clinical+Perspective.">Clinical Perspective.</a> Circulation. 119 (16), 2209-2216 (2009).</li><li>Zhang, C., Gong, W., Liu, H., Guo, Z., Ge, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inhibition+of+matrix+metalloproteinase-9+with+low-dose+doxycycline+reduces+acute+lung+injury+induced+by+cardiopulmonary+bypass.">Inhibition of matrix metalloproteinase-9 with low-dose doxycycline reduces acute lung injury induced by cardiopulmonary bypass.</a> International Journal Of Clinical And Experimental Medicine. 7 (12), 4975-4982 (2014).</li></ol>

L'obiettivo principale di questo studio era determinare l'effetto dell'impalcatura COL-CS caricata da DOX sulla guarigione della DW nei ratti. CL e NCL sono stati preparati e valutati in termini di morfologia, indice di gonfiore, cinetica di rilascio in vitro e biocompatibilità.
Caratterizzazione dell'impalcatura NCL e CL caricata da DOX Le impalcature preparate sono state trovate porose con pori interconnessi. Questi pori interconnessi assicurano la natura porosa e spugno...

Il diabete mellito (DM) è una condizione in cui l'incapacità del corpo di fornire insulina o reagire ai suoi esiti nella digestione anomala di zuccheri semplici porta a un aumento della glicemia 1. L'intreccio più consecutivo e schiacciante del DM è la ferita diabetica (DW). Circa il 25% dei pazienti con DM ha l'opportunità di costruire un DW nella loro vita 1. La guarigione ostacolata della DW è accreditata a una triopatia di DM: immunopatia, vasculopatia e neuropatia. Ogni volta che la DW non viene trattata, può provocare lo sviluppo della cancrena, provocando quindi la rimozione dell'organo interessato 2.
Molti trattamenti, come istruire i pazienti (ispezionare la ferita ogni giorno, pulire la ferita, evitare attività che creano pressione sulla ferita, monitoraggio periodico del glucosio, ecc.), controllare la glicemia, debridement delle ferite, scarico della pressione, procedura medica, ossigenoterapia iperbarica e terapie avanzate sono in pratica 3,4. La maggior parte di questi farmaci non affronta tutti i prerequisiti vitali per la cura della DW alla luce delle condizioni patofisiotiche multifattoriali e delle spese impreviste relative a questi farmaci 5. Anche se la patogenesi DW è multifattoriale, l'infiammazione persistente con gestione inappropriata dei tessuti è dichiarata come la vera ragione della guarigione ritardata in DWs 5,6.
I livelli aumentati di mediatori infiammatori e pro-infiammatori in DW si traducono in una diminuzione dei fattori di crescita responsabili della guarigione ritardata delle ferite 2,6. La formazione impropria di matrice extracellulare (ECM) nelle DW è accreditata per l'aumento dei livelli di metalloproteinasi matriciali (MMP) responsabili della rapida degradazione dell'ECM formato. Negli MMP, MMP-9 è segnalato come uno dei principali intermediari responsabili dell'infiammazione prolungata e della rapida degradazione dell'ECM 7. Si afferma che il trattamento locale con un farmaco antinfiammatorio che diminuisce i livelli elevati di MMP-9 rieche stabilisce l'omeostasi cutanea, la disposizione del quadro e richiede una migliore guarigione dei DWs 8,9.
La doxiciclina (DOX), un inibitore dell'MMP-9, è stata scelta per sopprimere i livelli elevati di MMP-9, un importante mediatore infiammatorio responsabile dell'infiammazione persistente in DWs 10,11,12. Inoltre, dox possiede antiossidanti (producono radicali idrossi e fenossidici liberi in grado di legarsi con specie reattive dell'ossigeno) 13 e anti-apoptotico (inibire l'espressione della caspasi e la stabilizzazione mitocondriale) 14 attività essenziali per il trattamento della DW. È stata scelta la disposizione di quadri contenenti DOX, collagene (COL) e chitosano (CS). La scelta del COL dipende dal modo in cui aiuta a fornire il quadro necessario responsabile della resistenza meccanica e della rigenerazione tissutale 15. D'altra parte, CS è strutturalmente omologo al glicosaminoglicano, associato a diverse fasi di guarigione delle ferite. È anche riportato che CS detiene una significativa proprietà antibatterica 15. Pertanto, l'impalcatura COL / CS di DOX è formulata per sopprimere l'infiammazione prolungata, seguita dal supporto della formazione della matrice per una guarigione efficace delle ferite in condizioni di DM.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>1-ethyl-(3-3-dimethyl aminopropyl) carbodiimide hydrochloride (EDC)</td>
			<td>Merck Millipore, Mumbai, India</td>
			<td>E7750</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2-(N-morpholino) ethane sulfonic acid (MES)</td>
			<td>Merck Millipore, Mumbai, India</td>
			<td>137074</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3-(4, 5 dimethyl thiazole-2 yl) -2, 5-diphenyl tetrazolium bromide (MTT)</td>
			<td>Thermo Fisher, Mumbai, India</td>
			<td>M6494</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Deep freezer verticle</td>
			<td>Labline Instruments, Kochi, India</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dialysis sack</td>
			<td>Merck Millipore, Mumbai, India</td>
			<td>D6191-Avg. flat width 25 mm (1.0 in.), MWCO 12,000 Da</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Doxycycline</td>
			<td>Sigma chemicals Co. Ltd, Mumbai, India</td>
			<td>D9891</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Elisa kit</td>
			<td>R&#38;D Systems</td>
			<td>RMP900</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Escherichia coli (E. coli)</td>
			<td>National Collection of Industrial Microorganisms, Pune, India</td>
			<td>NCIM 2567</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol</td>
			<td>Merck Millipore, Mumbai, India</td>
			<td>100983</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lyophilizer-SZ042</td>
			<td>Sub-Zero lab instruments, Chennai, India</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mechanical Stirrer-RQ-122/D</td>
			<td>Remi laboratory instruments, Mumbai, India</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medium molecular weight Chitosan</td>
			<td>Sisco Research Laboratories Pvt. Ltd., Mumbai, India</td>
			<td>18824</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microtome-RM2135</td>
			<td>Leica, U.K</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mouse embryonic fibroblast cells (3T3-L1)</td>
			<td>National Centre for Cell Sciences, Pune, India</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Multiple plate reader -Inifinte M200 Pro</td>
			<td>Tecan Instruments, Switzerland</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>N-hydroxy succinimide (NHS)</td>
			<td>Sigma chemicals Co. Ltd, Mumbai, India</td>
			<td>130672</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pseudomonas aeruginosa (P. aeruginosa)</td>
			<td>National Collection of Industrial Microorganisms, Pune, India</td>
			<td>NCIM 2036</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scanning Electron Microscopy (SEM)-S-4800</td>
			<td>Hitachi, India</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium hydroxide (NaOH) pellets</td>
			<td>Qualigen fine chemicals, Mumbai, India</td>
			<td>Q27815</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Staphylococcus aureus (S. aureus)</td>
			<td>National Collection of Industrial Microorganisms, Pune, India</td>
			<td>NCIM 5022</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Staphylococcus epidermis (S. epidermis)</td>
			<td>National Collection of Industrial Microorganisms, Pune, India</td>
			<td>NCIM 5270</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Streptozotocin (STZ)</td>
			<td>Sisco Research Laboratories Pvt. Ltd., Mumbai, India</td>
			<td>14653</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Type-1 rat Collagen</td>
			<td>Sigma chemicals Co. Ltd, Mumbai, India</td>
			<td>C7661</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultraviolet&#8211;visible spectroscopy-1700</td>
			<td>Shimadzu</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

doxycycline loaded collagen-chitosan composite scaffold for the accelerated healing of diabetic wounds

Una delle principali complicanze del diabete mellito sono le ferite diabetiche (DW). La fase prolungata dell'infiammazione del diabete ostruisce le ulteriori fasi di una lesione che porta a una guarigione ritardata delle ferite. Abbiamo selezionato la doxciclina (DOX), come potenziale farmaco preferito, grazie alle sue proprietà antibatteriche insieme alle sue proprietà antinfiammatorie riportate. L'attuale studio mira a formulare impalcature dox caricate collagene-chitosano non retiche (NCL) e retille (CL) e valutare la loro capacità curativa in condizioni diabetiche. Il risultato della caratterizzazione delle impalcature rivela che l'impalcatura DOX-CL ha una porosità ideale, un basso tasso di gonfiore e degradazione e un rilascio prolungato di DOX rispetto all'impalcatura DOX-NCL. Gli studi in vitro rivelano che l'impalcatura DOX-CL era biocompatibile e ha migliorato la crescita cellulare rispetto ai gruppi di impalcatura e controllo CL. Gli studi antibatterici hanno dimostrato che l'impalcatura DOX-CL era più efficace dell'impalcatura CL contro i batteri più comuni trovati in DW. Utilizzando il modello di DW indotto dalla dieta streptozotocina e ad alto contenuto di grassi, è stato osservato un tasso significativamente (p≤0,05) più veloce di contrazione della ferita nel gruppo trattato con impalcature DOX-CL rispetto a quelli nei gruppi di impalcatura e controllo CL. L'uso dell'impalcatura DOX-CL può rivelarsi un approccio promettente per il trattamento locale per le DW.

Caratterizzazione dell'impalcatura NCL e CL caricata da DOX All'esame visivo, l'impalcatura NCL e CL è stata trovata di colore crema. Inoltre, entrambe le impalcature sembrano essere come una spugna, rigida e anelastica se esaminate fisicamente. Le immagini SEM delle impalcature NCL e CL sono mostrate nella figura 1. Dalla figura, era chiaro che c'era una diminuzione delle dimensioni dei pori dopo il collegamento incrociato formando collegamenti intermolecolari. Inoltre,...

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Doxycycline Loaded Collagen-Chitosan Composite Scaffold for the Accelerated Healing of Diabetic Wounds

L'impalcatura DOX-CL preparata soddisfaceva i prerequisiti di una medicazione DW ideale in resistenza meccanica, porosità, assorbimento dell'acqua, tasso di degradazione, rilascio prolungato, proprietà antibatteriche, biocompatibilità e antinfiammatorie, che sono considerate essenziali per il recupero del tessuto danneggiato nei DW.

Impalcatura composita collagene-chitosano caricata di doxiciclina per la guarigione accelerata delle ferite diabetiche

One major complication of diabetes mellitus is diabetic wounds (DW). The prolonged phase of inflammation in diabetes obstructs the further stages of an ...

L'attuale lavoro di ricerca sono impalcature composite collagene-chitosano cariche di doxiciclina per la guarigione accelerata delle ferite diabetiche. Il diabete è una malattia metabolica cronica caratterizzata da elevati livelli di glucosio nel sangue. Più a lungo l'individuo ha il diabete, maggiore è il rischio di complicanze, come malattie cardiovascolari, nefropatia, neuropatia, retinopatia e danni ai piedi, eccetera.Il danno nervoso ai piedi e anche lo scarso flusso sanguigno ai piedi aumentano il rischio di varie complicazioni del piede. Se non trattate, queste ferite possono richiedere alla fine amputazioni delle dita dei piedi, del piede o delle gambe. All'incirca, il 25% dei pazienti con diabete mellito ha l'opportunità di accumulare una ferita diabetica nel corso della loro vita.La gestione terapeutica delle ferite diabetiche rimane un ostacolo che deve essere superato alla fine. Anche se la fisiopatologia della ferita diabetica è multifattoriale, si ritiene che il trattamento locale con farmaci antinfiammatori potrebbe ridurre gli elevati livelli di MMP-9 e ristabilire la disposizione del quadro dell'omeostasi cutanea e provoca la guarigione nelle ferite diabetiche. La doxiciclina, l'inibitore dell'MMP-9, è stata scelta in questo studio per sopprimere questi elevati livelli di MMP-9, una delle principali molecole infiammatorie responsabili della continua infiammazione delle ferite diabetiche.D'altra parte, i biomateriali hanno affascinato gli esseri umani per diversi decenni e sono stati al centro di molte scoperte mediche rivoluzionarie per la somministrazione efficiente di farmaci e macromolecolari e lo sviluppo di dispositivi biomedici su misura. Quindi, con questa breve introduzione, abbiamo preparato un'impalcatura collagene-chitosano caricata di doxiciclina per attenuare, per accelerare la guarigione ritardata nelle ferite diabetiche. Questo è Bharat Kumar Reddy, ricercatore del Dipartimento di Farmacologia, JSS College of Pharmacy, Ooty, India.Oggi siamo qui per esaminare la procedura, come preparare l'impalcatura collagene-chitosano caricata di doxiciclina per la guarigione accelerata delle ferite diabetiche. Diamo un'occhiata alla procedura, come prepararci. Prepareremo l'1,2% della soluzione di collagene, per la quale stiamo assumendo 1,2 grammi di collagene di tipo I, che proviene dall'origine della coda del ratto.A questo, stiamo aggiungendo 100 ml di acqua di Millipore e l'abbiamo tenuta da parte per mezz'ora per consentire al collagene di rigonfiarsi in acqua. Nella fase successiva è stato preparato lo 0,8% della soluzione di chitosano, per la quale stiamo assumendo 0,8 grammi di chitosano di peso molecolare medio, che è stato mescolato con 100 ml di acido acetico all'1%. Anche questa soluzione ci siamo tenuti da parte per mezz'ora.Dopo mezz'ora, entrambe le soluzioni sono state sottoposte a agitazione meccanica durante la notte ad un rpm del 2000. Alla soluzione di collagene mescolato durante la notte stiamo lentamente aggiungendo un grammo di doxiciclina. E la soluzione contenente questo collagene e doxiciclina è stata sottoposta per mezz'ora di agitazione ad un rpm del 2000.A questa soluzione stiamo lentamente aggiungendo una soluzione chitosan stimolata durante la notte. E questo, assicuratevi che sia etichettato come miscela fisica che contiene doxiciclina, collagene, chitosano. Questa miscela fisica che abbiamo sottoposto per un'altra mezz'ora di agitazione ad un rpm del 2000.Dopo mezz'ora queste miscele fisiche sono state trasferite nei rispettivi stampi in alluminio, che ha una dimensione di due in due centimetri e uno spessore di 0,5 centimetri. Più tardi, questi stampi furono trasferiti in un contenitore di metallo. Questi contenitori metallici erano contenenti gli stampi in alluminio, sono stati sottoposti a congelamento profondo.Dopo 24 ore, possiamo vedere chiaramente la miscela fisica solidificata contenente doxiciclina, collagene e chitosano. Queste miscele fisiche solidificate sono state ulteriormente sottoposte a litofilia. La lëfilizzazione è stata eseguita a meno 85 gradi più o meno quattro gradi Celsius per 72 ore.Dopo 72 ore, il materiale licofilizzato è stato prelevato dal licofilizzatore. E qui possiamo vedere chiaramente la miscela fisica completamente essiccata, che non è altro che nota come impalcatura collagene-chitosano carica di doxiciclina. Queste impalcature sono state sottoposte a reti incrociate Al fine di eseguire il crosslinking, inizialmente, il buffer MES è stato preparato prelevando 0,488 grammi di MES e 15 ml di acqua, da cui stiamo esingendo 20 ml di tampone MES e trasferendo separatamente nel becher.A questi 20 ml di becher sono stati aggiunti 50 mg di collagene-chitosano caricato con doxiciclina. E l'ammollo di questa impalcatura è stato eseguito per mezz'ora. Dopo mezz'ora, l'impalcatura collagene-chitosano caricata di doxiciclina è stata prelevata dal tampone MES da 20 ml.Inoltre, è stato immerso in una soluzione contenente 19,5 ml di tampone MES, 0,1264 grammi di EDC e 0,014 grammi di NHS. L'ammollo è stato eseguito per quattro ore di intervallo di tempo per il completamento del crosslinking. Dopo il crosslinking, l'impalcatura collagene-chitosano caricata con doxiciclina incrociata è stata prelevata dalla soluzione e trasferita in un contenitore, che è stato dettagliato nella procedura precedente, ed è stata asciugata separatamente.Qui possiamo vedere chiaramente l'impalcatura non reticorata e retittata, insieme alle stesse immagini. Dalle immagini è chiaro che il collegamento incrociato dell'impalcatura ha comportato una diminuzione delle dimensioni dei pori a causa della formazione di forti legami intramolecolari. Il ratto Wistar maschio è stato preso e il segno dei due centimetri è stato disegnato sulla regione toracica dorsale.La ferita da escissione è stata creata intorno al marchio e il tracciamento della ferita è stato preso su un foglio OHP. La traccia della ferita è stata misurata con l'aiuto di un metodo grafico. La ferita creata sull'animale era di circa 176 mm.Successivamente, la ferita creata è stata trattata con impalcatura collagene-chitosano caricata con reticeria retitica e monitorata per 21 giorni. Una volta che l'animale è stato recuperato dall'anestesia, ogni animale è stato in gabbia individualmente. E questi animali sono stati nutriti con dieta e acqua normali.Tutti gli animali, dopo aver creato la ferita, sono stati divisi in tre gruppi in cui ogni gruppo conteneva sei animali. Qui possiamo vedere chiaramente la differenza tra zero giorno e sette giorni in cui la riduzione della ferita da impalcatura reticata caricata di doxiciclina era di circa il 48%E in questa immagine possiamo vedere chiaramente la differenza tra il giorno 14 e il giorno. 21 di tutti i gruppi in cui l'impalcatura reticata di collagene caricata da doxiciclina è stata guarita intorno al 99%L'area guarita è stata isolata e lavorata per studi istopologici con l'aiuto della colorazione HMB. Qui possiamo vedere chiaramente l'epidermide reepithelizzata, il giorno 21, nell'impalcatura chitosa di collagene caricata di doxiciclina.Mentre nel controllo e nell'impalcatura incrociata, nient'altro che placebo, doveva ancora formare l'epidermide. Come il nostro studio, le impalcature incrociate in doxiciclina preparate hanno mostrato molte proprietà ideali, come una buona resistenza meccanica, biocompatibilità, assorbimento prolungato dell'acqua a rilascio, insieme a proprietà antibatteriche e antinfiammatorie. Queste impalcature possono essere una forma dosis ideale per il trattamento delle ferite diabetiche.

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