Name: doxycycline loaded collagen-chitosan composite scaffold for the accelerated healing of diabetic wounds
Uploaded: 2021-08-21T14:00:00
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著者らはアシシュ・D・ワドワニ博士に感謝する。(インド・ウーティ薬学部薬学院薬学院薬学科薬学科助教授・部長) 
著者らは、ニューデリーの大学および高等教育機関(DST-FIST)の科学技術インフラ改善基金である科学技術省が私たちの部門を支援してくれたことに感謝したいと考えています。
著者はまた、三十氏に感謝したいと思っています。Sとスリラムさん。ビデオ撮影で彼らのサポートのためのナルクラM.ファームの学生。
この研究は、JSS高等教育研究アカデミー(JSSAHER)によって支援されました。

実行されたすべての動物の手順は、JSS薬科大学の制度的動物倫理委員会によって承認されました, ウーティ, インド.
1. 凍結乾燥法によるDOX搭載多孔性足場の調製
<ol><li>100mLの水(例えば、ミリポア)に1.2gのCOLを加え、腫れのために脇に置きます。</li>
	<li>腫れたCOL分散液を一晩2000rpmで撹拌し、COLの完全な溶解を確実にします。</li>
	<li>1%酢酸の100 mLに約0.8gのCSを溶解して、C...

<ol>
	<li>. IDF Diabetes Atlas, 9th edn Available from: <a target="_blank" href="https://www.diabetesatlas.org">https://www.diabetesatlas.org</a> (2019)</li><li>Falanga, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Wound+healing+and+its+impairment+in+the+diabetic+foot.">Wound healing and its impairment in the diabetic foot.</a> The Lancet. 366 (9498), 1736-1743 (2005).</li><li>Frykberg, R. G., Banks, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Challenges+in+the+treatment+of+chronic+wounds.">Challenges in the treatment of chronic wounds.</a> Advances in Wound Care. 4 (9), 560-582 (2015).</li><li>Alexiadou, K., Doupis, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Management+of+diabetic+foot+ulcers.">Management of diabetic foot ulcers.</a> Diabetes Therapy. 3 (1), 1-15 (2012).</li><li>Karri, V. V. S. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Current+and+emerging+therapies+in+the+management+of+diabetic+foot+ulcers.">Current and emerging therapies in the management of diabetic foot ulcers.</a> Current Medical Research and Opinion. 32 (3), 519-542 (2016).</li><li>Sanapalli, B. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+beta+defensins+may+be+a+multifactorial+modulator+in+the+management+of+diabetic+wound.">Human beta defensins may be a multifactorial modulator in the management of diabetic wound.</a> Wound Repair and Regeneration. 28 (3), 416-421 (2020).</li><li>Caley, M. P., Martins, V. L., O'Toole, E. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Metalloproteinases+and+wound+healing.">Metalloproteinases and wound healing.</a> Advances in Wound Care. 4 (4), 225-234 (2015).</li><li>Reiss, M. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Matrix+metalloproteinase-9+delays+wound+healing+in+a+murine+wound+model.">Matrix metalloproteinase-9 delays wound healing in a murine wound model.</a> Surgery. 147 (2), 295-302 (2010).</li><li>Gill, S. E., Parks, W. 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M., Carvalho, E., de Sousa, H. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recent+advances+on+the+development+of+wound+dressings+for+diabetic+foot+ulcer+treatment-a+review.">Recent advances on the development of wound dressings for diabetic foot ulcer treatment-a review.</a> Acta Biomaterialia. 9 (7), 7093-7114 (2013).</li><li>Natarajan, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nanostructured+Lipid+Carriers+of+Pioglitazone+Loaded+Collagen/Chitosan+Composite+Scaffold+for+Diabetic+Wound+Healing.">Nanostructured Lipid Carriers of Pioglitazone Loaded Collagen/Chitosan Composite Scaffold for Diabetic Wound Healing.</a> Advances in Wound Care. 8 (10), 499-513 (2019).</li><li>Karri, V. V. S. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Curcumin+loaded+chitosan+nanoparticles+impregnated+into+collagen-alginate+scaffolds+for+diabetic+wound+healing.">Curcumin loaded chitosan nanoparticles impregnated into collagen-alginate scaffolds for diabetic wound healing.</a> International Journal Of Biological Macromolecules. 93, 1519-1529 (2016).</li><li>Hsieh, W. -. C., Chang, C. -. P., Lin, S. -. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Morphology+and+characterization+of+3D+micro-porous+structured+chitosan+scaffolds+for+tissue+engineering.">Morphology and characterization of 3D micro-porous structured chitosan scaffolds for tissue engineering.</a> Colloids and Surfaces B: Biointerfaces. 57 (2), 250-255 (2007).</li><li>Xie, Y., Chen, J., Xiao, A., Liu, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Antibacterial+activity+of+polyphenols:+structure-activity+relationship+and+influence+of+hyperglycemic+condition.">Antibacterial activity of polyphenols: structure-activity relationship and influence of hyperglycemic condition.</a> Molecules. 22 (1913), 1-11 (2017).</li><li>Geerlings, S. E., Brouwer, E. C., Gaastra, W., Verhoef, J., Hoepelman, A. 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S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+simplified+method+for+the+analysis+of+hydroxyproline+in+biological+tissues.">A simplified method for the analysis of hydroxyproline in biological tissues.</a> Clinical Biochemistry. 29 (3), 225-229 (1996).</li><li>Charulatha, V., Rajaram, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Influence+of+different+crosslinking+treatments+on+the+physical+properties+of+collagen+membranes.">Influence of different crosslinking treatments on the physical properties of collagen membranes.</a> Biomaterials. 24 (5), 759-767 (2003).</li><li>Rehakova, M., Bako&#353;, D., Vizarova, K., Sold&#225;n, M., Jur&#237;ckov&#225;, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Properties+of+collagen+and+hyaluronic+acid+composite+materials+and+their+modification+by+chemical+crosslinking.">Properties of collagen and hyaluronic acid composite materials and their modification by chemical crosslinking.</a> Journal of Biomedical Materials Research: An Official Journal of The Society for Biomaterials and The Japanese Society for Biomaterials. 30 (3), 369-372 (1996).</li><li>Chang, M. -. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Doxycycline+enhances+survival+and+self-renewal+of+human+pluripotent+stem+cells.">Doxycycline enhances survival and self-renewal of human pluripotent stem cells.</a> Stem Cell Reports. 3 (2), 353-364 (2014).</li><li>Dovi, J. V., He, L. K., DiPietro, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Accelerated+wound+closure+in+neutrophil-depleted+mice.">Accelerated wound closure in neutrophil-depleted mice.</a> Journal of Leukocyte Biology. 73 (4), 448-455 (2003).</li><li>Lindeman, J. H., Abdul-Hussien, H., van Bockel, J. H., Wolterbeek, R., Kleemann, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clinical+Perspective.">Clinical Perspective.</a> Circulation. 119 (16), 2209-2216 (2009).</li><li>Zhang, C., Gong, W., Liu, H., Guo, Z., Ge, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inhibition+of+matrix+metalloproteinase-9+with+low-dose+doxycycline+reduces+acute+lung+injury+induced+by+cardiopulmonary+bypass.">Inhibition of matrix metalloproteinase-9 with low-dose doxycycline reduces acute lung injury induced by cardiopulmonary bypass.</a> International Journal Of Clinical And Experimental Medicine. 7 (12), 4975-4982 (2014).</li></ol>

本研究の主な目的は、ラットのDW治癒に対するDOX装填されたCOL-CS足場の効果を決定することであった。CLおよびNCLは、形態、腫脹指数、生体外放出動態、および生体適合性の観点から調製および評価した。
DOX ロードされた NCL および CL スキャフォールドの特性 準備された足場は、相互接続された細孔を有する多孔質であることが判明した。これらの相互接...

糖尿病(DM)は、体がインスリンを送達したり、単純な糖の異常な消化でその結果に反応しなかった場合に血糖値 1の上昇をもたらす状態である。DMの最も連続した破砕絡み合いは、糖尿病創傷(DW)である。DM患者のおよそ25%は、寿命 1でDWを構築する機会を持っています。DWの妨げ癒しはDMのトリオパシーに認定されている:免疫障害、血管障害、および神経障害。DWが治療を受けずに放置されると、壊疽の発症が生じ、その結果、関係する器官 2の除去を促す。
患者に指示するなど、多くの治療(創傷を毎日検査し、傷を浄化し、創傷に圧力をかける活動、定期的なグルコースモニタリングなどを避ける)、血糖値、創傷脱除剤、圧力オフロード、医療処置、高圧酸素療法、および高度な治療法を制御する。これらの薬の大半は、多因子性病態生理学的状態とこれらの薬に関連する予期せぬ費用に照らしてDWケアに不可欠なすべての前提条件に対処することができません5.DWの病因は多因子性であるが、不適当な組織管理を伴う持続的な炎症は、DW5,6における治癒遅延の実際の理由であると述べられている。
DWにおける炎症性および炎症促進メディエーターの増強レベルは、遅延創傷治癒を担う成長因子の減少をもたらす2,6.DWにおける不適切な細胞外マトリックス(ECM)形成は、形成されたECMの急速な分解に対して責任を負うマトリックスメタロプロテイナーゼ(MMP)のレベルの増加に認定されています。MMPでは、MMP-9は、炎症の長期化および急速なECM劣化7を担う主要な仲介者として報告されている。MMP-9の上昇レベルを低下させる抗炎症薬による局所治療は、皮内恒常性を再確立し、フレームワークの配置およびDAW8、9のより良い治癒を促す。
ドキシサイクリン(DOX)は、MMP-9阻害剤であり、DW10、11、12における持続的な炎症を引き起こす主要な炎症性メディケーターであるMMP-9の上昇レベルを抑制するために選択された。さらに、DOXは、抗酸化剤(活性酸素種と結合し得る遊離ヒドロキシおよびフェノキシラジカルを産生する)13および抗アポトーシス(カスパーゼ発現およびミトコンドリア安定化を阻害する)14の活性を有する。DOX、コラーゲン(COL)、キトサン(CS)を含むフレームワークの配置を選択した。COLの選択は、機械的強度と組織再生15に必要なフレームワークを提供するのに役立つ方法に依存します。一方、CSは、構造的にグリコサミノグリカンに相同であり、いくつかの創傷治癒相と関連している。CSは重要な抗菌性を有する15を有することも報告されている。したがって、DOXのCOL/CS足場は、長時間の炎症を抑制するために処方され、続いてDM条件での創傷治癒に成功するためのマトリックス形成を支持する。

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>1-ethyl-(3-3-dimethyl aminopropyl) carbodiimide hydrochloride (EDC)</td>
			<td>Merck Millipore, Mumbai, India</td>
			<td>E7750</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2-(N-morpholino) ethane sulfonic acid (MES)</td>
			<td>Merck Millipore, Mumbai, India</td>
			<td>137074</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3-(4, 5 dimethyl thiazole-2 yl) -2, 5-diphenyl tetrazolium bromide (MTT)</td>
			<td>Thermo Fisher, Mumbai, India</td>
			<td>M6494</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Deep freezer verticle</td>
			<td>Labline Instruments, Kochi, India</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dialysis sack</td>
			<td>Merck Millipore, Mumbai, India</td>
			<td>D6191-Avg. flat width 25 mm (1.0 in.), MWCO 12,000 Da</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Doxycycline</td>
			<td>Sigma chemicals Co. Ltd, Mumbai, India</td>
			<td>D9891</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Elisa kit</td>
			<td>R&#38;D Systems</td>
			<td>RMP900</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Escherichia coli (E. coli)</td>
			<td>National Collection of Industrial Microorganisms, Pune, India</td>
			<td>NCIM 2567</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol</td>
			<td>Merck Millipore, Mumbai, India</td>
			<td>100983</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lyophilizer-SZ042</td>
			<td>Sub-Zero lab instruments, Chennai, India</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mechanical Stirrer-RQ-122/D</td>
			<td>Remi laboratory instruments, Mumbai, India</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medium molecular weight Chitosan</td>
			<td>Sisco Research Laboratories Pvt. Ltd., Mumbai, India</td>
			<td>18824</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microtome-RM2135</td>
			<td>Leica, U.K</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mouse embryonic fibroblast cells (3T3-L1)</td>
			<td>National Centre for Cell Sciences, Pune, India</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Multiple plate reader -Inifinte M200 Pro</td>
			<td>Tecan Instruments, Switzerland</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>N-hydroxy succinimide (NHS)</td>
			<td>Sigma chemicals Co. Ltd, Mumbai, India</td>
			<td>130672</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pseudomonas aeruginosa (P. aeruginosa)</td>
			<td>National Collection of Industrial Microorganisms, Pune, India</td>
			<td>NCIM 2036</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scanning Electron Microscopy (SEM)-S-4800</td>
			<td>Hitachi, India</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium hydroxide (NaOH) pellets</td>
			<td>Qualigen fine chemicals, Mumbai, India</td>
			<td>Q27815</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Staphylococcus aureus (S. aureus)</td>
			<td>National Collection of Industrial Microorganisms, Pune, India</td>
			<td>NCIM 5022</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Staphylococcus epidermis (S. epidermis)</td>
			<td>National Collection of Industrial Microorganisms, Pune, India</td>
			<td>NCIM 5270</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Streptozotocin (STZ)</td>
			<td>Sisco Research Laboratories Pvt. Ltd., Mumbai, India</td>
			<td>14653</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Type-1 rat Collagen</td>
			<td>Sigma chemicals Co. Ltd, Mumbai, India</td>
			<td>C7661</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultraviolet&#8211;visible spectroscopy-1700</td>
			<td>Shimadzu</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

doxycycline loaded collagen-chitosan composite scaffold for the accelerated healing of diabetic wounds

糖尿病の大きな合併症の1つは糖尿病性創傷(DW)です。糖尿病の炎症の長期段階は、遅延創傷治癒につながる傷害のさらなる段階を妨げる。我々は、その報告された抗炎症特性と共に、その抗菌特性のために、選択の潜在的な薬物として、ドキシサイクリン(DOX)を選択した。現在の研究は、DOXに装填されたコラーゲンキトサン非架橋(NCL)および架橋(CL)足場を処方し、糖尿病状態での治癒能力を評価することを目的としています。足場の特徴付け結果は、DOX-CL足場が理想的な空隙率、低い腫脹及び分解率、およびDOXの持続的な放出をDOX-NCL足場と比較して保持することを明らかにする。 in vitro 研究は、DOX-CL足場がCL足場処理および対照群と比較して生体適合性および増強細胞増殖であることを明らかにした。抗菌研究は、DOX-CL足場がDWで見つかった最も一般的な細菌に対するCL足場よりも効果的であったことを示している。ストレプトゾトシンおよび高脂肪食誘導DWモデルを用いて、DOX-CL足場処理群における創傷収縮率が有意に(p≤0.05)より速く、CL足場処理および対照群のものと比較して観察された。DOX-CL足場の使用は、DWの局所治療のための有望なアプローチであることが証明できる。

DOX ロードされた NCL および CL スキャフォールドの特性 目視検査では、NCLとCL足場は色のクリームであることが判明した。また、両方の足場は、物理的に調べるとスポンジのように見え、硬く、弾力性があります。図 1に、NCL および CL スキャフォールドの SEM イメージを示します。この図から、分子間結合を形成して架橋した後の孔径の減少があったこと?...

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Doxycycline Loaded Collagen-Chitosan Composite Scaffold for the Accelerated Healing of Diabetic Wounds

調製されたDOX-CL足場は、機械的強度、多孔性、吸水性、分解速度、持続放出、抗菌、生体適合性、および抗炎症特性における理想的なDWドレッシングの前提条件を満たし、これは、DWの損傷した組織の回復に不可欠であると考えられる。

糖尿病性創傷の加速治癒のためのドキシサイクリン装填されたコラーゲン-キトサン複合足場

One major complication of diabetes mellitus is diabetic wounds (DW). The prolonged phase of inflammation in diabetes obstructs the further stages of an ...

現在の研究は、糖尿病性創傷の加速治癒のためのドキシサイクリン装填されたコラーゲンキトサン複合足場である。糖尿病は、血糖のレベルの上昇を特徴とする慢性代謝疾患である。糖尿病を持つ時間が長ければ長いほど、心血管疾患、腎症、神経障害、網膜症、足の損傷などの合併症のリスクが高くなります。足の神経損傷と足への血流の悪さは、様々な足の合併症のリスクを高めます。放置すると、これらの傷は最終的に足の先、足、または脚の切断を必要とします。およそ、糖尿病患者25%は、生涯に糖尿病性創傷を蓄積する機会を有する。糖尿病性創傷の治療管理は、最終的に交差する必要があるこれまでのハードルのままです。糖尿病性創傷の病態生理は多因子性であるが、抗炎症薬による局所治療はMMP-9の上昇レベルを低下させ、皮恒常性フレームワークの配置を再確立し、糖尿病性創傷の治癒を促す可能性があると考えられている。MMP-9阻害剤であるドキシサイクリンは、糖尿病創傷の炎症を続ける主要な炎症性分子であるMMP-9のこれらの上昇レベルを抑制するために、この研究で選ばれました。一方、生体材料は数十年にわたり人間を魅了し、効率的な薬物および高分子送達とオーダーメイドの生物医学装置の開発のための多くのゲームを変える医療ブレークスルーの中核をなしてきました。そこで、この簡単な導入により、糖尿病性創傷の治癒遅延を加速させるために、ドキシサイクリンを装填したコラーゲンキトサン足場を調製しました。インドのウーティにあるJSS薬学部薬剤学科の研究学者、バラト・クマール・レディです。今日、私たちは、糖尿病性創傷の加速治癒のためのドキシサイクリンロードコラーゲンキトサン足場を準備する方法、手順を調べたい。手順、準備方法を垣間見てみましょう。ラットの尾由来の1.2gのタイプIコラーゲンを摂取するコラーゲン溶液を1.2%用意します。これに、100mlのミリポア水を加え、コラーゲンが水に膨らませることができるように30分間脇に置いています。次のステップでは、0.8%のキトサン溶液を調製し、そこで0.8グラムの中分子量キトサンを摂取し、これを100mlの1%酢酸と混合した。このソリューションも、30分間は脇に置いています。30分後、両溶液は2000年のRPMで一晩機械的撹拌を行った。一晩攪拌コラーゲン溶液に、我々はゆっくりとドキシサイクリンの1グラムを追加しています。そして、このコラーゲンとドキシサイクリンを含む溶液を、2000年のRPMで30分間撹拌した。この溶液に我々はゆっくりと一晩攪拌キトサン溶液を加えている。そして、これは、ドキシサイクリン、コラーゲン、キトサンを含む物理的な混合物としてラベル付けされていることを確認してください。この物理的な混合物は、我々は2000年のRPMで攪拌の別の30分のために行った。30分後、これらの物理的混合物は、2センチメートルに2の寸法と0.5センチメートルの厚さを有するそれぞれのアルミニウム型に移された。その後、これらの金型を金属容器に移した。これらの金属容器はアルミニウムモールドを含有し、深い凍結を行った。24時間後、ドキシサイクリン、コラーゲン、キトサンを含む固化した物理的混合物をはっきりと見ることができます。これらの固化した物理的混合物は、さらに凍結乾燥のために行った。凍結乾燥は72時間マイナス85度プラスマイナス4度で行った。72時間後、凍結乾燥物質を凍結乾燥剤から取り出した。そして、ここでは、ドキシサイクリンを装填したコラーゲンキトサン足場として知られている完全に乾燥した物理的な混合物を明確に見ることができます。これらの足場は架橋を行うために架橋するために施され、最初は、MESバッファーを0.488グラムのMESと15mlの水を摂取して調製し、そこから20mlのMESバッファーを取り出し、ビーカーに別々に移す。これら20mlのビーカーに、50mgのドキシサイクリンを装填したコラーゲンキトサンを加えた。そして、この足場の浸漬は30分間行われました。30分後、ドキシサイクリンを装填したコラーゲンキトサン足場を20mlMES緩衝液から取り出した。また、19.5 mlのMESバッファー、0.1264グラムのEDC、および0.014グラムのNHSを含む溶液に浸漬した。この浸漬は、架橋の完了のために4時間の時間間隔で行った。架橋後、架橋したドキシサイクリンを溶液から取り出したコラーゲンキトサン足場を取り出し、容器に移し、前の手順で詳述し、別に乾燥させた。ここでは、同じ画像と一緒に、非架橋および架橋された足場をはっきりと見ることができます。画像からは、足場の架橋が強い分子内結合の形成による孔サイズの減少をもたらしたことが明らかである。雄のウィスターラットを採取し、2匹を2センチメートルのマークに引き込んだ。切除創傷はマークの周りに作成され、創傷の追跡はOHPシート上に取られた。創傷の痕跡は、グラフィカルな方法の助けを借りて測定した。動物に作成された創傷は約176ミリメートルでした。その後、作成された創傷を、一次ドレッシングで架橋ドキシサイクリンを装填したコラーゲンキトサン足場で治療し、21日間監視した。動物が麻酔から回収されると、各動物は個別にケージに入れられた。そして、これらの動物は、通常の食事と水を与えられました。すべての動物は、創傷を作成した後、各群に6匹の動物を含む3つのグループに分けられた。ここでは、ドキシサイクリンが架橋された足場の創傷減少率が約48%であったゼロ日と7日の違いをはっきりと見ることができ、この画像では、ドキシサイクリンを装填したコラーゲン架橋足場が99%前後で治癒したすべてのグループの14日目と21日目の違いをはっきりと見ることができます。ここでは、21日目に、ドキシサイクリンにロードされたコラーゲンキトサン足場で、再エピゼン化された表皮をはっきりと見ることができます。対照および架橋足場では、プラセボ以外の何物でもなく、表皮を形成しなければならなかった。私たち自身の研究と同様に、調製されたドキシサイクリン架橋足場は、抗菌および抗炎症特性と共に、良好な機械的強度、生体適合性、持続的な放出吸水性、などの多くの理想的な特性を示しています。これらの足場は、糖尿病性創傷の治療に理想的なドシス形態であり得る。

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Constructing a Collagen Hydrogel for the Delivery of Stem Cell-loaded Chitosan Microspheres

幹細胞にロードされたキトサンミクロスフェアの配信のためにコラーゲンハイドロゲルの構築

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組織工学：層状細胞シートの送達のための多細胞3D足場の構築

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生体分子の時間的に制御された放出のための界面高分子電解質繊維の複合足場

Various scaffolds used in tissue engineering require a controlled biochemical environment to mimic the physiological cell niche. Interfacial ...

Fabrication of Inverted Colloidal Crystal Poly(ethylene glycol) Scaffold: A Three-dimensional Cell Culture Platform for Liver Tissue Engineering

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肝組織工学のための三次元細胞培養プラットフォーム：逆コロイド結晶ポリ（エチレングリコール）足場の作製

The ability to maintain hepatocyte function in vitro, for the purpose of testing xenobiotics&#39; cytotoxicity, studying virus infection and developing ...

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A Net Mold-based Method of Scaffold-free Three-Dimensional Cardiac Tissue Creation

スキャフォールド フリー三次元心筋組織構築純金型ベース方式

This protocol describes a novel and easy net mold-based method to create three-dimensional (3-D) cardiac tissues without additional scaffold material. ...

Fabrication of the Composite Regenerative Peripheral Nerve Interface (C-RPNI) in the Adult Rat

Fabrication of the Composite Regenerative Peripheral Nerve Interface C-RPNI in the Adult Rat

成体ラットにおける複合再生性末梢神経インタフェース(C-RPNI)の作製

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