Name: analysis of cerebral vasospasm in a murine model of subarachnoid hemorrhage with high frequency transcranial duplex ultrasound
Uploaded: 2021-06-03T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Analysis of Cerebral Vasospasm in a Murine Model of Subarachnoid Hemorrhage with High Frequency Transcranial Duplex Ultrasound at JoVE.com

ويود المؤلفان أن يشكرا ستيفان كيندل على إعداد الرسوم التوضيحية في الفيديو. وقد تم دعم PW وMM وSHK من قبل الوزارة الاتحادية الألمانية للتعليم والبحث (BMBF 01EO1503). وقد تم دعم العمل بمنحة كبيرة للأجهزة من مؤسسة البحوث الألمانية (DFG INST 371/47-1 FUGG). وقد تم دعم MM بمنحة من ال Else Kröner-Fresenius-Stiftung (2020_EKEA.144).

تمت الموافقة على التجارب الحيوانية من قبل لجنة رعاية الحيوان المسؤولة (Landesuntersuchungsamt راينلاند-بفالز) وأجريت وفقا لقانون رعاية الحيوان الألماني (TierSchG). واتبعت جميع المبادئ التوجيهية الدولية والوطنية والمؤسسية المعمول بها لرعاية الحيوانات واستخدامها. في هذه الدراسة، قمنا بإجراء قياسات لسر?...

<ol>
	<li>Macdonald, R. L., Schweizer, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spontaneous+subarachnoid+haemorrhage.">Spontaneous subarachnoid haemorrhage.</a> Lancet. 389 (10069), 655-666 (2017).</li><li>Macdonald, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Delayed+neurological+deterioration+after+subarachnoid+haemorrhage.">Delayed neurological deterioration after subarachnoid haemorrhage.</a> Nature Reviews Neurology. 10 (1), 44-58 (2014).</li><li>Francoeur, C. L., Mayer, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Management+of+delayed+cerebral+ischemia+after+subarachnoid+hemorrhage.">Management of delayed cerebral ischemia after subarachnoid hemorrhage.</a> Critical Care. 20 (1), 277 (2016).</li><li>van Lieshout, J. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+introduction+to+the+pathophysiology+of+aneurysmal+subarachnoid+hemorrhage.">An introduction to the pathophysiology of aneurysmal subarachnoid hemorrhage.</a> Neurosurgical Review. , (2017).</li><li>Altay, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+method+for+subarachnoid+hemorrhage+to+induce+vasospasm+in+mice.">A novel method for subarachnoid hemorrhage to induce vasospasm in mice.</a> J Neurosci Methods. 183 (2), 136-140 (2009).</li><li>Momin, E. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Controlled+delivery+of+nitric+oxide+inhibits+leukocyte+migration+and+prevents+vasospasm+in+haptoglobin+2-2+mice+after+subarachnoid+hemorrhage.">Controlled delivery of nitric oxide inhibits leukocyte migration and prevents vasospasm in haptoglobin 2-2 mice after subarachnoid hemorrhage.</a> Neurosurgery. 65 (5), 937-945 (2009).</li><li>Froehler, M. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vasospasm+after+subarachnoid+hemorrhage+in+haptoglobin+2-2+mice+can+be+prevented+with+a+glutathione+peroxidase+mimetic.">Vasospasm after subarachnoid hemorrhage in haptoglobin 2-2 mice can be prevented with a glutathione peroxidase mimetic.</a> Journal of Clinical Neuroscience. 17 (9), 1169-1172 (2010).</li><li>Provencio, J. J., Altay, T., Smithason, S., Moore, S. K., Ransohoff, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Depletion+of+Ly6G/C(+)+cells+ameliorates+delayed+cerebral+vasospasm+in+subarachnoid+hemorrhage.">Depletion of Ly6G/C(+) cells ameliorates delayed cerebral vasospasm in subarachnoid hemorrhage.</a> Journal of Neuroimmunology. 232 (1-2), 94-100 (2011).</li><li>Kamp, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+a+murine+single-blood-injection+SAH+model.">Evaluation of a murine single-blood-injection SAH model.</a> PLoS One. 9 (12), 114946 (2014).</li><li>Luh, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Contractile+Apparatus+Is+Essential+for+the+Integrity+of+the+Blood-Brain+Barrier+After+Experimental+Subarachnoid+Hemorrhage.">The Contractile Apparatus Is Essential for the Integrity of the Blood-Brain Barrier After Experimental Subarachnoid Hemorrhage.</a> Translational Stroke Research. , (2018).</li><li>Neulen, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Volumetric+Method+for+Quantification+of+Cerebral+Vasospasm+in+a+Murine+Model+of+Subarachnoid+Hemorrhage.">A Volumetric Method for Quantification of Cerebral Vasospasm in a Murine Model of Subarachnoid Hemorrhage.</a> Journal of Visualized Experiments. (137), (2018).</li><li>Neulen, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Large+Vessel+Vasospasm+Is+Not+Associated+with+Cerebral+Cortical+Hypoperfusion+in+a+Murine+Model+of+Subarachnoid+Hemorrhage.">Large Vessel Vasospasm Is Not Associated with Cerebral Cortical Hypoperfusion in a Murine Model of Subarachnoid Hemorrhage.</a> Translational Stroke Research. , (2018).</li><li>Neulen, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neutrophils+mediate+early+cerebral+cortical+hypoperfusion+in+a+murine+model+of+subarachnoid+haemorrhage.">Neutrophils mediate early cerebral cortical hypoperfusion in a murine model of subarachnoid haemorrhage.</a> Scientific Reports. 9 (1), 8460 (2019).</li><li>Neulen, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Volumetric+analysis+of+intracranial+vessels:+a+novel+tool+for+evaluation+of+cerebral+vasospasm.">Volumetric analysis of intracranial vessels: a novel tool for evaluation of cerebral vasospasm.</a> Int J Comput Assist Radiol Surg. 14 (1), 157-167 (2019).</li><li>Washington, C. W., Zipfel, G. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Participants+in+the+International+Multi-disciplinary+Consensus+Conference+on+the+Critical+Care+Management+of+Subarachnoid,+H.+Detection+and+monitoring+of+vasospasm+and+delayed+cerebral+ischemia:+a+review+and+assessment+of+the+literature.">Participants in the International Multi-disciplinary Consensus Conference on the Critical Care Management of Subarachnoid, H. Detection and monitoring of vasospasm and delayed cerebral ischemia: a review and assessment of the literature.</a> NeuroCritical Care. 15 (2), 312-317 (2011).</li><li>Greke, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Image-guided+transcranial+Doppler+sonography+for+monitoring+of+defined+segments+of+intracranial+arteries.">Image-guided transcranial Doppler sonography for monitoring of defined segments of intracranial arteries.</a> Journal of Neurosurgical Anesthesiology. 25 (1), 55-61 (2013).</li><li>Neulen, A., Prokesch, E., Stein, M., Konig, J., Giese, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Image-guided+transcranial+Doppler+sonography+for+monitoring+of+vasospasm+after+subarachnoid+hemorrhage.">Image-guided transcranial Doppler sonography for monitoring of vasospasm after subarachnoid hemorrhage.</a> Clinical Neurology and Neurosurgery. 145, 14-18 (2016).</li><li>Neulen, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Image-Guided+Transcranial+Doppler+Ultrasound+for+Monitoring+Posthemorrhagic+Vasospasms+of+Infratentorial+Arteries:+A+Feasibility+Study.">Image-Guided Transcranial Doppler Ultrasound for Monitoring Posthemorrhagic Vasospasms of Infratentorial Arteries: A Feasibility Study.</a> World Neurosurgery. 134, 284-291 (2020).</li><li>Neulen, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Correlation+of+cardiac+function+and+cerebral+perfusion+in+a+murine+model+of+subarachnoid+hemorrhage.">Correlation of cardiac function and cerebral perfusion in a murine model of subarachnoid hemorrhage.</a> Scientific Reports. 11 (1), 3317 (2021).</li><li>Neulen, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+segmentation-based+volumetric+approach+to+localize+and+quantify+cerebral+vasospasm+based+on+tomographic+imaging+data.">A segmentation-based volumetric approach to localize and quantify cerebral vasospasm based on tomographic imaging data.</a> PLoS One. 12 (2), 0172010 (2017).</li><li>Marbacher, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Systematic+Review+of+In+Vivo+Animal+Models+of+Subarachnoid+Hemorrhage:+Species,+Standard+Parameters,+and+Outcomes.">Systematic Review of In Vivo Animal Models of Subarachnoid Hemorrhage: Species, Standard Parameters, and Outcomes.</a> Translational Stroke Research. , (2018).</li><li>Figueiredo, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+digital+subtraction+angiography,+micro-computed+tomography+angiography+and+magnetic+resonance+angiography+in+the+assessment+of+the+cerebrovascular+system+in+live+mice.">Comparison of digital subtraction angiography, micro-computed tomography angiography and magnetic resonance angiography in the assessment of the cerebrovascular system in live mice.</a> Clinical Neuroradiology. 22 (1), 21-28 (2012).</li><li>Lindegaard, K. F., Nornes, H., Bakke, S. J., Sorteberg, W., Nakstad, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cerebral+vasospasm+diagnosis+by+means+of+angiography+and+blood+velocity+measurements.">Cerebral vasospasm diagnosis by means of angiography and blood velocity measurements.</a> Acta Neurochirurgica. 100 (1-2), 12-24 (1989).</li><li>Cassia, G. S., Faingold, R., Bernard, C., Sant'Anna, G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neonatal+hypoxic-ischemic+injury:+sonography+and+dynamic+color+Doppler+sonography+perfusion+of+the+brain+and+abdomen+with+pathologic+correlation.">Neonatal hypoxic-ischemic injury: sonography and dynamic color Doppler sonography perfusion of the brain and abdomen with pathologic correlation.</a> American Journal of Roentgenology. 199 (6), 743-752 (2012).</li><li>Shen, Q., Stuart, J., Venkatesh, B., Wallace, J., Lipman, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inter+observer+variability+of+the+transcranial+Doppler+ultrasound+technique:+impact+of+lack+of+practice+on+the+accuracy+of+measurement.">Inter observer variability of the transcranial Doppler ultrasound technique: impact of lack of practice on the accuracy of measurement.</a> Journal of Clinical Monitoring and Computing. 15 (3-4), 179-184 (1999).</li></ol>

على حد علمنا، هذه الدراسة هي الأولى لتقديم بروتوكول لرصد vasospasm الدماغي في نموذج مورين من SAH مع ارتفاع وتيرة عبر الجمجمة اللون المرمزة الموجات فوق الصوتية المزدوجة. نظهر أن هذه الطريقة يمكن قياس زيادة في سرعات تدفق الدم داخل الجمجمة بعد التعريفي SAH في الفئران. في الطب البشري هذه الظاهرة معرو...

نزيف تحت العنكبوتية العفوي (SAH) هو شكل من أشكال السكتة الدماغية النزفية الناجمة في الغالب عن تمزق تمدد الأوعية الدموية داخل الجمجمة1. تتأثر النتيجة العصبية بشكل رئيسي بعاملين: إصابة الدماغ المبكرة (EBI) ، والتي تسببها آثار النزيف وما يرتبط به من نقص التروية الدماغية الدماغية العالمية العابرة ، وتأخر نقص التروية الدماغية (DCI) ، والذي يحدث خلال الأسابيع التالية للنزيف2،3. وأفادت التقارير DCI تؤثر على ما يصل إلى 30٪ من المرضى SAH2. الفيزيولوجيا المرضية من DCI ينطوي على الأوعية الدموية الدماغية، دوران الأوعية الدقيقة المضطربة الناجمة عن microvasospasms وmicrothrombosis، والاكتئاب انتشار القشرية، والآثار الناجمة عن التهاب4. لسوء الحظ، لا يزال الفيزيولوجيا المرضية الدقيقة غير واضحة ولا يوجد علاج متاح يمنع بشكل فعال DCI3. لذلك، يتم التحقيق DCI في العديد من الدراسات السريرية والتجريبية.
في الوقت الحاضر، معظم الدراسات التجريبية على SAH استخدام نماذج الحيوانات الصغيرة، وخاصة في الفئران5،6،7،8،9،10،11،12،13. في مثل هذه الدراسات، يتم التحقيق في كثير من الأحيان فصام الأوعية الدماغي كنقطة نهاية. ومن الشائع تحديد درجة من vasospasm ex vivo. وذلك لأن الأساليب غير الباضعة لفحص الأوعية الدموية الدماغية في الجسم الحي التي تتطلب وقتا قصيرا للتخدير وفرض القليل من الضيق على الحيوانات غير موجودة. ومع ذلك ، فإن فحص الأوعية الدموية الدماغية في الجسم الحي سيكون مفيدا. وذلك لأنه سيسمح الطولية في الدراسات الحية على vasospasm في الفئران (أي تصوير الأوعية الدموية الدماغية في نقاط زمنية مختلفة خلال الأيام التي تلت تحريض SAH). ومن شأن ذلك أن يعزز إمكانية مقارنة البيانات المكتسبة في نقاط زمنية مختلفة. وعلاوة على ذلك، فإن استخدام تصميم دراسة طولية هو استراتيجية للحد من أعداد الحيوانات.
هنا نحن نثبت استخدام الموجات فوق الصوتية عبر الجمجمة عالية التردد لتحديد تدفق الدم في الشرايين الدماغية في الفئران. نظهر أنه ، على غرار السونوغرافيا دوبلر عبر الجمجمة (TCD) أو السونوغرافيا المزدوجة المرمزة بالألوان عبر الجمجمة (TCCD) في الممارسة السريرية14و15و16و17و18، يمكن استخدام هذه الطريقة لمراقبة انسداد الأوعية الدماغية عن طريق قياس سرعات تدفق الدم للشرايين داخل الجمجمة بعد تحريض SAH في نموذج المورين.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Balea hair removal creme</td>
			<td>Balea; Germany</td>
			<td>ASIN B0759XM39V</td>
			<td>hair removal creme</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>C57BL/6N mice</td>
			<td>Janvier; Saint-Berthevin Cedex, France</td>
			<td>n.a.</td>
			<td>mice</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Corneregel</td>
			<td>Bausch&#38;Lomb; Rochester, NY, USA</td>
			<td>REF 81552983</td>
			<td>eye ointment, lube</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>cotton swabs</td>
			<td>Hecht Assistent; Sondenheim vor der R&#246;hn, Germany</td>
			<td>REF 44302010</td>
			<td>cotton swabs</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ecco-XS razor</td>
			<td>Tondeo; Soligen, Germany</td>
			<td>DE 28693396</td>
			<td>razor</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electrode cream</td>
			<td>GE; Boston, MA, USA</td>
			<td>REF 21708318</td>
			<td>conductive paste</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heating plate</td>
			<td>Medax; Kiel, Germany</td>
			<td>2005-205-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>Abvie; Wiesbaden, Germany</td>
			<td>n.a.</td>
			<td>volatile anesthetic</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Leukofix</td>
			<td>BSN medical; Hamburg, Germany</td>
			<td>REF 02137-00</td>
			<td>tape</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mechanical arm + micromanipulator</td>
			<td>VisualSonics; FujiFilm, Toronto, CA</td>
			<td>P/N 11277</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microbac tissues</td>
			<td>Paul Hartmann AG; Hamburg, Germany</td>
			<td>REF 981387</td>
			<td>antimicrobial tissues</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MZ400, 38 MHz linear array transducer</td>
			<td>VisualSonics; FujiFilm, Toronto, CA</td>
			<td>REF 51068-30</td>
			<td>ultrasound transducer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sonosid</td>
			<td>ASID Bonz GmbH; Herrenberg, Germany</td>
			<td>REF 782010</td>
			<td>ultrasonography gel</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultrasound platform with heating plate and ECG-recording</td>
			<td>VisualSonics; FujiFilm, Toronto, CA</td>
			<td>P/N 11179</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>UniVet-Porta</td>
			<td>Groppler; Oberperasberg, Germany</td>
			<td>S/N BKGM0437</td>
			<td>isoflurane vaporizer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vevo3100</td>
			<td>VisualSonics; FujiFilm, Toronto, CA</td>
			<td>REF 51073-45</td>
			<td>ultrasonography device</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>VevoLab software</td>
			<td>VisualSonics; FujiFilm, Toronto, CA</td>
			<td>n.a.</td>
			<td>evaluation software</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

analysis of cerebral vasospasm in a murine model of subarachnoid hemorrhage with high frequency transcranial duplex ultrasound

توسع الأوعية الدماغية الذي يحدث في الأسابيع التي تلت بعد نزيف تحت العنكبوتية, نوع من السكتة الدماغية النزفية, يساهم في تأخر نقص التروية الدماغية. مشكلة واجهت في الدراسات التجريبية باستخدام نماذج مورين من SAH هو أن أساليب الرصد في الجسم الحي من vasospasm الدماغي في الفئران تفتقر. هنا، ونحن نظهر تطبيق الموجات فوق الصوتية عالية التردد لإجراء فحوص السونوغرافيا المزدوجة عبر الجمجمة على الفئران. باستخدام هذه الطريقة، يمكن التعرف على الشرايين السباتية الداخلية (ICA). تسارعت سرعات تدفق الدم في ICAs داخل الجمجمة بشكل كبير بعد تحريض SAH ، في حين ظلت سرعات تدفق الدم في ICAs خارج الجمجمة منخفضة ، مما يشير إلى زيادة الأوعية الدماغية. في الختام، فإن الطريقة التي أظهرت هنا يسمح وظيفية، غير الباضعة في رصد الجسم الحي من vasospasm الدماغي في نموذج SAH مورين.

في 6 فئران، تم حث 3 منها SAH باستخدام نموذج ثقب خيوط الأوعية الدموية الداخلية في حين حصل 3 على جراحة صورية، وتم تحديد سرعات تدفق الدم في الشريان السباتي الداخلي داخل الجمجمة (ICA) وICA خارج الجمجمة قبل يوم واحد من الجراحة، وبعد 1 و 3 و 7 أيام من الجراحة. تم إجراء القياسات كجزء من فحوصات تخطيط صدى الق?...

Watch this Scientific Journal Video about Analysis of Cerebral Vasospasm in a Murine Model of Subarachnoid Hemorrhage with High Frequency Transcranial Duplex Ultrasound at JoVE.com

Analysis of Cerebral Vasospasm in a Murine Model of Subarachnoid Hemorrhage with High Frequency Transcranial Duplex Ultrasound

الهدف من هذه المخطوطة هو تقديم طريقة تعتمد على السونوغرافيا تسمح في التصوير الحي لتدفق الدم في الشرايين الدماغية في الفئران. نحن نظهر تطبيقه لتحديد التغيرات في سرعات تدفق الدم المرتبطة vasospasm في نماذج مورين من نزيف تحت العنكبوتية (SAH).

تحليل فاسوسباسم الدماغي في نموذج مورين من نزيف تحت العنكبوتية مع الموجات فوق الصوتية المزدوجة عبر الجمجمة عالية التردد

Cerebral vasospasm that occurs in the weeks after subarachnoid hemorrhage, a type of hemorrhagic stroke, contributes to delayed cerebral ischemia. A ...

الهدف العام لهذا الإجراء هو مراقبة الأوعية الدموية الدماغية بعد نزيف تحت العنكبوتية في الفئران في الجسم الحي. ويتم ذلك من خلال تطبيق عالية التردد السونوغرافيا المزدوجة مرمزة بالألوان تحت التخدير مع isoflurane. تتم معالجة بيانات التصوير لتحديد سرعات تدفق الدم في الشرايين السباتية الداخلية داخل وخارج الجمجمة.تشير سرعة تدفق الدم داخل الجمجمة المتسارعة إلى سرعة الأوعية الدموية الدماغية. في هذه الدراسة، قمنا بإجراء قياسات لسرعات تدفق الدم من الشرايين داخل الجمجمة وخارج الجمجمة في الفئران الإناث، C57BL/6N الذين تتراوح أعمارهم بين 11 إلى 12 أسبوعا. وقد تعرضت الفئران إما لتحريض SAH أو جراحة صورية تم وصفها بالتفصيل في مكان آخر.لإعداد التبديل فحص التصوير فوق الصوتي على جهاز الموجات فوق الصوتية وأدخل ID.Warm الحيوان لوحة التدفئة من نظام الموجات فوق الصوتية إلى 37 درجة مئوية. تأكد من أن مسبار درجة حرارة المستقيم جاهز للاستخدام. استخدام حمام الماء الدافئ لتسخين هلام الموجات فوق الصوتية إلى 37 درجة مئوية.إعداد كريم إزالة الشعر، كريم الاتصال للأقطاب ومرهم العين. تأكد من تركيب المحول بشكل صحيح على الذراع الميكانيكية وتأكد من أن غرفة تحريض التخدير يتم مسحها مع 4٪ isoflurane و 40٪ أكسجين. حث التخدير عن طريق وضع الماوس في الغرفة لمدة دقيقة واحدة.حماية العينين مع مرهم. استمر فقط بعد الوصول إلى تخدير عميق بما فيه الكفاية. الحفاظ على التخدير مع 1.5٪ isoflurane و 40٪ الأكسجين باستخدام قناع التخدير طوال العملية برمتها.في الخطوة الأولى ، يتم تحديد سرعات تدفق الدم في الشرايين السباتية الداخلية داخل الجمجمة مع السونوغرافيا المزدوجة عالية التردد عبر الجمجمة. ضع الماوس في موضع عرضة على لوحة التدفئة من نظام الموجات فوق الصوتية للحفاظ على درجة حرارة الجسم 37 درجة مئوية. تطبيق مرهم العين على كلا الجانبين.قبل الامتحان الأول تقصير الفراء في occiput مع ماكينة حلاقة كهربائية. ثم إزالة الشعر المتبقي كيميائيا باستخدام كريم إزالة الشعر. استخدمي مسحة قطنية لنشر وفرك الكريم لمدة دقيقتين حتى يبدأ الشعر في السقوط.بعد دقيقتين إضافيتين إزالة كريم والشعر مع ملعقة وتطهير الجلد مع مطهر الجلد الكحولية. معطف الأطراف الأربعة للحيوان مع عجينة موصل وإصلاحها مع الشريط على أقطاب تخطيط القلب جزءا لا يتجزأ من المجلس. ضع التشحيم على مسبار درجة حرارة المستقيم وأدخله بعناية لمراقبة درجة حرارة الجسم ، باستخدام مصباح احترار إضافي إذا لزم الأمر.تحقق، إذا تم عرض المعلمات الفسيولوجية، تخطيط القلب وإشارة التنفس بشكل صحيح على شاشة نظام الموجات فوق الصوتية. إذا لزم الأمر، يمكن تعديل مستوى التخدير للحصول على معدل ضربات القلب المستهدف من 4 إلى 500 نبضة في الدقيقة. معطف مع هلام الموجات فوق الصوتية.استخدم محول صفيف خطي ومعدل إطار أعلى من 200 إطار في الثانية للحصول على صور بالموجات فوق الصوتية وتركيبها على الذراع الميكانيكية. ضع محول على أوكسبوت يميل مرة أخرى بمقدار 30 درجة. استخدم وضع B ووضع CW-Doppler لتصور الشريان السباتي الداخلي داخل الجمجمة الأيمن وتحريك المحول مع وحدة التحكم ذهابا وإيابا حتى نجد أقصى تدفق للشرايين.لجمع المعلومات التشريحية استخدام التقليدية وضع B و CW-دوبلر و بدء الاستحواذ من خلال النقر على زر الحصول على. لتسجيل المعلومات حول خصائص تدفق الأوعية داخل الجمجمة انقر على زر دوبلر موجة النبض، وضع حجم عينة في وسط السفينة والحصول على حلقة سيني أطول من ثلاث ثوان. المضي قدما بشكل متطابق مع الجانب الأيسر.في الخطوة التالية يتم تحديد سرعات تدفق الدم من الشرايين السباتية الداخلية خارج الجمجمة مع السونوغرافيا المزدوجة عالية التردد. ضع الماوس في وضعية السبق على لوحة التدفئة في نظام الموجات فوق الصوتية للحفاظ على درجة حرارة الجسم من 37 درجة مئوية. قبل الفحص الأول إزالة الشعر من الجزء الأمامي من الرقبة مع ماكينة حلاقة كهربائية.ثم إزالة الشعر المتبقي كيميائيا باستخدام كريم إزالة الشعر كما هو موضح سابقا. معطف الأطراف الأربعة للحيوان مع عجينة موصل وإصلاحها مع الشريط على أقطاب تخطيط القلب جزءا لا يتجزأ من المجلس. ضع التشحيم على مسبار درجة حرارة المستقيم وأدخله بعناية لمراقبة درجة حرارة الجسم.استخدام مصباح الاحترار إضافية إذا لزم الأمر. تحقق مرة أخرى من العرض الصحيح للمعلمات الفسيولوجية على الشاشة. معطف الجزء الأمامي من الرقبة مع هلام الموجات فوق الصوتية ارتفعت درجة حرارتها إلى 37 درجة مئوية.ضع المحول الموازي للحيوان وضبط الموضع من أجل الحصول على صور طولية للشريان السباتي الأيمن. استخدم وضع B CW-Doppler لتصور الشريان السباتي الأيمن. يجب أن تحتوي الصورة على الشريان السباتي المشترك الصحيح والشريان السباتي الداخلي الأيمن والشريان السباتي الخارجي الأيمن.لجمع المعلومات التشريحية استخدام التقليدية وضع B و CW-دوبلر و بدء الاستحواذ من خلال النقر على زر الحصول على. لتسجيل معلومات حول خصائص تدفق الشريان السباتي خارج الجمجمة انقر على زر دوبلر موجة النبض، ضع حجم العينة في وسط الشريان السباتي المشترك الشريان السباتي الداخلي والشريان السباتي الخارجي والحصول على حلقة سينية أطول من ثلاث ثوان. المضي قدما بشكل متطابق مع الجانب الأيسر.إنهاء التخدير وإزالة الحيوان من لوحة الاحترار ووضعه في قفص، وضعت في حاضنة ساخنة إلى 36 درجة مئوية لمدة ساعة واحدة لمنع انخفاض حرارة الجسم والتحقق من الشفاء التام. الخطوة التالية هي معالجة بيانات التصوير السونوغرافي الفائق. استخدام محطة عمل خارجية لمعالجة بيانات الموجات فوق الصوتية عالية التردد.تصدير وضع B، وضع CW-دوبلر والصور PW-دوبلر وضع والحلقات سيني إلى برنامج مختبر Vevo. افتح دراسة الموجات فوق الصوتية المصدرة. حدد واحد وفتح PW-دوبلر حلقة سيني من الشريان السباتي داخل الجمجمة.في هذا البروتوكول عادة ما يتم تسجيل سبع إلى ثماني نبضات في منحنيات سرعة التدفق المقابلة. وقفة حلقة cine وانقر على زر القياس. اختر حزمة الأوعية الدموية وانقر على RICA PSV لقياس ذروة الضغط الانقباضي للشريان السباتي داخل الجمجمة الأيمن.الآن انقر على اليسار على ذروة منحنى السرعة وسحب خط مستقيم إلى خط الصفر. تحديد القياس بنقرة زر الماوس الأيمن. الآن اختيار EDV ريكا لقياس السرعة الانبساطية نهاية.انقر على اليسار على الحد الأدنى من طفح منحنى السرعة في نهاية diastole. اسحب الخط مباشرة إلى خط الصفر وحدد القياس بنقرة زر الماوس الأيمن. اختر ريكا VTI لقياس وقت السرعة المتكاملة.انقر على اليسار في بداية منحنى السرعة واتبع المنحنى مع الماوس حتى نهاية الهضبة الانبساطية. ثم انقر بزر الماوس الأيمن مرة أخرى لتحديد القياس. تصدير البيانات من الشرايين السباتية الداخلية داخل المخ باستخدام زر التقرير.اضغط تصدير وحفظ البيانات كملف تقرير VSI. استخدم نفس النهج لقياس PSV و EDV و VTI للشرايين السباتية الداخلية خارج الجمجمة الصحيحة وتصدير البيانات وفقا لذلك. المضي قدما بشكل مماثل مع الجانب الأيسر واستخدام LICA PSV، EDV وVTI.في خمسة فئران وثلاثة منها تم تحريض SAH في حين أن اثنين الحصول على جراحة صورية تم تحديد سرعات تدفق الدم من الشريان الداخلي داخل الجمجمة والشريان السباتي الداخلي خارج الجمجمة قبل يوم واحد من الجراحة وبعد يوم واحد وثلاثة وسبعة أيام من الجراحة. قبل الجراحة، كانت سرعات تدفق الدم الزائدة وداخل الجمجمة وكذلك نسبة تدفق الدم داخل وخارج الجمجمة متشابهة بين SAH والحيوانات الصورية. في اليوم الأول بعد تحريض SAH لم تكن هناك تغييرات كبيرة في سرعات تدفق الدم داخل أو خارج الجمجمة أو النسب بين تدفق الدم داخل وخارج الجمجمة.في اليومين الثالث والسابع زادت سرعات تدفق الدم داخل الجمجمة في الشريان السباتي الداخلي بشكل ملحوظ واثنين من SAH التي تشير إلى توسع الأوعية الدماغي بعد SAH. كما ظلت سرعات تدفق الدم خارج الجمجمة دون تغيير تقريبا، ونسب سرعات تدفق الدم داخل وخارج الجمجمة زادت أيضا بشكل كبير في اليوم السابع في الحيوانات SAH تشير إلى vasospasm الدماغي. في الختام عالية التردد مرمزة بالألوان عبر الجمجمة السونوغرافيا المزدوجة يمكن استخدامها لأداء في قياسات الجسم الحي لسرعات تدفق الدم داخل الجمجمة في الفئران.على غرار الوضع في المرضى البشر تسارع سرعات تدفق الدم داخل الجمجمة في الفئران بعد SAH تشير إلى vasospasm. الطريقة السونوغرافية الفائقة الموضحة هنا سريعة وقليلة التوغل. فإنه يسمح الدراسات الطولية من vasospasm في نماذج مورين SAH.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Assessment of Cerebral Lateralization in Children using Functional Transcranial Doppler Ultrasound (fTCD)

Assessment of Cerebral Lateralization in Children using Functional Transcranial Doppler Ultrasound fTCD

تقييم Lateralization الدماغي عند الأطفال باستخدام الموجات فوق الصوتية وظيفية عبر الجمجمة دوبلر (fTCD)

There are many unanswered questions about cerebral lateralization.  In particular, it remains unclear which aspects of language and nonverbal ability are ...

Autologous Blood Injection to Model Spontaneous Intracerebral Hemorrhage in Mice

حقن الدم ذاتي النزيف الدماغي الداخلي النموذجي لالعفوي في الفئران

Investigation of the pathophysiology of injury after intracerebral
hemorrhage (ICH) requires a reproducible animal model.  While ICH
accounts for 10-15% ...

A Rat Model of Mild Intrauterine Hypoperfusion with Microcoil Stenosis

نموذج الفئران من هيبوبيرفوسيون داخل الرحم خفيفة مع تضيق ميكروكويل

Intrauterine hypoperfusion/ischemia is one of the major causes of intrauterine/fetal growth restriction, preterm birth, and low birth weight. Most studies ...

A Volumetric Method for Quantification of Cerebral Vasospasm in a Murine Model of Subarachnoid Hemorrhage

أسلوب حجمي للتحديد الكمي للمخ بالتشنج في نموذج موريني نزيف تحت العنكبوتية

Subarachnoid hemorrhage (SAH) is a subtype of hemorrhagic stroke. Cerebral vasospasm that occurs in the aftermath of the bleeding is an important factor ...

Double Direct Injection of Blood into the Cisterna Magna as a Model of Subarachnoid Hemorrhage

مزدوجة الحقن المباشر للدم في ماغنا سيستيرنا كنموذج للنزف تحت العنكبوتية

Among strokes, subarachnoid hemorrhage (SAH) consecutive to the rupture of a cerebral arterial aneurysm represents 5-9% but is responsible for about 30% ...

Pre-Chiasmatic, Single Injection of Autologous Blood to Induce Experimental Subarachnoid Hemorrhage in a Rat Model

حقنة واحدة من الدم الذاتي قبل Chiasmatic للحث على نزيف تحت العنكبوتية التجريبي في نموذج الفئران

Despite advances in treatment over the last decades, subarachnoid hemorrhage (SAH) continues to carry a high burden of morbidity and mortality, largely ...

Endovascular Perforation Model for Subarachnoid Hemorrhage Combined with Magnetic Resonance Imaging (MRI)

Endovascular Perforation Model for Subarachnoid Hemorrhage Combined with Magnetic Resonance Imaging MRI

نموذج ثقب الأوعية الدموية الداخلية للنزيف تحت العنكبوتية جنبا إلى جنب مع التصوير بالرنين المغناطيسي (MRI)

The endovascular filament perforation model to mimic subarachnoid hemorrhage (SAH) is a commonly used model - however, the technique can cause a high ...

Modeling Neonatal Intraventricular Hemorrhage Through Intraventricular Injection of Hemoglobin

نمذجة النزف داخل البطيني الوليدي من خلال الحقن داخل البطيني للهيموغلوبين

Neonatal intraventricular hemorrhage (IVH) is a common consequence of premature birth and leads to brain injury, posthemorrhagic hydrocephalus (PHH), and ...

Establishing a Transcranial Middle Cerebral Artery Occlusion Mice Model

A Modified Transcranial Middle Cerebral Artery Occlusion Model to Study Stroke Outcomes in Aged Mice

Innovative Techniques and Future Directions in Stroke Research (Video) | JoVE

نموذج معدل لانسداد الشريان الدماغي الأوسط عبر الجمجمة لدراسة نتائج السكتة الدماغية في الفئران المسنة

In experimental stroke research, middle cerebral artery occlusion (MCAO) with an intraluminal filament is widely used to model ischemic stroke in mice. ...

Chinese Massage Techniques: Enhancing Motor Function in Cerebral Palsy Rats

Abdominal Massage to Improve Motor Dysfunction in Rats with Cerebral Palsy

Exploring the Potential of Massage Therapy in Cerebral Palsy Using Animal Models (Video) | JoVE

تدليك البطن لتحسين الخلل الحركي في الفئران المصابة بالشلل الدماغي

Cerebral palsy (CP) is a disease with a high disability rate and morbidity. The clinical symptoms of cerebral palsy are motor dysfunction and abnormal ...