Name: analysis of cerebral vasospasm in a murine model of subarachnoid hemorrhage with high frequency transcranial duplex ultrasound
Uploaded: 2021-06-03T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Analysis of Cerebral Vasospasm in a Murine Model of Subarachnoid Hemorrhage with High Frequency Transcranial Duplex Ultrasound at JoVE.com

המחברים מבקשים להודות לסטפן קינדל על הכנת האיורים בסרטון. PW, MM ו- SHK נתמכו על ידי המשרד הפדרלי הגרמני לחינוך ומחקר (BMBF 01EO1503). העבודה נתמכה על ידי מענק מכשור גדול של קרן המחקר הגרמנית (DFG INST 371/47-1 FUGG). MM נתמך על ידי מענק של אלזה קרנר-Fresenius-Stiftung (2020_EKEA.144).

הניסויים בבעלי חיים אושרו על ידי הוועדה האחראית לטיפול בבעלי חיים (Landesuntersuchungsamt Rheinland-Pfalz) ובוצעו בהתאם לחוק הגרמני לרווחת בעלי חיים (TierSchG). כל ההנחיות הבינלאומיות, הלאומיות והמוסדיות הרלוונטיות לטיפול ולשימוש בבעלי חיים בוצעו. במחקר זה, ביצענו מדידות של מהירויות זרימת הדם של עורקים תוך ורי...

<ol>
	<li>Macdonald, R. L., Schweizer, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spontaneous+subarachnoid+haemorrhage.">Spontaneous subarachnoid haemorrhage.</a> Lancet. 389 (10069), 655-666 (2017).</li><li>Macdonald, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Delayed+neurological+deterioration+after+subarachnoid+haemorrhage.">Delayed neurological deterioration after subarachnoid haemorrhage.</a> Nature Reviews Neurology. 10 (1), 44-58 (2014).</li><li>Francoeur, C. L., Mayer, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Management+of+delayed+cerebral+ischemia+after+subarachnoid+hemorrhage.">Management of delayed cerebral ischemia after subarachnoid hemorrhage.</a> Critical Care. 20 (1), 277 (2016).</li><li>van Lieshout, J. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+introduction+to+the+pathophysiology+of+aneurysmal+subarachnoid+hemorrhage.">An introduction to the pathophysiology of aneurysmal subarachnoid hemorrhage.</a> Neurosurgical Review. , (2017).</li><li>Altay, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+method+for+subarachnoid+hemorrhage+to+induce+vasospasm+in+mice.">A novel method for subarachnoid hemorrhage to induce vasospasm in mice.</a> J Neurosci Methods. 183 (2), 136-140 (2009).</li><li>Momin, E. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Controlled+delivery+of+nitric+oxide+inhibits+leukocyte+migration+and+prevents+vasospasm+in+haptoglobin+2-2+mice+after+subarachnoid+hemorrhage.">Controlled delivery of nitric oxide inhibits leukocyte migration and prevents vasospasm in haptoglobin 2-2 mice after subarachnoid hemorrhage.</a> Neurosurgery. 65 (5), 937-945 (2009).</li><li>Froehler, M. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vasospasm+after+subarachnoid+hemorrhage+in+haptoglobin+2-2+mice+can+be+prevented+with+a+glutathione+peroxidase+mimetic.">Vasospasm after subarachnoid hemorrhage in haptoglobin 2-2 mice can be prevented with a glutathione peroxidase mimetic.</a> Journal of Clinical Neuroscience. 17 (9), 1169-1172 (2010).</li><li>Provencio, J. J., Altay, T., Smithason, S., Moore, S. K., Ransohoff, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Depletion+of+Ly6G/C(+)+cells+ameliorates+delayed+cerebral+vasospasm+in+subarachnoid+hemorrhage.">Depletion of Ly6G/C(+) cells ameliorates delayed cerebral vasospasm in subarachnoid hemorrhage.</a> Journal of Neuroimmunology. 232 (1-2), 94-100 (2011).</li><li>Kamp, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+a+murine+single-blood-injection+SAH+model.">Evaluation of a murine single-blood-injection SAH model.</a> PLoS One. 9 (12), 114946 (2014).</li><li>Luh, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Contractile+Apparatus+Is+Essential+for+the+Integrity+of+the+Blood-Brain+Barrier+After+Experimental+Subarachnoid+Hemorrhage.">The Contractile Apparatus Is Essential for the Integrity of the Blood-Brain Barrier After Experimental Subarachnoid Hemorrhage.</a> Translational Stroke Research. , (2018).</li><li>Neulen, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Volumetric+Method+for+Quantification+of+Cerebral+Vasospasm+in+a+Murine+Model+of+Subarachnoid+Hemorrhage.">A Volumetric Method for Quantification of Cerebral Vasospasm in a Murine Model of Subarachnoid Hemorrhage.</a> Journal of Visualized Experiments. (137), (2018).</li><li>Neulen, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Large+Vessel+Vasospasm+Is+Not+Associated+with+Cerebral+Cortical+Hypoperfusion+in+a+Murine+Model+of+Subarachnoid+Hemorrhage.">Large Vessel Vasospasm Is Not Associated with Cerebral Cortical Hypoperfusion in a Murine Model of Subarachnoid Hemorrhage.</a> Translational Stroke Research. , (2018).</li><li>Neulen, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neutrophils+mediate+early+cerebral+cortical+hypoperfusion+in+a+murine+model+of+subarachnoid+haemorrhage.">Neutrophils mediate early cerebral cortical hypoperfusion in a murine model of subarachnoid haemorrhage.</a> Scientific Reports. 9 (1), 8460 (2019).</li><li>Neulen, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Volumetric+analysis+of+intracranial+vessels:+a+novel+tool+for+evaluation+of+cerebral+vasospasm.">Volumetric analysis of intracranial vessels: a novel tool for evaluation of cerebral vasospasm.</a> Int J Comput Assist Radiol Surg. 14 (1), 157-167 (2019).</li><li>Washington, C. W., Zipfel, G. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Participants+in+the+International+Multi-disciplinary+Consensus+Conference+on+the+Critical+Care+Management+of+Subarachnoid,+H.+Detection+and+monitoring+of+vasospasm+and+delayed+cerebral+ischemia:+a+review+and+assessment+of+the+literature.">Participants in the International Multi-disciplinary Consensus Conference on the Critical Care Management of Subarachnoid, H. Detection and monitoring of vasospasm and delayed cerebral ischemia: a review and assessment of the literature.</a> NeuroCritical Care. 15 (2), 312-317 (2011).</li><li>Greke, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Image-guided+transcranial+Doppler+sonography+for+monitoring+of+defined+segments+of+intracranial+arteries.">Image-guided transcranial Doppler sonography for monitoring of defined segments of intracranial arteries.</a> Journal of Neurosurgical Anesthesiology. 25 (1), 55-61 (2013).</li><li>Neulen, A., Prokesch, E., Stein, M., Konig, J., Giese, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Image-guided+transcranial+Doppler+sonography+for+monitoring+of+vasospasm+after+subarachnoid+hemorrhage.">Image-guided transcranial Doppler sonography for monitoring of vasospasm after subarachnoid hemorrhage.</a> Clinical Neurology and Neurosurgery. 145, 14-18 (2016).</li><li>Neulen, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Image-Guided+Transcranial+Doppler+Ultrasound+for+Monitoring+Posthemorrhagic+Vasospasms+of+Infratentorial+Arteries:+A+Feasibility+Study.">Image-Guided Transcranial Doppler Ultrasound for Monitoring Posthemorrhagic Vasospasms of Infratentorial Arteries: A Feasibility Study.</a> World Neurosurgery. 134, 284-291 (2020).</li><li>Neulen, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Correlation+of+cardiac+function+and+cerebral+perfusion+in+a+murine+model+of+subarachnoid+hemorrhage.">Correlation of cardiac function and cerebral perfusion in a murine model of subarachnoid hemorrhage.</a> Scientific Reports. 11 (1), 3317 (2021).</li><li>Neulen, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+segmentation-based+volumetric+approach+to+localize+and+quantify+cerebral+vasospasm+based+on+tomographic+imaging+data.">A segmentation-based volumetric approach to localize and quantify cerebral vasospasm based on tomographic imaging data.</a> PLoS One. 12 (2), 0172010 (2017).</li><li>Marbacher, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Systematic+Review+of+In+Vivo+Animal+Models+of+Subarachnoid+Hemorrhage:+Species,+Standard+Parameters,+and+Outcomes.">Systematic Review of In Vivo Animal Models of Subarachnoid Hemorrhage: Species, Standard Parameters, and Outcomes.</a> Translational Stroke Research. , (2018).</li><li>Figueiredo, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+digital+subtraction+angiography,+micro-computed+tomography+angiography+and+magnetic+resonance+angiography+in+the+assessment+of+the+cerebrovascular+system+in+live+mice.">Comparison of digital subtraction angiography, micro-computed tomography angiography and magnetic resonance angiography in the assessment of the cerebrovascular system in live mice.</a> Clinical Neuroradiology. 22 (1), 21-28 (2012).</li><li>Lindegaard, K. F., Nornes, H., Bakke, S. J., Sorteberg, W., Nakstad, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cerebral+vasospasm+diagnosis+by+means+of+angiography+and+blood+velocity+measurements.">Cerebral vasospasm diagnosis by means of angiography and blood velocity measurements.</a> Acta Neurochirurgica. 100 (1-2), 12-24 (1989).</li><li>Cassia, G. S., Faingold, R., Bernard, C., Sant'Anna, G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neonatal+hypoxic-ischemic+injury:+sonography+and+dynamic+color+Doppler+sonography+perfusion+of+the+brain+and+abdomen+with+pathologic+correlation.">Neonatal hypoxic-ischemic injury: sonography and dynamic color Doppler sonography perfusion of the brain and abdomen with pathologic correlation.</a> American Journal of Roentgenology. 199 (6), 743-752 (2012).</li><li>Shen, Q., Stuart, J., Venkatesh, B., Wallace, J., Lipman, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inter+observer+variability+of+the+transcranial+Doppler+ultrasound+technique:+impact+of+lack+of+practice+on+the+accuracy+of+measurement.">Inter observer variability of the transcranial Doppler ultrasound technique: impact of lack of practice on the accuracy of measurement.</a> Journal of Clinical Monitoring and Computing. 15 (3-4), 179-184 (1999).</li></ol>

למיטב ידיעתנו, מחקר זה הוא הראשון להציג פרוטוקול לניטור vasospasm המוחי במודל מורין של SAH עם אולטרסאונד דופלקס בצבע transcranial בתדר גבוה מקודד צבע. אנו מראים כי שיטה זו יכולה למדוד עלייה במהירות זרימת הדם תוך ורידי לאחר אינדוקציה SAH בעכברים. ברפואה האנושית תופעה זו ידועה היטב3,<sup ...

דימום תת-אראצנואידי ספונטני (SAH) הוא סוג של שבץ דימומי הנגרם בעיקר על ידי קרע של מפרצת תוךנדרית 1. התוצאה הנוירולוגית מושפעת בעיקר משני גורמים: פגיעה מוחית מוקדמת (EBI), הנגרמת על ידי השפעות הדימום והאיזכמיה המוחית העולמית החולפית הקשורה, ואיסכמיה מוחית מעוכב (DCI), המתרחשת בשבועות שלאחר הדימום2,3. DCI דווח להשפיע על עד 30% של חולי SAH2. הפתופיזיולוגיה של DCI כרוכה vasospasm מוחי אנגיוגרפי, microcirculation מופרע הנגרמת על ידי microvasospasms ו microthrombosis, דיכאון התפשטות קליפת המוח, והשפעות המופעלות על ידי דלקת4. למרבה הצער, הפתופיזיולוגיה המדויקת עדיין לא ברורה ואין טיפול זמין המונע ביעילות DCI3. לכן, DCI נחקר במחקרים קליניים וניסיוניים רבים.
כיום, רוב המחקרים הניסיוניים על SAH משתמשים במודלים קטנים של בעלי חיים, במיוחד בעכברים5,6,7,8,9,10,11,12,13. במחקרים כאלה, vasospasm מוחי נחקר לעתים קרובות כנקודת קצה. זה נפוץ לקבוע את מידת vasospasm אקס ויוו. הסיבה לכך היא כי שיטות פולשניות לבדיקה vivo של vasospasm מוחי הדורש זמן הרדמה קצר הטלת רק מצוקה קטנה על בעלי החיים חסרים. עם זאת, בדיקה של vasospasm מוחי vivo יהיה יתרון. הסיבה לכך היא כי זה יאפשר אורך במחקרים vivo על vasospasm בעכברים (כלומר, הדמיה של vasospasm מוחי בנקודות זמן שונות בימים שלאחר אינדוקציה של SAH). פעולה זו תשפר את ההנאה של נתונים שנרכשו בנקודות זמן שונות. יתר על כן, באמצעות עיצוב מחקר אורך היא אסטרטגיה כדי להפחית את מספר בעלי החיים.
כאן אנו מדגימים את השימוש באולטרסאונד transcranial בתדירות גבוהה כדי לקבוע את זרימת הדם בעורקים מוחיים בעכברים. אנו מראים כי, בדומה לסונוגרפיה דופלר transcranial (TCD) או סונוגרפיה דופלקס מקודדת בצבע transcranial (TCCD) בפרקטיקה קלינית14,15,16,17,18, שיטה זו יכולה לשמש כדי לפקח על vasospasm המוחי על ידי מדידת מהירויות זרימת הדם של העורקים תוך ורידי לאחר אינדוקציה SAH במודל המורין.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Balea hair removal creme</td>
			<td>Balea; Germany</td>
			<td>ASIN B0759XM39V</td>
			<td>hair removal creme</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>C57BL/6N mice</td>
			<td>Janvier; Saint-Berthevin Cedex, France</td>
			<td>n.a.</td>
			<td>mice</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Corneregel</td>
			<td>Bausch&#38;Lomb; Rochester, NY, USA</td>
			<td>REF 81552983</td>
			<td>eye ointment, lube</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>cotton swabs</td>
			<td>Hecht Assistent; Sondenheim vor der R&#246;hn, Germany</td>
			<td>REF 44302010</td>
			<td>cotton swabs</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ecco-XS razor</td>
			<td>Tondeo; Soligen, Germany</td>
			<td>DE 28693396</td>
			<td>razor</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electrode cream</td>
			<td>GE; Boston, MA, USA</td>
			<td>REF 21708318</td>
			<td>conductive paste</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heating plate</td>
			<td>Medax; Kiel, Germany</td>
			<td>2005-205-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>Abvie; Wiesbaden, Germany</td>
			<td>n.a.</td>
			<td>volatile anesthetic</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Leukofix</td>
			<td>BSN medical; Hamburg, Germany</td>
			<td>REF 02137-00</td>
			<td>tape</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mechanical arm + micromanipulator</td>
			<td>VisualSonics; FujiFilm, Toronto, CA</td>
			<td>P/N 11277</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microbac tissues</td>
			<td>Paul Hartmann AG; Hamburg, Germany</td>
			<td>REF 981387</td>
			<td>antimicrobial tissues</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MZ400, 38 MHz linear array transducer</td>
			<td>VisualSonics; FujiFilm, Toronto, CA</td>
			<td>REF 51068-30</td>
			<td>ultrasound transducer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sonosid</td>
			<td>ASID Bonz GmbH; Herrenberg, Germany</td>
			<td>REF 782010</td>
			<td>ultrasonography gel</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultrasound platform with heating plate and ECG-recording</td>
			<td>VisualSonics; FujiFilm, Toronto, CA</td>
			<td>P/N 11179</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>UniVet-Porta</td>
			<td>Groppler; Oberperasberg, Germany</td>
			<td>S/N BKGM0437</td>
			<td>isoflurane vaporizer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vevo3100</td>
			<td>VisualSonics; FujiFilm, Toronto, CA</td>
			<td>REF 51073-45</td>
			<td>ultrasonography device</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>VevoLab software</td>
			<td>VisualSonics; FujiFilm, Toronto, CA</td>
			<td>n.a.</td>
			<td>evaluation software</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

analysis of cerebral vasospasm in a murine model of subarachnoid hemorrhage with high frequency transcranial duplex ultrasound

vasospasm מוחי המתרחשת בשבועות לאחר דימום תת-אראצנואידי, סוג של שבץ דימום, תורם איסכמיה מוחית מעוכבת. בעיה נתקל במחקרים ניסיוניים באמצעות מודלים מורין של SAH היא כי שיטות ניטור in vivo של vasospasm המוח בעכברים חסרים. כאן, אנו מדגימים את היישום של אולטרסאונד בתדר גבוה לבצע בדיקות סונוגרפיה דופלקס transcranial על עכברים. באמצעות השיטה, ניתן היה לזהות את עורקי העורק הראשי הפנימיים (ICA). מהירויות זרימת הדם ב- ICAs תוך ורידי הואצו באופן משמעותי לאחר אינדוקציה של SAH, בעוד מהירויות זרימת הדם ב- ICAs חוץ-סריאלי נשארו נמוכות, דבר המצביע על vasospasm מוחי. לסיכום, השיטה המודגמת כאן מאפשרת ניטור פונקציונלי ולא פולשני של ווספסם מוחי במודל SAH מורין.

ב 6 עכברים, ב 3 אשר SAH היה המושרה באמצעות מודל ניקוב חוט אנדווסקולרי בעוד 3 השיגו ניתוח מזויף, מהירויות זרימת הדם של עורק העורק הראשי הפנימי תוך ורידי (ICA) ושל ICA extracranial נקבעו יום אחד לפני הניתוח, ו 1, 3, ו 7 ימים לאחר הניתוח. המדידות בוצעו כחלק מבדיקות אקו לב של מחקר אחר בהרדמה עם isoflurane תוך שמירה על ...

Watch this Scientific Journal Video about Analysis of Cerebral Vasospasm in a Murine Model of Subarachnoid Hemorrhage with High Frequency Transcranial Duplex Ultrasound at JoVE.com

Analysis of Cerebral Vasospasm in a Murine Model of Subarachnoid Hemorrhage with High Frequency Transcranial Duplex Ultrasound

מטרת כתב היד היא להציג שיטה מבוססת סונוגרפיה המאפשרת הדמיה של זרימת הדם בעורקים מוחיים בעכברים. אנו מדגימים את היישום שלה כדי לקבוע שינויים במהירות זרימת הדם הקשורים vasospasm במודלים מורין של דימום subarachnoid (SAH).

ניתוח של Vasospasm מוחי במודל מורין של דימום subarachnoid עם אולטרסאונד דופלקס Transcranial בתדר גבוה

Cerebral vasospasm that occurs in the weeks after subarachnoid hemorrhage, a type of hemorrhagic stroke, contributes to delayed cerebral ischemia. A ...

המטרה הכוללת של הליך זה היא לפקח על vasospasm מוחי לאחר דימום תת-אראצנואידי בעכברים ב vivo. זה מושג על ידי היישום של סונוגרפיה דופלקס בצבע בתדר גבוה מקודד תחת הרדמה עם isoflurane. נתוני ההדמיה מעובדים כדי לקבוע את מהירויות זרימת הדם בעורקים הפנימיים הפנימיים תוך-סידוריים.מהירות זרימת דם תוך ורידי מואצת מצביעה על vasospasm מוחי. במחקר זה, ביצענו מדידות של מהירויות זרימת הדם של עורקים תוך ורידי ו extracranial אצל נקבה, C57BL / 6N עכברים בגילאי 11 עד 12 שבועות. העכברים היו נתונים או אינדוקציה SAH או ניתוח מזויף אשר תואר בפירוט במקומות אחרים.כדי להכין את מתג בדיקת אולטרה סאונד על מכונת אולטרסאונד ולהזן את ID.Warm החימום צלחת החימום של מערכת אולטרסאונד ל 37 מעלות צלזיוס. ודא כי גשוש הטמפרטורה רקטלית מוכן לשימוש. השתמש באמבט מים חמים כדי לחמם את ג'ל אולטרסאונד ל 37 מעלות צלזיוס.מכינים את קרם הסרת השיער, קרם מגע לאלקטרודות ומשחה לעיניים. ודא כי המתמר מותקן כראוי על הזרוע המכנית ולהבטיח כי התא של אינדוקציה הרדמה הוא סמוק עם 4% isoflurane ו 40% חמצן. לגרום להרדמה על ידי לשים את העכבר בתא במשך דקה אחת.להגן על העיניים עם משחה. המשך רק לאחר הרדמה עמוקה מספיק הושגה. לשמור על הרדמה עם 1.5% isoflurane ו 40% חמצן באמצעות מסכת הרדמה לאורך כל ההליך.בשלב הראשון, מהירויות זרימת הדם של העורקים הפנימיים תוך ורידי העורקים נקבעים עם סונוגרפיה דו-צדדית בתדר גבוה transcranial. מניחים את העכבר בתנוחה נוטה על צלחת החימום של מערכת אולטרסאונד כדי לשמור על טמפרטורת הגוף 37 מעלות צלזיוס. יש למרוח משחת עיניים משני הצדדים.לפני הבחינה הראשונה לקצר את הפרווה ב occiput עם מכונת גילוח חשמלית. לאחר מכן להסיר את השיער שנותר כימית באמצעות קרם להסרת שיער. השתמש ספוגית כותנה כדי להפיץ ולשפשף את השמנת במשך שתי דקות עד השיער מתחיל לנשור.לאחר שתי דקות נוספות להסיר את השמנת והשיער עם מרית ולחטא את העור עם חיטוי עור אלכוהולי. מצפים את ארבעת הגפיים של החיה במשחה מוליך ומתקן אותם עם סרט הדבקה על אלקטרודות א.ק.ג. המוטמעות בלוח. מניחים סיכה על בדיקה טמפרטורה רקטלית בזהירות להכניס אותו כדי לפקח על טמפרטורת הגוף, באמצעות מנורת חימום נוספת במידת הצורך.בדוק, אם הפרמטרים הפיזיולוגיים, א.ק.ג. ואות הנשימה מוצגים כראוי על המסך של מערכת אולטרסאונד. במידת הצורך, ניתן להתאים את רמת ההרדמה כדי להשיג את הדופק היעד של 4 עד 500 פעימות לדקה. מצפה אותו עם ג'ל אולטרסאונד.השתמש מתמר מערך ליניארי וקצב מסגרות מעל 200 מסגרות לשנייה כדי לרכוש תמונות אולטרסאונד ולהרכיב אותו על הזרוע המכנית. מניחים את המתמר על occiput מוטה לאחור על ידי 30 מעלות. השתמש במצב B ובמצב CW-Doppler כדי לדמיין את עורק העורק הפנימי תוך חיים הנכון ולהעביר את המתמר עם יחידת הבקרה קדימה ואחורה עד שנמצא את הזרימה המרבית של העורקים.כדי לאסוף מידע אנטומי להשתמש במצב B המסורתית ומצב CW-דופלר ולהתחיל רכישה על ידי לחיצה על כפתור הרכישה. כדי לתעד מידע על מאפייני הזרימה של כלי הדם תוך נדריים לחץ על כפתור דופלר גל הדופק, למקם נפח מדגם במרכז הכלי ולרכוש לולאת cine יותר משלוש שניות. המשך באופן זהה עם הצד השמאלי.בשלב הבא מהירויות זרימת הדם של העורקים הראשיים הפנימיים extracranial נקבעים עם סונוגרפיה דופלקס בתדר גבוה. מניחים את העכבר במצב supine על צלחת החימום של מערכת אולטרסאונד כדי לשמור על טמפרטורת הגוף של 37 מעלות צלזיוס. לפני הבחינה הראשונה להסיר את השיער של החלק הקדמי של הצוואר עם מכונת גילוח חשמלית.לאחר מכן להסיר את השיער שנותר כימית באמצעות קרם להסרת שיער כמתואר קודם לכן. מצפים את ארבעת הגפיים של החיה במשחה מוליך ומתקן אותם עם סרט הדבקה על אלקטרודות א.ק.ג. המוטמעות בלוח. מניחים סיכה על בדיקה טמפרטורה רקטלית בזהירות להכניס אותו כדי לפקח על טמפרטורת הגוף.שימוש במנורת חימום נוספת במידת הצורך. בדוק שוב את התצוגה הנכונה של הפרמטרים הפיזיולוגיים על המסך. מצפים את החלק הקדמי של הצוואר עם ג'ל אולטרסאונד מחומם ל 37 מעלות צלזיוס.מניחים את המתמר במקביל לבעל החיים ומתאימים את התנוחה על מנת לקבל תמונות אורך של העורק הראשי הנכון. השתמש במצב B במצב CW-דופלר כדי לדמיין את עורק העורק הראשי הנכון. התמונה צריכה להכיל את העורק הראשי המשותף הנכון, את העורק הראשי הפנימי הימני ואת העורק הראשי החיצוני הנכון.כדי לאסוף מידע אנטומי להשתמש במצב B המסורתית ומצב CW-דופלר ולהתחיל רכישה על ידי לחיצה על כפתור הרכישה. כדי לתעד מידע על מאפייני הזרימה של עורק העורק הראשי החוץ-סידורי לחץ על כפתור דופלר גל הדופק, מקם את נפח הדגימה במרכז העורק הראשי המשותף עורק העורק הראשי הפנימי ועורק הראשי החיצוני ורכוש לולאת cine יותר משלוש שניות. המשך באופן זהה עם הצד השמאלי.מסיימים את ההרדמה ומסירים את החיה מלוח ההתחממות ומכניסים אותה לכלוב, מניחים באינקובטור מחומם ל-36 מעלות צלזיוס למשך שעה כדי למנוע היפותרמיה ולבדוק התאוששות מלאה. השלב הבא הוא עיבוד נתוני האולטרה-סאונד. שימוש בתחנת עבודה חיצונית לעיבוד שלאחר נתוני אולטרסאונד בתדירות גבוהה.יצא את מצב B, מצב CW-דופלר ומצב PW-דופלר תמונות לולאות cine לתוכנת Vevo LAB. פתח את מחקר אולטרסאונד מיוצא. בחר בעל חיים אחד ופתח את לולאת הסינוס PW-Doppler של עורק העורק הראשי תוך חיים.בפרוטוקול זה נרשמות בדרך כלל שבע עד שמונה פעימות לב בעקומות מהירות זרימה תואמות. השהה את לולאת הסינוס ולחץ על לחצן המדידה. בחר את חבילת כלי הדם ולחץ על RICA PSV כדי למדוד את הלחץ הסיסטולי שיא של העורק הראשי תוך חיים הנכון.עכשיו לחץ שמאלה על פסגת עקומת מהירות ולמשוך את הקו הישר לקו האפס. קבע את המדידה בלחיצה באמצעות לחצן העכבר הימני. עכשיו לבחור RICA EDV כדי למדוד את המהירות הדיאסטולית הסופית.לחץ שמאלה על הפריחה המינימלית של עקומת המהירות בסוף diastole. משוך את הקו ישר לקו האפס וקבע מידות בלחיצה באמצעות לחצן העכבר הימני. בחר RICA VTI כדי למדוד את אינטגרל זמן המהירות.לחץ שמאלה בתחילת עקומת מהירות ועקוב אחר העקומה עם עכבר עד סוף הרמה הדיאסטולית. ולאחר מכן לחץ שוב ימינה כדי לקבוע את המדידה. יצא את הנתונים של העורקים הפנימיים תוך-מוחיים באמצעות לחצן הדוח.הקש על יצא ושמור את הנתונים כקובץ דוח VSI. השתמש באותה גישה למדידת PSV, EDV ו- VTI של העורקים הראשיים הפנימיים החוץ-סידוריים הנכונים וייצא את הנתונים בהתאם. המשך באופן זהה עם הצד השמאלי ולהשתמש LICA PSV, EDV ו VTI.בחמישה עכברים ושלושה מהם SAH הושרה בעוד שניים לקבל ניתוח מזויף את מהירות זרימת הדם של העורק הפנימי תוך ורידי של העורק הראשי הפנימי extracranial נקבע יום אחד לפני הניתוח ואחד, שלושה ושבעה ימים לאחר הניתוח. לפני הניתוח, מהירויות זרימת דם נוספות תוך ורידי, כמו גם היחס בין זרימת דם תוך אסטרנציאלית היו דומים בין SAH ובעלי חיים מזויפים. ביום הראשון לאחר אינדוקציה SAH לא היו שינויים משמעותיים במהירות זרימת הדם תוך או חוץ סידורי או היחסים בין זרימת דם תוך ורידי.בימים שלוש ושבע מהירויות זרימת הדם תוך ורידי של העורק הראשי הפנימי גדלו במידה ניכרת ושניים מבעלי החיים SAH המציין vasospasm מוחי לאחר SAH. כמו מהירויות זרימת הדם extracranial נשאר כמעט ללא שינוי, היחסים של מהירויות זרימת הדם תוך אסטרניאלית גם גדל באופן משמעותי ביום השביעי בבעלי החיים SAH המציין vasospasm המוחי. לסיכום, ניתן להשתמש בסונוגרפיה דו-קרנית בתדר גבוה בצבע כדי לבצע מדידות vivo של מהירויות זרימת הדם תוך ורידי בעכברים.בדומה למצב בחולים אנושיים מהירויות זרימת הדם תוך ורידי להאיץ בעכברים לאחר SAH המציין vasospasm. השיטה האולטרה סונוגרפית המוצגת כאן היא מהירה ומעט פולשניות. זה מאפשר מחקרים אורך של vasospasm במודלים SAH מורין.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Assessment of Cerebral Lateralization in Children using Functional Transcranial Doppler Ultrasound (fTCD)

Assessment of Cerebral Lateralization in Children using Functional Transcranial Doppler Ultrasound fTCD

הערכת Lateralization מוחין אצל ילדים באמצעות אולטראסאונד דופלר פונקציונלית Transcranial (fTCD)

There are many unanswered questions about cerebral lateralization.  In particular, it remains unclear which aspects of language and nonverbal ability are ...

Autologous Blood Injection to Model Spontaneous Intracerebral Hemorrhage in Mice

הזרקת דם עצמיים על דגם דימום intracerebral ספונטנית עכברים

Investigation of the pathophysiology of injury after intracerebral
hemorrhage (ICH) requires a reproducible animal model.  While ICH
accounts for 10-15% ...

A Rat Model of Mild Intrauterine Hypoperfusion with Microcoil Stenosis

מודל עכברוש של זילוח תוך רחמי קלה עם היצרות Microcoil

Intrauterine hypoperfusion/ischemia is one of the major causes of intrauterine/fetal growth restriction, preterm birth, and low birth weight. Most studies ...

A Volumetric Method for Quantification of Cerebral Vasospasm in a Murine Model of Subarachnoid Hemorrhage

שיטה הנפחי עבור כימות Vasospasm המוחית במודל מאתר של דימום תת-עכבישי

Subarachnoid hemorrhage (SAH) is a subtype of hemorrhagic stroke. Cerebral vasospasm that occurs in the aftermath of the bleeding is an important factor ...

Double Direct Injection of Blood into the Cisterna Magna as a Model of Subarachnoid Hemorrhage

הזרקת דם ישירה כפולה לתוך מגנה צ'יסטרנה כודל של דימום Subarachnoid

Among strokes, subarachnoid hemorrhage (SAH) consecutive to the rupture of a cerebral arterial aneurysm represents 5-9% but is responsible for about 30% ...

Pre-Chiasmatic, Single Injection of Autologous Blood to Induce Experimental Subarachnoid Hemorrhage in a Rat Model

טרום כיאזמטי, הזרקה יחידה של דם אוטולוגי כדי לגרום לדימום ניסיוני subarachnoid במודל חולדה

Despite advances in treatment over the last decades, subarachnoid hemorrhage (SAH) continues to carry a high burden of morbidity and mortality, largely ...

Endovascular Perforation Model for Subarachnoid Hemorrhage Combined with Magnetic Resonance Imaging (MRI)

Endovascular Perforation Model for Subarachnoid Hemorrhage Combined with Magnetic Resonance Imaging MRI

מודל ניקוב אנדווסקולרי לדימום תת-עכבישי בשילוב עם דימום תהודה מגנטית (MRI)

The endovascular filament perforation model to mimic subarachnoid hemorrhage (SAH) is a commonly used model - however, the technique can cause a high ...

Modeling Neonatal Intraventricular Hemorrhage Through Intraventricular Injection of Hemoglobin

דוגמנות דימום תוך חדרי ילודים באמצעות הזרקה תוך-חדרית של המוגלובין

Neonatal intraventricular hemorrhage (IVH) is a common consequence of premature birth and leads to brain injury, posthemorrhagic hydrocephalus (PHH), and ...

Establishing a Transcranial Middle Cerebral Artery Occlusion Mice Model

A Modified Transcranial Middle Cerebral Artery Occlusion Model to Study Stroke Outcomes in Aged Mice

Innovative Techniques and Future Directions in Stroke Research (Video) | JoVE

מודל שונה של חסימת עורק מוחי אמצעי טרנס-גולגולתי לחקר תוצאות שבץ מוחי בעכברים מזדקנים

In experimental stroke research, middle cerebral artery occlusion (MCAO) with an intraluminal filament is widely used to model ischemic stroke in mice. ...

Chinese Massage Techniques: Enhancing Motor Function in Cerebral Palsy Rats

Abdominal Massage to Improve Motor Dysfunction in Rats with Cerebral Palsy

Exploring the Potential of Massage Therapy in Cerebral Palsy Using Animal Models (Video) | JoVE

עיסוי בטן לשיפור תפקוד מוטורי אצל חולדות עם שיתוק מוחין

Cerebral palsy (CP) is a disease with a high disability rate and morbidity. The clinical symptoms of cerebral palsy are motor dysfunction and abnormal ...