Name: analysis of cerebral vasospasm in a murine model of subarachnoid hemorrhage with high frequency transcranial duplex ultrasound
Uploaded: 2021-06-03T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Analysis of Cerebral Vasospasm in a Murine Model of Subarachnoid Hemorrhage with High Frequency Transcranial Duplex Ultrasound at JoVE.com

저자는 비디오에서 일러스트의 준비스테판 킨델에게 감사드립니다. PW, MM 및 SHK는 독일 연방 교육 연구부(BMBF 01EO1503)의 지원을 받았습니다. 이 작품은 독일 연구 재단 (DFG INST 371/47-1 FUGG)의 대규모 계측 보조금에 의해 지원되었다. MM은 엘스 크뢰너-프레세니우스-스티퉁(2020_EKEA.144)의 보조금으로 지원되었다.

동물 실험은 책임있는 동물 관리위원회 (Landesuntersuchungsamt Rheinland-Pfalz)에 의해 승인되고 독일 동물 복지법 (TierSchG)에 따라 실시되었습니다. 동물의 치료와 사용에 대한 모든 해당 국제, 국가 및 제도적 지침이 준수되었습니다. 이 연구에서는 19-21 g 사이의 체중으로 11-12 주 세 여성 C57BL/6N 마우스에서 두개 내 및 두개골 동맥의 혈류 속도의 측정을 수행했습니다. 마우스는 SAH 유도 또는 가짜 수술을 ?...

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	<li>Macdonald, R. L., Schweizer, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spontaneous+subarachnoid+haemorrhage.">Spontaneous subarachnoid haemorrhage.</a> Lancet. 389 (10069), 655-666 (2017).</li><li>Macdonald, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Delayed+neurological+deterioration+after+subarachnoid+haemorrhage.">Delayed neurological deterioration after subarachnoid haemorrhage.</a> Nature Reviews Neurology. 10 (1), 44-58 (2014).</li><li>Francoeur, C. L., Mayer, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Management+of+delayed+cerebral+ischemia+after+subarachnoid+hemorrhage.">Management of delayed cerebral ischemia after subarachnoid hemorrhage.</a> Critical Care. 20 (1), 277 (2016).</li><li>van Lieshout, J. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+introduction+to+the+pathophysiology+of+aneurysmal+subarachnoid+hemorrhage.">An introduction to the pathophysiology of aneurysmal subarachnoid hemorrhage.</a> Neurosurgical Review. , (2017).</li><li>Altay, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+method+for+subarachnoid+hemorrhage+to+induce+vasospasm+in+mice.">A novel method for subarachnoid hemorrhage to induce vasospasm in mice.</a> J Neurosci Methods. 183 (2), 136-140 (2009).</li><li>Momin, E. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Controlled+delivery+of+nitric+oxide+inhibits+leukocyte+migration+and+prevents+vasospasm+in+haptoglobin+2-2+mice+after+subarachnoid+hemorrhage.">Controlled delivery of nitric oxide inhibits leukocyte migration and prevents vasospasm in haptoglobin 2-2 mice after subarachnoid hemorrhage.</a> Neurosurgery. 65 (5), 937-945 (2009).</li><li>Froehler, M. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vasospasm+after+subarachnoid+hemorrhage+in+haptoglobin+2-2+mice+can+be+prevented+with+a+glutathione+peroxidase+mimetic.">Vasospasm after subarachnoid hemorrhage in haptoglobin 2-2 mice can be prevented with a glutathione peroxidase mimetic.</a> Journal of Clinical Neuroscience. 17 (9), 1169-1172 (2010).</li><li>Provencio, J. J., Altay, T., Smithason, S., Moore, S. K., Ransohoff, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Depletion+of+Ly6G/C(+)+cells+ameliorates+delayed+cerebral+vasospasm+in+subarachnoid+hemorrhage.">Depletion of Ly6G/C(+) cells ameliorates delayed cerebral vasospasm in subarachnoid hemorrhage.</a> Journal of Neuroimmunology. 232 (1-2), 94-100 (2011).</li><li>Kamp, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+a+murine+single-blood-injection+SAH+model.">Evaluation of a murine single-blood-injection SAH model.</a> PLoS One. 9 (12), 114946 (2014).</li><li>Luh, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Contractile+Apparatus+Is+Essential+for+the+Integrity+of+the+Blood-Brain+Barrier+After+Experimental+Subarachnoid+Hemorrhage.">The Contractile Apparatus Is Essential for the Integrity of the Blood-Brain Barrier After Experimental Subarachnoid Hemorrhage.</a> Translational Stroke Research. , (2018).</li><li>Neulen, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Volumetric+Method+for+Quantification+of+Cerebral+Vasospasm+in+a+Murine+Model+of+Subarachnoid+Hemorrhage.">A Volumetric Method for Quantification of Cerebral Vasospasm in a Murine Model of Subarachnoid Hemorrhage.</a> Journal of Visualized Experiments. (137), (2018).</li><li>Neulen, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Large+Vessel+Vasospasm+Is+Not+Associated+with+Cerebral+Cortical+Hypoperfusion+in+a+Murine+Model+of+Subarachnoid+Hemorrhage.">Large Vessel Vasospasm Is Not Associated with Cerebral Cortical Hypoperfusion in a Murine Model of Subarachnoid Hemorrhage.</a> Translational Stroke Research. , (2018).</li><li>Neulen, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neutrophils+mediate+early+cerebral+cortical+hypoperfusion+in+a+murine+model+of+subarachnoid+haemorrhage.">Neutrophils mediate early cerebral cortical hypoperfusion in a murine model of subarachnoid haemorrhage.</a> Scientific Reports. 9 (1), 8460 (2019).</li><li>Neulen, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Volumetric+analysis+of+intracranial+vessels:+a+novel+tool+for+evaluation+of+cerebral+vasospasm.">Volumetric analysis of intracranial vessels: a novel tool for evaluation of cerebral vasospasm.</a> Int J Comput Assist Radiol Surg. 14 (1), 157-167 (2019).</li><li>Washington, C. W., Zipfel, G. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Participants+in+the+International+Multi-disciplinary+Consensus+Conference+on+the+Critical+Care+Management+of+Subarachnoid,+H.+Detection+and+monitoring+of+vasospasm+and+delayed+cerebral+ischemia:+a+review+and+assessment+of+the+literature.">Participants in the International Multi-disciplinary Consensus Conference on the Critical Care Management of Subarachnoid, H. Detection and monitoring of vasospasm and delayed cerebral ischemia: a review and assessment of the literature.</a> NeuroCritical Care. 15 (2), 312-317 (2011).</li><li>Greke, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Image-guided+transcranial+Doppler+sonography+for+monitoring+of+defined+segments+of+intracranial+arteries.">Image-guided transcranial Doppler sonography for monitoring of defined segments of intracranial arteries.</a> Journal of Neurosurgical Anesthesiology. 25 (1), 55-61 (2013).</li><li>Neulen, A., Prokesch, E., Stein, M., Konig, J., Giese, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Image-guided+transcranial+Doppler+sonography+for+monitoring+of+vasospasm+after+subarachnoid+hemorrhage.">Image-guided transcranial Doppler sonography for monitoring of vasospasm after subarachnoid hemorrhage.</a> Clinical Neurology and Neurosurgery. 145, 14-18 (2016).</li><li>Neulen, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Image-Guided+Transcranial+Doppler+Ultrasound+for+Monitoring+Posthemorrhagic+Vasospasms+of+Infratentorial+Arteries:+A+Feasibility+Study.">Image-Guided Transcranial Doppler Ultrasound for Monitoring Posthemorrhagic Vasospasms of Infratentorial Arteries: A Feasibility Study.</a> World Neurosurgery. 134, 284-291 (2020).</li><li>Neulen, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Correlation+of+cardiac+function+and+cerebral+perfusion+in+a+murine+model+of+subarachnoid+hemorrhage.">Correlation of cardiac function and cerebral perfusion in a murine model of subarachnoid hemorrhage.</a> Scientific Reports. 11 (1), 3317 (2021).</li><li>Neulen, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+segmentation-based+volumetric+approach+to+localize+and+quantify+cerebral+vasospasm+based+on+tomographic+imaging+data.">A segmentation-based volumetric approach to localize and quantify cerebral vasospasm based on tomographic imaging data.</a> PLoS One. 12 (2), 0172010 (2017).</li><li>Marbacher, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Systematic+Review+of+In+Vivo+Animal+Models+of+Subarachnoid+Hemorrhage:+Species,+Standard+Parameters,+and+Outcomes.">Systematic Review of In Vivo Animal Models of Subarachnoid Hemorrhage: Species, Standard Parameters, and Outcomes.</a> Translational Stroke Research. , (2018).</li><li>Figueiredo, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+digital+subtraction+angiography,+micro-computed+tomography+angiography+and+magnetic+resonance+angiography+in+the+assessment+of+the+cerebrovascular+system+in+live+mice.">Comparison of digital subtraction angiography, micro-computed tomography angiography and magnetic resonance angiography in the assessment of the cerebrovascular system in live mice.</a> Clinical Neuroradiology. 22 (1), 21-28 (2012).</li><li>Lindegaard, K. F., Nornes, H., Bakke, S. J., Sorteberg, W., Nakstad, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cerebral+vasospasm+diagnosis+by+means+of+angiography+and+blood+velocity+measurements.">Cerebral vasospasm diagnosis by means of angiography and blood velocity measurements.</a> Acta Neurochirurgica. 100 (1-2), 12-24 (1989).</li><li>Cassia, G. S., Faingold, R., Bernard, C., Sant'Anna, G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neonatal+hypoxic-ischemic+injury:+sonography+and+dynamic+color+Doppler+sonography+perfusion+of+the+brain+and+abdomen+with+pathologic+correlation.">Neonatal hypoxic-ischemic injury: sonography and dynamic color Doppler sonography perfusion of the brain and abdomen with pathologic correlation.</a> American Journal of Roentgenology. 199 (6), 743-752 (2012).</li><li>Shen, Q., Stuart, J., Venkatesh, B., Wallace, J., Lipman, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inter+observer+variability+of+the+transcranial+Doppler+ultrasound+technique:+impact+of+lack+of+practice+on+the+accuracy+of+measurement.">Inter observer variability of the transcranial Doppler ultrasound technique: impact of lack of practice on the accuracy of measurement.</a> Journal of Clinical Monitoring and Computing. 15 (3-4), 179-184 (1999).</li></ol>

우리의 지식의 최고에, 이 연구는 고주파 경두개 색 으로 코딩 된 듀플렉스 초음파와 SAH의 뮤린 모델에서 뇌 혈관 경련의 모니터링을위한 프로토콜을 제시하는 첫번째입니다. 우리는 이 방법이 마우스에 있는 SAH 유도 후에 두개 내 혈류 속도의 증가를 측정할 수 있다는 것을 보여줍니다. 인간 의학에서 이 현상은 잘 알려져있다3,15. 몇몇 임상 연구는 큰 ...

자발적인 지주막 출혈 (SAH)은 주로 두개 내 동맥류1의파열로 인한 출혈성 뇌졸중의 한 형태이다. 신경학적 결과는 주로 출혈의 효과와 관련된 과도 글로벌 뇌 허혈의 영향으로 인한 조기 뇌 손상(EBI)과 출혈2,3다음 주 동안 발생하는 지연된 대뇌 허혈(DCI)의 두 가지 요인에 의해 좌우된다. DCI는 SAH 환자의 최대 30%에 영향을 미치는 것으로 보고되었다2. DCI의 병리학은 혈관 신생 뇌 혈관 경련, 미세 혈관 경련 및 미세 혈전증으로 인한 방해 된 미세 순환, 피질 확산 우울증 및 염증4에의해 유발되는 효과를 포함한다. 불행하게도, 정확한 병리 생리학은 불분명남아 효과적으로 DCI3을방지하는 가능한 치료가 없습니다. 따라서 DCI는 많은 임상 및 실험 연구에서 조사됩니다.
요즘, SAH에 대한 대부분의 실험 연구는 특히 마우스5,6,7,8,9,10,11,12,13에서작은 동물 모델을 사용합니다. 이러한 연구에서, 대뇌 혈관 경련은 자주 끝점으로 조사. 혈관 경련 ex vivo의 정도를 결정하는 것이 일반적입니다. 이것은 짧은 마취 시간을 요구하고 동물에 작은 고민만 부과하는 뇌 혈관 경련의 생체 내 검사에 대한 비침습적 방법이 부족하기 때문이다. 그러나 생체 내에서 뇌 혈관 경련을 검사하는 것이 유리할 것입니다. 이것은 마우스에 있는 혈관 경련에 생체 내 연구 결과에 있는 세로 연구를 허용할 것이기 때문입니다 (즉, SAH의 유도 후에 일 도중 다른 시점에서 뇌 혈관 경련의 화상 진찰). 이렇게 하면 다른 시점에서 획득한 데이터의 비교도가 향상됩니다. 또한, 세로 학습 설계를 사용하는 것은 동물 수를 줄이는 전략입니다.
여기서 우리는 마우스에 있는 대뇌 동맥에 있는 혈류를 결정하기 위하여 고주파 경두개 초음파의 사용을 보여줍니다. 우리는 두개골 도플러 소노그래피 (TCD) 또는 경두개 색으로 구분된 이중 소노그래피 (TCCD)와 유사한 임상 실습14,15,16,17,18,이 방법은 자궁 내 의 혈류 속도를 측정하여 뇌 혈관 경련을 모니터링하는 데 사용될 수 있음을 보여줍니다.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Balea hair removal creme</td>
			<td>Balea; Germany</td>
			<td>ASIN B0759XM39V</td>
			<td>hair removal creme</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>C57BL/6N mice</td>
			<td>Janvier; Saint-Berthevin Cedex, France</td>
			<td>n.a.</td>
			<td>mice</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Corneregel</td>
			<td>Bausch&#38;Lomb; Rochester, NY, USA</td>
			<td>REF 81552983</td>
			<td>eye ointment, lube</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>cotton swabs</td>
			<td>Hecht Assistent; Sondenheim vor der R&#246;hn, Germany</td>
			<td>REF 44302010</td>
			<td>cotton swabs</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ecco-XS razor</td>
			<td>Tondeo; Soligen, Germany</td>
			<td>DE 28693396</td>
			<td>razor</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electrode cream</td>
			<td>GE; Boston, MA, USA</td>
			<td>REF 21708318</td>
			<td>conductive paste</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heating plate</td>
			<td>Medax; Kiel, Germany</td>
			<td>2005-205-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>Abvie; Wiesbaden, Germany</td>
			<td>n.a.</td>
			<td>volatile anesthetic</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Leukofix</td>
			<td>BSN medical; Hamburg, Germany</td>
			<td>REF 02137-00</td>
			<td>tape</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mechanical arm + micromanipulator</td>
			<td>VisualSonics; FujiFilm, Toronto, CA</td>
			<td>P/N 11277</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microbac tissues</td>
			<td>Paul Hartmann AG; Hamburg, Germany</td>
			<td>REF 981387</td>
			<td>antimicrobial tissues</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MZ400, 38 MHz linear array transducer</td>
			<td>VisualSonics; FujiFilm, Toronto, CA</td>
			<td>REF 51068-30</td>
			<td>ultrasound transducer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sonosid</td>
			<td>ASID Bonz GmbH; Herrenberg, Germany</td>
			<td>REF 782010</td>
			<td>ultrasonography gel</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultrasound platform with heating plate and ECG-recording</td>
			<td>VisualSonics; FujiFilm, Toronto, CA</td>
			<td>P/N 11179</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>UniVet-Porta</td>
			<td>Groppler; Oberperasberg, Germany</td>
			<td>S/N BKGM0437</td>
			<td>isoflurane vaporizer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vevo3100</td>
			<td>VisualSonics; FujiFilm, Toronto, CA</td>
			<td>REF 51073-45</td>
			<td>ultrasonography device</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>VevoLab software</td>
			<td>VisualSonics; FujiFilm, Toronto, CA</td>
			<td>n.a.</td>
			<td>evaluation software</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

analysis of cerebral vasospasm in a murine model of subarachnoid hemorrhage with high frequency transcranial duplex ultrasound

치피 뇌졸중의 일종인 체해 출혈 후 몇 주 후에 발생하는 뇌 혈관질은 뇌허혈지연에 기여합니다. SAH의 뮤린 모델을 사용하여 실험 연구에서 발생하는 문제는 마우스에서 뇌 혈관 경련의 생체 내 모니터링방법이 부족하다는 것입니다. 여기서, 우리는 마우스에 대한 경두개 이중 초음파 검사를 수행하기 위해 고주파 초음파의 적용을 보여줍니다. 이 방법을 사용하여 내부 경동맥(ICA)을 식별할 수 있습니다. 두개내 IcA의 혈류 속도는 SAH의 유도 후 크게 가속화되었으며, 두개골 ICA의 혈류 속도는 뇌 혈관 경련을 나타내는 낮은 상태를 유지했습니다. 결론적으로, 여기서 입증된 방법은 뮤린 SAH 모델에서 뇌 혈관경련의 기능적 비침습적 생체 내 모니터링을 허용한다.

6마리의 마우스에서, 3마리가 샴 수술을 받는 동안 내측 경동맥(ICA)과 자궁내경동맥(ICA)의 혈류 속도가 수술 1일 전에 결정되었고, 수술 후 1일, 3, 7일 동안 내혈관 필라멘트 천공 모델을 사용하여 SAH를 유도하였다. 측정은 37°C19에서체온을 유지하면서 이소플루란을 가진 마취하에 다른 연구의 에코카르디그래피 검사의 일환으로 수행되었다.
수술 전, 초두개 ?...

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Analysis of Cerebral Vasospasm in a Murine Model of Subarachnoid Hemorrhage with High Frequency Transcranial Duplex Ultrasound

이 원고의 목적은 마우스의 대뇌 동맥에서 혈류의 생체 내 이미징을 허용하는 초음파 기반 방법을 제시하는 것입니다. 우리는 지주 막 증 출혈의 뮤린 모델에서 혈관 경련과 관련 된 혈액 흐름 속도의 변화를 결정 하기 위해 그것의 응용 프로그램을 보여줍니다 (SAH).

고주파 두개골 이중 초음파를 가진 수브라크누이드 출혈의 뮤린 모형에 있는 뇌 혈관경련의 분석

Cerebral vasospasm that occurs in the weeks after subarachnoid hemorrhage, a type of hemorrhagic stroke, contributes to delayed cerebral ischemia. A ...

이 절차의 전반적인 목표는 생체 내 마우스에서 지주 막 증 후 뇌 혈관 경련을 모니터링 하는 것입니다. 이것은 이소플루란과 마취 하에 고주파 색으로 구분된 이중 음모의 적용에 의해 달성된다. 이미징 데이터는 내외 및 외두개 내 경동맥의 혈류 속도를 결정하기 위해 처리됩니다.가속화된 두개내 혈류 속도는 뇌혈관경련을 나타낸다. 이 연구에서는, 우리는 11에서 12 주 세 여성, C57BL/6N 마우스에 있는 두개 내 및 외두개 동맥의 혈류 속도의 측정을 능력을 발휘했습니다. 마우스는 다른 곳에서 상세히 기술된 SAH 유도 또는 가짜 수술을 실시하였다.초음파 기계에 초음파 검사 스위치를 준비하고 동물 ID를 입력하려면 초음파 시스템의 가열 판을 섭씨 37도로 따뜻하게하십시오. 직장 온도 프로브를 사용할 준비가 되었는지 확인합니다. 따뜻한 수조를 사용하여 초음파 젤을 섭씨 37도까지 가열하십시오.제모 크림, 전극과 눈 연고에 대한 접촉 크림을 준비합니다. 트랜스듀서가 기계식 팔에 제대로 장착되어 있는지 확인하고 마취 유도챔버가 4%이소플루란과 40%의 산소로 플러시되도록 하십시오. 1 분 동안 챔버에 마우스를 넣어 마취를 유도.연고로 눈을 보호하십시오. 충분히 깊은 마취에 도달 한 후에만 계속하십시오. 전체 절차 전반에 걸쳐 마취 마스크를 사용하여 1.5 %의 이소플루란과 40 %의 산소로 마취를 유지하십시오.첫 번째 단계에서, 두개 내 내 경동맥의 혈류 속도는 경두개 고주파 이중 음모로 결정된다. 체온 37도를 유지하기 위해 초음파 시스템의 가열 판에 마우스를 놓습니다. 양쪽에 눈 연고를 바르습니다.첫 번째 시험 전에 전기 면도기로 occiput의 털을 줄입니다. 그런 다음 제모 크림을 사용하여 화학적으로 남은 모발을 제거합니다. 면봉을 사용하여 모발이 빠지기 시작할 때까지 크림을 2분 간 문질러 보냅니다.추가 2 분 후 주걱으로 크림과 머리를 제거하고 알코올 피부 방부제로 피부를 소독. 전도성 페이스트로 동물의 네 가지 사지를 코팅하고 보드에 내장 된 심전도 전극에 테이프로 고정합니다. 직장 온도 프로브에 윤활유를 놓고 필요한 경우 추가 온난화 램프를 사용하여 체온을 모니터링하기 위해 조심스럽게 삽입하십시오.생리학적 매개 변수, 심전도 및 호흡 신호가 초음파 시스템의 화면에 올바르게 표시되는지 확인하십시오. 필요한 경우, 마취의 수준은 분당 4 ~ 500 비트의 목표 심박수를 얻기 위해 조정 될 수있다. 초음파 젤로 코팅하십시오.선형 어레이 트랜스듀서와 초당 200프레임 이상의 프레임 속도를 사용하여 초음파 이미지를 획득하고 기계식 암에 장착합니다. 트랜스듀서를 30도 뒤로 기울인 occiput에 놓습니다. B 모드와 CW-도플러 모드를 사용하여 오른쪽 두개 내 내부 경동맥을 시각화하고 동맥의 최대 흐름을 찾을 때까지 제어 장치로 트랜스듀서를 앞뒤로 이동합니다.해부학 정보를 수집하려면 기존의 B 모드 와 CW-도플러 모드를 사용하고 획득 버튼을 클릭하여 수집을 시작합니다. 두개내 선박의 유동 특성에 대한 정보를 기록하려면 펄스 파 도플러 버튼을 클릭하고, 시료 부피를 용기 중앙에 놓고 3초 이상 시네 루프를 획득한다. 왼쪽과 동일하게 진행합니다.다음 단계에서 초두개 내부 경동맥의 혈류 속도는 고주파 이중 음모로 결정된다. 37°C의 체온을 유지하기 위해 초음파 시스템의 가열 판에 마우스를 배치합니다. 첫 번째 시험 전에 전기 면도기와 목 앞의 머리카락을 제거합니다.그런 다음 이전에 설명한 바와 같이 제모 크림을 사용하여 화학적으로 남은 모발을 제거하십시오. 전도성 페이스트로 동물의 네 가지 사지를 코팅하고 보드에 내장 된 심전도 전극에 테이프로 고정합니다. 직장 온도 프로브에 윤활유를 놓고 조심스럽게 삽입하여 체온을 모니터링합니다.필요한 경우 추가 온난화 램프를 사용하십시오. 화면에 생리 적 매개 변수의 올바른 디스플레이를 다시 확인합니다. 37°C까지 따뜻하게 데운 초음파 젤로 목 앞쪽을 코팅합니다.트랜스듀서를 동물과 평행하게 배치하고 올바른 경동맥의 세로 이미지를 얻기 위해 위치를 조정한다. B 모드 CW-도플러 모드를 사용하여 올바른 경동맥을 시각화합니다. 이미지에는 올바른 일반적인 경동맥, 올바른 내부 경동맥 및 올바른 외부 경동맥이 포함되어야 합니다.해부학 정보를 수집하려면 기존의 B 모드 와 CW-도플러 모드를 사용하고 획득 버튼을 클릭하여 수집을 시작합니다. 초두개 동맥의 흐름 특성에 대한 정보를 기록하려면 맥박파 도플러 버튼을 클릭하고, 내부 경동맥 과 외부 경동맥을 공통 경동맥의 중앙에 시료 부피를 놓고 3초 이상 시네 루프를 획득한다. 왼쪽과 동일하게 진행합니다.마취를 종료하고 온난화 플레이트에서 동물을 제거하고 저체온증을 방지하고 완전한 회복을 확인하기 위해 1 시간 동안 섭씨 36도로 가열 된 인큐베이터에 넣은 케이지에 넣습니다. 다음 단계는 초음파 데이터를 처리하는 것입니다. 고주파 초음파 데이터의 후처리를 위해 외부 워크스테이션을 사용하는 경우.B 모드, CW-도플러 모드 및 PW-도플러 모드 이미지와 시네 루프를 베보 LAB 소프트웨어로 내보세요. 수출 된 초음파 연구를 엽니 다. 한 동물을 선택하고 두개 내 경동맥의 PW-도플러 시네 루프를 엽니다.이 프로토콜에서는 일반적으로 해당 흐름 속도 곡선에서 7~8개의 하트비트가 기록됩니다. 시네 루프를 일시 중지하고 측정 버튼을 클릭합니다. 혈관 패키지를 선택하고 RICA PSV를 클릭하여 오른쪽 두개내 경동맥의 피크 수축기 압력을 측정합니다.이제 속도 곡선의 피크를 왼쪽으로 클릭하고 직선을 0 선으로 당깁니다. 오른쪽 마우스 버튼을 클릭하여 측정을 결정합니다. 이제 RICA EDV를 선택하여 최종 확장기 속도를 측정합니다.디아스톨 끝에 있는 속도 곡선의 최소한의 발진을 왼쪽으로 클릭합니다. 선을 0선으로 바로 당기고 오른쪽 마우스 버튼을 클릭하여 측정을 결정합니다. RICA VTI를 선택하여 속도 시간을 일체측정합니다.속도 곡선의 시작 부분에 왼쪽을 클릭하고 확장기 고원의 끝까지 마우스와 곡선을 따릅니다. 그런 다음 마우스를 다시 클릭하여 측정을 결정합니다. 보고서 버튼을 사용하여 인트레이스 내경 동맥의 데이터를 내보냅니다.내보내기를 누르고 데이터를 VSI 보고서 파일로 저장합니다. 오른쪽 두개골 내부 경동맥의 PSV, EDV 및 VTI를 측정하고 그에 따라 데이터를 내보낼 수 있는 동일한 접근 방식을 사용합니다. 왼쪽과 동일하게 진행하고 LICA PSV, EDV 및 VTI를 사용합니다.5마리의 마우스와 3마리의 마우스에서 2마리가 가짜 수술을 받는 동안 유도되었고, 두개내 내동맥의 혈류 속도와 자궁 내경동맥의 혈류 속도는 수술 1일 전, 수술 후 1일, 3일, 7일 후에 결정되었다. 수술 전, 추가 및 두개 내 혈류 속도뿐만 아니라 내외 및 외두개 혈류의 비율은 SAH와 가짜 동물 사이에 유사했습니다. SAH 유도 후 첫날에는 내외 또는 두개 폐혈 속도 또는 인트라 및 외두개 혈류 사이의 비율에 큰 변화가 없었습니다.3일과 7일에 내부 경동맥의 두개내 혈류 속도가 현저하게 증가했으며 SAH 후 뇌 혈관 경련을 나타내는 SAH 동물 중 두 마리가 현저하게 증가했습니다. 두개골 혈류 속도가 거의 변하지 않았기 때문에 뇌 혈관 경련을 나타내는 SAH 동물의 7 일째에 내장 및 두개골 혈류 속도의 비율도 크게 증가했습니다. 결론적으로 고주파 색으로 구분된 경두개 이중 초음파 초음파 초음파 는 마우스에서 두개 내 혈류의 속도의 생체 측정을 수행하는 데 사용될 수 있다.혈관 경련을 나타내는 SAH 후 마우스에서 두개 내 혈류 속도가 가속화되는 인간 환자의 상황과 유사합니다. 여기에 표시된 매우 초음파 학적 방법은 빠르고 침략성이 거의 없습니다. 그것은 뮤린 SAH 모델에서 혈관 경련의 세로 연구를 허용합니다.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Assessment of Cerebral Lateralization in Children using Functional Transcranial Doppler Ultrasound (fTCD)

Assessment of Cerebral Lateralization in Children using Functional Transcranial Doppler Ultrasound fTCD

기능 Transcranial 도플러 초음파를 사용하여 어린이의 대뇌 Lateralization 평가 (fTCD)

There are many unanswered questions about cerebral lateralization.  In particular, it remains unclear which aspects of language and nonverbal ability are ...

연구

신경과학

Autologous Blood Injection to Model Spontaneous Intracerebral Hemorrhage in Mice

마우스에서 자연 했습니다만 출혈을 모델로 Autologous 혈액 주입

Investigation of the pathophysiology of injury after intracerebral
hemorrhage (ICH) requires a reproducible animal model.  While ICH
accounts for 10-15% ...

A Rat Model of Mild Intrauterine Hypoperfusion with Microcoil Stenosis

Microcoil 협와 가벼운 자궁내 Hypoperfusion의 쥐 모델

Intrauterine hypoperfusion/ischemia is one of the major causes of intrauterine/fetal growth restriction, preterm birth, and low birth weight. Most studies ...

A Volumetric Method for Quantification of Cerebral Vasospasm in a Murine Model of Subarachnoid Hemorrhage

거미 막 밑 출혈의 Murine 모델에 대뇌 Vasospasm의 정량화에 대 한 체적 메서드

Subarachnoid hemorrhage (SAH) is a subtype of hemorrhagic stroke. Cerebral vasospasm that occurs in the aftermath of the bleeding is an important factor ...

Double Direct Injection of Blood into the Cisterna Magna as a Model of Subarachnoid Hemorrhage

수브라크누드 출혈의 모델로 시스테나 마그나에 혈액을 이중 직접 주입

Among strokes, subarachnoid hemorrhage (SAH) consecutive to the rupture of a cerebral arterial aneurysm represents 5-9% but is responsible for about 30% ...

Pre-Chiasmatic, Single Injection of Autologous Blood to Induce Experimental Subarachnoid Hemorrhage in a Rat Model

쥐 모델에서 실험적 지주막하 출혈을 유도하기 위한 자가 혈액의 Pre-chiasmatic, 단일 주사

Despite advances in treatment over the last decades, subarachnoid hemorrhage (SAH) continues to carry a high burden of morbidity and mortality, largely ...

Endovascular Perforation Model for Subarachnoid Hemorrhage Combined with Magnetic Resonance Imaging (MRI)

Endovascular Perforation Model for Subarachnoid Hemorrhage Combined with Magnetic Resonance Imaging MRI

자기 공명 영상(MRI)과 결합된 Subarachnoid 출혈에 대한 혈관 내 천공 모델

The endovascular filament perforation model to mimic subarachnoid hemorrhage (SAH) is a commonly used model - however, the technique can cause a high ...

Modeling Neonatal Intraventricular Hemorrhage Through Intraventricular Injection of Hemoglobin

헤모글로빈의 뇌실내 주사를 통한 신생아 뇌실내 출혈 모델링

Neonatal intraventricular hemorrhage (IVH) is a common consequence of premature birth and leads to brain injury, posthemorrhagic hydrocephalus (PHH), and ...

Establishing a Transcranial Middle Cerebral Artery Occlusion Mice Model

A Modified Transcranial Middle Cerebral Artery Occlusion Model to Study Stroke Outcomes in Aged Mice

Innovative Techniques and Future Directions in Stroke Research (Video) | JoVE

늙은 쥐의 뇌졸중 결과를 연구하기 위해 수정된 경두개 중뇌동맥 폐색 모델

In experimental stroke research, middle cerebral artery occlusion (MCAO) with an intraluminal filament is widely used to model ischemic stroke in mice. ...

Chinese Massage Techniques: Enhancing Motor Function in Cerebral Palsy Rats

Abdominal Massage to Improve Motor Dysfunction in Rats with Cerebral Palsy

Exploring the Potential of Massage Therapy in Cerebral Palsy Using Animal Models (Video) | JoVE

뇌성마비가 있는 쥐의 운동 기능 장애를 개선하기 위한 복부 마사지

Cerebral palsy (CP) is a disease with a high disability rate and morbidity. The clinical symptoms of cerebral palsy are motor dysfunction and abnormal ...