Name: using chicken embryo as a powerful tool in assessment of developmental cardiotoxicities
Uploaded: 2021-03-21T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Using Chicken Embryo as a Powerful Tool in Assessment of Developmental Cardiotoxicities at JoVE.com

وقد دعم هذا العمل المؤسسة الوطنية للعلوم الطبيعية في الصين (المنحة رقم 91643203، 91543208، 81502835).

وقد وافقت اللجنة المؤسسية لرعاية الحيوان واستخدامه التابعة لجامعة تشينغداو على جميع الإجراءات الموصوفة. في مختبرنا، تم احتضان البيض في حاضنتين. تم وضع البيض منتصبا في الحاضنة ووضع بشكل عشوائي على الرفوف. وكانت ظروف حضانة البيض على النحو التالي: بدأت درجة حرارة الحضانة عند 37.9 درجة مئوية، ?...

<ol>
	<li>Kain, K. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+chick+embryo+as+an+expanding+experimental+model+for+cancer+and+cardiovascular+research.">The chick embryo as an expanding experimental model for cancer and cardiovascular research.</a> Developmental Dynamics. 243 (2), 216-228 (2014).</li><li>Menna, T. M., Mortola, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+posture+on+the+respiratory+mechanics+of+the+chick+embryo.">Effects of posture on the respiratory mechanics of the chick embryo.</a> Journal of Experimental Zoology. 293 (5), 450-455 (2002).</li><li>Hamburger, V., Hamilton, H. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+series+of+normal+stages+in+the+development+of+the+chick+embryo.">A series of normal stages in the development of the chick embryo.</a> Journal of Morphology. 88 (1), 49-92 (1951).</li><li>Yamamoto, F. Y., Neto, F. F., Freitas, P. F., Oliveira Ribeiro, C. A., Ortolani-Machado, C. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cadmium+effects+on+early+development+of+chick+embryos.">Cadmium effects on early development of chick embryos.</a> Environmental Toxicology and Pharmacology. 34 (2), 548-555 (2012).</li><li>Lv, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+roles+of+bone+morphogenetic+protein+2+in+perfluorooctanoic+acid+induced+developmental+cardiotoxicity+and+l-carnitine+mediated+protection.">The roles of bone morphogenetic protein 2 in perfluorooctanoic acid induced developmental cardiotoxicity and l-carnitine mediated protection.</a> Toxicology and Applied Pharmacology. 352, 68-76 (2018).</li><li>Kmecick, M., Vieira da Costa, M. C., Oliveria Ribeiro, C. A., Ortolani-Machado, C. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Morphological+evidence+of+neurotoxic+effects+in+chicken+embryos+after+exposure+to+perfluorooctanoic+acid+(PFOA)+and+inorganic+cadmium.">Morphological evidence of neurotoxic effects in chicken embryos after exposure to perfluorooctanoic acid (PFOA) and inorganic cadmium.</a> Toxicology. 4227, 152286 (2019).</li><li>Jiang, Q., Lust, R. M., Strynar, M. J., Dagnino, S., DeWitt, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Perflurooctanoic+acid+induces+developmental+cardiotoxicity+in+chicken+embryos+and+hatchlings.">Perflurooctanoic acid induces developmental cardiotoxicity in chicken embryos and hatchlings.</a> Toxicology. 293 (1-3), 97-106 (2012).</li><li>Jiang, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+ovo+very+early-in-life+exposure+to+diesel+exhaust+induced+cardiopulmonary+toxicity+in+a+hatchling+chick+model.">In ovo very early-in-life exposure to diesel exhaust induced cardiopulmonary toxicity in a hatchling chick model.</a> Environmental Pollution. 264, 114718 (2020).</li><li>Jiang, Q., Lust, R. M., DeWitt, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Perfluorooctanoic+acid+induced-developmental+cardiotoxicity:+are+peroxisome+proliferator+activated+receptor+alpha+(PPARalpha)+and+bone+morphorgenic+protein+2+(BMP2)+pathways+involved.">Perfluorooctanoic acid induced-developmental cardiotoxicity: are peroxisome proliferator activated receptor alpha (PPARalpha) and bone morphorgenic protein 2 (BMP2) pathways involved.</a> Journal of Toxicology and Environmental Health, Part A. 76 (11), 635-650 (2013).</li><li>Jiang, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Changes+in+the+levels+of+l-carnitine,+acetyl-l-carnitine+and+propionyl-l-carnitine+are+involved+in+perfluorooctanoic+acid+induced+developmental+cardiotoxicity+in+chicken+embryo.">Changes in the levels of l-carnitine, acetyl-l-carnitine and propionyl-l-carnitine are involved in perfluorooctanoic acid induced developmental cardiotoxicity in chicken embryo.</a> Environmental Toxicology and Pharmacology. 48, 116-124 (2016).</li><li>Zhao, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+PPAR+alpha+in+perfluorooctanoic+acid+induced+developmental+cardiotoxicity+and+l-carnitine+mediated+protection-Results+of+in+ovo+gene+silencing.">The role of PPAR alpha in perfluorooctanoic acid induced developmental cardiotoxicity and l-carnitine mediated protection-Results of in ovo gene silencing.</a> Environmental Toxicology and Pharmacology. 56, 136-144 (2017).</li><li>Jiang, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Particulate+Matter+2.5+Induced+Developmental+Cardiotoxicity+in+Chicken+Embryo+and+Hatchling.">Particulate Matter 2.5 Induced Developmental Cardiotoxicity in Chicken Embryo and Hatchling.</a> Front Pharmacol. 11, 841 (2020).</li><li>Molina, E. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+air+cell+injection+of+perfluorooctane+sulfonate+before+incubation+on+development+of+the+white+leghorn+chicken+(Gallus+domesticus)+embryo.">Effects of air cell injection of perfluorooctane sulfonate before incubation on development of the white leghorn chicken (Gallus domesticus) embryo.</a> Environmental Toxicology and Chemistry. 25 (1), 227-232 (2006).</li><li>Crump, D., Chiu, S., Williams, K. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bis-(3-allyl-4-hydroxyphenyl)+sulfone+decreases+embryonic+viability+and+alters+hepatic+mRNA+expression+at+two+distinct+developmental+stages+in+chicken+embryos+exposed+via+egg+injection.">Bis-(3-allyl-4-hydroxyphenyl) sulfone decreases embryonic viability and alters hepatic mRNA expression at two distinct developmental stages in chicken embryos exposed via egg injection.</a> Environmental Toxicology and Chemistry. 37 (2), 530-537 (2018).</li><li>Franci, C. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Potency+of+polycyclic+aromatic+hydrocarbons+in+chicken+and+Japanese+quail+embryos.">Potency of polycyclic aromatic hydrocarbons in chicken and Japanese quail embryos.</a> Environmental Toxicology and Chemistry. 37 (6), 1556-1564 (2018).</li><li>Rand, M. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Developmental+exposure+to+methylmercury+and+resultant+muscle+mercury+accumulation+and+adult+motor+deficits+in+mice.">Developmental exposure to methylmercury and resultant muscle mercury accumulation and adult motor deficits in mice.</a> Neurotoxicology. 81, 1-10 (2020).</li><li>Tanaka, T., Suzuki, T., Inomata, A., Moriyasu, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Combined+effects+of+maternal+exposure+to+fungicides+on+behavioral+development+in+F1+-generation+mice:+2.+Fixed-dose+study+of+thiabendazole.">Combined effects of maternal exposure to fungicides on behavioral development in F1 -generation mice: 2. Fixed-dose study of thiabendazole.</a> Birth Defects Research. , (2020).</li><li>Kofman, O., Lan, A., Raykin, E., Zega, K., Brodski, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Developmental+and+social+deficits+and+enhanced+sensitivity+to+prenatal+chlorpyrifos+in+PON1-/-+mouse+pups+and+adults.">Developmental and social deficits and enhanced sensitivity to prenatal chlorpyrifos in PON1-/- mouse pups and adults.</a> PLoS One. 15 (9), 0239738 (2020).</li><li>Kischel, A., Audouard, C., Fawal, M. A., Davy, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ephrin-B2+paces+neuronal+production+in+the+developing+neocortex.">Ephrin-B2 paces neuronal production in the developing neocortex.</a> BMC Developmental Biology. 20 (1), 12 (2020).</li><li>Okolo, F., Zhang, G., Rhodes, J., Gittes, G. K., Potoka, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intra-Amniotic+Sildenafil+Treatment+Promotes+Lung+Growth+and+Attenuates+Vascular+Remodeling+in+an+Experimental+Model+of+Congenital+Diaphragmatic+Hernia.">Intra-Amniotic Sildenafil Treatment Promotes Lung Growth and Attenuates Vascular Remodeling in an Experimental Model of Congenital Diaphragmatic Hernia.</a> Fetal Diagnosis and Therapy. , 1-13 (2020).</li><li>Vyslouzil, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Subchronic+continuous+inhalation+exposure+to+zinc+oxide+nanoparticles+induces+pulmonary+cell+response+in+mice.">Subchronic continuous inhalation exposure to zinc oxide nanoparticles induces pulmonary cell response in mice.</a> Journal of Trace Elements in Medicine and Biology. 61, 126511 (2020).</li><li>Wahle, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+neurological+effects+of+cerium+dioxide+nanoparticles+doped+with+different+amounts+of+zirconium+following+inhalation+exposure+in+mouse+models+of+Alzheimer's+and+vascular+disease.">Evaluation of neurological effects of cerium dioxide nanoparticles doped with different amounts of zirconium following inhalation exposure in mouse models of Alzheimer's and vascular disease.</a> Neurochemistry International. 138, 104755 (2020).</li><li>Tanabe, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Three-Dimensional+Echocardiography-+Role+in+Clinical+Practice+and+Future+Directions.">Three-Dimensional Echocardiography- Role in Clinical Practice and Future Directions.</a> Circ J. 84 (7), 1047-1054 (2020).</li></ol>

وقد تم جنين الدجاج نموذجا كلاسيكيا في الدراسات التنموية لمدة 200 سنة1. وقد استخدمت أساليبنا المعروضة في هذه المخطوطة في تقييم العديد من الملوثات البيئية، بما في ذلك حمض البيرفلوروكتانويك، والجسيمات، وعوادم الديزل مع نجاح5و7و8...

جنين الدجاج هو نموذج النمو الكلاسيكي، والذي تم استخدامه لأكثر من مائتي سنة1. نموذج جنين الدجاج له مزايا مختلفة بالمقارنة مع النماذج التقليدية. بادئ ذي بدء ، في وقت مبكر منذ أكثر من 70 عاما ، تم توضيح التطور الطبيعي لجنين الدجاج بوضوح شديد في دليل هامبورغر هاملتونالتدريج 2، حيث تم تعريف ما مجموعه 46 مرحلة خلال نمو جنين الدجاج مع الوقت الدقيق والخصائص المورفولوجية ، مما يسهل الكشف عن التطور غير الطبيعي. بالإضافة إلى ذلك ، فإن نموذج جنين الدجاج له ميزات أخرى مثل كونه منخفض التكلفة نسبيا وزائدا عن الحاجة من حيث الكمية ، وضوابط دقيقة نسبيا لجرعة التعرض ، ونظام مستقل مغلق داخل القشرة والتلاعب السهل بالجنين النامي ، وكلها تضمن إمكانية استخدامه كنموذج قوي للتقييم السمية. 
في السمية القلبية ، يتميز جنين الدجاج بقلب أربع غرف ، على غرار قلوب الثدييات ولكن بجدران أكثر سمكا ، مما يسمح بتقييمات مورفولوجية أسهل. بالإضافة إلى ذلك ، يسمح جنين الدجاج بالتعرض للاستنشاق التنموي ، وهو أمر غير ممكن في نماذج الثدييات: خلال المرحلة اللاحقة من التطور ، سينتقل جنين الدجاج من التنفس الداخلي إلى التنفس الخارجي (الحصول على الأكسجين عبر الرئة) ؛ هذا الأخير يتطلب أن الجنين يخترق غشاء الخلية الهوائية مع المنقار ، ويبدأ في تنفس الهواء3، مما يجعل الخلية الهوائية غرفة استنشاق مصغرة. باستخدام هذه الظاهرة ، يمكن تقييم الآثار السمية لملوثات الغاز على القلب (والأعضاء الأخرى) دون الحاجة إلى أدوات غرفة استنشاق مخصصة. 
في هذه المخطوطة، يتم وصف العديد من طرق تقييم التعرض/نقطة النهاية، وكلها تعمل على جعل جنين الدجاج أداة قوية في تقييم سمية القلب التنموية بعد التعرض للملوثات البيئية.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>4% phosphate buffered formaldehydefixative</td>
			<td>Biosharp, Hefei, China</td>
			<td>REF: BL539A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>75% ethanol</td>
			<td>Guoyao,Shanghai,China</td>
			<td>CAS:64-17-5</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Biosignaling monitor BL-420E+</td>
			<td>Taimeng, Chengdu, China</td>
			<td>BL-420E+</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Candling lamp</td>
			<td>Zhenwei, Dezhou, China</td>
			<td>WZ-001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Disposable syringe</td>
			<td>Zhiyu, Jiangsu, China</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Egg incubator</td>
			<td>Keyu,Dezhou, China</td>
			<td>KFX</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electrical balance</td>
			<td>OHAUS, Shanghai, China</td>
			<td>AR 224CN</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electro-thermal incubator</td>
			<td>Shenxian, Shanghai, China</td>
			<td>DHP-9022</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol absolute</td>
			<td>Guoyao,Shanghai,China</td>
			<td>CAS:64-17-5</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fertile chicken egg</td>
			<td>Jianuo, Jining, China</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hematoxylin and Eosin Staining Kit</td>
			<td>Beyotime, Bejing, China</td>
			<td>C0105</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Histology paraffin</td>
			<td>Aladdin, Shanghai, China</td>
			<td>P100928-500g</td>
			<td>Melt point 52~54&#176;C</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Histology paraffin</td>
			<td>Aladdin, Shanghai, China</td>
			<td>P100936-500g</td>
			<td>Melt point 62~64&#176;C</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>IV catheter</td>
			<td>KDL, Zhejiang, China</td>
			<td></td>
			<td>The catheters have to be soft, plastic ones.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lentivirus</td>
			<td>Genechem, Shanghai, China</td>
			<td></td>
			<td>The lentivirus were individually designed/synthesized by Genechem.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Masson&#39;s trichrome staining kit</td>
			<td>Solarbio, Beijing, China</td>
			<td>G1340</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Metal probe</td>
			<td>Jinuotai, Beijing, China</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microinjector (5 uL)</td>
			<td>Anting,Shanghai, China</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscope</td>
			<td>CAIKON, Shanghai, China</td>
			<td>XSP-500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microtome</td>
			<td>Leica, Germany</td>
			<td>HistoCore BIOCUT</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microtome blade</td>
			<td>Leica,Germany</td>
			<td>Leica 819</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pentobarbitual sodium</td>
			<td>Yitai Technology Co. Ltd.,&#160; Wuhan, China</td>
			<td>CAS: 57-33-0</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pipetter(10ul)</td>
			<td>Sartorius, Germany</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Povidone iodide</td>
			<td>Longyuquan, Taian, China</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scissor</td>
			<td>Anqisheng,Suzhou, China</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile saline</td>
			<td>Kelun,Chengdu, China</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sunflower oil</td>
			<td>Mighty Jiage, Jiangsu, China</td>
			<td></td>
			<td>Any commerical sunflower oil for human consumption should work</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tape</td>
			<td>M&#38;G, Shanghai, China</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tedlar PVF Bag (5L)</td>
			<td>Delin, Dalian, China</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vortex mixer</td>
			<td>SCILOGEX, Rocky Hill, CT, US</td>
			<td>MX-F</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Xylene</td>
			<td>Guoyao,Shanghai,China</td>
			<td>CAS:1330-20-7</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

using chicken embryo as a powerful tool in assessment of developmental cardiotoxicities

أجنة الدجاج هي نموذج كلاسيكي في الدراسات التنموية. خلال تطور أجنة الدجاج ، يتم تحديد النافذة الزمنية لتطور القلب بشكل جيد ، ومن السهل نسبيا تحقيق التعرض الدقيق وفي الوقت المناسب عبر طرق متعددة. وعلاوة على ذلك، فإن عملية نمو القلب في أجنة الدجاج مماثلة للثدييات، مما يؤدي أيضا إلى قلب من أربع غرف، مما يجعله نموذجا بديلا قيما في تقييم السموم القلبية التنموية. في مختبرنا، يتم استخدام نموذج جنين الدجاج بشكل روتيني في تقييم السموم القلبية التنموية بعد التعرض لمختلف الملوثات البيئية، بما في ذلك المواد لكل وبوليفلوروالكيل (PFAS)، والجسيمات (PMs)، وعوادم الديزل (DE) ومواد النانو. يمكن اختيار وقت التعرض بحرية بناء على الحاجة ، من بداية التطور (اليوم الجنيني 0 ، ED0) على طول الطريق إلى اليوم السابق للفقس. وتشمل طرق التعرض الرئيسية حقن خلايا الهواء، والتحنيم الدقيق المباشر، واستنشاق خلايا الهواء (التي تم تطويرها في الأصل في مختبرنا)، وتشمل نقاط النهاية المتاحة حاليا وظيفة القلب (تخطيط القلب)، والمورفولوجيا (التقييمات النسيجية) والتقييمات البيولوجية الجزيئية (الكيمياء المناعية، qRT-PCR، النشاف الغربي، وما إلى ذلك). وبطبيعة الحال، فإن نموذج جنين الدجاج له حدوده الخاصة، مثل محدودية توافر الأجسام المضادة. ومع ذلك، مع المزيد من المختبرات التي بدأت في استخدام هذا النموذج، يمكن استخدامه لتقديم مساهمات كبيرة في دراسة السموم القلبية التنموية.

نتائج التعرض حقن خلايا الهواء يمكن لحقن خلايا الهواء أن يعرض بشكل فعال الأجنة الدجاج النامية لمختلف العوامل، والتي يمكن الكشف عنها في وقت لاحق في العينات التي تم جمعها (المصل والأنسجة، وما إلى ذلك) من الأجنة / الدجاج الفقس. وفيما يلي مثال على ذلك، حيث تم حقن حمض البيرفلوروكتانويك (PFOA) با?...

Watch this Scientific Journal Video about Using Chicken Embryo as a Powerful Tool in Assessment of Developmental Cardiotoxicities at JoVE.com

Using Chicken Embryo as a Powerful Tool in Assessment of Developmental Cardiotoxicities

تستخدم أجنة الدجاج، كنموذج نمو كلاسيكي، في مختبرنا لتقييم السموم القلبية التنموية بعد التعرض لمختلف الملوثات البيئية. ويرد في هذه المخطوطة وصف لأساليب التعرض وأساليب التقييم المورفولوجية/الوظيفية المقررة.

استخدام جنين الدجاج كأداة قوية في تقييم السموم القلبية التنموية

Chicken embryos are a classical model in developmental studies. During the development of chicken embryos, the time window of heart development is ...

مرحبا بالجميع. أنا كسيشياو جيانغ، أستاذ مشارك في قسم علم السموم، كلية الصحة العامة في جامعة تشينغداو. نيابة عن مجموعتي البحثية، سأعرض أصول استخدام جنين الدجاج في تطوير تقييمنا لسمية القلب.جنين الدجاج هو نموذج النمو الكلاسيكي الذي له مزايا متعددة مثل التلاعب السهل، وسهولة الوصول العالية، ونظام مستقل مغلق، وهلم جرا. العمل مع الملوثات البيئية المتعددة، مثل حمض التانيك الفينولية. عادم الديزل، ولا سيما المسألة على أنابيب نانو الكربون.لدينا طرق التعرض متعددة المنشأة في المختبر، ولكن لسبب أكبر، كما يتم إجراء التقييمات الوظيفية بشكل روتيني. في هذا الفيديو، سأريك التفاصيل، وطرق التعرض وطرق التقييم الوظيفي المورفولوجية لك. لا تتردد في الاتصال بنا إذا كنت مهتما.شكرًا لك. هنا طرق التعرض لدينا أن أتمكن من تقديم لك. الآن الطريقة الأولى التي سأقدمها هي حقن خلايا الهواء، حيث ستقوم بحقن مباشرة في خلية الهواء.تنظيف سطح البيض مع محلول بولي يوديد. هذا هو محلول متعدد يوديد المتاحة تجاريا، المخفف مع الماء deionized، 1/5. وبعد ذلك، أجفف قشر البيض بورق الأنسجة، دون تنقية.من المهم لأن تنقية سوف كسر طلاء طبقة واقية على السطح الخارجي للقشرة. تنظيف جميع البيض في الغرفة المظلمة ووضع علامة على خلية الهواء مع قلم رصاص. استبعاد البيض مع الشقوق على قذيفة.أيضا استبعاد البيض مع خلايا الهواء على الجانب. إذا كان ذلك لديه طرف حاد، تلك من غير المرجح جدا أن يفقس بشكل طبيعي. تعقيم منطقة الخلية الهوائية، فضلا عن التحقيق المعدني، مع الكحول 75٪.مسحها الجافة، ومن ثم حفر حفرة صغيرة في وسط منطقة الخلية الهوائية مع التحقيق. لا تلصق المسبار في عمق الخلية الهوائية. بدلا من ذلك، فقط كسر قذيفة مع غيض من التحقيق.إذا كان الثقب لا يزال غير كبير بما فيه الكفاية، كسر قذيفة مرة أخرى في محيط الحفرة الموجودة، حتى انها كبيرة بما يكفي للسماح لك إدراج طرف. أدخل طرف ماصة في الحفرة مع طرف لمس الغشاء الداخلي. ببطء، حقن الخليط وعقد هناك لمدة 10 ثانية على الأقل.هذا هو السماح للصرف عن النفط الاستغناء عنها بالكامل. ثم قم بإزالة الطرف. الآن، ختم الحفرة مع فرشاة وقطة من البارافين الذائب.يجب الحرص على عدم بالتنقيط البارافين الذائب على الذاكرة الداخلية. بمجرد ختمها، ضع البيض في الحاضنة حتى تصل إلى المرحلة الجنينية المطلوبة. والثانية، الطريقة التي سأقدمها هي حقنة مايكرو.أولا وقبل كل شيء، يحتاج البيض لتنظيف والتعامل معها على النحو المبين في قسم حقن الهواء. هذا الإجراء يحتاج إلى أن يتم في غطاء محرك السيارة المعقمة. تعقيم منطقة الخلية الهوائية، والأدوات مع الأسيتون.حفر حفرة صغيرة في وسط منطقة الخلية الهوائية مع التحقيق المعدني. لا تلصق المسبار بعمق في خلية الهواء، أو قد تتلف الذاكرة الداخلية. ثم استخدم نفس العملية لتكبير الثقب بعناية حتى يبلغ قطره حوالي ملليمترين.وهذا يمكن أن يسمح تأكيد نسبة الذاكرة الداخلية. ثم تحميل الحل في حاقن الصغرى وإدراج الإبرة بعناية من خلال ثقب في الغشاء الداخلي لما مجموعه ثلاثة ملليمترات تقريبا. الاستغناء بلطف الحل ومن ثم إزالة الإبرة.الحفاظ على الإبرة عمودي قدر الإمكان. ختم رقيقة الحفرة مع قطعة صغيرة من الشريط. تغطية الثقب بالكامل لمنع جفاف الجنين والموت أثناء الحضانة اللاحقة.الطريقة الثالثة التي سأقدمها هي ضخ خلايا الهواء حيث تغرس ملوث غاز في خلية الهواء. تنظيف البيض والتعامل معه كما هو موضح في قسم حقن خلايا الهواء.وبعد ذلك يمكنك قراءة البيض حتى اليوم الجنيني 17. التعامل مع البويضات في اليوم الجنيني 17 للاحتفال منطقة الخلية الهوائية. في اليوم الجنيني 18، أخرج البيض من الحاضنة، وعقم منطقة خلايا الهواء والأدوات، مع الأسيتون.ومن ثم حفر بعناية اثنين من الثقوب الصغيرة على جانبي الخلية الهوائية. واحد هو لحقن الغاز أو الهباء الجوي. والآخر هو لتوسيع الهواء لدينا.تحكم بعناية في حجم الثقوب ، بحيث يكون جانب ثقب الحقن كافيا فقط لإدراج إبرة القسطرة ، في حين يجب أن يكون قطر الثقب المتوسع أكبر قليلا. قطرها حوالي ملليمتر واحد. الآن هذه هي حقيبة العينة التي نستخدمها للاحتفاظ بالغاز المستهدف أو الهباء الجوي.يمكنك استبدال أي جهاز تستخدمه. صب بلطف 10 مل من الغاز أو الهباء الجوي في حقنة. وبعد ذلك، قم بإرفاق الحقنة بعناية بإبرة القسطرة لدينا مع الإبرة الداخلية البعيدة بحيث تكون ناعمة.أدخل بلطف هذه الإبرة القسطرة في ثقب التسريب. بمجرد أن يكون هناك، وتطبيق الضغط ضد إبرة القسطرة. هذا هو للحد من التسرب من موقع الحقن.يمكن وضع إصبع آخر حولها مع ثقب طرد لتأكيد التسريب الخاص بك. إذا قمت بالتسريب بلطف ، فيجب الشعور بسهولة بتدفق الهواء من ثقب الطرد. هذا هو الهواء الأصلي في الخلية الجوية التي يتم طردها.عند الانتهاء من التسريب، ختم كلا الثقبين على الفور. هذه الأشرطة وإعادة البيض إلى حاضنتك. يمكنني تقديم عملية تقييم نقطة النهاية.تخدير الحيوانات بالكامل مع بنتوباربيتال 33 ملغم/كغ. حقن الملكية الفكرية اختبارها من قبل يفتح. ثم ضع الدجاج على طاولة العملية.تعقيم منطقة البطن والأقطاب الكهربائية مع الإيثانول. ثم أدخل قطبين إبرة من جانبين من البطن الفرعية بشكل مستمر. تأكد من أن الإبر لا تدخل تجويف البطن عن طريق رفع الجلد قليلا.وأدخل الإبرة من هناك. بمجرد إدخالها، ادفع الإبرة بعناية إلى الأمام حتى تصل إلى جانب تجويف الصدر. تأكد من أن الإبرة لا تذهب عميقا في الجسم أو التمسك بها من الجلد.ثم إجراء القياسات مع أداة تخطيط القلب. ويمكن أيضا استخدام أدوات أخرى للمعهد قادرة على تخطيط القلب. هذه هي طريقة تقييم نقطة النهاية الثانية هي الخريطة لموترين.هذا هو المقطع العرضي من القلب في طريق HME. هذا هو البطين الأيمن الذي سنقيس به للقيام بذلك، نستخدم اثنين من الحكام.المسطرة 1، والحاكم 2. الآن نحن مجرد نسخ مسطرة واحدة إلى الشاشة ونحجمها إلى الحجم المناسب ومن ثم تدوير ذلك. ونحركه بحيث يقع طرفي الخط الأفقي على طرفي 3 جدران البطين الأيمن.والآن لدينا سبعة خطوط قياس تمر عبر جدار البطين الأيمن الثلاثة. الآن نسخ المسطرة الثانوية إلى الصورة أيضا. نحن أيضا تغيير حجمها قليلا وتدوير واستبدال ذلك بحيث سيتم وضعها على حد سواء.هذا الخط الأفقي يذهب بالتوازي مع الجدار الخارجي للبطين الأيمن. والعامدة واحدة تذهب عبر نقطة إلى حيث خطوط المادة البيضاء الحاكم تلبية الجدار الداخلي أو البطين الأيمن. ومن ثم نصنع نقاط قياس بحيث يمكن قياسها لاحقا بالصورة J.We نكرر هذه العملية 7 مرات لكل عينة، بحيث يكون قياسنا التمثيلي للبطين الأيمن.سأريك ملخصا للنتائج الحالية هذا هو حقن PFOA في البيض قبل الحضانة، ويمكنك أن ترى أنه مع زيادة تلك الحقن تركيز المصل LPF في المصل زيادة فعالة. في مظاهرة، وفعالية، من الحقن الجزئي.يمكنك أن ترى أن A هو السيطرة، وB، هو المكان الذي تم حقن مكافحة الفيروسات اكسبرس في البروتين Q مضان كبيرة. يمكنك أن ترى مضان قوي. وهذا هو العرض لفعالية ضخ الظهارة.يمكنك أن ترى أنه مع التسريب ، لوحظت تغيرات مثيرة في الألياف البصرية في أنسجة عضلة القلب. حسنًا. ويمكنك أيضا أن ترى أن فترات R-R من الدجاج الفقس 0, 1, و 2 أسابيع. كما أنها تغيرت بشكل كبير بعد التسريب مع عوادم الديزل.تشير إلى أن عامل في هذا، هذا الأسلوب. هنا ، يمكنك أيضا أن ترى أن فعالية ضخ الظهارة في هذا المثال. يمكنك أن ترى أن البطينين الأيمنين للقلب زادت بشكل فعال بعد أن الهباء الجوي غرست مع عادم الديزل.وبالطبع، هنا نستخدم الطرق الهستومورمومترية. نحن فقط نريك. هذا فعال جدا. حسنًا.هذه كل الطرق التي سأقدمها لك آمل أن يسهل هذا عمل الآخرين مع جنين الدجاج كأداة بحثية قوية في علم السموم التنموية. أسعد الله يومك.

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Characterization of Thymic Settling Progenitors in the Mouse Embryo Using In Vivo and In Vitro Assays

Characterization of Thymic Settling Progenitors in the Mouse Embryo Using In Vivo and In Vitro Assays

توصيف التوتة تسوية الأسلاف في جنين الفأر عن طريق<em&gt; في فيفو</em&gt; و<em&gt; في المختبر</em&gt; فحوصات

Characterizing thymic settling progenitors is important to understand the pre-thymic stages of T cell development, essential to devise strategies for T ...

Microbead Implantation in the Zebrafish Embryo

Microbead زرع الأجنة الزرد

The zebrafish has emerged as a valuable genetic model system for the study of developmental biology and disease. Zebrafish share a high degree of genomic ...

Grafting of Beads into Developing Chicken Embryo Limbs to Identify Signal Transduction Pathways Affecting Gene Expression

مسمار الخرز في تطوير الدجاج أطراف الجنين لتحديد مسارات نقل الإشارة التي تؤثر على التعبير الجيني

Using chicken embryos it is possible to test directly the effects of either growth factors or specific inhibitors of signaling pathways on gene expression ...

In Ovo Electroporation in the Chicken Auditory Brainstem

In Ovo Electroporation in the Chicken Auditory Brainstem

في أوفو إليكتروبوراتيون في الدماغ الدماغ السمعي

Electroporation is a method that introduces genes of interest into biologically relevant organisms like the chicken embryo. It is long established that ...

Organotypic Culture Method to Study the Development Of Embryonic Chicken Tissues

أسلوب الثقافة أورجانوتيبيك لدراسة تطوير الأنسجة الجنينية الدجاج

The embryonic chicken is commonly used as a reliable model organism for vertebrate development. Its accessibility and short incubation period makes it ...

Minimally Invasive Embryo Transfer and Embryo Vitrification at the Optimal Embryo Stage in Rabbit Model

نقل الاجنه طفيف التوغل والتزجيج الجنيني في مرحله الجنين الأمثل في نموذج الأرنب

Assisted reproductive techniques (ARTs), such as in vitro embryo culture or embryo cryopreservation, affect natural development patterns with perinatal ...

Live Imaging and Analysis of Muscle Contractions in Drosophila Embryo

Live Imaging and Analysis of Muscle Contractions in Drosophila Embryo

التصوير الحي وتحليل تقلصات العضلات في جنين دروسوفيلا

Coordinated muscle contractions are a form of rhythmic behavior seen early during development in Drosophila embryos. Neuronal sensory feedback circuits ...

X-ray Diffraction of Intact Murine Skeletal Muscle as a Tool for Studying the Structural Basis of Muscle Disease

الأشعة السينية الانعراج من العضلات الهيكلية Murine سليمة كأداة لدراسة الأساس الهيكلي لأمراض العضلات

Transgenic mouse models have been important tools for studying the relationship of genotype to phenotype for human diseases including those of skeletal ...

Assessment of Oxidative Damage in the Primary Mouse Ocular Surface Cells/Stem Cells in Response to Ultraviolet-C (UV-C) Damage

Assessment of Oxidative Damage in the Primary Mouse Ocular Surface Cells/Stem Cells in Response to Ultraviolet-C UV-C Damage

تقييم الضرر التأكسدي في الخلايا السطحية الرئيسية للفأرة /الخلايا الجذعية استجابة للأضرار فوق البنفسجية-C (UV-C)

The ocular surface is subjected to regular wear and tear due to various environmental factors. Exposure to UV-C radiation constitutes an occupational ...

Using Immunofluorescence to Detect PM2.5-induced DNA Damage in Zebrafish Embryo Hearts

Using Immunofluorescence to Detect PM2.5-induced DNA Damage in Zebrafish Embryo Hearts

باستخدام Immunofluorescence للكشف عن PM2.5-الناجم عن تلف الحمض النووي في قلوب الأجنة حمار وحشي

Ambient fine particulate matter (PM2.5) exposure can lead to cardiac developmental toxicity but the underlying molecular mechanisms are still unclear. ...