Name: porcine corneal tissue explant to study the efficacy of herpes simplex virus-1 antivirals
Uploaded: 2021-09-20T15:00:00
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この研究は、D.S.A.A.A.A.A.に対するNIH助成金(R01 EY024710、RO1 AI139768、RO1 EY029426)によって支えられ、NIH国立眼科研究所からのF30EY025981助成金によって支えられた。研究は、パークパッキング会社、4107アシュランドアベニュー、ニューシティ、シカゴ、IL-60609から得たブタの角膜を使用して行われました

この研究で使用されるすべてのブタ組織は、第三者の民間組織によって提供され、動物の取り扱いのいずれもイリノイ大学シカゴ校の職員によって行われませんでした。
1. 材料
<ol><li>
試薬
	<ol>
<li>プラークアッセイの試薬として、パウダーメチルセルロース、ダルベッコの改変ワシ培地(DMEM)、ウシ胎児血清(FBS)、ペニシリン、ストレプトマイシン(P/S)を使用...

<ol>
	<li>Liesegang, T. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Herpes+simplex+virus+epidemiology+and+ocular+importance.">Herpes simplex virus epidemiology and ocular importance.</a> Cornea. 20 (1), 1-13 (2001).</li><li>Farooq, A. V., Valyi-Nagy, T., Shukla, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mediators+and+mechanisms+of+herpes+simplex+virus+entry+into+ocular+cells.">Mediators and mechanisms of herpes simplex virus entry into ocular cells.</a> Current Eye Research. 35 (6), 445-450 (2010).</li><li>Farooq, A. V., Shah, A., Shukla, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+herpesviruses+in+ocular+infections.">The role of herpesviruses in ocular infections.</a> Virus Adaptation and Treatment. 2 (1), 115-123 (2010).</li><li>Xu, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Seroprevalence+and+coinfection+with+herpes+simplex+virus+type+1+and+type+2+in+the+United+States,+1988-1994.">Seroprevalence and coinfection with herpes simplex virus type 1 and type 2 in the United States, 1988-1994.</a> Journal of Infectious Diseases. 185 (8), 1019-1024 (2002).</li><li>Xu, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Trends+in+herpes+simplex+virus+type+1+and+type+2+seroprevalence+in+the+United+States.">Trends in herpes simplex virus type 1 and type 2 seroprevalence in the United States.</a> Journal of the American Medical Association. 296 (8), 964-973 (2006).</li><li>Koganti, R., Yadavalli, T., Shukla, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Current+and+emerging+therapies+for+ocular+herpes+simplex+virus+type-1+infections.">Current and emerging therapies for ocular herpes simplex virus type-1 infections.</a> Microorganisms. 7 (10), (2019).</li><li>Lobo, A. -., Agelidis, A. 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S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Resistance+to+antiviral+drugs+of+herpes+simplex+virus+isolated+from+a+patient+treated+with+Acyclovir.">Resistance to antiviral drugs of herpes simplex virus isolated from a patient treated with Acyclovir.</a> New England Journal of Medicine. 306 (6), 343-346 (2010).</li><li>Yildiz, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acute+kidney+injury+due+to+acyclovir.">Acute kidney injury due to acyclovir.</a> CEN Case Report. 2 (1), 38-40 (2013).</li><li>Fleischer, R., Johnson, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acyclovir+nephrotoxicity:+a+case+report+highlighting+the+importance+of+prevention,+detection,+and+treatment+of+acyclovir-induced+nephropathy.">Acyclovir nephrotoxicity: a case report highlighting the importance of prevention, detection, and treatment of acyclovir-induced nephropathy.</a> Case Rep Med. 2010, 1-3 (2010).</li><li>Thakkar, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cultured+corneas+show+dendritic+spread+and+restrict+herpes+simplex+virus+infection+that+is+not+observed+with+cultured+corneal+cells.">Cultured corneas show dendritic spread and restrict herpes simplex virus infection that is not observed with cultured corneal cells.</a> Science Report. 7, 42559 (2017).</li><li>Pescina, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=et+al+Development+of+a+convenient+ex+vivo+model+for+the+study+of+the+transcorneal+permeation+of+drugs:+Histological+and+permeability+evaluation.">et al Development of a convenient ex vivo model for the study of the transcorneal permeation of drugs: Histological and permeability evaluation.</a> Journal of Pharmaceutical Sciences. 104, 63-71 (2015).</li><li>Jaishankar, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+off-target+effect+of+BX795+blocks+herpes+simplex+virus+type+1+infection+of+the+eye.">An off-target effect of BX795 blocks herpes simplex virus type 1 infection of the eye.</a> Science Translational Medicine. 10, 5861 (2018).</li><li>Duggal, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Zinc+oxide+tetrapods+inhibit+herpes+simplex+virus+infection+of+cultured+corneas.">Zinc oxide tetrapods inhibit herpes simplex virus infection of cultured corneas.</a> Molecular Vision. 23, 26-38 (2017).</li></ol>

以前の研究は、HSV-1感染に対する抗ウイルス剤として有望な役割を有することを示しているBX795;タンク結合キナーゼ1(TBK1)16を阻害することによって。TBK1とオートファジーの両方がヒト角膜上皮細胞で実証されるようにHSV-1感染を阻害する役割を果たしてきました。BX795は、10μMの濃度で抗ウイルス活性と最大に有効であることが示され、主要ウイルスタンパク質のウェスタン?...

眼感染症に罹患している人は、しばしば視力低下1を起こします。世界的に高い血清威容性を持つHSV感染者は、角膜瘢痕化、間質角膜炎および新血管新生症に至る眼感染症の再発に苦しむ2、3、4、5。HSV感染はまた、より少ない頻度を引き起こすことが示されている、免疫不全の間で重篤な状態の範囲、脳炎および全身性罹患率6、7、8のような未治療の患者。アシクロビル(ACV)およびそのヌクレオシド類似体のような薬物は、HSV-1感染を抑制し、再活性化を制御することに一貫した成功を示していますが、これらの薬物の長期使用は腎不全、胎児の異常および進化するウイルス株9、10、11、12、13に対する薬剤耐性の出現を制限する失敗に関連している。HSV-1眼感染症に関連する複合体は、マウスまたはウサギの眼感染症を用いてヒト角膜細胞の単層および3D培養物および生体内でのインビトロで以前に研究されてきた。これらのin vitroモデルはHSV-1感染の細胞生物学的構成要素に関する重要なデータを提供するが、しかし、角膜組織の複雑な複雑さを模倣できず、ウイルス14の樹状拡散を照らすことはほとんどしない。対照的に、in vivoシステムは、HSV-1感染中に角膜および免疫活性化応答で感染が広がっていることを示す上でより洞察力があるが、実験を見落とすために訓練を受けた研究者と動物ケアのための大規模な施設が必要であるという警告が付属している。
ここでは、HSV-1感染誘発創傷系を調べるために、ブタ角膜をex vivoモデルとして使用します。特定の薬物の潜在的な薬理学だけでなく、感染によって引き起こされる創傷系の細胞および分子生物学の両方を組織外植物培養を通じて研究することができる。このモデルは、他のウイルスおよび細菌感染の使用についても修正される可能性があります。本研究では、ブタコーンネを用い、前臨床小分子BX795の抗ウイルス効果を試験した。ブタの角膜の使用は、アクセスの容易さと費用対効果のために好まれました。さらに、ブタ角膜モデルは、角膜が単離しやすく、感染および可視化のために十分な大きさで、15を処理するための堅牢な人間の目の良いモデルです。ブタ角膜はまた、トランス角膜透過性および全身吸収15の両方におけるヒト角膜モデルの複雑さに匹敵する。このモデルを用いて研究を行うことで、HsV-1ウイルス感染の有能な阻害剤としてBX795がさらなる調査に値する方法を解明し、それを潜在的な低分子抗ウイルス化合物16として分類する文献に加えた。

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>30 G hypodermic needles.</td>
			<td>BD</td>
			<td>305128</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>500 mL glass bottle.</td>
			<td>Thomas Scientific</td>
			<td>844027</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Antimycotic and Antibiotic (AA)</td>
			<td>GIBCO</td>
			<td>15240096</td>
			<td>Aliquot into 5 mL tubes and keep frozen until use</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Benchtop vortexer.</td>
			<td>BioDot</td>
			<td>BDVM-3200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Biosafety cabinet with a Bio-Safety Level-2 (BSL-2) certification.</td>
			<td>Thermofisher Scientific</td>
			<td>Herasafe 2030i</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Calgiswab 6&#34; Sterile Calcium Alginate Standard Swabs.</td>
			<td>Puritan</td>
			<td>22029501</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell scraper - 25 cm</td>
			<td>Biologix BE</td>
			<td>70-1180 70-1250</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Crystal violet</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>C6158</td>
			<td>Store the powder in a dark place</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dulbecco&#8217;s modified Eagle&#8217;s medium - DMEM</td>
			<td>GIBCO</td>
			<td>41966029</td>
			<td>Store at 4 &#176;C until use</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>E7023</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal bovine serum -FBS</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>F2442</td>
			<td>Aliquot into 50 mL tubes and keep frozen until use</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Flat edged tweezers &#8211; 2.</td>
			<td>Harward Instruments</td>
			<td>72-8595</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Freezers --80 &#176;C. -</td>
			<td>Thermofisher Scientific</td>
			<td>13 100 790</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fresh box of blades.</td>
			<td>Thomas Scientific</td>
			<td>TE05091</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Guaze</td>
			<td>Johnson &#38; Johnson</td>
			<td></td>
			<td>108 square inch folder 12 ply</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HSV-1 17GFP</td>
			<td>grown in house</td>
			<td>-</td>
			<td>Original strain from Dr. Patricia Spears, Northwestern University. GFP expressing HSV-1 strain 17</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Insulin, Transferrin, Selenium - ITS</td>
			<td>GIBCO</td>
			<td>41400045</td>
			<td>Aliquot into 5 mL tubes and keep frozen until use</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Magnetic stirrer.</td>
			<td>Thomas Scientific</td>
			<td>H3710-HS</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Metallic Scissors.</td>
			<td>Harward Instruments</td>
			<td>72-8400</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micropipettes 1 to 1000 &#181;L.</td>
			<td>Thomas Scientific</td>
			<td>1159M37</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Minimum Essential Medium - MEM</td>
			<td>GIBCO</td>
			<td>11095080</td>
			<td>Store at 4 &#176;C until use</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>OptiMEM&#160;</td>
			<td>GIBCO</td>
			<td>31985047</td>
			<td>Store at 4 &#176;C until use</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin/streptomycin.</td>
			<td>GIBCO</td>
			<td>15140148</td>
			<td>Aliquot into 5 mL tubes and keep frozen until use</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphate Buffer Saline -PBS</td>
			<td>GIBCO</td>
			<td>10010072</td>
			<td>Store at room temperature</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Porcine Corneas</td>
			<td>Park Packaging Co., Chicago, IL</td>
			<td>0</td>
			<td>Special order by request</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Procedure bench covers - as needed.</td>
			<td>Thermofisher Scientific</td>
			<td>S42400</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Serological Pipettes</td>
			<td>Thomas Scientific</td>
			<td>P7132, P7127, P7128, P7129, P7137</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Serological Pipetting equipment.</td>
			<td>Thomas Scientific</td>
			<td>Ezpette Pro</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereoscope</td>
			<td>Carl Zeiss</td>
			<td>SteREO Discovery V20</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stirring magnet.</td>
			<td>Thomas Scientific</td>
			<td>F37120</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue culture flasks, T175 cm2.</td>
			<td>Thomas Scientific</td>
			<td>T1275</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue culture incubators which can maintain 5% CO2 and 37 &#176;C temperature.</td>
			<td>Thermofisher Scientific</td>
			<td>Forma 50145523</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue culture treated plates (6-well).</td>
			<td>Thomas Scientific</td>
			<td>T1006</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin-EDTA (0.05%), phenol red</td>
			<td>GIBCO</td>
			<td>25-300-062</td>
			<td>Aliquot into 10 mL tubes and keep frozen until use</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vero cells</td>
			<td>American Type Culture Collection ATCC</td>
			<td>CRL-1586</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

porcine corneal tissue explant to study the efficacy of herpes simplex virus-1 antivirals

ウイルスや細菌は、角膜感染を通じて様々な眼表面欠陥や創傷や潰瘍などの変性を引き起こす可能性があります。世界の60〜90%の範囲の血清過率で、単純ヘルペスウイルスタイプ1(HSV-1)は、一般的に病変および感染関連失明としても現れる口顔面領域の粘膜皮病変を引き起こす。現在の抗ウイルス薬は有効ですが、毒性副作用の耐性と持続性の出現は、このユビキタス病原体に対する新しい抗ウイルス薬の開発を必要とします。in vitro評価は、新たな抗ウイルスに関する機能的なデータを提供するが、生体内の眼組織の複雑さを示すものではありません。しかし、in vivo研究は高価であり、特にウイルス剤を扱う場合には訓練を受けた人員を必要とする。したがって、ex vivoモデルは、抗ウイルス検査のための効率的でありながら安価なステップです。ここでは、ブタコルネエクスビボを用いてHSV-1による感染を研究するプロトコルと、既存および新規の抗ウイルス薬を用いてそれらを局所的に治療する方法について議論する。また、HSV-1を用いてプラークアッセイを行う方法も実証する。詳細な方法は、HSV-1病原体に似た感染症を研究するために同様の実験を行うために使用することができる。

実験的な抗ウイルス薬の有効性を理解するには、生体内ヒト臨床試験のために送られる前に、広範囲にテストする必要があります。この点に関して、正の対照、陰性対照および試験群を同定しなければならない。トリフルオロチミジン(TFT)は、長い間、角膜炎を局所的に治療するための好ましい治療法として使用されてきた。陽性対照として使用され、TFT処置された角膜基?...

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Porcine Corneal Tissue Explant to Study the Efficacy of Herpes Simplex Virus-1 Antivirals

実験薬の抗ウイルス効果を試験するためのブタ角膜の使用について述べる。

単純ヘルペスウイルス-1抗ウイルス薬の有効性を研究するブタ角膜組織外植

Viruses and bacteria can cause a variety of ocular surface defects and degeneration such as wounds and ulcers through corneal infection. With a ...

動物モデルにおける薬物の有効性を理解することは、コストと労力を要する。ex vivo組織の外植モデルを使用する我々のプロトコルは、研究を行うために必要なコストと科学的人員の両方の面で有意に低い。この技術の主な利点は、他のいくつかの小さな動物モデルとは対照的に、人間の目に非常に似た解剖学と生理学を持つブタの目の使用です。我々は、インビトロで薬をテストするとき, 彼らは動物や人間のモデルに存在する可能性があります有効性を示す可能性があります。.Ex vivo組織システムは、私たちのインビトロシステムが動物およびヒトの試験に翻訳できるかどうかを理解するための最良の方法です。豚の角膜システムは、労働集約的ではないが、薬物を単離、維持、感染、および治療するための訓練可能なスキルを必要とし、特にブタの目全体から角膜を単離するプロセスは言葉で表現するのが難しいが、視覚的なデモンストレーションが必要である。適切なベンダーからブタの目を受け取った後、加工するまで氷の上に組織を保管し、適切な個人保護具を置きます。作業領域を70%エタノールで消毒し、ベンチカバーをワークスペースに固定します。作業領域の準備ができたら、50ミリメートルのガーゼに目を置き、ガーゼを使って片手で後部セクションをつかみます。30ゲージ針を使用して、目の上皮表面の中心近くに1回の穿刺を慎重に行い、間質を損傷しないように注意し、角膜から1ミリメートルの距離でスクレラに小さな切開を行うために鋭い滅菌ブレードを使用します。手の迅速かつ滑らかな回転作用を使用し、ビトリスユーモアが漏れないように注意し、角膜の端を切断し、角膜スクレアエッジで角膜を平らなツイーザーで保持し、ブレードを使用して残りのテザリング膜を切断します。各角膜が単離されると、組織は1ウェルあたり2ミリリットルの角膜培地を含む12ウェルプレートの個々の井戸に上に置き、17 GFPウイルス溶液の5番目のプラーク形成ユニットに5マイクロリットルを各角膜表面の破片状の部位に加える。すべての角膜が採取されたら、プレートを摂氏37度、5%の二酸化炭素インキュベーターを72時間置き、実験で使用されていない追加の目に10%漂白剤をスプレーしてバイオハザードバッグで安全に処分します。薬物を添加する前に毎日、角膜のプレートをステレオ顕微鏡の下に置き、GFPフィルターと500マイクロ秒の暴露時間を選択します。ウイルスの広がりと樹状突起のすべてが明確に視覚化されるまで、一連の増加する倍率で角膜をイメージングする前に、最も低い倍率で画像をキャプチャします。すべての角膜が画像化されたら、プレートを組織培養インキュベーターに戻します。感染前日、コンフルエントベロ細胞培養を1回1回10ミリリットルのPBSで2回洗浄し、摂氏37度で5〜10分間、1回0.05%トリプシンを1ミリリットルで処理する。細胞が剥離したら、9ミリリットルの培地を使用して、細胞がフラスコ表面から完全に外れ、得られた細胞懸濁液を15ミリリットルの遠心分離管に移すことを確認します。新しい6つのウェルプレートの各ウェルに300マイクロリットルの細胞を加え、次に各ウェルに2ミリリットルの培地を加え、一晩細胞培養インキュベーターにプレートを入れます。翌朝、定量のために各角膜からウイルスを採取し、無菌綿棒先端をバイオセーフティキャビネットの複数のマイクロ遠心分離管に綿棒当たり500マイクロリットルで少なくとも5分間浸す。インキュベーションの終わりに、感染したブタの角膜培養物をキャビネットに入れる。湿った綿棒を使用して、過度の圧力を加えることなく、各感染したブタ角膜の中心から3回転を時計回りに、反時計回りに5ミリメートル回転させます。一連の回転の終わりに、その無血清培地で各綿棒を時計回りに、反時計回りにマイクロ遠心チューブを回し、綿棒を切断して、先端が蓋を閉じた状態で各チューブ内に収まるようにします。すべての角膜がスワッピングされたら、1分間高速でチューブを渦盛りします。各角膜から採取したウイルスの量を定量化するために、マイクロ遠心分離チューブ中の無血清培地中のウイルスの1倍の丸10倍希釈を調製し、10倍から負の8に達するまで調製する。各ウェルの細胞から増殖培地を吸引した後、各ウイルス希釈の1ミリリットルを1回から10回から負の3個のメッキ細胞単層に移し、感染した細胞を細胞培養器に2時間置く。インキュベーションの終わりに、72時間のインキュベーションのために、またはプラークの形成が観察されるまで、各ウェルにメチルセルロースを含む培地の2ミリリットルを追加する前に、PBSでそれぞれをよく2回静かに洗います。プラーク観察時に、各ウェルの隅に1ミリリットルのメタノールをゆっくりと加え、室温で15分間インキュベーションします。インキュベーションの終了時に、細胞単層を乱すことなく各ウェルから内容物をゆっくりと吸引する。次に、各々に1ミリリットルの結晶紫色の働き溶液を用いてラベルを付け、すべての細胞が光から保護された30分間のインキュベーションのために覆われていることを注意してください。インキュベーションの終わりに、溶液を捨てて吸収性紙の上にウェルを乾燥させ、次に最も高い希釈ウェルでプラークの数を数え、開始溶液中のウイルス含有量の合計を3回定量化する。この立体蛍光イメージング解析で観察されるように、BX795の抗ウイルス効果は、ウイルス拡散を制御するTFTのそれと同様であり、車両で処理された角膜は、最初のウイルス接種後6日までに中央感染ゾーンから周辺へのウイルスの広がりを示すのみである。同様に、感染後2日目および4日目に採取した眼綿棒は、陽性対照およびBX795処理サンプルにおいてウイルスの完全な阻害を示し、一方、感染性ウイルス力素の急激な増加は陰性対照サンプルで観察される。ブタの眼全体からのブタの角膜の分離は最も重要なステップです。手順 2.3 ~ 2.6 は、このプロセスで最も重要です。我々のモデルは、ブタ角膜におけるウイルスの樹状拡散を理解するために使用することができる。この方法は、細菌および真菌感染症に向けて拡張することができます。この方法は、ヒトモデル外の角膜におけるウイルスの樹状拡散を可視化するのに役立った。このモデルは、動物およびヒトの試験に向かう前に薬物の有効性をテストするのに役立ちます.

Research

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To identify potential antivirals against BTV, we have  developed, optimized and validated three assays presented here. The CPE-based  assay was the first ...

Ex Vivo Infection of Murine Epidermis with Herpes Simplex Virus Type 1

Ex Vivo Infection of Murine Epidermis with Herpes Simplex Virus Type 1

単純ヘルペスウイルス1型を持つマウス表皮の ex vivo 感染

To enter its human host, herpes simplex virus type 1 (HSV-1) must overcome the barrier of mucosal surfaces, skin, or cornea. HSV-1 targets keratinocytes ...

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Overexpression and Purification of Human Cis-prenyltransferase in Escherichia coli

ヒトの過剰発現と精製<em&gt;シス</em&gt; - プレニルトランスフェラーゼ<em&gt;大腸菌</em

Prenyltransferases (PT) are a group of enzymes that catalyze chain elongation of allylic diphosphate using isopentenyl diphosphate (IPP) via multiple ...