Name: co-culture of glioblastoma stem-like cells on patterned neurons to study migration and cellular interactions
Uploaded: 2021-02-24T14:30:00
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这项工作得到了ARC基金会2020年，联赛癌症（吉隆德委员会），ARTC，计划癌症2021年，INCA PLBIO的支持。阿尔韦奥勒得到国家雷彻奇（格兰特·拉贝克斯·布雷恩-10-LABX-43）的支持。乔里斯·古永是图卢兹大学医院（楚图卢兹）的奖学金获得者。

知情的书面同意是从所有患者（根据当地道德委员会的规定，从挪威卑尔根的豪克兰医院）获得的。该协议遵循波尔多大学人类和动物研究伦理委员会的指导方针。怀孕的老鼠被安置和治疗在波尔多大学的动物设施。使用二氧化碳对E18次怀孕大鼠进行安乐死。所有动物程序均按照机构准则完成，并经当地道德委员会批准。所有商业产品均参照 材料表。
1. ?...

<ol>
	<li>Shergalis, A., Bankhead, A., Luesakul, U., Muangsin, N., Neamati, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Current+challenges+and+opportunities+in+treating+glioblastoma.">Current challenges and opportunities in treating glioblastoma.</a> Pharmacology Reviews. 70, 412-445 (2018).</li><li>Scherer, H. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+forms+of+growth+in+gliomas+and+their+practical+significance.">The forms of growth in gliomas and their practical significance.</a> Brain. 63, 1-35 (1940).</li><li>Zagzag, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hypoxia-+and+vascular+endothelial+growth+factor-induced+stromal+cell-derived+factor-1&#945;/CXCR4+expression+in+glioblastomas.">Hypoxia- and vascular endothelial growth factor-induced stromal cell-derived factor-1&#945;/CXCR4 expression in glioblastomas.</a> American Journal of Pathology. 173, 545-560 (2008).</li><li>Wang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Invasion+of+white+matter+tracts+by+glioma+stem+cells+is+regulated+by+a+NOTCH1-SOX2+positive-feedback+loop.">Invasion of white matter tracts by glioma stem cells is regulated by a NOTCH1-SOX2 positive-feedback loop.</a> Nature Neurosciences. 22, 91-105 (2019).</li><li>Venkataramani, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Glutamatergic+synaptic+input+to+glioma+cells+drives+brain+tumour+progression.">Glutamatergic synaptic input to glioma cells drives brain tumour progression.</a> Nature. 573, 532-538 (2019).</li><li>Venkatesh, H. 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G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=p120-catenin-dependent+collective+brain+infiltration+by+glioma+cell+networks.">p120-catenin-dependent collective brain infiltration by glioma cell networks.</a> Nature Cell Biology. 22, 97-107 (2020).</li><li>Guyon, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+3D+spheroid+model+for+glioblastoma.">A 3D spheroid model for glioblastoma.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (158), (2020).</li><li>Strale, P. O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multiprotein+Printing+by+Light?Induced+Molecular+Adsorption.">Multiprotein Printing by Light?Induced Molecular Adsorption.</a> Advanced Materials. , (2015).</li><li>Rao, S. 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J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Co-cultures+with+stem+cell-derived+human+sensory+neurons+reveal+regulators+of+peripheral+myelination.">Co-cultures with stem cell-derived human sensory neurons reveal regulators of peripheral myelination.</a> Brain. 140, 898-913 (2017).</li><li>Linkous, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modeling+patient-derived+glioblastoma+with+cerebral+organoids.">Modeling patient-derived glioblastoma with cerebral organoids.</a> Cell Reports. 26, 3203-3211 (2019).</li><li>Han, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interfering+with+long+non-coding+RNA+MIR22HG+processing+inhibits+glioblastoma+progression+through+suppression+of+Wnt/&#946;-catenin+signalling.">Interfering with long non-coding RNA MIR22HG processing inhibits glioblastoma progression through suppression of Wnt/&#946;-catenin signalling.</a> Brain. 143, 512-530 (2020).</li></ol>

胶质母细胞瘤广泛入侵帕奇马使用不同的模式：共同选择周围的血管，间歇性入侵，或在WMTs18入侵。后一种模式在文献中没有很好的特征，因为很难找到合适的体外或体内模型与WMT入侵有关。在这里，提出了一个简化的模型，其中培养啮齿动物神经元在层压涂层表面上进行图案，荧光GBM干细胞在神经元之上播种。本研究采用网格形状模式，改进肿瘤细胞附着、入侵?...

原发性恶性胶质瘤，包括GBM，是毁灭性的肿瘤，GBM患者的中等存活率为12至15个月。目前的治疗依赖于大肿瘤大规模切除和化疗加上放射治疗，这只会延长几个月的存活率。治疗失败与跨血脑屏障（BBB）的不良药物输送以及血管间空间、脑膜和WMT1沿线的侵入性生长密切相关。血管入侵，也称为血管共同选择，是一个经过充分研究的过程，分子机制开始被阐明：然而，沿WMT的GBM细胞入侵过程并不被很好地理解。肿瘤细胞沿着舍勒的次生结构2迁移到健康的大脑中。事实上，近一个世纪前，汉斯-约阿希姆·舍勒描述了GBM的侵入性路线，现在被称为腹膜饱腹症、腹膜饱腹症、亚皮亚传播和沿WMT（图1A）的入侵。
一些化疗因子及其受体，如频闪细胞衍生因子-1+（SDF1+）和C-X-C图案化学素受体4（CXCR4），但不是血管内皮生长因子（VEGF），似乎与WMT入侵3有关。最近，一个跨细胞的T1-SOX2轴已被证明是WMT入侵GBM细胞4的重要途径。作者描述了GBM干细胞如何侵入部分未髓化神经元的脑帕奇玛，这表明GBM细胞对骨髓护套的破坏。2019年，《自然》杂志发表了三篇文章，强调了电活动在胶质瘤发育中的作用。Monje 和合作者的开创性工作揭示了电活动在神经质-3分泌中的核心作用，这种分泌物促进胶质瘤的发展。
Winkler和合作者描述了GBM细胞（微管）之间的连接在侵入性步骤中至关重要，最近，GBM细胞和神经元之间通过新描述的神经胶质瘤突触相互作用。这些结构有利于对位于GBM细胞膜的α氨基-3-羟基-5-甲基-4-异氧丙烯酸（AMPA）受体进行谷氨酸刺激，从而促进肿瘤的发展和入侵。肿瘤细胞入侵是转移或远继发的传播过程中的一个中心过程，如GBM患者所观察到的。已确定在GBM入侵中很重要的几个因素，如血栓蓬丁-1，一种转化生长因子β（TGF+调节的基质细胞蛋白，或化学素受体CXCR3）7，8。
在这里，一个简化的生物仿生模型被描述为研究GBM入侵，其中神经元在层压素的轨道上成型，GBM细胞作为单细胞或球体（图1B）播种到它上面。这两个实验设置旨在回顾神经元的入侵，这是在GBM9，10，11观察到的。这种模型过去曾被开发成对齐的纳米纤维生物材料（核心壳电平），允许通过调节机械或化学特性12来研究细胞迁移。本文中描述的共同培养模型通过定义这个过程中涉及的新分子通路，可以更好地了解 GBM 细胞如何逃逸到神经元上。

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>(3-aminopropyl) triethoxysilane</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>440140-100ML</td>
			<td>The amino group is useful for the bioconjugation of mPEG-SVA</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>96-well round-bottom plate</td>
			<td>Sarstedt</td>
			<td>2582624</td>
			<td>Used to prepare spheroids</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Accutase</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>A11105-01</td>
			<td>Stored at -20 &#176;C (long-term) or 4 &#176;C (short-term), sphere dissociation enzyme</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>B27</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>12587</td>
			<td>Stored at -20 &#176;C, defrost before use</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Basic Fibroblast Growth Factor</td>
			<td>Peprotech</td>
			<td>100-18B</td>
			<td>Stored at -20 &#176;C, defrost before use</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Countess Cell Counting ChamberSlides</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>C10283</td>
			<td>Used to cell counting</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Coverslips</td>
			<td>Marienfeld</td>
			<td>111580</td>
			<td>Cell culture substrate</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dessicator cartridges</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>Z363456-6EA</td>
			<td>Used to reduce mosture during (3-aminopropyl) triethoxysilane treatment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DPBS 10x</td>
			<td>Pan Biotech</td>
			<td>P04-53-500</td>
			<td>Stored at 4 &#176;C</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fiji software, MTrack2 macro</td>
			<td>ImageJ</td>
			<td></td>
			<td>Used to analyze pictures</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Flask 75 cm&#178;</td>
			<td>Falcon</td>
			<td>10497302</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HBSS</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>H8264-500ML</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heparin sodium</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>H3149-100KU</td>
			<td>Stored at 4 &#176;C</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Laminin</td>
			<td></td>
			<td>114956-81-9</td>
			<td>Promotes neuronal adhesion</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Leonardo software</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>loading of envisioned micropatterns</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MetaMorph Software&#160;</td>
			<td>Molecular Devices LLC</td>
			<td>NA</td>
			<td>Microscopy automation software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Methylcellulose</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>M0512</td>
			<td>Diluted in NBM for a 2% final concentration</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Neurobasal medium</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>21103-049</td>
			<td>Stored at 4 &#176;C</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nikon TiE (S Fluor, 20x/0.75 NA)</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>inverted microscope equipped with a motorized stage&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin - Streptomycin</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>15140-122</td>
			<td>Stored at 4 &#176;C</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PLPP</td>
			<td>Alveole</td>
			<td>PLPPclassic_1ml</td>
			<td>Photoinitiator used to degrade the PEG brush</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Poly(ethylene glycol)-Succinimidyl Valerate (mPEG-SVA)</td>
			<td>Laysan Bio</td>
			<td>VA-PEG-VA-5000-5g</td>
			<td>Used as an anti-fouling coating</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PRIMO</td>
			<td>Alveole</td>
			<td>PRIMO1</td>
			<td>Digital micromirror device (DMD)-based UV projection apparatus</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypan blue 0.4%</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>T10282</td>
			<td>Used for cell counting</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin-EDTA</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>T4049-100ML</td>
			<td>Used to detach adherent cells</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

co-culture of glioblastoma stem-like cells on patterned neurons to study migration and cellular interactions

胶质母细胞瘤（GBMs），四级恶性胶质瘤，是人类癌症中最致命的类型之一，因为它们具有攻击性特征。尽管这些肿瘤的遗传学取得了重大进展，但GBM细胞如何侵入健康的脑帕伦奇马尚不清楚。值得注意的是，已证明GBM细胞通过不同的途径侵入永久空间：本文的主要兴趣是沿白质区（WMTs）的路线。肿瘤细胞与围产神经细胞成分的相互作用特征不充分。在此，描述了一种评估神经元对GBM细胞入侵的影响的方法。本文通过分析神经元上GBM干细胞的迁移，提出了一种先进的体外共培养检测，模拟WMT入侵。使用开源和自由访问软件的自动跟踪程序对GBM细胞在神经元存在时的行为进行监控。这种方法对许多应用都很有用，特别是对于功能和机械学研究，以及分析药理制剂对阻止GBM细胞迁移对神经元的影响。

与荧光GBM细胞共同培养的模式神经元按照协议部分的描述进行了培养，并进行了跟踪实验。GBM细胞在神经元上迁移时迅速改变其形状（图1B：面板6 和 视频1）。细胞沿着神经元扩展迁移，以随机运动（视频1）。荧光GBM细胞和非荧光神经元可以很容易地区分，这允许使用斐济宏跟踪细胞运动，如协议部分（图2）所?...

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Co-culture of Glioblastoma Stem-like Cells on Patterned Neurons to Study Migration and Cellular Interactions

在这里，我们提出了一个易于使用的共培养检测，以分析胶质母细胞瘤（GBM）迁移的模式神经元。我们在FiJi软件中开发了一个宏，用于简单量化神经元上的GBM细胞迁移，并观察到神经元会改变GBM细胞的侵入能力。

胶质母细胞瘤干细胞在模式神经元上共同培养，以研究迁移和细胞相互作用

Glioblastomas (GBMs), grade IV malignant gliomas, are one of the deadliest types of human cancer because of their aggressive characteristics. Despite ...

胶质母细胞瘤是具有高侵入性特征的破坏性脑肿瘤。这种共培养系统模仿胶质母细胞在神经元上迁移，以重新概括患者观察到的侵入性途径之一。我们共同文化模型的几何学和组成得到了精确控制。它确实有助于更好的可重复性，也有助于对复杂的生物过程进行直接量化。这种方法可以通过共同培养刚分离的胶质母细胞和神经元来适应临床诊断。它定义了临床指数，这对于临床结果非常重要。我们的方法还可用于量化其他迁移细胞，如成纤维细胞或免疫细胞。演示这个程序的将是乔里斯·古永，我团队的博士生。要为微模式制作基板，请通过空气或等离子体激活 18 毫米圆形玻璃盖片 5 分钟，然后将盖片放入干燥器中，用 100 微升三氧硅烷放置一小时，然后以每毫升 100 毫克的速度孵育 PEG-SVA 溶液，为期一小时。对于凝胶沉积，在孵化结束时，在滑梯中心加入三微升PLPP和50微升绝对乙醇，等到完全干燥。对于玻璃滑动显微模式，将盖子夹安装在 Ludin 腔室中，并将腔室放置在配备自动对焦系统的显微镜的舞台上。成像后，将微模式图像加载到软件中。自动紫外线照明测序后，使用移液器用 PBS 广泛清洗盖片中的 PLPP。然后用每毫升层蛋白50微克孵育盖片30分钟，然后用PBS进行另一次洗涤。要在微模式盖片上建立胚胎大鼠海马神经元培养，在最后一次洗涤后，用神经元细胞培养介质补充玻璃滑梯水分。种子5倍10至第四只大鼠海马神经元悬浮在神经巴萨尔介质中，每平方厘米3%马血清富集到每个微模式盖片上，在37摄氏度的5%二氧化碳孵化器中24小时孵化。离心分离胶质母细胞5分钟，在1000 RPM，并恢复颗粒在胶质母细胞培养介质，然后沉积1倍10到第三GBM细胞在微模式神经元。对于细胞的活细胞成像，将共培养置于装有37摄氏度恒温器室的倒显微镜的舞台上，并选择20倍的目标。然后使用显微镜软件中的多维采集工具箱，根据神经元模式的数量，每两分钟获取一次实时布莱特菲尔德和表观发光的GFP番茄图像，在16个不同位置拍摄12小时。对于神经元网络分析，成像后，从堆栈中选择一个图像。右键单击网络工具以打开相应的选项对话框并调整设置以生成图像的精确细分。单击"确定"。左键单击网络工具以复制所选图像，并将图像拆分为红色、灰色和绿色通道。选择灰色通道并执行对比拉伸增强，以改善不同区域之间的分离。使用 Sobel 边缘探测器执行 2D 信号处理卷积，按查找边缘命令分组。对于双重过滤，应用高斯模糊和中位数滤光片来降低噪音并平滑物体信号。要转换为面膜，执行调整的阈值算法以获取黑白像素的二进制图片。接下来，将细胞区域骨架化为一个简单的网络，并使用滤光颗粒去除结果中的小非网络粒子。网络图像中的网络滤光颗粒。要获得红色和绿色通道，使用调整后的阈值方法进行双重过滤并转换为面膜。使用分析粒子来确定二元绿色图像中的细胞形态。使用或操作员使用其感兴趣的区域合并所有通道，并将其初始颜色重新调整为简单的 RGB 图像。要执行单细胞动态分析，只需右键单细胞跟踪工具即可打开相应的选项对话框并调整设置以生成图像的精确细分。单击"确定"，然后左键单细胞跟踪以删除灰色通道。要根据时间生成与图像堆栈相对应的图像，请应用 Z 投影和双滤镜并转换以掩盖单元留下的痕迹。从二进制红色和绿色图像中删除小颗粒，如所示。使用兴趣区域工具选择单元跟踪的每个轮廓，并检查选项对话窗口中的跳过边缘检测框。隔离原始堆栈上的红色通道，并选择一个感兴趣的区域。双滤除所有图像并转换为面膜，以便确定每个双核核的中心 XY 位置。XY 位置可用于计算单元格的平均方位移、方向比和平均速度。对于多个单元跟踪分析，只需右键单击跟踪工具，打开相应的选项对话框并调整设置以生成图像的精确细分。左键单击跟踪工具以删除灰色通道。拆分红色和绿色通道，双滤镜，并转换为面膜。然后使用图像计算器命令与操作员合并通道，只留下位于膜内的原子核信号，并计算所示单元的轨迹图、平均方位、方向比和平均速度。荧光GBM与有图案的神经元共同培养，快速改变其形状，并以随机运动显示神经元扩展的迁移。播种到神经元的GBM细胞显示一个拉长的形状，多个突起跟随神经元轨道，而细胞在层压素上培养时保持其圆形。在培养的后期阶段，在GBM神经元共生培养中可以观察到与细胞相连的细突起。播种到神经元的GBM细胞比在这些轨迹图中观察到的在层压素上播种的GBM细胞表现出更大的迁移能力。对细胞荧光汇合的分析表明，在500分钟的观察期内，当球体与神经元共同培养时，观察到的细胞迁移比单单在层蛋白上培养的细胞迁移要多。事实上，在分析结束时，近一半的模式被GBM细胞覆盖，而层压素培养的球体仍然不与盖片相联。根据您想要回答的生物学问题，人们应该注意模式设计和细胞密度是体内条件的代表。细胞可以通过聚焦显微镜固定和成像。实时成像也是可能的，因为我们的方法不会损害成像能力。该技术非常适合研究分子相互作用，如胶质母细胞和神经元之间的代谢交换。它允许探索功能生物过程。高通量实验也可用于临床目的。

Research

JoVE Journal

Cancer Research

Coculture Assays to Study Macrophage and Microglia Stimulation of Glioblastoma Invasion

共培养化验，以研究胶质母细胞瘤入侵的巨噬细胞和小胶质细胞刺激

Glioblastoma multiforme (grade IV glioma) is a very aggressive human cancer with a median survival of 1 year post diagnosis. Despite the increased ...

科研

癌症研究

The Drosophila Imaginal Disc Tumor Model: Visualization and Quantification of Gene Expression and Tumor Invasiveness Using Genetic Mosaics

The Drosophila Imaginal Disc Tumor Model: Visualization and Quantification of Gene Expression and Tumor Invasiveness Using Genetic Mosaics

该<em&gt;果蝇</em&gt;成虫盘瘤模型：基因的表达与肿瘤侵袭性的可视化和定量遗传马赛克

Drosophila melanogaster has emerged as a powerful experimental system for functional and mechanistic studies of tumor development and progression in the ...

Flow Cytometry-based Drug Screening System for the Identification of Small Molecules That Promote Cellular Differentiation of Glioblastoma Stem Cells

流动 Cytometry-based 药物筛选系统对促进细胞分化胶质母细胞瘤小分子的鉴定

Glioblastoma (GBM) is the most common and most lethal primary brain tumor in adults, causing roughly 14,000 deaths each year in the U.S. alone. Median ...

Using the Dot Assay to Analyze Migration of Cell Sheets

用点法分析细胞板的迁移

Although complex organisms appear static, their tissues are under a continuous turnover. As cells age, die, and are replaced by new cells, cells move ...

Acellular and Cellular Lung Model to Study Tumor Metastasis

脱细胞和细胞肺模型研究肿瘤转移

It is difficult to isolate tumor cells at different points of tumor progression. We created an ex vivo lung model that can show the interaction of tumor ...

Live-Cell Imaging Assays to Study Glioblastoma Brain Tumor Stem Cell Migration and Invasion

活体细胞成像技术研究胶质瘤脑干细胞的迁移和侵袭

Glioblastoma (GBM) is an aggressive brain tumor that is poorly controlled with the currently available treatment options. Key features of GBMs include ...

Mesenchymal Stem Cell Isolation from Pulp Tissue and Co-Culture with Cancer Cells to Study Their Interactions

骨髓间充质干细胞在浆组织中的分离及与癌细胞联合培养研究其相互作用

Cancer as a multistep process and complicated disease is not only regulated by individual cell proliferation and growth but also controlled by tumor ...

Using Microarrays to Interrogate Microenvironmental Impact on Cellular Phenotypes in Cancer

利用微阵列研究微环境对癌症细胞表型的影响

Understanding the impact of the microenvironment on the phenotype of cells is a difficult problem due to the complex mixture of both soluble growth ...

Isolation of Stem-like Cells from 3-Dimensional Spheroid Cultures

从3维球体培养中分离出类似干细胞的细胞

Despite advances in adult stem cell research, identification and isolation of stem cells from tissue specimens remains a major challenge. While resident ...

Studying the Effects of Tumor-Secreted Paracrine Ligands on Macrophage Activation using Co-Culture with Permeable Membrane Supports

研究肿瘤分泌性副体结扎对宏噬细胞活化的影响，使用可渗透膜支架共培养

Tumor-derived paracrine signaling is an overlooked component of local immunosuppression and can lead to a permissive environment for continued cancer ...