Name: co-culture of glioblastoma stem-like cells on patterned neurons to study migration and cellular interactions
Uploaded: 2021-02-24T14:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Co-culture of Glioblastoma Stem-like Cells on Patterned Neurons to Study Migration and Cellular Interactions at JoVE.com

Ce travail a été soutenu par la Fondation ARC 2020, ligue contre le cancer (Comite de la Gironde), ARTC, Plan Cancer 2021, INCA PLBIO. Alveole est soutenu par l’Agence Nationale de la Recherche (Grant Labex BRAIN ANR-10-LABX-43). Joris Guyon est boursier du CHU Toulouse.

Le consentement écrit éclairé a été obtenu de tous les patients (de l’hôpital Haukeland, Bergen, Norvège, conformément aux règlements du comité d’éthique local). Ce protocole suit les directives des comités d’éthique de la recherche humaine et animale de l’Université de Bordeaux. Des rats gravides ont été logés et traités dans l’installation animalier de l’Université de Bordeaux. L’euthanasie d’une rate enceinte chronométré e18 a été réalisée en utilisant le CO2. Toutes...

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	<li>Shergalis, A., Bankhead, A., Luesakul, U., Muangsin, N., Neamati, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Current+challenges+and+opportunities+in+treating+glioblastoma.">Current challenges and opportunities in treating glioblastoma.</a> Pharmacology Reviews. 70, 412-445 (2018).</li><li>Scherer, H. 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J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Co-cultures+with+stem+cell-derived+human+sensory+neurons+reveal+regulators+of+peripheral+myelination.">Co-cultures with stem cell-derived human sensory neurons reveal regulators of peripheral myelination.</a> Brain. 140, 898-913 (2017).</li><li>Linkous, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modeling+patient-derived+glioblastoma+with+cerebral+organoids.">Modeling patient-derived glioblastoma with cerebral organoids.</a> Cell Reports. 26, 3203-3211 (2019).</li><li>Han, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interfering+with+long+non-coding+RNA+MIR22HG+processing+inhibits+glioblastoma+progression+through+suppression+of+Wnt/&#946;-catenin+signalling.">Interfering with long non-coding RNA MIR22HG processing inhibits glioblastoma progression through suppression of Wnt/&#946;-catenin signalling.</a> Brain. 143, 512-530 (2020).</li></ol>

Les glioblastomes envahissent largement le parenchyme en utilisant différents modes: cooptation des vaisseaux sanguins environnants, invasion interstitielle ou invasion sur wmts18. Ce dernier mode n’est pas bien caractérisé dans la littérature en raison de la difficulté à trouver des modèles in vitro ou in vivo appropriés liés à l’invasion de WMT. Ici, un modèle simplifié a été proposé dans lequel les neurones de rongeurs cultivés ont été modelés sur des su...

Les gliomes malins primaires, y compris gbms, sont des tumeurs dévastatrices, avec un taux de survie moyen de 12 à 15 mois rapportés pour des patients de GBM. La thérapie courante se fonde sur la grande résection de masse de tumeur et la chimiothérapie couplées avec la radiothérapie, qui prolonge seulement le taux de survie de quelques mois. Les échecs thérapeutiques sont intimement liés à une mauvaise administration de médicaments à travers la barrière hémato-encéphalique (BHE) et à la croissance invasive dans les espaces périvasculaires, les méninges et le long desTMM 1. L’invasion périvasculaire, également appelée co-option vasculaire, est un processus bien étudié, et les mécanismes moléculaires commencent à être élucidés ; cependant, le processus de l’invasion de cellules gbm le long de WMTs n’est pas bien compris. Les cellules tumorales migrent dans le cerveau sain le long des structures secondaires de Scherer2. En effet, il y a près d’un siècle, Hans-Joachim Scherer a décrit les voies invasives de la GBM, qui sont maintenant appelées satellitosis périnéuronal, satellitosis périvasculaire, propagation subpial, et invasion le long de la WMT (Figure 1A).
Certaines chimiokines et leurs récepteurs, tels que le facteur 1α dérivé des cellules stromales (SDF1α) et le récepteur 4 des chimiokines à motif C-X-C (CXCR4), mais pas le facteur de croissance endothélial vasculaire (VEGF), semblent être impliqués dans l’invasion WMT3. Plus récemment, un axe transcellulaire NOTCH1-SOX2 s’est avéré être une voie importante dans l’invasion WMT des cellules GBM4. Les auteurs ont décrit comment les cellules souches gbm envahissent le parenchyme de cerveau sur des neurones partiellement unmyelinated, suggérant la destruction des gaines de myelin par des cellules de GBM. Une étape importante a été franchie en 2019 lorsque trois articles ont été publiés de manière concluante dans la revue Nature, soulignant le rôle de l’activité électrique dans le développement du gliome5,6. Les travaux fondateurs de Monje et de ses collaborateurs ont mis en lumière le rôle central de l’activité électrique dans la sécrétion de neuroligine-3, qui favorise le développement du gliome.
Winkler et ses collaborateurs ont décrit les connexions entre les cellules GBM (microtubes) étant cruciales dans les étapes invasives, et dernièrement, les interactions entre les cellules GBM et les neurones via les synapses de neurogliome nouvellement décrites. Ces structures favorisent la stimulation glutamatergique des récepteurs de l’acide α-amino-3-hydroxy-5-methyl-4-isoxazolepropionic acid (AMPA) situés à la membrane cellulaire gbm, qui favorise le développement et l’invasion de tumeur. L’invasion de cellules de tumeur est un processus central dans la diffusion des métastases ou des foyers secondaires éloignés, comme observé dans des patients de GBM. Plusieurs facteurs ont été identifiés comme étant importants dans l’invasion du GBM tels que la thrombospondine-1, un facteur de croissance transformant bêta (protéine matricellulaire régulée par TGFβ, ou le récepteur de chimiokine CXCR3)7,8.
Ici, un modèle biomimétique simplifié a été décrit pour l’étude de l’invasion gbm, dans lequel les neurones sont modelés sur des pistes de laminine, et les cellules GBM sont ensemencées dessus, comme des cellules uniques ou comme des sphéroïdes (Figure 1B). Les deux décors expérimentaux visent à récapituler l’invasion sur les neurones, qui est observée dans GBM9,10,11. De tels modèles ont été développés dans le passé sous forme de biomatériaux en nanofibres alignés (électrofilage noyau-coquille) qui permettent d’étudier la migration cellulaire en modulant les propriétés mécaniques ou chimiques12. Le modèle de co-culture décrit dans cet article permet de mieux comprendre comment les cellules GBM s’échappent sur les neurones en définissant de nouvelles voies moléculaires impliquées dans ce processus.

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	<tbody>
		<tr>
			<td>(3-aminopropyl) triethoxysilane</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>440140-100ML</td>
			<td>The amino group is useful for the bioconjugation of mPEG-SVA</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>96-well round-bottom plate</td>
			<td>Sarstedt</td>
			<td>2582624</td>
			<td>Used to prepare spheroids</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Accutase</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>A11105-01</td>
			<td>Stored at -20 &#176;C (long-term) or 4 &#176;C (short-term), sphere dissociation enzyme</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>B27</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>12587</td>
			<td>Stored at -20 &#176;C, defrost before use</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Basic Fibroblast Growth Factor</td>
			<td>Peprotech</td>
			<td>100-18B</td>
			<td>Stored at -20 &#176;C, defrost before use</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Countess Cell Counting ChamberSlides</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>C10283</td>
			<td>Used to cell counting</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Coverslips</td>
			<td>Marienfeld</td>
			<td>111580</td>
			<td>Cell culture substrate</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dessicator cartridges</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>Z363456-6EA</td>
			<td>Used to reduce mosture during (3-aminopropyl) triethoxysilane treatment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DPBS 10x</td>
			<td>Pan Biotech</td>
			<td>P04-53-500</td>
			<td>Stored at 4 &#176;C</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fiji software, MTrack2 macro</td>
			<td>ImageJ</td>
			<td></td>
			<td>Used to analyze pictures</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Flask 75 cm&#178;</td>
			<td>Falcon</td>
			<td>10497302</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HBSS</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>H8264-500ML</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heparin sodium</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>H3149-100KU</td>
			<td>Stored at 4 &#176;C</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Laminin</td>
			<td></td>
			<td>114956-81-9</td>
			<td>Promotes neuronal adhesion</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Leonardo software</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>loading of envisioned micropatterns</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MetaMorph Software&#160;</td>
			<td>Molecular Devices LLC</td>
			<td>NA</td>
			<td>Microscopy automation software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Methylcellulose</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>M0512</td>
			<td>Diluted in NBM for a 2% final concentration</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Neurobasal medium</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>21103-049</td>
			<td>Stored at 4 &#176;C</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nikon TiE (S Fluor, 20x/0.75 NA)</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>inverted microscope equipped with a motorized stage&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin - Streptomycin</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>15140-122</td>
			<td>Stored at 4 &#176;C</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PLPP</td>
			<td>Alveole</td>
			<td>PLPPclassic_1ml</td>
			<td>Photoinitiator used to degrade the PEG brush</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Poly(ethylene glycol)-Succinimidyl Valerate (mPEG-SVA)</td>
			<td>Laysan Bio</td>
			<td>VA-PEG-VA-5000-5g</td>
			<td>Used as an anti-fouling coating</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PRIMO</td>
			<td>Alveole</td>
			<td>PRIMO1</td>
			<td>Digital micromirror device (DMD)-based UV projection apparatus</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypan blue 0.4%</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>T10282</td>
			<td>Used for cell counting</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin-EDTA</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>T4049-100ML</td>
			<td>Used to detach adherent cells</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

co-culture of glioblastoma stem-like cells on patterned neurons to study migration and cellular interactions

Les glioblastomes (GBM), gliomes malins de grade IV, sont l’un des types les plus mortels de cancer humain en raison de leurs caractéristiques agressives. En dépit des avances significatives dans la génétique de ces tumeurs, comment les cellules de GBM envahissent le parenchyme sain de cerveau n’est pas bien comprise. Notamment, on lui a montré que les cellules de GBM envahissent l’espace peritumoral par différentes voies ; l’intérêt principal de cet article est la route le long des étendues de matière blanche (WMTs). Les interactions des cellules tumorales avec les composants peritumoral nerveux de cellules ne sont pas bien caractérisées. Ici, une méthode a été décrite qui évalue l’impact des neurones sur l’invasion cellulaire gbm. Ce document présente une analyse in vitro avancée de co-culture qui imite l’invasion de WMT en analysant la migration de GBM tige-comme des cellules sur des neurones. Le comportement des cellules GBM en présence de neurones est surveillé à l’aide d’une procédure de suivi automatisée avec un logiciel open source et en accès libre. Cette méthode est utile pour de nombreuses applications, en particulier, pour des études fonctionnelles et mécanistes ainsi que pour l’analyse des effets des agents pharmacologiques qui peuvent bloquer la migration cellulaire GBM sur les neurones.

Des neurones modelés co-cultivés avec les cellules fluorescentes de GBM ont été préparés comme décrit dans la section de protocole, et des expériences de suivi ont été exécutées. Les cellules GBM ont rapidement modifié leur forme lors de la migration sur les neurones(Figure 1B: panneau 6 et Vidéo 1). Les cellules ont migré le long des extensions neuronales, dans un mouvement aléatoire (Vidéo 1). Les cellules GBM fluorescente...

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Co-culture of Glioblastoma Stem-like Cells on Patterned Neurons to Study Migration and Cellular Interactions

Ici, nous présentons un test de co-culture facile à utiliser pour analyser la migration du glioblastome (GBM) sur des neurones à motifs. Nous avons développé une macro dans le logiciel FiJi pour une quantification facile de la migration des cellules GBM sur les neurones, et avons observé que les neurones modifient la capacité invasive des cellules GBM.

Co-culture de cellules souches de glioblastome sur des neurones à motifs pour étudier la migration et les interactions cellulaires

Glioblastomas (GBMs), grade IV malignant gliomas, are one of the deadliest types of human cancer because of their aggressive characteristics. Despite ...

Les glioblastomes sont des tumeurs cérébrales dévastatrices avec un profil invasif élevé. Ce système de co-culture imite la migration des cellules du glioblastome sur les neurones pour récapituler l’une des voies invasives observées chez les patients. La géométrie et la composition de notre modèle de co-culture sont contrôlées avec précision.Il facilite une meilleure reproductibilité et aussi une quantification simple des processus biologiques complexes. Cette méthode peut être adaptée au diagnostic clinique en co-cultivant des cellules et des neurones de glioblastome fraîchement dissociés. Il définit un index clinique, ce qui est très important en tant que résultat clinique.Notre méthode peut également être utilisée pour quantifier d’autres cellules migratrices, telles que les fibroblastes ou les cellules immunitaires. Joris Guyon, un doctorant de mon équipe, fera la démonstration de la procédure. Pour fabriquer un substrat pour le micropatterning, traiter les lamelles circulaires de verre de 18 millimètres par activation de l’air ou du plasma pendant cinq minutes avant de placer les lamelles dans un dessiculateur avec 100 microlitres de triéthoxysilane pendant une heure, puis incuber une solution de PEG-SVA à 100 milligrammes par millilitre pendant une heure.Pour le dépôt de gel, à la fin de l’incubation, ajoutez trois microlitres de PLPP et 50 microlitres d’éthanol absolu au centre de la lame et attendez qu’elle sèche complètement. Pour le micropatternage de lames de verre, montez la lame de couverture dans une chambre Ludin et placez la chambre sur la scène d’un microscope équipé d’un système de mise au point automatique. Après l’imagerie, chargez les images micropattern dans le logiciel.Après le séquençage automatique de l’éclairage UV, utilisez une pipette pour laver abondamment le PLPP de la lamelle de couverture avec du PBS. Incuber ensuite la lame de couverture avec 50 microgrammes par millilitre de laminine pendant 30 minutes, suivi d’un autre lavage avec pbs comme démontré. Pour mettre en place une culture de neurones de l’hippocampe de rat embryonnaire sur les lamules de couverture du micropattern, après le dernier lavage, réhydratez les lames de verre avec un milieu de culture cellulaire neuronale.Ensemencez cinq fois 10 à la quatrième neurones de l’hippocampe de rat en suspension dans un milieu neurobasal enrichi avec 3% de sérum de cheval par centimètre carré sur chaque lamelle micropatternée pour une incubation de 24 heures dans un incubateur à 5% de dioxyde de carbone à 37 degrés Celsius. Centrifuger les cellules de glioblastome dissociées pendant cinq minutes à 1 000 RPM et remettre en suspension le culot dans le milieu de culture cellulaire du glioblastome, puis déposer une fois 10 aux troisièmes cellules GBM sur les neurones micropatternés. Pour l’imagerie des cellules vivantes des cellules, placez la co-culture sur la scène d’un microscope inversé équipé d’une chambre thermostatée de 37 degrés Celsius et sélectionnez l’objectif 20X.Ensuite, utilisez la boîte à outils d’acquisition multidimensionnelle dans le logiciel de microscope pour acquérir des images de tomates Brightfield et GFP en direct toutes les deux minutes pendant 12 heures dans 16 positions différentes en fonction du nombre de modèles avec des neurones. Pour l’analyse de réseau neuronal, après l’imagerie, sélectionnez une image dans la pile. Cliquez avec le bouton droit sur l’outil réseau pour ouvrir la boîte de dialogue des options correspondante et ajuster les paramètres pour produire une segmentation précise des images.Cliquez sur OK. Cliquez avec le bouton gauche de la souris sur l’outil réseau pour dupliquer l’image sélectionnée et diviser l’image en couches de couleur rouge, gris et vert. Sélectionnez la couche grise et améliorez l’étirement du contraste pour améliorer la séparation entre les différentes zones. Utilisez le détecteur de bord Sobel pour effectuer la convolution de traitement du signal 2D comme regroupé sous la commande find edge.Pour le double filtrage, appliquez un flou gaussien et un filtre médian pour réduire le bruit et lisser le signal de l’objet. Pour convertir en masque, exécutez des algorithmes de seuil adaptés pour obtenir une image binaire avec des pixels noirs et blancs. Ensuite, squelettez la zone cellulaire en un réseau simple et utilisez des particules de filtre pour éliminer les petites particules non en réseau dans les résultats.Filtrer les particules réseau dans une image réseau. Pour obtenir des canaux rouges et verts, effectuez un double filtrage et convertissez-les en masque comme démontré à l’aide de la méthode de seuillage adaptée. Utilisez analyser les particules pour déterminer la morphologie des cellules dans l’image verte binaire.Utilisez l’opérateur or pour fusionner tous les canaux à l’aide de leurs régions d’intérêt et réajuster leur couleur initiale en une image RVB simple. Pour effectuer une analyse de motilité à cellule unique, cliquez avec le bouton droit sur l’outil de suivi de cellule unique pour ouvrir la boîte de dialogue d’options correspondante et ajuster les paramètres pour produire une segmentation précise des images. Cliquez sur OK et cliquez avec le bouton gauche sur le suivi à cellule unique pour supprimer le canal gris.Pour générer une image correspondant à une pile d’images en fonction de l’heure, appliquez une projection Z et un double filtre et convertissez-la pour masquer les traînées laissées par les cellules. Retirez les petites particules de l’image binaire rouge et verte comme illustré. Utilisez l’outil région d’intérêt pour sélectionner chaque isoligne de la trace de cellule et cochez la case de détection des tronçons d’évitement dans la boîte de dialogue des options.Isolez le canal rouge sur la pile d’origine et sélectionnez une région d’intérêt. Double filtrez toutes les images et convertissez-les en masque pour permettre de déterminer la position XY du centroïde de chaque noyau binarisé. Les positions XY peuvent être utilisées pour calculer le déplacement carré moyen, le rapport de directionnalité et la vitesse moyenne de la cellule.Pour l’analyse de suivi de plusieurs cellules, cliquez avec le bouton droit sur l’outil de suivi pour ouvrir la boîte de dialogue d’options correspondante et ajuster les paramètres pour produire une segmentation précise des images. Faites un clic gauche sur l’outil de suivi pour supprimer le canal gris. Fractionnez les canaux rouges et verts, doublez le filtre et convertissez-les en masque.Utilisez ensuite la commande de calculatrice d’image avec l’opérateur and pour fusionner les canaux en ne laissant que le signal du noyau situé dans les membranes et calculez le tracé de trajectoire, le déplacement carré moyen, le rapport de directionnalité et la vitesse moyenne des cellules, comme illustré. Le GBM fluorescent co-cultivé avec des neurones à motifs modifie rapidement leur forme et montre une migration le long des extensions neuronales dans un mouvement aléatoire. Les cellules GBM ensemencées sur les neurones présentent une forme allongée avec de multiples saillies qui suivent les traces neuronales tandis que les cellules conservent leur forme arrondie lorsqu’elles sont cultivées sur de la laminine.Aux stades ultérieurs de la culture, de minces saillies se liant aux cellules peuvent être observées dans les co-cultures neuronales GBM. Les cellules GBM ensemencées sur les neurones démontrent une plus grande capacité migratoire que les cellules GBM ensemencées sur la laminine comme observé dans ces diagrammes de trajectoire. L’analyse de la confluence fluorescente des cellules démontre que sur une période d’observation de 500 minutes, on observe plus de migration cellulaire lorsque les sphéroïdes sont co-cultivés avec des neurones que lorsque les cellules sont cultivées sur la laminine seule.En effet à la fin de l’analyse, près de la moitié du motif est recouverte de cellules GBM tandis que les sphéroïdes cultivés sur la laminine restent non accompagnés à la lame de couverture. Selon les questions biologiques auxquelles vous souhaitez répondre, il faut veiller à ce que la conception du motif et la densité cellulaire soient représentatives des conditions in vivo. Les cellules peuvent être fixées et es microscopie confocale.L’imagerie en direct est également possible car notre méthode n’altère pas les capacités d’imagerie. Cette technique est bien adaptée à l’étude des interactions moléculaires, telles que les échanges métaboliques entre les cellules du glioblastome et les neurones. Il permet l’exploration des processus biologiques fonctionnels.Des expériences à haut débit peuvent également être réalisées à des fins cliniques.

Research

JoVE Journal

Cancer Research

Coculture Assays to Study Macrophage and Microglia Stimulation of Glioblastoma Invasion

Coculture Assays pour étudier macrophage et microglie Stimulation de glioblastome Invasion

Glioblastoma multiforme (grade IV glioma) is a very aggressive human cancer with a median survival of 1 year post diagnosis. Despite the increased ...

Recherche

Recherche en cancérologie

The Drosophila Imaginal Disc Tumor Model: Visualization and Quantification of Gene Expression and Tumor Invasiveness Using Genetic Mosaics

The Drosophila Imaginal Disc Tumor Model: Visualization and Quantification of Gene Expression and Tumor Invasiveness Using Genetic Mosaics

le<em&gt; Drosophila</em&gt; Imaginal Tumor Disc Modèle: Visualisation et quantification de l&#39;expression génique et de tumeurs invasives utilisant Mosaïques génétique

Drosophila melanogaster has emerged as a powerful experimental system for functional and mechanistic studies of tumor development and progression in the ...

Flow Cytometry-based Drug Screening System for the Identification of Small Molecules That Promote Cellular Differentiation of Glioblastoma Stem Cells

Médicament à base de cytométrie en flux système de contrôle pour l’Identification de petites molécules qui favorisent la différenciation cellulaire des cellules souches de glioblastome

Glioblastoma (GBM) is the most common and most lethal primary brain tumor in adults, causing roughly 14,000 deaths each year in the U.S. alone. Median ...

Using the Dot Assay to Analyze Migration of Cell Sheets

Utilisant le test de Dot pour analyser la Migration des cellules feuilles

Although complex organisms appear static, their tissues are under a continuous turnover. As cells age, die, and are replaced by new cells, cells move ...

Acellular and Cellular Lung Model to Study Tumor Metastasis

Cellulaire et acellulaire poumon modèle pour étudier les métastases tumorales

It is difficult to isolate tumor cells at different points of tumor progression. We created an ex vivo lung model that can show the interaction of tumor ...

Live-Cell Imaging Assays to Study Glioblastoma Brain Tumor Stem Cell Migration and Invasion

Épreuves d’imagerie de cellules vivantes pour étude glioblastome Brain Tumor Stem Cell Migration et Invasion

Glioblastoma (GBM) is an aggressive brain tumor that is poorly controlled with the currently available treatment options. Key features of GBMs include ...

Mesenchymal Stem Cell Isolation from Pulp Tissue and Co-Culture with Cancer Cells to Study Their Interactions

Isolement des cellules souches mésenchymateuses du tissu de pulpe et co-culture avec les cellules cancéreuses afin d’étudier leurs Interactions

Cancer as a multistep process and complicated disease is not only regulated by individual cell proliferation and growth but also controlled by tumor ...

Using Microarrays to Interrogate Microenvironmental Impact on Cellular Phenotypes in Cancer

Utilisation de microréseaux pour interroger l'impact microenvironnemental sur les phénotypes cellulaires dans le cancer

Understanding the impact of the microenvironment on the phenotype of cells is a difficult problem due to the complex mixture of both soluble growth ...

Isolation of Stem-like Cells from 3-Dimensional Spheroid Cultures

Isolement des cellules souches des cultures sphéroïdes tridimensionnelles

Despite advances in adult stem cell research, identification and isolation of stem cells from tissue specimens remains a major challenge. While resident ...

Studying the Effects of Tumor-Secreted Paracrine Ligands on Macrophage Activation using Co-Culture with Permeable Membrane Supports

Étudier les effets des ligands paracriné sécrétés par les tumeurs sur l'activation du macrophage à l'aide de la co-culture avec des supports membranaires perméables

Tumor-derived paracrine signaling is an overlooked component of local immunosuppression and can lead to a permissive environment for continued cancer ...